專利名稱：頭孢類化合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及新的頭孢類化合物(cephem compounds)及其可藥用鹽。更具體地，本發(fā)明涉及具有抗微生物活性的新的頭孢類化合物及其可藥用鹽；新的頭孢類化合物及其可藥用鹽的制備方法；包括所述新的頭孢類化合物及其可藥用鹽的藥物組合物；以及治療人和動物的感染性疾病的方法。
發(fā)明公開本發(fā)明的一個目的是提供對多種致病微生物具有高活性的新的頭孢類化合物及其可藥用鹽。
本發(fā)明的另一個目的是提供制備所述頭孢類化合物及其鹽的方法。
本發(fā)明的另一個目的是提供包括所述頭孢類化合物或其可藥用鹽作為活性成分的藥物組合物。
本發(fā)明的另一個目的是提供治療由致病微生物所引起的感染性疾病的方法，包括對被感染的人或動物給藥所述頭孢類化合物。
本發(fā)明的目標頭孢類化合物是新的，并且可由以下通式[I]表示 其中R1為低級烷基或羥基(低級)烷基，和R2為氫或氨基保護基，或R1和R2結合在一起形成低級亞烷基；
R3為-A-R6，其中A為鍵、-NHCO-(CH2CO)n-(其中n為0或1)、低級亞烷基、-NH-CO-CO-或 和R6為 或 其中Z1和Z2獨立地為-NHCO-或-CONH-，k、q和r獨立地為0或1，s和t獨立地為0到6的整數(shù)，m和p獨立地為0到6的整數(shù)，和R7、R8、R9和R10獨立地為氨基、被保護的氨基、胍基、被保護的胍基、脒基或被保護的脒基；R4為羧基或被保護的羧基；和R5為氨基或被保護的氨基。
對于目標化合物[I]，需要指出以下幾點。
也就是說，目標化合物[I]包括順式異構體(Z型)、反式異構體(E型)及其混合物。順式異構體(Z型)是指具有下式所示局部結構的幾何異構體 其中R4和R5各自的定義如上所述，
反式異構體(E型)是指具有下式所示局部結構的另一種幾何異構體 其中R4和R5各自的定義如上所述，并且，所有的這些幾何異構體及其混合物都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
在本發(fā)明的說明書和權利要求中，為方便起見，這些幾何異構體及其混合物的局部結構由下式表示 其中R4和R5各自的定義如上所述。
需要指出的另一點是化合物[I]的吡唑基(pyrazoli0)部分也可以以互變異構形式存在，這種互變異構平衡可由下式表示。
其中R1、R2和R3各自的定義如上所述。
上述的兩種互變異構體都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，然而，在本發(fā)明的說明書和權利要求中，為方便起見，目標化合物[I]只由式(A)的吡唑基表示。
本發(fā)明的頭孢類化合物[I]可通過以下所述方法制備。
方法1
方法2
方法3
方法4 其中R1、R2、R3、R4和R5各自的定義如上所述，R11為被保護的羧基，Y為離去基團，X 為陰離子，R6a為 或
其中Z1、Z2、k、q、r、s、t、m和p各自的定義如上所述，和R7a、R8a、R9a和R10a獨立地為被保護的氨基、被保護的胍基或被保護的脒基，R6b為 或 其中Z1、Z2、k、q、r、s、t、m和p各自的定義如上所述，和R7b、R8b、R9b和R10b獨立地為氨基、胍基或脒基，R1a為被保護的羥基(低級)烷基，和R1b為羥基(低級)烷基。
原料化合物[II]和[VI]可以通過以下方法制備。
方法A
方法B 其中R1、R2、R3、R4、R5、R11、Y和X 各自的定義如上所述，R12為被保護的氨基，R13為被保護的羧基，和R14為氨基保護基。
原料化合物[VII]和[XI]或其鹽可以通過后文描述的制備例2-65中所公開的方法或其類似的方法制備。
在本說明書的上下文說明中，各種定義的適當?shù)睦釉敿氄f明如下。
除非另外說明，術語“低級”是指具有1到6個，優(yōu)選1到4個碳原子的基團。
適當?shù)摹宓图壨榛?，和″羥基(低級)烷基″、″被保護的羥基(低級)烷基″和″芳基(低級)烷基″中的″低級烷基″部分包括具有1到6個碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、叔戊基和己基，其中更優(yōu)選的是C1-C4烷基。
適當?shù)摹辶u基(低級)烷基″包括羥基(C1-C6)烷基，如羥基甲基、1-羥基乙基、2-羥基乙基、1-羥基丙基、2-羥基丙基、3-羥基丙基、4-羥基丁基、5-羥基戊基和6-羥基己基，其中優(yōu)選的是羥基(C1-C4)烷基。
適當?shù)挠蒖1和R2形成的″低級亞烷基″包括具有1到6個，優(yōu)選2到4個碳原子的直鏈亞烷基，例如亞甲基、1，2-亞乙基、1，3-亞丙基和1，4-亞丁基，其中優(yōu)選的是具有2或3個碳原子的直鏈亞烷基。
適當?shù)挠糜贏的″低級亞烷基″包括具有1到6個碳原子的直鏈或支鏈亞烷基，例如亞甲基、1，2-亞乙基、1，3-亞丙基、1，4-亞丁基、1，5-亞戊基、1，6-亞己基和1，2-亞丙基，其中優(yōu)選的是具有1到3個碳原子的直鏈亞烷基，最優(yōu)選的是亞甲基。
″芳基(低級)烷基″中的適當?shù)摹宸蓟宀糠职–6-C12芳基如苯基和萘基，其中優(yōu)選的是苯基。
適當?shù)摹宸蓟?低級)烷基″包括單-、二-或三苯基(低級)烷基如芐基、苯乙基、二苯甲基和三苯甲基。
適當?shù)摹宓图壨轷；?，和″低級烷?；被逯械摹宓图壨轷；宀糠职ň哂?到6個碳原子的直鏈或支鏈烷酰基，例如甲?；⒁阴；?、丙?；?、丁?；惗□；?、戊?；?、異戊?；⑿挛祯；图乎；?，其中優(yōu)選的是C1-C4烷?；?。
“低級烷氧基羰基″和″低級烷氧基羰基氨基″中的適當?shù)摹宓图壨檠趸辈糠职ň哂?到6個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、叔戊氧基和己氧基，其中優(yōu)選的是C1-C4烷氧基。
″被保護的氨基″中的適當?shù)摹灏被Ｗo基″包括如以下所述的酰基、被取代的或未被取代的芳基(低級)烷叉基[如，芐叉基、羥基芐叉基等等]、芳基(低級)烷基如單-、二-或三苯基(低級)烷基[如，芐基、苯乙基、二苯甲基、三苯甲基等等]，等等。
適當?shù)摹艴；灏ǖ图壨轷；鵞如，甲?；?、乙?；⒈；?、己酰基、新戊酰基等等]、單(或二或三)鹵代(低級)烷?；鵞如，氯代乙?；?、三氟乙?；鹊萞、低級烷氧基羰基[如，甲氧基羰基、乙氧基羰基、叔丁氧基羰基、叔戊氧基羰基、己氧基羰基等等]、氨基甲?；?、芳?；鵞如，苯甲?；⒓妆锦；?、萘甲?；鹊萞、芳基(低級)烷?；鵞如，苯基乙?；?、苯基丙?；鹊萞、芳氧基羰基[如，苯氧基羰基、萘氧基羰基等等]、芳氧基(低級)烷?；鵞如，苯氧基乙?；?、苯氧基丙酰基等等]、芳基乙醛?；鵞如，苯基乙醛酰基、萘基乙醛酰基等等]、芳基(低級)烷氧基羰基(其非必要地被適當?shù)娜〈〈?[如，芐氧基羰基、苯乙氧基羰基、對硝基芐氧基羰基等等]等等。
優(yōu)選的″氨基保護基″的例子包括芳基(低級)烷基和?；?，其中更優(yōu)選的是芳基(低級)烷基、低級烷?；偷图壨檠趸驶貏e優(yōu)選的是單-、二-或三苯基(C1-C6)烷基、C1-C6烷?；?C1-C6)烷氧基羰基。
優(yōu)選的″被保護的氨基″的例子包括芳基(低級)烷基氨基和酰基氨基，其中更優(yōu)選的是芳基(低級)烷基氨基、低級烷?；被偷图壨檠趸驶被?，特別優(yōu)選的是單-、二-或三苯基(C1-C6)烷基氨基、C1-C6烷?；被?C1-C6)烷氧基羰基氨基。
作為″被保護的胍基″和″被保護的脒基″中的適當?shù)摹灞Ｗo基″，可提及前述對″被保護的氨基″中的″氨基保護基″舉例說明的那些。
優(yōu)選的″被保護的胍基″的例子包括?；一?單?；一投；一?如2，3-雙[(低級)烷氧基羰基]胍基[如，2，3-雙(叔丁氧基羰基)胍基]，其中更優(yōu)選的是2，3-雙[(C1-C6)烷氧基羰基]胍基。
優(yōu)選的″被保護的脒基″的例子包括?；呋?單酰基脒基和二?；呋?如N1，N2-雙[(低級)烷氧基羰基]脒基[如，N1，N2-雙(叔丁氧基羰基)脒基]，其中優(yōu)選的是N1，N2-雙[(C1-C6)烷氧基羰基]脒基。
″被保護的羥基(低級)烷基″中的適當?shù)摹灞槐Ｗo的羥基″包括酰氧基基團、芳基(低級)烷氧基基團等等?！艴Ｑ趸逯械倪m當?shù)摹艴；宀糠职ǖ图壨轷；鵞如，甲?；?、乙?；?、丙?；?、己?；⑿挛祯；鹊萞、單(或二或三)鹵代(低級)烷?；鵞如，氯代乙?；?、三氟乙?；鹊萞、低級烷氧基羰基[如，甲氧基羰基、乙氧基羰基、叔丁氧基羰基、叔戊氧基羰基、己氧基羰基等等]、氨基甲?；鹊取！宸蓟?低級)烷氧基″中的適當?shù)摹宸蓟?低級)烷基″部分包括單-、二-或三苯基(低級)烷基[如，芐基、苯乙基、二苯甲基、三苯甲基等等]等等。
適當?shù)摹灞槐Ｗo的羧基″包括被酯化的羧基等等，被酯化的羧基的具體例子包括可具有適當取代基的低級烷氧基羰基[如，甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基、異丙氧基羰基、丁氧基羰基、異丁氧基羰基、叔丁氧基羰基、戊氧基羰基、己氧基羰基、1-環(huán)丙基乙氧基羰基等等]，如低級烷酰氧基(低級)烷氧基羰基[如，乙酰氧基甲氧基羰基、丙酰氧基甲氧基羰基、丁酰氧基甲氧基羰基、戊酰氧基甲氧基羰基、新戊酰氧基甲氧基羰基、1-乙酰氧基乙氧基羰基、1-丙酰氧基乙氧基羰基、2-丙酰氧基乙氧基羰基、己酰氧基甲氧基羰基等等]、低級烷磺?；?低級)烷氧基羰基[如，2-甲磺?；已趸驶鹊萞或單(或二或三)鹵代(低級)烷氧基羰基[如，2-碘代乙氧基羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基等等]；低級烯基氧羰基[如，乙烯基氧羰基、烯丙基氧羰基等等]；低級炔基氧羰基[如，乙炔基氧羰基、丙炔基氧羰基等等]；可具有適當取代基的芳基(低級)烷氧基羰基[如，芐氧基羰基、4-甲氧基芐氧基羰基、4-硝基芐氧基羰基、苯乙氧基羰基、三苯甲氧基羰基、二苯甲氧基羰基、雙(甲氧基苯基)甲氧基羰基、3，4-二甲氧基芐氧基羰基、4-羥基-3，5-二-叔丁基芐氧基羰基等等]；可具有適當取代基的芳氧基羰基[如，苯氧基羰基、4-氯代苯氧基羰基、甲苯氧基羰基、4-叔丁基苯氧基羰基、二甲苯氧基羰基、氧基羰基、異丙苯氧基羰基等等]；等等。
優(yōu)選的″被保護的羧基″的例子包括可具有適當取代基的低級烷氧基羰基和芳基(低級)烷氧基羰基，其中優(yōu)選的是(C1-C6)烷氧基羰基。
適當?shù)摹咫x去基團″包括鹵素[如，氯、溴、碘等等]或酰氧基如芳基磺酰氧基[如，苯磺酰氧基、甲苯磺酰氧基等等]、低級烷基磺酰氧基[如，甲磺酰氧基等等]、低級烷酰氧基[如，乙酰氧基、丙酰氧基等等]等等。
適當?shù)摹尻庪x子″包括甲酸根、乙酸根、三氟乙酸根、馬來酸根、酒石酸根、甲磺酸根、苯磺酸根、甲苯磺酸根、氯離子、溴離子、碘離子、硫酸根、磷酸根等等。
目標化合物[I]的適當?shù)目伤幱名}為常規(guī)的無毒鹽，其包括例如與堿形成的鹽或酸加成鹽，如與無機堿形成的鹽例如堿金屬鹽[如，鈉鹽、鉀鹽等等]、堿土金屬鹽[如，鈣鹽、鎂鹽等等]、銨鹽；與有機堿形成的鹽例如有機胺鹽[如，三甲胺鹽、三乙胺鹽、吡啶鹽、甲基吡啶鹽、乙醇胺鹽、三乙醇胺鹽、二環(huán)己基胺鹽、N，N′-二芐基亞乙基二胺鹽等等]；無機酸加成鹽[如，鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽等等]；有機酸或磺酸加成鹽[如，甲酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、甲磺酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽等等]；和與堿性或酸性氨基酸[如精氨酸、天冬氨酸、谷氨酸等等]形成的鹽。
由通式(I)表示的本發(fā)明的頭孢類化合物的優(yōu)選實施方案如下。
(1)式[I]的化合物或其可藥用鹽，其中R1為低級烷基或羥基(低級)烷基，和R2為氫、芳基(低級)烷基或?；?，或R1和R2結合在一起形成低級亞烷基；R4為羧基或被酯化的羧基；R5為氨基、芳基(低級)烷基氨基或?；被?；和R7、R8、R9和R10獨立地為氨基、芳基(低級)烷基氨基、?；被?、胍基、?；一?、脒基或?；呋?。
(2)上述(1)的化合物或其可藥用鹽，其中R1為低級烷基或羥基(低級)烷基，和R2為氫、芳基(低級)烷基、低級烷?；虻图壨檠趸驶騌1和R2結合在一起形成低級亞烷基；R4為羧基或低級烷氧基羰基；R5為氨基、芳基(低級)烷基氨基、低級烷?；被虻图壨檠趸驶被?；和R7、R8、R9和R10獨立地為氨基、芳基(低級)烷基氨基、低級烷酰基氨基、低級烷氧基羰基氨基、胍基、2，3-雙[(低級)烷氧基羰基]胍基、脒基或N1，N2-雙[(低級)烷氧基羰基]脒基。
(3)上述(2)的化合物或其可藥用鹽，其中R1為C1-C6烷基或羥基(C1-C6)烷基，和R2為氫，單-、二-或三苯基(C1-C6)烷基，C1-C6烷?；?C1-C6)烷氧基羰基，或R1和R2結合在一起形成C1-C6亞烷基；R4為羧基或(C1-C6)烷氧基羰基；R5為氨基，單-、二-或三苯基(C1-C6)烷基氨基，C1-C6烷?；被?C1-C6)烷氧基羰基氨基；R7、R8、R9和R10獨立地為氨基、單-、二-或三苯基(C1-C6)烷基氨基、C1-C6烷酰基氨基、(C1-C6)烷氧基羰基氨基、胍基、2，3-雙[(C1-C6)烷氧基羰基]胍基、脒基或N1，N2-雙[(C1-C6)烷氧基羰基]脒基。
(4)上述(2)的化合物或其可藥用鹽，其中R1為低級烷基；R2為氫；R4為羧基；R5為氨基；和R7、R8、R9和R10為氨基。
(5)上述(4)的化合物或其可藥用鹽，其中R1為C1-C6烷基；R2為氫；R4為羧基；R5為氨基；和R7、R8、R9和R10為氨基。
(6)式[I]的化合物或其可藥用鹽，其中A為-NHCO-(CH2CO)n-，其中n為0或1，和R6為 或 其中m和p獨立地為1到3的整數(shù)，和R7、R8、R9和R10獨立地為氨基或被保護的氨基。
(7)上述(6)的化合物或其可藥用鹽，其中A為-NHCO-，和R7、R8、R9和R10為氨基。
(8)式[I]的化合物或其可藥用鹽，其中A為-NHCO-(CH2CO)n-其中n為0或1、-NH-CO-CO-或 和
R6為 或 其中s、t、m和p獨立地為1到6的整數(shù)，R7、R8、R9和R10為氨基或被保護的氨基。
(9)式[I]的化合物或其可藥用鹽，其中A為鍵或-NHCO-，和R6為 其中s和t獨立地為0到6的整數(shù)，R7和R8獨立地為氨基、被保護的氨基、胍基、被保護的胍基、脒基或被保護的脒基。
(10)上述(9)的化合物或其可藥用鹽，其中A為-NHCO-，和R7和R8獨立地為氨基或胍基。
(11)式的化合物或其可藥用鹽，其中A為低級亞烷基，和R6為 其中m和p獨立地為0到6的整數(shù)，R9和R10獨立地為氨基或脒基。
(12)式的化合物或其可藥用鹽，其中A為-NHCO-，和R6為
其中Z1和Z2獨立地為-NHCO-或-CONH-，k、q和r獨立地為0或1，s和t獨立地為1到6的整數(shù)，R7和R8為氨基。
A優(yōu)選為其中n為0或1的-NHCO-(CH2CO)n-、-NH-CO-CO-或 更優(yōu)選-NHCO-(CH2CO)n-。
n優(yōu)選為0。
R6優(yōu)選選自 和 更優(yōu)選地，R6為 或
特別優(yōu)選地，R6為 或 k優(yōu)選為1。
q和r優(yōu)選為0。
s和t優(yōu)選為1到6的整數(shù)，更優(yōu)選為1到4的整數(shù)。
或者，當s和t之一為0時，另一個優(yōu)選為1到6的整數(shù)，更優(yōu)選為1到4的整數(shù)。
當q為1時，s優(yōu)選為1到6的整數(shù)，更優(yōu)選為1到4的整數(shù)。
當r為1時，t優(yōu)選為1到6的整數(shù)，更優(yōu)選為1到4的整數(shù)。
m和p優(yōu)選為1到6的整數(shù)，更優(yōu)選為1到4的整數(shù)，特別優(yōu)選為1到3的整數(shù)。
R7和R8優(yōu)選獨立地為氨基或胍基，更優(yōu)選為氨基。
R9和R10優(yōu)選獨立地為氨基或脒基，更優(yōu)選為氨基。
R4優(yōu)選為羧基。
R5優(yōu)選為氨基。
式[I]所示化合物的優(yōu)選實施方案選自下組中7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-({[雙(2-氨基乙基)氨基]羰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑基}甲基-3-頭孢(cephem)-4-羧酸鹽，7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-({[N-(2-氨基乙基)-N-(3-氨基丙基)氨基]羰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸鹽，7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基-4-{3-[2-氨基-1-(氨基甲基)乙基]脲基}-2-甲基-1-吡唑基)甲基-3-頭孢-4-羧酸鹽，7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[(3-{[2-氨基-1-(氨基甲基)乙基]氨基}-3-氧代丙?；?氨基]-2-甲基-1-吡唑基}甲基-3-頭孢-4-羧酸鹽，7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-{[4-氨基-2-(2-氨基乙基)丁?；鵠氨基}-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸鹽，和7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-{[3-氨基-2-(氨基甲基)丙?；鵠氨基}-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸鹽，或其可藥用鹽。
以下詳細說明本發(fā)明的目標化合物的制備方法。
方法1化合物[I]或其鹽可以通過使化合物[II]或其在氨基處的活性衍生物、或其鹽與化合物[III]或其在羧基處的活性衍生物、或其鹽反應制備。
適當?shù)幕衔颷II]的在氨基處的活性衍生物包括由化合物[II]與羰基化合物如醛、酮等等反應形成的席夫堿型亞氨基或其互變的烯胺型異構體；由化合物[II]與甲硅烷基化合物如雙(三甲基甲硅烷基)乙酰胺、單(三甲基甲硅烷基)乙酰胺[如，N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺]、雙(三甲基甲硅烷基)脲]等等反應形成的甲硅烷基衍生物；由化合物[II]與三氯化磷或光氣反應形成的衍生物。
適當?shù)幕衔颷II]及其活性衍生物的鹽可參見用于化合物[I]的那些示例性例子。
適當?shù)幕衔颷III]的在羧基處的活性衍生物包括酰基鹵、酸酐、活化的酰胺和活化的酯?；钚匝苌锏倪m當?shù)睦涌蔀轷；?；?；B氮；與酸如取代的磷酸[如，二烷基磷酸、苯基磷酸、二苯基磷酸、二芐基磷酸、鹵化磷酸等等]、二烷基亞磷酸、亞硫酸、硫代硫酸、硫酸、烷基磺酸[如，甲烷磺酸等等]、脂肪族羧酸[如，乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、新戊酸、戊酸、異戊酸、2-乙基丁酸、三氯乙酸等等]和芳香族羧酸[如，苯甲酸等等]的混合酸酐；對稱的酸酐；用咪唑、4-取代的咪唑、二甲基吡唑、三唑或四唑活化的酰胺；活化的酯[如，氰基甲基酯、甲氧基甲基酯、二甲基亞氨基甲基[(CH3)2N+＝CH-]酯、乙烯基酯、炔丙基酯、對硝基苯基酯、2，4-二硝基苯基酯、三氯苯基酯、五氯苯基酯、甲磺酰基苯基酯、苯基偶氮苯基酯、苯基硫酯、對硝基苯基硫酯、對甲苯基硫酯、羧基甲基硫酯、吡喃基酯、吡啶基酯、哌啶基酯、8-喹啉基硫酯等等]；或與N-羥基化合物[如，N，N-二甲基羥胺、1-羥基-2-(1H)-吡啶酮、N-羥基琥珀酰亞胺、N-羥基鄰苯二甲酰亞胺、N-羥基-1H-苯并三唑等等]的酯?？筛鶕?jù)要使用的化合物[III]的類型任選地從這些活性衍生物中進行選擇。
適當?shù)幕衔颷III]及其活性衍生物的鹽可參見用于化合物[I]的那些示例性例子。
反應通常在常規(guī)的溶劑如水、醇[如，甲醇、乙醇等等]、丙酮、二氧雜環(huán)己烷、乙腈、氯仿、二氯甲烷、二氯乙烷、四氫呋喃、乙酸乙酯、N，N-二甲基甲酰胺、吡啶或任何其他不會影響反應的有機溶劑中進行。這些常規(guī)溶劑也可與水混合使用。
在該反應中，當化合物[III]以游離酸形式或其鹽的形式使用時，優(yōu)選反應在常規(guī)的縮合劑的存在下進行，所述常規(guī)的縮合劑為例如N，N′-二環(huán)己基碳二亞胺；N-環(huán)己基-N′-嗎啉基乙基碳二亞胺；N-環(huán)己基-N′-(4-二乙基氨基環(huán)己基)碳二亞胺；N，N′-二乙基碳二亞胺；N，N′-二異丙基碳二亞胺；N-乙基-N′-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺；N，N′-羰基-雙-(2-甲基咪唑)；五亞甲基乙烯酮-N-環(huán)己基亞胺；二苯基乙烯酮-N-環(huán)己基亞胺；乙氧基乙炔；1-烷氧基-1-氯乙烯；亞磷酸三烷基酯；多磷酸乙酯；多磷酸異丙酯；三氯氧化磷(磷酰氯)；三氯化磷；亞硫酰氯；草酰氯；鹵代甲酸低級烷基酯[如，氯甲酸乙酯、氯甲酸異丙酯等等]、三苯膦；2-乙基-7-羥基苯并異唑鹽；2-乙基-5-(間磺基苯基)異唑氫氧化物分子內(nèi)鹽；1-(對氯苯磺酰氧基)-6-氯-1H-苯并三唑；通過N，N-二甲基甲酰胺與亞硫酰氯、光氣、氯甲酸三氯甲基酯、三氯氧化磷等等反應制備的所謂的Vilsmeier試劑；等等。
反應也可在無機堿或有機堿如堿金屬碳酸氫鹽、三(低級)烷基胺、吡啶、N-(低級)烷基嗎啉、N，N-二(低級)烷基芐基胺等等的存在下進行。
反應溫度不是至關重要的，反應通常在冷卻到升溫條件下進行。
方法2化合物[Ib]或其鹽可通過使化合物[Ia]或其鹽經(jīng)過氨基保護基的消除反應制備。
消除反應根據(jù)常規(guī)方法例如水解等等進行。
優(yōu)選水解在堿或酸(包括路易斯酸)的存在下進行。
適合的堿包括無機堿和有機堿如堿金屬[如，鈉、鉀等等]、堿土金屬[如，鎂、鈣等等]的氫氧化物或碳酸鹽或碳酸氫鹽；三烷基胺[如，三甲胺、三乙胺等等]、甲基吡啶、1，5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯、1，4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷、1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯等等。
適當?shù)乃岚ㄓ袡C酸[如，甲酸、乙酸、丙酸、三氯乙酸、三氟乙酸等等]和無機酸[如，氫氯酸、氫溴酸、硫酸、氯化氫、溴化氫等等]。
使用路易斯酸如三鹵代乙酸[如，三氯乙酸、三氟乙酸等等]等的消除反應優(yōu)選在陽離子捕集劑[如，苯甲醚、苯酚等]的存在下進行。
反應通常在溶劑如水、醇[如，甲醇、乙醇等]、二氯甲烷、四氫呋喃、其混合物或任何其它不會不利地影響反應的溶劑中進行。也可以將液體堿或酸用作溶劑。
反應溫度不是至關重要的，反應通常在冷卻到升溫條件下進行。
方法3-(i)化合物[VIII]或其鹽可通過使化合物[VI]或其鹽與化合物[VII]或其鹽反應制備。
適當?shù)幕衔颷VI]、[VII]和[VIII]的鹽可參見用于化合物[I]的那些示例性例子。
該反應可在溶劑如水、磷酸鹽緩沖液、丙酮、氯仿、乙腈、硝基苯、二氯甲烷、二氯乙烷、甲酰胺、N，N-二甲基甲酰胺、甲醇、乙醇、乙醚、四氫呋喃、二甲基亞砜或任何其他不會不利地影響反應的有機溶劑中進行，優(yōu)選在強極性溶劑中進行。在所述溶劑中，親水性溶劑可與水混合使用。當化合物[VII]為液體時，也可將其用作溶劑。
優(yōu)選反應在堿例如無機堿如堿金屬氫氧化物、堿金屬碳酸鹽、堿金屬碳酸氫鹽；有機堿如三烷基胺；等等的存在下進行。
反應溫度不是至關重要的，反應通常在環(huán)境溫度、在升溫或加熱條件下進行。優(yōu)選該反應在堿金屬鹵化物[如，碘化鈉、碘化鉀等等]、堿金屬硫氰酸鹽[如，硫氰酸鈉、硫氰酸鉀等等]等等的存在下進行。
陰離子X 可為衍生自離去基團Y的陰離子，并且也可通過常規(guī)方法將其轉化為其它陰離子。
方法3-(ii)化合物[I]或其鹽可通過使化合物[VIII]或其鹽經(jīng)過羧基保護基的消除反應制備。
消除反應以與上述方法2中的反應相似的方法進行，因此，使用的試劑和反應條件(如，溶劑、反應溫度等)可參見方法2所述的那些。
方法4化合物[If]或其鹽可通過使化合物[Ie]或其鹽經(jīng)過羥基保護基的消除反應制備。
該消除反應的適當?shù)姆椒òǔＲ?guī)方法如水解、還原等。
(i)關于水解優(yōu)選水解在堿或酸(包括路易斯酸)的存在下進行。
適當?shù)膲A包括無機堿和有機堿如堿金屬[如，鈉、鉀等等]、堿土金屬[如，鎂、鈣等等]的氫氧化物或碳酸鹽或碳酸氫鹽；三烷基胺[如，三甲胺、三乙胺等等]、甲基吡啶、1，5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯、1，4-二氮雜雙環(huán)[2.2.2]辛烷、1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯等等。
適當?shù)乃岚ㄓ袡C酸[如，甲酸、乙酸、丙酸、三氯乙酸、三氟乙酸等等]和無機酸[如，氫氯酸、氫溴酸、硫酸、氯化氫、溴化氫等等]。
使用路易斯酸如三鹵代乙酸[如，三氯乙酸、三氟乙酸等等]等的消除反應優(yōu)選在陽離子捕集劑[如，苯甲醚、苯酚等]的存在下進行。
反應通常在溶劑如水、醇[如，甲醇、乙醇等]、二氯甲烷、四氫呋喃、其混合物或任何其他不會不利地影響反應的溶劑中進行。也可以將液體堿或酸用作溶劑。
反應溫度不是至關重要的，反應通常在冷卻到升溫條件下進行。
(ii)關于還原還原以常規(guī)的方法進行，包括化學還原和催化還原。
化學還原中使用的適當?shù)倪€原劑為金屬[如，錫、鋅、鐵、等]或金屬化合物[如，氯化鉻、乙酸鉻等等]和有機酸或無機酸[如，甲酸、乙酸、丙酸、三氟乙酸、對甲苯磺酸、氫氯酸、氫溴酸等等]的組合。
催化還原中使用的適當?shù)拇呋瘎槟切┏Ｒ?guī)的催化劑，如鉑催化劑[如，鉑片、海綿鉑、鉑黑、膠態(tài)鉑、氧化鉑、鉑絲等等]、鈀催化劑[如，海綿鈀、鈀黑、氧化鈀、碳載鈀、膠態(tài)鈀、硫酸鋇載鈀、碳酸鋇載鈀等等]、鎳催化劑[如，還原鎳、氧化鎳、阮內(nèi)鎳等等]、鈷催化劑[如，還原鈷、阮內(nèi)鈷等等]、鐵催化劑[如，還原鐵、阮內(nèi)鐵等等]、銅催化劑[如，還原銅、阮內(nèi)銅、烏爾曼(Ullman)銅等等]等等。
還原通常在不會不利地影響反應的常規(guī)溶劑中進行，所述溶劑如水、甲醇、乙醇、丙醇、N，N-二甲基甲酰胺或其混合物。
另外，在上述用于化學還原中的酸為液體時，也可將它們用作溶劑。
另外，用于催化還原的適當?shù)娜軇┛蔀樯鲜鋈軇?，以及其它常?guī)的溶劑如乙醚、二氧雜環(huán)己烷、四氫呋喃等，或其混合物。
還原反應的反應溫度不是至關重要的，反應通常在冷卻到升溫條件下進行。
當R5為被保護的氨基時，R5中的氨基保護基可通過常規(guī)方法如水解消除。
以下詳細說明制備原料化合物的方法A和B。
方法A-(i)化合物[XII]或其鹽可通過使化合物[X]或其鹽與化合物[XI]或其鹽反應制備。
該反應可以按類似上述方法3-(i)的反應的方法進行，因此，使用的試劑和反應條件(如，溶劑、反應溫度等等)可參見方法3-(i)中所述。
方法A-(ii)化合物[II]或其鹽可通過使化合物[XII]或其鹽經(jīng)過R12和R14中的氨基保護基和R13中的羧基保護基的消除反應制備。
該反應可以按類似上述方法2的反應的方法進行，因此，使用的試劑和反應條件(如，溶劑、反應溫度等等)可參考方法2中所述。
方法B化合物[VI]或其鹽可以通過使化合物[XIII]或其在氨基處的活性衍生物、或其鹽與化合物[XIV]或其在羧基處的活性衍生物、或其鹽反應制備。
該反應可以按類似上述方法1的反應的方法進行，因此，使用的試劑和反應條件(如，溶劑、反應溫度等等)可參考方法1中所述。
通過上述方法得到的化合物可以通過常規(guī)方法分離并純化，所述方法如粉碎、重結晶、柱色譜法、再沉淀等等。
需要指出的是，化合物[I]和其它化合物可能由于不對稱碳原子和雙鍵而包括一個或多個立體異構體如旋光異構體和幾何異構體，所有的這種異構體及其混合物都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
目標化合物[I]及其可藥用鹽包括溶劑化物[如，包封化合物(如，水合物等等)]。
目標化合物[I]及其可藥用鹽是新的，并且表現(xiàn)出高的抗微生物活性，抑制多種致病微生物(包括革蘭氏陽性和革蘭氏陰性微生物)的生長，并且可用作抗微生物劑。
現(xiàn)在，為了表明目標化合物[I]的實用性，以下給出本發(fā)明的代表性化合物的MIC(最小抑制濃度)的試驗數(shù)據(jù)。
試驗方法通過如下所述的兩倍瓊脂平板稀釋法測定體外抗菌活性。
將一菌環(huán)量的各個試驗菌株在胰酪胨大豆培養(yǎng)液中的過夜培養(yǎng)物(每毫升106個活細胞)在包含遞級濃度的代表性試驗化合物的腦心浸液瓊脂(HI-瓊脂)上畫線培養(yǎng)，在37℃培養(yǎng)20小時后的最小抑制濃度(MIC)以μg/ml表示。
試驗化合物化合物(a)7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-({[雙(2-氨基乙基)氨基]羰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑基}甲基-3-頭孢-4-羧酸鹽(實施例1)化合物(b)7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-({[雙(2-氨基乙基)氨基]羰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑基}甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽(實施例2)化合物(c)7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-({[N-(2-氨基乙基)-N-(3-氨基丙基)氨基]羰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸鹽(實施例3)化合物(d)7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基-4-{3-[2-氨基-1-(氨基甲基)乙基]脲基}-2-甲基-1-吡唑基)甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽(實施例4)化合物(e)7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[(3-{[2-氨基-1-(氨基甲基)乙基]氨基}-3-氧代丙?；?氨基]-2-甲基-1-吡唑基}甲基-3-頭孢-4-羧酸鹽(實施例5)頭孢他啶試驗結果表1

對于治療給藥，本發(fā)明的目標化合物[I]及其可藥用鹽可以作為包含所述化合物作為活性成分，與適于口服給藥、腸胃外給藥或外用給藥的可藥用載體如有機或無機的固體或液體賦形劑混合的常規(guī)藥物制劑的形式使用。藥物制劑可為固體劑型如片劑、顆粒、粉末、膠囊，或為液體劑型如溶液、懸浮液、糖漿劑、乳劑、檸檬水等等。
如果需要，在上述制劑中可包括輔助性物質、穩(wěn)定劑、潤濕劑和其它通常使用的添加劑如乳糖、檸檬酸、酒石酸、硬脂酸、硬脂酸鎂、石膏粉、蔗糖、玉米淀粉、滑石、明膠、瓊脂、果膠、花生油、橄欖油、可可脂、乙二醇等等。
化合物[I]的劑量可隨患者的年齡、狀況、疾病類型、應用的化合物[I]種類等等的不同而變化并根據(jù)這些因素確定。通常，可對患者給藥每天1mg到4,000mg或甚至更多的量。約50mg、100mg、250mg、500mg、1000mg或2000mg的本發(fā)明的目標化合物[I]的平均單一劑量可用于治療由致病微生物感染的疾病。
給出以下制備劑和實施例用于更具體地說明本發(fā)明。
制備例1在冰冷卻下向(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酸(319g)的N，N-二甲基乙酰胺(1.5L)溶液中加入碳酸鉀(113g)和甲烷磺酰氯(126ml)。將混合物在10℃下攪拌2小時。將反應混合物加入到乙酸乙酯和水的混合物中。將有機層用水和鹽水洗，得到活化的酸溶液。另一方面，在冰冷卻下用三乙胺將7β-氨基-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯鹽酸鹽(300g)在水(1L)和乙酸乙酯(1L)的混合物中的懸浮液調(diào)節(jié)到pH6。在攪拌下在10℃向得到的混合物中滴加上述得到的活化的酸溶液。繼續(xù)在5-10℃攪拌1.5小時，用三乙胺保持反應混合物的pH為6。分離有機層，用水和鹽水洗，并真空蒸發(fā)。將濃縮物傾倒在二異丙基醚(15L)中，通過過濾收集沉淀物并干燥，得到7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯(495.7g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(9H，s)，1.44(6H，s)，3.45-3.70(2H，m)，3.76(3H，s)，4.46和4.54(1H，ABq，J＝16Hz)，5.10-5.28(2H+1H，m)，5.90(1H，dd，J＝4.9Hz，8.5Hz)，6.94(2H，d，J＝8.7Hz)，7.36(2H，d，J＝8.7Hz)，8.18(2H，brs)，9.52(1H，d，J＝8.5Hz)制備例2在低于10℃的溫度下向5-氨基-1-甲基吡唑(100g)的水(700ml)溶液中加入濃鹽酸(86ml)和水(200ml)中的亞硝酸鈉(63.9g)。將反應混合物在5℃下攪拌30分鐘。通過過濾收集沉淀的固體并干燥，得到5-氨基-1-甲基-4-亞硝基吡唑(117g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.52和3.59(3H，s)，7.22和8.51(1H，s)，8.17和8.51(1H，brs)制備例3向5-氨基-1-甲基-4-亞硝基吡唑(117g)的懸浮液中加入硫酸(91g)和10％碳載鈀(58g)。將混合物在氣球壓力下氫化10小時。將反應混合物過濾，濾液真空濃縮。向濃縮物中加入異丙醇(2.3L)并將混合物攪拌1小時。通過過濾收集沉淀的固體并干燥，得到4，5-二氨基-1-甲基吡唑硫酸鹽(158g)。
1H-NMR(D2O)δ3.74(3H，s)，7.80(1H，s)制備例4用4N氫氧化鈉水溶液將4，5-二氨基-1-甲基吡唑硫酸鹽(158g)的水(1.1L)溶液中和到pH6.9，并向該溶液中加入二氧雜環(huán)己烷(474ml)。向得到的混合物中滴加氯甲酸苯酯(124g)，在低于10℃的溫度下用4N氫氧化鈉水溶液維持混合物的pH在6.9。將反應混合物攪拌1小時。通過過濾收集沉淀的固體并干燥，得到5-氨基-1-甲基-4-苯氧基羰基氨基吡唑(155g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ3.52(3H，s)，5.00(2H，brs)，7.10-7.50(6H，m)，8.93(1H，brs)制備例5在室溫下向5-氨基-1-甲基-4-苯氧基羰基氨基吡唑(153.8g)在四氫呋喃(1L)中的懸浮液中加入三乙胺(67g)和三苯基氯甲烷(185g)。將混合物攪拌6.5小時。向反應混合物中加入庚烷(2.6L)并將混合物攪拌1小時。通過過濾收集沉淀的固體并用庚烷-二異丙基醚(1∶1)洗。將粗品固體懸浮在水(3L)中并將懸浮液攪拌1小時。通過過濾收集固體并干燥，得到1-甲基-4-苯氧基羰基氨基-5-三苯基甲基氨基吡唑(253.6g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ2.74(3H，s)，5.57(1H，brs)，7.00-7.50(21H，m)，8.12(1H，brs)制備例6向2-氨基乙基氨基甲酸叔丁基酯(4.81g)的脫水氯仿(10ml)溶液中加入碳酸鈉(1.06g)和N-(2-溴乙基)三苯甲基胺(3.66g)并將混合物在回流下攪拌3小時。向反應混合物中加入乙醚和己烷并將溶液用水洗?；旌衔镉?％檸檬酸水溶液提取并將水層用乙醚洗。然后用碳酸氫鈉堿化水層，隨后用乙醚提取。有機層用鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮，得到2-{[2-(三苯甲基氨基)乙基]氨基}乙基氨基甲酸叔丁酯(1.86g)，為粘稠的油狀物。
1H-NMR(CDCl3)δ1.43(9H，s)，1.77(2H，br)，2.27(2H，t，J＝6.0Hz)，2.64(2H，t，J＝6.0Hz)，2.70(2H，t，J＝6.0Hz)，3.13-3.23(2H，m)，4.93(1H，br)，7.13-7.32(9H，m)，7.43-7.51(6H，m)制備例7向[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯(712mg)和2-{[2-(三苯甲基氨基)乙基]氨基}乙基氨基甲酸叔丁酯(668mg)在脫水氯仿(4ml)中的懸浮液中加入N-乙基二異丙基胺(0.257ml)，并將混合物在回流下攪拌16小時。向反應混合物中加入乙酸乙酯并將溶液連續(xù)地用水、5％檸檬酸水溶液、1M氫氧化鈉水溶液和鹽水洗。將有機層用無水硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法純化，用5％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到(2-{N-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基}羰基)-N-[2-(三苯甲基氨基)乙基]氨基}乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.15g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.29(9H，s)，2.07(1H，br)，2.37-2.47(2H，m)，2.80(3H，s)，2.89-2.92(2H，m)，3.10-3.20(2H，m)，3.21-3.32(2H，m)，5.09(1H，brs)，5.39(1H，br)，6.97(1H，s)，7.15-7.35(30H，m)，7.81(1H，br)制備例8向[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯(949mg)和[亞氨基雙(2，1-乙二基)]雙氨基甲酸二叔丁酯(693mg)在脫水氯仿(4.5ml)中的懸浮液中加入N-乙基二異丙基胺(0.342ml)并將混合物在回流下攪拌18.5小時。向反應混合物中加入乙酸乙酯并將溶液連續(xù)地用5％檸檬酸水溶液、1M氫氧化鈉水溶液和鹽水洗。將有機層用無水硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物與二異丙基醚、乙醚和己烷的混合溶劑研磨，得到[[({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基}羰基)亞氨基]雙(2，1-乙二基)]雙氨基甲酸二叔丁酯(1.17g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.39(18H，s)，2.85(3H，s)，3.05-3.17(4H，m)，3.03-3.24(4H，m)，5.04(2H，br)，5.09(1H，brs)，7.13-7.26(15H，m)，7.17(1H，s)制備例9向2-氨基乙基氨基甲酸叔丁酯(481mg)的脫水氯仿(3ml)溶液中加入碳酸鈉(212mg)和(3-溴丙基)三苯甲基胺(694mg)，并將混合物在回流下攪拌3.5小時。向反應混合物中加入乙醚和己烷并將溶液用水洗?；旌衔镉?％檸檬酸水溶液提取，水層用乙醚洗。然后用碳酸氫鈉堿化水溶液，隨后用乙醚提取。有機層用鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮，得到2-{[3-(三苯甲基氨基)丙基]氨基}乙基氨基甲酸叔丁酯(410mg)，為粘稠的油狀物。
1H-NMR(CDCl3)δ1.43(9H，s)，1.60-1.80(2H，br)，1.65(2H，五重峰，J＝6.9Hz)，2.19(2H，t，J＝6.9Hz)，2.67(2H，t，J＝6.9Hz)，2.69(2H，t，J＝6.0Hz)，3.11-3.22(2H，m)，4.95(1H，br)，7.10-7.30(9H，m)，7.40-7.50(6H，m)制備例10向[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯(423mg)和2-{[3-(三苯甲基氨基)丙基]氨基}乙基氨基甲酸叔丁酯(410mg)在脫水氯仿(2.5ml)中的懸浮液中加入N-乙基二異丙基胺(0.152ml)并將混合物在回流下攪拌16小時。向反應混合物中加入乙酸乙酯并將溶液連續(xù)地用水、5％檸檬酸水溶液、1M氫氧化鈉水溶液和鹽水洗。將有機層用無水硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮，殘余物通過硅膠柱色譜法純化，用5％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到(2-{N-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基}羰基)-N-[3-(三苯甲基氨基)丙基]氨基}乙基)氨基甲酸叔丁酯(657mg)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.22(9H，s)，1.55-1.65(3H，m)，2.08-2.18(2H，m)，2.85(3H，s)，3.05-3.18(4H，m)，3.12-3.23(2H，m)，5.01(1H，br)，5.07(1H，brs)，6.24(1H，br)，7.04(1H，s)，7.15-7.30(24H，m)，7.37-7.45(6H，m)實施例1向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯(838mg)的N，N-二甲基甲酰胺(2.0ml)溶液中加入1，3-雙(三甲基甲硅烷基)脲(1.26g)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向溶液中加入碘化鉀(286mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向反應混合物中加入(2-{N-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基}羰基)-N-[2-(三苯甲基氨基)乙基]氨基}乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.17g)的N，N-二甲基甲酰胺(3ml)溶液并將整個混合物在45-50℃攪拌2.5小時。向得到的反應混合物中加入乙酸乙酯(60ml)并將溶液連續(xù)地用水(50ml)、10％三氟乙酸鈉水溶液(50ml×2)和鹽水(50ml)洗，無水硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮到約8ml。將濃縮物傾倒在二異丙基醚(100ml)中，通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥。向固體在二氯甲烷(4.7ml)中的溶液中加入苯甲醚(1.6ml)和三氟乙酸(4.7ml)。
將得到的溶液在室溫下攪拌4小時并傾倒在二異丙基醚(100ml)中。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥，得到粗產(chǎn)物(1.26g)，其通過使用ODS柱的制備高效液相色譜(HPLC)純化。將包含所需產(chǎn)物的洗脫液真空濃縮到約30ml。用濃鹽酸將濃縮物調(diào)節(jié)到約pH3并在Diaion(注冊商標)HP-20(Mitsubishi Chemical Corporation)上色譜分離，用30％的異丙醇水溶液洗脫。洗脫液真空濃縮到約10ml并凍干，得到7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-({[雙(2-氨基乙基)氨基]羰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑基}甲基-3-頭孢-4-羧酸鹽(58mg)，為無定形固體。
1H-NMR(D2O)δ1.52(6H，s)，3.20(1H，d，J＝17.6Hz)，3.26(4H，t，J＝6.0Hz)，3.51(1H，d，J＝17.6Hz)，3.62-3.74(4H，m)，3.74(3H，s)，4.95(1H，d，J＝14.9Hz)，5.27(1H，d，J＝14.9Hz)，5.27(1H，d，J＝4.8Hz)，5.83(1H，d，J＝4.8Hz)，7.85(1H，s)實施例2向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯(889mg)的N，N-二甲基甲酰胺(2.0ml)溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(856mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向溶液中加入碘化鉀(303mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向反應混合物中加入[[({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基}羰基)亞氨基]雙(2，1-乙二基)]雙氨基甲酸二叔丁酯(1.03g)的N，N-二甲基甲酰胺(2ml)溶液并將整個混合物在45-55℃攪拌2.75小時。向得到的反應混合物中加入乙酸乙酯(20ml)并將溶液連續(xù)地用水(20ml×2)、10％三氟乙酸鈉水溶液(10ml×2)和鹽水(10ml)洗，無水硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮到約9ml。將濃縮物傾倒在二異丙基醚(45ml)中，通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥。向固體在二氯甲烷(4.7ml)中的溶液中加入苯甲醚(1.6ml)和三氟乙酸(4.7ml)。
將得到的溶液在室溫下攪拌4小時并傾倒在二異丙基醚(80ml)中。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥得到粗產(chǎn)物(1.18g)，其通過使用ODS柱的制備高效液相色譜(HPLC)純化。將包含所需產(chǎn)物的洗脫液真空濃縮到約30m。用濃鹽酸將濃縮物調(diào)節(jié)到約pH3并在Sepabeads(注冊商標)SP207(Mitsubishi Chemical Corporation)上色譜分離，用40％的異丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮到約10ml并加入1M硫酸(0.24ml)。將得到的溶液凍干得到7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-({[雙(2-氨基乙基)氨基]羰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑基}甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽(81mg)，為無定形固體。
1H-NMR(D2O)δ1.59(3H，s)，1.59(3H，s)，3.24(1H，d，J＝17.9Hz)，3.26(4H，t，J＝6.5Hz)，3.46(1H，d，J＝17.9Hz)，3.70(4H，t，J＝6.5Hz)，3.70(3H，s)，5.06(1H，d，J＝15.6Hz)，5.23(1H，d，J＝15.6Hz)，5.24(1H，d，J＝5.0Hz)，5.85(1H，d，J＝5.0Hz)，7.91(1H，s)實施例3向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯(647mg)的N，N-二甲基甲酰胺(1.5ml)溶液中加入1，3-雙(三甲基甲硅烷基)脲(971mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向溶液中加入碘化鉀(221mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向反應混合物中加入(2-{N-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基}羰基)-N-[3-(三苯甲基氨基)丙基]氨基}乙基)氨基甲酸叔丁酯(918mg)的N，N-二甲基甲酰胺(2ml)溶液并將整個混合物在45-50℃攪拌2.5小時。向得到的反應混合物中加入乙酸乙酯(50ml)并將溶液連續(xù)地用水(50ml)、10％三氟乙酸鈉水溶液(50ml×2)和鹽水(50ml)洗，無水硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮到約8ml。將濃縮物傾倒在二異丙基醚(60ml)中，通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥。向固體在二氯甲烷(3.7ml)中的溶液中加入苯甲醚(1.3ml)和三氟乙酸(3.7ml)。
將得到的溶液在室溫下攪拌4小時并傾倒在二異丙基醚(60ml)中。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥得到粗產(chǎn)物(995mg)，其通過使用ODS柱的制備高效液相色譜(HPLC)純化。將包含所需產(chǎn)物的洗脫液真空濃縮到約30ml。用濃鹽酸將濃縮物調(diào)節(jié)到約pH 3并在Diaion(注冊商標)HP-20(Mitsubishi Chemical Corporation)上色譜分離，用30％異丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮到約10ml并凍干，得到7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-(([N-(2-氨基乙基)-N-(3-氨基丙基)氨基]羰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸鹽(62mg)，為無定形固體。
1H-NMR(D2O)δ1.52(6H，s)，1.95-2.10(2H，m)，3.04(2H，t，J＝7.3Hz)，3.15-3.29(2H，m)，3.21(1H，d，J＝17.9Hz)，3.39-3.50(2H，m)，3.52(1H，d，J＝17.9Hz)，3.59-3.70(2H，m)，3.74(3H，s)，4.95(1H，d，J＝15.1Hz)，5.09(1H，d，J＝15.1Hz)，5.27(1H，d，J＝5.0Hz)，5.82(1H，d，J＝5.0Hz)，7.83(1H，s)制備例11在攪拌下向1，3-二氨基-2-丙醇(75g)在水(370ml)和四氫呋喃(500ml)中的懸浮液中滴加三乙胺(290ml)。在40分鐘內(nèi)在低于25℃的溫度下向在冰水浴上冷卻的混合物中滴加二叔丁基二碳酸酯(381g)的四氫呋喃(250ml)溶液并將混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物用1N鹽酸酸化(pH＝3)并用乙酸乙酯(1L)提取。有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗，并在無水硫酸鎂上干燥。減壓濃縮得到殘余物，其與乙酸乙酯(150ml)-己烷(700ml)研磨得到(2-羥基-1，3-丙二基)雙氨基甲酸二叔丁酯(164g)，為白色固體。
ESI質譜313.3[M+Na]+(正離子)1H-NMR(CDCl3)δ1.44(18H，s)，3.0-3.4(4H，m)，3.6-3.9(2H，m)，5.1-5.2(2H，m)制備例12向在冰水浴上冷卻的(2-羥基-1，3-丙二基)雙氨基甲酸二叔丁酯(200g)的二氯甲烷(1.2L)溶液中加入三乙胺(384ml)然后在低于15℃的溫度下滴加甲磺酰氯(64ml)的二氯甲烷(300ml)溶液。將混合物在相同溫度下攪拌1.5小時并用飽和碳酸氫鈉水溶液(200ml)淬滅。有機層用稀鹽酸酸化(pH＝3)并用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗，在無水硫酸鎂上干燥。減壓濃縮得到殘余物，其與乙酸乙酯(100ml)-己烷(500ml)研磨，得到甲磺酸2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}乙酯(202g)，為白色固體。
ESI質譜391.1[M+Na]+(正離子)1H-NMR(CDCl3)δ1.45(18H，s)，3.09(3H，s)，3.2-3.4(2H，m)，3.4-3.6(2H，m)，4.6-4.8(1H，m)，5.0-5.3(2H，m)制備例13向甲磺酸2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}乙酯(200g)的溶液中加入鄰苯二甲酰亞胺鉀鹽(101g)，并將混合物在75℃攪拌過夜。向反應混合物中加入水(6L)并將混合物用乙酸乙酯(6L)提取。有機層用水(1.5L×3)和鹽水洗，并在無水硫酸鎂上干燥。減壓濃縮得到殘余物，將其與己烷(500ml)研磨。將收集的晶體用己烷洗(100ml×3)，將母液從己烷(300ml)重結晶并與先前的晶體合并，得到[2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異氮茚-2-基)-1，3-丙二基]雙氨基甲酸二叔丁酯(168g)。
ESI質譜442.1[M+Na]+(正離子)
1H-NMR(CDCl3)δ1.32(18H，s)，3.4-3.6(2H，m)，3.6-3.9(2H，m)，4.4-4.6(1H，m)，4.8-5.2(2H，m)，7.6-7.9(4H，m)制備例14將[2-(1，3-二氧代-1，3-二氫-2H-異氮茚-2-基)-1，3-丙二基]雙氨基甲酸二叔丁酯(144g)懸浮在乙醇(1.5L)中，并向在冰水浴上冷卻的懸浮液中滴加一水合肼(19.8ml)?；旌衔锘亓?小時，并在冰水浴上冷卻到5℃。濾除沉淀物無并將濾液減壓濃縮，并從己烷(500ml)-乙酸乙酯(100ml)重結晶，得到(2-氨基-1，3-丙二基)雙氨基甲酸二叔丁酯(44.1g)，為晶體。由薄層色譜法證明純度令人滿意的母液(31.3g)，也用于隨后的反應。
ESI質譜290.4[M+H]+(正離子)1H-NMR(DMSO-d6)δ1.44(18H，s)，2.8-3.3(5H，m)，4.8-5.3(4H，m)制備例15除了使用N，N-二甲基甲酰胺代替氯仿之外，以與制備例7同樣的方式從[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯和(2-氨基-1，3-丙二基)雙氨基甲酸二叔丁酯得到{2-[({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基}羰基)氨基]-1，3-丙二基}雙氨基甲酸二叔丁酯。
ESI質譜692.3[M+Na]+(正離子)1H-NMR(DMSO-d6)δ1.37(18H，s)，2.69(3H，s)，2.8-3.1(4H，m)，3.5-3.7(1H，m)，5.72(1H，s)，5.83(1H，d，J＝7.5Hz)，6.6-6.8(2H，m)實施例47β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基-4-{3-[2-氨基-1-(氨基甲基)乙基]脲基}-2-甲基-1-吡唑基)甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽除了在Diaion(注冊商標)HP20上進行色譜純化并真空濃縮之后，在凍干之前加入當量的硫酸之外，以與實施例1同樣的方式從7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯和{2-[({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基}羰基)氨基]-1，3-丙二基}雙氨基甲酸二叔丁酯得到標題化合物。
ESI質譜696.1[M(游離)+H]+(正離子)1H-NMR(D2O)δ1.62(6H，s)，3.0-3.6(6H，m)，3.71(3H，s)，4.2-4.5(1H，m)，5.04和5.24(2H，ABq，J＝15.8Hz)，5.26(1H，d，J＝4.8Hz)，5.87(1H，d，J＝4.7Hz)，7.96(1H，s)制備例16向攪拌的1-甲基吡唑-4，5-二胺硫酸鹽(2.1g)和3-乙氧基-3-氧代丙酸(1.32g)的二氯甲烷(10ml)和四氫呋喃(10ml)溶液中加入N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(3.83g)和N-乙基二異丙基胺(6.96ml)并將混合物攪拌過夜。減壓除去溶劑，并將含有3-[(5-氨基-1-甲基吡唑-4-基)氨基]-3-氧代丙酸乙酯的殘余物不經(jīng)純化用于隨后的反應。
制備例17將在制備例16中得到的粗產(chǎn)物3-[(5-氨基-1-甲基吡唑-4-基)氨基]-3-氧代丙酸乙酯溶解于N，N-二甲基甲酰胺(20ml)中，并在攪拌下加入三苯甲基氯(5.52g)和三乙胺(4.14ml)。將混合物攪拌過夜并用水(10ml)淬滅。將整個混合物用乙酸乙酯提取，用水和鹽水洗，并用無水硫酸鎂干燥。減壓濃縮得到殘余的油狀物，將其在硅膠上色譜純化，用二氯甲烷-乙酸乙酯(2∶3)洗脫，得到3-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙酸乙酯(1.23g).
ESI質譜491.2[M+Na]+(正離子)，467.3[M-H]-(負離子)1H-NMR(DMSO-d6)δ1.18(3H，t，J＝7.1Hz)，2.75(3H，s)，3.04(2H，s)，4.07(2H，q，J＝7.1Hz)制備例18向攪拌的3-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙酸乙酯(1.3g)的四氫呋喃(30ml)溶液中加入1N氫氧化鈉水溶液(3.1ml)并將混合物在室溫下攪拌3小時。真空除去四氫呋喃并用稀檸檬酸水溶液將殘余物酸化。通過過濾收集得到的沉淀物并減壓干燥，得到3-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙酸(1.22g)。
ESI質譜463.2[M+Na]+(正離子)1H-NMR(DMSO-d6)δ2.74(3H，s)，2.95(2H，s)，5.56(1H，s)，7.0-7.4(16H，m)，8.54(1H，s)，12.0-13.0(1H，brs)制備例19將3-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙酸(600mg)、(2-氨基-1，3-丙二基)雙氨基甲酸二叔丁酯(434mg)和N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(522mg)在四氫呋喃(12ml)和二氯甲烷(6ml)中的混合物在室溫下攪拌過夜。加入水并將整個混合物用乙酸乙酯提取。有機層用水和鹽水洗，并用無水硫酸鎂干燥。減壓濃縮得到殘余物，將其與二異丙基醚-乙酸乙酯(2∶1)研磨，得到{2-[(3-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙?；?氨基]-1，3-丙二基}雙氨基甲酸二叔丁酯(699mg)，為白色固體。
ESI質譜733.9[M+Na]+(正離子)1H-NMR(DMSO-d6)δ1.37(18H，s)，2.73(3H，s)，2.83(2H，s)，2.8-3.2(4H，m)，3.6-3.9(1H，m)，5.60(1H，s)，6.6-6.8(2H，m)，7.1-7.4(16H，m)，7.80(1H，d，J＝8.2Hz)，8.69(1H，s)實施例57β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[(3-{[2-氨基-1-(氨基甲基)乙基]氨基}-3-氧代丙酰基)氨基]-2-甲基-1-吡唑基}甲基-3-頭孢-4-羧酸鹽以與實施例1同樣的方式從7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯和{2-[(3-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙?；?氨基]-1，3-丙二基}雙氨基甲酸二叔丁酯得到標題化合物。
1H-NMR(D20)δ1.54(6H，s)，3.0-3.7(8H，m)，3.78(3H，s)，4.4-4.7(1H，m)，4.9-5.2(2H，m)，5.27(1H，d，J＝4.9Hz)，5.85(1H，d，J＝4.7Hz)，8.03(1H，s)制備例20向(2S)-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}-3-[(叔丁氧基羰基)氨基]丙酸(1.695g)和1-甲基-1H-吡唑-4，5-二胺硫酸鹽(1.05g)在水(16ml)中的懸浮液中加入三乙胺(1.4ml)和N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(1.73g)。將混合物在室溫下攪拌2小時。將得到的懸浮液用乙酸乙酯和四氫呋喃的混合溶劑提取。提取液用水和鹽水洗，無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，得到{(2S)-3-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-3-氧代-1，2-丙二基}雙氨基甲酸2-芐酯1-叔丁酯(1.78g)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.36(9H，s)，3.20-3.35(2H，m)，3.50(3H，s)，4.10-4.25(1H，m)，4.92(2H，brs)，5.00和5.08(2H，ABq，J＝12.7Hz)，6.84(1H，t，J＝5.5Hz)，7.15(1H，s)，7.26(1H，d，J＝8.1Hz)，7.27-7.37(5H，m)，9.20(1H，brs)制備例21在室溫下在氫氣氣氛下將{(2S)-3-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-3-氧代-1，2-丙二基}雙氨基甲酸2-芐酯1-叔丁酯(1.58g)的四氫呋喃(28ml)溶液用10％碳載鈀(0.75g)處理2小時。在濾除催化劑之后，將濾液真空濃縮，得到粗的油狀物，將其溶解于四氫呋喃(28ml)中。在室溫下向溶液中連續(xù)地加入三乙胺(2.04ml)和({[(三氟甲基)磺?；鵠亞氨基}亞甲基)雙氨基甲酸二叔丁酯(2.86g)。將混合物在室溫下攪拌過夜。向反應混合物中加入水以淬滅反應?；旌衔镉靡宜嵋阴ヌ崛　Ｓ袡C層用水和鹽水洗。提取液用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法純化，得到{[((1S)-2-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-1-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}-2-氧代乙基)氨基]亞甲基(methylylidene)}雙氨基甲酸二叔丁酯(1.53g)，為無定形固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.36(9H，s)，1.40(9H，s)，1.48(9H，s)，3.25-3.60(3H，m)，3.51(3H，s)，4.60-4.75(1H，m)，4.96(2H，brs)，7.05(1H，t，J＝6.1Hz)，7.11(1H，s)，9.25(1H，d，J＝7.5Hz)，11.47(1H，brs)制備例22向{[((1S)-2-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-1-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}-2-氧代乙基)氨基]亞甲基}雙氨基甲酸二叔丁酯(1.72g)的二氯甲烷(17ml)溶液中加入三苯甲基氯(931mg)。向混合物中滴加三乙胺(0.53ml)。將混合物在室溫下攪拌1小時。將反應混合物溶解于乙酸乙酯中。將溶液用水和鹽水洗。提取液用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法純化，得到{(Z)-[((1S)-1-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}-2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-2-氧代乙基)氨基]亞甲基}雙氨基甲酸二叔丁酯(2.25g)。
ESI質譜783[M+H]+1H-NMR(DMSO-d6)δ1.35(9H，s)，1.42(9H，s)，1.47(9H，s)，2.75(3H，s)，2.90-3.40(3H，m)，4.35-4.50(1H，m)，5.65(1H，s)，6.92(1H，t，J＝5.8Hz)，7.14-7.31(16H，m)，8.48(1H，s)，8.56(1H，d，J＝7.6Hz)實施例6向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯(681mg)的N-甲基嗎啉(2ml)溶液中加入1，3-雙(三甲基甲硅烷基)脲(1.02g)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向溶液中加入碘化鉀(183mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向反應混合物中加入{(Z)-[((1S)-1-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}-2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-2-氧代乙基)氨基]亞甲基}雙氨基甲酸二叔丁酯(939mg)并將整個混合物在35℃攪拌過夜。向得到的反應混合物中加入乙酸乙酯(1.7L)并將混合物連續(xù)地用水、10％硫代硫酸鈉水溶液、10％三氟乙酸鈉水溶液和鹽水洗，無水硫酸鎂干燥并過濾。將濾液真空濃縮到約1L。將濃縮物傾倒在二異丙基醚中，通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥。向固體在二氯甲烷(3.6ml)中的溶液中加入苯甲醚(1.2ml)和三氟乙酸(3.6ml)。將得到的溶液在室溫下攪拌4小時并傾倒在二異丙基醚中。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥得到粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將包含所需產(chǎn)物的洗脫液真空濃縮到約30ml。通過加入濃鹽酸調(diào)節(jié)濃縮物到約pH3并在Diaion(注冊商標)HP-20上進行色譜純化，用30％異丙醇水溶液洗脫。將洗脫液真空濃縮到約30ml并加入1當量的0.1M硫酸水溶液。將混合物凍干，得到7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基-4-{[(2S)-3-氨基-2-(胍基)丙?；鵠氨基}-2-甲基-1-吡唑基)甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽(115mg)，為無定形固體。
ESI質譜729.8[M+Na]+IR(KBr)1778，1664，1527，1155，1109cm-11H-NMR(DMSO-d6)δ1.61(6H，s)，3.20和3.43(2H，ABq，J＝17.8Hz)，3.72(3H，s)，4.55-4.80(3H，m)，5.00和5.25(1H，ABq，J＝15.8Hz)，5.24(1H，d，J＝4.9Hz)，5.87(1H，d，J＝4.9Hz)，7.97(1H，s)制備例23在室溫下向(4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基)氨基甲酸苯酯(5g)在二氯甲烷(150m1)中的懸浮液中加入[亞氨基雙(2，1-乙二基)]雙氨基甲酸二叔丁酯(8.81g)和三乙胺(1.96g)，并將混合物在回流下攪拌19小時。將混合物真空濃縮，并將殘余物通過硅膠柱色譜法純化，得到[{[(4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基)羰基]亞氨基}雙(2，1-乙二基)]雙氨基甲酸二叔丁酯(7g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.37(18H，s)，1.94-1.99(2H，m)，2.94-3.32(10H，m)，3.90-3.96(2H，m)，5.38(1H，brs)，6.83-6.92(1H，m)，6.98(1H，s)，7.49(1H，s)實施例77β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-({[雙(2-氨基乙基)氨基]羰基}氨基)-4，5，6，7-四氫-1-吡唑并[1，5-a]嘧啶基]甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽以與實施例6同樣的方式從7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯和[{[(4，5，6，7-四氫吡唑并[1，5-a]嘧啶-3-基氨基)羰基]亞氨基}雙(2，1-乙二基)]雙氨基甲酸二叔丁酯得到標題化合物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.61(6H，s)，2.04-2.22(2H，m)，3.19-3.56(10H，m)，3.65-3.78(2H，m)，4.04-4.18(2H，m)，4.88-5.22(2H，m)，5.24(1H，d，J＝4.7Hz)，5.86(1H，d，J＝4.7Hz)，7.85(1H，s)制備例24向攪拌的[1-(2-羥基乙基)-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯(9g)的N，N-二甲基甲酰胺(63ml)溶液中加入[亞氨基雙(2，1-乙二基)]雙氨基甲酸二叔丁酯(5.95g)和三乙胺(2.74ml)，并將混合物在室溫下攪拌3小時。向反應混合物中加入水，將整個混合物用乙酸乙酯提取。將提取液用水和鹽水洗并用無水硫酸鎂干燥。減壓濃縮得到粗產(chǎn)物，將其與乙酸乙酯-二異丙基醚(1∶3)研磨。通過過濾收集得到的固體，得到[[({[1-(2-羥基乙基)-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)亞氨基]雙(2，1-乙二基)]雙氨基甲酸二叔丁酯(11.7g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.36(18H，s)，2.9-3.0(4H，m)，3.0-3.15(4H，m)，3.30-3.45(4H，m)，4.70-4.78(1H，m)，5.54(1H，brs)，6.70-6.85(1H，m)，7.04(1H，s)，7.00-7.35(16H，m)實施例87β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-({[雙(2-氨基乙基)氨基]羰基}氨基)-2-(2-羥基乙基)-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽以與實施例6同樣的方式從7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯和[[({[1-(2-羥基乙基)-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)亞氨基]雙(2，1-乙二基)]雙氨基甲酸二叔丁酯得到標題化合物。
1H-NMR(D2O)δ1.61(6H，s)，3.22和3.51(2H，ABq，J＝17.9Hz)，3.18-3.35(4H，m)，3.65-3.80(4H，m)，3.80-3.95(2H，m)，4.32-4.47(2H，m)，5.09和5.19(2H，ABq，J＝15.2Hz)，5.26(1H，d，J＝4.9Hz)，5.86(1H，d，J＝4.9Hz)，7.97(1H，s)制備例25將1-甲基-1H-吡唑-5-胺(2g)和(2-氧代-1，3-丙二基)雙氨基甲酸二叔丁酯(5.9g)在乙酸(20ml)中的混合物在70℃攪拌8小時。向反應混合物中加入乙酸乙酯并將混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液中和。有機層用無水硫酸鎂干燥并真空濃縮，殘余物通過硅膠柱色譜法純化(乙酸乙酯-乙酸乙酯∶乙醇＝10∶1)，得到所需的產(chǎn)物(1g)。將得到的產(chǎn)物溶解于甲醇(20ml)中并加入10％Pd/C(0.5g)，將混合物在氣球壓力下氫化5小時。反應混合物通過Celite墊過濾并將濾液真空濃縮，得到[2-(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1，3-丙二基]雙氨基甲酸二叔丁酯(1g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.36(18H，s)，2.55-2.75(1H，m)，2.85-3.10(4H，m)，3.48(3H，s)，4.82(2H，brs)，6.50-6.70(2H，m)，6.90(1H，s)制備例26在室溫下向[2-(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-1，3-丙二基]雙氨基甲酸二叔丁酯(1.27g)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(1.05g)和三苯甲基氯(1.44g)。將混合物攪拌2小時。加入水并將混合物用乙酸乙酯提取。有機層用無水硫酸鎂干燥并真空濃縮，殘余物通過硅膠柱色譜法純化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶1)，得到{2-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]-1，3-丙二基}雙氨基甲酸二叔丁酯(1.7g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.36(18H，s)，2.4-2.75(5H，m)，2.61(3H，s)，5.70(1H，brs)，6.05-6.20(2H，m)，6.99(1H，s)，7.05-7.30(15H，m)實施例97β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[2-氨基-1-(氨基甲基)乙基]-2-甲基-1-吡唑基}甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽以與實施例6同樣的方式從7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯和{2-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]-1，3-丙二基}雙氨基甲酸二叔丁酯得到標題化合物。
1H-NMR(D2O)δ1.62(6H，s)，3.15-3.70(7H，m)，3.72(3H，s)，4，99(1H，d，J＝16.2Hz)，5.22(1H，d，J＝16.2Hz)，5.27(1H，d，J＝4.8Hz)，5.86(1H，d，J＝4.8Hz)，8.03(1H，s)制備例27向(2S)-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]丁酸(6.0g)和1-甲基-1H-吡唑-4，5-二胺硫酸鹽(3.57g)在水(60ml)中的懸浮液中加入三乙胺(4.75ml)和N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(5.88g)。將混合物在室溫下攪拌2小時。將得到的懸浮液用乙酸乙酯和四氫呋喃的混合溶劑提取。提取液用水和鹽水洗，無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。向殘余物的二氯甲烷(60ml)溶液中加入三苯甲基氯(4.74g)。向混合物中滴加三乙胺(4.75ml)。將混合物在室溫下攪拌1小時。將反應混合物溶解于乙酸乙酯中。將溶液用水和鹽水洗。有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法純化，得到[(1S)-3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)丙基]氨基甲酸芐酯(5.55g)。
ESI質譜689.31[M+H]+1H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(9H，s)，1.40-1.75(2H，m)，2.81(3H，s)，2.82-3.00(3H，m)，3.70-3.90(1H，m)，5.00和5.08(2H，ABq，J＝12.6Hz)，5.77(1H，s)，6.72(1H，三峰狀)，7.15-7.47(22H，m)，8.25(1H，brs)制備例28在室溫下將[(1S)-3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)丙基]氨基甲酸芐酯(1.38g)和二叔丁基二碳酸酯(0.87g)的四氫呋喃(28ml)溶液在氫氣氣氛下用10％碳載鈀(0.70g)處理3小時。在濾除催化劑之后，將濾液真空濃縮，得到粗的油狀物。油狀物通過硅膠柱色譜法純化，得到[(1S)-3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)丙基]氨基甲酸叔丁酯(1.00g)，為無定形固體。
ESI質譜655.34[M+H]+1H-NMR(DMSO-d6)δ1.39(18H，s)，2.80-2.95(3H，m)，2.83(3H，s)，3.65-3.85(1H，m)，5.78(1H，brs)，6.69(1H，三峰狀)，6.89(1H，d，J＝8.1Hz)，7.15-7.32(16H，m)，8.20(1H，brs)實施例107β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-{[(2S)-2，4-二氨基丁?；鵠氨基}-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽以與實施例6同樣的方式從7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯和[(1S)-3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)丙基]氨基甲酸叔丁酯得到標題化合物。
ESI質譜681.2[M+H]+IR(KBr)1772，1527，1402，1109cm-11H-NMR(DMSO-d6)δ1.57(6H，s)，2.30-2.50(2H，m)，3.20(2H，t，J＝8.4Hz)，3.20和3.48(2H，ABq，J＝17.7Hz)，3.73(3H，s)，4.35(1H，t，J＝6.7Hz)，4.98和5.21(1H，ABq，J＝15.3Hz)，5.25(1H，d，J＝4.8Hz)，5.85(1H，d，J＝4.8Hz)，8.14(1H，s)制備例29((3S)-4-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-4-氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯以與制備例20同樣的方式從(2S)-2-{[(芐氧基)羰基]氨基}-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]丁酸得到標題化合物。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.37(9H，s)，1.55-1.90(2H，m)，2.85-3.08(2H，m)，3.51(3H，s)，4.00-4.18(1H，m)，4.91(1H，brs)，5.03(2H，s)，6.77(1H，三峰狀)，7.18(1H，s)，7.25-7.40(5H，m)，7.54(1H，d，J＝7.8Hz)，9.22(1H，brs)制備例30在室溫下將((3S)-4-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-3-{[(芐氧基)羰基]氨基}-4-氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯(1.51g)的四氫呋喃(30ml)溶液在氫氣氣氛下用10％碳載鈀(0.75g)處理2小時。在濾除催化劑之后，將濾液真空濃縮，得到粗的油狀物，將其溶解于四氫呋喃(30ml)中。在室溫下向溶液中連續(xù)地加入三乙胺(1.94ml)和({[(三氟甲基)磺?；鵠亞氨基}亞甲基)雙氨基甲酸二叔丁酯(2.64g)。將混合物在室溫下攪拌過夜。向反應混合物中加入水以淬滅反應。混合物用乙酸乙酯提取。有機層用水和鹽水洗。提取液用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。向殘余物在二氯甲烷(30ml)中的溶液中加入三苯甲基氯(942mg)。向混合物中滴加三乙胺(1.9ml)。將混合物在室溫下攪拌過夜。將反應混合物溶解于乙酸乙酯中。將溶液用水和鹽水洗。提取液用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法純化，得到((Z)-{[(1S)-3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)丙基]氨基}亞甲基)雙氨基甲酸二叔丁酯(1.95g)。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.38(9H，s)，1.42(9H，s)，1.48(9H，s)，1.50-1.85(2H，m)，2.75-3.12(2H，m)，2.79(3H，s)，4.30-4.48(1H，m)，5.62(1H，s)，6.67(1H，三峰狀)，7.14-7.29(16H，m)，8.54(1H，d，J＝7.6Hz)，8.61(1H，brs)實施例117β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基-4-{[(2S)-4-氨基-2-(胍基)丁酰基]氨基}-2-甲基-1-吡唑基)甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽以與實施例6同樣的方式從7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯和((Z)-{[(1S)-3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)丙基]氨基}亞甲基)雙氨基甲酸二叔丁酯得到標題化合物。
ESI質譜691.11[M+H]+IR(KBr)1776，1668，1525，1111cm-11H-NMR(DMSO-d6)δ1.60(6H，s)，1.75-2.50(2H，m)，3.19和3.41(2H，ABq，J＝17.9Hz)，3.70(3H，s)，4.96和5.22(2H，ABq，J＝15.5Hz)，5.23(1H，d，J＝4.8Hz)，5.86(1H，d，J＝4.8Hz)，7.89(1H，s)制備例31將Dess-Martin過碘烷(periodinane)(4.2g)溶解于二氯甲烷(75ml)中并向該溶液中加入((3S)-3-羥基-4-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-4-氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯(5g)。將整個混合物在室溫下攪拌30分鐘并用1N氫氧化鈉水溶液(70ml)淬滅，同時攪拌30分鐘。將整個混合物用乙酸乙酯提取。將提取液用水和鹽水洗并用無水硫酸鎂干燥。減壓蒸發(fā)溶劑，得到粗產(chǎn)物，其通過硅膠柱色譜法純化(乙酸乙酯∶二氯甲烷＝1∶4)，得到(4-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3，4-二氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯(3.4g)。
ESI質譜576.2[M+Na]+(正離子)1H-NMR(CDCl3)δ1.39(9H，s)，2.7-2.9(2H，m)，2.72(3H，s)，3.1-3.3(2H，m)，5.89(1H，s)，6.7-7.0(1H，m)，7.0-7.3(15H，m)，7.39(1H，s)，8.93(1H，s)制備例32在冰冷卻下向攪拌的(氰基甲基)膦酸二乙酯(704mg)的四氫呋喃(20ml)溶液中加入氫化鈉(159mg，60％的油懸浮液)。將混合物攪拌45分鐘同時升溫到室溫。將(4-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3，4-二氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯(2g)加入到混合物中并將整個混合物在室溫下攪拌2小時。向混合物中加入水并將整個混合物用乙酸乙酯提取。將提取液用水和鹽水洗并用無水硫酸鎂干燥。減壓蒸發(fā)溶劑，得到殘余的油狀物，將其與少量的乙酸乙酯研磨并用二異丙基醚稀釋。通過過濾收集得到的沉淀物，得到[(3E)-4-氰基-3-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-3-丁烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(1.41g)。
ESI質譜599.3[M+Na]+(正離子)1H-NMR(CDCl3)δ1.37(9H，s)，2.4-2.6(2H，m)，2.77(3H，s)，2.9-3.1(2H，m)，5.52(1H，s)，5.82(1H，s)，6.8-7.0(1H，m)，7.0-7.4(16H，m)，8.75(1H，s)制備例33向攪拌的[(3E)-4-氰基-3-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-3-丁烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(1.4g)和二叔丁基二碳酸酯(795mg)的四氫呋喃(10ml)溶液中加入PtO2(110mg)并將混合物在氫氣氣氛下攪拌5天。濾除不溶性的PtO2并將濾液減壓濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法純化(乙酸乙酯∶二氯甲烷＝1∶1)，得到[3-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-1，5-戊二基]雙氨基甲酸二叔丁酯(1.04g)。
ESI質譜705.3[M+Na]+(正離子)1H-NMR(CDCl3)δ1.38(18H，s)，1.4-1.6(4H，m)，1.8-2.0(1H，m)，2.6-2.8(4H，m)，2.78(3H，s)，5.86(1H，s)，6.6-6.8(2H，m)，7.1-7.4(16H，m)，7.81(1H，s)實施例12
7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-{[4-氨基-2-(2-氨基乙基)丁酰基]氨基}-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽以與實施例6同樣的方式從7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯和[3-({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)-1，5-戊二基]雙氨基甲酸二叔丁酯得到標題化合物。
ESI質譜740.3[M+H]+(正離子)1H-NMR(D2O)δ1.54(6H，s)，1.8-2.2(4H，m)，2.6-2.9(1H，m)，2.9-3.2(4H，m)，3.18和3.57(2H，ABq，J＝17.7Hz)，3.8-4.0(2H，m)，4.3-4.5(2H，m)，4.8-5.2(2H，m)，5.30(1H，d，J＝4.8Hz)，5.85(1H，d，J＝4.8Hz)，8.14(1H，s)制備例34在室溫下向攪拌的甲磺酸2-[(叔丁氧基羰基)氨基]-1-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}乙酯(10g)的二甲基亞砜(100ml)溶液中加入氰化鈉(2g)并將整個混合物在室溫下攪拌過夜。向反應混合物中加入水并將整個混合物用乙酸乙酯提取。將提取液用水和鹽水洗并用無水硫酸鎂干燥。減壓除去溶劑，殘余的油狀物通過硅膠柱色譜法純化(乙酸乙酯∶己烷＝1∶5)，得到(2-氰基-1，3-丙二基)雙氨基甲酸二叔丁酯(4.04g)。ESI質譜322.3[M+Na]+(正離子)1H-NMR(CDCl3)δ1.44(18H，s)，2.6-2.7(2H，m)，3.2-3.6(4H，m)，3.8-4.0(1H，m)制備例35將(2-氰基-1，3-丙二基)雙氨基甲酸二叔丁酯溶解于濃鹽酸(13ml)和乙酸(13ml)中并將混合物回流5小時。將反應混合物冷卻并減壓蒸發(fā)溶劑。向殘余的油狀物中加入四氫呋喃(20ml)和水(20ml)并將整個混合物用1N氫氧化鈉水溶液中和。向混合物中加入二叔丁基二碳酸酯(6.12g)和三乙胺(9.31ml)。將整個混合物在室溫下攪拌過夜。減壓除去溶劑，并將水層用1N鹽酸水溶液酸化(pH＝2)。將整個混合物用乙酸乙酯提取并將提取液用無水硫酸鎂干燥，減壓濃縮，得到3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}丙酸(480mg)。
ESI質譜341.2[M+Na]+(正離子)
制備例36向3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}丙酸(476mg)的二氯甲烷(6ml)溶液中加入羥基苯并三唑(222mg)和N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(573mg)，并將混合物攪拌10分鐘。向上述混合物中加入1-甲基-N5-三苯甲基-1H-吡唑-4，5-二胺(530mg)并將將整個混合物在室溫下攪拌1小時。向混合物中加入水并將整個混合物用乙酸乙酯提取。將提取液用水和鹽水洗并用無水硫酸鎂干燥。減壓除去溶劑，得到(2-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}-3-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯(270mg)。
ESI質譜677.3[M+Na]+(正離子)實施例137β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-{[3-氨基-2-(氨基甲基)丙?；鵠氨基}-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽以與實施例6同樣的方式從7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯和(2-{[(叔丁氧基羰基)氨基]甲基}-3-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯得到標題化合物。
1H-NMR(D2O)δ1.56(6H，s)，3.0-3.1(2H，m)，3.20和3.48(2H，ABq，J＝17.8Hz)，3.4-3.5(2H，m)，4.0-4.2(1H，m)，4.8-5.3(2H，m)，5.25(1H，d，J＝4.8Hz)，5.84(1H，d，J＝4.7Hz)，8.0-8.1(1H，m)制備例37向2-(4，5-二氨基-1H-吡唑-1-基)乙醇硫酸鹽(2g)和(2S)-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-羥基丁酸(1.92g)的水(8ml)溶液中加入三乙胺(2.32ml)和N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(1.76g)，并將混合物在室溫下攪拌3小時。將整個混合物用乙酸乙酯-四氫呋喃(1∶1)提取并減壓蒸發(fā)溶劑，得到((3S)-44[5-氨基-1-(2-羥基乙基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-羥基-4-氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯的粗產(chǎn)物。得到的粗產(chǎn)物不經(jīng)進一步純化用于制備例38。
制備例38向((3S)-4-{[5-氨基-1-(2-羥基乙基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-羥基-4-氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯(2.86g)的N，N-二甲基甲酰胺(30ml)溶液中加入三苯甲基氯(3.48g)和三乙胺(3.48ml)，并將混合物在室溫下攪拌過夜。向反應混合物加入水并將整個混合物用乙酸乙酯提取。將提取液用水和鹽水洗并用無水硫酸鎂干燥。減壓蒸發(fā)溶劑得到粗的結晶，將其用乙酸乙酯-二異丙基醚(2∶1)洗并通過過濾收集，得到((3S)-3-羥基-4-{[1-(2-羥基乙基)-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-4-氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯(3.5g)。
ESI質譜608.3[M+Na]+(正離子)1H-NMR(CDCl3)δ1.2-1.5(1H，m)，1.39(9H，s)，1.5-1.8(1H，m)，2.8-3.1(2H，m)，3.2-3.4(2H，m)，3.4-3.6(2H，m)，3.6-3.8(1H，m)，4.92(1H，t，J＝5.0Hz)，5.51(1H，d，J＝5.4Hz)，6.07(1H，s)，6.6-6.8(1H，m)，7.0-7.4(15H，m)，7.43(1H，s)，8.02(1H，s)制備例39向攪拌的((3S)-3-羥基-4-{[1-(2-羥基乙基)-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-4-氧代丁基)氨基甲酸叔丁酯(2.5g)的N，N-二甲基甲酰胺(25ml)溶液中加入三苯甲基氯(1.25g)、三乙胺(1.78ml)和4-二甲氨基吡啶(52.1mg)，并將混合物攪拌1小時。將反應混合物升溫到60℃并在相同溫度下攪拌2天。向混合物中加入水，并將整個混合物用乙酸乙酯提取。將提取液用水和鹽水洗并用無水硫酸鎂干燥。減壓濃縮得到油狀物，其通過硅膠柱色譜法純化(二氯甲烷∶乙酸乙酯＝5∶1)，得到[(3S)-3-羥基-4-氧代-4-({5-(三苯甲基氨基)-1-[2-(三苯甲氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基}氨基)丁基]氨基甲酸叔丁酯(1.5g)。
ESI質譜851.3[M+Na]+(正離子)1H-NMR(CDCl3)δ1.2-1.5(1H，m)，1.39(9H，s)，1.5-1.8(1H，m)，2.8-3.1(4H，m)，3.3-3.5(2H，m)，3.6-3.8(1H，m)，5.59(1H，d，J＝5.2Hz)，5.95(1H，s)，6.6-6.8(1H，m)，7.1-7.4(30H，m)，7.43(1H，s)，8.32(1H，s)制備例40向攪拌的Dess-Martin試劑(845mg)在二氯甲烷(15ml)中的懸浮液中加入[(3S)-3-羥基-4-氧代-4-({5-(三苯甲基氨基)-1-[2-(三苯甲氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基}氨基)丁基]氨基甲酸叔丁酯(1.5g)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向混合物中加入1N氫氧化鈉水溶液(8ml)同時攪拌30分鐘，將整個混合物用乙酸乙酯提取。將提取液用水和鹽水洗并用無水硫酸鎂干燥。減壓濃縮得到油狀物，其通過硅膠柱色譜法純化(乙酸乙酯二氯甲烷＝1∶4)，得到[3，4-二氧代-4-({5-(三苯甲基氨基)-1-[2-(三苯甲氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基}氨基)丁基]氨基甲酸叔丁酯(1.33g)。ESI質譜848.3[M+Na]+(正離子)1H-NMR(CDCl3)δ1.38(9H，s)，2.7-2.9(2H，m)，2.9-3.0(2H，m)，3.1-3.4(4H，m)，5.90(1H，s)，6.8-6.9(1H，m)，7.1-7.4(30H，m)，7.45(1H，s)，8.99(1H，s)制備例41在氮氣氛下在0℃向攪拌的(氰基甲基)膦酸二乙酯(311mg)的四氫呋喃(13ml)溶液中加入氫化鈉(70.3mg，60％的油懸浮液)，并將混合物攪拌45分鐘同時升溫到室溫。向混合物中加入[3，4-二氧代4-({5-(三苯甲基氨基)-1-[2-(三苯甲氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基}氨基)丁基]氨基甲酸叔丁酯(1-32g)并繼續(xù)攪拌30分鐘。向反應混合物中加入水并將整個混合物用乙酸乙酯提取。將提取液用水和鹽水洗并用無水硫酸鎂干燥。減壓濃縮，得到{(3E)-4-氰基-3-[({5-(三苯甲基氨基)-1-[2-(三苯甲氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基}氨基)羰基]-3-丁烯-1-基}氨基甲酸叔丁酯(1.13g)。ESI質譜872.3[M+Na]+(正離子)1H-NMR(CDCl3)δ1.36(9H，s)，2.4-2.6(2H，m)，2.8-3.1(4H，m)，3.2-3.4(2H，m)，5.54(1H，s)，5.80(1H，s)，6.8-7.0(1H，m)，7.0-7.5(31H，m)，8.87(1H，s)制備例42在氫氣氛下向{(3E)-4-氰基-3-[({5-(三苯甲基氨基)-1-[2-(三苯甲氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基}氨基)羰基]-3-丁烯-1-基}氨基甲酸叔丁酯(1.1g)的乙醇(10ml)溶液中加入二叔丁基二碳酸酯(297mg)和PtO2(59mg)，并將混合物攪拌5天。濾除催化劑并將濾液減壓濃縮，得到油狀物，其通過硅膠柱色譜法純化(二氯甲烷乙酸乙酯＝5∶1→1∶1)，得到{3-[({5-(三苯甲基氨基)-1-[2-(三苯甲氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基}氨基)羰基]-1，5-戊二基}雙氨基甲酸二叔丁酯(570mg)。
ESI質譜978.4[M+Na]+(正離子)1H-NMR(CDCl3)δ1.37(18H，s)，1.7-2.0(1H，m)，2.6-2.8(4H，m)，2.8-3.0(2H，m)，3.3-3.5(2H，m)，5.87(1H，s)，6.6-6.8(2H，m)，7.1-7.4(31H，m)，7.92(1H，s)
實施例147β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-{[4-氨基-2-(2-氨基乙基)丁?；鵠氨基}-2-(2-羥基乙基)-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽以與實施例6同樣的方式從7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯和{3-[({5-(三苯甲基氨基)-1-[2-(三苯甲氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基}氨基)羰基]-1，5-戊二基}雙氨基甲酸二叔丁酯得到標題化合物。
1H-NMR(D2O)δ1.54(6H，s)，1.8-2.2(4H，m)，2.6-2.9(1H，m)，2.9-3.2(4H，m)，3.18和3.57(2H，ABq，J＝17.7Hz)，3.8-4.0(2H，m)，4.3-4.5(2H，m)，4.8-5.2(2H，m)，5.30(1H，d，J＝4.8Hz)，5.85(1H，d，J＝4.8Hz)，8.14(1H，s)制備例43在冰冷卻下向2-(4，5-二氨基-1H-吡唑-1-基)乙醇硫酸鹽(5g)的水(30ml)和二氧雜環(huán)己烷(15ml)溶液中加入氫氧化鈉水溶液以調(diào)節(jié)混合物到pH 7。向混合物中加入氯甲酸苯酯(3.42g)，同時控制pH在7，將整個混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物用乙酸乙酯-四氫呋喃(1∶1)提取并將提取液用無水硫酸鎂干燥。蒸發(fā)溶劑得到[5-氨基-1-(2-羥基乙基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯的粗產(chǎn)物，為油狀物，其不經(jīng)進一步純化就用于制備例44。
制備例44向攪拌的[5-氨基-1-(2-羥基乙基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯(5.45g)的N，N-二甲基甲酰胺(55ml)溶液中加入三乙胺(8.69ml)和三苯甲基氯(6.37g)，并將混合物在室溫下攪拌1小時。向反應混合物中加入水并將整個混合物用乙酸乙酯提取。將提取液用水和鹽水洗并用無水硫酸鎂干燥。減壓濃縮得到粗產(chǎn)物，將其與乙酸乙酯-二異丙基醚(1∶2)研磨。通過過濾收集得到的固體，得到[1-(2-羥基乙基)-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯(3.5g)。
ESI質譜527.2[M+Na]+(正離子)1H-NMR(CDCl3)δ3.12(2H，t，J＝5.9Hz)，3.3-3.5(2H，m)，4.92(1H，t，J＝5.1Hz)，5.79(1H，s)，6.9-7.5(21H，m)，7.77(1H，s)
制備例45向攪拌的[1-(2-羥基乙基)-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯(1g)的N，N-二甲基甲酰胺(10ml)溶液中加入(2-氨基-1，3-丙二基)雙氨基甲酸二叔丁酯(631mg)和三乙胺(0.83ml)，并將混合物在室溫下攪拌3小時。向反應混合物中加入水并將整個混合物用乙酸乙酯提取。將提取液用水和鹽水洗并用無水硫酸鎂干燥。減壓濃縮得到粗產(chǎn)物，將其與乙酸乙酯-二異丙基醚(1∶3)研磨。通過過濾收集得到的固體，得到{2-[({[1-(2-羥基乙基)-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)氨基]-1，3-丙二基}雙氨基甲酸二叔丁酯(435mg)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.38(18H，s)，2.8-3.0(4H，m)，3.0-3.1(2H，m)，3.3-3.5(2H，m)，3.4-3.6(1H，m)，4.78(1H，t，J＝5.1Hz)，5.73(1H，d，J＝7.3Hz)，5.80(1H，s)，6.50(1H，s)，6.5-6.8(2H，m)，7.0-7.4(16H，m)實施例157β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-[({[2-氨基-1-(氨基甲基)乙基]氨基}羰基)氨基]-2-(2-羥基乙基)-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸鹽以與實施例6同樣的方式從7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯和{2-[({[1-(2-羥基乙基)-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)氨基]-1，3-丙二基}雙氨基甲酸二叔丁酯得到標題化合物。
1H-NMR(D2O)δ1.54(6H，s)，3.0-3.3(5H，m)，3.4-3.7(2H，m)，3.8-4.0(2H，m)，4.2-4.5(2H，m)，4.8-5.2(2H，m)，5.28(1H，d，J＝4.8Hz)，5.86(1H，d，J＝4.6Hz)，8.00(1H，s)制備例46向1-甲基-1H-吡唑-4，5-二胺硫酸鹽(2.10g)、(2S)-2-[(芐氧基羰基)氨基]-5-[(叔丁氧基羰基)氨基]戊酸(3.66g)和三乙胺(3.04g)在氯仿(50ml)中的懸浮液中加入N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(1.91g)，并將混合物在室溫下攪拌15小時。將反應混合物連續(xù)地用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗。有機層用無水硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮，得到{(1S)-1-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酰基]四亞甲基}雙氨基甲酸1-芐酯4-叔丁酯的粗產(chǎn)物，為油狀物。該粗產(chǎn)物不經(jīng)進一步純化直接用于下一步。
向{(1S)-1-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酰基]四亞甲基}雙氨基甲酸1-芐酯4-叔丁酯的粗產(chǎn)物和三乙胺(1.01g)的氯仿(50ml)溶液中加入三苯基氯甲烷(2.78g)，并將混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物連續(xù)地用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗。有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法純化，用2％甲醇/氯仿洗脫，得到((1S)-1-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲?；鶀四亞甲基)雙氨基甲酸1-芐酯4-叔丁酯(720mg)，為油狀物。
1H-NMR(CDCl3)δ1.41(9H，s)，1.42-1.60(4H，m)，2.90(3H，s)，3.02-3.04(1H，m)，3.23-3.25(1H，m)，3.93-3.95(1H，m)，4.62(1H，br)，4.66(1H，s)，5.10(2H，s)，5.36(1H，br)，6.98(1H，br)，7.20-7.36(20H，m)，7.52(1H，s)制備例47在室溫下將((1S)-1-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲?；鶀四亞甲基)雙氨基甲酸1-芐酯4-叔丁酯(6.4g)的甲醇(100ml)溶液在氫氣氣氛下用10％碳載鈀(1.0g)處理6天。在濾除催化劑之后將濾液真空濃縮。將殘余物與乙醚研磨并真空干燥，得到(4S)-4-氨基-5-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-5-氧代戊基氨基甲酸叔丁酯(2.2g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.42(9H，s)，1.50-1.74(4H，m)，2.94(3H，s)，3.08-3.12(2H，m)，3.17-3.19(1H，m)，4.67(1H，br)，4.83(1H，s)，7.20-7.26(15H，m)，7.37(1H，s)，8.03(1H，s)制備例48向(4S)-4-氨基-5-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-5-氧代戊基氨基甲酸叔丁酯(1.71g)的四氫呋喃(30ml)溶液中加入N-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酰氧基]-琥珀酰亞胺(820mg)。將混合物在室溫下攪拌6小時。向反應混合物中加入氯仿(50ml)。將混合物連續(xù)地用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗。有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，得到(4S)-4-{[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙?；鵠氨基}-5-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-5-氧代戊基氨基甲酸叔丁酯(2.1g)，為油狀物。
1H-NMR(CDCl3)δ1.41(9H，s)，1.43(9H，s)，1.42-1.64(4H，m)，2.87(3H，s)，3.01-3.19(2H，m)，3.71-3.80(2H，m)，4.18-4.20(1H，m)，4.75(1H，br)，4.78(1H，br)，5.27(1H，br)，6.76(1H，d，J＝7Hz)，7.18(1H，br)，7.19-7.32(15H，m)，7.52(1H，s)實施例16向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯(1.0g)的N，N-二甲基甲酰胺(3ml)溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(965mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向溶液中加入碘化鉀(341mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向反應混合物中加入(4S)-4-{[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酰基]氨基}-5-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-5-氧代戊基氨基甲酸叔丁酯(1.27g)，并將整個混合物在40℃攪拌4小時。向反應混合物中加入乙酸乙酯(100ml)并將混合物連續(xù)地用鹽水(50ml)、10％三氟乙酸鈉水溶液(50ml)和鹽水(50ml)洗，無水硫酸鎂干燥并過濾。將濾液真空濃縮到約5ml。將濃縮物傾倒在二異丙基醚(120ml)中，通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥。向固體在二氯甲烷(4.5ml)中的溶液中加入苯甲醚(1.5ml)和三氟乙酸(3.0ml)。將得到的溶液在室溫下攪拌16小時并傾倒在二異丙基醚(120ml)中。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥得到粗產(chǎn)物(1.42g)，其通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將包含所需產(chǎn)物的洗脫液真空濃縮到約20ml。濃縮物再一次通過使用ODS柱的制備HPLC純化，用8％乙腈/水洗脫。將洗脫液真空濃縮到約10ml。將得到的溶液凍干，得到7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-({(2S)-5-氨基-2-[(氨基乙?；?氨基]戊?；鶀氨基)-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸鹽(46.3mg)，為無定形固體。
1H-NMR(D2O)δ1.52(6H，s)，1.69-2.02(4H，m)，3.03(2H，t，J＝7.3Hz)，3.19(1H，d，J＝17.9Hz)，3.49(1H，d，J＝17.9Hz)，3.74(3H，s)，3.90(2H，s)，4.49(1H，m)，4.97(1H，d，J＝14.7Hz)，5.12(1H，d，J＝14.7Hz)，5.25(1H，d，J＝4.6Hz)，5.83(1H，d，J＝4.6Hz)，8.00(1H，s)制備例49向(2S)-2-[(芐氧基羰基)氨基]-5-[(叔丁氧基羰基)氨基]戊酸(22.0g)和三乙胺(6.7g)的四氫呋喃(240ml)溶液中加入氯甲酸甲酯(6.2g)隨后在冰冷卻下攪拌30分鐘。在相同的溫度下向反應混合物中加入1-甲基-1H-吡唑-4，5-二胺硫酸鹽(12.6g)和三乙胺(13.4g)的水(50ml)溶液。將混合物在室溫下攪拌1小時。向反應混合物中加入氯仿(240ml)并將各層分開。有機層連續(xù)地用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗。有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，得到{(1S)-1-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基甲?；鵠四亞甲基}雙氨基甲酸1-芐酯4-叔丁酯的粗產(chǎn)物，為油狀物。粗產(chǎn)物不經(jīng)進一步純化直接用于下一步。
在室溫下將{(1S)-1-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酰基]四亞甲基}雙氨基甲酸1-芐酯4-叔丁酯粗產(chǎn)物的甲醇(200ml)溶液在氫氣氣氛下用10％碳載鈀(1.0g)處理6天。在濾除催化劑之后將濾液真空濃縮。將殘余物與乙醚研磨并真空干燥。得到(4S)-4-氨基-5-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-5-氧代戊基氨基甲酸叔丁酯(5.5g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.40(9H，s)，1.41(9H，s)，1.42-1.44(4H，m)，2.33-2.44(2H，m)，2.85(3H，s)，3.02-3.40(2H，m)，3.38-3.39(2H，m)，4.18-4.20(1H，m)，4.74(1H，br)，4.76(1H，s)，5.24(1H，br)，6.39(1H，d，J＝7Hz)，7.17(1H，br)，7.18-7.30(15H，m)，7.52(1H，s)制備例50向(4S)-4-氨基-5-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-5-氧代戊基氨基甲酸叔丁酯(4.90g)和三乙胺(1.52g)的氯仿(100ml)溶液中加入N-[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰氧基]琥珀酰亞胺(4.26g)。將混合物在室溫下攪拌17小時。混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液洗。有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，得到(4S)-5-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-4-{[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙?；鵠氨基)-5-氧代戊基氨基甲酸叔丁酯的粗產(chǎn)物，為油狀物。粗產(chǎn)物不經(jīng)進一步純化直接用于下一步。
向(4S)-5-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-4-{[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙?；鵠氨基}-5-氧代戊基氨基甲酸叔丁酯的粗產(chǎn)物和三乙胺(1.52g)的氯仿(100ml)溶液中加入三苯基氯甲烷(4.20g)并將混合物在室溫下攪拌1小時。將反應混合物連續(xù)地用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗。有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，得到(4S)-4-{[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙?；鵠氨基)-5-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基)-5-氧代戊基氨基甲酸叔丁酯(7.20g)，為油狀物。
1H-NMR(CDCl3)δ1.40(9H，s)，1.41(9H，s)，1.42-1.44(4H，m)，2.33-2.442H，m)，285(3H，s)，3.02-3.40(2H，m)，3.38-3.39(2H，m)，4.18-4.20(1H，m)，4.74(1H，br)，4.76(1H，s)，5.24(1H，br)，6.39(1H，d，J＝7Hz)，7.17(1H，br)，7.18-7.30(15 H，m)，7.52(1H，s)實施例17向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯(6.63g )的N，N- 二甲基甲酰胺(20ml)溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(6.39g)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘向溶液中加入碘化鉀(2.26g)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向反應混合物中加入(4S)-4-{[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙?；鵠基}-5-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-5-氧代戊基氨基甲酸叔丁酯(7.20g)并將整個混合物在40℃攪拌3小時。向得到的反應混合物中加入乙酸乙酯(600ml)并將溶液連續(xù)地用鹽水(300ml)，10％三氟乙酸鈉水溶液(300ml)和鹽水(300ml)洗，無水硫酸鎂干燥并過濾。將濾液真空濃縮到約30ml。將濃縮物傾倒在二異丙基醚(700ml)中，通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥。向固體在二氯甲烷(30ml)中的溶液中加入苯甲醚(10ml)和三氟乙酸(30ml)。將得的溶液在室溫下攪拌5小時并傾倒在二異丙基醚(850ml)中。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥得到粗產(chǎn)物(9.50g)，其通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將包含所需產(chǎn)物的洗脫液真空濃縮到約20ml。濃縮物通過使用ODS柱的制備HPLC進一步純化，用20％乙腈/水洗脫。將洗脫液真空濃縮到約10ml并加入1.0mol/l硫酸(1.42ml)。將得到溶液凍干，得到7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-({(2S)-5-氨基-2-[(3-氨基丙?；?氨基]戊?；鶀氨基)-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽(1.29g)，為無定形固體。
1H-NMR(D2O)δ1.62(6H，s)，1.73-2.03(4H，m)，2.80(2H，t，J＝6.9Hz)，.05(1H，t，J＝7.3Hz)，3.24(1H，d，J＝17.9Hz)，3.28(2H，t，J＝6.9Hz)，3.47(1H，d，J＝17.9Hz)，3.74(3H，s)，4.45(1H，m)，5.07(1H，d，J＝16.5Hz)，5.26(H，d，J＝16.5Hz)，5.26(1H，d，J＝5.0Hz)，5.88(1H，d，J＝5.0Hz)，8.07(1H，s)制備例51向(4S)-4-氨基-5-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-5-氧代戊基氨基甲酸叔丁酯(560mg)和三乙胺(170mg)的氯仿(30ml)溶液中加入({[(三氟甲基)磺?；鵠亞氨基}亞甲基)雙氨基甲酸二叔丁酯(660mg)。將混合物在室溫下攪拌18小時。反應混合物用鹽水洗，有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，得到粗產(chǎn)物(4S)-5-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-4-[2，3-雙(叔丁氧基羰基)胍基]-5-氧代戊基氨基甲酸叔丁酯，為油狀物。該粗產(chǎn)物不經(jīng)進一步純化直接用于下一步。
向粗產(chǎn)物(4S)-5-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-4-[2，3-雙(叔丁氧基羰基)胍基]-5-氧代戊基氨基甲酸叔丁酯和三乙胺(170mg)的氯仿(30ml)溶液中加入三苯基氯甲烷(470mg)并將混合物在室溫下攪拌6小時。將反應混合物連續(xù)地用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗。有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法純化，用3％甲醇/氯仿洗脫，得到(4S)-4-[2，3-雙(叔丁氧基羰基)胍基]-5-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-5-氧代戊基氨基甲酸叔丁酯(850mg)，為油狀物。
1H-NMR(CDCl3)δ1.39(9H，s)，1.44(9H，s)，1.49(9H，s)，1.57-1.79(4H，m)，2.88(3H，s)，3.05-3.16(2H，m)，4.23-4.24(1H，m)，4.63(1H，s)，4.65(1H，br)，7.22-7.33(15H，m)，7.54(1H，brs)，7.6(H，s)，8.57(1H，d，J＝7Hz)，11.28(1H，s)實施例18向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯(680mg)的N，N-二甲基甲酰胺(2ml)溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(660mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向溶液中加入碘化鉀(232mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向反應混合物中加入(4S)-4-[2，3-雙(叔丁氧基羰基)胍基]-5-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-5-氧代戊基氨基甲酸叔丁酯(810mg)，并將整個混合物在40℃攪拌4小時。向得到的反應混合物中加入乙酸乙酯(100ml)并將溶液連續(xù)地用鹽水(50ml)、10％三氟乙酸鈉水溶液(50ml)和鹽水(50ml)洗，無水硫酸鎂干燥并過濾。將濾液真空濃縮到約5ml。將濃縮物傾倒在二異丙基醚(120ml)中，通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥。向固體在二氯甲烷(3.0ml)中的溶液中加入苯甲醚(1.0ml)和三氟乙酸(3.0ml)。將得到的溶液在室溫下攪拌4小時并傾倒在二異丙基醚(120ml)中。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥得到粗產(chǎn)物(0.54g)，其通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將包含所需產(chǎn)物的洗脫液真空濃縮到約20ml。濃縮物通過使用ODS柱的制備HPLC進一步純化，用15％乙腈/水洗脫。將洗脫液真空濃縮到約10ml并加入0.05mol/l硫酸(0.924ml)。將得到的溶液凍干，得到7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-{[(2S)-5-氨基-2-(胍基)戊?；鵠氨基}-2-甲基-1-吡唑錨基]甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽(61.0mg)，為無定形固體。
1H-NMR(D20)δ1.58(6H，s)，1.76-1.84(2H，m)，1.86-1.96(1H，m)，2.04-2.13(1H，m)，3.04(2H，t，J＝7.3Hz)，3.21(1H，d，J＝17.9Hz)，3.46(1H，d，J＝17.9Hz)，3.73(3H，s)，4.36-4.42(1H，m)，4.98(1H，d，J＝15.6Hz)，5.20(1H，d，J＝15.6Hz)，5.24(1H，d，J＝4.6Hz)，5.84(1H，d，J＝4.6Hz)，8.06(1H，s)制備例52向(2S)-2-[(芐氧基羰基)氨基]-6-[(叔丁氧基羰基)氨基]己酸(19.02g)和三乙胺(5.56g)的四氫呋喃(200ml)溶液中加入氯甲酸甲酯(4.21ml)，然后在冰冷卻下攪拌30分鐘。在相同溫度下向反應混合物中加入1-甲基-1H-吡唑-4，5-二-胺硫酸鹽(15.75g)和三乙胺(15.2g)的水(50ml)溶液。將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向反應混合物中加入氯仿(300ml)并將各層分離。有機層連續(xù)地用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗。有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，得到粗產(chǎn)物(1S)-{1-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基甲?；鵠五亞甲基}雙氨基甲酸1-芐酯5-叔丁酯，為油狀物。粗產(chǎn)物不經(jīng)進一步純化直接用于下一步。
粗產(chǎn)物(1S)-{1-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酰基]五亞甲基}雙氨基甲酸1-芐酯5-叔丁酯的甲醇(350ml)溶液用10％碳載鈀(2.0g)在氫氣氣氛下在室溫下處理6天。在濾除催化劑之后將濾液真空濃縮。將殘余物與乙酸乙酯研磨并真空干燥，得到(5S)-5-氨基-6-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-6-氧代己基氨基甲酸叔丁酯(12.1g)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.24-1.40(4H，m)，1.36(9H，s)，1.70-1.77(2H，m)，2.88-2.91(2H，m)，3.51(3H，s)，3.80-3.82(1H，m)，5.15(2H，s)，6.77(1H，br)，7.27(1H，s)，10.05(1H，br)制備例53向(5S)-5-氨基-6-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-6-氧代己基氨基甲酸叔丁酯(1.60g)和三乙胺(0.47g)的氯仿(100ml)溶液中加入N-[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰氧基]琥珀酰亞胺(1.34g)。將混合物在室溫下攪拌15小時?；旌衔镉蔑柡吞妓釟溻c水溶液洗。有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，得到粗產(chǎn)物(5S)-6-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-5-{[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酰基]氨基}-6-氧代己基氨基甲酸叔丁酯(2.09g)，為油狀物。粗產(chǎn)物不經(jīng)進一步純化直接用于下一步。
向粗產(chǎn)物(5S)-6-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-5-([3-(叔丁氧基羰基氨基)丙?；鵠氨基}-6-氧代己基氨基甲酸叔丁酯和三乙胺(0.50g)的氯仿(30ml)溶液中加入三苯基氯甲烷(1.37g)并將混合物在室溫下攪拌16小時。將反應混合物連續(xù)地用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗。有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法純化，用3％甲醇/氯仿洗脫，得到(5S)-5-{[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙?；鵠氨基}-6-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-6-氧代己基氨基甲酸叔丁酯(1.62g)，為油狀物。
1H-NMR(CDCl3)δ1.24-1.70(6H，m)，1.42(18H，s)，2.30-2.44(2H，m)，2.91(3H，s)，3.06-3.10(2H，m)，3.35-3.39(2H，m)，4.01-4.05(1H，m)，4.58(1H，s)，4.66(1H，br)，5.23(1H，br)，6.21(1H，br)，6.78(1H，br)，7.12-7.32(15H，m)，7.58(1H，s)實施例19向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯(1.36g)的N，N-二甲基甲酰胺(4ml)溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(1.31g)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向溶液中加入碘化鉀(465mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向反應混合物中加入(5S)-5-{[3-(叔丁氧基羰基氨基)丙?；鵠氨基}-6-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-6-氧代己基氨基甲酸叔丁酯(1.87g)并將整個混合物在室溫下攪拌22小時。向得到的反應混合物中加入乙酸乙酯(150ml)并將溶液連續(xù)地用鹽水(80ml)、10％三氟乙酸鈉水溶液(80ml)和鹽水(80ml)洗，無水硫酸鎂干燥并過濾。將濾液真空濃縮到約5ml。將濃縮物傾倒在二異丙基醚(120ml)中，通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥。向固體在二氯甲烷(6.0ml)中的溶液中加入苯甲醚(2.0ml)和三氟乙酸(6.0ml)。將得到的溶液在室溫下攪拌6小時并傾倒在二異丙基醚(120ml)中。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥得到粗產(chǎn)物(1.62g)，將其通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將包含所需產(chǎn)物的洗脫液真空濃縮到約20ml。濃縮物進一步通過使用ODS柱的制備HPLC純化，用20％乙腈/水洗脫。將洗脫液真空濃縮到約10ml并加入0.05mol/l硫酸(6.96ml)。將得到的溶液凍干，得到7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-({(2S)-6-氨基-2-[(3-氨基丙?；?氨基]己酰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽(286.7mg)，為無定形固體。
1H-NMR(D2O)δ1.42-1.57(2H，m)，1.61(6H，d，J＝3.2Hz)，1.67-1.75(2H，m)，1.78-1.96(2H，m)，2.78(2H，t，J＝6.9Hz)，3.00(2H，t，J＝7.8Hz)，3.23(1H，d，J＝17.9Hz)，3.27(2H，t，J＝6.9Hz)，3.46(2H，d，J＝17.9Hz)，3.73(3H，s)，4.37-4.42(1H，m)，5.04(1H，d，J＝15.6Hz)，5.25(1H，d，J＝15.6Hz)，5.25(1H，d，J＝5.0Hz)，5.87(1H，d，J＝5.0Hz)，8.05(1H，s)制備例54向(5S)-5-氨基-6-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-6-氧代己基氨基甲酸叔丁酯(3.4g)和三乙胺(1.21g)的氯仿(100ml)溶液中加入({[(三氟甲基)磺?；鵠亞氨基}亞甲基)雙氨基甲酸二叔丁酯(4.70g)。將混合物在室溫下攪拌15小時。反應混合物用鹽水洗，有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，得到(5S)-5-[2，3-雙(叔丁氧基羰基)胍基]-6-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-6-氧代己基氨基甲酸叔丁酯粗產(chǎn)物，為油狀物。粗產(chǎn)物不經(jīng)進一步純化直接用于下一步。
向粗產(chǎn)物(5S)-5-[2，3-雙(叔丁氧基羰基)胍基]-6-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-6-氧代己基氨基甲酸叔丁酯和三乙胺(1.01g)的氯仿(100ml)溶液中加入三苯基氯甲烷(2.78g)，并將混合物在室溫下攪拌2小時。將反應混合物連續(xù)地用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗。有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法純化，用3％甲醇/氯仿洗脫，得到(5S)-5-[2，3-雙(叔丁氧基羰基)胍基]-6-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-6-氧代己基氨基甲酸叔丁酯(5.60g)，為油狀物。
1H-NMR(CDCl3)δ1.21-1.79(6H，m)，1.37(9H，s)，1.44(9H，s)，1.49(9H，s)，2.88(3H，s)，3.02-3.11(2H，m)，4.14-4.19(1H，m)，4.55(1H，s)，4.58(1H，br)，7.16-7.31(15H，m)，7.53(1H，br)，7.62(1H，s)，8.52(1H，d，J＝7Hz)，11.30(1H，s)實施例20向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯(1-02g)的N，N-二甲基甲酰胺(3.0ml)溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(980mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向溶液中加入碘化鉀(350mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向反應混合物中加入(5S)-5-[2，3-雙(叔丁氧基羰基)胍基]-6-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-6-氧代己基氨基甲酸叔丁酯(1.48g)，并將整個混合物在40℃攪拌4小時。向得到的反應混合物中加入乙酸乙酯(150ml)并將溶液連續(xù)地用鹽水(75ml)、10％三氟乙酸鈉水溶液(75ml)和鹽水(75ml)洗，無水硫酸鎂干燥并過濾。將濾液真空濃縮到約5ml。將濃縮物傾倒在二異丙基醚(150ml)中，通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥。向固體在二氯甲烷(3.0ml)中的溶液中加入苯甲醚(1.0ml)和三氟乙酸(3.0ml)。將得到的溶液在室溫下攪拌4小時并傾倒在二異丙基醚(150ml)中。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥得到粗產(chǎn)物(0.92g)，將其通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將包含所需產(chǎn)物的洗脫液真空濃縮到約20ml。濃縮物進一步通過使用ODS柱的制備HPLC純化，用15％乙腈/水洗脫。將洗脫液真空濃縮到約10ml并加入0.05mol/l硫酸(2.07ml)。將得到的溶液凍干，得到7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-{[(2S)-6-氨基-2-(胍基)己?；鵠氨基}-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽(94.6mg)，為無定形固體。
1H-NMR(D2O)δ1.45-1.56(2H，m)，1.60(6H，d，J＝3.2Hz)，1.66-1.75(2H，m)，1.83-1.93(1H，m)，1.98-2.08(1H，m)，3.00(2H，t，J＝7.8Hz)，3.22(1H，d，J＝17.9Hz)，3.45(1H，d，J＝17.9Hz)，3.72(3H，s)，4.32-4.38(1H，m)，5.00(1H，d，J＝15.6Hz)，5.23(1H，d，J＝15.6Hz)，5.24(1H，d，J＝4.6Hz)，5.85(1H，d，J＝4.6Hz)，8.07(1H，s)制備例55
向(5S)-5-氨基-6-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基]-6-氧代己基氨基甲酸叔丁酯(3.06g)和三乙胺(1.09g)的氯仿(30ml)溶液中加入二叔丁基二碳酸酯(2.36g)。將混合物在室溫下攪拌14小時。將反應混合物用鹽水洗，并將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮，得到(1S)-{1-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基甲?；鵠五亞甲基}雙氨基甲酸二叔丁酯的粗產(chǎn)物，為油狀物。粗產(chǎn)物不經(jīng)進一步純化直接用于下一步。
向粗產(chǎn)物(1S)-{1-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酰基]五亞甲基}雙氨基甲酸二叔丁酯和三乙胺(0.91g)的氯仿(30ml)溶液中加入三苯基氯甲烷(2.51g)，并將混合物在室溫下攪拌6小時。將反應混合物連續(xù)地用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗。有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法純化，用3％甲醇/氯仿洗脫，得到(1S)-(1-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲酰基}五亞甲基)雙氨基甲酸二叔丁酯(4.23g)，為油狀物。
1H-NMR(CDCl3)δ1.27-1.32(2H，m)，1.42(9H，s)，1.44(9H，s)，1.46-1.63(4H，m)，2.94(3H，s)，3.09-3.10(2H，m)，3.74-3.76(1H，m)，4.56(1H，br)，4.58(1H，br)，4.97(1H，br)，6.73(1H，br)，7.20-7.31(15H，m)，7.54(1H，s)實施例21向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯(1.36g)的N，N-二甲基甲酰胺(4.0ml)溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(1.31g)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向溶液中加入碘化鉀(465mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向反應混合物中加入(1S)-(1-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲?；鶀五亞甲基)雙氨基甲酸二叔丁酯(1.37g)，并將整個混合物在40℃攪拌2小時。向得到的反應混合物中加入乙酸乙酯(150ml)并將溶液連續(xù)地用鹽水(80ml)、10％三氟乙酸鈉水溶液(80ml)和鹽水(80ml)洗，無水硫酸鎂干燥并過濾。將濾液真空濃縮到約10ml。將濃縮物傾倒在二異丙基醚(150ml)中，通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥。向固體在二氯甲烷(4.5ml)中的溶液中加入苯甲醚(1.5ml)和三氟乙酸(4.5ml)。將得到的溶液在室溫下攪拌6小時并傾倒在二異丙基醚(150ml)中。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥得到粗產(chǎn)物(1.27g)，將其通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將包含所需產(chǎn)物的洗脫液真空濃縮到約20ml。濃縮物進一步通過使用ODS柱的制備HPLC純化，用15％乙腈/水洗脫。將洗脫液真空濃縮到約10ml并加入0.05mol/l硫酸(3.64ml)。將得到的溶液凍干，得到7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-[(2S)-(2，6-二氨基己?；?氨基]-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽(166.4mg)，為無定形固體。
1H-NMR(D2O)δ1.49-1.57(2H，m)，1.61(6H，d，J＝3.2Hz)，1.71-1.78(2H，m)，1.95-2.09(2H，m)，3.02(2H，t，J＝7.8Hz)，3.23(1H，d，J＝17.9Hz)，3.47(1H，d，J＝17.9Hz)，3.74(3H，s)，4.23(1H，t，J＝6.4Hz)，5.01(1H，d，J＝16.0Hz)，5.25(1H，d，J＝16.0Hz)，5.25(1H，d，J＝5.0Hz)，5.86(1H，d，J＝5.0Hz)，8.13(1H，s)制備例56向5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸(7.1g)、N-(2-氨基乙基)三苯甲基胺(15.1g)和三乙胺(10.1g)的氯仿(200ml)溶液中加入N-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(9.6g)，并將混合物在室溫下攪拌16小時。將反應混合物連續(xù)地用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗。將有機層用硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物與乙酸乙酯研磨并真空干燥，得到5-氨基-1-甲基-N-[2-(三苯甲基氨基)乙基]-1H-吡唑-4-甲酰胺(11.4g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ2.35-2.38(2H，m)，3.45-3.49(2H，m)，3.63(3H，s)，5.15(1H，br)，5.91(1H，br)，7.17-7.49(16H，m)制備例57在室溫下向氫化鋰鋁(3.78g)在四氫呋喃(150ml)中的懸浮液中加入5-氨基-1-甲基-N-[2-(三苯甲基氨基)乙基]-1H-吡唑-4-甲酰胺(10.64g)。反應混合物在回流下攪拌18小時。在冰浴上冷卻之后，向反應混合物加入氟化鈉(20g)和四氫呋喃水溶液(10ml)。過濾除去不溶性物質。將得到的濾液真空濃縮并將殘余物溶解于氯仿中。將溶液用10％氫氧化鈉水溶液洗。有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將油狀的殘余物與乙酸乙酯研磨并真空干燥，得到N-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基]-N′-三苯甲基乙烷-1，2-二胺(3.2g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ2.45(2H，br)，2.68(2H，br)，3.34(3H，s)，3.71(2H，s)，6.94(1H，br)，7.09-7.40(16H，m)制備例58向N-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基]-N′-三苯甲基乙烷-1，2-二胺(7.50g)和三乙胺(2.86g)的氯仿(100ml)溶液中加入({[(三氟甲基)磺酰基]亞氨基}亞甲基)雙氨基甲酸二叔丁酯(11.05g)。將混合物在室溫下攪拌4天。將反應混合物連續(xù)地用10％檸檬酸水溶液和鹽水洗，并將有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法純化，用3％甲醇/氯仿洗脫，得到N-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基]-N′，N″-雙(叔丁氧基羰基)-N-[2-(三苯甲基氨基)乙基]胍(3.00g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.42(9H，brs)，1.51(9H，brs)，2.42-2.46(2H，m)，3.30-3.34(2H，m)，3.57(3H，s)，4.08(2H，s)，5.34(1H，brs)，6.96(1H，s)，7.21-7.41(15H，m)，10.54(1H，br)制備例59向N-[(5-氨基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基]-N′，N″-雙(叔丁氧基羰基)-N-[2-(三苯甲基氨基)乙基]胍(1.84g)的吡啶(10ml)溶液中加入三苯基氯甲烷(0.94g)并將混合物在室溫下攪拌3小時。向反應混合物中加入氯仿(50ml)。將混合物連續(xù)地用10％檸檬酸水溶液、鹽水和飽和碳酸氫鈉水溶液洗。有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法純化，用3％甲醇/氯仿洗脫，得到N′，N″-雙(叔丁氧基羰基)-N-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]甲基}-N-[2-(三苯甲基氨基)乙基]胍(1.60g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.32(9H，s)，1.41(9H，s)，2.25-2.45(4H，m)，2.71(3H，s)，3.35(1H，brs)，3.59(2H，s)，5.97(1H，br)，7.06(1H，s)，7.18-7.41(30H，m)，10.21(1H，br)實施例22向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯(1.36g)的N，N-～甲基甲酰胺(4.0ml)溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(1.31g)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向溶液中加入碘化鉀(465mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向反應混合物中加入N′，N ″-雙(叔丁氧基羰基)-N-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]甲基}-N-[2-(三苯甲基氨基)乙基]胍(1.60g)，并將整個混合物在40℃攪拌4小時。向得到的反應混合物中加入乙酸乙酯(150ml)并將溶液連續(xù)地用鹽水(80ml)、10％三氟乙酸鈉水溶液(80ml)和鹽水(80ml)洗，無水硫酸鎂干燥并過濾。將濾液真空濃縮到約10ml。將濃縮物傾倒在二異丙基醚(150ml)中，通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥。向固體在二氯甲烷(6.0ml)中的溶液中加入苯甲醚(2.0ml)和三氟乙酸(6.0ml)。將得到的溶液在室溫下攪拌6小時并傾倒在二異丙基醚(200ml)中。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥得到粗產(chǎn)物(1.40g)，將其通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將包含所需產(chǎn)物的洗脫液真空濃縮到約20ml。濃縮物進一步通過使用ODS柱的制備HPLC純化，用15％乙腈/水洗脫。將洗脫液真空濃縮到約10ml并加入0.05mol/l硫酸(2.0ml)。將得到的溶液凍干，得到7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-{[1-(2-氨基乙基)胍基]甲基}-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽(61.9mg)，為無定形固體。
1H-NMR(D2O)δ1.62(6H，d，J＝3.2Hz)，3.26(1H，d，J＝17.9Hz)，3.33(2H，t，J＝6.0Hz)，3.54(1H，d，J＝17.9Hz)，3.61(2H，t，J＝6.0Hz)，3.72(3H，s)，4.19(2H，s)，5.01(1H，d，J＝15.6Hz)，5.23(1H，d，J＝15.6Hz)，5.27(1H，d，J＝5.0Hz)，5.86(1H，d，J＝5.0Hz)，8.09(1H，s)制備例60將2-氨基丙二酸二乙酯(1.68g)和(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯(3.20g)的脫水氯仿(5ml)溶液在回流下攪拌。7小時之后，向反應混合物加入另外的(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯(3.20g)并將混合物在回流下攪拌2天。向反應混合物中加入水并將溶液用己烷和二異丙基醚(1∶1)的混合溶劑洗。水層用二氯甲烷提取。有機層用水洗并用5％檸檬酸水溶液提取。水層用乙醚洗并用氫氧化鈉堿化。水溶液用二氯甲烷提取。有機層用鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物與二異丙基醚和乙醚的混合溶劑研磨，得到7-氨基-6，8-二氧代-2，5，9，12-四氮雜十三烷二酸二叔丁酯(1.87g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.44(18H，s)，2.19(2H，br)，3.1-3.5(8H，m)，4.00(1H，s)，4.94(2H，br)，8.01(2H，br)制備例61
向N-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基甲酸苯酯(949mg)和7-氨基-6，8-二氧代-2，5，9，12-四氮雜十三烷二酸二叔丁酯(968mg)在脫水氯仿(4ml)中的懸浮液中加入N-乙基二異丙基胺(0.342ml)并將混合物在回流下攪拌5小時。向反應混合物中加入乙醚。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥，得到7-[({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)氨基]-6，8-二氧代-2，5，9，12-四氮雜十三烷二酸二叔丁酯(1.38g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.42(18H，s)，2.93(3H，s)，3.2-3.3(4H，m)，3.3-3.4(4H，m)，4.68(1H，d，J＝4.1Hz)，5.63(1H，br)，7.1-7.4(15H，m)，7.36(1H，br)，7.43(1H，brs)實施例23向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯(681mg)的N，N-二甲基甲酰胺(2ml)溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(656mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向溶液中加入碘化鉀(232mg)并將混合物在室溫下攪拌55分鐘。向反應混合物中加入7-[({[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}羰基)氨基]-6，8-二氧代-2，5，9，12-四氮雜十三烷二酸二叔丁酯(784mg)的N，N-二甲基甲酰胺(2ml)溶液，并將整個混合物在45-50℃攪拌3小時，然后在50-55℃攪拌1小時。向得到的反應混合物中加入乙酸乙酯(50ml)并將溶液連續(xù)地用水(50ml×2)、10％三氟乙酸鈉水溶液(50ml)和鹽水(50ml)洗，無水硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮到約5.5g。將濃縮物傾倒在二異丙基醚(80ml)中，通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥。向固體在二氯甲烷(3ml)中的溶液中加入苯甲醚(1ml)和三氟乙酸(3ml)。將得到的溶液在室溫下攪拌4小時并傾倒在二異丙基醚(80ml)中。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥，得到粗產(chǎn)物(810mg)，將其通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將包含所需產(chǎn)物的洗脫液真空濃縮到約20ml。濃縮物進一步通過使用ODS柱的制備HPLC純化，用12％乙腈/水洗脫。將洗脫液真空濃縮到約10ml并加入0.05M硫酸(2.28ml)。將得到的溶液凍干，得到7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-{[({1，3-雙[(2-氨基乙基)氨基]-1，3-二氧代丙-2-基}氨基)羰基]氨基}-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽(98mg)，為無定形固體。
1H-NMR(D2O)δ1.61(3H，s)，1.61(3H，s)，3.18(4H，t，J＝5.7Hz)，3.22(1H，d，J＝17.9Hz)，3.49(1H，d，J＝17.9Hz)，3.4-3.7(4H，m)，3.72(3H，s)，5.02(1H，s)，5.08(1H，d，J＝16.0Hz)，5.23(1H，d，J＝16.0Hz)，5.26(1H，d，J＝5.0Hz)，5.87(1H，d，J＝5.0Hz)，7.95(1H，s)制備例62向1-甲基-N5-三苯甲基-1H-吡唑-4，5-二胺(1.60g)在乙醇(50ml)中的懸浮液中加入三乙胺(0.627ml)和方形酸二乙酯(diethylsquarate)(0.858ml)，并將混合物在室溫下攪拌22小時。向反應混合物中加入乙酸乙酯(200ml)和己烷(100ml)并將溶液連續(xù)地用水、5％檸檬酸水溶液和鹽水洗。將有機層用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。將結晶的殘余物用乙醚洗并真空干燥，得到3-乙氧基-4-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-環(huán)丁烯-1，2-二酮(1.45g)，為固體。1H-NMR(CDCl3)δ1.42(3H，br)，2.99(3H，s)，4.41(1H，brs)，4.69(2H，q，J＝7.2Hz)，6.40(1H，br)，7.13-7.35(16H，m)制備例63向[亞氨基雙(2，1-乙二基)]雙氨基甲酸二叔丁酯(2.13g)和3-乙氧基-4-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-環(huán)丁烯-1，2-二酮(1.91g)的氯仿(10ml)溶液中加入三乙胺(0.558ml)并將混合物在回流下攪拌。9小時之后，向反應混合物加入額外的[亞氨基雙(2，1-乙二基)]雙氨基甲酸二叔丁酯(1.82g)并將混合物在回流下攪拌1天。向反應混合物中加入乙醚并將溶液連續(xù)地用5％檸檬酸水溶液、水和鹽水洗。將有機層用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過硅膠柱色譜法純化，用二氯甲烷/甲醇(20∶1)洗脫，得到{[(2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3，4-二氧代環(huán)丁-1-烯-1-基)亞氨基]雙(2，1-乙二基)}雙氨基甲酸二叔丁酯(1.84g)，為固體。
1H-NMR(CDCl3)δ1.39(18H，s)，2.85(3H，s)，3.0-3.2(4H，m)，3.3-3.5(2H，m)，3.7-3.9(2H，m)，5.10(1H，br)，5.16(1H，br)，5.28(1H，s)，7.1-7.4(16H，m)，8.93(1H，brs)實施例24向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯(817mg)的N，N-二甲基甲酰胺(2.4ml)溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(788mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向溶液中加入碘化鉀(279mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向反應混合物中加入{[(2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3，4-二氧代環(huán)丁-1-烯-1-基)亞氨基]雙(2，1-乙二基)}雙氨基甲酸二叔丁酯(883mg)的N，N-二甲基甲酰胺(1.8ml)溶液，并將整個混合物在45-50℃攪拌3小時并然后在50-55℃攪拌3小時。向得到的反應混合物中加入乙酸乙酯(50ml)并將溶液連續(xù)地用水(50ml×2)、10％三氟乙酸鈉水溶液(50ml)和鹽水(50ml)洗，無水硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮到約8g。將濃縮物傾倒在二異丙基醚(80ml)中，通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥。向固體在二氯甲烷(4.1ml)中的溶液中加入苯甲醚(1.36ml)和三氟乙酸(4.1ml)。將得到的溶液在室溫下攪拌4小時并傾倒在二異丙基醚(100ml)中。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥得到粗產(chǎn)物(1.11g)，將其通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將包含所需產(chǎn)物的洗脫液真空濃縮到約20ml。濃縮物進一步通過使用ODS柱的制備HPLC純化，用10％乙腈/0.1％三氟乙酸水溶液洗脫。將洗脫液(265ml)真空濃縮到約10ml并凍干，得到7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-({2-[雙(2-氨基乙基)氨基]-3，4-二氧代-1-環(huán)丁烯-1-基}氨基)-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸三氟乙酸鹽(26mg)，為無定形固體。
1H-NMR(D2O)δ1.62(6H，s)，3.35(1H，d，J＝18.3Hz)，3.40(4H，t，J＝6.0Hz)，3.47(2H，t，J＝6.4Hz)，3.73(3H，s)，3.73(1H，d，J＝18.3Hz)，3.9-4.1(2H，m)，4.8-5.1(1H，m)，5.12(1H，d，J＝15.1Hz)，5.31(1H，d，J＝4.6Hz)，5.83(1H，d，J＝4.6Hz)，7.97(1H，s)制備例64向(2-氨基-1，3-丙二基)雙氨基甲酸二叔丁酯(810mg)和3-乙氧基-4-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3-環(huán)丁烯-1，2-二酮(957mg)在乙醇(10ml)中的懸浮液中加入三乙胺(0.279ml)并將混合物在回流下攪拌1天。將反應混合物真空濃縮到約5ml。向濃縮物中加入二異丙基醚。通過過濾收集沉淀的晶體并真空干燥，得到{2-[(2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3，4-二氧代環(huán)丁-1-烯-1-基)氨基]-1，3-丙二基}雙氨基甲酸二叔丁酯(1.22g)，為固體。
1H-NMR(DMSO-d6)δ1.37(18H，s)，2.73(3H，s)，2.9-3.3(4H，m)，3.9-4.1(1H，m)，5.84(1H，br)，6.85(2H，br)，7.07(1H，brs)，7.1-7.3(15H，m)，8.05(1H，br)實施例25向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯(817mg)的N，N-二甲基甲酰胺(2.4ml)溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(788mg)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向溶液中加入碘化鉀(279mg)并將混合物在室溫下攪拌55分鐘。向反應混合物中加入{2-[(2-{[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]氨基}-3，4-二氧代環(huán)丁-1-烯-1-基)氨基]-1，3-丙二基}雙氨基甲酸二叔丁酯(866mg)的N，N-二甲基甲酰胺(6.4ml)溶液，并將整個混合物在45-50℃攪拌2.5小時，然后在50-55℃攪拌3小時。向得到的反應混合物中加入乙酸乙酯(50ml)和水(50ml)。在濾掉沉淀物之后，將濾液分離。有機層連續(xù)地用水(50ml)、10％三氟乙酸鈉水溶液(50ml)和鹽水(50ml)洗，無水硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮到約7g。將濃縮物傾倒在二異丙基醚(80ml)中，通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥。向固體在二氯甲烷(3.4ml)中的溶液中加入苯甲醚(1.13ml)和三氟乙酸(3.4ml)。將得到的溶液在室溫下攪拌4小時并傾倒在二異丙基醚(100ml)中。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥得到粗產(chǎn)物(902mg)，將其通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將包含所需產(chǎn)物的洗脫液真空濃縮到約20ml。濃縮物進一步通過使用ODS柱的制備HPLC純化，用8％乙腈/0.1％三氟乙酸水溶液洗脫。將洗脫液(280ml)真空濃縮到約10ml并凍干，得到7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-{[2-(1，3-二氨基丙-2-基)氨基-3，4-二氧代-1-環(huán)丁烯-1-基]氨基}-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸三氟乙酸鹽(8.3mg)，為無定形固體。
1H-NMR(D2O)δ1.62(6H，s)，3.2-3.5(5H，m)，3.6-3.8(1H，m)，3.72(3H，s)，4.6-5.0(2H，m)，5.12(1H，d，J＝13.3Hz)，5.31(1H，d，J＝4.6Hz)，5.82(1H，d，J＝4.6Hz)，8.04(1H，s)制備例65在冰冷卻下向1，1′-草?；溥?1.52g)的N，N-二甲基甲酰胺(16ml)溶液中加入1-甲基-N5-三苯甲基-1H-吡唑-4，5-二胺(1.42g)，并將混合物在室溫下攪拌1小時。在冰冷卻下向反應混合物中加入[亞氨基雙(2，1-乙二基)]雙氨基甲酸二叔丁酯(4.55g)的N，N-二甲基甲酰胺(4ml)溶液，并將混合物在室溫下攪拌1天，然后將其在室溫下靜置9天。向反應混合物中加入乙酸乙酯(50ml)和二氯甲烷(20ml)。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥得到[({2-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]-2-氧代乙?；鶀亞氨基)雙(2，1-乙二基)]雙氨基甲酸二叔丁酯(1.79g)，為固體。母液連續(xù)地用水、5％檸檬酸水溶液和鹽水洗。將有機層用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。將結晶殘余物用二氯甲烷和乙醚的混合溶劑洗，真空干燥并與先前的固體合并，得到[({2-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]-2-氧代乙?；鶀亞氨基)雙(2，1-乙二基)]雙氨基甲酸二叔丁酯(2.44g)。
1H-NMR(CDCl3)δ1.37(9H，s)，1.45(9H，s)，2.97(3H，s)，3.2-3.4(4H，m)，3.4-3.6(2H，m)，3.78(2H，t，J＝6.2Hz)，4.53(1H，brs)，5.09(1H，br)，5.34(1H，br)，7.1-7.4(15H，m)，7.49(1H，s)，8.13(1H，brs)實施例26向7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-叔丁氧基羰基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-氯甲基-3-頭孢-4-羧酸4-甲氧基芐酯(1.36g，2.00mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(4ml)溶液中加入N-(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(1.31g)并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。向溶液中加入碘化鉀(465mg)并將混合物在室溫下攪拌40分鐘。向反應混合物中加入[({2-[1-甲基-5-(三苯甲基氨基)-1H-吡唑-4-基]-2-氧代乙?；鶀亞氨基)雙(2，1-乙二基)]雙氨基甲酸二叔丁酯(1.42g)的N，N-二甲基甲酰胺(6ml)溶液，并將整個混合物在45-50℃攪拌3小時，然后在50-55℃攪拌1小時。向得到的反應混合物中加入乙酸乙酯(100ml)并將溶液連續(xù)地用水(100ml×2)，10％三氟乙酸鈉水溶液(100ml)和鹽水(50ml)洗，無水硫酸鈉干燥并過濾。將濾液真空濃縮到約9g。將濃縮物傾倒在二異丙基醚(150ml)中，通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥。向固體在二氯甲烷(4.8ml)中的溶液中加入苯甲醚(1.6ml)和三氟乙酸(4.8ml)。將得到的溶液在室溫下攪拌4小時并傾倒在二異丙基醚(150ml)中。通過過濾收集得到的沉淀物并真空干燥得到粗產(chǎn)物(1.24g)，將其通過使用ODS柱的制備HPLC純化。將包含所需產(chǎn)物的洗脫液真空濃縮到約20ml。濃縮物進一步通過使用ODS柱的制備HPLC純化，用30％乙腈/水洗脫。將洗脫液真空濃縮到約10ml并加入0.05M硫酸(0.77ml)。將得到的溶液凍干，得到7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-({2-[雙(2-氨基乙基)氨基]-2-氧代乙酰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽(30mg)，為無定形固體。
1H-NMR(D2O)δ1.61(6H，s)，3.24(1H，d，J＝17.9Hz)，3.38(2H，t，J＝5.7Hz)，3.41(2H，t，J＝6.4Hz)，3.47(1H，d，J＝17.9Hz)，3.48(2H，t，J＝6.4Hz)，3.72(2H，t，J＝5.7Hz)，3.75(3H，s)，5.10(1H，d，J＝15.4Hz)，5.26(1H，d，J＝5.0Hz)，5.27(1H，d，J＝15.4Hz)，5.87(1H，d，J＝5.0Hz)，8.15(1H，s)本申請基于2003年9月18日在澳大利亞提交的申請2003905084，其內(nèi)容被并入本文作為參考。
權利要求
1.下式[I]所示的化合物或其可藥用鹽 其中R1為低級烷基或羥基(低級)烷基，和R2為氫或氨基保護基，或R1和R2結合在一起形成低級亞烷基；R3為-A-R6其中A為鍵，其中n為0或1的-NHCO-(CH2CO)n-，低級亞烷基，-NH-CO-CO-或 和R6為 或 其中Z1和Z2獨立地為-NHCO-或-CONH-，k、q和r獨立地為0或1，s和t獨立地為0到6的整數(shù)，m和p獨立地為0到6的整數(shù)，和R7、R8、R9和R10獨立地為氨基、被保護的氨基、胍基、被保護的胍基、脒基或被保護的脒基；R4為羧基或被保護的羧基；和R5為氨基或被保護的氨基。
2.權利要求1所述的化合物或其可藥用鹽，其中R1為低級烷基或羥基(低級)烷基，和R2為氫、芳基(低級)烷基或?；騌1和R2結合在一起形成低級亞烷基；R4為羧基或被酯化的羧基；R5為氨基、芳基(低級)烷基氨基或?；被?；和R7、R8、R9和R10獨立地為氨基、芳基(低級)烷基氨基、?；被?、胍基、酰基胍基、脒基或?；呋?。
3.權利要求2所述的化合物或其可藥用鹽，其中R1為低級烷基或羥基(低級)烷基，和R2為氫、芳基(低級)烷基、低級烷?；虻图壨檠趸驶?，或R1和R2結合在一起形成低級亞烷基；R4為羧基或低級烷氧基羰基；R5為氨基、芳基(低級)烷基氨基、低級烷酰基氨基或低級烷氧基羰基氨基；和R7、R8、R9和R10獨立地為氨基、芳基(低級)烷基氨基、低級烷酰基氨基、低級烷氧基羰基氨基、胍基、2，3-雙[(低級)烷氧基羰基]胍基、脒基或N1，N2-雙[(低級)烷氧基羰基]脒基。
4.權利要求3所述的化合物或其可藥用鹽，其中R1為低級烷基；R2為氫；R4為羧基；R5為氨基；和R7、R8、R9和R10為氨基。
5.權利要求1所述的化合物或其可藥用鹽，其中A為-NHCO-(CH2CO)n-，其中n為0或1，和R6為 或 其中m和p獨立地為1到3的整數(shù)，R7、R8、R9和R10獨立地為氨基或被保護的氨基。
6.權利要求5所述的化合物或其可藥用鹽，其中A為-NHCO-，和R7、R8、R9和R10為氨基。
7.權利要求1所述的化合物或其可藥用鹽，其中A為-NHCO-(CH2CO)n-其中n為0或1，-NH-CO-CO-或 和R6為 或 其中s、t、m和p獨立地為1到6的整數(shù)，R7、R8、R9和R10為氨基或被保護的氨基。
8.權利要求1所述的化合物或其可藥用鹽，其中A為鍵或-NHCO-，和R6為 其中s、t、R7和R8各自的定義如權利要求1中的定義。
9.權利要求8所述的化合物或其可藥用鹽，其中A為-NHCO-，和R7和R8獨立地為氨基或胍基。
10.權利要求1所述的化合物或其可藥用鹽，其中A為低級亞烷基，和R6為 其中m和p各自的定義如權利要求1中的定義，和R9和R10獨立地為氨基或脒基。
11.權利要求1所述的化合物或其可藥用鹽，其中A為-NHCO-，和R6為 其中Z1、Z2、k、q和r各自的定義如權利要求1中的定義，s和t獨立地為1到6的整數(shù)，R7和R8為氨基。
12.選自下組中的權利要求1所述的化合物或其可藥用鹽7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-({[雙(2-氨基乙基)氨基]羰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑基}甲基-3-頭孢-4-羧酸鹽，7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-({[雙(2-氨基乙基)氨基]羰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑基}甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽，7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-[3-氨基-4-({[N-(2-氨基乙基)-N-(3-氨基丙基)氨基]羰基}氨基)-2-甲基-1-吡唑基]甲基-3-頭孢-4-羧酸鹽，7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-(3-氨基-4-{3-[2-氨基-1-(氨基甲基)乙基]脲基}-2-甲基-1-吡唑基)甲基-3-頭孢-4-羧酸硫酸氫鹽，和7β-[(Z)-2-(5-氨基-1，2，4-噻二唑-3-基)-2-(1-羧基-1-甲基乙氧基亞氨基)乙酰氨基]-3-{3-氨基-4-[(3-{[2-氨基-1-(氨基甲基)乙基]氨基}-3-氧代丙?；?氨基]-2-甲基-1-吡唑基}甲基-3-頭孢-4-羧酸鹽。
13.制備式[I]所示的化合物或其鹽的方法 其中R1為低級烷基或羥基(低級)烷基，和R2為氫或氨基保護基，或R1和R2結合在一起形成低級亞烷基；R3為-A-R6其中A為鍵，其中n為0或1的-NHCO-(CH2CO)n-，低級亞烷基，-NH-CO-CO-或 和R6為 或 其中Z1和Z2獨立地為-NHCO-或-CONH-，k、q和r獨立地為0或1，s和t獨立地為0到6的整數(shù)，m和p獨立地為0到6的整數(shù)，和R7、R8、R9和R10獨立地為氨基、被保護的氨基、胍基、被保護的胍基、脒基或被保護的脒基；所述方法包括(1)使式[II]所示的化合物或其在氨基處的活性衍生物或其鹽與式[III]所示的化合物或其在羧基處的活性衍生物或其鹽反應，得到式[I]所示的化合物或其鹽式[II]為 其中R1、R2和R3各自的定義如上所述，式[III]為 其中R4和R5各自的定義如上所述，式[I]為 其中R1、R2、R3、R4和R5各自的定義如上所述，或(2)使式[Ia]所示的化合物或其鹽經(jīng)過氨基保護基的消除反應，得到式[Ib]所示的化合物或其鹽式[Ia]為 其中R1、R2、R4、R5和A各自的定義如上所述，R6a為 或 其中Z1、Z2、k、q、r、s、t、m和p各自的定義如上所述，R7a、R8a、R9a和R10a獨立地為被保護的氨基、被保護的胍基或被保護的脒基，式[Ib]為 其中R1、R2、R4、R5和A各自的定義如上所述，R6b為 或 其中Z1、Z2、k、q、r、s、t、m和p各自的定義如上所述，R7b、R8b、R9b和R10b獨立地為氨基、胍基或脒基，或(3)使式[VI]所示的化合物或其鹽與式[VII]所示的化合物或其鹽反應，得到式[VIII]所示的化合物或其鹽，并且使式[VIII]所示的化合物或其鹽經(jīng)過羧基保護基的消除反應，得到式[I]所示的化合物或其鹽式[VI]為 其中R4和R5各自的定義如上所述，R11為被保護的羧基，Y為離去基團，式[VII]為 其中R1、R2和R3各自的定義如上所述，式[VIII]為 其中R1、R2、R3、R4、R5和R11各自的定義如上所述，X為陰離子，式[I]為 其中R1、R2、R3、R4和R5各自的定義如上所述。
14.包括權利要求1所述的化合物或其可藥用鹽與可藥用載體的混合物的藥物組合物。
15.權利要求1所述的化合物或其可藥用鹽，用作藥物。
16.權利要求1所述的化合物或其可藥用鹽，用作抗微生物劑。
17.權利要求1所述的化合物或其可藥用鹽在生產(chǎn)用于治療感染性疾病的藥物中的應用。
18.治療感染性疾病的方法，包括對人或動物給藥權利要求1所述的化合物或其可藥用鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及下式[I]所示的化合物或其可藥用鹽其中R
文檔編號C07D501/00GK1852715SQ200480026900
公開日2006年10月25日 申請日期2004年9月17日 優(yōu)先權日2003年9月18日
發(fā)明者山中敏夫, 村埜賢司, 戶田彩子, 大木秀德, 大垣勝, 奧田真也, 川端浩二, 井上敏, 三隅啟司, 伊藤健治, 佐藤賢治 申請人:安斯泰來制藥有限公司, 湧永制藥株式會社