Cochinchinoid A在制備治療乳腺癌藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及化合物CochinchinoidA的新用途，具體涉及CochinchinoidA在制備 治療乳腺癌藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] Mei-Ling Han等人首次分離純化出化合物CochinchinoidA，并將成果發(fā)表在著 名天然產(chǎn)物雜志 Journal ofNatural Product 上（11 β-HSDlInhibitors from Walsura cochinchinensis，J. Nat. Prod，2013,76,1319-1327)。文中研究了化合物對(duì) 11 β-HSD1 的 抑制活性，cochinchinoid K對(duì)小鼠11 β -HSD1有抑制活性，IC5。值為0. 82 μΜ。
[0003] 目前尚未有該化合物關(guān)于乳腺癌的活性報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種CochinchinoidA的醫(yī)藥用途。
[0005] 上述目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
[0006] CochinchinoidA在制備治療乳腺癌藥物中的應(yīng)用，所述CochinchinoidA化學(xué)結(jié) 構(gòu)式如下，
[0008] 進(jìn)一步地，所述乳腺癌為乳腺癌MCF-7、乳腺癌MDA-MB-231和乳腺癌MDA-MB-453。
【附圖說明】
[0009] 圖1 :不同劑量CochinchinoidA對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖活力的影響；
[0010] 圖2 :不同劑量CochinchinoidA對(duì)乳腺癌細(xì)胞凋亡的影響。
【具體實(shí)施方式】
[0011] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容。
[0012] 實(shí)施例1 :CochinchinoidA的分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0013] Cochinchinoid A的制備方法同文獻(xiàn)報(bào)道的制備方法（11 β-HSDIInhibitors from ffalsura cochinchinensis，J.Nat. Prod.，2013,76,1319-1327) 〇
[0014] 結(jié)構(gòu)確證：無色結(jié)晶，熔點(diǎn)205~207°C，分子式為C36H5Q0 9，不飽和度為12。紅外 光譜的吸收帶表明化合物含有羥基（3433cm1)和羰基（1743和1712cm1)基團(tuán)。核磁共 振氫譜數(shù)據(jù) δΗ(ρρπι，DMS0-d6,600MHz) :Η-1(3· 52, ddd，J = 8· 7,3· 2,2· 4)，Η-2(2· 31，m)， Η-2(2· 01，ddd，J = 16. 3,2· 8,2· 4)，Η-3(5· 07，dd，J = 2· 8,2· 8)，Η-5(2· 35，d，J = 12. 5)， Η-6(4· 20, dd，J = 12. 5,3· 2)，Η-7(5· 68, d，J = 3· 2)，Η-9(2· 86, dd，J = 11. 8,7· 3)， Η-11(1· 79,1. 81，m)，Η-12(1· 61，ddd，J = 13. 2,9· 8,2· 9)，Η-12(2· 44，m)，Η-15(5· 93, s)， Η-18(1· 01，s)，Η-19(0· 99, s)，Η-21(7· 57, dd，J = 1· 7,0· 8)，Η-22(6· 34, dd，J = 1· 7， 0· 8)，Η-23 (7· 45, dd，J = 1· 7,1· 7)，Η-28 (3· 41，brd，J = 7· 6)，Η-28 (3· 52, d，J = 7· 6)， H-29(1.21，s)，H-30(1.34，s)，H-2'（2.30, m)，H-3'（1.41，1.69, m)，H-4'（0.91，t，J = 7· 5)，H-5'（1· 18, d，J = 7· 0)，H-2"（2· 21，m)，H-3"（1· 35,1· 64, m)，H-4"（0· 86, t，J = 7. 4)，H-5"（1. 12, d，J = 7. 0)，1-OH(2. 48, d，J = 8. 7)，17-OH(2. 51，s);核磁共振碳譜數(shù) 據(jù) Sc(ppm，DMS0-d6,600Hz) :71. 64 (CH，1-C)，30.30 (CH2,2-C)，73.31 (CH，3-C)，42.34 (C， 4-C)，40. 75 (CH，5-C)，72. 40 (CH，6-C)，72. 55 (CH，7-C)，46. 48 (C，8-C)，34. 79 (CH，9-C)， 40. 35(C，10-C)，14. 26(CH2,11-C)，21. 64(CH2,12-C)，50. 75(C，13-C)，193. 12(C，14-C)， 121. 04(CH，15-C)，205. 89(C，16-C)，80. 63(C，17-C)，30. 46(CH3,18-C)，15. 74(CH3,19-C)， 122. 82 (C，20-C)，141. 54 (CH，21-C)，109. 76 (CH，22-C)，142. 88 (CH，23-C)，77. 80 (CH2， 28-C)，19. 27(CH3,29-C)，24. 98(CH3,30-C)，175. 00(C，Γ -C)，41. 39(CH，2' -C)，26. 60(CH2， 3'-C)，11. 81(CH3,4'-C)，16. 82(CH3,5'-C)，175. 19(C，1"-C)，41. 60(CH，2"-C)，26. 55(CH2， 3"-C)，12. 00 (CH3,4"-C)，17. 47 (CH3, 5"-C)。結(jié)構(gòu)確證數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致，因此可以確 定本發(fā)明制備的化合物即為文獻(xiàn)報(bào)道的CochinchinoidA。
[0015] 實(shí)施例2 :CochinchinoidA的藥理作用試驗(yàn)
[0016] -、材料和儀器
[0017] DMEM/F12高糖培養(yǎng)液購于北京Hyclone公司。改良型RPMI-1640培養(yǎng)基購于北京 Hyclone公司。標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清購于天津TBD公司。CCK-8細(xì)胞活力檢測試劑購于日本株式會(huì) 社同仁化學(xué)研究所。AnnexinV-FITC/PI凋亡檢測試劑盒購于上海炎彬化工科技有限公司。 JC-1線粒體膜電位探針購于江蘇碧云天生物技術(shù)研究所。二甲基亞礬（DMS0)和磷酸鹽緩 沖溶液（PBS)購于Sigma公司產(chǎn)品。CochinchinoidA自制，HPLC歸一化純度大于98%。
[0018] -70°C低溫冰箱（FormaScientificInc.公司，美國），電子天平（島津AEL-200 型，日本），超凈工作臺(tái)（SW-CJ-IC型，蘇州），恒溫振蕩器（THZ-C型），高壓蒸汽消毒 鍋（YX-400B 型），C02細(xì)胞培養(yǎng)箱（FormaSeries II，Thermalelectroncorp.，美國）， 恒溫水浴鍋（BHW2-I型，國產(chǎn)），倒置相差顯微鏡（CK40型，Olympus，日本），顯微鏡 (BX51型，Olympus，日本），顯微數(shù)碼采集系統(tǒng)（DP71型，Olympus，日本），多功能酶標(biāo)儀 (InfiniteM200型，TECAN，瑞士），臺(tái)式室溫高速離心機(jī)（TGL-16G型，北京），臺(tái)式低溫高 速離心機(jī)（2K15型，sigma公司，美國），BL60電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公 司），LD4-40大容量離心機(jī)（北京京立離心機(jī)有限公司），2K15高溫低速冷凍離心機(jī)（sigma 公司），UV765紫外分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司），激光共聚焦掃描顯微鏡 (MRC-1024 型，Bio-Rad，英國）。
[0019] 二、試驗(yàn)方法
[0020] 1、細(xì)胞株及培養(yǎng)
[0021] 選用乳腺癌MCF-7細(xì)胞（雌激素受體陽性ER+，人類表皮生長因子受體-2陰性 HERZ/neu )、乳腺癌 MDA-MB-231 細(xì)胞（ER，HERZ/neu )和乳腺癌 MDA-MB-453(ER，HERZ/ neu+)細(xì)胞株，三種細(xì)胞株均來自于中國科學(xué)院生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所。MCF-7細(xì)胞 和10^-1^-231細(xì)胞培養(yǎng)于含10%標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清的01^1作12高糖培