型組相比有明顯延長。
[0051]與control組相比，不論是注射或是口服給予抗疲勞藥物混合液，小鼠肝糖原含量均顯著增加，其中，注射給藥中劑量組與對照組差異達顯著性水平(圖2A)，口服給藥大劑量組與對照組差異達顯著水平(圖2B)，具有統(tǒng)計學意義(P < 0.05)，在抗慢性疲勞綜合癥模型實驗中，口服給藥小劑量組與模型組差異達顯著水平(圖2C)，具有統(tǒng)計學意義(P
<0.05) ο
[0052]注射給予抗疲勞藥物混合液后，與control組比較，全血乳酸含量明顯下降，以中劑量和大劑量最為顯著(P < 0.05);與control組相比，口服給予抗疲勞藥物混合液后全血乳酸含量均有所下降，但無統(tǒng)計學意義(P > 0.05)。與model組相比，口服給予抗疲勞藥物混合液后小鼠全血乳酸含量有明顯延長，有統(tǒng)計學顯著意義(P < 0.01)。
[0053]本發(fā)明的抗疲勞藥物混合液各劑量組血漿尿素氮含量較control組相比均有所下降。經(jīng)方差分析注射給藥(圖4A)中劑量組與對照組有高度顯著性，口服給藥(圖4B)大劑量組與對照組有高度顯著性(P < 0.05)，口服給藥抗慢性疲勞綜合癥(圖4C)大劑量組與模型組相比有下降趨勢，但無統(tǒng)計學意義。
[0054]綜合上述實驗結果，本發(fā)明提供的這種抗疲勞藥物能明顯延長小鼠負重游泳時間、提高疲勞小鼠肝糖原儲備、降低疲勞小鼠乳酸和尿素氮含量，提示本發(fā)明具有明顯的抗疲勞作用。
[0055]本發(fā)明提供的抗疲勞藥物所用原藥及輔料、制劑均可由市場購得。
[0056]下面結合實施例，進一步闡述本發(fā)明:
[0057]實施例1
[0058]I材料與方法
[0059]1.1 樣品:
[0060]1.2實驗動物:五月齡中年雄性ICR小鼠；八月齡老年雄性C57小鼠。
[0061]1.3儀器與試劑:游泳箱、鉛絲、全波長酶標儀、恒溫水浴箱、離心機、肝糖原檢測試劑盒(南京建成，貨號A043)、乳酸檢測試劑盒(南京建成，貨號A019-1)、尿素氮試劑盒(南京建成，貨號C013-1)、S0D檢測試劑盒(南京建成，貨號A001-1)、MDA檢測試劑盒(南京建成，貨號A003-1)。
[0062]1.4實驗方法:
[0063]A.第一批:將60只雄性五月齡中年ICR小鼠隨機分為4組，每組15只。小劑量組腹腔注射給藥200mg/kg的藥品，中劑量腹腔注射給藥400mg/kg的藥品，大劑量腹腔注射給藥600mg/kg的藥品。Control組給予同體積的生理鹽水。于每天上午10:00至11:00給藥一次，連續(xù)給藥7天。
[0064]B.第二批:將100只雄性八月齡老年C57小鼠隨機分為4組，每組20只。小劑量組灌胃200mg/kg的藥品，中劑量灌胃400mg/kg的藥品，大劑量灌600mg/kg的藥品。Control組給予同體積的水。于每天上午10:00至11:00給藥一次，連續(xù)給藥7天。
[0065]C.第三批:將80只雄性五月齡中年ICR小鼠隨機分為4組，每組20只。Control組正常環(huán)境下飼養(yǎng)14天，其余三組進行慢性疲勞綜合癥造模:每天上午9:00至11:00進行束縛，每次一小時，每天下午將小鼠放入水深為35cm，水溫為21 ± 1°C的游泳箱內(nèi)強制游泳I小時，連續(xù)造模14天。從第15天開始給藥，小劑量灌胃200mg/kg的藥品，大劑量灌胃600mg/kg的藥品。Control組給予同體積的水。于每天上午10:00至11:00給藥一次，連續(xù)給藥7天。
[0066]1.4.1負重游泳實驗
[0067]末次給予藥物30min后，給小鼠尾部負其體重的4%質(zhì)量的鉛絲。將小鼠放入水深為35cm，水溫為21 土 1°C的游泳箱內(nèi)游泳，直到力竭。力竭的判定標準為小鼠頭部沉入水中1s內(nèi)不浮出水面，記錄力竭時間。
[0068]1.4.2肝糖原測定
[0069]小鼠負重游泳后，休息10分鐘，在摘眼球采血后將小鼠處死。取出肝臟，用生理鹽水漂洗后再用濾紙吸干，精確稱取50mg肝臟。按照試劑盒說明書進行肝臟肝糖原的測定。
[0070]1.4.3全血乳酸測定
[0071]小鼠負重游泳后，休息10分鐘，摘除眼球取血，按照試劑盒說明進行全血乳酸的測定。
[0072]1.4.4血漿指標測定
[0073]小鼠負重游泳后，休息10分鐘，眼球采血，用EDTA鈉鹽抗凝后3500轉離心10分鐘后分離出血漿，按照試劑盒說明書進行血漿尿素氮的測定。
[0074]2 結果
[0075]2.1小鼠負重游泳時間測定
[0076]圖1表示抗疲勞藥物對小鼠負重游泳時間的影響。其中圖1A為第一批腹腔注射實驗結果；圖1B為第二批口服實驗結果，*表示P < 0.05與control組比較；C為第三批口服抗慢性疲勞綜合癥實驗結果。由圖1A可以看出，腹腔注射給予瑪咖(Maca)、北蟲草和西洋參聯(lián)合應用具有延長小鼠負重游泳時間的趨勢，且此趨勢呈劑量依賴性；由圖1B可以看出，與control組相比，口服給予瑪咖(Maca)、北蟲草和西洋參聯(lián)合應用后小鼠負重游泳時間呈現(xiàn)劑量依賴性延長，經(jīng)方差分析，中、大劑量組與control對照組相比有顯著性差異(P < 0.05)。由圖1C可以看出，與control組相比，模型組的小鼠負重游泳時間明顯下降，而口服給予瑪咖(Maca)、北蟲草和西洋參聯(lián)合應用后小鼠負重游泳時間與模型組相比有明顯延長。
[0077]2.2小鼠肝糖原測定
[0078]圖2表示抗疲勞藥物對小鼠肝糖原儲備的影響，其中圖2A為第一批腹腔注射實驗結果，*表示P < 0.05，與control組比較；圖2B為第二批口服實驗結果，*表示p < 0.05，與control組比較；圖2C為第三批口服抗慢性疲勞綜合癥實驗結果，*表示p < 0.05，與model組比較。由圖2可以看出，與control組相比，不論是注射或是口服給予瑪咖(Maca)、北蟲草和西洋參聯(lián)合應用，小鼠肝糖原含量均顯著增加，其中，注射給藥中劑量組與對照組差異達顯著性水平(圖2A)，口服給藥大劑量組與對照組差異達顯著水平(圖2B)，具有統(tǒng)計學意義(P < 0.05)，在抗慢性疲勞綜合癥模型實驗中，口服給藥小劑量組與模型組差異達顯著水平(圖2C)，具有統(tǒng)計學意義(P < 0.05)。
[0079]2.3小鼠全血乳酸測定
[0080]圖3表示抗疲勞藥物對小鼠全血乳酸水平的影響。其中圖3A為第一批腹腔注射實驗結果，*表示P < 0.05，與control組比較；圖3B為第二批口服實驗結果，C為第三批口服抗慢性疲勞綜合癥實驗結果，**表示P < 0.01，與model組比較。由圖3A可以看出，注射給予瑪咖(Maca)、北蟲草和西洋參聯(lián)合應用后，與control組比較，全血乳酸含量明顯下降，以中劑量和大劑量最為顯著(P <0.05);由圖3B可以看出，與control組相比，口服給予瑪咖(Maca)、北蟲草和西洋參聯(lián)合應用后全血乳酸含量均有所下降，但無統(tǒng)計學意義(P >0.05)。由圖3C可以看出，與model組相比，口服給予瑪咖(Maca)、北蟲草和西洋參聯(lián)合應用后小鼠全血乳酸含量有明顯延長，有統(tǒng)計學顯著意義(P < 0.01)。
[0081 ] 2.4小鼠血漿尿素氮含量測定
[0082]圖4表示抗疲勞藥物對小鼠血漿尿素氮水平的影響。其中圖4A為第一批腹腔注射實驗結果，*表示P < 0.05，與control組比較；圖4B為第二批口服實驗結果，*表示p
<0.05，與control組比較；圖4C為第三批口服抗慢性疲勞綜合癥實驗結果。由圖4可以看出，瑪咖(Maca)、北蟲草和西洋參聯(lián)合應用各劑量組血漿尿素氮含量較control組相比均有所下降。經(jīng)方差分析注射給藥(圖4A)中劑量組與對照組有高度顯著性，口服給藥(圖4B)大劑量組與對照組有高度顯著性(P < 0.05)，口服給藥抗慢性疲勞綜合癥(圖4C)大劑量組與模型組相比有下降趨勢，但無統(tǒng)計學意義。
[0083]綜合上述實驗結果，本發(fā)明提供的這種抗疲勞藥物能明顯延長小鼠負重游泳時間、提高疲勞小鼠肝糖原儲備、降低疲勞小鼠乳酸和尿素氮含量，提示本發(fā)明具有明顯的抗疲勞作用。
[0084]這種抗疲勞藥物的抗疲勞綜合癥的治療獲得類似效果。
[0085]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也應視為本發(fā)明的保護范圍。
【主權項】
1.一種抗疲勞藥物，其特征在于:所述抗疲勞藥物，按重量百分比計，包括以下組分: 瑪咖50% ； 北蟲草25% ； 西洋參25%。2.根據(jù)權利要求1所述的一種抗疲勞藥物，其特征在于:所述藥物中還包括藥用輔料。3.根據(jù)權利要求1所述的一種抗疲勞藥物，其特征在于:所述藥物的劑型包括口服液、飲料、片劑、膠囊、噴霧劑或透皮吸收劑。4.根據(jù)權利要求1所述的一種抗疲勞藥物，其特征在于:所述藥物的服用方式為每日I?3次，每次100-1000mg/kg動物體重。5.根據(jù)權利要求3所述的一種抗疲勞藥物，其特征在于:所述藥物的給藥方式為口服或外用。6.一種權利要求1-5任一所述的抗疲勞藥物的制備方法，其特征在于:所述制備方法為:將NADPH瑪咖、北蟲草和西洋參按照重量比例50: 25: 25混合溶于生理鹽水或去離子水中，然后加入藥物輔料組成復合制劑。7.—種權利要求1-5任一所述的抗疲勞藥物的用途，其特征在于:抗疲勞藥物應用于制備抗疲勞保健品或食品。8.根據(jù)權利要求7所述的一種抗疲勞藥物的用途，其特征在于:所述抗疲勞藥物應用于糾正亞健康狀態(tài)或治療慢性疲勞綜合癥；所述糾正亞健康狀態(tài)包括增加肝糖原含量、增加全血乳酸含量或降低血漿尿素氮含量。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種抗疲勞藥物及其制備方法和用途，通過瑪咖(Maca)、北蟲草和西洋參聯(lián)合應用，實驗結果表明，具有延長中年與老年小鼠負重游泳時間，增加肝糖原儲備，減少乳酸、尿素氮含量，具有用量小、安全、可注射、可口服等優(yōu)點，具有較大的保健和臨床應用價值。本發(fā)明提供的這種抗疲勞藥物可應用于制備抗疲勞保健品或食品。
【IPC分類】A61P39/00, A61K36/258, A61K36/31, A23L2/38, A61K36/068
【公開號】CN105213456
【申請?zhí)枴緾N201510763099
【發(fā)明人】范盤生
【申請人】南京路詩瑪生物科技有限公司
【公開日】2016年1月6日
【申請日】2015年11月10日