專利名稱：作為s1p受體激動劑的3,5－芳基、雜芳基或環(huán)烷基取代的－1,2,4－噁二唑類化合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及是S1P1/Edg1受體激動劑并且因此通過調(diào)控白細胞通量、螯合二級淋巴組織中的淋巴細胞、和干擾有效免疫響應中所需的細胞細胞相互作用而具有免疫活性的化合物。本發(fā)明還涉及包含該類化合物的藥物組合物以及一些治療或預防方法。
背景技術：
已經(jīng)表明免疫抑制劑可用于許多自身免疫和慢性炎性疾病，包括全身性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosis)、慢性類風濕性關節(jié)炎、I型糖尿病、炎性腸病、膽汁性肝硬化、葡萄膜炎、多發(fā)性硬化和其它病癥如克羅恩氏病、潰瘍性結腸炎、大皰性類天皰瘡、肉樣瘤病、牛皮癬、自身免疫性肌炎、韋格納氏肉芽腫、魚鱗病、格雷夫斯氏眼病、特應性皮炎和哮喘。還證明其可用作用于治療癌癥、淋巴瘤和白血病的化療方案的一部分。
雖然這些病癥中各病癥發(fā)病機理的基礎可能完全不同，但是其都出現(xiàn)大量自身抗體和/或自身反應性(self-reactive)淋巴細胞。該類自身反應性可能部分是由于喪失了正常免疫系統(tǒng)在其下進行運轉的穩(wěn)態(tài)控制而造成的。類似地，在骨髓或器官移植后，宿主淋巴細胞識別該外來的組織抗原并開始產(chǎn)生細胞和體液響應，包括抗體、細胞因子和細胞毒性淋巴細胞，其導致了移植物排斥。
自身免疫或排斥過程的一種最終結果是由于其所釋放的炎性細胞和介質(zhì)而造成組織破壞?？寡讋┤鏝SAIDs主要通過阻斷這些介質(zhì)的作用或分泌來起作用，但是其并不會改變所說疾病的免疫學基礎。另一方面，細胞毒素劑如環(huán)磷酰胺以一種非特異性方式起作用，從而使得既切斷了正常響應又切斷了自身免疫響應。因為感染是其自身免疫性疾病，所以用該類非特異性免疫抑制劑進行治療的患者實際上很可能會死于感染。
環(huán)孢菌素A是一種被用來預防移植器官排斥的藥物。FK-506是另一種被批準用于預防移植器官排斥并且特別是肝移植排斥的藥物。環(huán)孢菌素A和FK-506是通過抑制機體的免疫系統(tǒng)使之不能調(diào)動其排斥移植性外來蛋白的天然保護劑的巨大儲庫而起作用的。
環(huán)孢菌素A被批準用于治療嚴重的牛皮癬并且已經(jīng)被一些歐洲管理機構(European regulatory agencies)批準用于治療特應性皮炎。
雖然可有效延遲或抑制移植排斥，但是已知環(huán)孢菌素A和FK-506可造成幾種不希望出現(xiàn)的副作用，包括腎毒性、神經(jīng)毒性、和腸胃不適。因此，仍然需要并且十分希望研制一種沒有這些副作用的免疫抑制劑。
免疫抑制性化合物FTY720是目前正在進行臨床試驗的淋巴細胞螯合劑。FTY720在哺乳動物體內(nèi)被代謝成是有效的鞘氨醇1-磷酸酯受體激動劑的化合物。鞘氨醇1-磷酸酯受體的激動調(diào)控著白細胞通量、在沒有淋巴細胞耗竭(lymphodepletion)的情況下誘導了淋巴結和派伊爾班中淋巴細胞(T-細胞和B-細胞)的螯合、和破壞了脾的體系結構，從而干擾了T細胞依賴性和非T細胞依賴性抗體響應。希望用該類免疫抑制來預防器官移植后的排斥和用于治療自身免疫性病癥。
鞘氨醇1-磷酸酯是一種由造血細胞分泌和儲存并由被活化的血小板釋放的生物活性的鞘脂代謝物。Yatomi，Y.，T.Ohmori，G.Rile，F(xiàn).Kazama，H.Okamoto，T.Sano，K.Satoh，S.Kume，G.Tigyi，Y.Igarashi，和Y.Ozaki.2000.Blood.963431-8。其可作為G蛋白-偶合的受體族的激動劑來調(diào)節(jié)細胞增生、分化、存活、和能動性。Fukushima，N.，I.Ishii，J.J.A.Contos，J.A.Weiner，和J.Chun.2001.溶血磷脂受體(Lysophospholipids Receptor).Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.41507-34；Hla，T.，M.-J.Lee，N.Ancellin，J.H.Paik，and M.J.Kluk.2001.溶血磷脂-受體啟示(Lysophospholipids-Receptorrevelations).Science.2941875-1878；Spiegel，S.，和S.Milstien.2000.新鞘氨醇-1-磷酸酯受體族的功能(Functions of a new family ofsphingosine-1-phosphate receptors).Biochim.Biophys.Acta.1484107-16；Pyne，S.，和N.Pyne.2000.通過G-蛋白偶合的受體的內(nèi)皮分化基因族發(fā)信號的鞘氨醇1-磷酸酯(Sphingosine 1-phosphatesignalling via the endothelial differentiation gene family of G-proteincoupled receptors).Pharm.&Therapeutics.88115-131。已經(jīng)確定出了五種鞘氨醇1-磷酸酯受體(S1P1、S1P2、S1P3、S1P4和S1P5，也被稱為內(nèi)皮分化基因Edg1、Edg5、Edg3、Edg6、Edg8)，其廣泛分布在細胞和組織中并且在人和嚙齒動物種屬體內(nèi)被良好保存(見表)。與S1P受體的結合引起了通過Gq-、Gi/o、G12-、G13-、和Rho-依賴性途徑進行的信號轉導。已經(jīng)表明配體誘導的S1P1和S1P3的活化促進了通過Rac-和Rho-進行的血管生成、趨化性、和粘附連接集合，見Lee，M.-J.，S.Thangada，K.P.Claffey，N.Ancellin，C.H.Liu，M.Kluk，M.Volpi，R.I.Sha′afi，和T.Hla.1999.Cell.99301-12，而S1P2的激動促進了軸突收縮，見Van Brocklyn，J.R.，Z.Tu，L.C.Edsall，R.R.Schmidt，和S.Spiegel.1999.J.Biol.Chem.2744626-4632，并通過阻斷Rac活化而抑制了趨化性，見Okamoto，H.，N.Takuwa，T.Yokomizo，N.Sugimoto，S.Sakurada，H.Shigematsu，和Y.Takuwa.2000.Mol.Cell.Biol.209247-9261。S1P4集中于造血細胞和組織，見M.H.，G.Bernhardt，and M.Lipp.1999.Curr.Top.Microbiol.Immunol.246131-6，而S1P5主要是在淋巴組織中有一些表達的神經(jīng)元受體，見Im，D.S.，C.E.Heise，N.Ancellin，B.F.O′Dowd，G.J.Shei，R.P.Heavens，M.R.Rigby，T.Hla，S.Mandala，G.McAllister，S.R.George，和K.R.Lynch.2000.J.Biol.Chem.27514281-6。
給動物使用鞘氨醇1-磷酸酯誘導了全身外周血淋巴細胞螯合到二級淋巴器官中，從而產(chǎn)生了治療學上有用的免疫抑制，見Mandala，S.，R.Hajdu，J.Bergstrom，E.Quackenbush，J.Xie，J.Milligan，R.Thornton，G.-J.Shei，D.Card，C.Keohane，M.Rosenbach，J.Hale，C.L.Lynch，K.Rupprecht，W.Parsons，H.Rosen.2002.Science.296346-349。但是，鞘氨醇1-磷酸酯也具有一些限制其作為治療劑的實用性的心血管和支氣管收縮作用。鞘氨醇1-磷酸酯的靜脈內(nèi)給藥降低了大鼠的心率、心室收縮和血壓，見Sugiyama，A.，N.N.Aye，Y.Yatomi，Y.Ozaki，和K.Hashimoto.2000.Jpn.J.Pharmacol.82338-342。在人氣道平滑肌細胞中，鞘氨醇1-磷酸酯調(diào)控著收縮、細胞生長和促進支氣管收縮的細胞因子產(chǎn)生、氣道炎癥和哮喘中的改型，見Ammit，A.J.，A.T.Hastie，L.C.Edsall，R.K.Hoffman，Y.Amrani，V.P.Krymskaya，S.A.Kane，S.P.Peters，R.B.Penn，S.Spiegel，R.A.Panettieri.Jr.2001，F(xiàn)ASEB J.151212-1214。該不希望出現(xiàn)的鞘氨醇1-磷酸酯的作用與其無選擇性地對所有的S1P受體都具有有效的激動劑活性有關。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明包括是S1P1/Edg1受體激動劑的選擇性高于S1P3/Edg3受體的化合物。S1P1/Edg1受體選擇性激動劑具有優(yōu)于目前療法的優(yōu)點并且擴大了淋巴細胞螯合劑的治療窗，治療窗的擴大使得可以耐受更高的劑量并且從而改善了其作為單一療法的功效。
雖然免疫抑制劑的主要應用是用于治療骨髓、器官和移植排斥，但是該類化合物的其它應用還包括可用于治療關節(jié)炎，特別是類風濕性關節(jié)炎、胰島素和非胰島素依賴性糖尿病、多發(fā)性硬化、牛皮癬、炎性腸病、克羅恩氏病、紅斑狼瘡(lupus erythematosis)等等。
因此，本發(fā)明聚焦于提供一些比現(xiàn)有技術化合物更安全更有效的免疫抑制劑化合物。通過這里的詳細描述，本發(fā)明的這些和其它目的對于本領域普通技術人員而言將是明顯的。
S1P受體的概述

發(fā)明概述本發(fā)明包括式I的化合物以及其可藥用的鹽
該化合物可用于治療免疫介導的疾病和病癥，如骨髓、器官和組織移植排斥。包括一些藥物組合物和應用方法。
本發(fā)明的詳細描述本發(fā)明包括式I的化合物或其可藥用的鹽 其中A選自下列基團苯基、萘基和HET1，其各自被一至三個獨立地選自鹵素、C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基的取代基所取代，或者A是C3-6環(huán)烷基，其任選地被一至三個獨立地選自鹵素、C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基的取代基所取代；B選自下列基團苯基、萘基、HET2和C3-6環(huán)烷基，其各自任選地被一至三個獨立地選自鹵素、C1-4烷基、鹵素取代的C1-4烷基和羥基-取代的C1-4烷基的取代基所取代；HET1選自下列基團苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并唑基、咔唑基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氫吲哚基、吲哚基、indolazinyl、吲唑基、異苯并呋喃基、異吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異唑基、萘啶基、二唑基、唑基、吡嗪基、吡唑基、吡啶并吡啶基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、氮雜環(huán)丁烷基、1，4-二烷基、六氫氮雜基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、二氫苯并咪唑基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并唑基、二氫呋喃基、二氫咪唑基、二氫吲哚基、二氫異唑基、二氫異噻唑基、二氫二唑基、二氫唑基、二氫吡嗪基、二氫吡唑基、二氫吡啶基、二氫嘧啶基、二氫吡咯基、二氫喹啉基、二氫四唑基、二氫噻二唑基、二氫噻唑基、二氫噻吩基、二氫三唑基、二氫氮雜環(huán)丁烷基、亞甲二氧基苯甲?；?、四氫呋喃基、和四氫噻吩基，所說的HET1任選地被1-2個氧代所取代；HET2選自下列基團呋喃基、咪唑基、異噻唑基、異唑基、二唑基、唑基、吡唑基、吡咯基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基和三唑基；和X選自下列基團甲基、甲氧基、硝基、氨基、三氟甲基和鹵素，其中X在相對于式I所示的1，2，4-二唑基的連接而言鄰位的環(huán)B上取代。短語“X在相對于1，2，4-二唑的連接而言鄰位的環(huán)B上取代”指的是其1，2-位并且在下面的實施例中進行了舉例說明。
本發(fā)明的一個實施方案包括一種式I的化合物，其中A選自下列基團被一至兩個獨立地選自鹵素、C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基的取代基取代的苯基、吡啶基和吡嗪基，或者A是任選地被一至兩個獨立地選自鹵素、C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基的取代基取代的C3-6環(huán)烷基。
本發(fā)明的另一個實施方案包括一種式I化合物，其中A是在相對于式I所示的1，2，4-二唑基的連接而言的對位上被選自C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基的取代基取代的苯基。
本發(fā)明的另一個實施方案包括一種式I化合物，其中A是在相對于式I所示的1，2，4-二唑基的連接而言的1，4-位上被選自C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基的取代基取代的吡啶基?！?，4-位”指的是例如下面實施例6至11和16所示的位置。
本發(fā)明的另一個實施方案包括一種其中A是環(huán)己基的式I的化合物。
本發(fā)明的另一個實施方案包括其中B是任選地被選自鹵素、C1-4烷基、鹵素取代的C1-4烷基和羥基-取代的C1-4烷基的取代基取代的苯基的式I的化合物。
本發(fā)明的另一個實施方案包括其中B選自各自任選地被選自鹵素、C1-4烷基、鹵素取代的C1-4烷基和羥基-取代的C1-4烷基的取代基取代的異唑基、噻二唑基和噻吩基的式I的化合物。
本發(fā)明的另一個實施方案包括其中X是甲基的式I的化合物。
本發(fā)明還包括式Ia的化合物或其可藥用的鹽 其中A選自下列基團被一至兩個獨立地選自鹵素、C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基的取代基取代的苯基、吡啶基和吡嗪基，或者A是任選地被一至兩個獨立地選自鹵素、C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基的取代基取代的C3-6環(huán)烷基。
本發(fā)明的一個實施方案包括式Ib的化合物或其可藥用的鹽 其中
B選自苯基、異唑基、噻二唑基和噻吩基，其各自任選地被一個選自鹵素、C1-4烷基、鹵素取代的C1-4烷基和羥基-取代的C1-4烷基的取代基所取代；和X選自下列基團甲基、甲氧基、硝基、氨基、三氟甲基和鹵素，其中X在相對于式I所示的1，2，4-二唑基連接而言為鄰位的環(huán)B上取代。
本發(fā)明的另一個實施方案包括一種式Ic的化合物或其可藥用的鹽， 其中z選自下列基團C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基；B選自下列基團苯基、異唑基、噻二唑基和噻吩基，其各自任選地被一個選自鹵素、C1-4烷基、鹵素取代的C1-4烷基和羥基-取代的C1-4烷基的取代基所取代；和X選自下列基團甲基、甲氧基、硝基、氨基、三氟甲基和鹵素，其中X在相對于式I所示的1，2，4-二唑基連接而言為鄰位的環(huán)B上取代。
本發(fā)明的另一個實施方案包括一種其中z是C1-6烷氧基或鹵素取代的-C1-6烷氧基的式I的化合物。
用下面的實施例對本發(fā)明進一步進行了舉例說明。
本發(fā)明還包含一種治療需要該類治療的哺乳動物患者的免疫調(diào)節(jié)異常的方法，其包括以有效治療所說的免疫調(diào)節(jié)異常的數(shù)量給所說的患者使用式I的化合物。
在這種實施方案中包括其中所說的免疫調(diào)節(jié)異常是選自全身性紅斑狼瘡、慢性類風濕性關節(jié)炎、I型糖尿病、炎性腸病、膽汁性肝硬化、葡萄膜炎、多發(fā)性硬化、克羅恩氏病、潰瘍性結腸炎、大皰性類天皰瘡、肉樣瘤病、牛皮癬、自身免疫性肌炎、韋格納氏肉芽腫、魚鱗病、格雷夫斯氏眼病和哮喘的自身免疫性或慢性炎性疾病的上述方法。
在這種實施方案中還包括其中所說的免疫調(diào)節(jié)異常是骨髓或器官移植排斥或移植物抗宿主疾病的上述方法。
在這種實施方案中還包括其中所說的免疫調(diào)節(jié)異常選自器官或組織的移植、由移植造成的移植物抗宿主疾病、包括類風濕性關節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡在內(nèi)的自身免疫性綜合征、橋本氏甲狀腺炎、多發(fā)性硬化、重癥肌無力、I型糖尿病、葡萄膜炎、后葡萄膜炎、變應性腦脊髓炎、腎小球性腎炎、包括風濕熱和感染后的腎小球性腎炎在內(nèi)的感染后的自身免疫性疾病、炎性和過度增生性皮膚病、牛皮癬、特應性皮炎、接觸性皮炎、濕疹性皮炎、脂溢性皮炎、扁平苔蘚、天皰瘡、大皰性類天皰瘡、大皰性表皮松懈癥、蕁麻疹、血管性水腫、結節(jié)性脈管炎、紅斑、皮膚上的嗜曙紅細胞增多、紅斑狼瘡、痤瘡、斑禿、角膜結膜炎、春季結膜炎、與貝切特氏病有關的葡萄膜炎、角膜炎、皰疹性角膜炎、圓錐形角膜、角膜上皮營養(yǎng)不良(dystrophia epithelialiscorneae)、角膜白斑、眼天皰瘡、莫倫氏潰瘍、鞏膜炎、格雷夫斯氏眼病(Graves’opthalmopathy)、伏格特-小柳-原田三氏綜合征、肉樣瘤病、花粉變態(tài)反應、可逆性阻塞性氣道疾病、支氣管哮喘、變應性哮喘、內(nèi)源性哮喘、外源性哮喘、粉塵性哮喘、慢性或慢性頑固性哮喘、晚期哮喘(late asthma)和氣道高反應性、支氣管炎、胃潰瘍、由局部缺血性疾病和血栓形成造成的血管損害、局部缺血性腸疾病、炎性腸病、壞死性小腸結腸炎、與熱灼傷有關的小腸損害、腹部疾病、直腸炎、嗜酸細胞性胃腸炎、肥大細胞增生病、克羅恩氏病、潰瘍性結腸炎、偏頭痛、鼻炎、濕疹、間質(zhì)性腎炎、肺出血腎炎綜合征、溶血性尿毒癥綜合征、糖尿病腎病、糖多發(fā)性肌炎、格-巴二氏綜合征、美尼爾氏病、多發(fā)性神經(jīng)炎、多神經(jīng)炎、單神經(jīng)炎、神經(jīng)根病、甲狀腺功能亢進、巴塞多氏病、單純性紅細胞再生障礙、再生障礙性貧血、再生不良性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜、自身免疫性溶血性貧血、粒細胞缺乏癥、惡性貧血、巨幼紅細胞貧血、紅細胞發(fā)生不能、骨質(zhì)疏松癥、肉樣瘤病、纖維化肺、特發(fā)性間質(zhì)性肺炎、皮膚肌炎、尋常性白斑病、尋常性魚鱗病、光變應性敏感性、皮膚T細胞淋巴瘤、動脈硬化、動脈粥樣硬化、大動脈炎綜合征、結節(jié)性多動脈炎、非炎性心肌病、硬皮病、韋格納氏壞死性肉芽腫、口腔干燥-風濕性關節(jié)炎綜合征、肥胖癥、嗜曙紅細胞性筋膜炎、齦、牙周組織、牙槽骨的損害、substantia ossea dentis、腎小球性腎炎、男性型脫發(fā)或老年性脫發(fā)(通過預防脫發(fā)或提供頭發(fā)萌芽和/或促進頭發(fā)產(chǎn)生和頭發(fā)生長)、肌營養(yǎng)不良、膿皮病和賽雜瑞氏綜合征、阿狄森氏綜合征、在保護、移植或局部缺血性疾病時發(fā)生的器官的局部缺血-再灌注性損傷、內(nèi)毒素休克、假膜性結腸炎、由藥物或輻射造成的結腸炎、局部缺血性急性腎功能不全、慢性腎功能不全、由肺-氧或藥物造成的毒素病、肺癌、肺氣腫、白內(nèi)障、鐵塵肺、視網(wǎng)膜色素變性、老年性黃斑變性、vitreal瘢痕形成、角膜強堿燒傷、多形性紅斑皮炎(dermatitis erythemamultiforme)、linear IgA ballous dermatitis和cement dermatitis、齒齦炎、牙周炎、膿毒癥、胰腺炎、由環(huán)境污染造成的疾病、衰老、癌發(fā)生、癌轉移和高空病、由組胺或白三烯-C4釋放造成的疾病、貝切特氏病、自身免疫性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、硬化性膽管炎、部分肝切除術、急性肝壞死、由毒素造成的壞死、病毒性肝炎、休克、或缺氧癥、B-病毒肝炎、非-A/非-B型肝炎、肝硬化、酒精性肝硬化、肝衰竭、暴發(fā)性肝功能衰竭、晚期發(fā)作的肝衰竭(late-onset hepaticfailure)、“acute-on-chronic”肝衰竭、化療作用的強化、巨細胞病毒感染、HCMV感染、AIDS、癌癥、老年性癡呆、創(chuàng)傷、和慢性細菌感染的上述方法。
這種實施方案中還包括其中免疫調(diào)節(jié)異常選自1)多發(fā)性硬化，2)類風濕性關節(jié)炎，3)全身性紅斑狼瘡，4)牛皮癬，5)被移植器官或組織的排斥，6)炎性腸病，7)淋巴來源的惡性腫瘤，8)急性和慢性淋巴細胞白血病和淋巴瘤以及9)胰島素和非胰島素依賴性糖尿病的上述方法。
本發(fā)明還包括一種抑制需要免疫抑制的哺乳動物患者的免疫系統(tǒng)的方法，其包括給所說的患者使用免疫抑制有效量的式I的化合物。
本發(fā)明還包括一種包含式I的化合物和與之結合的可藥用載體的藥物組合物。
本發(fā)明還包括一種治療需要該類治療的哺乳動物患者的呼吸疾病或病癥的方法，其包括以可有效治療所說的呼吸疾病或病癥的數(shù)量給所說的患者使用式I的化合物。在這種實施方案中包括其中所說的呼吸疾病或病癥選自哮喘、慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺疾病、成人呼吸窘迫綜合征、嬰兒呼吸窘迫綜合征、咳嗽、嗜酸細胞性肉芽腫、呼吸道合胞體病毒細支氣管炎、支氣管擴張、特發(fā)性肺纖維化、急性肺損傷和阻塞性細支氣管炎組織肺炎(bronchiolitis obliteransorganizing pneumonia)的上述方法。
在這種實施方案中還包括其中所說的患者還患有呼吸疾病或病癥的上述方法。
在這種實施方案中還包括其中所說的患者還患有心血管疾病或病癥的上述方法。
除非特別表明，否則用下面的定義來對本發(fā)明進行描述。
當在本發(fā)明說明書的結構式中出現(xiàn)氮原子時，應當理解的是存在滿足該氮原子效價的足夠的氫原子或取代基。
術語“鹵素”或“鹵素(halo)”包括F、Cl、Br和I。
術語“烷基”指的是具有所示碳原子數(shù)的直鏈或支鏈結構以及其組合。因此，例如C1-6烷基包括甲基、乙基、丙基、2-丙基、仲-和叔-丁基、丁基、戊基、己基、1，1-二甲基乙基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。
術語“烷氧基”指的是具有所示碳原子數(shù)的直鏈、支鏈或環(huán)狀構型的烷氧基。例如，C1-6烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基等等。
術語“環(huán)烷基”指的是具有所示碳原子數(shù)的任選地結合有直鏈或支鏈結構的單-、二-或三-環(huán)結構。環(huán)烷基的實例包括環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)庚基、金剛烷基、環(huán)十二烷基甲基、2-乙基-1-二環(huán)[4.4.0]癸基、環(huán)丁基甲基等等。
術語“鹵素取代的烷基”指的是在高至最大數(shù)目個可取代位置上被一個或多個上面所定義的鹵素基團取代的上面所定義的烷基，如三氟甲基等等。
術語“鹵素取代的烷氧基”指的是在高至最大數(shù)目個可取代位置上被一個或多個上面所定義的鹵素基團取代的上面所定義的烷氧基，如三氟烷氧基等等。
術語“鹵素取代的環(huán)烷基烷基”指的是在高至最大數(shù)目個可取代位置上被一個或多個上面所定義的鹵素基團取代的上面所定義的環(huán)烷基。
術語“羥基-取代的烷基”指的是在高至最大數(shù)目個可取代的位置上被一個或多個羥基取代的上面所定義的烷基。
術語“治療”不僅包括治療，患者用于緩解患者疾病或病癥的跡象和癥狀，而且還包括對無癥狀患者進行的用于防止所說疾病或病癥開始或阻止其進程的預防性治療。術語“治療有效的量”指的是將引起研究人員、獸醫(yī)、內(nèi)科醫(yī)生或其它臨床醫(yī)師所尋求的組織、系統(tǒng)、動物或人的生物或醫(yī)學響應的藥物或藥學活性劑的數(shù)量。該術語還包括研究人員、獸醫(yī)、內(nèi)科醫(yī)生或其它臨床醫(yī)師尋求的將防止組織、系統(tǒng)、動物或人出現(xiàn)生物學或醫(yī)學事件的風險予以防止或降低的藥物的數(shù)量。
這里所述的本發(fā)明包括可藥用的鹽以及水合物?？伤幱玫柠}既包括金屬(無機)鹽又包括有機鹽；在Remington′s PharmaceuticalSciences，第17版，第1418頁(1985)中給出了其目錄。本領域技術人員眾所周知的是，適宜鹽形式的選擇是以物理和化學穩(wěn)定性、可流動性、吸濕性以及溶解度為基礎的。正如本領域技術人員將理解的那樣，可藥用的鹽非限制性地包括無機酸的鹽如鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、二磷酸鹽、氫溴化物、以及硝酸鹽或有機酸的鹽如蘋果酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽、枸櫞酸鹽、醋酸鹽、乳酸鹽、甲磺酸鹽、對-甲苯磺酸鹽或撲酸鹽、水楊酸鹽和硬脂酸鹽。相似地，可藥用的陽離子非限制性地包括鈉、鉀、鈣、鋁、鋰和銨(尤其是與仲胺形成的銨鹽)。由于上面所列舉的理由，本發(fā)明優(yōu)選的鹽包括鉀、鈉、鈣和銨鹽。本發(fā)明的范圍內(nèi)還包括式I化合物的結晶形式、水合物和溶劑化物。
對于本說明書的目的而言，“可藥用的水合物”指的是本發(fā)明的化合物與一分子或多分子水一起結晶從而形成的一種水合的形式。
本發(fā)明還包括的落在式I的化合物還包括其一種或多種立體異構體形式、基本純的形式或立體異構體的混合物的形式。所有該類異構體都被包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
由于其S1P1/Edg1激動劑活性，本發(fā)明的化合物是用于治療或預防自身免疫性或慢性炎性疾病的免疫調(diào)節(jié)劑。本發(fā)明的化合物可用于抑制其中免疫抑制狀況井然有序情況中的免疫系統(tǒng)如可用于骨髓、器官或移植排斥、自身免疫性和慢性炎性疾病，包括全身性紅斑狼瘡、慢性類風濕性關節(jié)炎、I型糖尿病、炎性腸病、膽汁性肝硬化、葡萄膜炎、多發(fā)性硬化、克羅恩氏病、潰瘍性結腸炎、大皰性類天皰瘡、肉樣瘤病、牛皮癬、自身免疫性肌炎、韋格納氏肉芽腫、魚鱗病、格雷夫斯氏眼病和哮喘。
本發(fā)明的化合物更具體地可用于治療或預防選自器官或組織的移植、由移植造成的移植物抗宿主疾病、包括類風濕性關節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡在內(nèi)的自身免疫性綜合征、橋本氏甲狀腺炎、多發(fā)性硬化、重癥肌無力、I型糖尿病、葡萄膜炎、后葡萄膜炎、變應性腦脊髓炎、腎小球性腎炎、包括風濕熱和感染后的腎小球性腎炎在內(nèi)的感染后的自身免疫性疾病、炎性和過度增生性皮膚病、牛皮癬，特應性皮炎、接觸性皮炎、濕疹性皮炎、脂溢性皮炎、扁平苔蘚、天皰瘡、大皰性類天皰瘡、大皰性表皮松懈癥、蕁麻疹、血管性水腫、結節(jié)性脈管炎、紅斑、皮膚上的嗜曙紅細胞增多、紅斑狼瘡、痤瘡、斑禿、角膜結膜炎、春季結膜炎、與貝切特氏病有關的葡萄膜炎、角膜炎、皰疹性角膜炎、圓錐形角膜、角膜上皮營養(yǎng)不良(dystrophia epithelialiscorneae)、角膜白斑、眼天皰瘡、莫倫氏潰瘍、鞏膜炎、格雷夫斯氏眼病(Graves’opthalmopathy)、伏格特-小柳-原田三氏綜合征、肉樣瘤病、花粉變態(tài)反應、可逆性阻塞性氣道疾病、支氣管哮喘、變應性哮喘、內(nèi)源性哮喘、外源性哮喘、粉塵性哮喘、慢性或慢性頑固性哮喘、晚期哮喘和氣道高反應性、支氣管炎、胃潰瘍、由局部缺血性疾病和血栓形成造成的血管損害、局部缺血性腸疾病、炎性腸病、壞死性小腸結腸炎、與熱灼傷有關的小腸損害、腹部疾病、直腸炎、嗜酸細胞性胃腸炎、肥大細胞增生病、克羅恩氏病、潰瘍性結腸炎、偏頭痛、鼻炎、濕疹、間質(zhì)性腎炎、肺出血腎炎綜合征、溶血性尿毒癥綜合征、糖尿病腎病、糖多發(fā)性肌炎、格-巴二氏綜合征、美尼爾氏病、多發(fā)性神經(jīng)炎、多神經(jīng)炎、單神經(jīng)炎、神經(jīng)根病、甲狀腺功能亢進、巴塞多氏病、單純性紅細胞再生障礙、再生障礙性貧血、再生不良性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜、自身免疫性溶血性貧血、粒細胞缺乏癥、惡性貧血、巨幼紅細胞貧血、紅細胞發(fā)生不能、骨質(zhì)疏松癥、肉樣瘤病、纖維化肺、特發(fā)性間質(zhì)性肺炎、皮膚肌炎、尋常性白斑病、尋常性魚鱗病、光變應性敏感性、皮膚T細胞淋巴瘤、動脈硬化、動脈粥樣硬化、大動脈炎綜合征、結節(jié)性多動脈炎、非炎性心肌病、硬皮病、韋格納氏壞死性肉芽腫、口腔干燥-風濕性關節(jié)炎綜合征、肥胖癥、嗜曙紅細胞性筋膜炎、齦、牙周組織、牙槽骨的損害、substantiaossea dentis、腎小球性腎炎、男性型脫發(fā)或老年性脫發(fā)(通過預防脫發(fā)或提供頭發(fā)萌芽和/或促進頭發(fā)產(chǎn)生和頭發(fā)生長)、肌營養(yǎng)不良、膿皮病和賽雜瑞氏綜合征、阿狄森氏綜合征、在保擴、移植或局部缺血性疾病時發(fā)生的器官的局部缺血-再灌注性損傷、內(nèi)毒素休克、假膜性結腸炎、由藥物或輻射造成的結腸炎、局部缺血性急性腎功能不全、慢性腎功能不全、由肺-氧或藥物造成的毒素病、肺癌、肺氣腫、白內(nèi)障、鐵塵肺、視網(wǎng)膜色素變性、老年性黃斑變性、vitreal瘢痕形成、，角膜強堿燒傷、多形性紅斑皮炎(dermatitis erythema multiforme)、linear IgA ballous dermatitis和cement dermatitis、齒齦炎、牙周炎、膿毒癥、胰腺炎、由環(huán)境污染造成的疾病、衰老、癌發(fā)生、癌轉移和由組胺或白三烯-C4釋放造成的高空病、貝切特氏病、自身免疫性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、硬化性膽管炎、部分肝切除術、急性肝壞死、由毒素造成的壞死、病毒性肝炎、休克、或缺氧癥、B-病毒肝炎、非-A/非-B型肝炎、肝硬化、酒精性肝硬化、肝衰竭、暴發(fā)性肝功能衰竭、晚期發(fā)作的肝衰竭(late-onset hepatic failure)、“acute-on-chronic”肝衰竭、化療作用的強化、巨細胞病毒感染、HCMV感染、AIDS、癌癥、老年性癡呆、創(chuàng)傷、和慢性細菌感染的疾病或紊亂。
本發(fā)明的化合物還可用于治療或預防阿耳茨海默氏病。
本發(fā)明還包括一種預防或治療需要該類預防或治療的哺乳動物患者對器官或組織移植的耐受性或移植排斥的方法，其包括使用治療有效量的式I的化合物。
本發(fā)明的另一個實施方案是一種抑制需要該類抑制的哺乳動物患者的免疫系統(tǒng)的方法，其包括給該患者使用可抑制免疫系統(tǒng)數(shù)量的式I的化合物。
這里所述的方法最特定地包括一種治療或預防骨髓或器官移植排斥的方法，其包括以可以有效治療或預防骨髓或器官移植排斥的數(shù)量給需要該類治療或預防的哺乳動物患者使用式I的化合物或其可藥用的鹽或其水合物。
本發(fā)明的化合物還可用于治療呼吸疾病或病癥，如哮喘、慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺疾病、成人呼吸窘迫綜合征、嬰兒呼吸窘迫綜合征、咳嗽、嗜酸細胞性肉芽腫、呼吸道合胞體病毒細支氣管炎、支氣管擴張、特發(fā)性肺纖維化、急性肺損傷和阻塞性細支氣管炎組織肺炎。
此外，本發(fā)明的化合物還是具有對S1P3/Edg3受體選擇性的對S1P1/Edg1受體的選擇性激動劑。Edg1選擇性激動劑具有優(yōu)于目前療法的優(yōu)點并且擴大了淋巴細胞螯合劑的治療窗，治療窗的擴大使得可以耐受更高的劑量并且從而改善了其作為單一療法的功效。
本發(fā)明還包括包含可藥用載體和式I的化合物或其可藥用的鹽或水合物的藥物制劑。所說制劑一種優(yōu)選的實施方案是一種其中還包括第二種免疫抑制劑的制劑。該類第二種免疫抑制劑的實例非限制性地包括硫唑嘌呤、布喹那鈉、脫氧精胍菌素、mizaribine、霉酚酸嗎啉酯(morpholino ester)、環(huán)孢菌素、FK-506、雷帕霉素、FTY720和ISAtx247(Isotechnika)。本發(fā)明還包括將式I的化合物與包括一種或多種上述物質(zhì)在內(nèi)的第二種免疫抑制劑共同給藥的方法。
本發(fā)明的化合物包括其鹽和水合物可用于治療自身免疫性疾病，包括用于預防骨髓移植物、外來器官移植物的排斥和/或相關的折磨、疾病和病患。
可以用可使該活性成分化合物與溫血動物體內(nèi)的作用部位相接觸的任何方法來將本發(fā)明的化合物進行給藥。例如，可以將其口服給藥、局部給藥，包括經(jīng)皮給藥、眼睛給藥、頰給藥、鼻內(nèi)給藥、吸入給藥、陰道內(nèi)給藥、直腸給藥、腦池內(nèi)給藥和胃腸外給藥。這里所用的術語“胃腸外”指的是包括皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、關節(jié)內(nèi)注射或輸入、胸骨內(nèi)和腹膜內(nèi)的給藥模式。
可以用任何適于以單個治療劑或治療劑聯(lián)合形式與藥物聯(lián)合應用的任何可獲得的方便手段來將所說的化合物進行給藥。其可以被單獨給藥，但是通常是與在所選擇的給藥途徑和標準藥學實踐的基礎上所選擇的藥用載體一起進行給藥。
給藥劑量將取決于接受者的年齡、健康和體重、疾病的程度、如果存在的話的并行治療的種類、所需的治療頻率和作用性質(zhì)?；钚猿煞只衔锏娜談┝客ǔ槊刻旒s0.1-2000毫克。一般地，每天一次或分多次應用的1至100毫克活性化合物可有效獲得所需的結果。這些劑量是治療自身免疫性疾病、預防外來器官移植物的排斥和/或相關的痛苦、疾病和病患的有效量。
所說的活性成分可以以固體劑型或液體劑型形式被口服給藥，所說的固體劑型如膠囊、片劑、錠劑、糖錠劑、顆粒和粉劑，所說的液體劑型如酏劑、糖漿劑、乳劑、分散體、和混懸液。所說的活性成分還可以以無菌液體劑型如分散體、混懸液或溶液的形式被胃腸外給藥?？梢杂糜趯⑺f活性成分進行給藥的其它劑型還有用于局部給藥的軟膏、乳膏、滴劑、經(jīng)皮貼劑或粉；用于眼睛給藥的眼用溶液或混懸液形式，即滴眼液；用于吸入或鼻內(nèi)給藥的氣霧劑噴霧劑或粉末組合物、或用于直腸或陰道給藥的乳膏、軟膏、噴霧或栓劑。
明膠膠囊包含活性成分和粉狀載體，如乳糖、淀粉、纖維素衍生物、硬脂酸鎂、硬脂酸等等。還可以用相似的稀釋劑來制備壓縮片。片劑和膠囊都可以被制備成用于在數(shù)小時內(nèi)提供藥物的持續(xù)釋放的緩釋產(chǎn)品?？梢詫嚎s片包糖衣或包膜衣以掩蓋任何令人不愉快的味道和保護該片劑不受大氣影響，或者可以對其包腸衣以選擇性在胃腸道內(nèi)崩解。
用于口服給藥的液體劑型可包含著色劑和矯味劑以增加患者的接受性。
一般而言，水、適宜的油、鹽水、水性右旋糖(葡萄糖)、以及相關的糖溶液和二醇如丙二醇或聚乙二醇是適用于胃腸外溶液的載體。用于胃腸外給藥的溶液優(yōu)選地包含活性成分的水溶性鹽、適宜的穩(wěn)定劑、和如果需要的話的緩沖物質(zhì)。適宜的抗氧化劑例如單獨或聯(lián)合使用的亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉、或抗壞血酸，是適宜的穩(wěn)定劑。還可以使用枸櫞酸以及其鹽和EDTA鈉。此外，胃腸外溶液還可以包含防腐劑，如苯扎氯銨、尼泊金甲酯或尼泊金丙酯、和氯丁醇。
在Remington′s Pharmaceutical Sciences，A.Osol(本領域中的一種標準參考教科書)中對適宜的藥用載體進行了描述。
對于吸入給藥而言，本發(fā)明的化合物可以方便地從加壓包裝或噴霧器中以氣霧劑噴霧形式被傳遞。該化合物還可以以進行了配制的粉末形式被傳遞，并且可以在吹入粉末吸入器裝置的幫助下來吸入所說的粉末組合物。對于吸入而言，優(yōu)選的傳遞系統(tǒng)是一種計量劑量的吸入(MDI)氣霧劑，其可以被制備成式I的化合物在適宜推進劑如碳氟化合物或烴中的混懸液或溶液的形式。
對于眼睛給藥而言，眼用制劑可以用在適宜的眼用基質(zhì)中具有適宜重量百分比式I化合物的溶液或混懸液來進行制備，從而使得所說的化合物可以與眼睛表面接觸足夠的時間從而使得該化合物可以滲透到眼睛的角膜和內(nèi)部區(qū)域中。
可用于將本發(fā)明化合物進行給藥的藥物劑型如下所述膠囊通過用100毫克粉狀活性成分、150毫克乳糖、50毫克纖維素、和6毫克硬脂酸鎂對各標準的兩部分式硬明膠膠囊進行填充來制備許多單位膠囊。
軟明膠膠囊制備活性成分在可消化的油如豆油、棉子油或橄欖油中的混合物并通過容積泵將其注射到明膠中從而形成包含100毫克活性成分的軟明膠膠囊。對這些膠囊進行洗滌和干燥。
片劑用常規(guī)方法制備許多片劑從而使得該劑量單位為100毫克活性成分、0.2毫克膠體二氧化硅、5毫克硬脂酸鎂、275毫克微晶纖維素、11毫克淀粉和98.8毫克乳糖?？梢詰眠m宜的包衣以增加其適口性或延遲吸收。
可注射的制劑通過將1.5％重量的活性成分在10％體積的丙二醇中進行攪拌來制備一種適于注射給藥的胃腸外組合物。用注射用水將該溶液的體積調(diào)節(jié)至足量并對其進行滅菌。
混懸液制備一種用于口服給藥的水性混懸液，從而使得每5毫升混懸液包含100毫克分割得很細的活性成分、100毫克羧甲基纖維素鈉、5毫克苯甲酸鈉、1.0克山梨醇溶液，U.S.P.、和0.025毫升香草醛。
當本發(fā)明的化合物被逐步給藥或者與另一種治療劑聯(lián)用時，通常可以使用相同的劑型。當這些藥物以物理組合形式被給藥時，可以根據(jù)所合并藥物的相容性來對劑型和給藥途徑進行選擇。因此，術語共同給藥被理解為包括將兩種活性劑相伴給藥或相繼給藥，或者以兩種活性組分固定劑量組合物的形式進行給藥。
合成方法在下面的實施例中對制備本發(fā)明化合物的方法進行了描述。本領域的從業(yè)者將容易地識別出另外供選擇的途徑。
一種制備本發(fā)明通式結構i的化合物的適當方法如反應路線1所示。為了進行?；?，可以用試劑如N，N′-二環(huán)己基碳化二亞胺、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺、1，1′-羰基二咪唑、或二(2-氧代-3-唑烷基)次膦酰氯在存在適宜的堿(如果需要的話)如三乙胺、N，N-二異丙基乙基胺、或碳酸氫鈉的情況下在溶劑如1，2-二氯乙烷、甲苯、二甲苯類、N，N-二甲基甲酰胺或N-甲基吡咯烷酮中將芳族羧酸ii活化。然后，可以向其中加入通式結構iii的芳基N-羥基脒，從而形成?；鵑-羥基脒iv?？梢杂帽绢I域技術人員已知的方法(例如，結晶、硅膠色譜、HPLC)將這種中間體分離出來，并且在隨后的步驟中，通過在適宜的溶劑(例如，1，2-二氯乙烷、甲苯、二甲苯類、N，N-二甲基甲酰胺或N-甲基吡咯烷酮)中溫熱來對其進行環(huán)化/脫水，從而得到結構i的1，2，4-二唑。iii向iv的轉化可能需要加入堿，在該類情況中可以使用試劑如吡啶、N，N-二異丙基乙基胺或氟化四丁基銨。在不將N-羥基脒iv分離出來會更方便或者希望不將其分離出來時，在這種情況中可以以一種連續(xù)過程的形式將ii轉化成i。
可以使用除被活化的芳族羧酸ii之外的?；瘎﹣淼玫交衔飅。更特定地，其可有利地用或可能希望用芳族羧酰氯、羧酸酐、羧酰胺或腈代替芳族羧酸ii和?；罨瘎﹣碇苽渖鲜?，2，4-二唑化合物i。用這些其它酰化劑以及與本發(fā)明相關的其它方法制備1，2，4-二唑類的方法對于本領域技術人員而言是已知的并且已經(jīng)在文獻中對其進行了綜述(見，Clapp，L.B.，“1，2，3-和1，2，4-二唑類”，第366-91頁，綜合雜環(huán)化學(Comprehensive Heterocyclic Chemistry)，第6卷，Potts，K.T.主編，Pergamon Press，1984)。
反應路線1 制備用于制備本發(fā)明化合物所用的芳族N-羥基脒中間體iii的一種適宜方法如反應路線2所示。對于這種中間體而言，用羥胺(得自羥胺水溶液或通過用堿如三乙胺、N，N-二異丙基乙基胺、或碳酸氫鈉對鹽酸羥胺進行處理產(chǎn)生的)在適宜的溶劑(甲醇、乙醇、水、N，N-二甲基甲酰胺)在環(huán)境溫度或高于環(huán)境溫度的溫度下對相應的芳族腈v進行處理。然后，用本領域技術人員已知的方法(例如，結晶、硅膠色譜、HPLC)可以將這種中間體分離出來。
反應路線2 許多芳族腈v以及芳族羧酸ii可以通過商業(yè)來源獲得或者可以由本領域技術人員用所報道的文獻中的操作來進行制備。雖然通式結構i是非手性的，但是應當理解的是其兩個芳族環(huán)中的任何一個或者兩個上的任何基團可能具有不對稱中心，在這種情況中可以用本領域技術人員已知的方法獲得i的各立體異構體，所說的方法(非限制性地)包括立體有擇合成、用對映純(enantiopure)的酸或堿對i的鹽或在其制備中所用任何中間體進行拆分、用使用對映純的固定相的HPLC對i或其制備中所用的任何中間體進行拆分。
典型實施例對本發(fā)明的化合物舉例說明如下通則在減壓下在旋轉蒸發(fā)器上進行溶液的濃縮。在硅膠(230-400目)上進行常規(guī)閃式色譜。還在所標注大小的預填裝的筒中在硅膠(32-63mM，60孔徑)上用Biotage閃式色譜儀(DyaxCorp.)來進行閃式色譜。除非特別說明，否則NMR譜是在CDCl3溶液中獲得的。偶合常數(shù)(J)的單位為赫茲(Hz)?？s寫二乙基醚(乙醚)、三乙胺(TEA)、N，N-二異丙基乙基胺(DIEA)、飽和水溶液(sat′d)、室溫(rt)、小時(h)、分鐘(min)。
HPLC方法HPLC AYMC ODS A，5μ，4.6×50mm柱，梯度在4.5min內(nèi)，10∶90-95∶5v/v的CH3CN∶H2O+0.05％ TFA，然后在95∶5 v/v的CH3CN:H2O+0.05％TFA下保持1.5min；2.5mL/min，二極管陣列檢測200-400nMHPLC BAnalytical Sales & Service ARMOR C185m 2×25cm柱，梯度在15min內(nèi)，10∶90-100∶0 v/v的CH3CN∶H2O+0.05％TFA，然后將其在100.0 v/v的CH3CN∶H2O+0.05％TFA下保持10min；20mL/min，二極管陣列檢測200-400nM。
羧酸中間體的制備羧酸13-氟-4-環(huán)戊基-苯甲酸將0.45g(1.45mmol)3-氟-4-溴-苯甲酸芐酯(0.45g，1.45mmol)在4.4mL 0.5M溴化環(huán)戊基鋅THF溶液中的溶液用～5mg二(三-叔-丁基膦)鈀(O)進行處理，并將所得的混合物在rt下攪拌24h。用1∶1的己烷/EtOAc作為洗脫劑在Biotage 40S 筒上直接對該反應混合物進行純化。將所得固體(0.27g，0.91mmol)和10％Pd/C在5mL MeOH中的混合物在1atm H2下攪拌3h。對該反應過濾并濃縮。用HPLC B純化，得到標題化合物1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.83(dd，J＝1.6，8.0，1H)，7.72(dd，J＝1.6，10.5，1H)，7.36(t，J＝7.7，1H)，3.30(m，1H)，2.05-2.14(m，2H)，1.58-1.90(m，6H).
羧酸2(+/-)-4-(1-氧代-2-甲基丁基)苯甲酸步驟A(+/-)-4-(1-氧代-2-甲基丁基)苯甲酸乙酯將0.58g(4.5mmol)(+/-)-2-甲基丁酰氯在10mL 0.5M碘化4-(乙氧基羰基)苯基鋅THF溶液中的溶液用～5mg二(三-叔-丁基膦)鈀(O)進行處理并將所得的混合物在rt下攪拌1h。將該反應在50mL EtOAv乙酸乙酯和25mL 2N HCl之間進行分配并進行層分離。將有機層用25mL sat′d NaCl進行洗滌，將其干燥并進行濃縮。用硅膠色譜進行純化，用15∶1 v/v己烷/乙酸乙酯(15∶1)作為洗脫劑，得到標題化合物1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.12(d，J＝8.4，2H)，7.98(d，J＝8.5，2H)，4.40(q，J＝7.2，2H)，3.40(m，1H)，1.83(m，1H)，1.51(m，1H)，1.41(t，J＝7.2，3H)，1.20(d，J＝6.8 3H)，0.91(t，J＝7.5 3H).
步驟B(+/-)-4-(1-氧代-2-甲基丁基)苯甲酸將0.57g(2.4mmol)(+/-)-4-(1-氧代-2-甲基丁基)苯甲酸乙酯(得自步驟A)在10mL MeOH、3mL THF和2.4mL 5N NaOH中的溶液在rt下攪拌16h。將該混合物用20mL H2O進行稀釋并用25mL CH2Cl2進行萃取。將水層酸化(pH1)并用50mL EtOAc對其進行萃取。將有機層用25mL sat′d NaCl洗滌，將其干燥并進行濃縮，得到0.41g標題化合物1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.21(d，J＝8.4，2H)，8.03(d，J＝8.5，2H)，3.41(m，1H)，1.85(m，1H)，1.52(m，1H)，1.21(d，J＝6.9，3H)，0.93(t，J＝7.5，3H).
羧酸34-(1-氧代-2-甲基丙基)苯甲酸標題化合物是用與制備羧酸2所述的方法相似的方法來進行制備的，用異丁酰氯代替步驟A中的(+/-)-2-甲基丁酰氯1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.21(d，J＝8.5，2H)，8.03(d，J＝8.5，2H)，3.57(m，1H)，1.24(d，J＝6.9，6H).
羧酸44-(環(huán)丁基二氟甲基)苯甲酸步驟A4-(環(huán)丁基羰基)苯甲酸乙酯標題化合物是用與制備羧酸2的方法相似的方法來進行制備的，用環(huán)丁烷碳酰氯代替步驟A中的(+/-)-2-甲基丁酰氯1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.10(d，J＝8.2，2H)，7.93(d，J＝8.5，2H)，4.40(q，J＝7.2，2H)，4.01(m，1H)，2.37-2.46(m，2H)，2.28-2.36(m，2H)，2.04-2.15(m，1H)，1.88-1.97(m，1H)，1.41(t，J＝7.1，3H).
步驟B4-(環(huán)丁基二氟甲基)苯甲酸乙酯將810mg(3.5mmol)乙基4-(環(huán)丁基羰基)苯甲酸(得自步驟A)在5mL甲苯中的溶液用1.30g(5.9mmol)三氟化[二(2-甲氧基乙基)氨基]硫和0.41mL(0.7mmol)EtOH進行處理并將所得的混合物加熱至80℃加熱18h。將該反應濃縮。用硅膠色譜進行純化，用20∶1 v/v的己烷/EtOAc進行洗脫，得到標題化合物1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.07(d，J＝8.2，2H)，7.51(d，J＝8.5，2H)，4.39(q，J＝7.2，2H)，2.96(m，1H)，2.15-2.27(m，2H)，1.80-1.99(m，4H)，1.40(t，J＝7.1，3H).
步驟C4-(環(huán)丁基二氟甲基)苯甲酸將360mg(1.4mmol)4-(環(huán)丁基二氟甲基)苯甲酸乙酯(得自步驟B)在4mL 1∶1 v/v MeOH/THF中的溶液用2.1mL 1.0N NaOH進行處理。將所得的混合物在50℃下攪拌3h，然后將其冷卻并濃縮。將所得的殘余物在EtOAc和2N HCl之間進行分配。將有機層用2NHCl(25ml)、25mL sat′d NaCl洗滌，將其干燥并進行濃縮，得到280mg標題化合物1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.15(d，J＝8.5，2H)，7.56(d，J＝8.4，2H)，2.97(m，1H)，2.17-2.27(m，2H)，1.80-2.02(m，4H).
羧酸54-(1，1-二氟-2-甲基丙基)苯甲酸標題化合物是用與制備羧酸4所述的方法相似的方法來進行制備的，用4-(異丙基羰基)苯甲酸乙酯代替步驟B中的4-(環(huán)丁基羰基)苯甲酸乙酯1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.17(d，J＝8.3，2H)，7.56(d，J＝8.4，2H)，2.34(m，1H)，1.00(d，J＝6.8，6H).
羧酸63-氟-4-(2-甲基丙酰基)苯甲酸步驟A1-溴-3-氟-4-(2′-甲基)苯基乙基酮在-78℃下，將1.00g(3.8mmol)N-甲氧基-N-甲基(4-溴-2-氟)苯甲酰胺在10mL THF中的溶液用2.3mL 2.0M氯化異丙基鎂的THF溶液進行處理。使該反應溫熱至rt并將其攪拌3h。將該反應用50mL乙醚稀釋，用25mL 2N HCl、25mL sat’d NaCl洗滌，將其干燥并進行濃縮。用硅膠色譜進行純化，用50∶1 己烷/EtOAc作為洗脫劑，得到143mg標題化合物1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.67(t，J＝8.2，1H)，7.38(dd，J＝1.8，8.4，1H)，7.33(dd，J＝1.6，10.3，1H)，3.35(m，1H)，1.19(d，J＝6.9，6H).
步驟B3-氟-4-異丁酰苯甲酸將143mg(0.58mmol)1-溴-3-氟-4-(2′-甲基)苯基乙基酮(得自步驟A)、41mg(0.35mmol)氰化鋅、11mg(0.011mmol)三(二亞芐基丙酮)-二鈀(O)和15mg(0.026mmol)1，1-二(二苯基膦基)-二茂鐵(15mg，0.026mmol)在2mL DMF和0.030mL水中的溶液加熱至85℃加熱3h。使該反應冷卻，將其負載到硅膠上并己烷/乙酸乙酯(20∶1)對其進行洗脫，得到黃色固體形式的產(chǎn)物(36mg)。將這種固體在甲醇(2mL)中的溶液用過量5N NaOH進行處理并將其在60℃下加熱3h。使該反應冷卻，用50mL EtOAc稀釋，用25mL 2N HCl洗滌，將其干燥并進行濃縮，得到化合物。
羧酸73-三氟甲基-4-(2-(S)-丁氧基)苯甲酸步驟A3-三氟甲基-4-(2-(S)-丁氧基)芐腈將1.1g(5.9mmol)4-氟-3-三氟甲基芐腈和485mg(6.5mmol)(S)-(+)-2-丁醇在10mL THF中的溶液在-10℃下用235mg(5.9mmol)氫化鈉進行處理。將所得的混合物冷卻攪拌2h，然后用10mL H2O將其淬熄。將該被淬熄的溶液用30mL Et2O萃取，用MgSO4干燥并濃縮。在Biotage 40M筒上用色譜進行純化，用4∶1 v/v己烷/乙酸乙酯作為洗脫劑，得到550mg標題化合物
1H NMR(500MHz)δ0.99(t，J＝7.6，3H)，1.35(d，J＝6.2，3H)，1.58-1.83(m，2H)，4.51(七重峰，1H)，7.04(d，J＝8.7，1H)，7.75(d，J＝8.7，1H)，7.85(s，1H).
步驟B3-三氟甲基-4-(2-(S)-丁氧基)苯甲酸將550mg(2.2mmol)3-三氟甲基-4-(2-(S)-甲基丙氧基)芐腈(得自步驟A)在5mL乙醇中的溶液用1.5mL 5.0N NaOH進行處理并將其加熱至80℃加熱3h。然后，將該反應濃縮，用2N HCl處理，用30mLEtOAc萃取，將其干燥并進行濃縮，得到600mg標題化合物1H NMR(500Mhz)δ0.99(t，J＝7.3，3H)，1.43(d，J＝5.9，3H)，1.73-1.83(m，2H)，4.54(七重峰，1H)，7.02(d，J＝8.9，1H)，8.21(d，J＝8.9，1H)，8.32(s，1H).
羧酸8-14用與制備羧酸7所述的這些方法相似的方法來制備下面的中間體，用適宜的醇代替步驟A中的(S)-2-丁醇。
羧酸153-三氟甲基-4-(1-(S)-甲基-2，2，2-三氟乙氧基)苯甲酸步驟A1-(S)-甲基-2，2，2-三氟乙醇標題化合物是用Ramachandran，P.V.等人在Tetrahedron，1993，49(9)，1725-38中所述的方法來進行制備的。
步驟B3-三氟甲基-4-(1-(S)-甲基-2，2，2-三氟乙氧基)苯甲酸標題化合物是用與制備羧酸7所述的方法相似的方法來進行制備的，用1-(S)-甲基-2，2，2-三氟乙醇(得自步驟A)代替羧酸7步驟A中的(S)-2-丁醇。通過將其轉化成相應的甲酯(過量的2.0M三甲基甲硅烷基重氮甲烷在環(huán)己烷中的溶液，THF/MeOH，5分鐘)和用HPLC進行分析來測定標題化合物的對映純度。條件Chiralcel OD 4.6×250mm柱，98∶2 v/v庚烷/iPrOH，1.0mL/min，λ＝254nM.(R)-對映異構體＝8.5min，(S)-對映異構體＝10.4min。
羧酸163-氟-4-(2-(S)-丁氧基)苯甲酸步驟A3-氟-4-(2-(S)-丁氧基)苯甲醛將750mg(5.4mmol)3-氟-4-羥基苯甲醛、403mg(5.4mmol)(R)-(-)-2-丁醇和2g(7.5mmol)三苯基磷在10mL THF中的溶液用1.5mL偶氮二甲酸二異丙酯進行處理。將所得的溶液在rt下攪拌14h，冷卻至rt并將其濃縮。用Biotage 40M筒色譜進行純化，用4∶1 v/v的己烷/EtzO作為洗脫劑，得到130mg標題化合物1H NMR(500Mhz)δ0.99(t，J＝7.6，3H)，1.35(d，J＝6.2，3H)，1.58-1.83(m，2H)，4.47(m，1H)，7.05(t，J＝8.2，1H)，7.59(d，J＝8.2，1H)，7.61(s，1H)，9.84(s，1H).
步驟B3-氟-4-(2-(S)-丁氧基)苯甲酸將130mg(0.66mmol)3-氟-4-(2-(S)-丁氧基)苯甲醛(得自步驟A)在1mL丙酮中的溶液用73mg(0.73mmol)氧化鉻(VI)在3∶1 v/v的水/硫酸的混合物中在0℃下進行處理。使該反應溫熱至rt并將其攪拌2hr，然后用10mL乙酸乙酯進行萃取，用鹽水洗滌，用MgSO4干燥并濃縮，得到130mg標題化合物1H NMR(500Mhz)δ1.00(t，J＝7.6，3H)，1.36(d，J＝6.2，3H)，1.70(m，1H)，1.82(m，1H)，4.44(m，1H)，6.99(t，J＝8.2，1H)，7.79(d，J＝8.2，1H)，7.85(s，1H).
羧酸173，5-二氟-4-(2-(S)-丁氧基)苯甲酸步驟A1-溴-3，5-二氟-4-(2-(S)-丁氧基)苯標題化合物是用與羧酸16，步驟A所述方法相似的方法來進行制備的，用4-溴-2，6-二氟苯酚代替3-氟-4-羥基苯甲醛。
步驟B3，5-二氟-4-(2-(S)-丁氧基)芐腈制備400mg(1.5mmol)1-溴-3，5-二氟-4-(2-(S)-丁氧基)苯(得自步驟A)、106mg(0.9mmol)氰化鋅、69mg三(二亞芐基丙酮)二鈀(O)和100mg(0.18mmol)1，1′-二(二苯基膦基(phosino))二茂鐵在3mL DMF和30μL水中的溶液。將所得的溶液加熱至80℃加熱1小時，然后將其冷卻并將其濃縮。用Biotage 40M筒色譜進行純化，用20∶1 v/v的己烷/EtOAc作為洗脫劑，得到280mg標題化合物1HNMR(500Mhz)δ1.01(t，J＝7.6，3H)，1.35(d，J＝6.2，3H)，1.68(m，1H)，1.79(m，1H)，4.47(m，1H)，7.25(d，2H).
步驟C3，5-二氟-4-(2-(S)-丁氧基)苯甲酸標題化合物是用于羧酸7，步驟B中所述方法相似的方法來進行制備的，用3，5-二氟-4-(2-(S)-丁氧基)芐腈(得自步驟B)代替3-三氟甲基-4-(2-(S)-甲基丙氧基)芐腈
1H NMR(500Mhz)δ1.0(t，J＝7.3，3H)，1.32(d，J＝5.9，3H)，1.68(m，1H)，1.79(m，1H)，4.45(m，1H)，7.65(d，J＝8.3，2H).
羧酸184-(2-(S)-丁氧基)苯甲酸步驟A4-(2-(S)-丁氧基)苯甲酸甲酯標題化合物是用與羧酸16，步驟A所述方法相似的方法來進行制備的，用4-羥基苯甲酸甲酯代替3-氟-4-羥基苯甲醛。
步驟B4-(2-(S)-丁氧基)苯甲酸在rt下，將1.0g(4.8mmol)4-(2-(S)-丁氧基)苯甲酸甲酯在15mLMeOH中的溶液用1mL 5.0N NaOH處理1h。將該溶液濃縮，用6mL2N HCl酸化，用EtOAc萃取，將其干燥并進行濃縮，得到800mg(86％)標題化合物。
羧酶194-(2-(S)-丁氧基-2-氟-苯甲酸步驟A4-(2-(S)-丁氧基-2-氟-芐腈標題化合物是用與羧酸16，步驟A所述方法相似的方法來進行制備的，用2-氟-4-羥基-芐腈代替3-氟-4-羥基苯甲醛。
步驟B4-(2-(S)-丁氧基-2-氟-苯甲酸將770mg(4.0mmol)4-(2-(S)-丁氧基-2-氟-芐腈(得自步驟A)、20mL EtOH和8mL 5N NaOH(8ml)的混合物在80℃下攪拌20小時。將該溶液濃縮，用2N HCl酸化，用EtOAc萃取，將其干燥并進行濃縮，得到0.57g標題化合物1H NMR(500Mhz)δ7.99(t，J＝8.8，1H)，6.75(dd，J＝2.0，6.9，1H)，6.66(dd，J＝2.1，11.0，1H)，4.38-4.44(m，2H)，1.75-1.85(m，1H，1.65-1.75(m，1H)，1.37(d，J＝6.0，3H)，1.02(t，J＝7.4，3H).
羧酸203，5-二氟-4-(2，2，2-三氟乙氧基)苯甲酸步驟A5-溴-1，3-二氟-2-(2，2，2-三氟乙氧基)苯將1.25g(6mmol)4-溴-2，6-二氟苯酚和3.93g(12mmol)碳酸銫在10mL乙腈中的混合物用1.4g(6mmol)of 2，2，2-三氟乙基三氟甲磺酸酯進行處理并將其在rt下攪拌2h。將該反應混合物用EtOAc稀釋并用2NHCl對其進行洗滌。將有機層干燥并對其進行濃縮。用硅膠色譜進行純化，用9∶1的己烷/EtOAc作為洗脫劑，得到230mg標題化合物1H NMR(500Mhz)δ7.16(d，J＝7.3，2H)，4.41-4.50(m，2H).
步驟B3，5-二氟-4-(2，2，2-三氟乙氧基)芐腈將230mg(1.8mmol)5-溴-1，3-二氟-2-(2，2，2-三氟乙氧基)苯(得自步驟A)、63mg(1.1mmol)氰化鋅、41mg(0.09mmol)三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)和60mg(0.21mmol)1，1′-二(二苯基膦基(phosino))二茂鐵在1.5mL DMF和15μL水中的混合物在95℃下加熱2h。將該反應混合物冷卻并將其濃縮。用硅膠色譜進行純化，用9∶1的己烷/EtOAc作為洗脫劑，得到50mg標題化合物。
步驟C3，5-二氟-4-(2，2，2-三氟乙氧基)苯甲酸標題化合物是用與羧酸7，步驟B所述方法相似的方法來進行制備的，用3，5-二氟-4-(2，2，2-三氟乙氧基)芐腈代替3-三氟甲基-4-(2-(S)-甲基丙氧基)芐腈1H NMR(500Mhz)δ7.71(d，J＝8.1，2H)，4.58-4.64(m，2H).
羧酸215-(2-甲基-1-氧代丙基)吡啶-2-甲酸步驟A(+/-)-5-(2-甲基-1-羥基丙基)-2-溴吡啶在0℃下，將1.00g(4.4mmol)2，5-二溴吡啶在10mL THF中的溶液用2.5mL 2M氯化異丙基鎂的THF溶液進行處理并將所得的混合物冷卻攪拌1h。將該混合物用0.46mL(5.1mmol)異丁醛進行處理，將其加溫至rt并攪拌16h。將該混合物在50mL EtOAc和50mL水之間進行分配并進行層分離。將有機層用25mL sat’d NaCl洗滌，將其干燥并進行濃縮。用硅膠色譜進行純化，用3∶1 v/v的己烷/EtOAc作為洗脫劑，得到290mg標題化合物1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.29(d，J＝2.3，，1H)，7.55(dd，J＝2.3，8.0，1H)，7.47(d，J＝8.3，1H)，4.45(d，J＝6.7，1H)，1.94(m，1H)，0.97(d，J＝6.6，3H)，0.85(d，J＝6.9，3H).
步驟B5-(2-甲基-1-氧代丙基)-2-溴吡啶將290mg(1.25mmol)5-(2-甲基-1-羥基丙基)-2-溴吡啶(得自步驟A)和220mg(1.9mmol)N-甲基嗎啉-N-氧化物在5mL CH2Cl2中的混合物用20mg過釕酸(perruthenate)四丙基銨進行處理。將該混合物在rt下攪拌3h。將該反應混合物用硅膠色譜進行純化，用10∶1 v/v的己烷/EtOAc作為洗脫劑，得到230mg標題化合物1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.29(d，J＝2.5，，1H)，8.07(dd，J＝2.6，8.3，1H)，7.61(d，J＝8.5，1H)，3.45(m，1H)，1.23(d，J＝6.8，6H).
步驟C5-(2-甲基-1-氧代丙基)吡啶-2-腈將300mg(1.3mmol)5-(2-甲基-1-氧代丙基)-2-溴吡啶(得自步驟B)、氰化鋅(0.093g，0.789mmol)、三(二亞芐基丙酮)-二鈀(0)(24mg，0.026mmol)和1，1-二(二苯基膦基)-二茂鐵(33mg，0.059mmol)在2mL DMF和0.03mL水中的溶液在80℃下加熱2.5h。使該反應冷卻，將其負載到硅膠上并用5∶1 v/v的己烷/EtOAc進行洗脫，從而得到224mg產(chǎn)物1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.21(d，J＝1.8，，1H)，8.34(dd，J＝2.3，8.0，1H)，7.83(d，J＝8.0，1H)，3.50(m，1H)，1.25(d，J＝6.8，6H).
步驟D5-(2-甲基-1-氧代丙基)吡啶-2-甲酸將125mg(0.7mmol)5-(2-甲基-1-氧代丙基)吡啶-2-腈(得自步驟C)和0.7mL 5.0N NaOH在2.5mL EtOH中的溶液在75℃下攪拌1h。使該反應冷卻，用50mL EtOAc稀釋，用20mL 2N HCl、25mL sat′dNaCl洗滌，將其干燥并進行濃縮，得到108mg標題化合物。
羧酸225-(1，1-二氟-2-甲基丙基)吡啶-2-甲酸標題化合物是用與羧酸4，步驟B和C中所述方法相似的方法由5-(2-甲基-1-氧代丙基)吡啶-2-腈(得自羧酸21，步驟C)來進行制備的1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.71(s，1H)，8.30(d，J＝8.0，1H)，8.01(dd，J＝2.1，8.3，1H)，2.37(m，1H)，1.04(d，J＝6.9，6H)；ESI-MS 216.7(M+H).
羧酸23(S)-4-(3，3-二氟環(huán)戊基)苯甲酸步驟A(S)-3-(4-溴苯基)環(huán)戊酮在氮氣下，向7.2g(35.8mmol)、4-溴苯基硼酸、186mg(0.72mmol)乙?；鵤cetonato二(亞乙基)銠(I)和446mg(0.71mmol)(S)-2，2′-二(二苯基膦基)-1，1′聯(lián)萘(BINAP)在60mL二烷和6mL H2O中的混合物中加入1.0mL(11.9mmol)2-環(huán)戊烯-1-酮。在回流5.5h后，將該反應濃縮。將該殘余物在300mL EtOAc和300mL 1N NaHCO3之間進行分配。在進行相分離后，將有機層用300mL鹽水洗滌，用Na2SO4干燥并將其濃縮。將該殘余物在40M Biotage柱進行純化，用9∶1 v/v的己烷/EtOAc作為洗脫劑，得到1.90g白色固體形式的標題化合物1H-NMR(500MHz)δ1.97(m，1H)，2.29-2.37(m，2H)，2.43-2.52(m，2H)，2.69(m，1H)，3.40(m，1H)，7.16(d，J＝8.5，2H)，7.49(d，J＝8.5，2H).
步驟B(S)-3-(4-溴苯基)-1，1-二氟環(huán)戊烷在偶爾攪拌的情況下，使2.1mL(11.4mmol)三氟化[二(2-甲氧基乙基)氨基]硫和0.10mL(0.7mmol)醚合三氟化硼在7mL甲苯中的混合物在0℃下靜置1.3h。向其中加入1.9g(7.9mmol)(S)-3-(4-溴苯基)環(huán)戊酮(得自步驟A)在13mL甲苯中的溶液。將該反應在55℃下攪拌2天。在冷卻后，將該混合物在0℃下加入到250mL 2N NaOH和250mL Et2O中。在攪拌30min后，進行相分離。將有機層用250mL1N NaOH和250mL H2O洗滌，用MgSO4干燥并濃縮。將殘余物在40M Biotage柱上純化，用49∶1 v/v的己烷/Et2O作為洗脫劑，得到1.47g標題化合物1H-NMR(500MHz)δ1.85(m，1H)，2.09-2.26(m，3H)，2.35(m，1H)，2.56(m，1H)，3.30(m，1H)，7.13(d，J＝8.3，2H)，7.46(d，J＝8.3，2H).
步驟C(S)-4-(3，3-二氟環(huán)戊基)苯甲酸在-78℃下，將1.0g(3.8mmol)(S)-3-(4-溴苯基)-1，1-二氟環(huán)戊烷(得自步驟B)在15mL THF中的溶液用1.6mL(4.0mmol)2.5M BuLi的己烷溶液進行處理。在攪拌15min后，將該反應加入到干冰在200mLEt2O中的混懸液中。使該混合物溫熱至rt。用100mL 1N NaOH對該反應混合物進行萃取。在進行相分離后，用濃HCl將水層酸化至pH1-2。將水相用3×100mL CH2Cl2進行萃取。將所合并的有機相干燥并進行濃縮，得到0.67g標題化合物1H-NMR(500MHz，CD3OD)δ1.87(m，1H)，2.13-2.37(m，4H)，2.54(m，1H)，3.41(m，1H)，7.39(d，J＝8.2，2H)，7.97(d，J＝8.2，2H).
羧酸24(R)-4-(3，3-二氟環(huán)戊基)苯甲酸標題化合物是用與制備羧酸23的方法相似的方法來進行制備的，只是在步驟A中用(R)-2，2′-二(二苯基膦基)-1，1′聯(lián)萘(BINAP)代替(S)-2，2′-二(二苯基膦基)-1，1′聯(lián)萘(BINAP)。
制備實施例實施例13-(2-甲基-5-氯苯基)-5-(4-(2-甲基丙基)苯基)-1，2，4-二唑步驟AN-羥基-(2-甲基-5-氯)芐脒將2.50g(16.5mmol)5-氯-2-甲基芐腈、2.30g(33mmol)鹽酸羥胺和6.90g(82.5mmol)碳酸氫鈉在25mL MeOH甲醇中的混合物在50℃下攪拌16h。將該反應混合物冷卻，用50mL 2N HCl稀釋，然后用3×30mL CH2Cl2和1×30mL EtOAc進行萃取。將所合并的有機物干燥并進行濃縮，得到2.15g標題化合物1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.29-7.34(m，2H)，7.23(d，J＝8.0，1H)，2.38(s，3H).步驟B3-(2-甲基-5-氯苯基)-5-(4-(2-甲基丙基)苯基)-1，2，4-二唑將500mg(2.8mmol)4-(2-甲基丙基)苯甲酸、600mg(3.1mmol)鹽酸1-(3-(二甲基氨基)丙基)-3-乙基碳化二亞胺和420mg(3.1mmol)1-羥基苯并三唑在10mL乙腈中的混合物在rt下攪拌10min。將該混合物用520mg(2.8mmol)N-羥基-(2-甲基-5-氯)芐脒(得自步驟A)進行處理并將所得的混合物在80℃下加熱16h。將該反應冷卻并將其濃縮。用硅膠色譜進行純化，用19∶1 v/v的己烷/EtOAC作為洗脫劑，得到330mg標題化合物1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.11-8.13(m，3H)，7.37(dd，J＝2.3，8.2，1H)，7.33(d，J＝8.3，2H)，7.25-7.28(m，1H)，2.58(d，J＝7.3，2H)，2.52(s，3H)，1.94(m，1H)，0.94(d，J＝6.6，6H)；ESI-MS 327(M+H).
實施例2-18用與實施例1所述這些方法相似的方法制備下面的化合物，在步驟B中用適宜的羧酸代替4-(2-甲基丙基)苯甲酸。


實施例19-25用與實施例1所述這些方法相似的方法制備下面的化合物，在步驟A中用適宜的腈代替(2-甲基-5-氯)芐腈和在步驟B中用4-(環(huán)己基)苯甲酸代替4-(2-甲基丙基)苯甲酸。

實施例26-31用與實施例1所述這些方法相似的方法制備下面的化合物，在步驟A中用適宜的腈代替(2-甲基-5-氯)芐腈和在步驟B中用適宜的羧酸代替4-(2-甲基丙基)苯甲酸。

生物學活性用下面的試驗可以對本發(fā)明化合物的S1P1/Edg1、S1P3，/Edg3、S1P2/Edg5、S1P4/Edg6或S1P5/Edg8活性進行評估配體與Edg/S1P受體的結合試驗用具有鞘氨醇激酶活性的粗酵母菌提取物在包含50mMKH2PO4、1mM巰基乙醇、1mM Na3VO4、25mM KF、2mM氨基脲、1mM Na2EDTA、5mM MgCl2、50mM鞘氨醇、0.1％TritonX-114、和1mCi γ33P-ATP(NEN；比活度3000Ci/mmol)的反應混合物中由γ33P-ATP和鞘氨醇來進行33P-鞘氨醇-1-磷酸酯的酶合成。用丁醇對該反應產(chǎn)物進行萃取并用HPLC對33P-鞘氨醇-1-磷酸酯進行純化。
用不含酶的解離溶液(Specialty Media，Lavallette，NJ)來收獲表達EDG/S1P受體的細胞。將其在冷PBS中洗滌一次并將其混懸于由50mM HEPES-Na，pH7.5、5mM MgCl2、1mM CaCl2、和0.5％不含脂肪酸的BSA所組成的結合試驗緩沖劑中。將33P-鞘氨醇-1-磷酸酯與0.1nM鞘氨醇-1-磷酸酯一起在結合試驗緩沖劑中進行聲處理；向位于96孔微量滴定皿中的100μl細胞(1×106個細胞/ml)中加入100μl所說的配體混合物。在溫和混合的情況下使其在室溫下結合60min。然后，用Packard Filtermate Universal Harvester將細胞收集到GF/B濾板上。在將該濾板干燥30min后，向各孔中加入40μl Microscint 20并在Wallac Microbeta閃爍計數(shù)器上對結合進行測定。非特異性結合被定義為在存在0.5μM冷鞘氨醇-1-磷酸酯的情況下剩余的放射性活性的量。
或者，在由表達Edg/S1P受體的細胞制備的膜上進行配體結合試驗。用不含酶的解離溶液來收獲細胞并將其在冷PBS中洗滌一次。通過用Kinematica polytron在冰冷的20mM HEPES pH7.4、10mMEDTA中進行勻化(標度5，10秒)來破碎這些細胞。將這些勻漿在48,000xg下在4℃下離心15min并將小丸混懸于20mM HEPES pH7.4，0.1mM EDTA中。在第二次離心后，將該最后的小丸混懸于20mMHEPES pH7.4，100mM NaCl，10mM MgCl2中。用0.5至2μg膜蛋白如上所述的那樣進行配體結合試驗。
可以在該該33P-鞘氨醇-1-磷酸酯結合試驗中確定Edg/S1P受體的激動劑和拮抗劑。將用DMSO、甲醇或其它溶劑稀釋的化合物與包含33P-鞘氨醇-1-磷酸酯的探針和結合試驗緩沖劑在微量滴定皿中進行混合。向其中加入由表達Edg/S1P受體的細胞制備的膜，并如所示那樣進行與33P-鞘氨醇-1-磷酸酯的結合。測定存在各種濃度化合物情況下的結合數(shù)量并用非線性回歸軟件如MRLCalc(Merck ResearchLaboratories)或PRISM(GraphPad軟件)對數(shù)據(jù)進行分析以測量這些化合物對所說受體的親合力。通過用由被各受體(S1P1/Edg1，S1P3/Edg3，S1P2/Edg5，S1P4/Edg6，S1P5/Edg8)轉染的細胞制得的膜在存在所說化合物的情況下測量33P-鞘氨醇-1-磷酸酯結合的水平來測定化合物對Edg/S1P受體的選擇性。
35S-GTPγS結合試驗用35S-GTPγS結合試驗測量S1P/Edg受體與G蛋白的功能性偶合。將如配體與Edg/S1P受體結合試驗中所述那樣制備的膜(1-10μg膜蛋白)在200μl包含20mM HEPES pH7.4，100mM NaCl，10mMMgCl2，5μM GDP，0.1％不含脂肪酸的BSA(Sigma，catalog A8806)，各種濃度的鞘氨醇-1-磷酸酯，和125pM35S-GTPγS(NEN；比活度1250Ci/mmol)的體積中在96孔微量滴定皿中進行培養(yǎng)。將其在溫和混合的情況下在室溫下進行1小時的結合，通過用Packard FiltermateUniversal Harvester將該膜收集到GF/B濾板上來終止結合。在將該濾板干燥30min后，向各孔中加入40μl Microscint 20并在WallacMicrobeta閃爍計數(shù)器對結合進行測量。
可以在所說的35S-GTPγS結合試驗中確定S1P/Edg受體的激動劑和拮抗劑。將用DMSO、甲醇或其它溶劑稀釋的化合物加入到微量滴定皿中從而得到0.01nM至10μM的最終濃度。向其中加入由表達S1P/Edg受體的細胞制備的膜，并如所述的那樣與35S-GTPγS進行結合。當在不存在天然配體或其它已知激動劑的情況下進行試驗時，認為在高于內(nèi)源性水平的水平上刺激35S-GTPγS結合的化合物是激動劑，而認為抑制35S-GTPγS結合的內(nèi)源性水平的化合物是反相激動劑。在存在低于最大水平的天然配體或已知的S1P/Edg受體激動劑的情況下用35S-GTPγS結合試驗來探測拮抗劑，在這種情況中這些化合物降低了35S-GTPγS結合的水平。用在存在各種濃度化合物的情況下測定的結合數(shù)量來測量化合物作為S1P/Edg受體的激動劑、反相激動劑、或拮抗劑的效力。為了對激動劑進行評估，將高于基準的刺激百分比計算為在存在化合物情況下的結合除以不存在配體情況下的結合再乘以100的形式。用非線性回歸曲線擬合程序MRLCalc(Merck ResearchLaboratories)作劑量響應曲線，并將EC50值定義為獲得其自身最大刺激50％所需的激動劑濃度。通過用由各受體轉染的細胞制得的膜測量存在化合物情況下35S-GTPγS的結合水平來測定化合物對S1P/Edg受體的選擇性。
細胞內(nèi)鈣通量試驗用FLIPR(熒光成像板讀數(shù)器，分子裝置(Fluorescence ImagingPlate Reader，Molecular Devices))測量與細胞內(nèi)鈣活動有關的S1P/Edg受體與G蛋白的功能性偶合。收獲表達S1P/Edg受體的細胞并將其用試驗緩沖劑(包含20mM HEPES，0.1％BSA和710μg/ml丙磺舒(probenicid)的Hanks Buffered鹽水溶液(BRL)(Sigma))洗滌一次。在37℃和5％CO2下在包含500nM鈣敏感的染料Fluo-4(分子探針)的相同緩沖劑中對這些細胞標記1小時。用緩沖劑將這些細胞洗滌兩次，然后將其以每孔1.5×105的數(shù)量(90μl)涂鍍在涂覆了多熔素的96孔黑色微量滴定皿中。通過用200μl試驗緩沖劑將鞘氨醇-1-磷酸酯或其它激動劑稀釋至為最終試驗濃度2倍的濃度來制備一種96-孔配體板。將該配體板和細胞板負載到該FLIPR儀器上以對其進行分析。使這些板平衡至37℃。通過將等體積的配體轉移到細胞板中來開始試驗，并以3min的間隔記錄鈣通量。以面積(總和)或最大峰高(max)的形式對細胞響應進行定量。在不存在天然配體的情況下，通過用適宜的溶劑對化合物進行稀釋并將其轉移到Fluo-4標記的細胞中來對激動劑進行評估。在通過加入天然配體或其它S1P/Edg受體激動劑來開始鈣流出之前通過用各種濃度的化合物對該Fluo-4標記的細胞預處理15分鐘來對拮抗劑進行評估。
表達S1P/Edg受體細胞的制備可以用許多方法中的任何一種來克隆S1P1/Edg1、S1P3/Edg3、S1P2/Edg5、S1P4/Edg6或S1P5/Edg8。這些方法非限制性地包括(1)RACE PCR克隆技術(Frohman等人，1988，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 858998-9002)?？梢杂?′和/或3′RACE來產(chǎn)生全長型cDNA序列；(2)在適宜的表達載體系統(tǒng)中在構建了包含S1P/Edg的cDNA文庫后Edg/S1P cDNA的直接功能性表達；(3)用由該S1P/Edg蛋白的氨基酸序列設計的進行了標記的簡并寡核苷酸探針對在噬菌體或質(zhì)粒穿梭載體中構建的包含S1P/Edg的cDNA文庫進行篩選；(4)用編碼所說的S1P/Edg蛋白的不完全cDNA對在噬菌體或質(zhì)粒穿梭載體中構建的包含S1P/Edg的cDNA文庫進行篩選。這種不完全cDNA是通過設計得自與S1P/Edg蛋白相關的其它蛋白已知的氨基酸序列的簡并寡核苷酸引發(fā)劑由S1P/Edg DNA片斷的特定PCR擴增而獲得的；(5)用與哺乳動物S1P/Edg蛋白具有同源性的部分cDNA或寡核苷酸對在噬菌體或質(zhì)粒穿梭載體重構建的包含S1P/Edg的cDNA文庫進行篩選。對于S1P/Edg cDNA的PCR擴增而言，這種策略可能還涉及使用基因特異性的寡核苷酸引發(fā)劑；或(6)用S1P/Edg核苷酸序列作為模板設計5′和3′基因特異性的寡核苷酸，從而使得可以用已知的RACE技術來產(chǎn)生全長型cDNA，或者可以用這些用于產(chǎn)生和分離出一種部分編碼區(qū)域的相同已知RACE技術來產(chǎn)生編碼區(qū)域的一部分并用其作為用于從許多類cDNA和/或基因組文庫中篩選出一種的探針，從而分離出編碼S1P/Edg的核苷酸序列的全長型版本。
本領域技術人員顯而易見的是可以用其它類型的文庫以及由其它細胞類型或種屬類型構建的數(shù)據(jù)庫來分離編碼S1P/Edg的DNA或S1P/Edg同系物。其它類型的文庫非限制性地包括得自其它細胞的cDNA文庫。
本領域技術人員顯而易見的是可以由具有S1P/Edg活性的細胞或細胞系制備適宜的cDNA文庫。可以通過首先用用于該類目的的任何可獲得的已知試驗測量與細胞有關的S1P/Edg活性來對用于制備用來分離出編碼S1P/Edg的cDNA的cDNA文庫的細胞或細胞系進行選擇。
可以用現(xiàn)有技術公知的標準技術來進行cDNA文庫的制備。例如可以在Sambrook等人，1989，分子克隆實驗室手冊(MolecularCloningA Laboratory Manual)；Cold Spring Harbor Laboratory，ColdSpring Harbor，紐約中找到眾所周知的cDNA文庫構建技術?；パaDNA文庫還可以由許多商業(yè)來源獲得，所說的商業(yè)來源非限制性地包括Clontech Laboratories，Inc.和Stratagene。
對于S1P/Edg在重組宿主細胞中的表達而言，可以使用包含編碼S1P/Edg-樣蛋白的DNA的表達載體?？梢詫⒃擃愔亟M宿主細胞在適宜的條件下進行培養(yǎng)從而制備出S1P/Edg或生物學等值的形式。表達載體可以非限制性地包括克隆載體、改性的克隆載體、特定設計的質(zhì)?；虿《?。通過商業(yè)途徑獲得的哺乳動物表達載體可能適用于重組的S1P/Edg表達。
重組的宿主細胞可以是原核或真核細胞，非限制性地包括細菌如大腸桿菌、真菌細胞如酵母菌、哺乳動物細胞，非限制性地包括牛、豬、猴子和嚙齒動物源的細胞系；和昆蟲細胞，非限制性地包括得自果蠅和蠶的細胞系。
各種S1P/Edg受體的核苷酸序列在現(xiàn)有技術中是已知的。例如可參見下面的文獻S1P1/Edg1人Ela，T.和T.Maciag 1990，在分化的人內(nèi)皮細胞中誘導的大量轉錄物編碼了具有與G-蛋白偶合受體的結構相似結構的多肽(An abundanttranscript induced in differentiating human endothelial cells encodes apolypeptide with structural similarities to G-protein coupledreceptors).J.Biol Chem.2659308-9313，其在這里被全部引入作為參考。
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S1P1/Edg1大鼠Lado，D.C.，C.S.Browe，A.A.Gaskin，J.M.Borden，和A.J.MacLennan.1994，大鼠edg-1即早基因的克隆表達方式表明了功能的多樣性(Cloning of the rat edg-1 immediate-early geneexpressionpattern suggests diverse functions).Gene 149331-336，其在這里被全部引入作為參考。
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S1P2/Edg5人An，S.，Y.Zheng，T.Bleu 2000鞘氨醇1-磷酸酯誘導的細胞增生、存活和G-蛋白偶合受體Edg3和Edg5介導的相關發(fā)信號事件(Sphingosine 1-Phosphate-induced cell proliferation，survival，andrelated signaling events mediated by G Protein-coupled receptors Edg3and Edg5).J.Biol.Chem 275288-296，其在這里被全部引入作為參考。
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S1P5/Edg8人Im，D.-S.，J.Clemens，T.L.Macdonald，K.R.Lynch 2001，人和小鼠鞘氨醇1-磷酸酯受體，S1P5(Edg-8)的特性鞘氨醇1-磷酸酯受體的結構-活性的關系(Characterization of the human and mousesphingosine 1-phsophate receptors，S1P5(Edg-8)Structure-Activityrelationship of sphingosine 1-phsophate receptors).Biochemistry4014053-14060，其在這里被全部引入作為參考。
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S1P5/Edg8大鼠Im，D.-S.，C.E.Heise，N.Ancellin，B.F.O′Dowd，G.-J.Shei，R.P.Heavens，M.R.Rigby，T.Hla，S.Mandala，G.McAllister，S.R.George，K.R.Lynch 2000，新型鞘氨醇1-磷酸酯受體，Edg-8的特性(Characterization of a novel sphingosine 1-phsophate receptors，Edg-8).J.Biol.Chem.27514281-14286，其在這里被全部引入作為參考。
WO 01/05829，公開于2001年1月25日，其在這里被全部引入作為參考。
心血管作用的測量可以用下面的方法來評估本發(fā)明化合物對心血管參數(shù)的作用用具有股動脈和靜脈導管的儀器裝備成年雄性大鼠(體重大約為350g)來分別測量動脈壓和靜脈內(nèi)給藥化合物。將動物用戊巴比妥(55mg/kg，ip)麻醉。在Gould Po-Ne-Mah數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)上記錄其血壓和心率。心率是由動脈脈沖波獲得的。在適應期后，進行基準讀數(shù)(大約20分鐘)并將該數(shù)據(jù)平均。將化合物靜脈內(nèi)給藥(大約5秒的推注或持續(xù)輸注15分鐘)，在將化合物給藥后每隔一分鐘對數(shù)據(jù)進行記錄，記錄60分鐘。以心率中的峰改變或平均動脈壓的形式來對數(shù)據(jù)進行計算或者用心率或血壓改變對時間作圖的曲線下面積形式來進行計算。將數(shù)據(jù)表示為均值±SEM。用單側斯圖登成對t-檢驗來將其與基準值進行統(tǒng)計學比較，并且認為在p＜0.05下有顯著意義。
在Sugiyama，A.，N.N.Aye，Y.Yatomi，Y.Ozaki，K.Hashimoto 2000鞘氨醇-1-磷酸酯——一種天然存在的生物學活性溶血磷脂對大鼠心血管系統(tǒng)的作用(Effects of Sphingosine-1-Phosphate，a naturallyoccurring biologically active lysophospholipid，on the ratcardiovascular system).Jpn.J.Pharmacol.82338-342中對S1P對大鼠心血管系統(tǒng)的作用進行了描述，其在這里被全部引入作為參考。
小鼠急性毒性的測量用0.1ml被溶解于無毒基質(zhì)中的試驗化合物對每只小鼠靜脈內(nèi)(尾靜脈)給藥并觀察其毒性跡象。嚴重的跡象可能包括死亡、癲癇發(fā)作、麻痹或喪失意識(unconciousness)。還可能會發(fā)現(xiàn)輕微的中毒跡象，輕微的中毒跡象可以包括共濟失調(diào)、呼吸緩慢、生氣或相對于正常小鼠而言活性降低。在注意到這些跡象時，用相同的基質(zhì)對給藥溶液進行稀釋。以相同的方式將該被稀釋了的劑量給藥于第二只小鼠并同樣觀察其跡象。重復該過程直至達到不產(chǎn)生任何跡象的劑量。認為其是估算的無作用的水平。以這種水平對另外一只小鼠進行給藥以證實不存在跡象。
淋巴細胞減少的評估如小鼠急性毒性測量中所述的那樣將化合物進行給藥并在給藥后3小時如下所述那樣對小鼠的淋巴細胞減少進行評估。在用CO2使小鼠喪失意識時，打開其胸部，通過直接心臟穿刺取0.5ml血，立即用EDTA對血液進行穩(wěn)定并用已進行了校準的用于進行鼠科動物白細胞分類計數(shù)的臨床血液學自動分析儀(H2000，CARESIDE，Culver City CA)對其血液學進行評估。通過將三只小鼠的血液學參數(shù)與三只用基質(zhì)處理的小鼠進行比較來確定試驗治療中淋巴細胞的降低。用上述稀釋方法的變型通過耐受性來確定這種評估所用的劑量。對于此目的而言，希望無作用，可接受有輕微的作用，將產(chǎn)生嚴重毒性的劑量連續(xù)稀釋至僅產(chǎn)生輕微的作用的水平。
實施例的體外活性正如通過在上述試驗中測量出來的其作為S1P1/Edg1受體有效的選擇性激動劑(相對于S1PR3/Edg3受體而言)活性所證明的那樣，這里所公開的實施例可用作免疫調(diào)節(jié)劑。如在上述35S-GTPγS結合試驗中估算的對S1P1/Edg1受體的EC50與對S1P3/Edg3受體的EC50的比例測得的那樣，這里所公開的實施例特別是對S1P1/Edg1受體的選擇性比對S1PR3/Edg3受體的選擇性高100倍以上并且如通過上述35S-GTPγS結合試驗估算出來的那樣，其對S1P1/Edg1受體的結合的EC50低于10nM。
權利要求
1.一種式I所示的化合物或其可藥用的鹽， 其中A選自下列基團苯基、萘基和HET1，其各自被一至三個獨立地選自下列基團的取代基所取代鹵素、C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基，或者A是C3-6環(huán)烷基，其任選地被一至三個獨立地選自鹵素、C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基的取代基所取代；B選自下列基團苯基、萘基、HET2和C3-6環(huán)烷基，其各自任選地被一至三個獨立地選自鹵素、C1-4烷基、鹵素取代的C1-4烷基和羥基-取代的C1-4烷基的取代基所取代；HET1選自下列基團苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并唑基、咔唑基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氫吲哚基、吲哚基、indolazinyl、吲唑基、異苯并呋喃基、異吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異唑基、萘啶基、二唑基、唑基、吡嗪基、吡唑基、吡啶并吡啶基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、氮雜環(huán)丁烷基、1，4-二烷基、六氫氮雜基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、二氫苯并咪唑基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并唑基、二氫呋喃基、二氫咪唑基、二氫吲哚基、二氫異唑基、二氫異噻唑基、二氫二唑基、二氫唑基、二氫吡嗪基、二氫吡唑基、二氫吡啶基、二氫嘧啶基、二氫吡咯基、二氫喹啉基、二氫四唑基、二氫噻二唑基、二氫噻唑基、二氫噻吩基、二氫三唑基、二氫氮雜環(huán)丁烷基、亞甲二氧基苯甲酰基、四氫呋喃基、和四氫噻吩基，所說的HET1任選地被1-2氧代基取代；HET2選自下列基團呋喃基、咪唑基、異噻唑基、異唑基、二唑基、唑基、吡唑基、吡咯基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基和三唑基；和X選自下列基團甲基、甲氧基、硝基、氨基、三氟甲基和鹵素，其中X在相對于式I中所示的1，2，4-二唑基團的連接而言為鄰位的環(huán)B上取代。
2.如權利要求1所述的化合物，其中A選自下列基團被一至兩個獨立地選自鹵素、C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基的取代基取代的苯基、吡啶基和吡嗪基，或者A是任選地被一至兩個獨立地選自鹵素、C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基的取代基取代的C3-6環(huán)烷基。
3.如權利要求1所述的化合物，其中A是在相對于式I中所示1，2，4-二唑基的連接而言的對位上被一個選自C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基的取代基取代的苯基。
4.如權利要求1所述的化合物，其中A是在相對于式I中所示1，2，4-二唑基的連接而言的1，4-位上被一個選自C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基的取代基取代的吡啶基。
5.如權利要求1所述的化合物，其中A是環(huán)己基。
6.如權利要求1所述的化合物，其中B是任選地被一個選自鹵素、C1-4烷基、鹵素取代的C1-4烷基和羥基-取代的C1-4烷基的取代基取代的苯基。
7.如權利要求1所述的化合物，其中B選自下列基團異唑基、噻二唑基和噻吩基，其各自任選地被一個選自鹵素、C1-4烷基、鹵素取代的C1-4烷基和羥基取代的C1-4烷基的取代基所取代。
8.如權利要求1所述的化合物，其中X是甲基。
9.如權利要求1所述的化合物或其可藥用的鹽，其具有式Ia結構 其中A選自下列基團被一至兩個獨立地選自鹵素、C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基的取代基取代的苯基、吡啶基和吡嗪基，或者A是任選地被一至兩個獨立地選自鹵素、C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基的取代基取代的C3-6環(huán)烷基。
10.如權利要求1所述的化合物或其可藥用的鹽，其具有式Ib結構 其中B選自下列基團苯基、異唑基、噻二唑基和噻吩基，其各自任選地被一個選自鹵素、C1-4烷基、鹵素取代的C1-4烷基和羥基-取代的C1-4烷基的取代基所取代，和X選自下列基團甲基、甲氧基、硝基、氨基、三氟甲基和鹵素，其中X在相對于式I中所示的1，2，4-二唑基的連接而言為鄰位的環(huán)B上取代。
11.如權利要求1所述的化合物或其可藥用的鹽，其具有式Ic結構 其中Z選自下列基團C1-6烷基、鹵素取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、鹵素取代的C3-6環(huán)烷基、C1-6烷氧基和鹵素取代的-C1-6烷氧基；B選自下列基團苯基、異唑基、噻二唑基和噻吩基，其各自任選地被一個選自鹵素、C1-4烷基、鹵素取代的C1-4烷基和羥基-取代的C1-4烷基的取代基所取代；和X選自下列基團甲基、甲氧基、硝基、氨基、三氟甲基和鹵素，其中X在相對于式I中所示的1，2，4-二唑基的連接而言為鄰位的環(huán)B上取代。
12.如權利要求11所述的化合物，其中Z是C1-6烷氧基或鹵素-取代的-C1-6烷氧基。
13.一種化合物，其選自下表中的一種化合物表A 表B 表C 或上述任何一種化合物的可藥用的鹽。
14.一種治療需要該類治療的哺乳動物患者的免疫調(diào)節(jié)異常的方法，其包括以可以有效治療所說免疫調(diào)節(jié)異常的數(shù)量給所說的患者使用如權利要求1所述的化合物。
15.如權利要求14所述的方法，其中所說的免疫調(diào)節(jié)異常是一種選自全身性紅斑狼瘡、慢性類風濕性關節(jié)炎、I型糖尿病、炎性腸病、膽汁性肝硬化、葡萄膜炎、多發(fā)性硬化、克羅恩氏病、潰瘍性結腸炎；大皰性類天皰瘡、肉樣瘤病、牛皮癬、自身免疫性肌炎、韋格納氏肉芽腫、魚鱗病、格雷夫斯氏眼病和哮喘的自身免疫性或慢性炎性疾病。
16.如權利要求14所述的方法，其中所說的免疫調(diào)節(jié)異常是骨髓或器官移植排斥或移植物抗宿主疾病。
17.如權利要求14所述的方法，其中所說的免疫調(diào)節(jié)異常選自器官或組織的移植、由移植造成的移植物抗宿主疾病，包括類風濕性關節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡在內(nèi)的自身免疫性綜合征、橋本氏甲狀腺炎、多發(fā)性硬化、重癥肌無力、I型糖尿病、葡萄膜炎、后葡萄膜炎、變應性腦脊髓炎、腎小球性腎炎、包括風濕熱和感染后的腎小球性腎炎在內(nèi)的感染后的自身免疫性疾病、炎性和過度增生性皮膚病、牛皮癬、特應性皮炎、接觸性皮炎、濕疹性皮炎、脂溢性皮炎、扁平苔蘚、天皰瘡、大皰性類天皰瘡、大皰性表皮松懈癥、蕁麻疹、血管性水腫、結節(jié)性脈管炎、紅斑、皮膚上的嗜曙紅細胞增多、紅斑狼瘡、痤瘡、斑禿、角膜結膜炎、春季結膜炎、與貝切特氏病有關的葡萄膜炎、角膜炎、皰疹性角膜炎、圓錐形角膜、角膜上皮營養(yǎng)不良(dystrophiaepithelialis corneae)、角膜白斑、眼天皰瘡、莫倫氏潰瘍、鞏膜炎、格雷夫斯氏眼病(Graves’opthalmopathy)、伏格特-小柳-原田三氏綜合征、肉樣瘤病、花粉變態(tài)反應、可逆性阻塞性氣道疾病、支氣管哮喘、變應性哮喘、內(nèi)源性哮喘、外源性哮喘、粉塵性哮喘、慢性或慢性頑固性哮喘、晚期哮喘和氣道高反應性、支氣管炎、胃潰瘍、由局部缺血性疾病和血栓形成造成的血管損害、局部缺血性腸疾病、炎性腸病、壞死性小腸結腸炎、與熱灼傷有關的小腸損害、腹部疾病、直腸炎、嗜酸細胞性胃腸炎、肥大細胞增生病、克羅恩氏病、潰瘍性結腸炎、偏頭痛、鼻炎、濕疹、間質(zhì)性腎炎、肺出血腎炎綜合征、溶血性尿毒癥綜合征、糖尿病腎病、糖多發(fā)性肌炎、格-巴二氏綜合征、美尼爾氏病、多發(fā)性神經(jīng)炎、多神經(jīng)炎、單神經(jīng)炎、神經(jīng)根病、甲狀腺功能亢進、巴塞多氏病、單純性紅細胞再生障礙、再生障礙性貧血、再生不良性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜、自身免疫性溶血性貧血、粒細胞缺乏癥、惡性貧血、巨幼紅細胞貧血、紅細胞發(fā)生不能、骨質(zhì)疏松癥、肉樣瘤病、纖維化肺、特發(fā)性間質(zhì)性肺炎、皮膚肌炎、尋常性白斑病、尋常性魚鱗病、光變應性敏感性、皮膚T細胞淋巴瘤、動脈硬化、動脈粥樣硬化、大動脈炎綜合征、結節(jié)性多動脈炎、非炎性心肌病、硬皮病、韋格納氏壞死性肉芽腫、口腔干燥-風濕性關節(jié)炎綜合征、肥胖癥、嗜曙紅細胞性筋膜炎、齦、牙周組織、牙槽骨的損害、substantiaossea dentis、腎小球性腎炎、男性型脫發(fā)或老年性脫發(fā)(通過預防脫發(fā)或提供頭發(fā)萌芽和/或促進頭發(fā)產(chǎn)生和頭發(fā)生長)、肌營養(yǎng)不良、膿皮病和賽雜瑞氏綜合征、阿狄森氏綜合征、在保護、移植或局部缺血性疾病時發(fā)生的組織的局部缺血-再灌注性損傷、內(nèi)毒素休克、假膜性結腸炎、由藥物或輻射造成的結腸炎、局部缺血性急性腎功能不全、慢性腎功能不全、由肺-氧或藥物造成的毒素病、肺癌、肺氣腫、白內(nèi)障、鐵塵肺、視網(wǎng)膜色素變性、老年性黃斑變性、vitreal瘢痕形成、角膜強堿燒傷、多形性紅斑皮炎(dermatitis erythema multiforme)、linear IgA ballous dermatitis和cement dermatitis、齒齦炎、牙周炎、膿毒癥、胰腺炎、由環(huán)境污染造成的疾病、衰老、癌發(fā)生、癌轉移和高空病、由組胺或白三烯-C4釋放造成的疾病、貝切特氏病、自身免疫性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、硬化性膽管炎、部分肝切除術、急性肝壞死、由毒素造成的壞死、病毒性肝炎、休克、或缺氧癥、B-病毒肝炎、非-A/非-B型肝炎、肝硬化、酒精性肝硬化、肝衰竭、暴發(fā)性肝功能衰竭、晚期發(fā)作的肝衰竭(late-onset hepatic failure)、“acute-on-chronic”肝衰竭、化療作用的強化、巨細胞病毒感染、HCMV感染、AIDS、癌癥、老年性癡呆、創(chuàng)傷、和慢性細菌感染。
18.如權利要求14所述的方法，其中所說的免疫調(diào)節(jié)異常選自下列1)多發(fā)性硬化，2)類風濕性關節(jié)炎，3)全身性紅斑狼瘡，4)牛皮癬，5)被移植器官或組織的排斥，6)炎性腸病，7)淋巴來源的惡性腫瘤，8)急性和慢性淋巴細胞白血病和淋巴瘤以及9)胰島素和非胰島素依賴性糖尿病。
19.一種抑制需要免疫抑制的哺乳動物患者內(nèi)的免疫系統(tǒng)的方法，其包括給所說的患者使用免疫抑制有效量的如權利要求1所述的化合物。
20.一種藥物組合物，其包含如權利要求1所述的化合物和與之結合的可藥用載體。
21.一種治療需要該類治療的哺乳動物患者的呼吸疾病或病癥的方法，其包括以可以有效治療所說呼吸疾病或病癥的數(shù)量給所說的患者使用如權利要求1所述的化合物。
22.如權利要求21所述的方法，其中所說的呼吸疾病或病癥選自下列哮喘、慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺疾病、成人呼吸窘迫綜合征、嬰兒呼吸窘迫綜合征、咳嗽、嗜酸細胞性肉芽腫、呼吸道合胞體病毒細支氣管炎、支氣管擴張、特發(fā)性肺纖維化、急性肺損傷和阻塞性細支氣管炎組織肺炎。
全文摘要
本發(fā)明包括式I化合物(I)以及其可藥用的鹽。該化合物可用于治療免疫介導的疾病和病癥，如骨髓、器官和組織移植排斥。還包括藥物組合物以及其使用方法。
文檔編號C07D271/00GK1859908SQ200480028299
公開日2006年11月8日 申請日期2004年9月27日 優(yōu)先權日2003年10月1日
發(fā)明者G·A·多赫爾蒂, J·J·哈爾, I·E·萊吉克, C·L·林奇, L·M·托思 申請人:默克公司