專利名稱：一種海洋真菌裂殖壺菌(Schizochytrium)LX0809及其工業(yè)應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及海洋微生物的應(yīng)用技術(shù)，具體講是一種海洋真菌裂殖壺菌 (Schizochytrium) LX0809及其在食品和飼料添加劑和生物柴油工業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用。其屬于 微生物應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
營養(yǎng)學和醫(yī)學研究表明，DHA是一種重要的營養(yǎng)保健品，可有效增進健康和抵御疾 病侵擾。DHA是人腦神經(jīng)細胞膜中主要的脂質(zhì)成分，也是大腦、神經(jīng)和視覺細胞中重要的脂 肪酸成分，對人體生理功能的正常發(fā)揮及多種疾病的防治有著重要作用，特別是在嬰幼兒 大腦和視覺系統(tǒng)發(fā)育過程中占有十分重要的地位。DHA參與嬰兒大腦組織(如腦囊泡，髓磷 脂和線粒體)發(fā)育。世界衛(wèi)生組織強烈建議在嬰兒食品中添加DHA。DHA可以從海洋魚油中提取，也可以通過海洋微生物發(fā)酵獲得。魚油DHA生產(chǎn)成本 低，價格便宜，但是魚油中常含有的滴滴涕、化學殺蟲劑、多氯聯(lián)苯類物質(zhì)、二惡英和六氯苯 等有害物質(zhì)。純種海洋微生物從純種培養(yǎng)到精煉都需嚴格消毒，無菌操作，并可采用國際認 可的食品安全生產(chǎn)及控制管理技術(shù)，所生產(chǎn)的油脂純度高、無污染，可做到不含或僅含微量 EPA,而且DHA穩(wěn)定，不含魚腥味。到目前為止，已有上百個品種海洋微生物的脂肪酸組成中含有DHA。它們隸屬于 硅藻類、金藻類、綠藻類、甲藻類、隱甲藻類、藍藻類和黃藻類。其中研究最多的菌種有三角 褐指藻、小球藻、鹽藻、中肋骨條藻、新月菱形藻、裂殖壺菌等。其中最有應(yīng)用價值和發(fā)展?jié)?力的海洋微生物是破囊壺菌科的(Thraustochytriaceae)的裂殖壺菌(Schizochytrium)。 它具有生產(chǎn)周期短、培養(yǎng)簡單、細胞內(nèi)脂肪酸和DHA含量高等優(yōu)勢，被認為是一種具有潛力 的DHA的新生資源，是目前進行工業(yè)化培養(yǎng)作為DHA來源最理想的物種之一。裂殖壺菌的 安全性已經(jīng)得到美國食品和藥品部(FDA)的認可，并開發(fā)了從醫(yī)藥、食品以及飼料等一系 列產(chǎn)品。授權(quán)公告號為CN1648233A的專利公開了一種以裂殖壺菌SR21的菌株為出發(fā)菌 株，通過化學和物理誘變相結(jié)合而得到的一株突變株0UC88，通過優(yōu)化菌株的培養(yǎng)條件下， 培養(yǎng)后期補加碳源，發(fā)酵液的細胞干重達到25g/l，DHA含量達到8. 27g/l。無論是發(fā)酵液 的細胞干重，還是DHA含量菌株0UC88均顯著低于本發(fā)明所述裂殖壺菌(Schizochytrium) LX0809 菌株。授權(quán)公告號為CN1916156A的專利公開了一種以裂殖壺菌WZU4771菌株及其在制 備DHA粉末和DHA油脂中的應(yīng)用。該菌株在優(yōu)化的培養(yǎng)條件下培養(yǎng)5天，發(fā)酵液的細胞干 重達到42. 15g/l，DHA含量達到14. lg/Ι。發(fā)酵液的細胞干重明顯低于本發(fā)明所述裂殖壺菌 (Schizochytrium) LX0809菌株，DHA含量也略低于本發(fā)明所述裂殖壺菌(Schizochytrium) LX0809菌株，發(fā)酵培養(yǎng)時間也長于本發(fā)明，不利于規(guī)?；a(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
有鑒于此，本發(fā)明的目的是提供一種生產(chǎn)周期更短、菌體細胞生物量增加更快、易 于規(guī)?；囵B(yǎng)并高產(chǎn)二十二碳六烯酸的裂殖壺菌菌株。在含有30 50g/L葡萄糖為碳源， 1 10g/L的玉米漿為氮源，包括鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽、錳鹽、硼化物、溴化物及其混合物的無機 鹽，pH為4. 5 8. 0的發(fā)酵培養(yǎng)基中20 30°C培養(yǎng)80 100小時，得到含有長鏈多不飽 和脂肪酸的油脂，包括二十二碳六烯酸(DHA)和二十二碳五烯酸(DPA)。本發(fā)明所述的裂殖壺菌(Schizochytrium)是以從遼寧省盤錦市大洼縣趙圈 河鄉(xiāng)紅海灘里(東經(jīng)122° 01'，北緯41° 11')采集的腐土上分離的菌株裂殖壺菌 (Schizochytrium) LX0809，該菌株已于2009年12月23日保藏在中國微生物菌種保藏管理 委員會普通微生物中心(北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號)，保藏編號為CGMCC No. 3535， 其具體的篩選步驟如下1、初篩取盤錦市沿海灘涂里的腐土接種在所述的初篩培養(yǎng)基(葡萄糖10g/l，酵 母粉2g/l，蛋白胨lg/Ι，青霉素0. 5g/l，鏈霉素0. 5g/l，瓊脂15g/l，用盤錦市海域海水稀 釋10倍后配制)平板上，30°C培養(yǎng)3天。挑取培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到新的平板上進行培養(yǎng)，劃線分 離得到純培養(yǎng)物。2、復篩將純培養(yǎng)物接種到所述的復篩培養(yǎng)基(葡萄糖40g/l，酵母粉5g/l，蛋白 胨3g/l，用盤錦市海域海水稀釋10倍后配制)中，在搖床上培養(yǎng)。離心分離得到培養(yǎng)物，真 空干燥至恒重，稱量細胞干重。索氏提取法檢測細胞干重中的脂肪含量，氣相色譜法檢測脂 肪中的DHA含量，以發(fā)酵液細胞干重和DHA產(chǎn)率為指標，篩選得到高產(chǎn)菌株，命名為LX0809。本發(fā)明所述的LX0809在在掃描和透視電鏡下觀察所述的高產(chǎn)DHA的菌株的外部 形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)，其特征為營養(yǎng)菌體為橢圓球形，由不連續(xù)的細胞壁包裹著，單核。細胞壁 由幾層緊壓在一起的致密鱗片構(gòu)成，在細胞壁不連續(xù)處可分辨鱗片，鱗片厚約2 3納米。 形成放射狀的、根狀的外質(zhì)網(wǎng)依附在底物上，外質(zhì)網(wǎng)產(chǎn)生于外質(zhì)網(wǎng)形成體，從細胞壁不連續(xù) 出長出。行無性繁殖，由營養(yǎng)菌體轉(zhuǎn)化為游動孢子囊，其內(nèi)有許多游動孢子。在游動孢子生 成過程中，細胞質(zhì)分裂緊接著每次細胞核分裂進行，并且形成四倍體細胞。游動孢子側(cè)生著 不等長的雙鞭毛，前向鞭毛兩邊排列茸鞭茸毛，后向鞭毛較短。存在由鱗片構(gòu)成的細胞壁、外質(zhì)網(wǎng)形成體和外質(zhì)網(wǎng)是現(xiàn)行的鑒定破囊壺菌科的標 準。破囊壺菌的游動孢子形成機制有兩種(1)分裂細胞核分裂完全完成后進行細胞質(zhì)分 裂的階段性和(2)細胞質(zhì)分裂緊接著每次細胞核分裂進行的連續(xù)性分裂。連續(xù)性分裂可以 形成四倍體細胞。以連續(xù)性分裂形成游動孢子，產(chǎn)生四倍體細胞，是裂殖壺菌的特征。因此， 所述的高產(chǎn)DHA的誘變菌株鑒定為裂殖壺菌，命名為裂殖壺菌(Schizochytrium)LX0809。所述的裂殖壺菌(Schizochytrium)LX0809在不同時間內(nèi)的培養(yǎng)基中發(fā)酵所得細 胞干重和DHA產(chǎn)量如圖1所示。發(fā)酵液離心后真空干燥得到菌體干粉，然后菌體干粉經(jīng)過 正己烷萃取，減壓蒸餾的到含有DHA毛油。毛油經(jīng)過脫膠、脫酸、脫色、脫臭、脫蠟等工藝過 程，加入抗氧化劑，混勻得到應(yīng)用于食品的DHA油脂。經(jīng)過氣相色譜檢測，油脂含量為細胞 干重重量百分含量的40 55%，其中飽和脂肪酸占油脂重量百分含量的40 45%，不飽 和脂肪酸占油脂重量百分含量的45 55%，其中DHA占油脂重量百分含量的35 40%， DPA占油脂重量百分含量的10 12%。可用作兒童和婦女的多不飽和脂肪酸補充的保健 品，也可作為食用油、乳制品和谷物制品等的食品添加劑，也可作為水產(chǎn)和畜牧養(yǎng)殖等的飼料添加劑。以棕櫚酸酯為主的甘油三酯經(jīng)過催化轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)制得棕櫚酸甲酯，可以作為生 物柴油使用。本發(fā)明的優(yōu)點在于所述的裂殖壺菌(SChiZOChytrium)LX0809能夠以普通 碳源(葡萄糖)和普通氮源(玉米漿)進行細胞生長和DHA積累；所述的裂殖壺菌 (Schizochytrium) LX0809通過培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件優(yōu)化，經(jīng)過100小時發(fā)酵培養(yǎng)可達到細胞 干重為72. 5g/l，DHA含量達到15. 3g/l，高于已見報道的菌株；裂殖壺菌(Schizochytrium) 的安全性已經(jīng)得到美國食品和藥品部(Food and Drug Administration)的認可，可開發(fā)從 醫(yī)藥、食品(尤其是孕婦、哺乳期婦女和兒童食品)以及飼料等一系列產(chǎn)品；所述裂殖壺菌 LX0809的氨基酸種類平衡，并富含甲硫氨酸和賴氨酸等必需氨基酸，適合作為食品和飼料 的添加劑；所述裂殖壺菌(Schizochytrium) LX0809的長鏈多不飽和脂肪酸譜簡單，除DHA 外，只含有少量的DPA，利于DHA分離和純化。


圖1為裂殖壺菌(Schizochytrium)LX0809(CGMCC3535)的在不同發(fā)酵時間下的細 胞干重和DHA產(chǎn)量。
具體實施例方式實施實例1.裂殖壺菌的篩選取遼寧省盤錦市大洼縣趙圈河鄉(xiāng)紅海灘里采集的腐土，接種在所述的初篩培養(yǎng) 基平板上，在30°C下富集培養(yǎng)5天。挑取培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到新的平板上進行培養(yǎng)，直到得到純培 養(yǎng)物為止。將純培養(yǎng)物接種到裝有50ml所述的復篩培養(yǎng)基的250ml搖瓶中，在200rpm的 搖床上培養(yǎng)3天，培養(yǎng)溫度為30°C。培養(yǎng)液經(jīng)過離心(8000rpm，5分鐘)、水洗后再離心，然 后真空干燥(溫度為60 80°C，真空度為80干帕)3小時，稱量細胞干重。采用索氏提取 法萃取細胞干粉中的油脂，然后用氣相色譜法檢測油脂中的脂肪酸組成，以DHA的產(chǎn)率作 為指標，篩選出高產(chǎn)DHA的裂殖壺菌菌株，命名為LX0809。采用離子色譜分析法得到所得裂 殖壺菌(Schizochytrium) LX0809菌株的氨基酸譜圖見表1。
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表1.裂殖壺菌(Schizochytrium) LX0809的氨基酸譜 分析結(jié)果顯示本發(fā)明所述的裂殖壺菌(SChiZOChytrium)LX0809的氨基酸種類及 各種氨基酸的數(shù)量與營養(yǎng)需要量相符，并且富含甲硫氨酸(2. 24% )和賴氨酸(6. 07% )等 必需氨基酸。從氨基酸角度來看，裂殖壺菌LX0809也是作為食品膳食補充劑和飼料添加劑 的理想來源。實施實例2.裂殖壺菌(Schizochytrium) LX0809的發(fā)酵生產(chǎn)將在斜面生長45小時的裂殖壺菌(Schizochytrium) LX0809菌種接種至500ml搖 瓶中。種子液和發(fā)酵培養(yǎng)基包括50g/L葡萄糖、10g/L玉米漿、5g/L氯化鈉、2g/L氯化鉀、 0. 5g/L硫酸鎂、0. 05g/L氯化錳、0. 01g/L硼酸、0. 01g/L溴化鉀。在30°C的搖床中以250rpm 的轉(zhuǎn)速培養(yǎng)至菌液的0D600達到1. 0時完成第一代活化，然后取IOml菌液接種至上述新鮮 培養(yǎng)基中，連續(xù)傳三代(均以至菌液的0D600達到1. 0時作為一代活化完成)，得到具有較 高活力的種子液；再以的接種量將種子液接種至5L的發(fā)酵罐，攪拌轉(zhuǎn)速300rpm，通氣量 3. 0升/分鐘，通過控制通氣量和攪拌轉(zhuǎn)速將發(fā)酵罐中溶解氧飽和度控制在40% (溶解氧 飽和度(％)=溶解氧實測含量/實測條件下溶解氧的飽和含量)，通過自動添加2. 5M的 硫酸或氫氧化鈉維持PH在7. 5。采用SBA-40C生物傳感分析儀(山東省科學院生物研究 所)測定發(fā)酵液中的葡萄糖含量，補料維持發(fā)酵液中的碳源和氮源濃度不變，90小時停止 發(fā)酵。發(fā)酵液經(jīng)離心(貝克曼Allegra 64R臺式高速冷凍離心機，8，OOOrpm，5分鐘) 棄上清，向離心管中加入與菌體相同體積的蒸餾水洗滌菌體細胞，然后再離心(貝克曼 Allegra 64R臺式高速冷凍離心機，10，OOOrpm，5分鐘)棄上清。然后濕菌體經(jīng)真空干燥 (溫度為60 80°C，真空度為80千帕)3小時，稱量的干細胞72. 3g/L。用正己烷萃取得 到菌體油脂36ml/L。取1. Og萃取的油脂置于200ml園底燒瓶中，加入濃度為0. 8M的氫氧
6化鉀_甲醇溶液70. 5ml，65°C水浴回流皂化15分鐘；冷卻后加入70ml 45% (w/v)的三氟 化硼_乙醚，于65°C水浴回流10分鐘甲酯化。冷卻后加入60ml正己烷振蕩2分鐘，再加 20ml飽和氯化鈉溶液，振蕩，靜置，收集上清液，減壓蒸餾去除正己烷后即得到脂肪酸甲酯。 氣相色譜檢測結(jié)果(表2)顯示，所得的裂殖壺菌LX0809的脂肪酸組成入表2所示。其中 棕櫚酸甘油三酯的含量最高，占油脂重量百分含量的40. 4%;DHA(C22:6n3)含量較高，占油 脂重量百分含量的38.0%，DPA(C22:5n6)含量次之，占油脂重量百分含量的10.5%，其它 油脂總計僅占12%，易于提取純化。表2.裂殖壺菌(Schizochytrium) LX0809的脂肪酸譜 實施實例3.裂殖壺菌(Schizochytrium) LX0809的發(fā)酵生產(chǎn)將在斜面生長45小時的裂殖壺菌(Schizochytrium) LX0809菌種按照實施例2的 方法活化，然后5%的接種量接種至5L發(fā)酵罐中。發(fā)酵培養(yǎng)基為30g/L葡萄糖、lg/L玉米 漿、5g/L氯化鈉、2g/L氯化鉀、0. 5g/L硫酸鎂、0. 05g/L氯化錳、0. 01g/L硼酸、0. 01g/L溴 化鉀。按照實施例2條件發(fā)酵80小時停止發(fā)酵，測得發(fā)酵液細胞干重為67. 7g/L。用正 己烷萃取得到菌體油脂32ml/L。取l.Og萃取的油脂置于200ml園底燒瓶中，加入濃度為 0. 8M的氫氧化鉀-甲醇溶液70. 5ml，65°C水浴回流皂化15分鐘；冷卻后加入70ml 45% (w/v)的三氟化硼-乙醚，于65°C水浴回流10分鐘甲酯化。冷卻后加入60ml正己烷振蕩 2分鐘，再加20ml飽和氯化鈉溶液，振蕩，靜置，收集上清液，減壓蒸餾去除正己烷后即得 到脂肪酸甲酯。菌體細胞油脂的脂肪酸譜如表3所示。其中棕櫚酸甘油三酯的含量最高， 占油脂重量百分含量的42. 5% ；DHA(C22:6n3)含量較高，占油脂重量百分含量的36. 0%， DPA(C22:5n6)含量次之，占油脂重量百分含量的10. 5 %，其它油脂總計僅占11%，易于提 取純化和工業(yè)化生產(chǎn)。
表3.裂殖壺菌(Schizochytrium) LX0809的脂肪酸譜 實施實例4.裂殖壺菌(Schizochytrium) LX0809的發(fā)酵生產(chǎn)將在斜面生長45小時的裂殖壺菌(Schizochytrium) LX0809菌種按照實施例2的 方法活化，然后5%的接種量接種至5L發(fā)酵罐中。發(fā)酵培養(yǎng)基為40g/L葡萄糖、5g/L玉米 漿、5g/L氯化鈉、2g/L氯化鉀、0. 5g/L硫酸鎂、0. 05g/L氯化錳、0. Olg/L硼酸、0. Olg/L溴化 鉀。按照實施例2條件發(fā)酵90小時停止發(fā)酵，測得發(fā)酵液細胞干重為71. 6g/L。用正己烷 萃取得到菌體油脂105ml。取1. Og萃取的油脂置于200ml園底燒瓶中，加入濃度為0. 8M的 氫氧化鉀_甲醇溶液70. 5ml，65°C水浴回流皂化15分鐘；冷卻后加入70ml 45% (w/v)的 三氟化硼-乙醚，于65°C水浴回流10分鐘甲酯化。冷卻后加入60ml正己烷振蕩2分鐘， 再加20ml飽和氯化鈉溶液，振蕩，靜置，收集上清液，減壓蒸餾去除正己烷后即得到脂肪酸 甲酯。菌體細胞油脂的脂肪酸譜如表4所示。表4.裂殖壺菌(Schizochytrium) LX0809的脂肪酸譜 實施實例5.裂殖壺菌菌體細胞油脂的提取和精煉取實施實例2所述裂殖壺菌(Schizochytrium) LX0809的干燥細胞200g，用濾紙包裹后置于索氏提取器，用500ml正己烷浸出24小時，然后在減壓蒸餾分離除去正己烷得到 96ml毛油。毛油在攪拌下加入Iml濃度為95%的磷酸，再加入300ml熱水混合均勻后。靜 置分層后取出上層毛油，用熱水反復洗滌至PH值中性。然后在強烈的攪拌下，加入Iml濃 度為8%的氫氧化鈉溶液。加熱至90°C，靜置沉降，除去皂腳。再用50ml的90°C去離子水 洗滌，然后真空干燥，干燥溫度為60 80°C，真空度為80. 0千帕。向干燥油脂中加入2. 5g 活性白土吸附脫色，脫色溫度為90°C，脫色時間為20分鐘。過濾除去活性白土。然后對油 脂采用水蒸氣氣提脫臭，脫臭溫度為180°C，脫臭時間為2小時。脫臭后油脂在慢速攪拌下， 冷卻至4 6°C左右，約24小時，使固體脂肪生成較大結(jié)晶，沉淀析出。過濾分離得到39ml DHA含量80%以上液體油和43g固體脂肪。向液體油中加入抗氧化劑，得到富含DHA的成 品油脂。實施實例6.裂殖壺菌(Schizochytrium) LX0809的規(guī)?；a(chǎn)按照實施實例4所述的方法，得到具有較高活力的種子液；然后將裂殖壺菌 (Schizochytrium)LX0809菌液以5%的接種量將種子液接種至20噸發(fā)酵罐中，攪拌轉(zhuǎn)速 300rpm，通氣量1. Ovvm，通過控制通氣量和攪拌轉(zhuǎn)速將發(fā)酵罐中溶解氧飽和度控制在5 55% (溶解氧飽和度(％)=溶解氧實測含量/實測條件下溶解氧的飽和含量)，通過自動 添加2. 5M的硫酸或氫氧化鈉維持pH在5. 5 7. 5之間。采用SBA-40C生物傳感分析儀 測定發(fā)酵液中的葡萄糖含量，通過補料維持發(fā)酵液中葡萄糖濃度為40g/L，100小時停止發(fā) 酵。用碟片離心機分離出菌體細胞，然后在氣流干燥機中干燥得到1604kg菌體細胞(含水 量低于8% )，然后干燥細胞在萃取罐中用正己烷萃取，萃取溫度為40 50°C，板框過濾去 除菌體碎片，然后在減壓蒸餾分離正己烷得到748kg毛油。取374kg毛油按照實施實例4 所述的方法對毛油進行脫膠、脫酸、脫色、脫臭和冬化處理，得到DHA含量80%以上液體油 156kg和171kg固體脂肪。將固體脂肪171kg，置于酯交換反應(yīng)器，加入4275kg甲醇和17kg 的氫氧化鉀，在65°C下反應(yīng)1小時，沉降分層，取上層脂肪酸甲酯經(jīng)分子蒸餾得到157kg生 物柴油，產(chǎn)率達到92 %。所得生物柴油以棕櫚酸甲酯為主符合2#礦物柴油和相關(guān)國家制定 的生物柴油的標準，可以作為礦物柴油的替代燃料使用。實施實例7.裂殖壺菌(Schizochytrium) LX0809在食品和飼料中的應(yīng)用將上述實施實例6方法所得的發(fā)酵液經(jīng)過121°C殺菌20分鐘，經(jīng)過碟式離心機脫 水后送入旋轉(zhuǎn)閃蒸干燥機中干燥得到含水量為5%的菌體干粉，可直接作為食品和飼料添 加劑。將菌體干粉用正己烷萃取后得到毛油，減壓蒸餾除去正己烷，然后將毛油通過脫膠、 脫酸、脫色、脫臭處理得到含DHA重量百分含量為65%，可直接食用或與其它食用油一起食 用。
權(quán)利要求
一株海洋真菌裂殖壺菌(Schizochytrium)LX0809，該菌種保藏號為CGMCC No.3535，在含有碳源、氮源和無機鹽的發(fā)酵培養(yǎng)基中20～30℃培養(yǎng)80～100小時，得到含有長鏈多不飽和脂肪酸的油脂，包括二十二碳六烯酸(DHA)和二十二碳五烯酸(DPA)，可應(yīng)用于食品和飼料添加劑。
2.權(quán)利要求1所述裂殖壺菌(SChiZOChytrium)LX0809的發(fā)酵培養(yǎng)基以濃度為30 50g/L葡萄糖為碳源；以1 10g/L的玉米漿為氮源；所述發(fā)酵培養(yǎng)基的無機鹽包括鈉鹽、 鉀鹽、鎂鹽、錳鹽、硼化物、溴化物及其混合物；所述發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為4. 5 8. 0。
3.權(quán)利要求1所述的裂殖壺菌(SChiZOChytrium)LX0809細胞的油脂重量為菌體細胞 干重的40 55%，其中飽和脂肪酸甘油三酯占油脂重量百分含量的40 45wt. %，不飽和 脂肪酸甘油三酯占油脂重量百分含量的45 55%，其中二十二碳六烯酸(DHA)甘油三酯占 油脂重量百分含量的35 40%，二十二碳五烯酸(DPA)甘油三酯占油脂重量百分含量的 10 12%。
4.權(quán)利要求1所述的裂殖壺菌(Schizochytrium)LX0809菌體細胞中的DHA可用作兒 童和婦女的多不飽和脂肪酸來源補充的保健品，也可作為食用油、乳制品和谷物制品等領(lǐng) 域的食品添加劑和水產(chǎn)和畜牧養(yǎng)殖等領(lǐng)域的飼料添加劑。
5.權(quán)利要求1所述的裂殖壺菌(SChiZOChytrium)LX0809菌體細胞中以棕櫚酸酯為主 的飽和脂肪酸甘油三酯，經(jīng)過催化轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)制得棕櫚酸甲酯，可以作為礦物柴油的替代 燃料使用。全文摘要
本發(fā)明提供了一種海洋真菌裂殖壺菌LX0809，其具有高產(chǎn)二十二碳六烯酸(DHA)的能力。本發(fā)明所述的裂殖壺菌LX0809分離自遼寧省盤錦市大洼縣趙圈河鄉(xiāng)紅海灘里采集的腐土，已于2009年12月23日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為CGMCC No.3535，所述裂殖壺菌LX0809通過補料發(fā)酵，發(fā)酵液的細胞干重可達到72.5g/L，DHA的產(chǎn)量達到15.3g/L。LX0809菌體細胞及其提取物既可用作食用油、乳制品和谷物制品等的食品添加劑，也可作為水產(chǎn)和畜牧養(yǎng)殖等的飼料添加劑。菌體細胞中的飽和甘油三酯，經(jīng)催化轉(zhuǎn)酯化反應(yīng)可制得生物柴油。
文檔編號C11C3/10GK101892160SQ20101000005
公開日2010年11月24日 申請日期2010年1月6日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月6日
發(fā)明者楊勇, 郗大興 申請人:吉林省?，斏锟萍加邢薰?br>