治療和預(yù)防癌癥藥物抗性的方法
【專利說(shuō)明】治療和預(yù)防癌癥藥物抗性的方法
[0001] 對(duì)相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用
[0002] 本申請(qǐng)要求2013年3月6日提交的美國(guó)專利申請(qǐng)No. 61/773,720的優(yōu)先權(quán)，通過(guò) 提述將其完整收錄。 發(fā)明領(lǐng)域
[0003] 本文中提供使用FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑治療病理疾患（諸如癌癥）的組合療法。
[0004] 發(fā)明背景
[0005] 相對(duì)快速獲得對(duì)癌癥藥物的抗性仍然是成功癌癥療法的一項(xiàng)關(guān)鍵障礙。闡明此類 藥物抗性的分子基礎(chǔ)的巨大努力已揭示了多種機(jī)制，包括藥物外流、靶物的藥物結(jié)合缺陷 突變體的獲得、備選存活途徑的卷入、后生改變。用EGFR酪氨酸激酶抑制劑治療包含活化 性EGFR突變的NSCLC患者導(dǎo)致對(duì)療法的抗腫瘤應(yīng)答，然而患者最終由于獲得藥物抗性而在 治療的情況下進(jìn)展。已知的抗性機(jī)制包括EGFR基因中的繼發(fā)突變（EGFR??)或MET基因 擴(kuò)增，然而在約40-45%的案例中根本的抗性機(jī)制仍然有待闡明。需要新的治療方法來(lái)成功 解決癌癥細(xì)胞群體內(nèi)的異質(zhì)性和癌細(xì)胞對(duì)藥物治療的抗性的出現(xiàn)。
[0006] 發(fā)明概述
[0007] 本文中提供使用FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和EGFR拮抗劑的組合療法。
[0008] 特別地，本文中提供在個(gè)體中治療癌癥的方法，其包括對(duì)該個(gè)體伴隨施用（a)FGFR 信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和（b)EGFR拮抗劑。在一些實(shí)施方案中，所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和 所述EGFR拮抗劑各自的量有效延長(zhǎng)癌癥敏感性的時(shí)段和/或延遲癌癥形成對(duì)所述EGFR拮 抗劑的抗性。在一些實(shí)施方案中，所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和所述EGFR拮抗劑各自的 量有效提高包含EGFR拮抗劑的癌癥治療的功效。例如，在一些實(shí)施方案中，與包括在沒(méi)有 所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑的情況下（在所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑缺失下）施用有效 量的所述EGFR拮抗劑的標(biāo)準(zhǔn)治療相比，所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和所述EGFR拮抗劑各 自的量有效提高功效。在一些實(shí)施方案中，與包括在沒(méi)有所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑的情 況下（在所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑缺失下）施用有效量的所述EGFR拮抗劑的標(biāo)準(zhǔn)治療 相比，所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和所述EGFR拮抗劑各自的量有效提高響應(yīng)（例如完全 響應(yīng)）。在一些實(shí)施方案中，所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和所述EGFR拮抗劑各自的量有效 提高和/或恢復(fù)癌癥對(duì)所述EGFR拮抗劑的敏感性。
[0009] 本文中還提供在個(gè)體中治療對(duì)EGFR拮抗劑治療有抗性的癌細(xì)胞的方法，其包括 對(duì)該個(gè)體施用有效量的FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和有效量的所述EGFR拮抗劑。另外，本文 中提供在個(gè)體中治療對(duì)EGFR拮抗劑有抗性的癌癥的方法，其包括對(duì)該個(gè)體施用有效量的 FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和有效量的所述EGFR拮抗劑。
[0010] 本文中提供提高和/或恢復(fù)對(duì)EGFR拮抗劑的敏感性的方法，其包括對(duì)該個(gè)體施用 有效量的FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和有效量的所述EGFR拮抗劑。
[0011] 本文中還提供在個(gè)體中提高包含EGFR拮抗劑的癌癥治療的功效的方法，其包括 對(duì)該個(gè)體伴隨施用（a)有效量的FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和（b)有效量的所述EGFR拮抗劑。
[0012] 本文中提供在個(gè)體中治療癌癥的方法，其包括對(duì)該個(gè)體伴隨施用（a)有效量的 FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和（b)有效量的EGFR拮抗劑，其中所述癌癥治療具有與包含在沒(méi)有 所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑的情況下（在所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑缺失下）施用有效 量的所述EGFR詰抗劑的標(biāo)準(zhǔn)治療相比升高的功效。
[0013] 另外，本文中提供在個(gè)體中延遲和/或阻止癌癥形成對(duì)EGFR拮抗劑的抗性，其包 括對(duì)該個(gè)體伴隨施用（a)有效量的FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和（b)有效量的所述EGFR。
[0014] 本文中提供治療形成對(duì)EGFR拮抗劑的抗性的可能性升高的具有癌癥的個(gè)體的方 法，其包括對(duì)該個(gè)體伴隨施用（a)有效量的FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和（b)有效量的所述 EGFR拮抗劑。
[0015] 本文中進(jìn)一步提供在具有癌癥的個(gè)體中提高對(duì)EGFR拮抗劑的敏感性的方法，其 包括對(duì)該個(gè)體伴隨施用（a)有效量的FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和（b)有效量的所述EGFR拮 抗劑。
[0016] 本文中還提供在具有癌癥的個(gè)體中延長(zhǎng)EGFR拮抗劑敏感性的時(shí)段的方法，其包 括對(duì)該個(gè)體伴隨施用（a)有效量的FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和（b)有效量的所述EGFR拮抗 劑。
[0017] 本文中提供在具有癌癥的個(gè)體中延長(zhǎng)對(duì)EGFR拮抗劑的響應(yīng)的持續(xù)時(shí)間的方法， 其包括對(duì)該個(gè)體伴隨施用（a)有效量的FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑和（b)有效量的所述EGFR 拮抗劑。
[0018] 在任何所述方法的一些實(shí)施方案中，所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑是抗體抑制劑、 小分子抑制劑、結(jié)合多肽抑制劑、和/或多核苷酸拮抗劑。在一些實(shí)施方案中，所述FGFR信 號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑是結(jié)合多肽抑制劑。在一些實(shí)施方案中，所述結(jié)合多肽抑制劑包含與Fc域 連接的FGFR胞外域的一個(gè)區(qū)域（例如與免疫球蛋白鉸鏈和Fc域連接的FGFR胞外域的一 個(gè)區(qū)域）。在一些實(shí)施方案中，所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑是FGFR1信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑。 在一些實(shí)施方案中，所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑是FGFR2信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑。在一些實(shí)施 方案中，所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑是FGFR3信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑。在一些實(shí)施方案中，所 述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑是FGFR4信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑。在一些實(shí)施方案中，所述FGFR信 號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑是小分子。在一些實(shí)施方案中，所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑是抗體。
[0019] 在一些實(shí)施方案中，所述FGFR1信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑結(jié)合和/或抑制FGFRlb、 FGFRlc、FGF1、FGF2、FGF3、FGF4、FGF5、FGF6、和 FGF10 中一項(xiàng)或多項(xiàng)。在一些實(shí)施方案 中，所述小分子是^[2-[[4-(二乙基氨基）丁基]氨基]-6-(3,5-二甲氧基苯基）吡啶 并[2, 3_d]啼啶-7-基]-Ν'-(1，1-二甲基乙基）-脲（N-[2-[[4_(diethylamino)butyl] amino]-6-(3, 5-dimethoxyphenyl)pyrido[2, 3-d]pyrimidin-7-yl]-N' -(1, 1-dimethyle thyl)-urea)或其藥學(xué)可接受鹽。在一些實(shí)施方案中，所述小分子是BGJ398 (Novartis)、 AZD4547 (AstraZeneca)、和 / 或 FF284 (Chugai/Debiopharm (Debio 1347))。在一些實(shí)施 方案中，所述FGFR1信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑是抗FGF2抗體。在一些實(shí)施方案中，所述FGFR1信 號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑是抗FGFR1抗體。在一些實(shí)施方案中，所述FGFR1信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑是抗 FGFRl-IIIb抗體。在一些實(shí)施方案中，所述FGFR1信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑是抗FGFRl-IIIc抗 體。在一些實(shí)施方案中，所述FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗劑是能夠結(jié)合超過(guò)一種FGFR多肽的抗 FGFR抗體。
[0020] 在任何所述方法的一些實(shí)施方案中，所述EGFR拮抗劑是N-(3-乙炔基苯 基）-6, 7_ 二（2_ 甲氧基乙氧基）_4_ 喹唑啉胺（N-(3-ethynylphenyl) _6, 7_bis (2-methoxy ethoxy)-4_quinazolinamine)和/或其藥學(xué)可接受鹽。在一些實(shí)施方案中，所述EGFR詰抗 劑是N-(3-乙炔基苯基）-6, 7-二（2-甲氧基乙氧基）-4-喹唑啉胺。在任何所述方法的一 些實(shí)施方案中，所述EGFR拮抗劑是N- (3-氯-4-氟-苯基）-7-甲氧基-6- (3-嗎啉-4-基 丙氧基）喹唑啉 _4_ 胺（N-(3-chlor〇-4-fluor〇-phenyl)-7-methoxy-6-(3-morpholin-4- ylpropoxy)quinazolin-4-amine)和/或其藥學(xué)可接受鹽。在一些實(shí)施方案中，所述EGFR 拮抗劑是N- (3-氯-4-氟-苯基）-7-甲氧基-6- (3-嗎啉-4-基丙氧基）喹唑啉-4-胺。
[0021] 在任何所述方法的一些實(shí)施方案中，所述癌癥是肺癌。在一些實(shí)施方案中，所述肺 癌是NSCLC。在一些實(shí)施方案中，所述癌癥已經(jīng)經(jīng)歷上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)變。
[0022] 附圖簡(jiǎn)述
[0023] 圖1A-C。|HCC4006-ER細(xì)胞對(duì)厄洛替尼有抗性。A，在所示濃度的厄洛替尼存在 下72小時(shí)時(shí)測(cè)定親本（HCC4006)和厄洛替尼選擇的HCC4006細(xì)胞（HCC4006-ER)的細(xì)胞存 活力。B，將HCC4006和HCC4006-ER細(xì)胞用或不用ΙμΜ厄洛替尼處理72小時(shí)，用碘化丙 啶（ΡΙ)和膜聯(lián)蛋白V染色，并通過(guò)FACS分析以定量膜聯(lián)蛋白陽(yáng)性細(xì)胞。C，將HCC4006和 HCC4006-ER細(xì)胞用所示濃度的厄洛替尼處理8小時(shí)，并用所示抗體對(duì)細(xì)胞裂解物進(jìn)行免疫 印跡。
[0024] 圖2A-D。| HCC4006-ER細(xì)胞展現(xiàn)EMT的特征。A，將親本和厄洛替尼抗性HCC4006 細(xì)胞裂解物對(duì)上皮相關(guān)蛋白質(zhì)和間充質(zhì)相關(guān)蛋白質(zhì)（分別是E-鈣粘著蛋白和波形蛋 白）進(jìn)行免疫印跡。B，在抓傷測(cè)定法中測(cè)量HCC4006和HCC4006-ER細(xì)胞的迀移率，并通 過(guò)Imaginon Incucyte監(jiān)測(cè)傷口閉合。C，在1%或10%胎牛血清$133)存在下在透孔 (transwell)測(cè)定法中測(cè)量細(xì)胞侵入。D，在所示時(shí)間點(diǎn)測(cè)量HCC4006和HCC4006-ER細(xì)胞的 細(xì)胞存活力。
[0025] 圖3A-C。|在HCC4006-ER細(xì)胞中AXL抑制不能克服對(duì)厄洛替尼的抗性。A，在所 示濃度的AXL激酶抑制劑R428和/或厄洛替尼存在下培養(yǎng)72小時(shí)后，測(cè)量親本和厄洛替 尼抗性HCC4006細(xì)胞的細(xì)胞存活力。B，在siRNA介導(dǎo)的AXL敲低或?qū)φ誷iRNA之后，在所 示濃度的厄洛替尼存在下測(cè)量厄洛替尼抗性HCC4006-ER細(xì)胞的細(xì)胞存活力。C，免疫印跡 對(duì)照，演示靶向AXL的siRNA對(duì)AXL表達(dá)水平的影響。
[0026] 圖4A-C。| FGFR1和特定FGF配體在HCC4006-ER細(xì)胞中顯著升高。A，與HCC4006 細(xì)胞相比，HCC4006-ER中FGF家族受體和配體的基因表達(dá)的倍數(shù)變化（log)，基于微陣列序 型分析。B，qRT-PCR對(duì)選定基因的確認(rèn)。C，F(xiàn)GF2蛋白質(zhì)水平在HCC4006-ER細(xì)胞的上清液 和裂解物中均升高，通過(guò)ELISA檢測(cè)。
[0027] 圖5A-C。|在HCC4006-ER細(xì)胞中對(duì)配體依賴性FGFR信號(hào)傳導(dǎo)的特異性抑制 克服對(duì)厄洛替尼的抗性。A，在所示濃度的厄洛替尼或TO173074存在下72小時(shí)時(shí)測(cè)定 HCC4006 (左）和HCC4006-ER (右）細(xì)胞中的細(xì)胞存活力。B，將HCC4006和HCC4006-ER細(xì) 胞用所示藥物處理2小時(shí)，并用所示抗體對(duì)細(xì)胞裂解物進(jìn)行免疫印跡。用外源FGF2+肝素 刺激細(xì)胞充當(dāng)FGFR激活的陽(yáng)性對(duì)照。C，在重組可溶性FGFR-Fc (用于中和FGF配體）和對(duì) 照存在下處理72小時(shí)后HCC4006和HCC4006-ER細(xì)胞中的細(xì)胞存活力。
[0028] 圖6。|在HCC4006細(xì)胞中FGFR抑制阻抑形成對(duì)厄洛替尼的抗性。用厄洛替尼 (1 yM)、PD173074(0. 5 μΜ)或組合連續(xù)處理細(xì)胞（lxio5個(gè)），之后固定并用結(jié)晶紫染色。未 處理的和HH73074處理的培養(yǎng)物在4周時(shí)染色，而厄洛替尼和組合處理的培養(yǎng)物在6周時(shí) 染色。
[0029] 圖7A-B。|FGFR而非AXL抑制使另一種與EMT有關(guān)的厄洛替尼抗性模型HCC827-ER 對(duì)EGFR抑制的存活效應(yīng)部分再敏化。A，在所示濃度的厄洛替尼、R428、或TO173074存在下 72小時(shí)時(shí)測(cè)定HCC827-ER細(xì)胞中的細(xì)胞存活力。B，在重組可溶性FGFR-Fc (用于中和FGF 配體）和對(duì)照存在下處理72小時(shí)后HCC827和HCC827-ER細(xì)胞中的細(xì)胞存活力。
[0030] 圖8。|在厄洛替尼存在或缺失下在HCC4006-ER細(xì)胞中對(duì)一組小分子抑制劑的篩 選揭示了 FGFR抑制劑HH73074能逆轉(zhuǎn)對(duì)厄洛替尼的抗性。顯示了生長(zhǎng)抑制劑IC5。。
[0031] 發(fā)明詳述
[0032] I.定義
[0033] 感興趣多肽的"拮抗劑"（可互換稱作"抑制劑"）是干擾感興趣多肽的活化或功 能，例如部分或完全阻斷、抑制、或中和由感興趣多肽介導(dǎo)的生物學(xué)活性的藥劑。例如，多 肽X的拮抗劑可以指部分或完全阻斷、抑制、或中和由多肽X介導(dǎo)的生物學(xué)活性的任何分 子。抑制劑的例子包括抗體；配體抗體；小分子詰抗劑；反義和抑制性RNA (例如shRNA)分 子。優(yōu)選地，抑制劑是結(jié)合感興趣多肽的抗體或小分子。在一個(gè)特定實(shí)施方案中，抑制劑具 有約1，000ηΜ或更少的對(duì)感興趣多肽的結(jié)合親和力（解離常數(shù)）。在另一個(gè)實(shí)施方案中， 抑制劑具有約1〇〇ηΜ或更少的對(duì)感興趣多肽的結(jié)合親和力。在另一個(gè)實(shí)施方案中，抑制劑 具有約50nM或更少的對(duì)感興趣多肽的結(jié)合親和力。在一個(gè)特定實(shí)施方案中，抑制劑共價(jià)結(jié) 合至感興趣多肽。在一個(gè)特定實(shí)施方案中，抑制劑以1，〇〇〇ηΜ或更少的IC5。抑制感興趣多 肽的信號(hào)傳導(dǎo)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，抑制劑以500nM或更少的IC5。抑制感興趣多肽的信 號(hào)傳導(dǎo)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，抑制劑以50nM或更少的IC5。抑制感興趣多肽的信號(hào)傳導(dǎo)。 在某些實(shí)施方案中，拮抗劑將感興趣多肽的表達(dá)水平或生物學(xué)活性降低或抑制至少10%、 20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或更多。在一些實(shí)施方案中，感興趣多肽是 FGFR(例如 FGFR1、FGFR2、FGFR3、和 / 或 FGFR4)或 FGF(例如 FGF1-23)。在一些實(shí)施方案 中，感興趣多肽是EGFR。
[0034] 除非另有說(shuō)明，如本文中使用的，術(shù)語(yǔ)"多肽"指來(lái)自任何脊椎動(dòng)物來(lái)源（包括哺 乳類動(dòng)物，諸如靈長(zhǎng)類動(dòng)物（例如人）和嚙齒類動(dòng)物（例如小鼠和大鼠））的任何天然感興 趣多肽。該術(shù)語(yǔ)涵蓋"全長(zhǎng)"、未加工多肽以及源自細(xì)胞中加工的任何形式的多肽。該術(shù)語(yǔ) 還涵蓋多肽的天然發(fā)生變體，例如剪接變體或等位變體。
[0035] "多核苷酸"或"核酸"在本文中可互換使用，指任何長(zhǎng)度的核苷酸聚合物，包括DNA 和RNA。核苷酸可以是脫氧核糖核苷酸、核糖核苷酸、經(jīng)過(guò)修飾的核苷酸或堿基、和/或其 類似物，或者是可通過(guò)DNA或RNA聚合酶，或者通過(guò)合成反應(yīng)摻入聚合物中的任何底物。多 核苷酸可包含經(jīng)過(guò)修飾的核苷酸，諸如甲基化核苷酸及其類似物。若存在的話，對(duì)核苷酸結(jié) 構(gòu)的修飾可以在裝配聚合物之前或之后進(jìn)行。核苷酸序列可以由非核苷酸組分中斷。多核 苷酸可以在合成后進(jìn)一步修飾，諸如通過(guò)與標(biāo)記物綴合。其它類型的修飾包括例如"帽"， 將一個(gè)或多個(gè)天然存在的核苷酸用類似物替代，核苷酸間修飾諸如例如具有不帶電荷連接 (例如甲基膦酸酯、磷酸三酯、磷酰胺酯（phosphoamidate)、氨基甲酸酯等）和具有帶電荷 連接（例如硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯等）的修飾，含有懸垂模塊（pendant moiety)諸如 例如蛋白質(zhì)（例如核酸酶、毒素、抗體、信號(hào)肽、聚L-賴氨酸等）的修飾，具有嵌入劑（例如 吖啶、補(bǔ)骨脂素等）的修飾，含有螯合劑（例如金屬、放射性金屬、硼、氧化性金屬等）的修 飾，含有燒化劑的修飾，具有經(jīng)修飾連接（例如α端基異構(gòu)核酸（anomeric nucleic acid) 等）的修飾，以及未修飾形式的多核苷酸。另外，通常存在于糖類中的任何羥基基團(tuán)可以 用例如膦酸（phosphonate)基團(tuán)、磷酸（phosphate)基團(tuán)替換，用標(biāo)準(zhǔn)保護(hù)基團(tuán)保護(hù)，或活 化以制備與別的核苷酸的別的連接，或者可綴合至固體或半固體支持物。可磷酸化或者用 胺或1-20個(gè)碳原子的有機(jī)加帽基團(tuán)模塊取代5'和3'末端0H。其它羥基也可衍生成標(biāo) 準(zhǔn)保護(hù)基團(tuán)。多核苷酸也可含有本領(lǐng)域普遍知道的核糖或脫氧核糖糖類的類似物形式，包 括例如2' -氧-甲基_、2' -氧-烯丙基_、2' -氟-或2' -疊氮-核糖，碳環(huán)糖類似物， 端基異構(gòu)糖，差向異構(gòu)糖諸如阿拉伯糖、木糖或來(lái)蘇糖、吡喃糖、呋喃糖、景天庚酮糖，無(wú) 環(huán)類似物及脫堿基核苷類似物諸如甲基核糖核苷?？捎脗溥x連接基團(tuán)替換一個(gè)或多個(gè)磷酸 二酯連接。這些備選連接基團(tuán)包括但不限于以下實(shí)施方案，其中磷酸酯用P(〇)S( "硫代酸 酯"（thioate))、P ⑶ S ( "二硫代酸酯"（dithioate))、（0) NR2 ( "酰胺酯"（amidate))、P (0) 尺、卩(0)01?'、0)或012("甲縮醛"&〇^&〇6七&1))替代，其中1?或1?'各自獨(dú)立為!1或者取代 或未取代的烴基（1-20個(gè)C)，任選含有醚（-0-)連接、芳基、烯基、環(huán)烴基、環(huán)烯基或芳烴基 (araldyl)。并非多核苷酸中的所有連接都必需是相同的。前述描述適用于本文中提及的 所有多核苷酸，包括RNA和DNA。
[0036] 術(shù)語(yǔ)"小分子"指具有約2000道爾頓或更小，優(yōu)選約500道爾頓或更小的分子量 的任何分子。
[0037] "分離的"抗體指已經(jīng)與其天然環(huán)境的組分分開(kāi)的抗體。在一些實(shí)施方案中，抗體 純化至大于95%或99%的純度，如通過(guò)例如電泳（例如SDS-PAGE、等電聚焦（IEF)、毛細(xì)管 電泳）或?qū)游觯ɡ珉x子交換或反相HPLC)測(cè)定的。關(guān)于用于評(píng)估抗體純度的方法的綜述， 見(jiàn)例如 Flatman 等人，J. Chromatogr. B 848 :79-87 (2007) 〇
[0038] 本文中的術(shù)語(yǔ)"抗體"以最廣義使用，并且涵蓋各種抗體結(jié)構(gòu)，包括但不限于單克 隆抗體、多克隆抗體、多特異性抗體（例如雙特異性抗體）、和抗體片段，只要它們展現(xiàn)出期 望的抗原結(jié)合活性。
[0039] 術(shù)語(yǔ)"抗感興趣多肽抗體"和"結(jié)合感興趣多肽的抗體"指能夠以足夠親和力結(jié)合 感興趣多肽，使得該抗體可作為診斷劑和/或治療劑用于靶向感興趣多肽的抗體。在一個(gè) 實(shí)施方案中，根據(jù)例如通過(guò)放射免疫測(cè)定法（RIA)的測(cè)量，抗感興趣多肽抗體結(jié)合無(wú)關(guān)的、 非感興趣多肽的蛋白質(zhì)的程度小于該抗體對(duì)感興趣多肽的結(jié)合的約10%。在某些實(shí)施方案 中，結(jié)合感興趣多肽的抗體具有彡1 μ M、彡100nM、彡10nM、彡InM、彡0.1 nM、彡0.0 lnM、或 彡0· OOlnM(例如10 SM或更少、例如10 SM至10 13M、例如10 9M至10 13M)的解離常數(shù)（Kd)。 在某些實(shí)施方案中，抗感興趣多肽抗體結(jié)合在來(lái)自不同物種的感興趣多肽中保守的感興 趣多肽表位。在一些實(shí)施方案中，感興趣多肽是FGFR(例如FGFR1、FGFR2、FGFR3、和/或 FGFR4)和/或FGF (例如FGF1-23)。在一些實(shí)施方案中，感興趣多肽是EGFR。
[0040] "阻斷性"抗體或"拮抗性"抗體是抑制或降低其結(jié)合的抗原的生物學(xué)活性的抗體。 優(yōu)選的阻斷性抗體或拮抗性抗體實(shí)質(zhì)性或完全抑制抗原的生物學(xué)活性。
[0041] "親和力"指分子（例如抗體）的單一結(jié)合位點(diǎn)與其結(jié)合配偶（例如抗原）之間全 部非共價(jià)相互作用總和的強(qiáng)度。除非另有指示，如本文中使用的，"結(jié)合親和力"指反映結(jié) 合對(duì)的成員（例如抗體和抗原）之間1:1相互作用的內(nèi)在結(jié)合親和力。分子X(jué)對(duì)其配偶Y 的親和力通?？梢杂媒怆x常數(shù)（Kd)來(lái)表述。親和力可以通過(guò)本領(lǐng)域知道的常用方法來(lái)測(cè) 量，包括本文中所描述的方法。下文描述了用于測(cè)量結(jié)合親和力的具體的說(shuō)明性和例示性 的實(shí)施方案。
[0042] "抗體片段"指與完整抗體不同的分子，其包含完整抗體中結(jié)合完整抗體結(jié)合的抗 原的部分?？贵w片段的例子包括但不限于？1?&13、？&13'、？&13'-5!^( &13'）2;雙抗體；線性 抗體；單鏈抗體分子（例如scFv);和由抗體片段形成的多特異性抗體。
[0043] 與參照抗體"結(jié)合相同表位的抗體"指在競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定法中將參照抗體對(duì)其抗原的結(jié) 合阻斷50%或更多的抗體，且相反，參照抗體在競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定法中將該抗體對(duì)其抗原的結(jié)合阻 斷50%或更多。
[0044] 術(shù)語(yǔ)"嵌合"抗體指其中的重和/或輕鏈的一部分自特定的來(lái)源或物種衍生，而重 和/或輕鏈的剩余部分自不同來(lái)源或物種衍生的抗體。
[0045] 術(shù)語(yǔ)"全長(zhǎng)抗體"、"完整抗體"、和"全抗體"在本文中可互換使用，指與天然抗體結(jié) 構(gòu)具有基本上類似的結(jié)構(gòu)或者具有含有Fc區(qū)的重鏈的抗體。
[0046] 如本文中使用的，術(shù)語(yǔ)"單克隆抗體"指從一群基本上同質(zhì)的抗體獲得的抗體，即 構(gòu)成群體的各個(gè)抗體是相同的和/或結(jié)合相同表位，除了例如含有天然存在的突變或在單 克隆抗體制備物的生成期間發(fā)生的可能的變體抗體外，此類變體一般以極小量存在。與通 常包含針對(duì)不同決定簇（表位）的不同抗體的多克隆抗體制備物不同，單克隆抗體制備物 的每個(gè)單克隆抗體針對(duì)抗原上的單一決定簇。如此，修飾語(yǔ)"單克隆"指示抗體自一群基本 上同質(zhì)的抗體獲得的特性，而不應(yīng)解釋為要求通過(guò)任何特定方法來(lái)生成抗體。例如，可以 通過(guò)多種技術(shù)來(lái)生成要依照本發(fā)明使用的單克隆抗體，包括但不限于雜交瘤方法、重組DNA 方法、噬菌體展示方法、和利用含有所有或部分人免疫球蛋白基因座的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的方法， 用于生成單克隆抗體的此類方法和其它例示性方法。
[0047] "人抗體"指擁有與由人或人細(xì)胞生成的或利用人抗體全集或其它人抗體編碼序 列自非人來(lái)源衍生的抗體的氨基酸序列對(duì)應(yīng)的氨基酸序列的抗體。人抗體的此定義明確排 除包含非人抗原結(jié)合殘基的人源化抗體。
[0048] "人源化"抗體指包含來(lái)自非人HVR的氨基酸殘基和來(lái)自人FR的氨基酸殘基的嵌 合抗體。在某些實(shí)施方案中，人源化抗體會(huì)包含至少一個(gè)，通常兩個(gè)基本上整個(gè)可變域，其 中所有或基本上所有HVR(例如CDR)對(duì)應(yīng)于非人抗體的那些，且所有或基本上所有FR對(duì)應(yīng) 于人抗體的那些。任選地，人源化抗體可以至少包含自人抗體衍生的抗體恒定區(qū)的一部分。 抗體，例如非人抗體的"人源化形式"指已經(jīng)經(jīng)歷人源化的抗體。
[0049] "免疫綴合物"指與一種或多種異源分子，包括但不限于細(xì)胞毒劑綴合的抗體。
[0050] "個(gè)體響應(yīng)"或"響應(yīng)"可使用指示對(duì)個(gè)體益處的任何終點(diǎn)評(píng)估，包括但不限于：（1) 一定程度地抑制疾病進(jìn)展（例如癌癥進(jìn)展），包括減緩和完全阻滯；（2)縮小腫瘤尺寸；（3) 抑制（即減輕、減緩或完全終止）癌細(xì)胞浸潤(rùn)入臨近周圍器官和/或組織；(4)抑制（即減 輕、減緩或完全終止）轉(zhuǎn)移；（5) -定程度地減輕與疾病或病癥（例如癌癥）有關(guān)的一種或 多種癥狀；(6)無(wú)進(jìn)展存活的長(zhǎng)度延長(zhǎng)；和/或（8)治療后給定時(shí)間點(diǎn)的死亡率降低。
[0051] 術(shù)語(yǔ)"基本上相同"在用于本文時(shí)表示兩個(gè)數(shù)值之間足夠高的相似程度，以致本領(lǐng) 域技術(shù)人員將認(rèn)為在用所述數(shù)值（例如Kd值或表達(dá)）所測(cè)量的生物學(xué)特性背景內(nèi)兩個(gè)數(shù) 值之間的差異具有很小的或沒(méi)有生物學(xué)和/或統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。作為參照/比較值的函數(shù)， 所述兩個(gè)數(shù)值之間的差異例如小于約50 %，小于約40 %，小于約30 %，小于約20 %，和/或 小于約10%。
[0052] 短語(yǔ)"實(shí)質(zhì)性不同"