),6.90-7.31(m,9H), 7.38(d，lH)，7.55-7.58(m，2H)，8.15(t，lH)，8.31(d，lH);
[0274] [M+扣+ = 482.2，
[0275] [M+Na]" = 504.1.
[0276] 實施例10
[0277] (s)-1-((S)-2-氨基-3-苯基丙酷基)-N-((S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙基川比咯 燒-2-甲酯胺
[027引
[0279] 制備標題化合物，其為2-[(2S)-2-{[(2S)-1-[(2S)-2-氨鐵基-3-苯基丙酷基]化 咯燒-2-基]甲酯氨基}-2-苯基乙基]化晚-1-鐵二氯化物
[0280] 步驟 A
[0%1 ] (S)-1-氧代-3-苯基-1-( (S)-2-( (S)-1-苯基-2-(R比晚-2-基）乙基氨基甲酯基)R比 咯燒-1 -基)丙-2-基氨基甲酸叔下醋
[0282]
[0巧3]將Boc-Phe-〇H( 180mg,0.68mmol)溶于無水DMF(4mL)。添加 HATU(271mg,0.71mmol) 和DI陽A(0.39血，2.24mmol)并在d攬拌混合物30分鐘。隨后，將(2S)-2-{[(lS)-1-苯基-2- 川比晚-1-鐵-2-基）乙基]氨基甲酯基}化咯燒-1-鐵二氯化物(250mg，0.68mmol)添加至溶液 并在d攬拌混合物18小時。添加水并用化OAc 3x萃取混合物。用鹽水洗涂有機相，經(jīng)化2S化 干燥，過濾并減壓濃縮。在Si〇2柱上純化產(chǎn)物（用梯度(0 %Me0H/50 %化OAc/50 %庚燒一 0 % MeOH/100%化OAc/0%庚燒一 15%Me0H/85%化OAc/0%庚燒）洗脫），隨后在C-18柱上純化 (用MeOH和水的梯度(0-100 %MeOH)洗脫），得到170mg(46 % )的標題化合物。
[0284] NMR(300MHz,CDCb): ppm 1.44(s,9H),1.73-1.91(m,3H),2.10-2.19(m, IH), 3.10-3.40(m，3H)，3.45-3.61(m，2H)，4.27-4.35(m，lH)，4.50-4.56(m，lH)，4.60-4.69(m, IH)，5，17-5.41(m，3H)，6.93-7.03(m，2H)，7.06-7.32(m，9H),7.47-7.56(m，lH),7.82(d, lH)，8.48(d，lH).
[0285] 步驟 B
[0286] 2-( (S)-2-( (S)-1-( (S)-2-氨鐵基-3-苯基丙酷基）R比咯燒-2-甲酯氨基)-2-苯基 乙基川比晚鐵二氯化物
[0287]
[0288] 將(S)-1-氧代-3-苯基-1-( (S)-2-( (S)-1-苯基-2-(R比晚-2-基）乙基氨基甲酯基） 化咯燒-1-基）丙-2-基氨基甲酸叔下醋（170mg，0.31mmol)溶于lMHCl在Et20中的溶液 (12.5mL, 12.53mmol)中。在的攬拌反應混合物18小時。在化2〇中研磨產(chǎn)物。在布氏漏斗上通 過過濾回收固體，用Et2〇洗涂并在真空下干燥。將所述固體溶于水并冷凍干燥得到150mg (93%)的標題化合物。
[0289] 1h 醒R(300MHz，D2〇):卵m 1.39-1.48(m，lH),1.58-1.65(m，2H),1.92-1.99(m, lH),2.66-2.74(m,lH),2.95-3.10(m,2H),3.29-3.45(m,3H),4.15-4.27(m,2H),5.09(t, lH)，6.97-7.17(m，10H)，7.59-7.64(m，2H)，8.18(t，lH)，8.35(d，lH);
[0290] [M+扣+ = 443.3，
[0291] [M+Na]" = 465.2.
[0巧2] 實施例11
[0293] (s)-1-((S)-2-氨基-4-甲基戊酷基)-N-((S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙基川比咯 燒-2-甲酯胺
[0294]
[0巧日]制備標題化合物，其為2-[(2S)-2-{[(2S)-1-[(2S)-2-氨鐵基-4-甲基戊酷基]化 咯燒-2-基]甲酯氨基}-2-苯基乙基]化晚-1-鐵二氯化物。
[0296] 步驟 A
[0297] (s)-4-甲基-1-氧代-1-((S)-2-((S)-1-苯基-2-川比晚-2-基）乙基氨基甲酯基川比 咯燒-1-基)戊-2-基氨基甲酸叔下醋
[029引
[0巧9] 將N-(叔下氧基幾基）亮氨酸（157mg，0.68mmo 1)溶于無水DMF (4mL)。添加 HATU (271111旨，0.71111111〇1)和01陽4(0.39血，2.24111111〇1)并在的攬拌混合物30分鐘。隨后，添加(25)- 2-{[(lS)-1-苯基-2-(化晚-1-鐵-2-基）乙基]氨基甲酯基}化咯燒-1-鐵二氯化物（250mg, 0.68mmol)至溶液并在d攬拌混合物18小時。添加水并用化OAc 3x萃取混合物。用鹽水洗涂 有機相，經(jīng)化2S〇4干燥，過濾并減壓濃縮。在Si化柱上純化產(chǎn)物（用梯度（0 %Me0H/50 % 化OAc/50 % 庚燒一0 %MeOH/100 % 化OAc/0 % 庚燒一 15 % MeOH/85 % 化OAc/0 % 庚燒)洗脫）， 隨后在C-18柱上純化(用MeOH和水的梯度(0-100%Me0H)洗脫），得到200mg(58%)的標題化 合物。
[0300] ^ NMR(300MHz,CDCb):ppm 0.91(d,3H),0.98(d,3H),1.34-1.52(m,IH),1.41(s, 9H)，1.70-1.84(m,2H)，1.85-1.96(m,3H)，2.11-2.18(m，lH),3.07-3.27(m，2H),3.47-3.56 (m，lH)，3.61-3.71(m，lH)，4.43-4.56(m，2H)，5.14-5.18(m，lH)，5,26-5.：M(m，lH)，6.98 (d，J=7.7Hz，lH)，7.08-7.25(m，5H)，7.52(t，lH)，7.83(d，lH)，8.48(d，lH).
[0301] 步驟 B
[0302] 2-((S)-2-((S)-1-((S)-2-氨鐵基-4-甲基戊酷基）化咯燒-2-甲酯氨基)-2-苯基 乙基川比晚鐵二氯化物
[0303]
[0304] 將(s)-4-甲基-1-氧代-1-((S)-2-((S)-1-苯基-2-川比晚-2-基）乙基氨基甲酯基） 化咯燒-1-基）戊-2-基氨基甲酸叔下醋（200mg，0.39mmol)溶于1M HC1在Et2〇中的溶液 (15.7mL, 15.7mmol)中。在的攬拌反應混合物18小時。在化2〇中研磨產(chǎn)物。在布氏漏斗上通 過過濾回收固體，用化2〇洗涂并在真空下干燥。將固體溶于水并冷凍干燥得到130mg(69%) 的標題化合物。
[030引 1h 匪R(300MHz,D20):ppm 0.72(d,6H),1.31-1.49(m，4H),1.65-1.74(m，2H), 1.93-2.02(m,lH),3.23-3.49(m,4H),3.99-4.04(m,lH),4.16-4.21(m,lH),5.07(t,lH), 7.08-7.20(m,5H),7.63-7.67(m,2H),8.22(td,IH),8.37(dd,IH)；
[0306] [M+扣+ = 409.2，
[0307] [M+Na]" = 431.2.
[030引實施例12
[0309] 2-[ (2S)-2-{ [ (2S)-1-[ (2S)-2-氨鐵基-5-{[氨鐵基(亞氨鐵基）甲基]氨基}戊酷 基]-化咯燒-2-基]甲酯氨基}-2-苯基乙基]化晚-1-鐵四氯化物
[0310]
[ow] 步驟A
[0312] n-[(1Z)-{[(4S)-4-{[(叔下氧基)幾基]氨基}-5-氧代-5-[(2S)-2-{[(lS)-1-苯 基-2-(化晚-2-基）乙基]氨基甲酯基}化咯燒-1-基]戊基]氨基}({[(叔下氧基)幾基]亞氨 基})甲基]氨基甲酸叔下醋
[0313]
[0314] 將Boc_Arg(Boc )2-〇H(644mg, 1.36mmol)溶于無水DMF(7mL)。添加 HATU(542mg, 1.43111111〇1)和01?64(0.781111^，4.48111111〇1)并在刊攬拌混合物30分鐘。隨后，添加（25)-2- {[ (1S)-1-苯基-2-(R比晚-1-鐵-2-基）乙基]氨基甲酯基} R比咯燒-1-鐵二氯化物（500mg, 1.36mmol)至溶液并在d攬拌18小時。添加水并用化OAc 3x萃取混合物。用鹽水洗涂有機 相，經(jīng)化2S化干燥，過濾并減壓濃縮。在Si化柱上純化（用梯度(0 %Me0H/50 %化OAc/50 %庚 燒一 0%Me0H/100% 化 OAc/0% 庚燒一 10%Me0H/90%Et0Ac/0% 庚燒)洗脫），隨后在 C-18 柱 上純化(用MeOH和水的梯度(0-100 %MeOH)洗脫），獲得200mg(20 % )的標題化合物。
[0；31 引 1h NMR(300MHz，CDCl3):ppm 1.43(s,9H)，1.46(s,9H)，1.51(s,9H), 1.57-1.76(m, 4H),1.86-1.99(m,3H),2.12-2.25(m,lH),3.11(dd,lH),3.23-3.30(m,lH),3.58-3.95(m, 4H)，4.42(t,，1H),4.56(d，lH),5,31-5.38(m，2H)，6.98(d,IH),7.17-7.33(m，5H),7.54(t, lH)，7.93(d，lH)，8.56(d，lH).
[0；316]步驟 B
[0317] 2-[(2S)-2-{[(2S)-1-[(2S)-2-氨鐵基-5-{[氨鐵基(亞氨鐵基）甲基]氨基}戊酷 基]化咯燒-2-基]甲酯氨基}-2-苯基乙基]化晚-1-鐵四氯化物
[031 引
[0319] 將 n-[(iz)-{[(4S)-4-{[(叔下氧基)幾基]氨基}-5-氧代-5-[(2S)-2-{[(lS)-1- 苯基-2-(化晚-2-基）乙基]氨基甲酯基}化咯燒-1 -基]戊基]氨基}({[(叔下氧基)幾基]亞 氨基})甲基]氨基甲酸叔下醋（200mg，0.27mmol)溶于1M HC1在Et2〇中的溶液（5.3mL， 10.64mmol)中。在的攬拌反應混合物18小時。在化2〇中研磨產(chǎn)物。在布氏漏斗上通過過濾回 收固體，用化2〇洗涂并在真空下干燥。將所述固體溶于水并冷凍干燥得到140mg(88%)的標 題化合物。
[0320] 1h 醒R(300MHz，D2〇):ppm 1.31-1.57(m，3H),1.66-1.78(m，4H),2.00-2.10(m, lH),2.99(t,2H),3.28-3.40(m,4H),4.16(t,lH),4.26(t,lH),5.09(t,lH),7.10-7.13(m, 2H)，7.16-7.21(m，3H)，7.67-7.71(m，2H)，8.27(t，IH)，8.40(d，IH);
[0321] [M+扣+ = 452.2.
[0322] 生物活性
[0323] 本文所述的前藥預期口服給予至患有抑郁癥或疼痛的受試者。
[0324] 實施例13
[0325] 該實施例闡述了不同的（S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙胺的前藥，其中R1是Ci-6燒 基C(0)0(Ci-6烷氧基），其可用于實現(xiàn)轉(zhuǎn)化至（S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙胺的不同速率 (即慢的或快的）W探明適當?shù)腜K分布。因此，改變R1W產(chǎn)生不同的前藥導致(S)-1-苯基-2- (化晚-2-基）乙胺的不同藥代動力學分布。此外，該實施例表明當將前藥轉(zhuǎn)化成游離堿時， 口服暴露中不存在預期損失。其中R1是Ci-6烷基C(0)0(Ci-6烷氧基)的前藥向（S)-1-苯基-2- 川比晚-2-基）乙胺的轉(zhuǎn)化預期經(jīng)由如下發(fā)生:最初的官能團如醋的酶水解，隨后向（S)-1-苯 基-2-(化晚-2-基)乙胺的自發(fā)轉(zhuǎn)化。參與的酶預期是數(shù)種非特異性、高容量的醋酶，其可通 過如下顯示:使用非選擇性醋酶抑制劑抑制轉(zhuǎn)化，而使用選擇性抑制劑不抑制轉(zhuǎn)化。運種醋 酶預期分布于人的整個機體。人腸液化IF)、人肝S9組分和人全血已用于檢查（S)-1-苯基- 2-(化晚-2-基）乙胺前藥的藥代動力學特性W及在不同機體隔室中（S)-1-苯基-2-(化晚- 2-基）乙胺的形成速率和形成程度。由（S)-1-苯基-2-"比晚-2-基）乙胺的不同前藥形成 (S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙胺的速率在全部測試測定中顯著不同，如表1所示。
[0326] 表 1
[0327]
[0328] 表1中顯示的體外結果表明（S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙胺的不同藥代動力學血 漿分布可通過使用不同的（s)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙胺前藥來實現(xiàn)。因此，特定前藥的 選擇將允許實現(xiàn)不同的（S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙胺的藥代動力學分布，也就是說，可 將不同的前藥用于實現(xiàn)向（S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙胺的慢或快的轉(zhuǎn)化。使用的人腸液 化IF)、人肝臟和人血液測定W生成表1顯示的結果，其已在Malmborg J&Ploeger BA,.J Pharmacol Toxicol Methods(2013)Ma}f-Jun 67(3)203-13進行了描述，其通過引入的方式 并入本申請。
[03巧]實施例14
[0330]該實施例表明可使用其中R1是
的不同的（S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙胺 的前藥W實現(xiàn)轉(zhuǎn)化成(s)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙胺的不同速率（即慢或快)來探明適當 的PK分布。因此，改變R1W產(chǎn)生不同的前藥導致(S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙胺的不同藥 代動力學分布。此外，該實施例表明當將前藥轉(zhuǎn)化為游離堿時在口服暴露中不存在預期損 失。
[0331] 其中R1天
的式（I)化合物的前藥向（S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙胺的 轉(zhuǎn)化預期經(jīng)由在脯氨酸C-末端處的酶水解發(fā)生，從而釋放二膚和(s)-1-苯基-2-(化晚-2- 基）乙胺。參與的酶預期為二膚基膚酶IV(DPPIV)，其可通過用該酶的選擇性抑制劑抑制轉(zhuǎn) 化來顯示。DPPIV預期分布于人的整個機體。人腸液化IF)、人肝臟S9組分和人全血已用于檢 查(S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙胺前藥的藥代動力學特性W及不同機體隔室中（S)-1-苯 基-2-(化晚-2-基）乙胺的形成速率和形成程度?；疌O-2細胞已用于評估(S)-1-苯基-2-川比 晚-2-基）乙胺的前藥的滲透性和吸收潛力。由不同的（S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙胺前藥 形成（S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙胺的速率在測試測定中有所不同，特別是在人血液中， 如表2所示。由（S)-1-苯基-2-(化晚-2-基）乙胺的不同前藥展示的不同滲透性表明（S)-1- 苯基-2-(化晚-2-基)乙胺的前藥的全身暴露將取決于所選的前藥而不同。