專利名稱：：富含異構(gòu)體的共軛亞油酸組合物的制備方法富含異構(gòu)體的共軛亞油酸組合物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種組合物的生產(chǎn)方法。尤其是，本發(fā)明涉及包含共軛亞油酸(CLA)的順9，反11和反10，順12異構(gòu)體，并且一種異構(gòu)體比另一種異構(gòu)體含量豐富的組合物的生產(chǎn)方法。人們對(duì)于食品中的共軛長鏈多不飽和脂肪酸，如CLA，對(duì)于動(dòng)物和人類的有益作用的認(rèn)識(shí)由來已久。CLA是含18個(gè)碳原子的共軛二烯脂肪酸。由于CLA中有兩個(gè)雙鍵，因此可能存在幾何異構(gòu)現(xiàn)象并且CLA分子或半族可存在許多異構(gòu)體形式。CLA中順9，反11("c9tll")和反10，順12("tl0cl2")異構(gòu)體通常最豐富，并且己經(jīng)鑒定出這兩種異構(gòu)體每一種均具有有益的藥理作用。由于順9，反11和反10，順12異構(gòu)體在化學(xué)合成的CLA混合物中的含量通常是大約等摩爾數(shù)的，因此，人們需要可將這兩種異構(gòu)體純化或使混合物富含其中一種異構(gòu)體的方法。特別是由于一種異構(gòu)體的藥理作用可會(huì)與另一種異構(gòu)體明顯不同，富含其中一種異構(gòu)體的CLA混合物可有有利的藥理作用。專利WO97/18320描述了高含量長鏈多不飽和脂肪酸物質(zhì)的制備方法。該方法包括使用能夠辨別不同幾何異構(gòu)體的酶。Nagao等人的文章(JAOCS，volume79,no3，(2002)，pages303to308)描述了通過皺褶念珠菌脂酶的選擇性酯化作用分餾和富集CLA異構(gòu)體。使用月桂醇以形成酯類。Haas等人的文章(Lipids,Volume34，no9，(1999)，pages979to987)描述了共軛亞油酸異構(gòu)體的脂酶催化分餾。該方法是小規(guī)模進(jìn)行的并且該文獻(xiàn)得出的結(jié)論是酶催化的酯化作用比水解作用更切合實(shí)際。專利US20010025113描述了富含異構(gòu)體的CLA組合物。在其中一個(gè)例子中，富含異構(gòu)體的混合物可通過使來自共軛后產(chǎn)生的1:1異構(gòu)體混合物的乙酯混合物結(jié)晶而獲得。該方法需要在低于-57。C的非常低的溫度下進(jìn)行。專利US6420577公開了商業(yè)上制備CLA的方法。用結(jié)晶純化CLA但不分離不同異構(gòu)體。Berdeaux等人(JAOCS，Volume75，no12(1998)，pages1749-1755)和Kim等人(J.FoodSci.Nutr，Volume5，no2(2000)，pages86-92)的文章公開了包括堿-異構(gòu)化亞油酸甲酯的甲基脂類的分離和純化的亞油酸共軛異構(gòu)體的制備方法。Kim等人(J.FoodSci.Nutr，Volume5，no1(2000)，pages10—14)公開了從紅花油(SSO)中化學(xué)合成高純度CLA的制備方法。專利WO2005/087017公開了富含CLA的順10，反12異構(gòu)體的組合物和富含CLA的反9,順11異構(gòu)體的組合物的合成方法。盡管CLA異構(gòu)體混合物的生產(chǎn)方法是已知的，但使一種異構(gòu)體的量增加至相對(duì)高的水平仍存在困難。例如，依賴于與另一種異構(gòu)體相比，對(duì)一種異構(gòu)體具有選擇性的脂酶的方法需要使反應(yīng)不完全進(jìn)行，因此，這是產(chǎn)量和異構(gòu)體富集程度的折衷。人們?nèi)匀恍枰缓环N異構(gòu)體的CLA異構(gòu)體混合物的制備方法，這種方法使一種異構(gòu)體的產(chǎn)量和/或含量相對(duì)于另一種異構(gòu)體的相對(duì)較高并且這種方法能以相對(duì)大的規(guī)模相對(duì)經(jīng)濟(jì)的條件下進(jìn)行，例如，不需要非常低的溫度(如低于-57°C)。CLA異構(gòu)體的分離通常是以酯類形式的CLA異構(gòu)體進(jìn)行。這樣做的理由被認(rèn)為是由于酯類與游離酸的熔點(diǎn)差別較大。熔點(diǎn)上的較大差別使得酯類比游離酸易于通過結(jié)晶分離。事實(shí)上，文獻(xiàn)中將相應(yīng)游離酸的異構(gòu)體的分離描述成幾乎是不可能的(見，例如，專利US2001/0018453)。此外，Jain等人(J.Agric，F(xiàn)oodChem，Volume54(2006)，pages5590-55%)認(rèn)為正是這些異構(gòu)體的不可分離性限制了其商業(yè)應(yīng)用。然而，分離酯類可需要額外的自游離酸形成酯類的歩驟，這一步驟可能是昂貴和費(fèi)時(shí)的。因此，仍然特別需要富含一種異構(gòu)體的CLA異構(gòu)體混合物的能夠克服上述問題的制備方法。本發(fā)明提供了包含共軛亞油酸(CLA)的順9，反11和反10，順12異構(gòu)體的組合物的制備方法，該方法包括-產(chǎn)生包含共軛亞油酸(CLA)的順9,反11和反10，順12異構(gòu)體的混合物，其中順9，反11和反10，順12異構(gòu)體中的一種異構(gòu)體相對(duì)于另一種異構(gòu)體的第一重量比X至少是1.3:1;和-使該混合物結(jié)晶以形成包含順9，反11和反10，順12異構(gòu)體的組合物，其中順9，反11和反10，順12異構(gòu)體中的一種異構(gòu)體相對(duì)于另一種異構(gòu)體的第二重量比是Y，其中Y大于X。已發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的方法使包含相對(duì)大量的順9，反11或反10，順12異構(gòu)體，優(yōu)選順9，反ll異構(gòu)體的組合物具有良好產(chǎn)率。令人吃驚的是，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，盡管順9，反11和反10，順12異構(gòu)體的熔點(diǎn)非常相近，包含CLA的順9，反11和反10、順12異構(gòu)體的游離酸的混合物也可通過使混合物經(jīng)過根據(jù)本發(fā)明的結(jié)晶步驟而分離。此外，人們吃驚地發(fā)現(xiàn)，通過調(diào)整結(jié)晶前這兩種異構(gòu)體的比例，可能可以在高于例如使相應(yīng)酯類結(jié)晶的所需溫度的溫度上如分離游離酸一樣通過結(jié)晶分離不同的異構(gòu)體。優(yōu)選地，結(jié)晶在溶劑存在條件下進(jìn)行。適合的溶劑包括極性有機(jī)化合物。更優(yōu)選的溶劑包含C3至C6酮、C1至C6醇、水或它們的混合物。最優(yōu)選的溶劑是丙酮，可將丙酮單獨(dú)使用或與一種或多種其他溶劑混合使用，比如與水混合使用，但在該混合物中丙酮是溶劑的主要組分(即其中丙酮的量按重量計(jì)是至少55%，更優(yōu)選是至少70%，甚至更優(yōu)選是至少90%)。結(jié)晶優(yōu)選在實(shí)質(zhì)上沒有或完全沒有尿素的條件下進(jìn)行。例如，尿素的量優(yōu)選低于溶劑重量的5%，按重量計(jì)更優(yōu)選低于3%，如按重量計(jì)低于1%，如按重量計(jì)低于0.5%，按重量計(jì)低于0.1%甚至按重量計(jì)0%。構(gòu)成本發(fā)明的方法的部分的結(jié)晶步驟在使用適量的溶劑下進(jìn)行以影響選擇性結(jié)晶。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)尤其優(yōu)選使用溶劑與順9，反11和反10，順12異構(gòu)體總量的重量比的范圍從約20:1至約1:1，如從約10:1至約1:1，更優(yōu)選從約9:1至約2:1，甚至更優(yōu)選從約8:1至約2:1，如從約6:1至約5:2或從約5:1至約3:1。尤其優(yōu)選使用約4:1的比例。這些水平的溶劑的作用使最有效的選擇性結(jié)晶得以在約-15。C至約-35"C的溫度范圍內(nèi)進(jìn)行。當(dāng)溶劑與順9，反11和反10，順12異構(gòu)體總量的比例低于約1.5:1時(shí)，可以發(fā)現(xiàn)該方法的選擇性大大下降。選擇結(jié)晶步驟的條件以使順9，反11和反10，順12異構(gòu)體得以有效地和選擇性地分離。進(jìn)行結(jié)晶的優(yōu)選溫度是低于O"C的溫度，更優(yōu)選是在-10至-4(TC的溫度范圍內(nèi)，如-15至-35°C，例如-18至-30。C。在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式中，結(jié)晶步驟在不進(jìn)行機(jī)械攪拌的條件下進(jìn)行。結(jié)晶可基本上靜止進(jìn)行，即在混合物中只有對(duì)流的電流產(chǎn)生運(yùn)動(dòng)。可通過通常在室溫下開始的控制冷卻或突然("緊急")冷卻影響結(jié)晶。控制冷卻可長達(dá)72小時(shí)并可包括時(shí)長超過2至24小時(shí)的速度是每小時(shí)約1至5t:的冷卻過程。緊急冷卻可能在不到5個(gè)小時(shí)之內(nèi)發(fā)生，更優(yōu)選不到2小時(shí)或不到1小時(shí)，甚至更優(yōu)選不到30分鐘，如不到15分鐘或不到5分鐘。用這兩種冷卻方式冷卻之后可將冷卻的混合物和溶劑在低溫下保存48小時(shí)以上，例如保存60小時(shí)以上。本發(fā)明包含其中的順9，反11和反10，順12異構(gòu)體中的一種異構(gòu)體相對(duì)于另一種異構(gòu)體的第一重量比X至少是1.3:1(雖然也可能是其他比例，如1.1:1、1.15:1禾n1.2:1)的混合物的產(chǎn)生步驟。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，確保兩種異構(gòu)體不等量的第一步使更有效的和/或更具選擇性的結(jié)晶得以進(jìn)行。可以許多不同方式產(chǎn)生混合物。通常，通過處理包含大致等摩爾數(shù)的量的順9，反11和反10，順12異構(gòu)體的組合物而形成混合物。但是，混合物也可通過其他方式產(chǎn)生。優(yōu)選地，混合物可通過包含用對(duì)于一種異構(gòu)體比對(duì)于另一種異構(gòu)體表現(xiàn)出更大的選擇性的酶來處理包含順9,反11和反10，順12異構(gòu)體的組合物的步驟的方法而產(chǎn)生。通常，酶是脂酶。在一個(gè)具體實(shí)施方式中，混合物通過以下產(chǎn)生用對(duì)于順9，反11異構(gòu)體比對(duì)于反10，順12異構(gòu)體更具有選擇性的酶使包含共軛亞油酸的組合物至少部分酯化形成順9，反11異構(gòu)體含量比反10，順12異構(gòu)體含量更豐富的酯類組分并將這些酯類組分水解以形成游離酸。在另一具體實(shí)施方式中，混合物可通過以下產(chǎn)生將包含共軛亞油酸的組合物與具有1至5個(gè)碳原子的至少一種一元醇至少部分酯化以獲得相應(yīng)的共軛亞油酸酯并用酶選擇性水解至少部分酯類以產(chǎn)生醇、富含c9tl1異構(gòu)體的游離脂肪酸和富含tl0cl2異構(gòu)體的CLA酯，同時(shí)至少部分去除形成的醇。產(chǎn)生混合物的起始組合物優(yōu)選是包含大致等摩爾數(shù)的量的順9，反11和反10，順12異構(gòu)體的CLA組合物，如可以通過CLA的化學(xué)合成獲得的，如通過亞油酸的共軛作用獲得，見文獻(xiàn)如專利EP-A-0卯2082所述。優(yōu)選地，一種、一種以上或所有的酯化和水解步驟使用脂酶進(jìn)行。最優(yōu)選的脂酶是那些對(duì)于順9，反11異構(gòu)體或?qū)τ诜?0，順12異構(gòu)體比對(duì)另一種異構(gòu)體更具有選擇性的脂酶。適合的脂酶的例子是那些來自于皺褶念珠菌或念珠地絲菌的脂酶。然而，僅僅必要的是酯化或水解步驟中的一個(gè)步驟表現(xiàn)出對(duì)于一種異構(gòu)體的選擇性，并且其他的酯化或水解步驟可是非選擇性的并可包含非選擇性化學(xué)反應(yīng)或酶反應(yīng)。優(yōu)選地，第一比例X是至少約1.3:1，如至少約1.4:1或至少約1.5:1。因?yàn)閷?shí)用的原因，優(yōu)選第一比例X不超過約4:1和更優(yōu)選低于約3:1或低于約2:1，如低于1.8:1。進(jìn)行結(jié)晶步驟以增加異構(gòu)體中一種異構(gòu)體對(duì)另一種異構(gòu)體的相對(duì)比例。結(jié)晶步驟后兩種異構(gòu)體的重量比是第二比例Y。Y大于X并通常大于約1.5:1，更優(yōu)選大于約1.7:1，如大于約2:1，例如至少約3:1或至少約4:1或至少約5:1或甚至至少約10:1。Y通常不超過約20:1，更優(yōu)選不超過約50:1或不超過約100:1。本發(fā)明的方法可包含進(jìn)一步步驟。例如，該方法優(yōu)選包含在結(jié)晶步驟后組合物的分離步驟，可選擇地包含沖洗組合物和可選擇地使組合物干燥的步驟。然而，優(yōu)選不沖洗組合物。同樣優(yōu)選的是不經(jīng)任何常壓或減壓下的外部加熱過程使溶劑移除至空氣中而使組合物干燥。組合物通常形成晶體產(chǎn)物并通過例如過濾或離心的方式從液體(即結(jié)晶后液態(tài)殘留物)中分離。為進(jìn)一步增加Y值，可將組合物進(jìn)行一次或多次進(jìn)一步結(jié)晶，如此處所述。該方法可包含從組合物形成酯類的歩驟。適合的酯類包括來自具有1至6個(gè)碳原子的醇的烴基酯類。尤其優(yōu)選甘油酯(包括單甘油酯、雙甘油酯、甘油三脂和它們的混合物)。這些酯類可通過酯化作用形成(例如使用酶；選擇性酶可進(jìn)一歩增加異構(gòu)體的比例Y)并可選擇地通過例如蒸餾的方法純化。進(jìn)行本發(fā)明的方法可使最終組合物中順9，反11異構(gòu)體或反10，順12異構(gòu)體的含量增加。優(yōu)選地，組合物中包含的順9，反ll異構(gòu)體的含量大于反10，順12異構(gòu)體的含量。在另一具體實(shí)施方式中，組合物中包含的反10，順12異構(gòu)體的數(shù)量大于順9，反11異構(gòu)體的數(shù)量。以組合物中C18:2脂肪酸復(fù)合物的總量計(jì)，本發(fā)明方法生產(chǎn)的組合物優(yōu)選包含至少60重量％的含有順9，反ll異構(gòu)體的復(fù)合物，更優(yōu)選至少70重量％的含有所述異構(gòu)體的復(fù)合物。另外，以組合物中C18:2脂肪酸復(fù)合物的總量計(jì)，組合物包含至少60重量％的含有反10，順12異構(gòu)體的復(fù)合物，更優(yōu)選包含至少70重量％的含有所述異構(gòu)體的復(fù)合物。本發(fā)明方法生產(chǎn)的組合物可用于食品、食物補(bǔ)充劑或藥品。所以，本發(fā)明也適用于包含本發(fā)明的組合物的食品、食物補(bǔ)充劑或藥品。食物補(bǔ)充劑或藥品可以是適合腸內(nèi)或腸外應(yīng)用的膠囊形式或其他形式，并包含本發(fā)明的組合物。尤其優(yōu)選食物補(bǔ)充劑(該術(shù)語包括營養(yǎng)補(bǔ)充劑)。食物補(bǔ)充劑的例子包括包含選自明膠、淀粉、改性淀粉或淀粉衍生物如葡萄糖、蔗糖、乳糖和果糖的包入膠囊的物料的軟膠囊和硬膠囊形式的產(chǎn)品。包入膠囊的物料可選擇地含有交聯(lián)劑或聚合劑、穩(wěn)定劑、抗氧化劑、保護(hù)光敏感的填充過程的光吸收劑、防腐劑等。優(yōu)選食物補(bǔ)充劑中共軛脂肪酸的單位劑量是從lmg至1000mg(更優(yōu)選是從100mg至750mg)。食品可選擇地包含與互補(bǔ)性脂肪的共混物的組合物。共混物可包含0.3-95重量％,，優(yōu)選是2-80重量％，最優(yōu)選5_40重量％的本發(fā)明的產(chǎn)品和99.7-5重量％，優(yōu)選是98-20重量％，最優(yōu)選95-60重量％的選自可可脂、可可油等價(jià)物、棕櫚油或部分棕櫚油、棕櫚仁油或部分棕櫚仁油或所述脂肪或其脂肪組分酯交換作用的混合物的互補(bǔ)性脂肪，或選自葵花子油、高油酸葵花籽油、大豆油、菜籽油、棉籽油、魚油、紅花油、高油酸紅花油、玉米油或MCT-油的液態(tài)油。食品(該術(shù)語包括動(dòng)物飼料)可含有脂肪相，其中脂肪相包含本發(fā)明的產(chǎn)品。適合的食品的例子包括那些選自人造黃油、脂肪連續(xù)相或水連續(xù)相或雙連續(xù)相軟質(zhì)奶酪、低脂軟質(zhì)奶酪、糕餅產(chǎn)品如巧克力或巧克力涂層或巧克力餡的食品或焙烤食品餡的食品、冰淇淋、冰淇淋涂層、包含冰淇淋的食品、調(diào)味品、醬汁、奶酪、奶油、奶油替代品、干湯料、醬油、飲料、谷物棒、醬油、棒狀小食品、乳制品、面包產(chǎn)品、臨床營養(yǎng)品和嬰兒食品或嬰JL配方食品的食品。藥品包括以下形式的藥品組合物，如片劑、丸劑、膠囊劑、小膠囊劑、包括顆粒劑、微珠、糖丸和微囊顆粒的復(fù)合劑型；粉末劑、酏劑、糖漿劑、混懸液劑和溶液劑。藥品組合物將包含藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體。藥品組合物優(yōu)選適合腸外給藥(如口服)。口服給藥的組合物可以固態(tài)或液態(tài)形式并可采用片劑、粉末劑、混懸液劑和糖漿劑的形式。可選擇地，該組合物包含一種或多種調(diào)味劑和/或著色劑。適合用于這種組合物的藥學(xué)上可接受的載體在藥學(xué)領(lǐng)域眾所周知。本發(fā)明的組合物可含有O.l-99重量％的共軛脂肪酸。組合物通常制成單位劑量形式。共軛脂肪酸的單位劑量優(yōu)選是從lmg至1000mg(更優(yōu)選是從100mg至750mg)。在制備這些組合物的過程中使用的賦形劑可包括本領(lǐng)域已知賦形劑。用以下非限制實(shí)施例解釋本發(fā)明。在實(shí)施例中和整個(gè)說明書中，除非另有說明，否則所有百分?jǐn)?shù)均為重量百分?jǐn)?shù)。實(shí)施例實(shí)施例1制備用以分餾的比例是X的起始物料根據(jù)專利US6160140的實(shí)施例1和2中描述的方法制備具有等摩爾比的兩個(gè)異構(gòu)體順9，反11(c9，tll)和反10，順12(tl0，cl2)的共軛亞油酸(CLA)混合物。將從該方法中獲得的游離脂肪酸用醇酯化。酯化反應(yīng)被脂酶催化。在該實(shí)施例中，將甘油用作醇并且該反應(yīng)用脂肪酶LipozymeRMIM催化。此后，將獲得的甘油酯部分水解并將酸性組分通過蒸餾的方式從甘油酯組分中分離。將約400kg充分精制的甘油酯產(chǎn)品部分水解。該反應(yīng)是由來自鈹褶念珠菌的脂酶催化。在170至19(TC蒸餾后，獲得兩個(gè)異構(gòu)體c9，tll禾口t10，cl2的比例X^—2.9的餾出物組分。實(shí)施例2經(jīng)濕法分餾富集C9,tll異構(gòu)體一般方法將兩種異構(gòu)體c9，tll和t10，cl2的比例是X的CLA游離脂肪酸(CLA-FFA)在500ml玻璃容器中溶于溶劑。所得溶液放入-3(TC冰箱并靜止冷卻48小時(shí)。之后，形成的晶體用布氏漏斗在減壓條件下過濾。所得硬脂(固態(tài)、晶體)組分融化至周圍環(huán)境中并且殘留溶劑通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的方法蒸發(fā)。根據(jù)下列公式計(jì)算產(chǎn)量產(chǎn)〗刷匕(g)c9，起始物料(g)硬脂(固態(tài))和油精(液態(tài):結(jié)晶后的液體)組分中的兩個(gè)異構(gòu)體tll禾nt10，c12的比例通過根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)FAMEGLC方法測(cè)定的脂肪酸構(gòu)成而計(jì)算。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>靜止?jié)穹ǚ逐s用不同比例的油與溶劑進(jìn)行一系列的4個(gè)實(shí)驗(yàn)。起始物料中兩種異構(gòu)體c9，tll和t10，cl2的比例(X)是2.6，而所用溶劑是丙酮。所研究的油與溶劑的比例是l丄5、1:2.3、1:4和1:9。所得結(jié)果如表1所示。表1.-3(TC下濕法分餾后獲得的硬脂組分的脂肪酸構(gòu)成和產(chǎn)量。<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>實(shí)施例3控制冷卻對(duì)濕法分餾富集的c9，tllCLA異構(gòu)體的影響一般方法兩種異構(gòu)體c9，tll禾Pt10，c12的比例是X的CLA-FFA在小規(guī)模結(jié)晶器中溶于溶劑。結(jié)晶器由有外殼的底部帶有過濾單元的1L玻璃容器構(gòu)成。為了能夠使用溫度控制的冷卻程序，將容器與溫度控制單元相連。所得溶液靜止冷卻48小時(shí)。所得硬脂組分融化至周圍環(huán)境中并且殘留溶劑通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的方法蒸發(fā)。兩種異構(gòu)體c9，tll和t10，c12的產(chǎn)量和比例根據(jù)上文提到的公式計(jì)算?？刂评鋮s分餾進(jìn)行兩個(gè)實(shí)驗(yàn)。在一個(gè)實(shí)驗(yàn)中，油/溶劑混合物根據(jù)溫度冷卻程序冷卻，而在第二個(gè)實(shí)驗(yàn)中使用緊急冷卻。兩種異構(gòu)體c9，tll和t10，c12的在起始物料中的比例(X)是7.6。所用的油對(duì)溶劑的比例是1:4。研究了以下溫度冷卻程序-在2小時(shí)之內(nèi)從2(TC降至-l(TC;-在1小時(shí)之內(nèi)從-l(TC降至-15°C;-在2小時(shí)之內(nèi)從-15。C降至-25°C。將該混合物在-25'C存放24小時(shí)；在此溫度之后將溫度進(jìn)一步降至-27°C。48小時(shí)后過濾該混合物。根據(jù)實(shí)施例2進(jìn)行緊急冷卻實(shí)驗(yàn)。所得結(jié)果如表2所示。表2.濕法分餾48小時(shí)后獲得的硬脂組分的脂肪酸構(gòu)成和產(chǎn)量。油:溶劑比例1:41:4產(chǎn)量(％)20.873.01起始物料控制冷卻緊急冷卻說明C16:04,47.4C18:00.71.40.9CLATT0.60.80.4C18:2c9，tll0.30.30.2C18:2tl0，c120.20.10.1C18:211，133.01.90.9C18:lC13.412.811.8CLAOX0.20.20.2C18:2T0.50.30.2C18:2C1.71.20.7TTnc—-0.40.2C20:0—一0.1——C18:2C9，Tll65.868.076.6C18:2T10，C128.75.12.4總CLA異構(gòu)體78,876.480.7未鑒定部分0.2——一—比例X7.6一—一—比例Y——13.131.3實(shí)施例4起始物料中比例X對(duì)富集(相當(dāng)于使X大于1)的影響根據(jù)實(shí)施例1中描述的過程進(jìn)行一個(gè)實(shí)驗(yàn)。研究了含有兩種不同比例的(X=l和X4.5)的兩種異構(gòu)體的起始物料。油對(duì)溶劑的比例是1.-4，并且將該混合物在-28'C結(jié)晶24和48小吋。所得結(jié)果如表3所表3.將X=l和X=1.5的物料經(jīng)濕法分餾后獲得的硬脂組分的脂<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>實(shí)施例5純化的c9，tll禾口t10，cl2共軛亞油酸(CLAFFA)和c9，tll和t10，cl2共軛亞油酸甲酯(CLAME)的物理或化學(xué)特征如下CLA異構(gòu)體熔點(diǎn)，°ca)沸點(diǎn)，"c(760托)b)蒸汽壓強(qiáng)，托Wc9，tllFFA10.1381.67.01<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>"在PerkinElmerPyrisIDSC上測(cè)定，用液氮冷卻。異構(gòu)體的純度是c9，tllCLA異構(gòu)體98。/。，t10，cl2CLA異構(gòu)體97%。W使用用于Solaris,SciFinder的先進(jìn)化學(xué)研究軟件實(shí)驗(yàn)室(ACD/Labs)V8.14i十算。權(quán)利要求1、包含共軛亞油酸(CLA)的順9，反11和反10，順12異構(gòu)體的組合物的制備方法，該方法包括-產(chǎn)生包含共軛亞油酸(CLA)的順9，反11和反10，順12異構(gòu)體的混合物，其中順9，反11和反10，順12異構(gòu)體中的一種異構(gòu)體相對(duì)于另一種異構(gòu)體的第一重量比X至少是1.3:1；和-使該混合物經(jīng)過結(jié)晶步驟以形成包含順9，反11和反10，順12異構(gòu)體的組合物，其中順9，反11和反10，順12異構(gòu)體中的一種異構(gòu)體相對(duì)于另一種異構(gòu)體的第二重量比是Y，其中Y大于X。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中結(jié)晶是在溶劑存在下進(jìn)行的。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中溶劑包含極性有機(jī)化合物。4、根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其中溶劑包含C3至C6酮、C1至C6醇、水或它們的混合物。5、根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的方法，其中結(jié)晶是在使用丙酮作為溶劑下進(jìn)行的。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中溶劑對(duì)順9，反11和反10，順12異構(gòu)體總量的重量比的范圍是從20:1至1:1。7、根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中溶劑對(duì)順9，反11和反10，順12異構(gòu)體總量的重量比的范圍是從9:1至2:1。8、根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的方法，其中結(jié)晶是在ox:以下的溫度下進(jìn)行的。9、根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的方法，其中結(jié)晶是在-10至-4(TC的溫度下進(jìn)行的。10、根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的方法，其中結(jié)晶是在不進(jìn)行機(jī)械攪拌的條件下進(jìn)行的。11、根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的方法，其中混合物是通過以下產(chǎn)生的用與反10，順12異構(gòu)體相比，對(duì)順9，反11異構(gòu)體有選擇性的酶使包括共軛亞油酸的組合物至少部分酯化以形成順9，反11異構(gòu)體比反10，順12異構(gòu)體含量豐富的酯類組分和反10，順12異構(gòu)體比順9，反11異構(gòu)體含量豐富的游離酸組分，并且將該酯類組分和該游離脂肪酸組分分離。12、根據(jù)權(quán)利要求ll所述的方法，該方法進(jìn)一步包含將酯類組分水解以形成順9，反11異構(gòu)體比反10，順12異構(gòu)體含量豐富的游離酸組合物。13、根據(jù)權(quán)利要求1至10任一項(xiàng)所述的方法，其中混合物是通過以下產(chǎn)生的用至少一種含有1至5碳原子的一元醇將包含共軛亞油酸的組合物至少部分酯化以獲得相應(yīng)共軛亞油酸酯和用酶選擇性水解至少部分酯類以產(chǎn)生醇、富含c9tl1異構(gòu)體的游離脂肪酸和富含tl0c12異構(gòu)體的CLA酯類，同時(shí)至少部分去除形成的醇，和將游離脂肪酸從CLA酯類中分離。14、根據(jù)權(quán)利要求11至13任一項(xiàng)所述的方法，其中酶是脂酶。15、根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的方法，其中第一比例X至少是1.5:1。16、根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的方法，其中第二比例Y至少是2.5:1。17、根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的方法，其中組合物包含含量大于反10，順12異構(gòu)體的量的順9，反11異構(gòu)體。18、根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的方法，其中以組合物中C18:2脂肪酸的總量計(jì)，該組合物包含至少60重量％的順9，反11異構(gòu)體。19、根據(jù)權(quán)利要求1至16任一項(xiàng)所述的方法，其中該組合物包含含量大于順9，反11異構(gòu)體的量的反10，順12異構(gòu)體。20、根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的方法，其中以組合物中C18:2脂肪酸的總量計(jì)，該組合物包含至少60重量％的反10，順12異構(gòu)體。21、根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)所述的方法，該方法進(jìn)一步包含從該組合物形成酯類。全文摘要本發(fā)明涉及一種包含共軛亞油酸(CLA)的順9，反11和反10，順12異構(gòu)體的組合物的制備方法，該方法包含產(chǎn)生包含共軛亞油酸(CLA)的順9，反11和反10，順12異構(gòu)體的混合物，其中順9，反11和反10，順12異構(gòu)體中的一種異構(gòu)體相對(duì)于另一種異構(gòu)體的第一重量比X至少是1.3∶1；和使該混合物結(jié)晶以形成包含順9，反11和反10，順12異構(gòu)體的組合物，其中順9，反11和反10，順12異構(gòu)體中的一種異構(gòu)體相對(duì)于另一種異構(gòu)體的第二重量比是Y，其中Y大于X。文檔編號(hào)C11C1/04GK101443437SQ200780016965公開日2009年5月27日申請(qǐng)日期2007年4月4日優(yōu)先權(quán)日2006年4月13日發(fā)明者J·蒙斯特,K·巴格干,V·塔蘭申請(qǐng)人:脂質(zhì)營養(yǎng)品有限公司