長效酮洛芬組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明描述一種長效獸醫(yī)學(xué)組合物，其包含至少一種酮洛芬酯前藥。所述組合物還包含至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯、和任選地至少一種防腐劑、和任選地至少一種額外的獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑。本發(fā)明還描述一種通過向有需要的動(dòng)物投與所述包含至少一種酮洛芬酯前藥的長效組合物來治療所述動(dòng)物的發(fā)熱、疼痛和/或發(fā)炎的方法。
【專利說明】
長效酮洛芬組合物
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種新穎長效組合物，其包含酮洛芬酯(ketoprofen ester)前藥和至 少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯和任選地防腐劑和/或獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑。本發(fā) 明還描述一種用所述長效組合物治療患有發(fā)熱、疼痛和/或發(fā)炎的動(dòng)物的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 本發(fā)明涉及一種新穎長效組合物，其包含酮洛芬酯前藥和至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接 受的甘油三酯和任選地至少一種防腐劑和/或至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑。本發(fā)明 還描述一種通過投與所述長效組合物來治療患有發(fā)熱、疼痛和/或發(fā)炎的動(dòng)物的方法。酮洛 芬的前藥以及酮洛芬在所屬領(lǐng)域中是眾所周知的。類似地，有許多可與酮洛芬和其前藥一 起使用的已知局部、口服和可注射組合物。本發(fā)明提供一種改良的長效組合物，其包含至少 一種酮洛芬酯前藥。具體地說，所述長效組合物為可注射組合物。
[0003] 非留體消炎藥物(NSAIDS)抑制環(huán)加氧酶C0X-1和C0X-2,從而抑制促進(jìn)發(fā)熱和疼痛 兩者產(chǎn)生的前列腺素的合成。酮洛芬，2-(3-苯甲酰基苯基)_丙酸(外消旋體）
[0005] 為一種NSAID，其長久以來被公認(rèn)為適用于治療發(fā)熱、疼痛和/或發(fā)炎（即，解熱劑 和鎮(zhèn)痛劑）。作為鎮(zhèn)痛劑，酮洛芬至少與其它可獲得的高效力NSAID化合物（如吲哚美辛 (indomethacin)、美洛昔康(meloxicam)、氟尼辛葡甲胺（flunixin meglumine)和苯基丁氮 酮(phenylbutazone)) -樣有效。作為解熱劑，酮洛芬比美洛昔康更強(qiáng)力。
[0006] 當(dāng)前NSAID治療被設(shè)計(jì)成每天給藥一次且實(shí)現(xiàn)不同程度的成功，如通過功效(包括 持續(xù)時(shí)間和毒性)所測量。因此，需要一種穩(wěn)定且有效的長效解熱劑和/或鎮(zhèn)痛劑組合物，尤 其是可在單次可注射劑量之后提供在2到5天之間的功效的長效解熱劑和/或鎮(zhèn)痛劑組合 物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明描述一種長效酮洛芬組合物，其用于治療動(dòng)物的疼痛、發(fā)炎和/或發(fā)熱。所 述長效組合物包含a)酮洛芬酯前藥、b)至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯、和任選地c) 至少一種防腐劑、和任選地d)至少一種額外的獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑。在本發(fā)明的另一 個(gè)方面中，所述長效組合物包含a)酮洛芬酯前藥和b)至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三 酯。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，所述長效組合物包含a)酮洛芬酯前藥、b)至少一種獸醫(yī)學(xué) 上可接受的甘油三酯和c)至少一種額外的獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑。在本發(fā)明的又另一個(gè) 方面中，所述長效組合物包含a)酮洛芬酯前藥、b)至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯和 c)至少一種防腐劑。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，所述長效組合物包含a)酮洛芬酯前藥、b) 至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯、C)至少一種防腐劑、和d)至少一種額外的獸醫(yī)學(xué)上 可接受的賦形劑。
[0008] 在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，酮洛芬酯前藥為烷基酯(例如甲酯、乙酯、丙酯、異丙酯 等）、苯甲酯、煙酰胺酯、二醇酯（例如聚乙二醇酯、丙二醇單酯和丙二醇二酯、以及其混合 物）。在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，所述酯為烷基酯（例如甲酯、乙酯、丙酯、異丙酯）以及其混 合物。在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，所述酯為甲酯。在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，所述酯為乙酯。 在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，所述酯為丙酯。在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，所述酯為異丙酯。在 本發(fā)明的另一個(gè)方面中，所述酯為苯甲酯。在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，所述酯為煙酰胺酯。 在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，所述酯為二醇酯(例如聚乙二醇酯、丙二醇單酯、丙二醇二酯、以 及其混合物）。在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，所述酯為聚乙二醇酯。在本發(fā)明的另一個(gè)方面中， 所述酯為丙二醇單酯、丙二醇二酯、以及其混合物。在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，所述酯為丙 二醇單酯。在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，所述酯為丙二醇二酯。在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，所 述酯為丙二醇非對(duì)映異構(gòu)體。
[0009] 在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，長效組合物為獸醫(yī)學(xué)組合物。在本發(fā)明的又另一個(gè)方 面中，長效組合物為可注射獸醫(yī)學(xué)組合物。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，長效獸醫(yī)學(xué)可注射 組合物為肌內(nèi)可注射組合物。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，長效獸醫(yī)學(xué)可注射組合物為皮 下可注射組合物。
[0010]在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯(包括甘油三酯類)選自由 以下各者組成的群組：辛酸/癸酸三甘油酯、丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯（甘油三酯類）、辛 酸/癸酸/亞油酸甘油三酯、三乙酸甘油酯（三醋精）、蓖麻油、棉籽油；芝麻油、以及其混合 物。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯選自由以下各者組成的群組： 辛酸/癸酸三甘油酯、丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯、三乙酸甘油酯、蓖麻油、棉籽油、以及其混 合物。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯選自由以下各者組成的群 組：辛酸/癸酸三甘油酯、三乙酸甘油酯、和蓖麻油、以及其混合物。在本發(fā)明的又另一個(gè)方 面中，獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯選自由以下各者組成的群組:辛酸/癸酸三甘油酯和三醋 精以及其混合物。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯選自由以下各 者組成的群組:辛酸/癸酸三甘油酯和蓖麻油以及其混合物。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中， 獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯為辛酸/癸酸三甘油酯。在本發(fā)明的再又另一方面中，辛酸/癸 酸三甘油酯為Miglyol 812。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，甘油三酯為三乙酸甘油酯。在本 發(fā)明的又另一個(gè)方面中，獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯為蓖麻油。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面 中，獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯是選自丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯、三乙酸甘油酯、蓖麻油 以及其混合物。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯為兩種甘油三酯 (包括丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯和三醋精）的混合物。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，獸醫(yī)學(xué) 上可接受的甘油三酯為兩種甘油三酯（包括丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯和蓖麻油）的混合 物。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯為丙二醇二辛酸酯/二癸酸 酯，尤其Miglyol 840。
[0011]在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，所述組合物進(jìn)一步包含至少一種防腐劑。在本發(fā)明 的又另一個(gè)方面中，所述防腐劑選自由以下各者組成的群組:丁基化羥基甲苯、丁基化羥基 苯甲醚、苯甲醇以及其混合物。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，所述防腐劑選自由以下各者組 成的群組：丁基化羥基甲苯和丁基化羥基苯甲醚以及其混合物。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面 中，所述防腐劑為丁基化羥基甲苯。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，所述防腐劑為丁基化羥基 苯甲醚。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，所述防腐劑為苯甲醇。
[0012] 在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，所述組合物進(jìn)一步包含至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的 賦形劑。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，所述額外的獸醫(yī)學(xué)賦形劑選自由以下各者組成的群 組：四甘醇、卡必醇（transcutol)、Kolliphor HS15、聚乙二醇、丙二醇、吡略燒酮、乙醇、苯 甲醇、單硬脂酸甘油酯、單油酸甘油酯、油酸乙酯、肉豆蔻酸異丙酯、苯甲酸苯甲酯、以及其 混合物。
[0013] 在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，為一種治療動(dòng)物的發(fā)熱、疼痛和/或發(fā)炎的方法，其 包含向所述有需要的動(dòng)物投與獸醫(yī)學(xué)長效組合物，所述獸醫(yī)學(xué)長效組合物包含a)酮洛芬酯 前藥、b)至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯、和任選地c)至少一種防腐劑、和任選地d)至 少一種額外的獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，為一種治療動(dòng)物的 發(fā)熱、疼痛和/或發(fā)炎的方法，其包含向所述有需要的動(dòng)物投與獸醫(yī)學(xué)長效組合物，所述獸 醫(yī)學(xué)長效組合物包含a)酮洛芬酯前藥和b)至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯。在本發(fā)明 的又另一個(gè)方面中，為一種治療動(dòng)物的發(fā)熱、疼痛和/或發(fā)炎的方法，其包含向所述有需要 的動(dòng)物投與獸醫(yī)學(xué)長效組合物，所述獸醫(yī)學(xué)長效組合物包含a)酮洛芬酯前藥、b)至少一種 獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯和c)至少一種防腐劑。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，為一種治 療動(dòng)物的發(fā)熱、疼痛和/或發(fā)炎的方法，其包含向所述有需要的動(dòng)物投與獸醫(yī)學(xué)長效組合 物，所述獸醫(yī)學(xué)長效組合物包含a)酮洛芬酯前藥、b)至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯 和c)至少一種額外的獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，為一種治療 動(dòng)物的發(fā)熱、疼痛和/或發(fā)炎的方法，其包含向所述有需要的動(dòng)物投與獸醫(yī)學(xué)長效組合物， 所述獸醫(yī)學(xué)長效組合物包含a)酮洛芬酯前藥、b)至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯、c) 至少一種防腐劑和d)至少一種額外的獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑。
[0014] 在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，為一種治療動(dòng)物的發(fā)熱、疼痛和/或發(fā)炎的方法，其 包含向所述有需要的動(dòng)物投與獸醫(yī)學(xué)長效組合物，其中酮洛芬酯前藥是選自由以下組成的 群組：甲酯、乙酯、苯甲酯、煙酰胺酯、聚乙二醇酯、丙二醇單酯、丙二醇二酯、丙二醇單酯和 二酯和丙二醇非對(duì)映異構(gòu)體。
[0015] 在本發(fā)明的另一個(gè)方面中為一種通過向有需要的動(dòng)物投與有效量的本發(fā)明的獸 醫(yī)學(xué)長效組合物來治療動(dòng)物的疼痛的方法。在本發(fā)明的另一個(gè)方面中為一種通過向有需要 的動(dòng)物投與有效量的本發(fā)明的獸醫(yī)學(xué)長效組合物來治療動(dòng)物的發(fā)熱的方法。在本發(fā)明的另 一個(gè)方面中為一種通過向有需要的動(dòng)物投與有效量的本發(fā)明的獸醫(yī)學(xué)長效組合物來治療 動(dòng)物的發(fā)炎的方法。
[0016] 在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，長效組合物通過注射投與。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面 中，所述組合物為可注射組合物。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，可注射組合物為肌內(nèi)（頂)可 注射組合物。在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，獸醫(yī)學(xué)可注射組合物為皮下可注射組合物。 [00 17]在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，酮洛芬前藥的量以約0.5到12mg/kg的劑量投與動(dòng)物。 在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，酮洛芬前藥的量在約l〇mg/mL到約300mg/mL范圍內(nèi)。
[0018]在本發(fā)明的又另一個(gè)方面中，為本發(fā)明的長效組合物的用途，其用于制造供治療 有需要的動(dòng)物的疼痛、發(fā)熱和/或發(fā)炎用的藥物。
[0019] 在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，為長效組合物的用途，所述長效組合物包含a)酮洛芬 前藥，其選自由以下組成的群組:式1、式2、式3、式4、式5、式6和式7以及其混合物;b)至少一 種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯；和任選地 c)至少一種防腐劑；和任選地d)至少一種額外的 獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑，其用于治療或預(yù)防有需要的動(dòng)物的疼痛、發(fā)熱和/或發(fā)炎。
[0020] 定義
[0021 ]出于本發(fā)明的目的，如本文中所描述和要求的，以下術(shù)語和短語定義如下：
[0022] "約"在與可測量的數(shù)字變量結(jié)合使用時(shí)是指變量的指定值和變量的全部值處于 指定值的實(shí)驗(yàn)誤差內(nèi)（例如，在平均值的95%置信區(qū)間內(nèi)）或處于指定值的10%內(nèi)，以較大 者為準(zhǔn)。
[0023] 如本文中所用，除非另外指示，否則"動(dòng)物"是指個(gè)別動(dòng)物，且所述個(gè)別動(dòng)物為哺乳 動(dòng)物。具體來說，哺乳動(dòng)物是指人類和非人類的脊椎動(dòng)物，其是分類哺乳綱(Mammalia)的成 員。非人類哺乳動(dòng)物的非排他性實(shí)例包括伴侶動(dòng)物和牲畜。伴侶動(dòng)物的非排他性實(shí)例包括： 狗、貓和馬。家畜的非排他性實(shí)例包括:豬、山羊、綿羊和牛。優(yōu)選的牲畜是牛和豬。優(yōu)選的動(dòng) 物為豬，且又第二優(yōu)選的動(dòng)物為牛。
[0024] 如本文中所用，除非另外指明，否則"任選地"是指自愿包括至少一種防腐劑和/或 至少一種額外的獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑；即，這些額外成分不是必需的。
[0025] 如本文中所用，除非另外指明，否則"治療有效量"是指本發(fā)明的長效組合物中的 酮洛芬前藥中的一種的量，其（i)治療或預(yù)防具體發(fā)熱、發(fā)炎和/或疼痛事件，（ii)減輕、改 善或消除具體發(fā)熱發(fā)炎和/或疼痛事件的一或多種癥狀，或（iii)預(yù)防或延遲本文所述的具 體發(fā)熱、發(fā)炎和/或疼痛事件的一或多種癥狀的發(fā)作。約0.5到12mg/kg的劑量范圍預(yù)期為治 療有效量。
[0026]如本文中所用，除非另外指示，否則"治療(Treatment/treating)"等是指逆轉(zhuǎn)、緩 解或抑制發(fā)熱、發(fā)炎和/或疼痛事件。如本文中所用，取決于動(dòng)物的病況，這些術(shù)語還涵蓋預(yù) 防病癥或病況或與病癥或病況相關(guān)的癥狀的發(fā)作，包括降低病癥或病況或在受所述發(fā)熱、 發(fā)炎和/或疼痛事件折磨之前與其相關(guān)的癥狀的嚴(yán)重程度。因此，治療可指向在投藥時(shí)未罹 患發(fā)熱、發(fā)炎和/或疼痛事件的動(dòng)物投與本發(fā)明的長效組合物例如作為預(yù)防性治療。治療還 涵蓋預(yù)防發(fā)熱、發(fā)炎和/或疼痛事件或與其相關(guān)的癥狀的復(fù)發(fā)。
[0027]如本文中所用，除非另外指示，否則"獸醫(yī)學(xué)上可接受的"指示，酮洛芬前藥和長效 組合物必須與構(gòu)成組合物的其它成分和/或正用其治療的動(dòng)物在化學(xué)和/或毒理學(xué)上相容。 所述術(shù)語與醫(yī)藥學(xué)上可接受的同義。
【具體實(shí)施方式】
[0028]所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)理解，本發(fā)明論述僅為示例性實(shí)施例的描述且不打算為限 制本發(fā)明的更廣方面，所述更廣方面體現(xiàn)在示例性構(gòu)造中。實(shí)際上，所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員將 顯而易見，在不脫離本發(fā)明的范圍或精神的情況下可以在本發(fā)明中進(jìn)行各種修改和改變。 舉例來說，說明或描述為一個(gè)實(shí)施例的一部分的特征可以用于另一實(shí)施例以產(chǎn)生再另一實(shí) 施例。因此，希望本發(fā)明涵蓋這類修改以及改變，所述修改以及改變處于所附權(quán)利要求書以 及其等效物的范圍內(nèi)。
[0029]本發(fā)明提供一種長效、穩(wěn)定的獸醫(yī)學(xué)組合物，其用于治療有需要的動(dòng)物的發(fā)熱、疼 痛和/或發(fā)炎，其包含投與有效量的酮洛芬酯前藥，所述酮洛芬酯前藥選自由以下組成的群 組:a)甲酯(式1，2-(3_苯甲?；交?丙酸甲酯）、b)乙酯(式2,2-(3_苯甲?；交?丙酸乙 酯）、c)煙酰胺酯(式3,2-(3_苯甲酰基苯基)丙酸2-(煙酰胺基）乙酯）、d)苯甲酯(式4,2-(3_ 苯甲?；交?丙酸苯甲酯）、e)丙二醇單酯(式5,2-(3_苯甲酰基苯基)丙酸2-羥丙酯)f)丙 二醇二酯(式6,雙(2-(3-苯甲酰基苯基)丙酸丙烷-1，2-二酯）、g)式5和式6的混合物、以及 h)聚乙二醇酯(式7)。本發(fā)明的丙二醇酯還包括其所有非對(duì)映異構(gòu)體。
[0032]在注射之后，酮洛芬酯前藥逐漸從注射部位處的調(diào)配物釋放。一旦釋放到全身循 環(huán)(例如血液/血漿）中，酯前藥就經(jīng)由肝酶水解。所述藥物的親本(活性)形式酮洛芬為所循 環(huán)的提供確定功效的主要NSAID化合物。
[0033]酮洛芬可根據(jù)US3641127中描述的程序制備。烷基酯酮洛芬前藥可根據(jù)《國際制藥 學(xué)雜志》（International Journal of Pharmaceutics) ,43(1988)，第101-110頁中描述的 程序制備。另外，甲酯可使用普通酯化反應(yīng)物制備，如Liang，Yu-Feng等人，《羰基化合物在 溫和條件下使用氧的高效C-H羥基化》（Highly Efficient C-H Hydroxylation of Carbonyl Compounds with Oxygen under Mild Conditions)，《應(yīng)用化學(xué)國際版》 (Angewandte Chemie，International Edition)，第53卷，第2期，第548-552頁，2014;流程5 所述。煙酰胺酯酮洛芬前藥可根據(jù)《歐洲藥物化學(xué)雜志》(European Journal of Medicinal Chemistry) ,39(2004)，第715-727頁中描述的程序制備。苯甲酯可通過費(fèi)歇爾酯化反應(yīng) (Fischer esterification)制備，所述費(fèi)歇爾酯化反應(yīng)涉及用醇（例如苯甲醇)在脫水劑 (例如硫酸）存在下處理羧酸（酮洛芬），如《藥物化學(xué)研究》(Med Chem Res) 21 (2012)，第 3361-3368頁中所述。烷基酯也可以此方式使用脂肪族醇制備。二醇酯可根據(jù)美國專利US 4,560,785中描述的方法制備。
[0034] 酮洛芬展現(xiàn)出強(qiáng)力的消炎、鎮(zhèn)痛和解熱作用，所述作用與抑制前列腺素合成和拮 抗緩激肽作用相關(guān)。酮洛芬非選擇性抑制C0X-1和C0X-2的活性，此引起對(duì)前列腺素制造的 阻斷，尤其對(duì)PGE 2的阻斷，預(yù)防痛覺過敏的發(fā)展。酮洛芬在非選擇性人類C0X分析中具有4-8nM的IC5Q值，與所評(píng)估的其它NSAID(例如萘普生(naproxen)或吲哚美辛）相比功能上強(qiáng)6-12倍。Kan tor，T ·，《藥物療法》（Pharmacotherapy )6: 93-103(1986)。酮洛芬針對(duì)C0X-1和 C0X-2酶的豬直系同源物的IC5Q值與人類相似，在6-7nM范圍內(nèi)，如本文所述。相比之下，酮洛 芬針對(duì)C0X-1和C0X-2酶的牛直系同源物較不強(qiáng)力，展示出針對(duì)C0X-1的30nM的IC 5Q值和針對(duì) C0X-2的220nM的IC5Q值，如本文所述。酮洛芬還具有功能性緩激肽拮抗劑活性，其作用與在 經(jīng)典NSAID吲哚美辛的情況下可見的作用大8倍。Julou，L.，等人，《斯堪的納維亞風(fēng)濕病學(xué) 雜志增刊》（Scand J Rheumatol Suppl)0:33-44(1976)。除了抑制環(huán)加氧酶之外，酮洛芬被 認(rèn)為提供抑制脂氧合酶的額外消炎益處。
[0035] 組合物，尤其獸醫(yī)學(xué)組合物，更確切地說，獸醫(yī)學(xué)長效組合物適用于傳遞至少一種 本發(fā)明的酮洛芬前藥，且其制備方法將為所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員易于清楚的。所述組合物和 其制備方法可在例如'Remington's Pharmaceutical Sciences'，第 19版（Mack Publishing Company, 1995)中找到。
[0036] 在本發(fā)明中，獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯另外涵蓋甘油一酯和甘油二酯。另外，甘 油三酯涵蓋天然衍生的和半合成/合成油，例如蓖麻油、棉籽油、芝麻油、亞麻籽油、紅花油、 花生油、大豆油、椰子油、橄欖油、玉米油、苦杏仁油、罌粟種子油、葵花油、苦杏仁油、植物油 以及其混合物。甘油三酯還涵蓋:三辛酸甘油酯、辛酸/癸酸三甘油酯（例如Miglyol 801、 Miglyol 812、Captex 355等）、辛酸/癸酸/亞油酸甘油三酯、辛酸/癸酸/琥珀酸甘油三酯、 丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯（例如Miglyol 840和Captex 200等）、三乙酸甘油酯(三醋精）、 硬脂酸甘油酯等，包括其混合物。優(yōu)選的甘油三酯為蓖麻油、三乙酸甘油酯、辛酸/癸酸/亞 油酸甘油三酯、辛酸/癸酸/琥珀酸甘油三酯、丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯（例如Miglyol 840 和Captex 200)、辛酸/癸酸三甘油酯以及其混合物。更優(yōu)選的甘油三酯為辛酸/癸酸三甘油 酯、三乙酸甘油酯、丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯、蓖麻油以及其混合物。甚至更優(yōu)選的甘油三 酯為辛酸/癸酸三甘油酯。另一優(yōu)選的甘油三酯為三乙酸甘油酯。另一更多優(yōu)選的甘油三酯 為丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯。另一更優(yōu)選的甘油三酯為蓖麻油。當(dāng)蓖麻油為組成的甘油三 酯時(shí)，那么不需要其它甘油酯和/或甘油三酯，例如二辛酸丙酯/二癸酸丙酯、辛酸/癸酸甘 油三酯或?；瘑胃视退狨セ蚱浠旌衔铩Ｉ踔粮鼉?yōu)選的辛酸/癸酸三甘油酯為Miglyol 812。另一甚至更優(yōu)選的丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯甘油三酯為Miglyol 840。
[0037] 在本發(fā)明中，長效組合物任選地包含至少一種防腐劑。在本發(fā)明中，長效組合物進(jìn) 一步包含至少一種防腐劑。防腐劑可為抗微生物、抗真菌和/或抗氧化防腐劑。防腐劑的非 限制性實(shí)例包括:苯甲酸、山梨酸、抗壞血酸、梓檬酸、苯甲醇、生育酚、乙醇、硫酸氫鈉、氯丁 醇、2-乙氧基乙醇、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯和對(duì)羥基苯 甲酸丁酯和其組合、氯己定、苯酚、丁基化羥基甲苯(BHT)、丁基化羥基苯甲醚(BHA)、苯甲酸 鈉、其混合物等。優(yōu)選的防腐劑選自由以下各者組成的群組:BHA、BHT、苯甲醇以及其混合 物。
[0038] 在本發(fā)明中，長效組合物任選地包含至少一種額外的獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑。 在本發(fā)明中，長效組合物進(jìn)一步包含至少一種額外的獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑。舉例來說， 額外的獸醫(yī)學(xué)賦形劑可包括緩沖劑(例如乙酸鈉、乙酸銨、天冬氨酸、二乙醇胺、碳酸鈉、磷 酸鉀等）、粘度改性劑(例如硬脂酸鋁(單硬脂酸鹽和二硬脂酸鹽）、羧甲基纖維素鈉、甲基纖 維素等）、溶劑（例如苯甲酸苯甲酯、聚乙二醇（例如PEG200、PEG 400等）、N，N-二甲基乙酰 胺、丙二醇、乙醇、苯甲醇、二甲亞砜、N-甲基吡咯烷酮、2-吡咯烷酮、甘油縮甲醛、甘油、肉豆 蔻酸異丙酯、四甘醇（四氫呋喃聚乙二醇醚(glycofurol)、四氫糠醇聚乙二醇醚）、二乙二醇 單乙醚(DEGMEE，例如卡必醇）、二乙二醇單甲醚(DEGMME)等）、乳化劑（例如聚乙氧基化醚、 酯和油，如聚乙二醇(macrogol)，且其磷脂卵磷脂為實(shí)例，脫水山梨糖醇酯（例如聚山梨醇 酯80(Span 80)、Span 40、Span60等））、克列莫佛（cremophor)(例如Cremaphor EL、 Cremaphor RH40等）、聚山梨醇酯（例如Tween 20、Tween 80等）、聚乙二醇-15-羥基硬脂酸 酯(例如Kolliphor HS15、Crodasol HS15等）、聚乙二醇15羥基硬脂酸酯、聚氧乙稀-聚氧丙 烯共聚物和維生素E的聚氧乙烯衍生物，如生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯等）、和張力改性 劑(例如山梨糖醇、木糖醇、甘露糖醇、右旋糖、葡萄糖、丙二醇、鹿糖、無機(jī)鹽(如氯化鈉)和 乳糖等）。
[0039] 所述組合物以常規(guī)方式根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)藥或獸醫(yī)學(xué)實(shí)踐制備。
[0040] 這些酮洛芬酯前藥的量易于由熟練的業(yè)內(nèi)人士測定且另外取決于最終長效組合 物的給藥量和給藥體積。所述給藥量和給藥體積被認(rèn)為是治療有效的給藥量和給藥體積。 式1、式2、或式3、式4、式5、式6、式5和式6、和式7以及其混合物的酮洛芬前藥的治療有效量 的代表性量在約0.1到20mg/kg范圍內(nèi)。酮洛芬酯前藥的治療有效量的更優(yōu)選的代表性量在 約0.25到15mg/kg范圍內(nèi)。酮洛芬酯前藥的治療有效量的甚至更優(yōu)選的代表性量在約0.5到 12mg/kg范圍內(nèi)。酮洛芬酯前藥的治療有效量的甚至更優(yōu)選的代表性量在約0.5到10mg/kg 范圍內(nèi)。組合物中的酮洛芬酯前藥的代表性量在約lmg/mL到約500mg/mL范圍內(nèi)。組合物中 的酮洛芬酯前藥的更優(yōu)選的量在約1 〇mg/ml到約400mg/mL范圍內(nèi)。組合物中的酮洛芬酯前 藥的甚至更優(yōu)選的量在約20mg/mL到約300mg/mL范圍內(nèi)。
[0041] 本發(fā)明的長效組合物適用作抗炎劑、解熱劑和鎮(zhèn)痛劑。長效組合物可用于獸醫(yī)學(xué) 藥物、牲畜飼養(yǎng)和維持公共健康狀況（即，為了確保食品動(dòng)物、尤其牲畜、例如豬和牛的安全 性和健康狀況)的領(lǐng)域。
[0042] 經(jīng)由肌內(nèi)注射或皮下注射全身傳遞酮洛芬前藥會(huì)確保全部治療劑量傳遞到動(dòng)物 (即，牛）。長效組合物可注射到動(dòng)物的耳中或注射于耳廓和顱連接點(diǎn)處。舉例來說，皮下注 射使用連接于如注射器、反復(fù)注射器、多劑量注射器等的裝置的無菌針（例如16號(hào)，1.5到 2.0cm)投與在耳廓與顱的連接點(diǎn)處。針定向耳軟骨的耳廓隆起的尾側(cè)，在靠近前耳舟表面 的基部的耳軟骨的近端，并從耳的尾側(cè)朝向嘴側(cè)。優(yōu)選地，注射在頸耳肌肉的尾側(cè)和腮腺唾 液腺的背尾側(cè)。一旦針完全插入，藥物投與者可回抽注射器活塞以確保針不在血管之中。一 旦在皮下組織中，適當(dāng)體積的可注射長效組合物經(jīng)由針排出，且隨后抽出針。優(yōu)選地，向針 插入點(diǎn)施加直接壓力以使所注射組合物的回流減到最少。盡管針不必平行于皮膚插入，但 所述方法仍由于針長度短和注射部位的位置而考慮皮下注射。
[0043] 針注射為優(yōu)選的傳遞方法，不過注射器、自動(dòng)注射器、反復(fù)給藥注射器和注射槍的 使用也可以類似方式使用。
[0044] 當(dāng)前治療方案，例如Metacam? (美洛昔康)為每天一次可注射劑，用于控制與關(guān)節(jié) 炎相關(guān)的疼痛和/或發(fā)炎。后續(xù)劑量應(yīng)在先前劑量之后24小時(shí)投與。類似地，氟尼辛葡甲胺 可注射劑的推薦劑量對(duì)于馬為每天一次，且重復(fù)給藥達(dá)到5天。在牛中，劑量可作為單次劑 量一天一次投與或分成兩個(gè)劑量每12小時(shí)投與一次持續(xù)達(dá)到3天。酮洛芬（Amil'e，）可注射 劑也通過每天一次注射持續(xù)1天(豬)到五天(馬)來投與。
[0045] 根據(jù)本發(fā)明，包含至少一種酮洛芬酯前藥、至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯、 和任選地至少一種防腐劑、和任選地至少一種額外的獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑的長效組合 物可視需要每兩天、三天、四天或五天使用一次。長效組合物提供用于在單次可注射劑量之 后治療疼痛、發(fā)炎和/或退熱持續(xù)高達(dá)48小時(shí)、72小時(shí)、96小時(shí)，且在一些情況下持續(xù)高達(dá) 120小時(shí)。因此，長效組合物提供動(dòng)物以長時(shí)間緩解且同樣地減少動(dòng)物照護(hù)者投與可注射劑 的次數(shù)。
[0046] 根據(jù)本發(fā)明，包含至少一種酮洛芬酯前藥、至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯、 和任選地至少一種防腐劑、和任選地至少一種額外的獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑的長效組合 物可進(jìn)一步包含額外的生物活性劑，例如抗細(xì)菌劑。存在多種可供用于動(dòng)物的抗細(xì)菌劑。這 些抗細(xì)菌劑包括（但不限于）以下各者：大環(huán)內(nèi)酯，例如托拉霉素（Draxxin")、泰地羅新 (tildipirosin) (Zuprevo81)、替米考星（1::11111；[(308；[11)(]/0(；〇說!?1)、泰洛星磷酸鹽(^71〇8；[11 phosphate)( Tylan?)、和加米霉素 (gamithromycin)(Zactran8 );頭胞菌素，例如頭孢噻夫鈉 (ceftiofur sodium)(例如Naxce.1?:和Esceeael?..)、頭孢噻夫鹽酸鹽（例如Excenel_RTU?、 Excenel RTU _EZ?、Spectraffiast?:)、頭孢噻夫結(jié)晶游離酸:(Excede? )、頭孢維星鈉 (cefovecin sodium) (Convcniaκ)、和頭孢泊月虧普昔酯（cefpodoxime proxetil) (Simpliccr );林可酰胺抗生素（lincosaminide antibiotic)，例如林可霉素（lincomycin) (Lincomix'?)、吡利霉素鹽酸鹽（pirlimycin hydrochloride)(PirsueSl)、和克林霉素鹽酸 鹽（clindamycin hydrochloride)(Antir0be1&l);氟喹諾酮，例如達(dá)氟沙星（danofloxacin) (Advocin?.).、恩氟沙星（enrofloxacin ) ( Baytri丨ιδ)、和馬波沙星（marbofloxacin) (Zeniquinl;);以及四環(huán)素，例如氯四環(huán)素（chlortetracycline)、氧四環(huán)素 (oxytetracycline)和多西環(huán)素(doxycycline)。其它抗細(xì)菌劑包括(但不限于)阿莫西林三 水合物（amoxicillin trihydrate)和克拉維酸（clavulonic acid)( CiavamoxK )、大觀霉 素(spectinomycin)( Adspec")、:增強(qiáng)的磺酰胺，包括甲氧節(jié)氨啼啶(trimethoprim)/磺胺啼 啶（sulfadiazine)C Tucoprim?)和磺胺二甲氧嗪（sulfadimethoxine)/奧美普林 (01'11161：(^1'；[111)<^1^11101^);以及氟苯尼考（：?101^11；[(301)(例如施1101^ 1和1^111'10產(chǎn)601(1)0
[0047]另外，親本劑酮洛芬也可與本文公開的抗細(xì)菌劑中的任一個(gè)組合，例如酮洛芬和 D.raxxin8 <,包含酬洛芬和Draxxin '81或酬洛芬和本文所述的任何其它抗細(xì)菌劑的組合物可 能為或可能不為這樣的組合物:包含獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯和/或防腐劑，但可包含至 少一種如本文所述的獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑和/或所屬領(lǐng)域中已知用于制備供動(dòng)物用的 穩(wěn)定可注射組合物的任何額外的獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑。
[0048]根據(jù)本發(fā)明，包含至少一種酮洛芬酯前藥、至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯、 和任選地至少一種防腐劑、和任選地至少一種額外的獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑的長效組合 物可與抗細(xì)菌劑同時(shí)或依序投與，即，作為兩個(gè)單獨(dú)的劑量單位。以另外的方式，長效組合 物可進(jìn)一步包含可作為單一可注射劑量單位共投與的抗細(xì)菌劑。類似地，酮洛芬可與抗細(xì) 菌劑同時(shí)或依序投與，無論是以單一可注射劑量單位形式還是以單獨(dú)的劑量單位形式調(diào)配 在一起。
[0049] 實(shí)驗(yàn)
[0050] 酮洛芬酯可根據(jù)如本文所述的工藝和方法制備。替代地，甲酯可根據(jù)以下流程制 備：
[0052] 將酮洛芬(50g)在室溫下添加到甲醇(200mL)中且攪拌直到溶解。將溶液冷卻到約 5-10 °C。HC1氣體經(jīng)由溶液傳遞，得到約23g反應(yīng)物質(zhì)增加。在攪拌的同時(shí)，使溶液升溫到室 溫。溶液接著冷卻到約0-5 °C。逐滴添加冷卻水(200mL)，同時(shí)維持約0-20 °C的反應(yīng)溫度。溶 液接著在室溫下攪拌約30分鐘。過濾固體且用水洗滌。固體在真空下在約40°C下干燥，得到 約52g酮洛芬甲酯(98.6%)。
[0053] 實(shí)例
[0054]在以下長效組合物實(shí)例中，酮洛芬酯前藥(KEP)可為式1到式7中的任一個(gè)以及其 混合物。下文展示非限制性獸醫(yī)學(xué)上可接受的長效組合物。
[0055] 組合物1
[0057] 組合物2

璃小瓶或白色HDPE小瓶中在25 °C和40 °C下且在加速穩(wěn)定性條件下在60 %和75 %相對(duì)濕度 下為穩(wěn)定的。添加防腐劑(例如苯甲醇或丁基羥基甲苯(BHT)提供類似的穩(wěn)定性結(jié)果。另外， 60mg/mL組合物在4°C、25°C、40°C、50°C和60°C下也為穩(wěn)定的，與小瓶頂部空間是否經(jīng)空氣 或氮?dú)馓畛錈o關(guān)。
[0085] 生物學(xué)
[0086]許多NSAID的體外活性使用豬肺泡巨噬細(xì)胞使用合格的原代細(xì)胞分析針對(duì)豬C0X-1和C0X-2酶評(píng)估。NSAIDS包括:氣尼辛匍甲胺（Banami.ne-S%)、美洛昔康(Metacam &)、酮洛 芬（KetofenR，可注射劑）、酮洛芬S-對(duì)映異構(gòu)體、酮洛芬（外消旋）、卡洛芬（carprof en)、和 酮洛芬前藥(式1和式3)。肺泡巨噬細(xì)胞在不同量的抑制劑存在下用脂多糖(LPS)處理，以產(chǎn) 生血栓素B2(TXB2)和/或前列腺素E 2(PGE2)。在21-24小時(shí)培育之后收集細(xì)胞上清液，且冷凍 在-80°C下直到通過ELISA定量。將TXB2用作⑶X-1抑制的分析讀出。PGE 2用作C0X-2抑制的 分析讀出。每一藥物在三個(gè)不同實(shí)驗(yàn)中在不同的三天測試(最低限度）。分別基于所觀察到 的TXB2或PGE 2濃度的平均值，計(jì)算每一藥物濃度的⑶X-1或⑶X-2的抑制百分比。平均抑 制％曲線(抑制％對(duì)比藥物濃度)通過非線性回歸分析，得到在C0X-2IC 5Q效力的秩序中列出 的個(gè)別IC5Q和IC9Q值。外消旋酮洛芬針對(duì)豬C0X酶的IC 5Q值(表1)與針對(duì)人類所報(bào)導(dǎo)的值相 似。如表1中所指出，酮洛芬(外消旋體）比氟尼辛稍微更強(qiáng)力，且兩者比酮洛芬甲酯強(qiáng)一個(gè) 數(shù)量級(jí)，酮洛芬甲酯與經(jīng)典C0X-2基準(zhǔn)美洛昔康相比更強(qiáng)力約5倍。
[0087]表1 ·各種 NSAID 的豬 C0X-1 和 C0X-2IC5Q 和 IC9〇 效力(μΜ)
[0090] 酮洛芬和式1的體外活性還使用牛全血分析針對(duì)牛⑶X-1和⑶Χ-2酶評(píng)估。簡單來 說，收集肝素化血液用于兩種分析。C0X-1分析涉及用魚精蛋白（protamine)處理血液；以逆 轉(zhuǎn)肝素的抗凝血作用；因此，誘導(dǎo)凝血和血栓素B2 (TXB2)的產(chǎn)生。C0X-2分析涉及用LPS處理 血液以產(chǎn)生PGE2。兩種分析均包括存在不同量的抑制劑，以抑制TXB2或PGE 2。酮洛芬（ Ketofen?可注射劑)和酮洛芬前藥酯式1各自在三個(gè)不同實(shí)驗(yàn)中在不同的三天測試(最低限 度）。抑制百分比自各藥物劑量的原始數(shù)據(jù)基于TXB2或PGE 2濃度的平均值計(jì)算。接著，平均 抑制％曲線(抑制％對(duì)比藥物濃度)經(jīng)由非線性回歸分析，得到個(gè)別IC5Q和IC 9Q值。如表2中 所指示，酮洛芬(外消旋體)與式1相比在抑制牛C0X-1酶時(shí)更強(qiáng)力，但在C0X-2酶時(shí)展示出與 式1類似的效力。如與豬C0X酶相比，酮洛芬和式1均展示出針對(duì)牛C0X-1和C0X-2較低的效 力。
[0091] 表2.酮洛芬（K：et〇fen￥可注射劑)和式1的牛C0X-1和C0X-2IC 5Q和IC9Q效力(μΜ)
[0093] 酮洛芬在小母豬(約15kg)中的藥代動(dòng)力學(xué)在水性組合物中在以0.5mg/kg靜脈內(nèi) 和肌內(nèi)投與之后評(píng)估。酮洛芬展示出在肌內(nèi)投與之后的低全身性清除率（1.49±0.50mL/ min/kg)、低分布容積(0.199±0.027L/kg)、2.29±0.87小時(shí)的最終半衰期時(shí)間以及高生物 利用度(121 ±9%)?；谒幬飫?dòng)力學(xué)結(jié)果，涉及氣管內(nèi)投與豬流感病毒(SIV)的臨床前發(fā)熱 模型用于在斷奶后小母豬中評(píng)估速釋酮洛芬(外消旋）的解熱劑功效，以及用于建立退熱的 藥物動(dòng)力學(xué)-藥效學(xué)(PK-PD)關(guān)系。氣管內(nèi)投與SIV(4mL 7.0±0.51og1QTCID 50/4mL)引起豬 的發(fā)熱逐漸升高，在投與后約24小時(shí)達(dá)到峰值，且經(jīng)投與后約40小時(shí)減弱。五組約28天大的 幼齡小母豬(每組N=10)接收氣管內(nèi)投與SIV，接著肌內(nèi)（IM)投與各種劑量(0、0.03、0.1、 0.3和lmg/kg)酮洛芬。酮洛芬(外消旋)在SIV投與之后23小時(shí)投與。在即將投與SIV(t = 0小 時(shí)）之前、在酮洛芬投與之前1小時(shí)（t = 22小時(shí)）和之后1小時(shí)（t = 24小時(shí)）以及在t = 6、27、 29、32和35小時(shí)下獲取直腸溫度讀數(shù)。外消旋酮洛芬劑量依賴性地在SIV誘導(dǎo)的發(fā)熱模型中 退熱，且甚至所測試的最低劑量(0.03mg/kg，B〇展示出與媒劑統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的分離。強(qiáng)解 熱劑活性與低到500nM的血漿濃度相關(guān)。數(shù)據(jù)指示外消旋酮洛芬為豬中的強(qiáng)力解熱劑。
[0094] LPS誘導(dǎo)的豬滑膜炎模型用于在斷奶后小母豬中評(píng)估速釋酮洛芬的鎮(zhèn)痛劑功效， 以及建立減痛的PK-H)關(guān)系（其可能與和退熱相關(guān)的關(guān)系不同）。經(jīng)麻醉動(dòng)物接收2mL LPS注 射到膝關(guān)節(jié)中。在足夠的麻醉恢復(fù)時(shí)間之后，通過將動(dòng)物從其畜圈轉(zhuǎn)移到開放區(qū)域并允許 其自發(fā)地走動(dòng)來評(píng)估所述動(dòng)物的跛行。觀察者指定臨床跛行的視覺模擬量表(VAS)評(píng)分。潛 在跛行分?jǐn)?shù)在〇cm(對(duì)應(yīng)于與正常運(yùn)動(dòng)無偏差)到10cm(對(duì)應(yīng)于可能的最差的跛行）范圍內(nèi)。 重復(fù)觀察結(jié)果持續(xù)高達(dá)滑膜炎誘導(dǎo)后5小時(shí)，此時(shí)跛行消退且動(dòng)物回到正常走動(dòng)。在驗(yàn)證研 究中，氟尼辛葡甲胺（2.2mg/kg，IM)(通常藥品核準(zhǔn)標(biāo)示外使用的用于治療豬的疼痛的產(chǎn) 品）和美洛昔康(〇. 2mg/kg，頂)（在歐洲中批準(zhǔn)為豬的鎮(zhèn)痛劑的化合物)均有效減少LPS誘導(dǎo) 的跛行。
[0095] 評(píng)估速釋酮洛芬減少LPS誘導(dǎo)的跛行的能力。執(zhí)行兩個(gè)獨(dú)立的研究以測定并細(xì)化 模型中的酮洛芬的劑量反應(yīng)函數(shù)。另外，獲取血液樣品以便使酮洛芬血漿濃度與功效相關(guān) (即，PK-PD評(píng)估）。兩種研究在方法方面是相同的。各研究由36只豬(N = 9/處理組)組成;滑 膜炎在t = _l小時(shí)下誘導(dǎo)，且酮洛芬在t = 0小時(shí)下投與。在t = l、2、3和4小時(shí)下檢查豬，且指 定VAS臨床跛行評(píng)分。在第一個(gè)研究中，將寬范圍的酮洛芬劑量(0.01、0.1、1 .Omg/kg，IM)與 媒劑相比。與媒劑相比，持續(xù)給藥后高達(dá)3小時(shí)，0.1和1.0mg/kg的酮洛芬產(chǎn)生跛行的統(tǒng)計(jì)學(xué) 上顯著的減少。血漿濃度測定出這些劑量產(chǎn)生大約兩種C0X酶的體外IC 9Q的總血漿濃度。執(zhí) 行第二個(gè)后繼研究，以通過與媒劑相比檢查劑量為〇. 01、〇. 03和0. lmg/kg，頂?shù)耐宸襾砑?xì) 化劑量反應(yīng)曲線。這項(xiàng)研究同樣展示〇. lmg/kg酮洛芬產(chǎn)生跛行的最大減少持續(xù)給藥后3小 時(shí)。這一劑量水準(zhǔn)對(duì)應(yīng)于在〇. 5與0.7μΜ酮洛芬之間的血漿濃度。另外，酮洛芬的生物利用度 在Μ注射之后測定為100 %。
[0096] 上文所述的體外和體內(nèi)結(jié)果展現(xiàn)出酮洛芬1)為豬C0X同工酶的強(qiáng)力抑制劑，2)在 豬中具有有利的藥物動(dòng)力學(xué)特性，和3)在低到500ηΜ的總血漿濃度下針對(duì)豬的發(fā)熱和疼痛 兩者高度有效。酮洛芬被視為親水性劑，其通常不適合于甘油三酯類組合物。因此，甘油三 酯類組合物與水溶解度較低的酮洛芬酯前藥一起考慮。
[0097] 在豬血漿和肝微粒體中在水解中評(píng)估酮洛芬前藥、式1、式2和式3。所測試的所有 式（1-3)在豬肝臟微粒體中快速水解且在豬血漿中適度或緩慢水解。這些酮洛芬酯的水解 在0.5mg/kg下在豬中在單次靜脈內(nèi)和肌內(nèi)投與之后進(jìn)行體內(nèi)評(píng)估。豬以0.5mg/kg酮洛芬或 其酯（式1-3)通過靜脈內(nèi)（IV)或肌內(nèi)注射給藥。評(píng)估血漿樣品的酮洛芬，且AUC(nmol*hr/ mL/μπιο 1 /kg)用μπιο 1 /kg的劑量(η = 3或4)標(biāo)準(zhǔn)化，呈現(xiàn)在表3中。
[0098] 表3.在靜脈內(nèi)和肌內(nèi)投與酮洛芬或其酯之后在豬中的經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)化平均酮洛芬AUC
[0100] 如表3中可見，酮洛芬在投與其甲酯(式1)之后的暴露相當(dāng)于在投與酮洛芬自身之 后的暴露。
[0101] 由于經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)化的暴露結(jié)果，四種包含式1的長效組合物被設(shè)計(jì)成用于評(píng)估酮洛芬 藥代動(dòng)力學(xué)。組合物包括共溶劑，所述共溶劑將從注射部位和/或肌內(nèi)空間經(jīng)約1天到約1周 的持續(xù)時(shí)間緩慢消散且包括:TO 1 (甘油縮甲醛:三醋精（25: 75v/v)); Τ02(miglyo 1 812); T03(棉籽油:三醋精(90: ΙΟv/v));以及T04(自身微乳化藥物傳遞系統(tǒng)），其可能提供至少兩 個(gè)優(yōu)點(diǎn)：1)對(duì)相對(duì)疏水性化合物賦予溶液樣動(dòng)力學(xué)，和/或2)延長活性劑保持在溶液中的時(shí) 間長度且使注射部位處的沉淀減到最少，歸因于存在顯著含量的乳化劑與甘油三酯。小母 豬(n = 4)(尚未懷孕的雌性豬，稱重約15kg)各自接收單次3mg/kg(30mg/mL)肌內(nèi)注射。如表 4中可見，miglyol 812組合物在72小時(shí)（072^)下得到最低〇1^1和最高酮洛芬血衆(zhòng)濃度。 C24hr、C48hr和C72 hr值分別為在給藥后24、48和72小時(shí)下的酮洛芬血漿濃度。
[0102] 表4.在單次肌內(nèi)投與酮洛芬甲酯之后在豬中的酮洛芬的平均藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)
[0103]
[0104] 進(jìn)行第二組合物研究以評(píng)估具有額外組分的式l(30mg/mL或60mg/mL)組合物。舉 例來說，將單硬脂酸鋁添加到miglyol 812組合物中以增加粘度，從而減小藥物自肌內(nèi)空間 流動(dòng)的面積。類似地，向miglyol 812中添加表面活性劑(Span 80，0.5 %或1 % )以減少發(fā)生 甘油三酯耗盡的滯后時(shí)間，和蓖麻油，其可提供甘油三酯與酯之間的不同分配系數(shù)。組合物 包括：T01(miglyol 812,30mg/mL)、T02(miglyol 812與單硬脂酸鋁，3〇11^/11^)、1'03 (miglyol 812,60mg/mL)、T04(miglyol 812與0.5%Span 80,30mg/mL)、T05(miglyol 812 與1 % Span 80，30mg/mL)、和T06 (蓖麻油，30mg/mL)。如表5中可見，增加酮洛芬甲酯劑量對(duì) 酮洛芬的藥物動(dòng)力學(xué)特征曲線沒有影響。添加粘度改性劑和/或界面活性劑對(duì)酮洛芬Cmax 或持續(xù)時(shí)間沒有明顯作用。另外，蓖麻油表現(xiàn)類似于miglyol 812。
[0105] 表5.在單次肌內(nèi)投與酮洛芬甲酯之后在豬中的酮洛芬的平均藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)
[0106]
[0107] 在豬中在不同可注射長期組合物中評(píng)估式1的額外的藥物動(dòng)力學(xué)研究。組合物包 括：組合物 l:miglyol 812;組合物 3:migylol 812:四甘醇（67 :33，v/v);組合物 4: 1111區(qū)71〇1812:三醋精（75:25，￥八）；組合物5:111丨817〇1812:四甘醇:1(〇11丨卩11〇1'批15(67:28: 5，v/v/v)。這些組合物不包括任選的防腐劑。表6展示出在單次lmg/kg肌內(nèi)注射之后在大母 豬(n = 4)(各自稱重184到233kg之間）中包含80mg/mL式1的組合物中的每一個(gè)的平均藥物 動(dòng)力學(xué)值。
[0108] 表6.在單次肌內(nèi)投與酮洛芬甲酯之后在豬中的酮洛芬的平均藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)
[0109]
[0110] 在豬中在不同可注射長期組合物中評(píng)估式1的額外的藥物動(dòng)力學(xué)研究。組合物包 括:組合物6:Migylol 840;組合物7:Migylol 840:四甘醇(67:33);組合物8:Miglyol 840: 三醋精（75:25);以及組合物 10:Miglyol 840:四甘醇：Kolliphor HS15(67:28:5)。這些組 合物不包括任選的防腐劑。表7展示出在單次lmg/kg肌內(nèi)注射之后在大母豬(n = 4)(稱重 184到233kg之間）中包含80mg/mL式1的組合物中的每一個(gè)的平均藥物動(dòng)力學(xué)值。
[0111] 表7.在單次肌內(nèi)投與酮洛芬甲酯之后在豬中的酮洛芬的平均藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)
[0112]
[0113]除非具體說明，否則在努力評(píng)估Miglyol 812中的式l(30mg/mL)針對(duì)豬(尤其小母 豬)的發(fā)熱的功效的等級(jí)和持續(xù)時(shí)間過程中，通過肌內(nèi)注射給予動(dòng)物6mg/kg劑量。基于先前 在豬SIV誘導(dǎo)的發(fā)熱模型中使用速釋酮洛芬的PK-PD研究，預(yù)測6mg/kg劑量會(huì)賦予2 500nM 的酮洛芬的總血漿濃度持續(xù)72小時(shí)。四個(gè)處理組與媒劑相比且包括:T01(速釋酮洛芬（lmg/ kg，頂，在發(fā)熱高峰之前1小時(shí)投與）、T02(式1，在SIV激發(fā)（即，發(fā)熱高峰)之前24小時(shí)投與）、 T03(式1，在SIV激發(fā)之前48小時(shí)投與）、和T04(式1，在SIV激發(fā)之前72小時(shí)投與）。在所有情 況下，在SIV激發(fā)后6、20、23、24、26、28、31和34小時(shí)下測量直腸溫度。數(shù)據(jù)呈現(xiàn)在圖1中。數(shù) 據(jù)繪制為最小二乘均值土SEM，且誤差條表示平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差(SEM)。展示出在給藥后24、 48和72小時(shí)下測定的酮洛芬的平均血漿濃度(衛(wèi)星ΡΚ組）：圖1Α:在SIV激發(fā)之后23小時(shí)給藥 的酮洛芬(速釋）；圖1Β:與SIV激發(fā)同時(shí)（即，在發(fā)熱高峰之前24小時(shí))給藥的Miglyol 812中 的酮洛芬甲酯(6mg/kg，頂）；圖1C:在SIV激發(fā)之前24小時(shí)（即，在發(fā)熱高峰之前48小時(shí))給藥 的Miglyol 812中的酮洛芬甲酯(6mg/kg，n〇;圖1D:在SIV激發(fā)之前48小時(shí)（即，在發(fā)熱高峰 之前72小時(shí))給藥的Miglyol 812中的酮洛芬甲酯(6mg/kg，n〇。在圖1中，指示與媒劑相 比具有統(tǒng)計(jì)顯著性的點(diǎn)(？〈0.05)川=10/組。
[0114] 如從圖1B、1C和1D可見，投與Miglyol 812中的式1引起直腸溫度在給藥后時(shí)間點(diǎn) 10-79小時(shí)下統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的降低。與功效研究平行運(yùn)作的衛(wèi)星PK組展示出在給藥后24、48 和72小時(shí)下與組合物相關(guān)的平均血漿濃度分別為3.67、1.19和0.52μΜ;這與6mg/kg將維持 血漿濃度高于2 500nM持續(xù)72小時(shí)的預(yù)測一致。
[0115] 為了評(píng)估解熱劑功效的起效，在SIV發(fā)熱模型中在給藥后較早小時(shí)中評(píng)估 Miglyol812中的式1。五組幼齡小母豬(每組N=10)接收氣管內(nèi)投與SIV，接著肌內(nèi)投與各種 劑量(0、4、5、6mg/kg)的式1化合物或Banamine (2 · 2mg/kg，IM)作為陽性對(duì)照。所有給藥組在 SIV投與之后24小時(shí)投與測試劑。在即將投與SIV之前(t = 0小時(shí)）、在劑量投與之前3小時(shí)（t =21小時(shí)）和之后1小時(shí)（t = 25小時(shí)）以及在丨=7、27、29、32和35小時(shí)下獲取直腸溫度讀數(shù) (Miglyol 812中的酮洛芬甲酯（4、5、6mg/kg，頂)與媒劑相比在給藥后初始數(shù)小時(shí)中的作 用）。結(jié)果展示在圖2中。數(shù)據(jù)繪制為最小二乘均值±SEM，且誤差條還表示SEM。在給藥后 0.5、1和3小時(shí)下評(píng)估與不同劑量相關(guān)的血漿濃度的時(shí)程(衛(wèi)星PK組）。
[0116] 如圖2中可見，與媒劑相比，從給藥后1小時(shí)開始且持續(xù)所有檢查的時(shí)間點(diǎn)，所有式 1劑量均顯著退熱。重要的是，與媒劑相比，在t = 35小時(shí)（即，給藥后11小時(shí)）下，所有劑量組 均保持活性，而Banamine并非如此。與和Miglyol 812組合物相關(guān)的PK特征曲線一致，衛(wèi)星 PK組展示出所有劑量的暴露水平在給藥后0.5、1和3小時(shí)下均遠(yuǎn)高于C0X-1和C0X-2體外IC 90 值?？傊琈ig 1 yo 1 812組合物在幼齡小母豬中的解熱劑作用可概述如下：1)以4、5和6mg/ kg，IM給藥的式1從給藥后1小時(shí)開始展示出解熱劑功效;2)6mg/kg，頂經(jīng)給藥后72小時(shí)持續(xù) 展示出解熱劑活性，但遞減劑量展示出解熱劑功效的持續(xù)時(shí)間的相應(yīng)縮短。在圖2中，指 示與媒劑相比具有統(tǒng)計(jì)顯著性的點(diǎn)(P〈〇. 05) <^=10/組。
[0117] 在豬滑膜炎模型中測試Miglyol 812中的酮洛芬甲酯(6.0mg/kg，IM)的起效和持 續(xù)時(shí)間。對(duì)于這一具體研究，各小母豬經(jīng)歷兩次滑膜炎誘發(fā)，一次在第〇天且再次在第3天。 在第0天，t = -1小時(shí)，滑膜炎通過將LPS注射到右膝關(guān)節(jié)中來誘發(fā)，接著在t = 0小時(shí)下給予 式1-Miglyol 812組合物(N=9)或媒劑(N=9)。跛行評(píng)估對(duì)應(yīng)于劑量投與后1-4小時(shí)。在第3 天，同樣在各小母豬中通過將LPS注射到左膝關(guān)節(jié)中來誘發(fā)滑膜炎（即，在t = 71小時(shí)下）。在 第3天的跛行評(píng)估對(duì)應(yīng)于劑量投與后73-76小時(shí)。結(jié)果示出在圖3中。數(shù)據(jù)表示為具有90%置 信界限的最小二乘均值(N = 9/組）。撲〈0.05,與媒劑相比。圖3的圖"A"的誤差條描繪95%置 信界限，且圖3的圖"B"上的誤差條為SEMJiglyol 812中的酮洛芬甲酯（6mg/kg，IM)在第0 天在投與1小時(shí)內(nèi)引起跛行顯著減少。在第3天，跛行仍然與安慰劑比較顯著減少達(dá)到給藥 后74小時(shí)（圖3A)。另外，血漿水平證實(shí)兩種⑶X酶的體外IC 9Q涵蓋這項(xiàng)研究的持續(xù)時(shí)間（圖 3B)〇
[0118] 在肌內(nèi)給予酮洛芬甲酯之后的酮洛芬血漿藥代動(dòng)力學(xué)也在完好的雄性牛中評(píng)估。 組合物包括:組合物1:120mg/mL酮洛芬甲酯于miglyol 812中，無防腐劑;組合物2:160mg/ mL酮洛芬甲酯于miglyol 812中：卡必醇（50: 50，v/v);以及組合物4:160mg/mL酮洛芬甲酯 于miglyol 812中：三醋精(80:20，￥八）。對(duì)于組合物1和2，三只小母牛（220-3001^)各自接 收6mg/kg肌內(nèi)劑量，且對(duì)于組合物4，兩只小母牛（180-240kg)各自接收6mg/kg肌內(nèi)劑量。在 單次肌內(nèi)注射酮洛芬甲酯之后，酮洛芬的平均血漿濃度保持高于酮洛芬的體外IC 9〇以便抑 制牛C0X-1酶持續(xù)120小時(shí)，且保持高于酮洛芬的體外IC9Q以便抑制牛C0X-2酶持續(xù)接近72小 時(shí)。結(jié)果在表8中不出。
[0119] 表8.在單次肌內(nèi)投與酮洛芬甲酯之后在牛中的酮洛芬的平均藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)
[0120]
[0121]表8中的數(shù)據(jù)指示當(dāng)Miglyol 812中的酮洛芬甲酯通過肌內(nèi)注射向牛給藥一次時(shí)， 所述組合物賦予與在豬中觀察到的特性類似的緩釋特性，引起酮洛芬在足以抑制牛C0X酶 持續(xù)3-5天的含量下的延長的血漿暴露。
[0122] 作為比較，表9中呈現(xiàn)給予平均體重為約91kg的牛（牛犢，年齡在6-12個(gè)月之間）的 酮洛芬(3mg/kg; Neoproftn?，100mg/mL)的非持續(xù)可注射組合物的平均酮洛芬藥代動(dòng)力學(xué)。 Singh，R·，等人，Wayamba Journal of Animal Science，6,2014,第820-823頁。
[0123] 表9.在單次肌內(nèi)注射Neoprol'C.之后酮洛芬的平均藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)
[0125]如在表8與9之間可觀察到的，在甲酯前藥(式1)之后的酮洛芬tl/2在牛中在與商 業(yè)可注射產(chǎn)品Neoprofen?相比時(shí)長約14倍(組合物1和2)和長約9.5倍(組合物4)。照此，較 長T1/2將與在單次可注射劑量之后延長的治療性血漿濃度且因此較長的功效持續(xù)時(shí)間相 關(guān)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種獸醫(yī)學(xué)長效組合物，其包含a)酮洛芬酯前藥； b) 至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯； c) 任選地至少一種防腐劑，以及 d) 任選地至少一種額外的獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的獸醫(yī)學(xué)長效組合物，其中所述酮洛芬酯前藥選自由以下各者 組成的群組：甲酯、乙酯、煙酰胺酯、苯甲酯、聚乙二醇酯、丙二醇單酯、丙二醇二酯、丙二醇 單酯和丙二醇二酯的混合物以及其混合物。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的獸醫(yī)學(xué)長效組合物，其中所述酮洛芬酯前藥為酮洛芬甲酯前 藥。4. 根據(jù)權(quán)利要求1到3中任一項(xiàng)所述的獸醫(yī)學(xué)長效組合物，其中所述獸醫(yī)學(xué)上可接受的 甘油三酯選自由以下各者組成的群組:辛酸/癸酸三甘油酯、丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯、辛 酸/癸酸/亞油酸甘油三酯、三乙酸甘油酯、蓖麻油、棉籽油;芝麻油、以及其混合物。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的獸醫(yī)學(xué)長效組合物，其中所述獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯為 辛酸/癸酸三甘油酯6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的獸醫(yī)學(xué)長效組合物，其中所述獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯為 丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯甘油三酯。7. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的獸醫(yī)學(xué)長效組合物，其中所述獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯選 自由以下各者組成的群組:三乙酸甘油酯、蓖麻油、棉籽油以及其混合物。8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的獸醫(yī)學(xué)長效組合物，其中所述獸醫(yī)學(xué)上可接受的辛酸/癸酸三 甘油酯為Miglyol 812。9. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的獸醫(yī)學(xué)長效組合物，其中所述獸醫(yī)學(xué)上可接受的丙二醇二辛 酸酯/二癸酸酯甘油三酯為Miglyol 840。10. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的獸醫(yī)學(xué)長效組合物，其進(jìn)一步包含至少一種防 腐劑。11. 根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的獸醫(yī)學(xué)長效組合物，其進(jìn)一步包含至少一種獸 醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑。12. -種治療動(dòng)物的發(fā)熱、疼痛和/或發(fā)炎的方法，其包含向所述有需要的動(dòng)物投與獸 醫(yī)學(xué)長效組合物，所述獸醫(yī)學(xué)長效組合物包含： a) 酮洛芬酯前藥； b) 至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯； c) 任選地至少一種防腐劑；以及 d) 任選地至少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的賦形劑。13. 根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中所述酮洛芬酯前藥為式1化合物，且其中所述至 少一種獸醫(yī)學(xué)上可接受的甘油三酯選自由以下各者組成的群組:辛酸/癸酸三甘油酯、丙二 醇二辛酸酯/二癸酸酯、辛酸/癸酸/亞油酸甘油三酯、三乙酸甘油酯、蓖麻油、棉籽油；芝麻 油、以及其混合物，且其中所述組合物進(jìn)一步包含至少一種防腐劑。14. 一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的長效組合物的用途，其用于治療有需要的動(dòng)物的發(fā)熱、 疼痛和/或發(fā)炎，通過向所述動(dòng)物通過注射投與所述組合物來進(jìn)行。15. 根據(jù)權(quán)利要求14所述的用途，其中所述注射為肌內(nèi)注射或皮下注射。
【文檔編號(hào)】A61K47/10GK105848638SQ201480068151
【公開日】2016年8月10日
【申請(qǐng)日】2014年12月15日
【發(fā)明人】R·A·艾文, S·X·胡, S·M·馬赫科維奇, B·H·曼寧, S·L·?？死锼固?
【申請(qǐng)人】碩騰服務(wù)有限責(zé)任公司