專利名稱：治療前列腺癌的中藥組合物、其制備方法和它在制備治療前列腺癌的藥物中的應用的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及一種治療前列腺癌的中藥組合物，該組合物的制備方法，和該組合物在制備治療前列腺癌的藥物中的應用。
(2)背景技術(shù)前列腺癌是男性中因癌癥死亡的主要病因之一，可分為性激素依賴性和非性激素依賴性兩種類型。通常只能用激光從外部照射、放射性物質(zhì)植入或進行冷凍手術(shù)。對有些病人而言，這些治療只是“限制禁錮”疾病幾年。大多數(shù)病人會同時接受化療，它雖然能殺死癌細胞，但同時也嚴重傷害體內(nèi)的正常細胞，其副作用很大。對于性激素依賴性前列腺癌給予性激素進行治療，有效率尚不夠理想；對于非性激素依賴性前列腺癌，目前尚無特效藥進行治療。當病人被診斷為癌癥第三或第四期，或前列腺癌復發(fā)轉(zhuǎn)移時，絕大部分患者只能等待死亡。因此，人們很需要副作用小，治療方便的治療方法，換言之，人們很需要副作用小、療效高的新穎藥物，經(jīng)本發(fā)明者的長期研究發(fā)現(xiàn)，一種中藥即可達到此治療目的。
(3)發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一個目的是提供一種療效好、副作用少的治療前列腺癌的中藥組合物；本發(fā)明的另一個目的是提供所述中藥組合物的制備方法；本發(fā)明的再一個目的是提供所述的中藥組合物在制備治療前列腺癌的藥物中的應用。
本發(fā)明的這些目的是通過下列構(gòu)思實現(xiàn)的一種治療前列腺癌的中藥組合物，其特征在于，它是由下述重量配比的原料制成的藥劑靈芝3-4
黃芩1-2冬凌草 1-2大青葉 1-2菊花0.5-1.5甘草0.5-1.5三七0.5-1.5最佳的原料重量配比為靈芝∶黃芩∶冬凌草∶大青葉∶菊花∶甘草∶三七＝3∶1.5∶1.2∶1.2∶0.9∶0.9∶0.9。
所述黃芩的最佳產(chǎn)地是四川，最佳采集時間是秋季；所述三七的最佳產(chǎn)地是云南，最佳采集時間是秋季(花開前)；所述大青葉的最佳產(chǎn)地是南方，最佳采集時間是秋季，所述菊花的最佳產(chǎn)地是浙江，最佳采集時間是秋季；所述冬凌草的最佳產(chǎn)地是河南，最佳采集時間是五月；靈芝是通過培育/發(fā)酵得到的，可采用上海農(nóng)科所出品的靈芝多糖，所述的靈芝多糖含有所需的活性成分靈芝多肽和靈芝β-D-葡聚糖；甘草的最佳產(chǎn)地是甘肅，最佳采集時間是秋季。
本發(fā)明也涉及所述中藥組合物的制備方法，包括混合提取制備方法或目的物提取制備方法，所述的混合提取制備方法包括1)準備原料將靈芝黃芩、冬凌草、大青葉、菊花、甘草、三七以重量比為3-4∶1-2∶1-2∶1-2∶0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5的比例進行混合，優(yōu)選地用進一步加工成中藥粗粉或中藥流浸膏，所述的加工方法是本技術(shù)領域公知的；所述的混合物分成六等份；2)提取生物堿i)將步驟1)得到的一份中藥混合物用0.1％鹽酸乙醇液滲濾或分次浸濾，得到酸性乙醇提取液；ii)減壓濃縮得到濃縮物；iii)酸性水(pH＝4-5)洗滌，在一個實施方案中，優(yōu)選地使該酸性水液冷凍過夜，過濾，得到殘渣，殘渣用酸性水(pH＝4-5)洗滌，得到酸性水液；iv)向步驟iii)中得到的酸性水液中加氨水沉淀，過濾得到總生物堿沉淀；或者
a)向步驟iii)中得到的酸性水液中加稀酸至pH＝2，用氯仿萃取，得到氯仿層和水層；蒸發(fā)氯仿層中的氯仿，得到弱生物堿；b)所述的水層加堿至pH＝6-7，用氯仿提取，得到水層和氯仿層，蒸發(fā)氯仿層中的氯仿，得到強生物堿；c)上述b)得到的水層用堿調(diào)節(jié)到pH10，然后用丁醇提取，蒸發(fā)丁醇層中的丁醇，得到水溶性的生物堿；合并上述a)、b)和c)得到的生物堿，得到總生物堿。
所述的氯仿、丁醇優(yōu)選地進行回收，供提取步驟循環(huán)使用。所述的生物堿殘渣優(yōu)選地進行低溫干燥，結(jié)晶。
3)提取多糖將步驟1)得到的一份中藥混合物用95-100℃的熱水提取，優(yōu)選的是提取2小時，棄去殘渣，濾液放置12小時后，向上清液中加入濃度50％以上的乙醇，離心得到多糖沉淀；所述的多糖沉淀優(yōu)選地用乙醚精制。
4)提取內(nèi)酯將步驟1)得到的一份中藥混合物用乙醚回流，除去色素，優(yōu)選地通過聚酰胺柱除色素，回收乙醚，得到總內(nèi)酯；5)提取皂甙將步驟1)得到的一份中藥混合物與石油醚回流2-4次，蒸發(fā)石油醚得到脫脂粗粉，用95％乙醇提取，減壓濃縮得到濃縮液；a)濃縮液依次用氯仿、乙醇提取，減壓回收氯仿、乙醇，得到總甙粗品；或者b)濃縮液用丁醇提取，得到丁醇層，減壓回收丁醇，得到總甙粗品。
6)提取香豆精將步驟1)得到的一份中藥混合物加水煎煮1-2小時，濃縮水煎液，加濃鹽酸(30％)，除去雜質(zhì)不溶物，放置澄清液，得到香豆精的粗結(jié)晶；它優(yōu)選地在干燥后用丙酮洗滌，干燥，加水重結(jié)晶，加熱，過濾，脫色，得到水溶液，冷卻后得到淡黃色膏狀產(chǎn)物的香豆精。
7)提取黃酮
a)向步驟1)得到的一份中藥混合物加70-80％乙醇浸漬，減壓回收乙醇液中的乙醇，殘留物用水溶解，過濾，得到水液；用乙酸乙酯提取水液，減壓濃縮乙酸乙酯液，得到總黃酮。
將步驟2)-7)提取得到的生物堿、多糖、內(nèi)酯、皂甙、香豆精、黃酮混合，得到本發(fā)明的治療前列腺癌的中藥組合物。
所述的目的物提取制備方法包括1)提取黃芩甙i)向上述黃芩組分中加入10倍(體積)量水煎煮1-2小時，過濾；ii)用酸將濾液調(diào)到pH1-2，在80-90℃下保持30-40分鐘，離心沉淀；沉淀物加水攪拌均勻，加堿將pH調(diào)節(jié)到中性，再加入3-5倍(體積)量的乙醇，過濾；iii)向濾液中加酸將pH調(diào)節(jié)到1-2，攪拌，在80-90℃下保持30-40分鐘，過濾；iv)所得的沉淀物分別用水、50％乙醇洗滌，再用95％乙醇洗滌或重結(jié)晶，得到黃芩甙。
2)提取三七皂甙i)用濃度在50％以下的甲醇提取三七根部粗粉中的可溶成分，減壓濃縮甲醇提取液，向殘留物中加入3-5倍(體積)量水；ii)水溶液用乙醚提取，水層再用正丁醇萃取，減壓蒸干，經(jīng)硅膠柱層析，用CHCl3-MeOH-H2O比65∶35∶10洗脫得到三七皂甙。
3)提取冬凌草甲素用乙醚提取冬凌草葉干粉，棄去殘渣，回收乙醚液中的乙醚，得到綠褐色殘留物；用甲醇溶解殘留物，脫色得到澄明甲醇液，減壓濃縮后室溫放置過夜，過濾，甲醇母液蒸干，研細；優(yōu)選地再用中性Al2O3吸附，用乙醚洗脫，結(jié)晶。
4)提取靛玉紅大青葉經(jīng)曬干加工制成干燥青黛，分次加入30％濃鹽酸，直至不再產(chǎn)生泡沫，過濾，用水將沉淀洗至中性，干燥；加甲醇回流2-4次，得到甲醇提取液，過濾，回收甲醇液中的甲醇，殘留物用石油醚提取，除去石油醚，殘渣用3％NaOH溶液處理，沉淀用水洗至中性，用乙酸乙酯抽提得到靛玉紅。
5)提取菊花黃酮粉碎菊花，用50-70％乙醇提取，減壓濃縮，加90-95％乙醇，沉淀，過濾，濃縮濾液至無乙醇，殘留物用水溶解，過濾，濾液經(jīng)過大孔吸附樹脂(DM130)，用去離子水洗至柱無色，再用95％乙醇多次洗脫，收集黃酮，結(jié)晶。
6)提取甘草素、異甘草素甘草用3-4倍(體積)量的90-95％乙醇提取，乙醇液經(jīng)石油醚萃取，水層拌入硅膠，用MeOH-H2O為7∶3洗脫，濃縮洗脫液，得到殘留物；向殘留物中加水至完全溶解，向水液中加乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯層用5％Na2CO3水液萃取，用稀酸將碳酸鈉水液調(diào)節(jié)到pH5-6，再用乙酸乙酯萃取，干燥乙酸乙酯液，經(jīng)聚酰胺柱分離，經(jīng)10-90％乙醇水溶液梯度洗脫得到甘草素和異甘草素。
7)使包含靈芝糖肽和靈芝β-D葡聚糖的靈芝多糖(有市售，上海農(nóng)科所出品)與上述步驟1)-6)提取得到的活性成分混合得到本發(fā)明產(chǎn)品。
所述的靈芝糖肽和靈芝β-D葡聚糖也可用下述方法提取得到I.a)靈芝子實體去雜質(zhì)后粉碎，加水8-10倍浸泡24小時，加熱到95-100℃下攪拌8-10小時；b)過濾，優(yōu)選的是離心或板框分離提取液與藥渣，得到濾液和藥渣；c)向藥渣中加水3-4倍進行浸提，優(yōu)選的是在95-100℃下攪拌8小時；重復步驟b)和c)II.a)將靈芝發(fā)酵液(含有菌球)加熱到95-100℃，攪拌4小時；b)過濾，優(yōu)選的是離心或板框分離提取液與菌球；c)向含菌球的藥渣中加水3-4倍(體積)，提取2小時，過濾，分離提取液和藥渣，d)合并I.b)，c)和II.c)中的濾液，濃縮至原體積的1/8-1/10，加入食用酒精(3-5倍)，至酒精達到70％左右，靜置醇析24小時，用離心機分離沉淀物，回收酒精，干燥沉淀物?；蛘?，對靈芝子實體進行索氏提取，用乙酸乙酯提取4小時，抽濾，得到的殘渣再進行索氏提取，用丙酮提取4小時，抽濾，所得的殘渣用90％乙醇浸泡24小時，離心，抽濾；殘渣用0.2摩爾/升磷酸緩沖液(PBS，pH＝7.0)在80℃下提取三次，4小時/次，抽濾，棄去殘渣，緩沖液去除蛋白質(zhì)，離心，將所得的上層液透析，優(yōu)選的是清水透析7天，蒸餾水透析3天；向非透析液中加入大量丙酮，出現(xiàn)沉淀，棄去上清液，沉淀用丙酮洗滌6次，得到所需產(chǎn)品的粉狀固體。
本發(fā)明中藥組合物的制備方法進一步還包括步驟8)a)將所述的步驟1)-7)得到的活性成分粉碎至≤200微米細粉；b)粉碎，干燥無漏籽/海棗籽(PHOENIX DACTYLIFERA L)或酸石榴籽/矮石榴籽(PUNICA GRANAT-UN L)，用8倍體積量的無水乙醇提取，優(yōu)選的是提取三次，合并濾液，減壓濃縮，用乙炔化鉀處理，得到粉末，c)將a)、b)所得的物質(zhì)以100-200∶1的重量比混合。
在本發(fā)明的一個實施方案中，將上述步驟c)得到的混合物裝入膠囊。
一般來說，本發(fā)明的產(chǎn)品能根據(jù)需要配制成多種劑型供使用，優(yōu)選的是配制成膠囊劑型進行口服，所述的賦形劑和配制技術(shù)是藥劑學領域中公知的，本技術(shù)領域的技術(shù)人員可根據(jù)相應的文獻和現(xiàn)有技術(shù)中的工藝配制得到上述制劑。
本發(fā)明的中藥組合物具有下列特性1.抗氧化物作用，消除游離基；2.雙向調(diào)節(jié)紅血球的數(shù)量；3.雙向調(diào)節(jié)白血球的數(shù)量；4.無毒性；5.有顯著抗病毒作用；6.誘致癌細胞死亡；7.調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)。
為表明本發(fā)明中藥組合物對前列腺癌的治療作用，現(xiàn)選取6位病人服用本發(fā)明中藥組合物，其效果見表1
表1六位病人服用本發(fā)明中藥組合物后的效果
注PSA是標志前列腺癌的一個重要指標，PSA高說明患有前列腺癌。
從上述結(jié)果中可見，全部患有前列腺癌的病人在服用本發(fā)明中藥組合物后，其PSA指標下降，即本發(fā)明的中藥組合物對前列腺癌有治療作用。全體病人的生活品質(zhì)獲得改善，食欲增加，精力旺盛。
在另一起臨床試驗中，36例性激素依賴性的前列腺癌服用本發(fā)明的中藥組合物后全部有效。非性激素依賴性的前列腺癌服用本發(fā)明的中藥組合物后有效率達60-70％。此臨床結(jié)果表面，本發(fā)明產(chǎn)品的療效明顯勝過現(xiàn)有技術(shù)領域中常用的藥物。
(4)具體實施方式
下面通過實施例進一步闡述本發(fā)明。
實施例1按下述配比稱取原料(千克)靈芝 3黃芩 1 冬凌草 1大青葉 2菊花 1.5甘草 0.5三七 0.5混合上述原料，研磨成中藥粗粉，將所述的粗粉分成六等份供下列1)-6)個提取步驟使用；1)提取生物堿i)將上述得到的一份中藥粗粉用0.1％鹽酸乙醇(95％)液滲濾或分次浸濾，得到酸性乙醇提取液；ii)減壓濃縮得到濃縮物；iii)酸性水(pH＝4-5)洗滌，在一個實施方案中，優(yōu)選地使該酸性水液冷凍過夜，過濾，得到殘渣，殘渣用酸性水(pH＝4-5)洗滌，得到酸性水液；iv)向步驟iii)中得到的酸性水液中加氨水沉淀，過濾得到總生物堿沉淀；或者a)向步驟iii)中得到的酸性水液中加稀鹽酸至pH＝2，用氯仿萃取，得到氯仿層和水層；蒸發(fā)氯仿層中的氯仿，得到弱生物堿的殘渣；b)所述的水層加堿至pH＝6，用氯仿提取，得到水層和氯仿層，蒸發(fā)氯仿層中的氯仿，得到強生物堿的殘渣；c)上述b)得到的水層用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)到pH10，然后用丁醇提取，蒸發(fā)丁醇層中的丁醇，得到水溶性的生物堿；合并上述a)、b)和c)得到的生物堿，得到總生物堿。
回收上述的氯仿、丁醇，供提取步驟循環(huán)使用。使所述的生物堿殘渣低溫干燥，結(jié)晶。
2)提取多糖用95℃的熱水提取上述得到的中藥粗粉達2小時，棄去殘渣，濾液放置12小時后，向上清液中加入濃度60％的乙醇，離心得到多糖沉淀；所述的多糖沉淀用乙醚精制。
3)提取內(nèi)酯將上述得到的中藥粗粉用乙醚回流，通過聚酰胺柱除色素，回收乙醚，得到總內(nèi)酯；4)提取皂甙將上述得到的中藥粗粉用石油醚回流，蒸發(fā)石油醚得到脫脂粗粉，用95％乙醇提取，減壓濃縮得到濃縮液；a)濃縮液依次用氯仿、乙醇提取，減壓回收氯仿、乙醇，得到皂甙粗品；或者b)濃縮液用丁醇提取，得到丁醇層，減壓回收丁醇，得到皂甙粗品。
5)提取香豆精將上述得到的中藥粗粉加水煎煮1小時，向濃縮水煎液中加濃鹽酸(30％)，除去雜質(zhì)不溶物，放置澄清液，得到香豆精的粗結(jié)晶；干燥后用丙酮洗滌該結(jié)晶，干燥，加水重結(jié)晶，加熱，過濾，脫色，得到水溶液，冷卻后得到淡黃色膏狀產(chǎn)物的香豆精。
6)提取黃酮a)向上述得到的一份中藥粗粉中加70％乙醇浸漬，減壓回收乙醇液中的乙醇，殘留物用水溶解，過濾，得到水液；用乙酸乙酯提取水液，減壓濃縮乙酸乙酯液，得到總黃酮。
將步驟1)-6)提取得到的生物堿、多糖、內(nèi)酯、皂甙、香豆精和黃酮混合，得到本發(fā)明的治療前列腺癌的中藥組合物。
實施例21)提取黃芩甙i)向2千克黃芩中加入10倍(體積)量水煎煮1小時，過濾；ii)用酸將濾液調(diào)到pH2，在80℃下保持30分鐘，離心沉淀；沉淀物加水攪拌均勻，加堿將pH調(diào)節(jié)到中性，再加入5倍(體積)量的乙醇，過濾；iii)向濾液中加鹽酸，將pH調(diào)節(jié)到2，攪拌，在80℃下保持30分鐘，過濾；iv)所得的沉淀物分別用水、50％乙醇洗滌，再用95％乙醇洗滌或重結(jié)晶，得到黃芩甙。
2)提取三七皂甙i)用40％的甲醇提取1.5千克三七根部粗粉中的可溶成分，減壓濃縮甲醇提取液，向殘留物中加入5倍(體積)量水；ii)水溶液用乙醚提取，水層再用正丁醇萃取，減壓蒸干，經(jīng)硅膠柱層析，用CHCl3-MeOH-H2O比65∶35∶10洗脫得到三七皂甙。
3)提取冬凌草甲素用乙醚提取2千克冬凌草葉干粉，棄去殘渣，回收乙醚液中的乙醚，得到綠褐色殘留物；甲醇溶解殘留物，脫色得到澄明甲醇液，減壓濃縮后室溫放置過夜，過濾，甲醇母液蒸干，研細；再用中性Al2O3吸附，用乙醚洗脫，結(jié)晶。
4)提取靛玉紅1.5千克大青葉經(jīng)曬干加工制成干燥青黛，分次加入30％濃鹽酸，直至不再產(chǎn)生泡沫，過濾，用水將沉淀洗至中性，干燥；加甲醇回流2-4次，得到甲醇提取液，過濾，回收甲醇液中的甲醇，殘留物用石油醚提取，除去石油醚，殘渣用3％NaOH溶液處理，沉淀用水洗至中性，用乙酸乙酯抽提得到靛玉紅。
5)提取菊花黃酮粉碎1.5千克菊花，用50％乙醇提取，減壓濃縮，加乙醇，沉淀，過濾，濃縮濾液至無乙醇，殘留物用水溶解，過濾，濾液經(jīng)過DM 130大孔吸附樹脂，用去離子水洗至柱無色，再用95％乙醇多次洗脫，收集黃酮，結(jié)晶。
6)提取甘草素、異甘草素1.5千克甘草用3倍(體積)量的95％乙醇提取，乙醇液經(jīng)石油醚萃取，水層經(jīng)硅膠柱洗脫，用MeOH-H2O為7∶3洗脫，濃縮洗脫液，得到殘留物；向殘留物中加水至完全溶解，向水液中加乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯層用5％Na2CO3水液萃取，用稀鹽酸將碳酸鈉水液調(diào)節(jié)到pH5-6，再用乙酸乙酯萃取，干燥乙酸乙酯液，經(jīng)60目聚酰胺柱分離，10-90％的乙醇水溶液梯度洗脫得到甘草素和異甘草素。
7)I.a)靈芝子實體去雜質(zhì)后粉碎，加水8倍浸泡24小時，加熱到95℃下攪拌8小時；b)離心分離提取液與藥渣，得到濾液和藥渣；c)向藥渣中加水3倍進行浸提，在95℃下攪拌8小時；重復步驟b)和c)，II.a)將靈芝發(fā)酵液(含有菌球)加熱到95℃，攪拌4小時；b離心分離提取液與菌球；c)向含菌球的藥渣中加水3倍(體積)，提取2小時，過濾，分離提取液和藥渣，d)合并I.b)，c)和II.c)中的濾液，濃縮至原體積的1/8，加入食用酒精(3-5倍)，至酒精達到70％左右，靜置醇析24小時，用離心機分離沉淀物，回收酒精，干燥沉淀物。
將上述步驟1)-7)提取得到的活性成分混合得到本發(fā)明中藥組合物(1)。
將中藥組合物(1)粉碎至≤200微米細粉(2)；粉碎，干燥無漏籽/海棗籽(PHOENIX DACTYLIFERA L)，用8倍體積量的無水乙醇提取，優(yōu)選的是提取三次，合并濾液，減壓濃縮，用乙炔化鉀處理，得到粉末(3)，將細粉(2)和粉末(3)以100-200∶1的重量比混合，然后裝入膠囊，得到本發(fā)明的中藥組合物的膠囊。
實施例31)提取黃芩甙i)向1.5千克黃芩中加入10倍(體積)量水煎煮1小時，過濾；ii)用稀鹽酸將濾液調(diào)到pH2，在80℃下保持30分鐘，離心沉淀；沉淀物加水攪拌均勻，加堿將pH調(diào)節(jié)到中性，再加入3倍(體積)量的乙醇，過濾；iii)向濾液中加鹽酸，將pH調(diào)節(jié)到2，攪拌，在80℃下保持30分鐘，過濾；iv)所得的沉淀物分別用水、50％乙醇洗滌，再用95％乙醇洗滌或重結(jié)晶，得到黃芩甙。
2)提取三七皂甙i)用40％的甲醇提取0.9千克三七根部粗粉中的可溶成分，減壓濃縮甲醇提取液，向殘留物中加入5倍(體積)量水；ii)水溶液用乙醚提取，水層再用正丁醇萃取，減壓蒸干，經(jīng)硅膠柱層析，用CHCl3-MeOH-H2O比65∶35∶10洗脫得到三七皂甙。
3)提取冬凌草甲素用乙醚提取1.2千克冬凌草葉干粉，棄去殘渣，回收乙醚液中的乙醚，得到綠褐色殘留物；甲醇溶解殘留物，脫色得到澄明甲醇液，減壓濃縮后室溫放置過夜，過濾，甲醇母液蒸干，研細；再用中性Al2O3吸附，用乙醚洗脫，結(jié)晶。
4)提取靛玉紅1.2千克大青葉經(jīng)曬干加工制成干燥青黛，分次加入30％濃鹽酸，直至不再產(chǎn)生泡沫，過濾，用水將沉淀洗至中性，干燥；加甲醇回流1小時，得到甲醇提取液，過濾，回收甲醇液中的甲醇，殘留物用石油醚提取，除去石油醚，殘渣用3％NaOH溶液處理，沉淀用水洗至中性，用乙酸乙酯抽提得到靛玉紅。
5)提取菊花黃酮粉碎0.9千克菊花，用50％乙醇提取，減壓濃縮，加70％乙醇，沉淀，過濾，濃縮濾液至無乙醇，殘留物用水溶解，過濾，濾液經(jīng)過DM130大孔吸附樹脂，用去離子水洗至柱無色，再用95％乙醇多次洗脫，收集黃酮，結(jié)晶。
6)提取甘草素、異甘草素0.9千克甘草用4倍(體積)量的95％乙醇提取，乙醇液經(jīng)石油醚萃取，水層拌入硅膠，用MeOH-H2O為7∶3洗脫，濃縮洗脫液，得到殘留物；向殘留物中加水至完全溶解，向水液中加乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯層用5％Na2CO3水液萃取，用稀酸將碳酸鈉水液調(diào)節(jié)到pH5-6，再用乙酸乙酯萃取，干燥乙酸乙酯液，經(jīng)聚酰胺柱分離，10-90％乙醇水溶液梯度洗脫得到甘草素和異甘草素。
7)從上海農(nóng)科所購得靈芝多糖，其用量相當于靈芝原料量3千克，所述的使包含靈芝糖肽和靈芝β-D葡聚糖的靈芝多糖與上述步驟1)-6)提取得到的活性成分混合，將該混合物粉碎成細粉，裝入膠囊供使用。
權(quán)利要求
1.一種治療前列腺癌的中藥組合物，其特征在于，它是由下述重量配比的原料制成的靈芝3-4黃芩1-2冬凌草 1-2大青葉 1-2菊花0.5-1.5甘草0.5-1.5三七0.5-1.5
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其中各原料的重量配比是靈芝∶黃芩∶冬凌草∶大青葉∶菊花∶甘草∶三七＝3∶1.5∶1.2∶1.2∶0.9∶0.9∶0.9
3.如權(quán)利要求1所述的中藥組合物的制備方法，其特征在于，它包括混合提取制備方法或目的物提取制備方法。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其中所述的混合提取制備方法包括1)準備原料將靈芝、黃芩、冬凌草、大青葉、菊花、甘草、三七以重量比為3-4∶1-2∶1-2∶1-2∶0.5-1.5∶0.5-1.5∶0.5-1.5的比例進行粉碎混合，將所述的混合物分成六等份；2)提取生物堿i)將步驟1)得到的一份中藥混合物用0.1％鹽酸乙醇液滲濾或分次浸濾，得到酸性乙醇提取液；ii)減壓濃縮得到濃縮物；iii)酸性水(pH＝4-5)洗滌，過濾，得到殘渣，殘渣用酸性水(pH＝4-5)洗滌，得到酸性水液；iv)向步驟iii)中得到的酸性水液中加氨水沉淀，過濾得到總生物堿沉淀；或者a)向步驟iii)中得到的酸性水液中加稀酸至pH＝2，用氯仿萃取，得到氯仿層和水層；蒸發(fā)氯仿層中的氯仿，得到弱生物堿；b)所述的水層加堿至pH＝6-7，用氯仿提取，得到水層和氯仿層，蒸發(fā)氯仿層中的氯仿，得到強生物堿；c)上述b)得到的水層用堿調(diào)節(jié)到pH10，然后用丁醇提取，蒸發(fā)丁醇層中的丁醇，得到水溶性的生物堿；d)合并上述a)、b)和c)得到的生物堿，得到總生物堿；3)提取多糖將步驟1)得到的一份中藥混合物用95-100℃的熱水提取，棄去殘渣，濾液放置12小時后，向上清液中加入濃度50％以上的乙醇，離心得到多糖沉淀；4)提取內(nèi)酯將步驟1)得到的一份中藥混合物用乙醚回流，除去色素，回收乙醚，得到總內(nèi)酯；5)提取皂甙將步驟1)得到的一份中藥混合物用石油醚回流，蒸發(fā)石油醚得到脫脂粗粉，用90-95％乙醇提取，減壓濃縮得到濃縮液；a)濃縮液依次用氯仿、乙醇提取，減壓回收氯仿、乙醇，得到總甙粗品；或者b)濃縮液用丁醇提取，減壓回收丁醇，得到皂甙粗品；6)提取香豆精將步驟1)得到的一份中藥混合物加水煎煮1-2小時，濃縮水煎液，加濃鹽酸，除去雜質(zhì)不溶物，放置澄清液，得到香豆精的粗結(jié)晶；7)提取黃酮向步驟1)得到的一份中藥混合物加70-80％乙醇浸漬，減壓回收乙醇液中的乙醇，殘留物用水溶解，過濾，得到水液；用乙酸乙酯提取水液，減壓濃縮乙酸乙酯液，得到總黃酮；將步驟2)-7)提取得到的生物堿、多糖、內(nèi)酯、皂甙、香豆精、黃酮混合，得到所述的中藥組合物。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其中所述的目的物提取制備方法包括1)提取黃芩甙i)向上述黃芩組分中加入10-15倍(體積)量水煎煮1-2小時，過濾；ii)用酸將濾液調(diào)到pH1-2，在80-90℃下保持30-40分鐘，離心沉淀；沉淀物加水攪拌均勻，加堿將pH調(diào)節(jié)到中性，再加入3-5倍(體積)量的乙醇，過濾；iii)向濾液中加酸將pH調(diào)節(jié)到1-2，攪拌，在80-90℃下保持30-40分鐘，過濾；iv)所得的沉淀物用分別用水、50％乙醇洗滌，再用95％乙醇洗滌或重結(jié)晶，得到黃芩甙；2)提取三七皂甙i)用濃度在50％以下的甲醇提取三七根部粗粉中的可溶成分，減壓濃縮甲醇提取液，向殘留物中加入3-5倍(體積)量水；ii)水溶液用乙醚提取，水層再用正丁醇萃取，減壓蒸干，經(jīng)硅膠柱層析，用CHCl3-MeOH-H2O比65∶35∶10洗脫得到三七皂甙；3)提取冬凌草甲素用乙醚提取冬凌草葉干粉，棄去殘渣，回收乙醚液中的乙醚，得到綠褐色殘留物；用甲醇溶解殘留物，脫色得到澄明甲醇液，減壓濃縮后室溫放置過夜，過濾，甲醇母液蒸干，研細；用乙醚洗脫，結(jié)晶；4)提取靛玉紅大青葉經(jīng)曬干加工制成干燥青黛，分次加入30％濃鹽酸，直至不再產(chǎn)生泡沫，過濾，用水將沉淀洗至中性，干燥；加甲醇回流2-4次，得到甲醇提取液，過濾，回收甲醇液中的甲醇，殘留物用石油醚提取，除去石油醚，殘渣用3％NaOH溶液處理，沉淀用水洗至中性，用乙酸乙酯抽提得到靛玉紅；5)提取菊花黃酮粉碎菊花，用50-70％乙醇提取，減壓濃縮，加90-95％乙醇，沉淀，過濾，濃縮濾液至無乙醇，殘留物用水溶解，過濾，濾液經(jīng)過大孔吸附樹脂，用去離子水洗至柱無色，再用95％乙醇多次洗脫，收集黃酮，結(jié)晶；6)提取甘草素、異甘草素甘草用3-4倍(體積)量的90-95％乙醇提取，乙醇液經(jīng)石油醚萃取，水層拌入硅膠，用MeOH-H2O 7∶3洗脫，濃縮洗脫液，得到殘留物；向殘留物中加水至完全溶解，向水溶液中加乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯層用5％Na2CO3水液萃取，用稀酸將碳酸鈉水液調(diào)節(jié)到pH5-6，再用乙酸乙酯萃取，干燥乙酸乙酯液，經(jīng)聚酰胺柱分離，用10-90％乙醇水溶液梯度洗脫得到甘草素和異甘草素；7)使包含靈芝糖肽和靈芝β-D葡聚糖的靈芝多糖與上述步驟1)-6)提取得到的活性成分混合得到所述的中藥組合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，它還包括步驟8)a)將所述的步驟1)-7)得到的活性成分粉碎至≤200微米細粉；b)粉碎，干燥無漏籽/海棗籽或酸石榴籽/矮石榴籽，用8倍體積量的無水乙醇提取，減壓濃縮，用乙炔化鉀處理，得到粉末，c)將a)、b)所得的物質(zhì)以100-200∶1的重量比混合。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，它還包括步驟d)將c)中得到的混合物裝入膠囊。
8.如權(quán)利要求1所述的中藥組合物在制備治療前列腺癌的藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種中藥組合物，它是以靈芝、黃芩、冬凌草、大青葉、菊花、甘草和三七為原料制成的。其制備方法包括混合提取和目的物提取，以多糖、內(nèi)酯、生物堿、黃酮、香豆精和皂甙，或以靈芝糖肽、黃芩甙、冬凌草甲素、靛玉紅、菊花黃酮、甘草素、異甘草素和三七皂甙為提取的有效成分。該中藥組合物能有效地治療前列腺癌，具有副作用小，有效率高的特點。
文檔編號A61P13/00GK1478538SQ0213665
公開日2004年3月3日 申請日期2002年8月26日 優(yōu)先權(quán)日2002年8月26日
發(fā)明者楊億泓 申請人:上海中耀生物科技有限公司