本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種抗高血壓藥物肼屈嗪的新劑型，特別涉及一種肼屈嗪納米乳抗高血壓藥物。
技術(shù)背景
肼屈嗪(Hydralazine)又名肼苯噠嗪，是一種直接作用于動脈和小動脈平滑肌的抗高血壓藥。它通過舒張血管平滑肌，使外周阻力降低，從而達(dá)到降低血壓的目的。肼屈嗪具有中等強度的降血壓作用，其特點為：舒張壓下降較顯著，并能增加腎血流量。其降壓作用于用藥后30～40分鐘開始出現(xiàn)。降壓作用主要是使小動脈擴(kuò)張，外周總阻力降低，以致血壓下降?，F(xiàn)多用于腎型高血壓及舒張壓較高的病人。肼屈嗪的作用機(jī)制尚未完全闡明?？赡艿淖饔脵C(jī)制包括：干擾第二信使三磷酸肌醇作用，限制平滑肌細(xì)胞肌漿網(wǎng)的鈣離子釋放；作為一氧化氮供體；激活缺氧誘導(dǎo)激活因子。
現(xiàn)在市場上已有如肼屈嗪片劑等的降壓藥物，雖然口服后能從胃腸道吸收，但吸收不完全，另外藥物的溶出速率慢，生物利用度極差，再加上肼屈嗪作用緩慢，使得肼屈嗪的藥效無法得到利用。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺陷與不足，本發(fā)明的目的在于能將一種能高效降壓的水溶性藥物肼屈嗪制備成納米乳劑，并且藥物分布均勻、穩(wěn)定性好、滲透性高、溶解度好、生物利用度高的肼屈嗪納米乳抗高血壓藥物。
實現(xiàn)上述發(fā)明目的的技術(shù)方案是：一種肼屈嗪納米乳抗高血壓藥物，其特征在于該藥的粒徑介于25.9～70.2nm之間，平均粒徑為48.8nm，其原料及各原料質(zhì)量百分比為：
肼屈嗪 1％～18％
表面活性劑 25％～45％
助表面活性劑 0～20％
其余成分為蒸餾水，上述原料的質(zhì)量百分比之和為 100％。
所述的表面活性劑為聚氧乙烯40氫化蓖麻油、蓖麻油聚氧乙烯醚40、吐溫80或泊洛沙姆188中的任意一種或與span80的混合物，這些表面活性劑對人體低毒、安全、無刺激。
所述的助表面活性劑為無水乙醇、1，2-丙二醇、聚乙二醇400或丙三醇中的任意一種或幾種的混合物。
本發(fā)明在藥物中加入刺激性小的助表面活性劑如乙醇、1，2-丙二醇、丙三醇或聚乙二醇400，除了助溶作用外，助表面活性劑主要是為了調(diào)整表面活性劑的親水親油平衡值(HLB)，使得油水界面張力進(jìn)一步降低，增大界膜的油水性和剛性。助表面活性劑摻入到界面膜中，促進(jìn)曲率半徑很小膜的形成，擴(kuò)大納米乳的乳區(qū)面積。
本發(fā)明的一種肼屈嗪納米乳通過口服給藥，減少藥物在體內(nèi)的首過效應(yīng)，促進(jìn)胃腸道吸收，提高了藥物的治療能力。
本發(fā)明的肼屈嗪納米乳與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點：
1.本發(fā)明的肼屈嗪抗高血壓納米乳的藥物粒徑在25.9～70.2nm之間，平均粒徑為48.8nm，加入表面活性劑和助表面活性劑，用溶解有肼屈嗪的蒸餾水滴定到均勻、透明的納米乳體系。形成的納米乳含肼屈嗪達(dá)6％以上。
2.本發(fā)明的肼屈嗪抗高血壓納米乳分布均勻，體系透明、穩(wěn)定性好，有較低的表面張力，具有良好的流動性，服用方便。
3.本發(fā)明的肼屈嗪抗高血壓納米乳給藥后迅速被網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞吞噬，使藥物迅速起效，并維持恒定的血藥濃度及藥理效應(yīng)，提高藥物的生物利用度，增強藥效、減少藥物的用量和使用次數(shù)。
4.本發(fā)明的肼屈嗪抗高血壓納米乳藥效穩(wěn)定，耗能低。
5.本發(fā)明制成納米乳后可制成口服液直接服用、也可經(jīng)膠囊包封或經(jīng)凍干粉技術(shù)等處理。
具體實施方式
發(fā)明人給出具體制備方法實施例及使用藥效試驗來進(jìn)一步說明本發(fā)明藥物的效果。
試驗例1本發(fā)明肼屈嗪納米乳抗高血壓藥物粒徑大小分析
本發(fā)明藥物經(jīng)透射電子顯微鏡檢測，液滴呈類球形，分散性好，無粘連。經(jīng)馬爾文粒度分析儀檢測其直徑分布在25.9～70.2nm之間，平均粒徑為48.8nm。
試驗例2本發(fā)明肼屈嗪納米乳抗高血壓藥物穩(wěn)定性分析
通過以下離心試驗、光穩(wěn)定性試驗、溫度穩(wěn)定性試驗等觀察本發(fā)明肼屈嗪納米乳抗高血壓藥物的穩(wěn)定性，觀察本發(fā)明是否有分層、渾濁或晶體析出等不穩(wěn)定現(xiàn)象。
1.高速離心試驗
取適量制備好的本發(fā)明肼屈嗪納米乳抗高血壓藥物于離心管中，以15 000r/min的轉(zhuǎn)速離心10min，離心試驗后，本發(fā)明肼屈嗪納米乳抗高血壓藥物依然保持離心前的澄清透明，未見分層、渾濁或晶體析出等不穩(wěn)定現(xiàn)象。
2.光穩(wěn)定性試驗
將適量制備好的肼屈嗪納米乳抗高血壓藥物裝入透明好的無色、透明小玻璃瓶中，密封，放置于正常光照條件下10d，分別于1d、2d、4d、6d、8d、10d取樣觀察。結(jié)果表明肼屈嗪納米乳抗高血壓藥物每份樣品均保持澄清透明，未見分層、渾濁或晶體析出等不穩(wěn)定現(xiàn)象。
3.溫度穩(wěn)定性試驗
將適量制備好的肼屈嗪納米乳抗高血壓藥物裝入透明度好的無色玻璃瓶中，密封，放置于4℃、室溫(25℃)和40℃三中溫度條件下留樣考察各30d，每隔5d取樣觀察。結(jié)果表明，肼屈嗪納米乳抗高血壓藥物在此三種溫度條件下均保持澄清透明，未見分層、渾濁或晶體析出等不穩(wěn)定現(xiàn)象。
4.長期穩(wěn)定性試驗
將3批納米乳密封于棕色玻璃瓶內(nèi)，置于(25±2)℃、相對濕度(60±5)％條件下12個月，分別于0、3、6、9和12個月時取樣，考察納米乳的性狀及含量變化，并參考文獻(xiàn)統(tǒng)計分析方法，計算肼屈嗪納米乳抗高血壓藥物的有效期。試驗結(jié)果表明在長期試驗條件下，肼屈嗪納米乳抗高血壓藥物的外觀一直保持澄明、均一，未見分層、色變、絮凝和破乳等現(xiàn)象；體系中的肼屈嗪含量隨時間延長而逐漸降低，其含量-時間變化曲線提供的線性回歸方程，計算出肼屈嗪納米乳抗高血壓藥物的有效期為31.15個月(以時間短者為標(biāo)準(zhǔn))。
試驗例3大鼠尾部測壓法測定肼屈嗪納米乳抗高血壓藥物的藥效(與市售肼屈嗪片對比)
SHR大鼠40只隨機(jī)分為4組，每組10只，分別設(shè)為肼屈嗪片組，肼屈嗪納米乳組和陽性空白組，前兩組分別給予肼屈嗪片混懸液和肼屈嗪納米乳各15mg/kg·d，溶于飲水中給藥，1次/d，連續(xù)12周。WKY大鼠10只為正常對照組，SHR大鼠10只陽性對照組不給藥物，正常飲水。
測量各組大鼠尾動脈血壓。鼠齡為6周時(即用藥前)測壓1次，鼠齡7周(用藥后1周)測壓1次，以后每隔一周測1次血壓，直到實驗結(jié)束。結(jié)果見表1。
表1各組大鼠SBP的比較(x±s，n＝10)
結(jié)果顯示，肼屈嗪納米乳與陽性對照組、肼屈嗪片組比較，差異均極顯著，表明肼屈嗪不但能顯著降低陽性大鼠的血壓，而且降壓效果與市售肼屈嗪片相比效果更為顯著。
試驗例4毒性試驗
1.毒理研究項目及結(jié)論：
本發(fā)明藥物嚴(yán)格按照新藥非臨床安全性評價方法與市售肼屈嗪片劑對比進(jìn)行了急性毒性試驗，重復(fù)給藥毒性試驗、遺傳毒性試驗(包括Ames試驗、小鼠骨髓微核試驗、體外培養(yǎng)哺乳動物細(xì)胞染色體突變試驗)、生殖毒性試驗(一般生殖毒性試驗、致畸敏感期毒性試驗、圍產(chǎn)期毒性試驗)、致癌試驗、免疫毒性試驗和局部刺激性試驗，試驗結(jié)果如下。
本發(fā)明藥物對小鼠急性毒性實驗結(jié)論：與市售肼屈嗪片劑對比，肼屈嗪納米乳未出現(xiàn)計量內(nèi)不良反應(yīng)及死亡。
本發(fā)明藥物的Ames試驗、小鼠精子畸形試驗和睪丸染色體畸變試驗等遺傳毒性試驗的結(jié)果均為陰性。
大鼠30d喂養(yǎng)本發(fā)明產(chǎn)品的結(jié)果表明：與市售肼屈嗪片劑對比，在試驗期內(nèi)，肼屈嗪納米乳計量內(nèi)各實驗組動物生長發(fā)育良好，體重、攝食量、血常規(guī)、血生化、臟器系數(shù)等指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)，病理組織學(xué)檢查亦未見異常。
本發(fā)明藥物長期毒性實驗結(jié)論：與市售肼屈嗪片劑對比，在試驗期內(nèi)，肼屈嗪納米乳計量內(nèi)，本藥品在連續(xù)灌胃給藥三個月未見大鼠不良反應(yīng)，各項檢查指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)，病理檢查其主要臟器及靶器官均未見該藥引起的中毒性病理改變。
試驗例5藥物動力學(xué)
本發(fā)明肼屈嗪納米乳口服后30分鐘顯效。1小時達(dá)高峰，t1/2為2小時，降壓作用可持續(xù)15小時。
實施例1
EL40 32g和乙醇4g在室溫(25℃)條件下攪拌均勻，然后向其中緩慢滴入溶解有肼屈嗪的蒸餾水。隨著蒸餾水量的增加，體系黏稠度增大，當(dāng)加入蒸餾水的量使體系由油包水變?yōu)樗托图{米乳時，體系粘稠度從最粘稠的狀態(tài)變稀，此時產(chǎn)生的即是無色透明的肼屈嗪納米乳，此時加入蒸餾水的量為58g、肼屈嗪為6g。此比例即為肼屈嗪抗高血壓納米乳的最優(yōu)配比。
以下實施例步驟同實施例1：
實施例2
EL40 35g，1，2-丙二醇5g，蒸餾水55g、肼屈嗪5g。
實施例3
RH40 40g，丙三醇5g，蒸餾水50.5g、肼屈嗪4.5g。
實施例4
RH40 30g，乙醇15g，蒸餾水50g、肼屈嗪5g。
實施例5
吐溫80 40g，丙三醇15g，蒸餾水41.5g，肼屈嗪3.5g。
實施例6
吐溫80 25g，PEG400 20g，蒸餾水50g、肼屈嗪5g。
實施例7
EL40 20g，span80 10g，蒸餾水69g，肼屈嗪1g。
實施例8
RH40 25g，span80 5g，蒸餾水63g，1，2-丙二醇5g，肼屈嗪2g。
實施例9
吐溫80 20g，span80 10g，蒸餾水60g，聚乙二醇400 5g，肼屈嗪5g。
實施例10
泊洛沙姆188 20g，span80 5g，丙三醇5g，蒸餾水52g，肼屈嗪18g。
實施例11
EL40 25g，蒸餾水64g，聚乙二醇400 5g，丙三醇5g，肼屈嗪1g。