抑制前列腺癌的藥的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于抑制前列腺癌的藥物。
【背景技術(shù)】
[0002] 癌癥是對(duì)人類生命健康危害最大的疾病之一，每年都有大量的人死于癌癥?？拱?藥物的研發(fā)一直是藥學(xué)研究的熱點(diǎn)?？鼓[瘤藥物中有74%是天然產(chǎn)物或其衍生物，如紫杉 醇及其衍生物就是目前臨床上應(yīng)用效果比較好的抗腫瘤藥物。因此，從天然產(chǎn)物中尋找抗 癌化合物或先導(dǎo)化合物具有重要的意義。
[0003] 前列腺癌是指發(fā)生在前列腺的上皮性惡性腫瘤。2004年WHO《泌尿系統(tǒng)及男性生殖 器官腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)》中前列腺癌病理類型上包括腺癌(腺泡腺癌）、導(dǎo)管腺癌、尿路上 皮癌、鱗狀細(xì)胞癌、腺鱗癌。其中前列腺腺癌占95 %以上，因此，通常我們所說的前列腺癌就 是指前列腺腺癌。2012年我國腫瘤登記地區(qū)前列腺癌發(fā)病率為9.92/10萬，列男性惡性腫瘤 發(fā)病率的第6位。發(fā)病年齡在55歲前處于較低水平，55歲后逐漸升高，發(fā)病率隨著年齡的增 長而增長，高峰年齡是70~80歲。目前，中國專利庫中雖然有少量的天然產(chǎn)物作為抑制前列 腺癌藥用的報(bào)道，但大多藥物組分單一，用藥有效性差，副作用大。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種能夠有效抑制前列腺癌作用的藥物組合物。
[0005] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0006] -種抑制前列腺癌的藥，它由如下式（I)的組分A、如下式（Π )的組分B和組分C組 成，

[0009]按照重量百分含量計(jì)，組分A占總重量的40-50% ;
[0010] 組分B占總重量的30-40%;
[0011] 組分C占總重量的15-25%。
[0012] 作為優(yōu)選，化合物(I)從祖師麻分離獲得，分離步驟包括：
[0013] S01:將祖師麻干燥、粉碎，用75~85%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇 味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃 取物和正丁醇萃取物；
[0014] S02:步驟S01中乙酸乙酯萃取物用10%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用75~85%乙醇洗 脫10個(gè)柱體積，收集75~85%乙醇洗脫液，減壓濃縮得乙醇洗脫物浸膏；
[0015] S03:步驟S02中乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為75:1、45:1、20:1、 12:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得至1」5個(gè)組分；
[0016] S04:步驟S03中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1、12:1和5:1的 二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；
[0017] S05:步驟S04中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為 75 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~12個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合 物⑴。
[0018] 化合物（Π )從貓爪草中提取分離獲得，分離步驟包括：
[0019] a:將貓爪草的干燥塊根粉碎，用75~85%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無 醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯 萃取物和正丁醇萃取物；
[0020] b:步驟a中乙酸乙酯萃取物用大孔樹脂除雜，先用15%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用 75%乙醇洗脫10個(gè)柱體積，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏；
[0021] C:步驟b中75 %乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1、45:1、20:1、 10:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得至1」5個(gè)組分；
[0022] d:步驟c中組分3用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為25:1、20:1和10:1的二 氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；
[0023] e:步驟d中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75 %的 甲醇水溶液等度洗脫，收集8~10個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（Π )。 [0024]作為優(yōu)選，步驟S01和步驟a中，均用80%乙醇熱回流提取，合并提取液。
[0025] 作為優(yōu)選，步驟S02中用10%乙醇洗脫之間，乙酸乙酯萃取物需要采用大孔吸附樹 脂除雜;步驟S02和步驟a中，所述大孔樹脂均為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0026] 另一種抑制前列腺癌的藥，包含有治療有效量的權(quán)利要求1所述的藥和藥學(xué)上可 接受的載體。上述可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時(shí)，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等;用于注射時(shí)，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
[0027] 本發(fā)明化合物用作藥物時(shí)，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。該藥物 組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、對(duì)人和動(dòng)物無毒和 惰性的可藥用載體和/或賦形劑。發(fā)明人通過CCK-8法和集落形成試驗(yàn)已驗(yàn)證上述藥物對(duì)前 列腺癌細(xì)胞株P(guān)C3和DU145的作用，且抑制作用具有濃度--時(shí)間依賴性關(guān)系。因此上述藥 物是晚期前列腺癌治療中的一個(gè)具有潛力的選擇。
【附圖說明】
[0028] 圖1為化合物(I)結(jié)構(gòu)式；
[0029] 圖2為化合物（Π )結(jié)構(gòu)式；
[0030]圖3為化合物（I)理論E⑶值與實(shí)驗(yàn)E⑶值比較；
[0031]圖4為化合物（Π )理論E⑶值與實(shí)驗(yàn)E⑶值比較；
[0032]圖5為不同濃度化合物（I)作用72h后PC3和DU145存活率；
[0033]圖6為10.0 mg/L化合物（I)作用不同時(shí)間后PC3和DU145存活率；
[0034]圖7為不同濃度化合物（Π )作用72h后PC3和DU145存活率；
[0035]圖8為10.011^/1化合物（11)作用不同時(shí)間后?03和01]145存活率。
【具體實(shí)施方式】
[0036]下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0037]實(shí)施例1: 一種抑制前列腺癌的藥，按照重量百分含量計(jì)，它由45%的式（I)的組分 A、35%的下式（Π )的組分B和20%的組分C組成，
[0040] 其中，化合物（m)名稱為:Norzoanthamine;它在中國科學(xué)院大學(xué)，2012年作者為 莊澤陽，名為《天然產(chǎn)物Norzoanthamine的核心骨架ABC環(huán)以及Dalesconol A的合成研究》 博士論文一文中有詳細(xì)提及。
[0041 ]而上述化合物（I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0042] 試劑來源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化 學(xué)試劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0043] 制備方法：（a)將干燥祖師麻（10kg)粉碎，用80 %乙醇熱回流提?。?5L X 3次），合 并提取液，濃縮至無醇味(3L)，依次用石油醚(3LX3次）、乙酸乙酯(3LX3次)和水飽和的正 丁醇(3LX3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(431g)和正丁醇萃取物；（b) 步驟(a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用 75 %乙醇洗脫10個(gè)柱體積，收集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇洗脫物浸膏（157g); (c)步驟(b)中75%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為75:1(8個(gè)柱體積）、45:1 (8個(gè)柱體積）、20:1 (8個(gè)柱體積）、12:1 (8個(gè)柱體積)和1:1 (5個(gè)柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯 度洗脫得到5個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分4(49g)用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為 20:1(8個(gè)柱體積）、12:1(10個(gè)柱體積)和5:1(8個(gè)柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3 個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2(25g)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度 為75 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集10-12個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合 物（I)(35mg)。
[0044] 結(jié)構(gòu)確證:冊(cè)431]\^顯示[]\1+他]+為111/2 511.2308，結(jié)合核磁特征可得分子式為 C27H36〇8，不飽和度為 10。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δΗ(ppm，DMS〇-d6，500MHz): H-1 (2 · 47，t，J = 13.5) ，H-l(1.57，dd，J=13.5,3.5)，H-2(2.54，m)，H-3(5.69，t，J = 5.0)，H-4(3.01，d，J = 5.0)，H-7(1.75，ddd，J=15.5，12.5,2.0)，H-7(1.26，m)，H-8(1.92，m)，H-8(1.54，t，J = 12.5) ，H-9(3.37，dd，J = 9.5,4.5)，H-ll(3.01，d，J = 2.5)，H-12(3.36，d，J = 2.5)，H-16 (0.91，d，J=7.5)，H-17(1.07，s)，H-18(0.93，s)，H-19(0.79，s)，H-20(1·ll，s)，H-2' (8.05，d，J = 7.0)，H-3'（7.44，t，J = 7.0)，H-4'（7.52，t，J = 7.0)，H-5'（7.44，t，J = 7.0)， H-6'（8.05，d，J = 7.0)，9-OH(4.55，d，J = 4.5)，ll-OH(5.36，s)，12-OH(5.34，s)，15-OH (6.45,8);核磁共振碳譜數(shù)據(jù)5。（？？111，0130-(1 6，1251泡）：42.3(〇12，1-〇,35.7(〇1，2-〇， 78.4(CH，3-C)，54.1(CH，4-C)，212.3(C，5-C)，49.0(C，6-C)，31.8(CH2,7-C)，29.2(CH2,8-C)，79.5(CH，9-C)，38.8(C，