專利名稱：維生素d類似物及其藥物用途的制作方法
化合物本發(fā)明涉及迄今未知的維生素D化合物，該類化合物在誘導(dǎo)分化和抑制某些細(xì)胞(包括皮膚細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞)的不良增殖方面顯示出強(qiáng)的活性，以及顯示出抗炎和免疫調(diào)節(jié)作用，涉及含有這些化合物的藥物制劑及制劑的劑量單位，并且涉及它們在治療和預(yù)防如下疾病中的應(yīng)用以異常細(xì)胞分化和/或細(xì)胞增殖為特征的疾病，例如癌癥，白血病，骨髓纖維變性，和牛皮癬，以及其他多種疾病狀態(tài)包括甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)，特別是于腎衰竭有關(guān)的繼發(fā)性甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)，糖尿病，高血壓，痤瘡，脫發(fā)，皮膚老化，AIDS，神經(jīng)變性疾病例如阿爾茨海默氏疾病，宿主抗移植物反應(yīng)，移植排斥，炎癥性疾病例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和哮喘，還涉及用于防止和/或治療類固醇誘導(dǎo)的皮膚萎縮，和涉及促進(jìn)骨生成和治療骨質(zhì)疏松癥。
研究顯示1α，25-二羥基-維生素D3(1，25(OH)2D3)可影響白介素的作用和/或產(chǎn)生(Muller，K.等，Immunol，Lett.，1988年，17361-366頁)，這表明此類化合物在治療以免疫系統(tǒng)機(jī)能障礙為特征的疾病方面具有潛力，所述疾病例如自身免疫疾病，AIDS，宿主抗移植物反應(yīng)和移植排斥，或其他以白介素-1生成異常為特征的病癥，例如炎癥疾病如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和哮喘。
研究還表明1，25(OH)2D3可刺激細(xì)胞分化并抑制細(xì)胞過度增殖(Abe，E.等，Proc.Natl.Acad.Sci.，U.S.A.，1981年，784990-4994頁)，這表明此類化合物在治療以異常細(xì)胞增殖和/或細(xì)胞分化為特征的疾病如白血病、骨髓纖維變性和牛皮癬方面具有潛力。
另外，1，25(OH)2D3或其前藥1α-OH-D3還被建議可用于治療高血壓(Lind，L.等，Acta Med.Scand.，1987年，222423-427頁)和糖尿病(Inomata，S.等，Bone Minera.，1986年，1187-192頁)。有關(guān)遺傳性維生素D抗性與脫發(fā)間聯(lián)系的最近研究暗示了1，25(OH)2D3的另一適應(yīng)征用1，25(OH)2D3治療可促進(jìn)毛發(fā)生長(Editorial，Lancet，1989年，3月4478頁)。同時，局部施用1，25(OH)2D3可減少雄性Syrian倉鼠耳部皮脂腺大小的事實表明這種化合物可用于治療痤瘡(Malloy V.L.等，The TricontinentalMeeting for Investigative Dermatology，華盛頓，1989年)。
然而，已知1，25(OH)2D3對鈣代謝的有力作用嚴(yán)格限制了1，25(OH)2D3對這些適應(yīng)癥的治療前景；升高的血藥濃度將很快引起高鈣血。因此，該化合物及其某些合成的有效類似物將不適于用作需以較高劑量連續(xù)給藥治療的疾病，例如牛皮癬、白血病或免疫疾病。
最近許多有關(guān)維生素D類似物的描述顯示與體內(nèi)對鈣代謝的作用相比，它們在體外誘導(dǎo)細(xì)胞分化/抑制細(xì)胞增活性殖方面具有一定的選擇性(通過測定升高的血清鈣濃度和/或升高的尿鈣排泄)，這對于所能安全給予的劑量有不利的限制?；谶@種選擇性，已開發(fā)出其中的第一類藥物鈣泊三醇(calcipotriol)(INN)或鈣泊三烯(calcipotriene)(USAN)，并且作為牛皮癬的安全的局部治療藥物得到廣泛認(rèn)同。
對在此基礎(chǔ)上選擇出的另一維生素D類似物—斷鈣醇(Seocalcitol)[1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-(5’-乙基-5’-羥基-庚-1’(E)，3’(E)-雙烯-1’-基)-9，10-斷孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯]的研究，證實了經(jīng)全身給予亞毒性劑量的維生素D類似物可在體內(nèi)抑制乳腺癌細(xì)胞增殖(Colston，K.W.等，Biochem.Pharmacol.1992年，442273-2280頁和Mathiasen，I.S.等，J.Steroid Biochem.Molec.Biol.，1993年，46365-371頁)。
因此，對具有預(yù)期治療活性和最小毒性的維生素D類似物有持續(xù)的需求。具有與本發(fā)明化合物相似結(jié)構(gòu)的化合物公開于EP522013。然而，該化合物有明顯的皮膚刺激性，并且不太適于局部給藥或局部治療皮膚病。
本發(fā)明化合物提供迄今未公開的維生素D類似物，它們具有免疫抑制和細(xì)胞增殖抑制活性，但是沒有升高血鈣水平和皮膚刺激性等副作用。
本發(fā)明涉及通式I化合物及其與可藥用酸的可體內(nèi)水解酯 其中R1和R2可以相同或不同，代表(C1-C4)烷基，和R3代表氫、鹵素、(C1-C4)烷基、或O-(C1-C4)烷基。
試驗性手性碳原子的構(gòu)型(式I和la(如下)中星號)可以為R或S式。在本發(fā)明優(yōu)選化合物中，用星號標(biāo)明的碳原子被同一烷基替代(R1＝R2)并且因此為非手性的。
具體地說，本發(fā)明涉及通式la的化合物插入原文3頁式1 其中R1、R2和R3如上述定義。
式la化合物優(yōu)選其中R1和R2獨立地為甲基或乙基，并且R3為氫、F、Cl、甲基、乙基或甲氧基的化合物。此外，式la化合物優(yōu)選R3位于4-或5-位。式la化合物進(jìn)一步優(yōu)選R1和R2均為甲基且R3為氫、F或甲基。式la化合物最優(yōu)選R3為氫、5-甲基或4-F，且R1和R2均為甲基。
本發(fā)明還包括純的式I化合物的非對映異構(gòu)體或此類非對映異構(gòu)體的混合物。
本發(fā)明特別優(yōu)選的化合物及其與可藥用酸的可體內(nèi)水解酯選自1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-[((3-(2-羥基-2-丙基)-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯；1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-[((3-(2-羥基-2-丙基)-5-甲基-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯；1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-[((3-(2-羥基-2-丙基)-5-甲氧基-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯；1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-[((3-(2-羥基-2-丙基)-4-氟-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-烯。
在此所用的術(shù)語″烷基″指通過從任一碳原子除去氫而衍生于烷烴任何單價基團(tuán)，并且包括正烷基(n-烷基)的下組(subclasses)和伯、仲和叔烷基，并且含有多個特定碳原子例如(C1-C4)烷基如甲基、乙基、正-丙基和異丁基。烷烴指具有通式CnH2n+2的支鏈或非支鏈脂族烴，并且全部氫原子和飽和碳原子組成。
經(jīng)圖I所示的路線，采用Tetrahedron 43 4609(1987年)描述的維生素D衍生物1可制備式la化合物。同法也可制得式I化合物的鄰位和對位取代類似物。
化合物1可用NaBH4還原成醇2，它可以兩種方法轉(zhuǎn)化成式III化合物?；衔?可用具有A-C(R1)(R2)-C6H3(R3)-CH2-Z(A為經(jīng)適當(dāng)保護(hù)的羥基，例如四氫吡喃基氧基或三烷基甲硅烷基氧基；Z為離去基團(tuán)如Cl、Br、I或甲苯磺?；籆6H3(R3)為鄰-亞苯基、間位-亞苯基或?qū)ξ?亞苯基)構(gòu)造的側(cè)鏈烷化，或者化合物2的羥基可轉(zhuǎn)化為離去基團(tuán)，例如經(jīng)甲苯磺?；纬苫衔颕I，然后在堿性條件下用具有式A-C(R1)(R2)-C6H3(R3)-CH2OH構(gòu)造的側(cè)鏈處理而轉(zhuǎn)化成化合物III化合物III向la的轉(zhuǎn)化包括光異構(gòu)化和脫保護(hù)步驟，這與合成其它維生素D類似物的最后步驟類似，參見EP0227826。
具有A-C(R1)(R2)-C6H3(R3)-CH2-Z構(gòu)造的側(cè)鏈可以是已知的化合物或按PCT/DK90/00323描述制得。具有A-C(R1)(R2)-C6H3(R3)-CH2OH構(gòu)造的側(cè)鏈可以是已知的化合物，或者用A-C(R1)(R2)-C6H3(R3)-CH2-Z經(jīng)簡單水解制得。
路線1
反應(yīng)路線注解a)還原，例如用NaBH4。
b)在堿如KOH、KOBut或KH條件下，有或沒有催化劑如18-冠醚-6，于無水溶劑如THF中用具有A-C(RX)(R2)-C6H3(R3)-CH2-Z片段的側(cè)鏈烷基化。
c)將OH轉(zhuǎn)化為離去基團(tuán)X，例如可采用X＝O-Ts的甲苯磺酰化。
d)在堿如NaH存在下，于無水溶劑如DMF中與具有A-C(R1)(R2)-C6H3(R3)-CH2OH構(gòu)造的側(cè)鏈反應(yīng)。
e)在三重敏化劑例如蒽存在下，用hν異構(gòu)化。
f)用TBAF或HF脫保護(hù)。
在本說明書使用了以下標(biāo)準(zhǔn)縮略語But＝叔丁基，DMF＝N，N-二甲基甲酰胺，Et＝乙基，Ether＝乙醚，Me＝甲基，PPTS＝對甲苯磺酸吡啶鎓，Py＝吡啶，TBAF＝氟化四丁基銨，TBS＝叔丁基二甲甲硅烷，THF＝四氫呋喃，THP＝四氫-4H-吡喃-2-基，Ts＝甲苯磺?；?，TES＝三乙基甲硅烷基。藥理學(xué)方法供證明式1化合物效力的比較數(shù)據(jù)見下表A。在下面的列標(biāo)題″HaCaT，rel.″、″Calc.，rel.″、″受體結(jié)合rel.″和″皮膚刺激性評分″加以說明。
為了評估并比較試驗化合物對皮膚細(xì)胞的抗增殖活性例如抗牛皮癬效力，采用了一種自動無致死的、非致瘤性人皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞株，經(jīng)體內(nèi)HaCaT試驗測定3H-胸苷攝入(Mork Hansen，C.等，J.Invest.Dermatol.1996年，144-48頁)。在表A的″HaCaT，rel.″列，列出了實施例1化合物100對皮膚細(xì)胞的抗增殖活性(相對于1，25(OH)2D3，骨化三醇)；如表所示，化合物100對皮膚細(xì)胞的抗增殖活性與先有技術(shù)中的骨化三醇相同。
通常，1，25(OH)2D3對生物器官鈣平衡的典型作用包括對鈣血和鈣尿活性的影響，而這種作用對于本發(fā)明維生素D類似物來說是不良的，本發(fā)明化合物通過選擇性抑制某些細(xì)胞增殖，即可獲得所需的無鈣血作用和無皮膚刺激性?？捎靡阎椒ń?jīng)鼠體內(nèi)測定化合物的鈣血活性(Binderup，L.，Bramm，E.，Biochem.Pharmacol.1988年，37889-895頁)。在表A中的″Calc.，rel.″列，列出了實施例1化合物100的鈣血活性(相對于1，25(OH)2D3)；如表所示，與骨化三醇和先有技術(shù)EP522013中的化合物111相比，本發(fā)明化合物100的鈣血活性非常低。
另外，采用已知方法(Binderup，L.，Bramm，E.，Biochem.Pharmacol.1988年，37889-895頁)，測定了本發(fā)明化合物對維生素D受體的結(jié)合，并與骨化三醇作了比較。
皮膚刺激性實驗采用無毛豚鼠。采用Randomised occlusivepatch試驗48小時。試驗中，分別給予3個劑量水平(500μg/ml、50μg/ml和5μg/ml)的每種類似物和安慰劑溶液。對皮膚刺激性的評估采用盲法(blinded)并以臨床分級和對皮膚血流(激光多普勒灌注造影，LDPI)和紅斑(Minolta ChromaMeter)的客觀測量為基礎(chǔ)。此外，還測定了表皮厚度，它可作為表皮增殖的一個征兆。
刺激性評分標(biāo)準(zhǔn)如下0 無刺激性物質(zhì)+ 與骨化三醇比較，刺激性不明確或非常低的物質(zhì)++與骨化三醇比較，刺激性非常低的物質(zhì)+++ 刺激性與骨化三醇同一水平的的物質(zhì)++++ 比骨化三醇更刺激的物質(zhì)++++ 與骨化三醇比較，刺激性非常高的物質(zhì)+從表A中可見，化合物100的刺激性明顯低于先有技術(shù)化合物，并且在HaCaT-試驗(牛皮癬模型)中的效力與1，25(OH)2D3相似，其鈣血活性可以忽略，可與EP522013中的化合物111相比。表A化合物100和參考化合物的生物學(xué)試驗
表A注解** 相對于1，25(OH)2D3的數(shù)值；該值大于1則表明此化合物比1，25(OH)2D3更具活性?！? 1，25(OH)2D3的IC50與化合物IC50的比值，其中IC50為與對照品比較，50％抑制3H-胸苷結(jié)合所需的濃度。Ref 參考化合物(EP522013的化合物)本發(fā)明式I化合物在結(jié)構(gòu)上與EP522013公開的式I化合物密切相關(guān)。然而，與EP522013化合物相比，本發(fā)明化合物的皮膚刺激性令人驚奇地低。為了證明這種驚奇的效果，對實施例1化合物100與EP522013的化合物111作了比較。兩者結(jié)構(gòu)上的唯一區(qū)別是連接C22的氧與苯環(huán)間的鏈長度不同EP522013化合物111中的氧與苯環(huán)直接連接，而本發(fā)明化合物100中的氧則是通過亞甲基與苯環(huán)連接。
本發(fā)明化合物旨在用于藥物組合物，所述組合物可用于上述人或獸疾病局部或全身治療。
本發(fā)明化合物可與其它藥物或治療形式聯(lián)用。在治療牛皮癬時，本發(fā)明化合物可與例如類固醇或其它治療如光-或UV光-療法或PUVA療法聯(lián)用。在治療癌癥時，本發(fā)明化合物可與其它抗癌藥物或抗癌療法例如放射治療聯(lián)用。在預(yù)防移植排斥和移植物對宿主反應(yīng)時，或在治療自身免疫疾病時，本發(fā)明化合物與其它免疫抑制或免疫調(diào)節(jié)藥物或療法例如環(huán)孢菌素的聯(lián)用是有益的。
對于要達(dá)到的治療效果而言，所需式I化合物的量當(dāng)然可隨特定化合物、給藥途徑和所治療的哺乳動物的不同而變化。本發(fā)明化合物可經(jīng)非腸道的、關(guān)節(jié)內(nèi)、腸道內(nèi)或局部途徑給藥。本發(fā)明化合物在腸內(nèi)給藥時可很好地吸收，這也是治療全身疾病時的優(yōu)選給藥途徑。在治療皮膚病如牛皮癬或者眼部疾病時，優(yōu)選采用局部或腸內(nèi)給藥。
活性組分可以粗制化學(xué)藥品形式單獨給藥，優(yōu)選采用其藥物制劑形式給藥。活性組分一般占制劑重量的0.1ppm-0.1％。
因此，本發(fā)明獸用和人用制劑包括活性組分及與其結(jié)合的可藥用載體和其它適宜治療組分。所述載體必須是″可接受的″，這意味著可與制劑的其它組分配伍且對接受者無害。
制劑包括如適于經(jīng)口服、眼部、直腸、非腸道(包括皮下、肌內(nèi)和靜脈內(nèi))、經(jīng)皮、關(guān)節(jié)內(nèi)和局部、鼻部或口腔給藥的形式。
術(shù)語“劑量單位”指一種適于給予病人的單劑量單位，它易于處理和包裝，其中含有物理和化學(xué)穩(wěn)定的單位劑量的活性物質(zhì)或與固體或液體藥用稀釋劑或載體的混合物。
制劑適于為劑量單位形式，并且可采用任何藥劑學(xué)已知方法制備。所用方法均包括將活性組分摻入含有一種或多種助劑的載體中的步驟。通常，將活性組分均勻且緊密地?fù)饺胍后w載體或細(xì)粉碎的固體載體中，然后，如果有需要，可將產(chǎn)物制成所需形式的制劑。
本發(fā)明適于口服給藥的制劑可以是例如膠囊劑、小藥囊(sachets)、片劑或錠劑的單劑量(discrete units)形式，其中每個均含有預(yù)定量的活性組分；粉末或顆粒形式，溶液形式或水性液體或非水性液體中的混懸液形式；或水包油乳劑或油包水乳劑形式。也可以丸劑、藥糖劑或糊劑給予活性組分。
適于直腸給藥的制劑可為摻有活性組分和載體的栓劑，或者為灌腸劑。
適于非腸道給藥的制劑通常包括含活性組分的無菌油性或水性制劑，優(yōu)選與接受者血液等滲。經(jīng)皮給藥制劑可為硬膏劑或貼劑形式。
適于關(guān)節(jié)內(nèi)或眼部給藥的制劑可以是微晶形式活性組分的無菌水性制劑，例如為水性的微晶混懸液。脂質(zhì)體制劑或可生物降解聚合物系統(tǒng)也可用于本發(fā)明活性組分的關(guān)節(jié)內(nèi)和眼部給藥。
適于局部或眼部給藥的制劑包括液體或半液體制劑，例如搽劑、洗液、凝膠、敷劑(applicants)、水包油或油包水乳劑如霜劑、軟膏或糊劑；或溶液或混懸液如滴劑。
適于鼻或口腔給藥的制劑包括粉末、自拋射和噴霧制劑，例如氣霧劑和霧化劑。
除了前面提到過的組分，本發(fā)明制劑中還含有一種或多種附加組分組分，例如稀釋劑、粘合劑、防腐劑等。
組合物可進(jìn)一步含有用于治療上述病理學(xué)病癥的其它治療活性化合物，例如用于治療免疫疾病的其它免疫抑制劑，或用于治療皮膚病的類固醇。
本發(fā)明涉及治療患有一種上述病理學(xué)病癥的病人的方法，該方法包括將有效量的一種或多種式1化合物給予對此有需要的病人，其中化合物可單獨給予或與一種多種賦形劑或其它用于治療所述病理學(xué)病癥的治療活性化合物聯(lián)用。采用本發(fā)明化合物和/或更有治療活性化合物的治療可同時或間歇給藥。
在全身治療中，每日劑量為0.001-2μg/kg體重，優(yōu)選為0.002-0.3μg/kg哺乳動物體重，例如給予0.003-0.3μg/kg式I化合物，給予成人的典型每日劑量為0.2-25μg。在皮膚病的局部治療中，給予含有0.1-1000μg/g、優(yōu)選1-500μg/g、更優(yōu)選10-250μg/g式I化合物的軟膏、霜或洗液。局部眼用時，可給予含有0.1-1000μg/g、優(yōu)選1-500μg/g、更優(yōu)選10-250μg/g式I化合物的軟膏、滴劑或凝膠。也可制成每單位劑量含有0.05-100μg、優(yōu)選0.1-50μg式I化合物的口服組合物，優(yōu)選為片劑、膠凝劑或滴劑。
在下面的一般方法、制備和實施例中將對本發(fā)明作進(jìn)一步描述一般方法、制備和實施例概述表2列出了式I的示例化合物，制備1-8的中間體列于表1中。
對于核磁共振光譜(300MHz)，所引用的氘核氯仿溶液化學(xué)位移值(δ)是相對于內(nèi)標(biāo)四甲基硅烷(δ＝0)或氯仿(δ＝7.25)的值。該值是多峰，其定義為(雙峰(d)，三峰(t)，四峰(q))或者是不在大致中間點(m)處，除非是指一個范圍(s＝單峰，b＝寬)。偶合常數(shù)(J)的單位為赫茲(Hz)，通常至最接近的單位。
醚是經(jīng)鈉干燥的乙醚。THF用二苯甲酮鈉干燥。石油醚指戊烷餾分。除非另有所指，反應(yīng)通常在室溫氬氣氛下進(jìn)行。處理步驟是指用特定溶劑(與有機(jī)反應(yīng)溶劑不同)稀釋，用水再用鹽水萃取，用無水MgSO4干燥并與真空下濃縮得到殘余物。色譜法采用硅膠。表1 制備式III和IV化合物化合物編號 制備編號 路線1式R1R2R3A43III Me Me H O-THP54IV Me Me H O-THP65III Me Me 5-MeO-THP76IV Me Me 5-MeO-THP87III Me Me 5-OMe O-THP98IV Me Me 5-OMe O-THP10 10 III Me Me H O-TES11 11 IV Me Me H O-TES表2式la的示例化合物化合物編號 實施例編號 R1R2R3100 1 MeMe H101 2 MeMe 5-Me102 3 MeMe 5-OMe100 4 MeMe H103 EtEt H104 EtEt 5-Me105 MeMe 4-F一般方法一般方法1經(jīng)化合物2烷化反應(yīng)制備式III化合物向無水四氫呋喃(10ml)中的化合物2(862mg，1.5mmol)溶液中加入氫化鉀(1.0ml 20％混懸于油中)和具有A-C(R1)(R2)-C6H3(R3)-CH2-Z構(gòu)造的側(cè)鏈(6,75mmol)，然后強(qiáng)力攪拌反應(yīng)混合物。18-冠醚-6(650mg，5.8mmol)溶于無水四氫呋喃(5ml)中，然后滴加到反應(yīng)液中，用時20分鐘。再攪拌90分鐘后，小心向反應(yīng)液中加入水(40ml)。當(dāng)反應(yīng)停止或，反應(yīng)混合物用醚(100ml)稀釋，有機(jī)相用水(3×50ml)和含水飽和氯化鈉(50ml)連續(xù)萃取。真空干燥并除去溶劑后，產(chǎn)物用色譜法(硅膠；以含10％醚的石油醚為洗脫液)純化得到所需的無色油狀化合物。一般方法2式III化合物異構(gòu)化為相應(yīng)的5(Z)異構(gòu)體IV于室溫氬氣下，用TQ 718-Z2(Hanau)型高壓紫外燈照射Pyrex燒瓶中含有式III化合物(1mmol)、蒽(800mg，4.5mmol)和三乙胺(1滴)的二氯甲烷(60ml)溶液35分鐘。溶液過濾并并于真空下濃縮。殘余物用色譜法(硅膠；以含10％醚的石油醚為洗脫液)純化得到所需的無色油狀化合物。一般方法3式IV化合物脫保護(hù)為相應(yīng)的式I化合物式IV化合物(1mmol)溶于乙酸乙酯中(1.0ml)。強(qiáng)力攪拌下加入乙腈(25ml)。加入含5％氫氟酸的8∶1乙腈/水(12ml)，反應(yīng)混合物于于室溫氬氣下攪拌45分鐘。加入乙酸乙酯(150ml)，然后反應(yīng)混合物用飽和水性碳酸氫鈉溶液(150ml)、水(3×60ml)和飽和水性氯化鈉(50ml)連續(xù)萃取，然后用硫酸鎂干燥并于真空下濃縮。殘余物用色譜法(200g硅膠；以含20％戊烷的乙酸乙酯為洗脫液)純化得到標(biāo)題化合物。制備制備11(S)，3(R)-雙-叔丁基二甲基-甲硅烷氧基-20(R)-羥甲基用氫硼化鈉(0.35g)處理含醛1(5g)的THF(20ml)和乙醇(70ml)的攪拌的冰冷溶液。反應(yīng)10分鐘后，將化合物分配于乙酸乙酯和水中，有機(jī)相用鹽水洗滌并干燥，真空下濃縮得到標(biāo)題化合物，1H NMRδ＝0.05(bs，12H)，0.56(s，3H)，0.86(s，9H)，0.89(s，9H)，0.96(d，3H，J＝7)，1.1-2.1(m，15H)，2.31(bd，1H)，2.55(dd，1H，J＝14和5)，2.86(bd，1H)，3.48(dd，1H，J＝10和7)，3.71(dd，1H，J＝11和4)，4.21(m，1H)，4.52(m，1H)，4.93(bs，1H)，4.98(bs，1H)，5.82(d，1H，J＝11.5)，和6.44(d，1H，J＝11.5)。制備31(S)，3(R)-雙-叔丁基二甲基-甲硅烷氧基-20(R)-對-甲苯磺酰氧-甲基-9，10-斷孕甾-5(E)，7(E)，10(19)-三烯(化合物3)將化合物2(5g)溶于二氯甲烷(25ml)和吡啶(3ml)，于攪拌和冰冷過程中向溶液中加入的對-甲苯磺酰氯(2.5g)。反應(yīng)混合物保持5℃過夜后，分配于乙酸乙酯和水中。有機(jī)層用飽和硫酸銅溶液(兩次)、水、5％碳酸氫鈉溶液和鹽水連續(xù)洗滌，然后干燥并于真空下濃縮。殘余物用色譜法(200g硅膠；以含5％醚的石油醚為洗脫液)純化得到標(biāo)題化合物，(甲醇中熔點為98-100℃)，1H NMRδ＝0.035(s，3H)，0.044(s，3H)，0.051(s，3H)，0.056(s，3H)，0.45(s，3H)，0.85(s，9H)，0.88(s，9H)，0.89(d，3H，J＝6)，1.15-2.05(m，14H)，2.28(bd，1H)，2.44(s，3H)，2.52(dd，1H，J＝14 and 5)，2.84(bd，1H)，3.81(m，1H)，4.11(m，1H)，4.20(m，1H)，4.51(m，1H)，4.93(bs，1H)，4.97(bs，1H)，5.79(d，1H，J＝11)，6.42(d，1H，J＝11)，7.33(bd，2H)，7.78(bd，2H)。制備3化合物4方法一般方法1起始物2-(2-(3-溴甲基苯基)-2-丙氧基)-四氫-4H-吡喃1H NMRδ＝7.42(s，1H)，7.3(m，3H)，6.44(d，1H)，5.61(d，1H)，4.98(s，1H)，4.93(s，1H)，4.51(dd，1H)，4.46(s，2H)，4.42(m，1H)，4.21(m，1H)，3.93(m，1H)，3.54(dd，1H)，3.39(m，1H)，3.27(t，1H)，2.85(d，1H)，2.54(dd，1H)，2.30(d，1H)，2.01(t，1H)，1.95-1.30(m，19H)，1.66(s，3H)，1.50(s，3H)，0.98(d，3H)，0.91(s，9H)，0.89(s，9H)，0.53(s，3H)，0.06(s，12H)。制備4化合物5方法一般方法2起始物化合物413CNMRδ＝148.1，147.0，140.6，138.4，134.9，127.8，125.9，125.9，124.8，124.8，124.8，124.7，122.9，117.8，111.0，95.2，77.7，74.5，72.8，71.8，67.3，63.2，56.0，53.2，45.8，45.4，44.6，39.7，36.0，32.0，31.9，28.6，26.7，26.3，25.7，25.6，25.2，23.2，21.8，20.5，18.0，17.9，17.1，12.2，-4.9，-5.0，-5.3。制備5化合物6方法一般方法1起始物2-(2-(3-溴甲基-5-甲基苯基)-2-丙氧基)-四氫-4H-吡喃1H NMRδ＝7.21(s，1H)，7.15(s，1H)，7.05(s，1H)，6.44(d，1H)，5.81(d，1H)，4.98(s，1H)，4.94(s，1H)，4.54(dd，1H)，4.43(s，2H)，4.40(m，1H)，4.21(m，1H)，3.95(m，1H)，3.54(dd，1H)，3.35(m，1H)，.25(t，1H)，2.86(d，1H)，2.34(s，3H)，2.30(d，1H)，2.0(t，1H)，1.95-1.20(m，19H)，1.65，(s，3H)，1.48(s，3H)，0.98(d，3H)，0.90(s，9H)，0.85(s，9H)，0.53(s，3H)，0.05(s，12H)。制備6化合物7方法一般方法2起始物化合物61H NMRδ＝7.21(s，1H)，7.15(s，1H)，6.90(s，1H)，6.22(d，1H)，6.00(d，1H)，5.17(s，1H)，4.85(s，1H)，4.4-4.3(m，4H)，4.18(m，1H)，3.95(m，1H)，3.53(dd，1H)，3.35(m，1H)，3.24(t，1H)，2.78(d，1H)，2.41(d，1H)，2.34(s，3H)，2.21(dd，1H)，1.95(t，1H)，1.9-1.25(m，19H)，1.65(s，3H)，1.48(s，3H)，0.99(d，3H)，0.90(s，18H)，0.25(s，3H)，0.07(s，12H)。制備7化合物8方法一般方法1起始物2-(2-(3-溴甲基-5-甲氧基苯基)-2-丙氧基)-四氫-4H-吡喃1H NMRδ＝6.98(s，1H)，6.92(d，1H)，6.79(s，1H)，6.44(d，1H)，5.83(d，1H)，4.98(s，1H)，4.93(s，1H)，4.5(dd，1H)，4.45(m，3H)，4.21(m，1H)，3.95(m，1H)，3.80(s，3H)，3.55 dd，1H)， 3.40 (m，1H)，3.26(t，1H)，2.87(d，1H)，2.56(dd，1H)，2.32(d，1H)，2.01(t，1H)，1.95-1.40(m，19H)，1.64(s，3H)，1.48(s，3H)，1.00(d，3H)，0.93(s，9H)，0.85(s，9H)，0.53(s，3H)，0.05(s，12H)。制備8化合物9方法一般方法2起始物化合物81H NMRδ＝6.98(s，1H)，6.91(s，1H)，6.82(s，1H)，6.21(d，1H)，6.00(d，1H)，5.17(s，1H)，4.85(s，1H)，4.46(s，2H)，4.40(m，1H)，4.35(m，1H)，4.17(m，1H)，3.95(m，1H)，3.80(s，3H)，3.55(dd，1H)，3.38(m，1H)，3.25(t，1H)，2.80(d，1H)，2.42(dd，1H)，2.2(dd，1H)，1.96(t，1H)，1.95-1.2(m，19H)，1.64(s，3H)，1.48(s，3H)，0.98(d，3H)，0.88(s，18H)，0.52(s，3H)，0.05(s，12H)。制備92-(3-溴甲基苯基)-2-三乙基甲硅烷氧基-丙烷(propan)將咪唑(10.1g，148mmol)溶于無水DMF(100ml)中，然后加入三乙基氯硅烷(15.6ml，148mmol)，反應(yīng)于室溫氬氣下攪拌30分鐘。滴加溶于無水DMF(100ml)中的2-(3-溴甲基苯基)-2-丙醇(17.0g，74mmol)，用時15分鐘。再攪拌15分鐘后加入乙酸乙酯(1100ml)，混合物用1N鹽酸(2×50ml)、水(3×200ml)和飽和的含水氯化鈉(200ml)連續(xù)萃取，用硫酸鎂干燥并于真空下濃縮。殘余物用色譜法(硅膠，含1％醚的戊烷洗脫液)純化得到無色油狀標(biāo)題化合物。1H NMRδ＝7.50(t，1H)，7.41(dt，1H)，7.29(t，1H)，7.23(dt，1H)，4.50(s，2H)，1.57(s，6H)，0.95(t，6H)，0.59(q，9H)。制備10化合物10方法一般方法1起始物2-(3-溴甲基苯基)-2-三乙基甲硅烷氧基-丙烷1H NMRδ＝7.43(m，1H)，7.37(m，1H)，7.27(t，1H)，7.17(m，1H)，6.45(d，1H)，5.82(m，1H)，4.98(m，1H)，4.94(m，1H)，4.53(dd，1H)，4.48(s，2H)，4.22(m，1H)，3.54(dd，1H)，3.26(dd，1H)，2.86(m，1H)，2.55(dd，1H)，2.32(m，1H)，2.08-1.20(m，14H)，1.56(s，6H)，0.99(d，3H)，0.94(t，9H)，0.90(s，9H)，0.86(s，9H)，0.58(q，6H)，0.53(s，3H)，0.06(m，12H)。制備11化合物11方法一般方法2起始物化合物101H NMRδ＝7.45-7.10(m，4H)，6.22(d，1H)，6.01(d，1H)，5.18(d，1H)，4.86(d，1H)，4.47(s，2H)，4.39(m，1H)，4.18(m，1H)，3.54(dd，1H)，3.25(dd，1H)，2.81(d，1H)，2.44(dd，1H)，2.21(dd，1H)，2.041.15(m，14H)，1.56(s，6H)，0.98(d，3H)，0.93(t，9H)，0.87(s，18H)，0.58(q，6H)，0.52(s，3H)，0.06(s，12H)。
實施例11(S)，3(R)-二羥基-20(R)-[((3-(2-羥基-2-丙基)-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物100)方法-般方法3起始物化合物513CNMRδ＝149.2，147.6，142.9，138.8，133.0，128.2，126.0，124.9，123.6，123.5，117.1，111.8，74.7，73.0，72.5，70.8，66.8，56.2，53.5，45.7，45.3，42.8，39.8，36.1，31.8，29.0，26.8，23.5，22.1，17.3，12.4。
實施例21(S)，3(R)-二羥基-20(R)-[((3-(2-羥基-2-丙基)-5-甲基-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物101)方法一般方法3起始物化合物71H NMRδ＝7.24(s，1H)，7.21(s，1H)，7.04(s，1H)，6.36(d，1H)，6.02(d，2H)，5.32(s，1H)，4.99(s，1H)，4.44(s，2H)，4.39(m，2H)，4.21(m，1H)，3.55(dd，1H)，3.24(dd，1H)，2.62(d，1H)，2.58(d，1H)，2.35(s，3H)，2.30-1.20(m，14H)，1.56(s，6H)，0.98(d，3H)，0.54(s，3H)。
實施例31(S)，3(R)-二羥基-20(R)-[((3-(2-羥基-2-丙基)-5-甲氧基-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物
102)方法一般方法3起始物化合物91H NMR 5＝7.01(s，1H)，6.97(s，1H)，6.80(s，1H)，6.36(d，1H)，6.02(d，1H)，5.32(s，1H)，4.99(s，1H)，4.46(s，2H)，4.41m，1H)，4.20(m，1H)，3.81(s，3H)，3.58(dd，1H)，3.25(t，1H)，2.81(dd，1H)，2.57(dd，1H)，2.3(dd，1H)，2.0-1.3(m，14H)，1.56(s，6H)，0.99(d，3H)，0.54(s，3H)。
實施例41(S)，3(R)-二羥基-20(R)-[((3-(2-羥基-2-丙基)-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯(化合物100)方法一般方法3起始物化合物1113CNMRδ＝142.9，147.6，142.9，138.8，133.0，128.2，26.0，124.9，123.6，123.5，117.1，111.8，74.7，73.0，72.5，70.8，66.8，56.2，53.5，45.7，45.3，42.8，39.8，36.1，31.8，29.0，26.8，23.5，22.1，17.3，12.4。
實施例5含化合物100的膠囊將化合物100溶于花生油中，濃度為1μg化合物111/ml油。加熱混合10重量份的明膠、5重量份的甘油、0.08重量份的山梨酸鉀和14重量份的蒸餾水，形成明膠軟膠囊。然后每個膠囊填入含100μl化合物111的油液，這樣每個膠囊含有0.1μg化合物100。
實施例6含化合物100的皮膚用霜將0.05mg化合物100溶于1g杏仁油中。向溶液中加入40g礦物油和20g自乳化蜂蠟。將混合物加熱液化。加入40ml熱水后，混合混合物。每100g所得霜劑中含有約0.5g化合物100。
實施例7含化合物100的可注射溶液一種注射溶液含有10μg化合物10015.4mg 磷酸二鈉二水合物2mg 磷酸二氫鈉二水合物0.8mg氯化鈉5mg 抗壞血酸鈉5mg SolutolHS 15加1ml水成注射液。
權(quán)利要求
1.通式為(I)的化合物及其與可藥用酸的可體內(nèi)水解酯， 其中R1和R2可以相同或不同，代表(C1-C4)烷基，和R3代表氫、鹵素、(C1-C4)烷基、或O-(C1-C4)烷基。
2.如權(quán)利要求1的具有通式la的化合物及其與可藥用酸的可體內(nèi)水解酯， 其中R1和R2可以相同或不同，代表(C1-C4)烷基，和R3代表氫、鹵素、(C1-C4)烷基、或O-(C1-C4)烷基。
3.如前述任一權(quán)利要求的化合物，其中R1代表甲基或乙基。
4.如前述任一權(quán)利要求的化合物，其中R2代表甲基或乙基。
5.如前述任一權(quán)利要求的化合物，其中R3代表氫，F(xiàn)，Cl，甲基，乙基或甲氧基。
6.如前述任一權(quán)利要求的化合物，其中R3位于5-位。
7.如前述任一權(quán)利要求的化合物，其中R1和R2均代表甲基，且R3代表氫，F(xiàn)或甲基。
8.如前述任一權(quán)利要求的化合物，其中R3代表5-甲基或4-氟。
9.如前述任一權(quán)利要求化合物的非對應(yīng)異構(gòu)體，為純的形式；或者如權(quán)利要求1或2的化合物的非對應(yīng)異構(gòu)體混合物。
10.如前述任一權(quán)利要求的化合物，選自1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-[((3-(2-羥基-2-丙基)-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯；1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-[((3-(2-羥基-2-丙基)-5-甲基-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯；1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-[((3-(2-羥基-2-丙基)-5-甲氧基-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯；1(S)，3(R)-二羥基-20(R)-[((3-(2-羥基-2-丙基)-4-氟-苯基)-甲氧基)-甲基]-9，10-斷-孕甾-5(Z)，7(E)，10(19)-三烯；及其與可藥用酸的可體內(nèi)水解酯。
11.含有有效量的如權(quán)利要求1-10之一化合物的藥物組合物，還含有可藥用載體和/或輔劑。
12.如權(quán)利要求11的藥物組合物，為劑量單位形式。
13.如權(quán)利要求12的藥物組合物，所述劑量單位含有0.05-100mg、優(yōu)選0.1-50mg的如權(quán)利要求1-10之一化合物。
14.如權(quán)利要求1-10之一化合物在制備藥物中的用途。
15.如權(quán)利要求1-10之一化合物在制備治療或預(yù)防以異常的細(xì)胞分化和/或細(xì)胞增殖為特征的疾病或者免疫系統(tǒng)失衡的藥物中的用途。
16.如前述權(quán)利要求的用途，所述疾病選自癌，牛皮癬，皮膚老化和甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)。
17.使用如權(quán)利要求12-14之一的組合物治療或預(yù)防以異常的細(xì)胞分化和/或細(xì)胞增殖為特征的疾病和/或免疫系統(tǒng)失衡的方法。
18.如前述權(quán)利要求的方法，其中所治療或預(yù)防的疾病自癌，牛皮癬，皮膚老化和甲狀旁腺機(jī)能亢進(jìn)。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式為(I)的化合物及其與可藥用酸的可體內(nèi)水解酯,其中R
文檔編號C07C401/00GK1351589SQ00807644
公開日2002年5月29日 申請日期2000年4月12日 優(yōu)先權(quán)日1999年4月23日
發(fā)明者K·漢森 申請人:里奧藥物制品有限公司