一種姜黃素膠束滴眼液及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種姜黃素滴眼液，特別涉及一種姜黃素膠束滴眼液及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 我國的糖尿病患病率近幾年快速增長，糖尿病已成為我國重大的公共衛(wèi)生問題。 患者長期的高血糖狀態(tài)導致全身各組織器官發(fā)生病變，引起嚴重的糖尿病相關并發(fā)癥，包 括糖尿病性角膜病變。此外，糖尿病患者在角膜外傷或接受角膜手術時極易出現(xiàn)角膜上皮 愈合延遲甚至不愈，臨床表現(xiàn)為持續(xù)性角膜上皮損失、反復性角膜上皮糜爛、淺層角膜潰瘍 形成、繼發(fā)嚴重角膜感染甚至失明，治療棘手，預后差，患者的經濟和精神負擔嚴重。目前糖 尿病性角膜病變的臨床治療手段有限，因此，研究糖尿病性角膜病變新的治療靶標和有效 防治措施具有重要的臨床意義。
[0003] 糖尿病性角膜神經病變引起的角膜知覺減退為糖尿病周圍神經病變的一部分，研 究表明線粒體產生過多的超氧化物是導致糖尿病所有慢性并發(fā)癥的共同發(fā)病機制。多種研 究發(fā)現(xiàn)，氧化應激在糖尿病的發(fā)生發(fā)展中起著舉足輕重的作用，慢性高血糖誘導氧化應激， 角膜和三叉神經節(jié)氧化還原水平的失衡是糖尿病發(fā)生的重要病理生理學特征。山東省眼科 研究所的研究人員開展了糾正氧化應激水平治療糖尿病性角膜病變的研究，取得了一定的 研究成果，進一步印證了通過著眼于氧化應激治療糖尿病性角膜病變的有效性與可行性。
[0004] 姜黃素（curcumin)是中藥姜黃的主要活性成分，具有抗氧化、抗炎、清除自由基等 廣泛的藥理學活性，在治療糖尿病及其并發(fā)癥方面有著廣闊的應用前景。但是姜黃素親水 性和親脂性均差，吸收差，生物利用度低，且其分子結構不穩(wěn)定，限制了其臨床應用，因此， 很有必要進一步探索既安全，又經濟又有效的眼部治療糖尿病性角膜病變和角膜神經病變 的姜黃素藥物。公開號為104644550A的中國專利公開了一種通過殼聚糖膠束包封姜黃素 制備成滴眼液，具有穩(wěn)定性好、生物利用度高的優(yōu)點。但其也存在一些不足：（1)殼聚糖作 為一種多糖性高分子材料，本身并不能形成膠束，因此需要加入了大量的表面活性劑和助 表面活性劑以幫助形成殼聚糖膠束，而加入大量的表面活性劑和助表面活性劑勢必引起眼 表刺激性和眼局部應用的安全隱患；（2)因殼聚糖本身并不能形成膠束，加入大量的表面 活性劑和助表面活性劑后輔助形成膠束，導致膠束的載藥量低，直接導致滴眼液的主藥姜 黃素濃度低，因此該發(fā)明中主藥姜黃素濃度只有〇. 〇〇5%-〇. 02%，該濃度對糖尿病性角膜病 變的治療基本上是無效的。
[0005] 山東省眼科研究所采用其已申請并獲得授權的發(fā)明專利"一種環(huán)孢素A膠束滴眼 液及其制備方法"（ZL201210529616. 9)技術制備了姜黃素納米膠束滴眼液，在治療效果性 評價研究中，姜黃素納米膠束眼表給藥可部分糾正角膜中的氧化還原失衡，但是因膠束不 能有效靶向進入線粒體，導致治療效果有限。此外，山東省眼科研究所在后續(xù)開發(fā)過程中， 研究發(fā)現(xiàn)單純基于聚乙烯己內酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇共聚物構建的膠束且其水溶 液在貯存過程中，環(huán)孢素A會逐漸從膠束中游離出來，其水溶液在室溫下的有效穩(wěn)定性只 有3個月。

【發(fā)明內容】

[0006] 針對上述問題，本發(fā)明的目的是提供一種姜黃素膠束滴眼液，改善姜黃素分子穩(wěn) 定性，提高滴眼給藥后的藥物吸收率，同時提高滴眼液的貯存穩(wěn)定性。
[0007] 本發(fā)明的另外一個目的是提供上述姜黃素膠束滴眼液的制備方法。
[0008] 本發(fā)明技術構思：將姜黃素制備為滴眼液能有效提高眼局部應用的療效，將滴眼 給藥后的姜黃素進一步有效地送至線粒體，則可進一步增強療效，但如何改善姜黃素的水 溶性，又能保證其分子穩(wěn)定性，提高吸收后線粒體亞細胞器的靶向性，同時還需要提高滴眼 液的貯存穩(wěn)定性是該制劑問題的難點。研究發(fā)現(xiàn)，采用聚乙烯己內酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚 乙二醇共聚物包合姜黃素制備成膠束并采用地喹氯銨修飾膠束，不但能解決姜黃素的水溶 性問題，提高姜黃素分子穩(wěn)定性，以及提高姜黃素膠束滴眼液的貯存穩(wěn)定性，還能進一步改 變藥物的角膜吸收后的分布特性，有效靶向于線粒體，提高姜黃素治療糖尿病性角膜病變 的有效性。
[0009] 本發(fā)明的技術方案：一種姜黃素膠束滴眼液，包括姜黃素為主藥以及防腐劑、等滲 調節(jié)劑，其特征在于還包括聚乙烯己內酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇共聚物為藥物輔料， 地喹氯銨為線粒體靶向修飾劑和穩(wěn)定劑，所述姜黃素主藥和聚乙烯己內酰胺-聚乙酸乙烯 酯-聚乙二醇嵌段共聚物藥物輔料質量比在1:12-1:20之間，所述地喹氯銨和聚乙烯己內 酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇共聚物藥物輔料質量比在1:20-1:40之間。
[0010] 所述聚乙烯己內酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇共聚物中聚乙烯己內酰胺、聚乙 酸乙烯酯、聚乙二醇三者的質量比為57:30:13,共聚物總分子量100000-120000,臨界膠束 濃度為 5. 〇-15mg/L。
[0011] 本發(fā)明的滴眼液的制備方法如下：將姜黃素、地喹氯銨和聚乙烯己內酰胺-聚乙 酸乙烯酯-聚乙二醇溶解到無水乙醇中，通過40°C水浴旋轉真空蒸發(fā)乙醇在容器內部均勻 成膜，再加入蒸餾水以充分洗膜，水浴超聲得膠束溶液，過濾冷凍干燥后得姜黃素膠束的干 粉制劑，再分散溶解于無菌緩沖液中，使得姜黃素最終質量百分濃度為0.5%，并加入防腐 劑、pH調節(jié)劑，等滲調節(jié)劑之后無菌過濾分裝即可。其中防腐劑、pH調節(jié)劑，等滲調節(jié)劑可 以按照已有技術添加。
[0012] 上述姜黃素膠束滴眼液的制備方法，制得的姜黃素膠束粒徑范圍在70~150nm之 間。
[0013] 上述姜黃素膠束滴眼液的制備方法，使用的緩沖液為常用磷酸鹽緩沖液或硼酸鹽 緩沖液，pH值為7. 4。
[0014] 本發(fā)明制備的姜黃素膠束滴眼液，使得姜黃素在水溶液中有良好的溶解性，給藥 濃度可達5mg/ml，且膠束粒徑小，分布范圍均一，藥物穩(wěn)定性良好。該姜黃素滴眼液不但降 低了給藥刺激性、還提高了角膜對藥物的吸收、降低了給藥濃度、延長了藥物作用時間、減 少了給藥次數(shù)、提高了患者的順從性，具有很好的經濟性。
【附圖說明】
[0015] 圖1是實施例1制備的0. 5%姜黃素膠束滴眼液與未用地喹氯銨修飾的0. 5%姜黃 素膠束滴眼液對糖尿病小鼠角膜損傷修復作用對比圖。
[0016] 圖2是對圖1各組小鼠角膜上皮缺損面積定量分析圖。
[0017] 圖3是實施例1制備的0. 5%姜黃素膠束滴眼液與未用地喹氯銨修飾的0. 5%姜黃 素膠束滴眼液細胞毒性實驗結果圖。
[0018] 圖4是實施例1制備的0.5%姜黃素膠束滴眼液與未用地喹氯銨修飾的0.5%姜黃 素膠束滴眼液的穩(wěn)定性實驗結果圖。
【具體實施方式】
[0019] 下面結合附圖并通過具體實施例來進一步詳細說明本發(fā)明。
[0020] 實施例1: 將50mg姜黃素、30mg地喹氯銨和900mg聚乙烯己內酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇 (分子量118000)置于IOOmL圓底燒瓶中，加入IOmL無水乙醇，充分溶解后，40°C水浴旋轉 真空蒸發(fā)無水乙醇，得到藥物和共聚物的均勻分散薄膜，然后加入蒸餾水，充分洗膜，300w 功率水浴超聲lOmin，得膠束溶液。將膠束溶液過0. 22Mm微孔濾膜后，冷凍干燥得膠束粉 末。然后用IOmL硼酸鹽緩沖液分散溶解膠束粉末，加入防腐劑苯扎氯銨、等滲調節(jié)劑氯化 鈉，PH調節(jié)為7. 4,無菌過濾分裝即可。激光粒度儀測得姜黃素膠束平均粒徑為93nm，分散 指數(shù)TOI=O. 067,分散均一性良好。將該姜黃素膠束滴眼劑在室溫條件下保存5個月，姜黃 素從膠束中滲漏量小于10%。
[0021] 實施例2: 將50mg姜黃素、15mg地喹氯銨和600mg聚乙烯己內酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇 (分子量100000)置于IOOmL圓底燒瓶中，加入IOmL無水乙醇，充分溶解后，40°C水浴旋轉 真空蒸發(fā)無水乙醇，得到藥物和共聚物的均勻分散薄膜，然后加入蒸餾水，充分洗膜，300w 功率水浴超聲lOmin，得膠束溶液。將膠束溶液過0. 22Mm微孔濾膜后，冷凍干燥得膠束粉 末。然后用IOmL硼酸鹽緩沖液分散溶解膠束粉末，加入防腐劑苯扎氯銨、等滲調節(jié)劑氯化 鈉，PH調節(jié)為7. 4,無菌過濾分裝即可。激光粒度儀測得姜黃素膠束平均粒徑為81nm，分散 指數(shù)TOI=O. 069,分散均一性良好。將該姜黃素膠束滴眼劑在室溫條件下保存5個月，姜黃 素從膠束中滲漏量小于10%。
[0022] 實施例3: 將50mg姜黃素、50mg地喹氯銨和1000 mg聚乙烯己內酰胺-聚乙酸乙烯酯-聚乙二醇 (分子量120000)置于IOOmL圓底燒瓶中，加入IOmL無水乙醇，充分溶解后，40°C水浴旋轉 真空蒸發(fā)無水乙醇，得到藥物和共聚物的均勻分散薄膜，然后加入蒸餾水，充分洗膜，300w 功率水浴超聲lOmin