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用于藥妝應用的源自油棕植物液的植物提取物的制作方法

文檔序號:1560865閱讀:429來源:國知局
專利名稱:用于藥妝應用的源自油棕植物液的植物提取物的制作方法
技術領域
本發(fā)明涉及一種藥妝混合物,包含提取自棕櫚油碾磨過程的植物液的酚類化合 物,所述混合物能改善皮膚健康狀況。 本發(fā)明進一步涉及處理或減少皮膚皺紋和細紋的方法,包括將有效量的來自所述 混合物的生物活性酚類及其它化合物應用到皮膚上。
輛,i羊麵日月 本發(fā)明的目的在于,提出從油棕碾磨過程獲得的油棕植物液的植物提取物的藥妝 應用,其可用于提升皮膚健康狀況和延緩皮膚老化。相應地,本發(fā)明還涉及從油棕榨油過程 中提取油棕植物液的抗氧劑的提取方法。油棕的加工過程產生了大量的富含酚類化合物、 果酸、果糖和甘油的植物液,所述的酚類化合物、果酸、果糖和甘油可以利用EP1398311中 簡要公開的膜過濾技術進一步地富集。 所述提取物含有酚類化合物、果酸、果糖和甘油,它們在抑制皮膚老化上具有很好 的整體效應。所述酚類通過多種機制延緩皮膚衰老,包括但不限于彈性蛋白酶抑制、膠原蛋 白酶抑制、抗氧活性、自由基清除、透明質酸酶抑制和消炎作用。所述酚類化合物的酪氨酸 酶抑制活性提升皮膚美白。炎癥過程生成可導致疤和皺紋的微小疤痕。油棕酚類化合物的 消炎功能可以緩和、保護和復原膚色及皮膚完整性。油棕酚類化合物的抗菌性能在防止皮 膚感染和提高藥妝的穩(wěn)定性進而增長保質期方面發(fā)揮了作用。局部使用的潤膚品用于滋養(yǎng) 和調和皮膚,油棕植物液提取物中的甘油和糖通過水合作用支撐皮膚結構。果酸用于通過 增強表皮剝落改善皮膚結構,并且在油棕植物液提取物中還有類似的酸存在。
具體實施例方式
結合實施例對依據本發(fā)明的藥妝的制備進行了詳細描述。但是,本發(fā)明不限于這 些實施例。 在實施例中,發(fā)明人從來自棕櫚油碾磨過程中的油棕植物液中離析出了包含酚類 化合物、果酸、果糖和甘油的植物提取物,并且制備含有這些提取物的配方(操作實例)和 不含有這些油棕酚類提取物的混合物(對照例)。 本發(fā)明著重研究包含酚類化合物的藥妝混合物,所述的酚類化合物是強抗氧劑,且可防止皮膚老化。 本發(fā)明也對含有如增白和去皺化妝品成分的合成物質的藥妝混合物進行了說明,其中的所述天然化合物與合成物質二者形成協同促進作用。 用于本發(fā)明的油棕植物液的生物活性提取物可通過任意能夠從植物液中提取酚類化合物的方法制備,如利用標準提取工藝或在美國專利4, 232,122、美國專利申請US2003031740和WO/2006/090953中公開的技術。這些提取方法包括但不限于使用乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯和丁醇。 除了提取物的直接利用外,利用油棕酚類化合物的不同組分也是可行的。組成提
取物的有效量或有效部分依賴于提取物的純度。例如,如果使用純度大約為10%的含有酚
類的粗提取物,提取物的使用通常在混合物重量大約0. 01 20 %的濃度范圍內。純度越
高,達到相同的效果使用的百分比例越小。假設有大體上純的酚類提取物,例如包含至少
80%活性酚類的提取物,使用水平應在混合物重量的大約0. 01 8%之間。 大體上酚類純的提取物可以任何適于局部應用的形式生產。這些形式包括溶液、
膠體分散系、水包油或油包水懸浮液、乳霜、凝膠、搽劑、凝膠、粉末、泡沫、摩絲等,用于不同
載體形式的藥妝的方法是本領域公知的,可在任何標準化妝品文獻中找到。 大體上純的酚類提取物也可以任何適于口服的形式生產。這些形式包括液體和粉末。 化妝品的類型并不具體限定,可以是,例如,個人護理產品如護膚霜、搽劑、潤膚水、面霜、清潔劑;化妝品如口紅和粉底;或護發(fā)產品。所述化妝品可不受限制用于任何形式。用于外用的皮膚制劑可以是,例如,藥膏或各種皮膚病制劑。 本發(fā)明的混合物可用于預防及處理皮膚中彈性蛋白酶的活性或彈性蛋白水平的減少導致的問題。例如,所述混合物具有改善老化皮膚硬度和彈性及減少細紋和皺紋的作用。所述混合物也可用于皮膚美白。而且,本發(fā)明的混合物具有一系列的治療應用,如促進創(chuàng)傷愈合。所述混合物也可以用于改善皮膚狀況,如硬皮病。
油棕中酚類化合物的含量 100 ii 1的油棕提取物與0. 2ml的福林-喬卡梯奧試劑(西格瑪)、2ml的水和lml的15%的Na2C03混合,并在室溫下溫育2h后,在波長為765nm處測量其吸光度。標準曲線利用不同濃度的沒食子酸(GAE)繪制,總的酚酸含量用沒食子酸當量(GAE)表示。
下述非何限制性實施例對本發(fā)明的藥妝及方法進行了說明。
實施例 除非特別指明,在以下實施例中,所述油棕酚類提取物是不含溶劑的粗提取物。
彈件g白酶抑制活件 彈性蛋白是皮膚結締組織中的硬蛋白,皮膚彈性主要由其負責。在炎癥和皮膚老化過程中,彈性蛋白分解為可溶性的多肽,真皮中彈性蛋白的量減少。彈性蛋白酶負責彈性蛋白的降解。因此,抑制彈性蛋白酶的活性可幫助維持皮膚蛋白水平和彈性。故進行分析實驗測定油棕酚類提取物對彈性蛋白酶的抑制。通過測量由胰彈性蛋白酶作用于底物N-琥珀酰-丙胺酸-丙胺酸-丙胺酸-p-硝基苯胺產生的4-硝基苯胺(4-nitoanilide)肽段的量,利用分光光度法評估彈性蛋白酶的活性。N-琥珀酰-丙胺酸-丙胺酸-丙胺酸-p-硝基苯胺西格瑪)和其它用于測試的物質在37t:下預先溫育,并通過酶(豬胰彈性蛋白酶,羅
5氏)的加入啟始反應。被釋放的游離4-硝基苯胺的量在30分鐘后通過測定波長為410nm 處的吸光度來測量。0. 2M的pH為8. 0的Tris-HCl緩沖液用作陰性對照。分析基質中最終 濃度為20ng/ml的彈性蛋白酶抑制劑作為陽性對照。油棕提取物在分析基質中的最終濃度 為4 20X,相當于60 300ppm的沒食子酸當量(GAE)。下圖顯示了得到的結果。陰性 對照的吸光度最大。對彈性蛋白酶活性的抑制產生較少的4-硝基苯胺和相應地較小的吸 光度。油棕酚類顯示出對彈性蛋白酶活性顯著的劑量依賴式的抑制功能。所述油棕酚類提 取物表現出大約13%的抑制效應,而代表快速色譜純化后的純化濾液3和純化濾液4分別 表現出了大約92%和98%的抑制效應。可以看出,油棕酚類抑制了彈性蛋白的降解,并轉
化為對皮膚的有益效果,如彈性的維持和隨之而來的抗老化效應。
彈性蛋白酶抑制分析
120.00 7
糊加
60.00 40,00 20.00
97.64
o.oo ^-
'^^^^^
- ^^^^^^^
12.89
純化濾液3
純化濾液4
濾液
4ng/ml彈性蛋 白酶抑制劑
膠原蛋白酶抑制分析 膠原蛋白酶(酶EC 3.4.24.3,5iig)單獨或與提取物一起加入到含有PZ肽 (0. 5mg)的O. lM的Tris緩沖液(pH7. 4)中,使總體積為1. 7ml,PZ肽是膠原蛋白酶的底物。 混合物在37t:水浴中溫育30min,然后加入lml的25mM的檸檬酸溶液終止酶反應。加入 5ml的乙酸乙酯混合后,利用紫外分光光度計在波長為320nm處測量有機層的吸光度。膠原 蛋白酶抑制由以下公式計算 膠原蛋白酶抑制百分比=[(Ac-As)/Ac]X100,其中,Ac表示(含有膠原蛋白酶的 對照的吸光度-不含膠原蛋白酶的對照的吸光度),as表示(含有膠原蛋白酶的樣品的吸 光度_不含膠原蛋白酶的樣品的吸光度)。 與對照相比,油棕提取物表現出顯著的膠原蛋白酶抑制活性。
透明質酸(HAase)抑制分析 HAase溶液(7900單位/ml的0. 1M的醋酸緩沖液,pH 3. 5)與100 iU的樣品混合 后,在37。C的水浴溫育器中溫育20min。加入HAase催化劑(0. lml的12. 5mM的CaCl2)后 再溫育20min。為啟始HAase反應,加入250 yl含透明質酸底物(1. 2mg/ml)的0. 1M醋酸 緩沖液(pH 3. 5)后,在37t:的水浴溫育器中溫育40min。為終止HAase反應,加入0. lml的 0. 4N的NaOH溶液和0. lml的0. 4M的四硼酸鉀溶液,然后在沸水中加熱3min。待完全冷卻
6后,力B入3ml的DMAB試劑(4g r-二甲基氨基苯甲醛(demethylaminobenaldehyde) 、350ml 冰醋酸和50ml的10M HC1)到反應物中,并在37。C水浴器中溫育20min。利用紫外分光光度 計在波長為585nm處進測量HAase反應產物4-乙酰氨基葡萄糖(4-acetylglucosamine)。 HAase抑制活性用相比對照的減少表示; 透明質酸酶抑制百分比=[(Ac-As)/Ac] X 100,其中,Ac和As分別是對照和樣品 的吸光度。對照用1 %的匿SO溶液代替提取物。
油棕提取物具有顯著的HAase抑制活性。
消炎活性 消炎活性采用凱曼環(huán)氧化酶(COX)抑制劑檢測分析試劑盒(目錄No. 560101))按 照制造商的說明書進行測量。采用此試劑盒,觀察到了弱的C0X活性。
抗氧活性分析 采用了多種方法確定抗氧活性,其中兩種如下所述
自由基清除活性分析
分析原理 DPPH'的自由基形式呈現出紫色,在波長為515nm處有最大吸收??寡鮿┤缒承┓?類化合物,能夠清除DPPH'自由基,從而使紫色的色飽和度降低,這可以通過分光光度法測 自由基清除分析 將DPPH'的儲備液用水稀釋到0. 025mg/ml,并使最終溶液中含有50%的甲醇。制 備濃度為300ppm(300 ii g/ml)的沒食子酸,用于測試的物質制備成濃度為300ppm GAE的水溶液。 在盛有975iU的DPPH'溶液的試管中加入25iU樣品。使用分光光度法每隔 0. lmin測定在波長為515nm處的吸光度,連續(xù)監(jiān)測2min。對照用水代替樣品,并采用相同 的處理方式。空白含有50X的甲醇代替DPra',并用水代替樣品。測試值要減掉空白值。
DPPH'在任意特定吸光度處的濃度均可利用下面的公式從DPPH'標準曲線中計算 得到 Y = aX+b其中,Y =吸光度(波長為51Snm處)
X = DPPH'的濃度(Dg/ml)
a =線性回歸系數
b = y-截足巨 因為標準曲線經過原點,所以b = 0。整理公式
x = —.......(3) 殘留DPPH'的百分比(% DPra',)采用下面的公式計算%DPPH*rem = ]( x100 (4)。 其中,[DPPH']t = DPPH'在時間為t時的濃度g/ml)
[DPra ] 。 = DPra 的初始濃度(y g/ml)
繪制殘留的DPPH'百分比隨時間變化的圖,并依此推算半衰期(t1/2),半衰期是指 DPPH'的濃度減少到初始濃度的50%時所需要的時間。 與對照相比,油棕提取物表現出了顯著的清除功能(方差分析,F = 74.314, p < 0. 001)。油棕提取物的半衰期為0. 64min或更少。在酚類的此濃度下少于0. 7min的半 衰期(如t^定義所示,要清除50^的初始DPra'自由基)表明,酚類化合物因其清除自由 基的高效快速,可以對機體和皮膚施加有益的效果。
采用13 _胡蘿卜素_亞油酸的分析
分析原理 亞油酸(多不飽和脂肪酸)和13 _胡蘿卜素對熱、光和空氣敏感。當雙鍵全部被 氧化時,P-胡蘿卜素(黃色)變?yōu)闊o色。氧化程度可通過黃色的色飽和度的下降反映出 來,這可通過分光光度法監(jiān)測。P-胡蘿卜素自發(fā)氧化,但是速度非常慢。亞油酸在熱、空氣 和光存在的條件下很容易氧化為過氧化物形式,在過氧化物形成的過程中產生自由基(過 氧自由基、烷氧基自由基、氫氧自由基),當自由基存在時,加速了 P-胡蘿卜素的氧化。在 抗氧劑存在時,如某些酚類化合物,自由基的形成受阻,因此減慢了 P-胡蘿卜素的脫色過 程。 分析過禾呈 油棕酚類提取物在睡制備成濃度為5, 000pm GAE的溶液。沒食子酸制備成濃度為 5,000卯m的水溶液。 給2瓶100ml水中充入壓縮空氣(購自Malaysian Oxygen Berhad,馬來西 亞)5min作氧處理。 將2. Omg的P -胡蘿卜素溶于10ml氯仿中制備P _胡蘿卜素溶液,用吸液槍吸取 2ml上述溶液加入到250ml的圓底燒瓶中。在40°C的真空中利用旋轉蒸發(fā)儀(型號461, 購自Buchi Laboratorium-Technik AG Postfach,瑞士)和抽吸泵(型號SUQ3,購自Heto Lab Equipment A/S,丹麥)去除氯仿。向圓底燒瓶中加入40mg亞油酸、400mg吐溫40和 100ml經氧處理的水。同時制備不含P-胡蘿卜素的相似的乳液。燒瓶劇烈振蕩5min。
用吸液槍吸取100 ill和200 ill樣品分別加入不同的試管,用甲醇調節(jié)至最終體 積為200iU。對照用水代替樣品,并作相同處理??瞻字泻袠悠泛腿橐?,但不含有P-胡 蘿卜素。測試值要減去空白值。 用分光光度法測量含有13 _胡蘿卜素的乳液在波長為470nm處的吸光度。這個吸 光度作為零時吸光度。測試后馬上加入4.8ml的乳液到含有樣品的試管中。分析基質中 酚類化合物的最終濃度為100和200ppm GAE。隨后將樣品置于5(TC的水浴中2h,并每隔 30min測量一次吸光度。 殘留13 -胡蘿卜素的百分比按如下計算
殘留百分比"^" xlOO.......(6) 其中,0Dt =時間為t的吸光度; 0D。=初始吸光度。 如下圖所示,油棕酚類提取物表現出對氧化的有力抑制。
時間(min) 不同樣品對|3 -胡蘿卜素氧化的抑制 線條顯示殘留口 _胡蘿卜素隨時間變化的百分比對照(X —X) , 100卯m的沒食 子酸(□ — □ ) 、200卯m的沒食子酸(■ — ■);及油棕提取物為100ppmGAE( △ — △) 和200ppm GAE ( K __K )。 當然,本發(fā)明的混合物可制備成化妝保養(yǎng)品或皮膚病護理品的形式,例如,包括但 不限于凝膠、湯劑、乳霜或粉末;個人護理產品,如護膚霜、搽劑、潤膚水、面霜、和清潔劑; 化妝品,如口紅和粉底;或護發(fā)產品?;瘖y品不受限制用于任何形式。用于外用的皮膚制劑 可以是,例如,藥膏或各種皮膚病制劑。 應當理解,如在此公開和描述的那樣,本發(fā)明不僅可以以各自組合的方式應用,也 可以在不偏離本發(fā)明意圖的范圍內以單一形式應用。
(%) g-^to.
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權利要求
一種藥妝混合物,其特征在于,所述混合物包含提取自棕櫚油碾磨過程的植物液的酚類化合物,所述混合物改善皮膚健康狀況。
2. 根據權利要求1所述的混合物,其特征在于,所述改善皮膚健康狀況包括防止皮膚 老化。
3. 根據權利要求1所述的混合物,其特征在于,所述混合物富含抗氧劑。
4. 根據權利要求1所述的混合物,其特征在于,所述混合物制備成直接用于皮膚的形 式或外用的皮膚病護理品及制劑。
5. 根據權利要求1所述的混合物,其特征在于,所述混合物制備成口服形式。
6. 根據權利要求1所述的混合物,其特征在于,所述混合物制備成化妝品的形式。
7. 根據權利要求1所述的混合物,其特征在于,所述混合物制備成護發(fā)品的形式。
8. 根據權利要求1所述的混合物,其特征在于,所述混合物制備成藥浴品的形式。
9. 根據權利要求1所述的混合物,其特征在于,所述混合物制備成凝膠的形式。
10. 根據權利要求1所述的混合物,其特征在于,所述混合物制備成粉末的形式。
11. 根據權利要求1所述的混合物,其特征在于,所述混合物制備成湯劑和藥膏的形式。
12. —種處理或減少皮膚皺紋和細紋的方法,其特征在于,包括應用有效量的來自如權 利要求1所述的混合物的生物活性酚類及其它化合物于皮膚。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種藥妝混合物,包含提取自棕櫚油碾磨過程的植物液的酚類化合物、果酸和果糖。這種混合物富含抗氧劑,顯著地改善皮膚健康狀況,包括防止皮膚的老化。
文檔編號A61Q19/08GK101711163SQ200880017954
公開日2010年5月19日 申請日期2008年4月14日 優(yōu)先權日2007年4月12日
發(fā)明者卡里亞納·桑德拉姆·P.·馬尼卡姆, 拉維加德維·沙姆巴沙穆提, 莫哈末·巴斯利·瓦西德, 譚友愛 申請人:馬來西亞棕櫚油協會
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