專利名稱：海南青牛膽植物總甾酮的醫(yī)藥用途及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及海南青牛膽植物總甾酮的醫(yī)藥用途及其制備方法。
海南青牛膽(Tinospora hainanensis H.S.Lo et Z.X.Li.)系防己科(Menispermaceae)青牛膽屬(Tinospora)植物，為海南省特有物種，藥用其藤莖。民間主要用于治療筋骨損傷和關(guān)節(jié)疼痛等癥。海南青牛膽植物總甾酮成分是β-蛻皮甾酮(β-ecdysone)、羅漢松甾酮A(makisterone A)、24-表-羅漢松甾酮A(24-epi-makisterone A)。藥理學(xué)研究首次發(fā)現(xiàn)，海南青牛膽植物總甾酮具有治療因鈣流失和成骨細(xì)胞合成受阻等因素造成的骨質(zhì)疏松癥作用。
本發(fā)明的目的是提供一種海南青牛膽植物總甾酮的醫(yī)藥用途。
本發(fā)明的另一目的是提供一種海南青牛膽植物總甾酮的制備方法。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的海南青牛膽植物總甾酮主要包含β-蛻皮甾酮(β-ecdysone)、羅漢松甾酮A(makisterone A)、24-表-羅漢松甾酮A(24-epi-makisterone A)。
結(jié)構(gòu)式 β-蛻皮甾酮(β-ecdysone) 羅漢松甾酮A(makisterone A) 24-表-羅漢松甾酮A(24-epi-makisterone A)海南青牛膽植物總甾酮的醫(yī)藥用途是改善因鈣流失或成骨細(xì)胞合成受阻引起的骨質(zhì)疏松。
制備方法包括().海南青牛膽用醇類溶劑提取；(2).提取物經(jīng)吸附樹脂富集；(3).富集后的中間產(chǎn)物再經(jīng)吸附劑進(jìn)行純化。
海南青牛膽植物總甾酮降低鈣流失和促骨細(xì)胞形成作用，迄今未見報(bào)道，尚屬首次發(fā)現(xiàn)。①.200μg/ml的海南青牛膽植物總甾酮能顯著地抑制鈣的流失作用；②.200μg/ml的海南青牛膽植物總甾酮能顯著地促進(jìn)成骨細(xì)胞的形成，由此可表明海南青牛膽植物總甾酮可改善因鈣流失或成骨細(xì)胞合成受阻而造成的骨質(zhì)疏松。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是為海南青牛膽提供了一種新的醫(yī)藥用途，即用來改善因鈣流失或成骨細(xì)胞合成受阻而誘發(fā)的骨質(zhì)疏松。本發(fā)明采用的制備方法優(yōu)點(diǎn)是，除掉了大量的水溶性雜質(zhì)和脂溶性雜質(zhì)，從而提高活性，降低毒性，使活性成分更加集中，方法科學(xué)穩(wěn)定，工藝簡單，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述。
實(shí)施例按本發(fā)明提取方法制備的總甾酮主要包含β-蛻皮甾酮(β-ecdysone)、羅漢松甾酮A(makisterone A)、24-表-羅漢松甾酮A(24-epi-makisterone A)和少量脂溶性雜質(zhì)。在總甾酮中除去以上3種主要成分外，允許有脂溶性成分。上述總甾酮有效成分的含意是3種甾酮單體的混合物。海南青牛膽總甾酮的提取方法具體包括以下3個步驟1、海南青牛膽醇提取藥材用醇回流提取3次，3次的藥材與醇的比例分別為1∶8，1∶6，和1∶4，3次時間分別為2，1.5和1小時，紗布過濾，合并3次濾液，減壓回收至無醇味，得稠膏。
2、樹脂富集所得稠膏按1kg藥材加0.2～1L水的比例稀釋，離心，上清液加入到已處理好的大孔吸附樹脂柱上，上樣溶液體積量與濕大孔吸附樹脂量之比為0.2～1L∶1kg。用10倍生藥量的水洗脫至無色，繼用10倍生藥量的90％醇洗脫，合并醇洗脫液，減壓回收醇至干，得總甾酮干膏。
3、吸附劑純化所得干膏用少量甲醇分次加熱提取，合并甲醇液，加入2倍上柱干膏量的200～300目柱層析用Al2O3，使其充分吸附，拌半勻，揮盡甲醇。將拌有樣的Al2O3加到處理好的Al2O3柱上，上柱干膏量與Al2O3量之比為1∶6。先用氯仿∶甲醇＝20∶1洗脫劑洗脫，按3流份/保留體積接液(1保留體積以上柱氧化鋁量∶洗脫劑＝1g∶1.2ml計(jì))，共洗10個保留體積。再用同樣量的氯仿∶甲醇＝4∶1梯度洗脫，回收洗脫劑得總甾酮，收率為0.17％。
權(quán)利要求
1.海南青牛膽植物總甾酮的醫(yī)藥用途，其特征在于海南青牛膽植物總甾酮的醫(yī)藥用途是治療因鈣流失和成骨細(xì)胞合成受阻等因素造成的骨質(zhì)疏松癥。
2.海南青牛膽植物總甾酮的制備方法，其特征在于海南青牛膽植物總甾酮主要含有β-蛻皮甾酮(β-ecdysone)、羅漢松甾酮A(Makisterone A)和24-表-羅漢松甾酮A(24-epi-makisterone A)等，允許有少量雜質(zhì)存在，總甾酮含量在50％以上，三種主要成分的結(jié)構(gòu)式為 β-蛻皮甾酮(β-ecdysone) 羅漢松甾酮A(makisterone A) 24-表-羅漢松甾酮A(24-epi-makisterone A)海南青牛膽植物總甾酮的制備方法為(1).海南青牛膽藤莖用醇類溶劑回流提取藥材與醇的比例為1∶3～12倍，加熱于醇類的沸點(diǎn)下，每次0.5～3小時，提取2～3次，合并提取液；(2).提取物用吸附樹脂富集提取液加入到吸附樹脂柱上用水洗至淡黃色，用10％～90％的醇類洗下總甾酮，回收醇，冷凍干燥得棕色粉末；(3).棕色粉末經(jīng)吸附劑純化將棕色粉末經(jīng)醇類溶劑加熱溶解后，用1～4倍量的吸附劑充分拌樣后，揮盡多余的溶劑，后按1∶2～10倍量的比例加拌樣吸附劑至吸附劑柱上，先用氯仿∶甲醇＝20～100∶1洗脫脂溶性雜質(zhì)，后用氯仿∶甲醇＝1～8∶1洗脫海南青牛膽總甾酮部分，回收溶劑得到海南青牛膽植物總甾酮部分，為淡黃色粉末。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的海南青牛膽總甾酮制備方法，其特征在于提取溶劑可以是甲醇、丙醇或濃度為10～95％的乙醇；洗脫溶媒可以是濃度為10～95％的甲醇或乙醇；吸附劑可以是硅膠、氧化鋁或活性炭等吸附劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及海南青牛膽植物總甾酮的醫(yī)藥用途及其制備方法。其醫(yī)藥用途是改善因鈣流失或成骨細(xì)胞合成受阻引起的骨質(zhì)疏松。其制備方法包括(1)海南青牛膽用醇類溶劑提?。?2)提取物經(jīng)吸附樹脂富集；(3)富集后的中間產(chǎn)物再經(jīng)吸附劑進(jìn)行純化。本發(fā)明醫(yī)藥用途的優(yōu)點(diǎn)是，用來改善因鈣流失或成骨細(xì)胞合成受阻而誘發(fā)的骨質(zhì)疏松。本發(fā)明制備方法的優(yōu)點(diǎn)是，除掉了大量的水溶性雜質(zhì)和脂溶性雜質(zhì)，從而提高活性，降低毒性，使活性成分更加集中，方法科學(xué)穩(wěn)定，工藝簡單，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07J9/00GK1398589SQ02128429
公開日2003年2月26日 申請日期2002年8月3日 優(yōu)先權(quán)日2002年8月3日
發(fā)明者劉明生, 郭玲, 張俊清, 黃艷, 艾朝輝, 郭幼瑩 申請人:海南醫(yī)學(xué)院