一種利用木瓜蛋白酶從大鯢尾部脂肪提取粗鯢油的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種利用木瓜蛋白酶從大鯢尾部脂肪提取粗鯢油的方法，包括：將大鯢尾部皮下脂肪與其皮膚分離，得大鯢尾部脂肪，然后攪成糜狀；將大鯢尾部脂肪與水以1:0.5~1:2.0的比例混合，將料液pH調(diào)到6.0~7.0，加入大鯢尾部脂肪重量0.1~0.5%的木瓜蛋白酶，搖勻升溫至40~60℃，攪拌震蕩反應(yīng)0.5~2.0h：將所得酶解液經(jīng)離心機(jī)4000-5000r/min，離心5-15min，離心后分為三層，吸取上層得到粗鯢油。本發(fā)明解脫蛋白質(zhì)對(duì)脂肪束縛，同時(shí)也降解酶解過(guò)程中形成乳狀液與脂肪結(jié)合的蛋白質(zhì)，反應(yīng)條件溫和，使得鯢油中有效成分穩(wěn)定。本發(fā)明反應(yīng)操作簡(jiǎn)單，提高了粗鯢油的提取率和產(chǎn)品的附加值，成本低且環(huán)保，可廣泛用于工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說(shuō)明】一種利用木瓜蛋白酶從大鯢尾部脂肪提取粗鯢油的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及動(dòng)物油脂提取加工【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種利用木瓜蛋白酶從大鯢尾部脂肪提取粗鯢油的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]中國(guó)大鯢屬于兩棲綱、有尾目、隱鰓鯢科，國(guó)家二級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生動(dòng)物，大鯢也是一種傳統(tǒng)的名貴藥用動(dòng)物，具滋陰補(bǔ)腎、補(bǔ)血行氣的功效，被譽(yù)為“水中人參”。隨著大鯢規(guī)模化馴養(yǎng)技術(shù)的成熟與推廣，大鯢產(chǎn)業(yè)逐漸成為原產(chǎn)區(qū)調(diào)整農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)、促進(jìn)農(nóng)民增收最具活力的新興產(chǎn)業(yè)。國(guó)內(nèi)大鯢產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅猛，大鯢養(yǎng)殖規(guī)模日漸增大，2012年末，全國(guó)大鯢庫(kù)存量約為500萬(wàn)尾。目前大鯢產(chǎn)品主要是用于餐桌上作為高端菜肴直接食用，需求量有限。大鯢加工產(chǎn)品剛剛起步，產(chǎn)品種類少，生產(chǎn)規(guī)模小。大鯢商品的終端市場(chǎng)小，已經(jīng)嚴(yán)重制約了該產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，產(chǎn)品深加工是拓寬其終端市場(chǎng)的重要出路。大鯢尾部由于脂肪含量過(guò)高而不被直接食用，經(jīng)測(cè)定，大鯢尾部脂肪中脂肪含量達(dá)到80.20%(以鮮樣計(jì))，是提取鯢油的良好材料。
[0003]大鯢脂肪中富含不飽和脂肪酸，含量高達(dá)76.58%，其中多不飽和脂肪酸(PUFA)為31.11%。食用富含PUFA的食物能有效預(yù)防心肌梗塞、心律不齊、降低血脂、動(dòng)脈粥樣硬化、冠狀動(dòng)脈硬化、抗氧化清除自由基、抗衰老等。DHA等長(zhǎng)鏈不飽和脂肪酸(UFA)是大腦組織與眼球等重要器官的“必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)”，具有健腦、提高記憶力和視力的功能，尤其能促進(jìn)胎兒腦細(xì)胞發(fā)育和嬰幼兒腦細(xì)胞生長(zhǎng)，促進(jìn)青少年提高記憶，防治老年性癡呆等；還具有預(yù)防動(dòng)脈硬化、預(yù)防心血管疾病、降低膽固醇、抗炎癥和抗過(guò)敏等生理功能。大鯢油脂的高營(yíng)養(yǎng)和醫(yī)療保健作用，使其很好的開(kāi)發(fā)利用前景。
[0004]目前，魚(yú)油的提取方法，主要包括壓榨法、蒸煮法、有機(jī)溶劑法、淡堿水解法、酶解法和超臨界流體萃取法等。壓榨法操作簡(jiǎn)單，但是提取率較低，現(xiàn)今已很少采用。有機(jī)溶劑法對(duì)設(shè)備要求不高，操作簡(jiǎn)單，缺點(diǎn)是不能將與蛋白質(zhì)結(jié)合的脂肪分離出來(lái)，提取率較低，且有溶劑殘留，對(duì)魚(yú)油的品質(zhì)造成影響。蒸煮法操作簡(jiǎn)單，提取溫度較高，會(huì)對(duì)魚(yú)油的品質(zhì)造成影響。淡堿水解法堿液濃度不易控制，提取率不穩(wěn)定。超臨界流體萃取法成本較高，只在對(duì)產(chǎn)品要求較高時(shí)才使用該法。酶解法提取率相對(duì)較高，且操作條件溫和，同時(shí)酶解液中還含有豐富的小分子肽和氨基酸等，可以進(jìn)一步加以利用，提高了魚(yú)油制品的附加值。張佳嬋等利用以人工養(yǎng)殖大鯢尾部為原料，使用堿性蛋白酶水解法提取大鯢油，酶法水解條件為溫度50°C，時(shí)間lh，加酶量1.5%，pH值為6(張佳嬋，薛玲，王昌濤，大鯢尾部魚(yú)油的酶法提取工藝，食品科學(xué)學(xué)報(bào)，31 (3):25-29)。其大鯢油的提取率較低，平均僅為63.9%。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是提供一種利用木瓜蛋白酶從大鯢尾部皮下脂肪中提取鯢油的方法，反應(yīng)條件溫和，鯢油提取率高，操作簡(jiǎn)單，且鯢油的品質(zhì)較好。
[0006]為達(dá)到上述技術(shù)目的，本發(fā)明提供一種利用木瓜蛋白酶從大鯢尾部脂肪中提取鯢油的方法，技術(shù)方案是:
(1)首先將大鯢尾部皮下脂肪與其皮膚分離，得大鯢尾部脂肪，然后攪成糜狀；
(2)將(I)所得大鯢尾部脂肪與水以1:0.5~1:2.0的比例混合，用HCl和NaoH將料液pH調(diào)到6.0-7.0，加入大鯢尾部脂肪重量0.1~0.5%的木瓜蛋白酶，搖勻升溫至4(T60°C，攪拌震蕩反應(yīng)0.5~2.0h。
[0007](3)將(2)所得酶解液經(jīng)離心機(jī)4000-5000r/min，離心5_15min，離心后分為三層，
上層為澄清淡黃色鯢油，中層為未水解成分，下層為富含多肽和氨基酸水解液的蛋白質(zhì)水解液，吸取上層得到粗鯢油。
[0008]優(yōu)化的是，步驟(2)中，料液比為1:1.0, pH為6.7，加酶量為0.3%，酶解時(shí)間為
1.0h，酶解溫度為55°C。經(jīng)離心機(jī)5000 r/min，離心lOmin。提取率可達(dá)98.5%以上。
[0009]本發(fā)明解脫蛋白質(zhì)對(duì)脂肪束縛，同時(shí)也降解酶解過(guò)程中形成乳狀液與脂肪結(jié)合的蛋白質(zhì)，反應(yīng)條件溫和，使得鯢油中有效成分穩(wěn)定.具有以下優(yōu)點(diǎn)和積極效果:(1)本發(fā)明采用木瓜白酶從大鯢尾部脂肪中提取鯢油，其反應(yīng)條件溫和，操作簡(jiǎn)單，提出過(guò)程用酶量與用水量較小，酶解時(shí)間短，成本很低，鯢油提取率很高達(dá)到98%以上，且品質(zhì)較好，達(dá)到粗魚(yú)油一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。(2)本發(fā)明利用大鯢尾部皮下脂肪中提取鯢油，變廢為寶，減少污染，大大提高了大鯢的產(chǎn)品附加值和資源利用率，具有重要的經(jīng)濟(jì)效益與生態(tài)效率。(3)工藝參數(shù)范圍較寬，容易操作與控制，可廣泛用于工業(yè)化生產(chǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0010]下面結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明:
實(shí)施例1:
(1)首先將大鯢尾部脂肪與皮膚分離，得大鯢尾部脂肪，稱取大鯢尾部脂肪100g，然后攪成糜狀；
(2)將攪成糜狀的大鯢尾部脂肪加入100g水混合，用HCl和NaoH調(diào)到pH6.7,0.3g的木瓜蛋白酶，搖勻升溫至55°C，攪拌震蕩反應(yīng)lh。
[0011](3)將(2)所得酶解液經(jīng)離心機(jī)4000r/min，離心lOmin，離心后分為三層，上層為澄清淡黃色鯢油，中層為為水解成分，下層為富含多肽和氨基酸水解液的蛋白質(zhì)水解液，吸取上層得到粗鯢油98.53g。
[0012]粗鯢油提取率為98.53%，其理化性質(zhì)分析結(jié)果見(jiàn)表1的粗鯢油樣品I?？梢?jiàn)，該方法提取的鯢油指標(biāo)均達(dá)到粗魚(yú)油一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。
[0013]實(shí)施例2:
(O首先將大鯢尾部脂肪分離，得大鯢尾部脂肪，稱取大鯢尾部脂肪100g，并攪成糜狀
(2)將攪成糜狀的大鯢尾部脂肪加入100g水混合，用HCl和NaoH調(diào)到pH6.5，大鯢尾部皮下脂肪重量為標(biāo)準(zhǔn)，加入0.1g的木瓜蛋白酶，搖勻升溫至55°C，攪拌震蕩反應(yīng)1.5h。
[0014](3)將(2)所得酶解液經(jīng)離心機(jī)5000r/min，離心lOmin，離心后分為三層，上層為澄清淡黃色鯢油，中層為為水解成分，下層為富含多肽和氨基酸水解液的蛋白質(zhì)水解液，吸取上層得到粗鯢油98.4g。
[0015]粗鯢油提取率為98.40%，其理化性質(zhì)分析結(jié)果見(jiàn)表1的粗鯢油樣品2?？梢?jiàn)，該方法提取的鯢油均達(dá)到粗魚(yú)油一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。
【權(quán)利要求】
1.一種利用木瓜蛋白酶從大鯢尾部脂肪提取粗鯢油的方法，其特征在于包括以下幾步 (I)首先將大鯢尾部皮下脂肪與其皮膚分離，得大鯢尾部脂肪，然后攪成糜狀； 將(I)所得大鯢尾部脂肪與水以1: 0.5~1:2.0的比例混合，用HCl和NaoH將料液pH調(diào)到6.0-7.0，加入大鯢尾部脂肪重量0.1~0.5%的木瓜蛋白酶，搖勻升溫至4(T60°C，攪拌震蕩反應(yīng)0.5~2.0h; 將(2)所得酶解液經(jīng)離心機(jī)4000-5000r/min，離心5_15min，離心后分為三層，上層為澄清淡黃色鯢油，中層為未水解成分，下層為富含多肽和氨基酸水解液的蛋白質(zhì)水解液，吸取上層得到粗鯢油。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用木瓜蛋白酶從大鯢尾部脂肪提取粗鯢油的方法，其特征在于，步驟(2)中，料液比為1:1.0，ρΗ為6.7，加酶量為0.3%，酶解時(shí)間為1.0h，酶解溫度為55。。。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用木瓜蛋白酶從大鯢尾部脂肪提取粗鯢油的方法，其特征在于，步驟(3)中，離心機(jī)轉(zhuǎn)速5000 r/min,離心時(shí)間IOmin0
【文檔編號(hào)】C11B1/00GK103666743SQ201310635618
【公開(kāi)日】2014年3月26日 申請(qǐng)日期:2013年12月3日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月3日
【發(fā)明者】羅慶華, 王苗苗, 吳沛霖, 王海磊 申請(qǐng)人:吉首大學(xué)