一種藥物組合物及其用于改善記憶障礙的用圖
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種藥物組合物，其包含組分(a)一種或多種人參皂苷單體以及組分(b)木犀草素或其類似物作為活性成分，其中所述人參皂苷單體選自人參皂苷Rg1、Rb1、Rg3、Rg5、Rd、Rh1、Rh3和Re，所述木犀草素類似物選自芹菜素、山奈酚、槲皮素、楊梅素、異鼠李素及其糖苷。與單一活性成分相比，該藥物組合物顯示更好的改善記憶障礙的效果，并且減少了活性成分的用量；因此，可用于改善由癡呆、腦外傷或應(yīng)激引起的記憶障礙。
【專利說明】
一種藥物組合物及其用于改善記憶障礙的用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，具體涉及一種藥物組合物，其包含木犀草素或其類似物以 及人參皂苷作為活性成分;還涉及該組合物用于改善記憶障礙的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 記憶障礙是指個(gè)人處于一種不能記住或回憶信息或技能的狀態(tài)，臨床表現(xiàn)為記憶 減弱、遺忘、錯(cuò)構(gòu)、虛構(gòu)和潛隱記憶等。在臨床上，記憶障礙是許多疾病可出現(xiàn)的癥候群，主 要有癡呆(包括老年癡呆、血管性癡呆、路易體癡呆等多種類型）、阿爾茨海默病、腦外傷或 應(yīng)激所致記憶障礙等。癡呆是指慢性獲得性進(jìn)行性智能障礙綜合征，臨床上以緩慢出現(xiàn)的 智能減退為主要特征，記憶減退是其核心癥狀，早期出現(xiàn)記憶障礙。隨著人口老齡化的加 速，老年癡呆的發(fā)病率也隨之增加，已成為繼腫瘤、心臟病、腦血管病之后引起老年人死亡 的第四大病因。阿爾茨海默氏癥(AD)是一種進(jìn)行性發(fā)展的神經(jīng)退行性疾病，其臨床特征是 記憶障礙、失語、失用、失認(rèn)、視空間機(jī)能損害等，特別是進(jìn)行性加重的智力記憶減退。β-淀 粉樣肽(β-amyIoid peptide，Αβ)的生成、積聚及毒性作用被認(rèn)為是AD主要病理機(jī)制。Αβ的 聚積會激活小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞，造成機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)，產(chǎn)生大量的活性氧簇 (ROS)和活性氮自由基(RNS)，R0S和RNS是活潑的過氧化物，大量的積聚會造成神經(jīng)元氧化 系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)的失衡，并能誘導(dǎo)炎癥介質(zhì)釋放增加，進(jìn)一步導(dǎo)致細(xì)胞損傷，在神經(jīng)元凋 亡過程中起到重要作用。
[0003] 由于記憶障礙的病因復(fù)雜，發(fā)病環(huán)節(jié)較多，迄今為止西藥治療記憶障礙效果較差， 患者對某些特定藥物的反應(yīng)往往有顯著差別，且易出現(xiàn)耐藥及副作用。而祖國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中 的天然藥物具有多環(huán)節(jié)、多層次、多靶點(diǎn)的作用特點(diǎn)，它可能彌補(bǔ)西藥的上述不足。
[0004] 人參是一種在亞洲國家廣泛使用的傳統(tǒng)藥物，具有益智作用。人參的主要成 分一一人參皂苷，具有多種藥理作用，特別是能夠增強(qiáng)記憶和認(rèn)知功能。其中，人參皂苷 Rgl、Rbl、Rg3、Rg5、Rd、Rhl、Rh3和Re等是人參發(fā)揮益智作用的主要成分。有研究表明，人參 皂苷Rgl和Rbl均可促進(jìn)幼鼠身體發(fā)育，并有助于小鼠成年后跳臺和避暗的記憶獲得過程。 人參皂苷Rgl主要通過影響學(xué)習(xí)記憶相關(guān)信號途徑來改善學(xué)習(xí)記憶功能。Rgl可以通過誘導(dǎo) c-fos基因表達(dá)，增加海馬cAMP水平，提高學(xué)習(xí)記憶能力(Liu and Zhang，1996) Agl能夠提 高大鼠基底前腦中膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶和酪氨酸激酶mRNA的表達(dá)和海馬神經(jīng)生長因子mRNA水 平（Salim et al，1997)。人參皂苷Rgl通過增加 P-AKT和K)NF水平來改善中年小鼠學(xué)習(xí)記憶 能力（Zhu et al，2015) Agl能降低海馬Αβ?-40含量，并可能通過PKA-CREB上調(diào)BDNF水平， 從而改善SAMP8小鼠學(xué)習(xí)記憶功能（Shi et al，2010)。相對于上述各人參皂苷顯著改善記 憶的效果，其高昂的價(jià)格制約了它們的廣泛使用。
[0005] 黃酮，是一類多酚化合物，廣泛存在于植物中，并具有廣泛的藥理作用。其中最突 出的是其抗氧化作用，特別是多羥基黃酮的抗氧化作用更強(qiáng)。此外，黃酮類化合物對學(xué)習(xí)、 記憶和神經(jīng)認(rèn)知功能具有有利影響（Jeremy P. E. Spencer，2008)。木犀草素（5，7,3'，4'-四 羥基黃酮）、山奈酚(3,5,7,4'-四羥基黃酮）、槲皮素(3,5,7,3'，4'-五羥基黃酮）、楊梅素 (3,5,7,3'，4'，5'-六羥基黃酮）、異鼠李素(3,5,7,4'-四羥基-3'-甲氧基黃酮)等均是多羥 基黃酮的代表性化合物，它們結(jié)構(gòu)相似，來源廣泛。對木犀草素的結(jié)構(gòu)分析以及生物學(xué)研究 都已經(jīng)證實(shí)它有顯著的抗氧化作用，可以減輕氧化劑及自由基對細(xì)胞造成的損傷(Dajas et al，2003;Seelinger et al，2008)。木犀草素通過抑制ROS和促炎癥因子的生成來發(fā)揮 對A&5-35誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用(Wang and Gao，2015)。木犀草素可能通過增強(qiáng)小鼠 腦組織的抗氧化活性對慢性不可預(yù)知性溫和應(yīng)激抑郁模型小鼠的抑郁樣行為有改善作用 (Liu et al，2013)。研究證明木犀草素通過PI3K-Akt-NF-KB-ERK信號通路來抑制神經(jīng)細(xì)胞 的氧化應(yīng)激(Zhou et al，2011)。芹菜素(5,7,4'-三羥基黃酮)與木犀草素在結(jié)構(gòu)上極其相 似，并且具有相似的抗氧化、改善學(xué)習(xí)記憶能力、改善記憶障礙的作用。其他多羥基黃酮化 合物，如山奈酚、槲皮素、楊梅素、異鼠李素等也具有類似的作用。
[0006] 現(xiàn)有技術(shù)中尚且沒有將人參皂苷單體與木犀草素或其類似物組合使用以改善記 憶障礙的相關(guān)報(bào)道。本申請的發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn)了，兩種活性成分的組合相對于單一活性 成分具有更好的改善記憶的效果，可用于治療記憶障礙，并且可減少人參皂苷的用量，具有 潛在的經(jīng)濟(jì)和社會效益。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明一方面提供一種藥物組合物，其包含組分(a)-種或多種人參皂苷單體以 及組分(b)木犀草素或其類似物作為活性成分，其中所述人參皂苷單體選自人參皂苷Rgl、 1^)1、1^3、1^5、1?(1、1?111、1?113和1^，所述木犀草素類似物選自序菜素、山奈酸、槲皮素、楊梅素、 異鼠李素及其糖苷;且其中組分(a)與組分(b)的重量比為1:50至10:1。
[0008] 在優(yōu)選的實(shí)施方案，組分(a)為人參皂苷1^1、肋1、1^3、1?(1、1^1和1^中的一種或多 種，如兩種、三種、四種、五種或六種;更優(yōu)選地，組分(a)為人參阜苷Rgl、Rbl、Rg3、Rd、Rhl和 Re中的一種或兩種;還更優(yōu)選地，組分(a)為人參皂苷Rgl或Rbl或二者的混合物;最優(yōu)選地， 組分(a)為人參皂苷Rgl。
[0009] 當(dāng)組分(a)為多種人參皂苷單體的混合物時(shí)，各人參皂苷單體可以以任何可能的 比例存在。特別地，當(dāng)組分(a)為人參皂苷1^1、仙1、1^3、1?(1、1^1和1^中的兩種時(shí)（如為人參 皂苷Rg 1和Rb 1的混合物時(shí)），兩種組分可以以任何可能的比例存在，例如100:1至1:100，優(yōu) 選50:1至1:50,更優(yōu)選25:1至1:25,最優(yōu)選10:1至1:10,如1:1。
[0010] 在優(yōu)選的實(shí)施方案中，組分(b)為木犀草素、芹菜素、山奈酚、槲皮素、楊梅素和異 鼠李素中的一種或多種，如兩種、三種、四種、五種或六種;更優(yōu)選地，組分(b)為木犀草素、 芹菜素、山奈酚、槲皮素、楊梅素和異鼠李素中的一種或兩種;還更優(yōu)選地，組分(b)為木犀 草素或芹菜素或二者的混合物；最優(yōu)選地，組分(b)為木犀草素。組分(b)還可為木犀草苷 (即木犀草素7-0-葡萄糖苷）、芹菜苷等糖苷。
[0011] 當(dāng)組分(b)為木犀草素、芹菜素、山奈酚、槲皮素、楊梅素和異鼠李素中的多種的混 合物時(shí)，其中各組分可以以任何可能的比例存在。特別地，當(dāng)組分(b)為木犀草素、芹菜素、 山奈酚、槲皮素、楊梅素和異鼠李素中的兩種時(shí)(如為木犀草素和芹菜素的混合物時(shí)），兩種 組分可以以任何可能的比例存在，例如100:1至1:100，優(yōu)選50:1至1:50,更優(yōu)選25:1至1: 25,最優(yōu)選 10:1 至 1:10,如 1:1。
[0012] 在優(yōu)選的實(shí)施方案中，組分(a)與組分(b)的重量比為1:50至1:20,更優(yōu)選1:45至1 :25，還更優(yōu)選1:40至1:30，甚至更優(yōu)選1:30、1:31、1:32、1:33、1:34、1:35、1:36、1:37、1: 38、1:39或1:40。
[0013] 在優(yōu)選的實(shí)施方案中，組分(a)與組分(b)的重量比為1:1至10:1，更優(yōu)選1:1至8: 1，還更優(yōu)選1:1至5:1，甚至更優(yōu)選1:1至3:1，最優(yōu)選1:1、1.5:1、2:1、2.1:1、2.2:1、2.3:1、 2·4:1、2·5:1、2·6:1、2·7:1、2·8:1、2·9:1或3:1。
[0014]在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含組分(a)人參皂苷Rgl或Rbl或二 者的混合物以及組分(b)木犀草素或芹菜素或二者的混合物作為活性成分，且其中組分(a) 與組分(b)的重量比為1:50至1:20或1:1至10:1，優(yōu)選1:40至1:30或1:1至5:1。
[0015]在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含組分(a)人參皂苷Rgl以及組分 (b)木犀草素作為活性成分，且其中組分(a)與組分(b)的重量比為1:50至1:20或1:1至10: 1，優(yōu)選1:45至1:25或1:1至8:1，更優(yōu)選1:40至1:30或1:1至5:1。
[0016]在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物包含組分(a)人參皂苷Rgl以及組分 (b)木犀草素作為活性成分，且其中組分(a)與組分(b)的重量比為1:1至3:1。
[0017] 本發(fā)明的藥物組合物可與藥學(xué)上可接受的賦形劑制成藥學(xué)上合適的制劑，如可制 成片劑、膠囊劑、顆粒劑、注射劑、口服液、混懸劑、微球、脂質(zhì)體等。
[0018] 本發(fā)明的另一方面提供本發(fā)明的藥物組合物用于制備改善記憶障礙的藥物的用 途。
[0019] 在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述記憶障礙為癡呆(如老年癡呆，血管性癡呆和路易體癡 呆等）導(dǎo)致的記憶障礙，阿爾茨海默病導(dǎo)致的記憶障礙，以及腦外傷、腦缺血或應(yīng)激導(dǎo)致的 記憶障礙;更優(yōu)選阿爾茨海默病導(dǎo)致的記憶障礙，以及腦外傷或氧化應(yīng)激導(dǎo)致的記憶障礙。
[0020] 在本發(fā)明中，表述"包含組分(a)以及組分(b)作為活性成分"意指在本發(fā)明的藥物 組合物中，活性成分由組分(a)和組分(b)組成，不合有其他未指明的活性成分。
【附圖說明】
[0021] 圖1不同劑量的單體對探索實(shí)驗(yàn)的影響(A實(shí)臺象限時(shí)間比，B速度）；
[0022]圖2不同劑量的單體對避暗學(xué)習(xí)階段的影響(A錯(cuò)誤次數(shù)，B安全區(qū)時(shí)間）；
[0023] 圖3不同劑量的單體對避暗鞏固階段的影響(A入暗潛伏期，B錯(cuò)誤次數(shù)，C安全區(qū)時(shí) 間）；
[0024] 圖4兩單體的不同組合對東莨菪堿模型小鼠穿臺次數(shù)的影響；
[0025] 圖5兩單體的不同組合對東莨菪堿模型小鼠實(shí)臺象限游泳時(shí)間的影響；
[0026] 圖6兩單體的組合對東莨菪堿模型小鼠穿臺次數(shù)的影響；以及
[0027] 圖7兩單體的組合對東莨菪堿模型小鼠實(shí)臺象限游泳時(shí)間的影響。
【具體實(shí)施方式】
[0028]下面通過實(shí)施例以木犀草素和人參皂苷Rgl為例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。應(yīng)該理 解的是，本發(fā)明的實(shí)施例是用于說明本發(fā)明的而不是對本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)質(zhì) 對本發(fā)明進(jìn)行的簡單改進(jìn)都屬于本發(fā)明要求保護(hù)范圍。
[0029]此外，在本發(fā)明中，術(shù)語"單體"意指基本上純的單一化合物，如HPLC純度大于 80%，優(yōu)選大于90%，不含有影響該活性成分的藥理作用的成分，但允許含有可接受量的雜 質(zhì)。在本發(fā)明中，d表示天，h表示小時(shí)，min表示分鐘，s表示秒。
[0030]實(shí)施例1:木犀草素和人參皂苷Rgl改善學(xué)習(xí)記憶的有效劑量范圍的確定 [0031]通過本實(shí)施例確定木犀草素和人參皂苷Rgl改善學(xué)習(xí)記憶功能的有效劑量范圍。 [0032] 1試驗(yàn)材料
[0033]動物:雄性ICR鼠，體重20g左右(n=108)，購于北京維通利華生物技術(shù)有限公司， 許可證號為SCXK(京）2012-0001。
[0034]藥物:人參皂苷Rgl，白色結(jié)晶粉末，純度大于99 %，批號150629;木犀草素，淡黃色 粉末，純度大于98%，批號150703;均購于上海融禾醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司。多奈哌齊，購于 衛(wèi)材（中國）藥業(yè)有限公司，批號1407016;東莨菪堿，購于sigma公司。
[0035] 2試驗(yàn)方法
[0036] 首先在文獻(xiàn)調(diào)研的基礎(chǔ)上確定了兩單體各自的高、中、低劑量。然后將小鼠隨機(jī)分 為9組:對照組(C)、東莨菪堿模型組（S)、多奈哌齊組(D)、木犀草素低劑量組(LL，20mg/kg BW)、木犀草素中劑量組(LM，60mg/kg BW)、木犀草素高劑量組(LH，180mg/kg BW)、人參皂苷 Rgl低劑量組(GL，5mg/kg BW)、人參皂苷Rgl中劑量組(GM，15mg/kg BW)和人參皂苷Rgl高劑 量組(GH，45mg/kg BW)。木犀草素、人參皂苷Rgl和多奈哌齊均溶解于0.5%CMC-Na溶液，都 采用灌胃給藥(0.1ml/10g)，對照組和模型組給予0.5%CMC-Na，每天1次。連續(xù)給藥3周后開 始行為學(xué)實(shí)驗(yàn)(水迷宮和避暗）。行為學(xué)實(shí)驗(yàn)前l(fā)h，各組繼續(xù)用相應(yīng)藥物灌胃。實(shí)驗(yàn)前30min， 除對照組腹腔注射生理鹽水外，其它組均腹腔注射東莨菪堿，注射體積為0.1ml/10g。根據(jù) 行為學(xué)結(jié)果確定兩單體各自改善學(xué)習(xí)記憶功能的有效劑量范圍。
[0037] 水迷宮實(shí)驗(yàn)共6天，前5天為定航實(shí)驗(yàn)，最后1天為探索實(shí)驗(yàn)。避暗實(shí)驗(yàn)共2天，第1天 為獲得模式，第2天為鞏固模式。
[0038] 3試驗(yàn)結(jié)果
[0039] (1)不同劑量的木犀草素和人參皂苷Rgl對東莨菪堿小鼠水迷宮潛伏期的影響
[0040] 表1:不同劑量的單體對定航實(shí)驗(yàn)潛伏期的影響

[0043] 備注：#?<0.05，##?<0.01，與對照組相比；仲<0.05，*沖<0.01，與5組（即東莨 菪堿模型組)相比；此外，在本申請的所有表格以及附圖中，符號#、##、*和**均具有上述相 同的含義。
[0044] 由表中可看出腹腔注射東莨菪堿后，模型組小鼠潛伏期顯著延長。三個(gè)不同劑量 的木犀草素處理后，小鼠潛伏期縮短(其中木犀草素60mg/kg和180mg/kg有顯著差異）；三個(gè) 不同劑量的人參皂苷Rgl處理后，小鼠潛伏期也縮短(其中人參皂苷Rgl 15mg/kg和45mg/kg 有顯著差異）。
[0045] (2)不同劑量的木犀草素和人參皂苷Rgl對東莨菪堿模型小鼠水迷宮探索的影響
[0046] 在探索實(shí)驗(yàn)中，東莨菪堿模型小鼠在實(shí)臺象限的游泳時(shí)間顯著減少。不同劑量的 木犀草素和人參皂苷Rgl處理后，小鼠在實(shí)臺象限的游泳時(shí)間顯著增加(兩種單體的多個(gè)劑 量組均有顯著性差異）。各組小鼠游泳速度沒有顯著差異。
[0047] 表2:不同劑量的單體對探索實(shí)驗(yàn)的影響
[0050] (3)不同劑量的木犀草素和人參皂苷Rgl對東莨菪堿模型小鼠避暗學(xué)習(xí)的影響
[0051 ]在避暗學(xué)習(xí)中，東莨菪堿模型小鼠的錯(cuò)誤次數(shù)增加(P<0.01 )，安全區(qū)時(shí)間減少(P <0.01)。兩種單體處理后，小鼠的錯(cuò)誤次數(shù)均減少（兩種單體的各劑量組均有顯著性差 異），安全區(qū)時(shí)間增加(木犀草素中劑量組和人參皂苷Rgl高劑量組有顯著性差異）。
[0052]表3:不同劑量的單體對避暗學(xué)習(xí)階段的影響
[0054] (4)不同劑量的木犀草素和人參皂苷Rgl對東莨菪堿模型小鼠避暗鞏固的影響
[0055] 在避暗鞏固中，東莨菪堿模型小鼠的潛伏期縮短(P<0.01)，錯(cuò)誤次數(shù)增加(P< 0.01)，安全區(qū)時(shí)間減少(P<〇. 01)。兩種單體處理后，小鼠的潛伏期延長(兩種單體的多個(gè) 劑量組均有顯著性差異），錯(cuò)誤次數(shù)均減少(兩種單體的各劑量組均有顯著性差異），安全區(qū) 時(shí)間增加(木犀草素的中、高劑量和Rgl的高劑量組有顯著性差異）。
[0056] 表4:不同劑量的單體對避暗鞏固階段的影響
[0058] 結(jié)論結(jié)合水迷宮和避暗實(shí)驗(yàn)結(jié)果，木犀草素在20-180mg/kg范圍內(nèi)、人參皂苷Rgl 在5-45mg/kg范圍內(nèi)對小鼠的學(xué)習(xí)記憶功能均有改善作用。
[0059]實(shí)施例2:木犀草素和人參皂苷Rgl的組合
[0060]通過均勻設(shè)計(jì)得到兩單體的多個(gè)組合。均勻設(shè)計(jì)是一種高效、快速的多因素設(shè)計(jì) 分析方法，它將數(shù)論與多元統(tǒng)計(jì)方法相結(jié)合，利用均勻設(shè)計(jì)表，使各試驗(yàn)因素及水平在試驗(yàn) 范圍內(nèi)得到合理的安排，達(dá)到用較少的試驗(yàn)點(diǎn)，獲得更多信息之目的。均勻設(shè)計(jì)是利用均勻 設(shè)計(jì)表來安排試驗(yàn)的，均勻設(shè)計(jì)表根據(jù)數(shù)理理論制定，滿足均勻散布原則。即均勻設(shè)計(jì)只考 慮了試驗(yàn)點(diǎn)的"均勻散布"，而未考慮"整齊可比"，因而可以大大減少試驗(yàn)次數(shù)。每個(gè)均勻設(shè) 計(jì)表都附有一個(gè)使用表，指示如何從均勻設(shè)計(jì)表中選用適當(dāng)?shù)牧?，以及由這些列所組成的 試驗(yàn)方案的均勻度(用均勻度偏差D表示，D越小，均勻度越好）。
[0061] 一般從每個(gè)藥物（即因素）的有效劑量范圍內(nèi)設(shè)置6個(gè)劑量（即水平），進(jìn)行均勻設(shè) 計(jì)。表5為4因素6水平均勻設(shè)計(jì)Uf(64)，表6為均勻設(shè)計(jì)表Uf(6 4)的使用表。
[0062] 表5:4因素6水平均勻設(shè)計(jì)表U6*(64)
[0066]在本發(fā)明中，將木犀草素和人參皂苷Rgl分別作為考察因素，每個(gè)因素設(shè)置6個(gè)水 平，然后通過均勻設(shè)計(jì)得到6個(gè)配伍組合。各因素水平的設(shè)定依賴于前期實(shí)驗(yàn)確定的有效劑 量范圍（木犀草素20-180mg/kg，人參皂苷Rgl 5-45mg/kg)。鑒于本實(shí)施例是兩因素六水平 試驗(yàn)，查閱表5和表6后，使用表5中的第1列和第3列。表7為兩因素各自6個(gè)水平的設(shè)置，表8 為根據(jù)Uf(6 4)均勻設(shè)計(jì)后得到的兩單體的組合。
[0067]表7:兩因素各自6個(gè)水平的設(shè)置

[0071 ]實(shí)施例3:兩單體的組合改善學(xué)習(xí)記憶功能的作用 [0072] 1試驗(yàn)材料
[0073]動物:雄性ICR小鼠（n=108)，購自北京維通利華生物技術(shù)有限公司，許可證號為 SCXK(京）2012-0001。
[0074]藥物:人參皂苷Rgl，白色結(jié)晶粉末，純度大于99 %，批號150629;木犀草素，淡黃色 粉末，純度大于98%，批號150703;均購于上海融禾醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司。多奈哌齊，購于 衛(wèi)材（中國）藥業(yè)有限公司，批號1407016;東莨菪堿，購于sigma公司。
[0075] 2試驗(yàn)方法
[0076]根據(jù)實(shí)施例2中得到的組合設(shè)計(jì)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)，采用東莨菪堿藥理模型。動物隨機(jī)分 為9組:對照組(Con)、東莨菪堿模型組(Sco)、多奈哌齊組(Don)、組合一組(50:120)、組合二 組(40.5:15)、組合三組(31:155)、組合四組(21.5:50)、組合五組（12:190)、組合六組(2.5: 85)，每組12只。給藥方法同實(shí)施例1，相應(yīng)藥物處理3周后開始行為學(xué)測試。采用水迷宮法檢 測學(xué)習(xí)記憶功能。
[0077] 3試驗(yàn)結(jié)果
[0078] 兩單體的不同組合對東莨菪堿模型小鼠水迷宮探索的影響
[0079] 東莨菪堿模型組小鼠的穿臺次數(shù)及其在實(shí)臺象限的游泳時(shí)間減少。在六個(gè)試驗(yàn)組 合中有三個(gè)組合使小鼠的穿臺次數(shù)及其在實(shí)臺象限的游泳時(shí)間增加，與模型組相比具有統(tǒng) 計(jì)學(xué)差異，它們分別為50(G) :120(L)(即人參皂苷Rgl與木犀草素的重量比為1:2.4)、40.5 (G) :15(L)(即人參皂苷Rgl與木犀草素的重量比為2.7:1)和2.5(G) :85(L)(即人參皂苷Rgl 與木犀草素的重量比為1:34)。
[0080] 表9:兩單體的不同組合對東莨菪堿模型小鼠穿臺次數(shù)和實(shí)臺象限游泳時(shí)間的影 響

[0082] 結(jié)論人參皂苷Rgl和木犀草素在以1: 2.4、2.7:1和1:34的比例組合后具有顯著的 改善東莨菪堿模型小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的作用。
[0083]實(shí)施例4:兩單體的組合改善學(xué)習(xí)記憶功能的藥效學(xué)驗(yàn)證 [0084]本實(shí)施例對實(shí)施例3中得到的兩單體的組合進(jìn)行藥效學(xué)驗(yàn)證。
[0085] 1試驗(yàn)材料
[0086]動物:雄性ICR小鼠 （n = 66)，購自北京維通利華生物技術(shù)有限公司，許可證號為 SCXK(京）2012-0001。
[0087]藥物:人參皂苷Rgl，白色結(jié)晶粉末，純度大于99 %，批號150629;木犀草素，淡黃色 粉末，純度大于98%，批號150703;均購于上海融禾醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司。多奈哌齊，購于 衛(wèi)材（中國）藥業(yè)有限公司，批號1407016;東莨菪堿，購于sigma公司。
[0088] 2試驗(yàn)方法
[0089]根據(jù)實(shí)施例3中得到的組合設(shè)計(jì)藥理實(shí)驗(yàn)，采用東莨菪堿藥理模型。動物隨機(jī)分為 6組:對照組[Con]、模型組[Sco]、多奈哌齊組[Don]、組合組（[G:L(2.5:85)]，即人參皂苷 Rg 1與木犀草素的重量比為1:34)、人參皂苷Rg 1組(2 · 5mg/kg) [G(2 · 5)]、木犀草素組(85mg/ kg)[L(85)]，每組11只。給藥方法同實(shí)施例1，相應(yīng)藥物處理3周后開始行為學(xué)測試。采用水 迷宮法檢測學(xué)習(xí)記憶功能。
[0090] 3試驗(yàn)結(jié)果
[0091 ]兩單體的組合對東莨菪堿模型小鼠水迷宮探索的影響
[0092] 東莨菪堿模型組小鼠的穿臺次數(shù)及其在實(shí)臺象限的游泳時(shí)間顯著減少。單獨(dú)使用 木犀草素或人參皂苷Rgl均可增加模型小鼠的穿臺次數(shù)及其在實(shí)臺象限的游泳時(shí)間。組合 組可顯著增加模型小鼠的穿臺次數(shù)及其在實(shí)臺象限的游泳時(shí)間。組合組相對于單一藥物組 具有顯著更好的改善效果。其中，G:L(2.5:85)組穿臺次數(shù)效果顯著強(qiáng)于G(2.5)組（P< 0.05)山丄(2.5 :85)組實(shí)臺象限時(shí)間百分比效果顯著強(qiáng)于6(2.5)組(？<0.05)。
[0093] 表10:兩單體的組合對東莨菪堿模型小鼠穿臺次數(shù)和實(shí)臺象限游泳時(shí)間
L0095」結(jié)論人參皂苷Rgl和木犀草素在以1:34的重量比組合后確有顯著的改善東莨菪 堿模型小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的作用，且其作用效果顯著優(yōu)于單一的藥物。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種藥物組合物，其包含組分(a)-種或多種人參皂苷單體以及組分(b)木犀草素或 其類似物作為活性成分，其中所述人參皂苷單體選自人參皂苷Rgl、Rbl、Rg3、Rg5、Rd、Rhl、 Rh3和Re，所述木犀草素類似物選自芹菜素、山奈酚、槲皮素、楊梅素、異鼠李素及其糖苷;且 其中組分(a)與組分(b)的重量比為1:50至10:1。2. 權(quán)利要求1的藥物組合物，其中組分(a)為人參皂苷Rgl、Rb I、Rg3、Rd、Rh 1和Re中的一 種或多種;更優(yōu)選地，組分(a)為人參阜苷Rgl、Rbl、Rg3、Rd、Rhl和Re中的一種或兩種;還更 優(yōu)選地，組分(a)為人參皂苷Rgl或Rb 1或二者的混合物;最優(yōu)選地，組分(a)為人參皂苷Rgl。3. 權(quán)利要求1的藥物組合物，其中組分(b)為木犀草素、芹菜素、山奈酚、槲皮素、楊梅素 和異鼠李素中的一種或多種;更優(yōu)選地，組分(b)為木犀草素、芹菜素、山奈酚、槲皮素、楊梅 素和異鼠李素中的一種或兩種;還更優(yōu)選地，組分(b)為木犀草素或芹菜素或二者的混合 物;最優(yōu)選地，組分(b)為木犀草素。4. 權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中組分(a)與組分(b)的重量比為1:50至1: 20,更優(yōu)選 1:45至 1:25,還更優(yōu)選 1:40至 1:30,甚至更優(yōu)選 1:30、1:31、1:32、1:33、1:34、1: 35、1:36、1:37、1:38、1:39或1:40。5. 權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中組分(a)與組分(b)的重量比為1:1至10: 1，更優(yōu)選1:1至8:1，還更優(yōu)選1:1至5:1，甚至更優(yōu)選1:1至3:1，最優(yōu)選1:1、1.5:1、2:1、2.1: 1、2·2:1、2·3:1、2·4:1、2·5:1、2·7:1、2·8:1、2·9:1或3:1。6. 權(quán)利要求1的藥物組合物，其包含組分(a)人參皂苷Rgl或Rbl或二者的混合物以及組 分(b)木犀草素或芹菜素或二者的混合物作為活性成分，且其中組分(a)與組分(b)的重量 比為1:50至1:20或1:1至10:1，優(yōu)選1:45至1:25或1:1至8:1，更優(yōu)選1:40至1:30或1:1至5: 1〇7. 權(quán)利要求1的藥物組合物，其包含組分(a)人參皂苷Rgl以及組分(b)木犀草素作為活 性成分，且其中組分(a)與組分(b)的重量比為1:50至1:20或1:1至10:1，優(yōu)選1:45至1:25或 1:1至8:1，更優(yōu)選 1:40至 1:30或1:1至5:1。8. 權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的藥物組合物，其與藥學(xué)上可接受的賦形劑按常規(guī)方法制成 片劑、膠囊劑、顆粒劑、□服液、混懸劑、注射劑、微球、脂質(zhì)體。9. 權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的藥物組合物用于制備改善記憶障礙的藥物的用途。10. 權(quán)利要求9的用途，其中所述記憶障礙為癡呆(如老年癡呆、血管性癡呆和路易體癡 呆）導(dǎo)致的記憶障礙，阿爾茨海默病導(dǎo)致的記憶障礙，以及腦外傷、腦缺血或應(yīng)激導(dǎo)致的記 憶障礙;優(yōu)選為阿爾茨海默病導(dǎo)致的記憶障礙，以及腦外傷或氧化應(yīng)激導(dǎo)致的記憶障礙。
【文檔編號】A61K31/7048GK105943545SQ201610145986
【公開日】2016年9月21日
【申請日】2016年3月16日
【發(fā)明人】曲麗娜, 陳海龍, 張永亮, 呂柯, 冀國華, 畢蕾, 鐘萍, 曹宏卿, 闞廣捍, 李瑩輝
【申請人】中國航天員科研訓(xùn)練中心