, 18), 7.07 (2H, d, 64 Hz, H-l, 15), 7.14 (2H, dd, ^8.28, 1.64 Hz, H-5, 19), 7.61 (2H, J=15. 76 Hz, H-7, 13) ； 13C NMR (in CDCl3, 100 MHz) δ 55.87 (C3jl7-OCH3), 55.95 (C2jl6-OCH3), 101.26 (C-10), 109.69 (C-l, 15)，111.08 (C-4, 18)，121.99 (C-8, 12)，122.60 (C-5, 19)，128.02 (C-2, 16)，140.36 (C-7, 13)，149.19 (C-6, 14)，150.99 (C-3, 17)，183.21 (C-9, 11) 〇
[0036] 實(shí)施例2二甲氧基姜黃素的半合成制備 取姜黃素（10 g)置250 mL三口瓶中，加1:1乙醚-甲醇混合溶液（v/v，80 mL)，搖勻， 加入氫氧化鈉（3.2 g)，攪拌下加熱至回流，在30 min內(nèi)滴加碘甲烷（15 g)，薄層色譜監(jiān)測(cè) 反應(yīng)至原料消耗殆盡。減壓除盡溶劑，加氨水（60 mL)使大量黃色晶體析出，過(guò)濾，用水洗 至中性，干燥后行硅膠層析柱分離，以石油醚-乙酸乙酯（8: 2，κ/κ)混合溶劑系統(tǒng)洗脫， 收集、合并中間段黃色餾分，減壓除盡溶劑，真空干燥，得橙黃色粉末狀固體（3.5 g)。波譜 分析結(jié)果與全合成制備產(chǎn)物一致，鑒定為二甲氧基姜黃素。
[0037] 實(shí)施例3二甲氧基姜黃素聚合物膠束及其凍干粉制備 (I)BOC-苯丙氨酸封端修飾的聚乙二醇單甲醚-聚己內(nèi)酯嵌段共聚物UPEG 2。。。_ PCL18。。-BP) /DMC膠束及其凍干粉 稱取180 mg所述共聚物高分子和20 mg二甲氧基姜黃素，置50 mL前形瓶中，加無(wú)水 乙醇15 mL，50°C水浴下超聲助溶至溶液澄清無(wú)不溶物，減壓蒸餾除去乙醇，使在瓶底及內(nèi) 壁形成一層均勻薄膜。注入10 mL溫?zé)峒兓?，?0°C水浴中水化45 min，至藥膜完全脫 落溶解，加入80 mg甘露醇，所得溶液經(jīng)0.22 μπι濾膜過(guò)濾后凍干，即得二甲氧基姜黃素載 藥膠束凍干粉。所得膠束理論載藥量10. 〇%，包封率99. 73%，平均粒徑為17. 9 nm，多分散 系數(shù)PDI為0. 045 ;加生理鹽水復(fù)溶制成20 mg/mL的溶液，室溫下避光放置，160 h內(nèi)未見(jiàn) 有沉淀析出。載藥膠束的粒徑分布與形態(tài)分別見(jiàn)附圖1、2,差示掃描量熱（DSC)分析見(jiàn)附圖 3,載藥膠束溶液凍干前后及凍干粉復(fù)溶后的穩(wěn)定性外觀考察見(jiàn)附圖4。
[0038] (2)聚乙二醇單甲醚-聚己內(nèi)酯嵌段共聚物UPEG35。。-PCL_)/DMC膠束及其凍干 粉 稱取190 mg所述共聚物高分子和10 mg二甲氧基姜黃素置50 mL前形瓶中，加無(wú)水乙 醇10 mL，超聲溶解，至溶液澄清無(wú)不溶物后，在45°C水浴緩慢減壓除盡乙醇，使在瓶底及內(nèi) 壁形成一層均勾薄膜。于前瓶中注入5 mL溫?zé)峒兓?，?0°C水浴中水化30 min，至藥膜 完全脫落溶解后，加入100 mg甘露醇，所得溶液經(jīng)0.22 μπι濾膜過(guò)濾后凍干，即得二甲氧 基姜黃素載藥膠束凍干粉。所得膠束理論載藥量5. 0%，包封率為98. 02%，平均粒徑為17. 8 ，多分散系數(shù)PDI為0. 046 ;加注射用水復(fù)溶制成10 mg/mL的溶液，室溫下避光放置，72 h內(nèi)未見(jiàn)有沉淀析出。
[0039] (3)聚乙二醇單甲醚-聚乳酸嵌段共聚物（mPEG34QQ-PLAls。。）/DMC膠束及其凍干粉 稱取190 mg所述共聚物高分子和10 mg二甲氧基姜黃素置50 mL前形瓶中，加無(wú)水乙 醇10 mL，置45°C水浴中加熱助溶，至溶液澄清無(wú)不溶物后，減壓蒸餾除去乙醇，使在瓶底及 內(nèi)壁形成一層均勾薄膜。于前瓶中注入10 mL溫?zé)峒兓?，?5°C水浴中水化30 min，至藥 膜完全脫落溶解，加入100 mg甘露醇，所得溶液經(jīng)0.22 μπι濾膜過(guò)濾后凍干，即得二甲氧 基姜黃素載藥膠束凍干粉。所得膠束理論載藥量5. 0%，包封率為97. 95%，平均粒徑為17. 7 ，多分散系數(shù)PDI為0. 050 ;加注射用水復(fù)溶制成5 mg/mL的溶液，室溫下避光放置，96 h 內(nèi)未見(jiàn)有沉淀析出。
[0040] (4)聚乙二醇單甲醚-聚乙丙交酯嵌段共聚物UPEG 34。。-PLGAismVDMC膠束及其凍 干粉 稱取190 mg所述共聚物高分子和10 mg二甲氧基姜黃素置50 mL前形瓶中，加無(wú)水 乙醇15 mL，超聲溶解，至溶液澄清無(wú)不溶物后，在40°C水浴緩慢減壓除盡乙醇，使在瓶底及 內(nèi)壁形成一層均勾薄膜。于前瓶中注入15 mL溫?zé)峒兓?，?0°C水浴中水化30 min，至 藥膜完全脫落溶解，加入50 mg甘露醇，所得溶液經(jīng)0.22 μπι濾膜過(guò)濾后凍干，即得二甲氧 基姜黃素載藥膠束凍干粉。所得膠束理論載藥量5. 0%，包封率為97. 33%，平均粒徑為17. 8 nm，多分散系數(shù)PDI為0. 045 ;加生理鹽水復(fù)溶制成10 mg/mL的溶液，室溫下避光放置，48 h內(nèi)未見(jiàn)有沉淀析出。
[0041] (5)B0C-苯丙氨酸封端修飾的聚乙二醇單甲醚-聚乳酸嵌段共聚物（mPEG2。。。-PLA 2_-BP) /DMC膠束及其凍干粉 稱取185 mg所述共聚物高分子和15 mg二甲氧基姜黃素置50 mL前形瓶中，加無(wú)水乙 醇20 mL，50°C水浴下超聲助溶至溶液澄清無(wú)不溶物，減壓蒸餾除去乙醇，使在瓶底及內(nèi)壁 形成一層均勻薄膜。注入10 mL溫?zé)峒兓?，?5°C水浴中水化60 min，至藥膜完全脫落 溶解，加入50 mg蔗糖，所得溶液經(jīng)0.22 μπι濾膜過(guò)濾后凍干，即得二甲氧基姜黃素載藥膠 束凍干粉。所得膠束理論載藥量7. 5%，包封率為99. 12%，平均粒徑為17. 9 nm，多分散系數(shù) PDI為0. 048 ;加5%葡萄糖溶液復(fù)溶制成15 mg/mL的溶液，室溫下避光放置，120 h內(nèi)未見(jiàn) 有沉淀析出。
[0042] 實(shí)施例4二甲氧基姜黃素聚合物膠束的藥代動(dòng)力學(xué)與組織分布試驗(yàn) (1)小鼠靜脈注射給藥的藥動(dòng)學(xué)比較試驗(yàn) 試驗(yàn)藥物：二甲氧基姜黃素聚合物膠束凍干制劑，按照實(shí)施例3 (1)制得，臨用前加生 理鹽水溶解至所需濃度；二甲氧基姜黃素二甲亞砜（DMSO)溶液制劑，以DMSO為溶劑，按常 規(guī)方法溶解二甲氧基姜黃素原料藥，制成每ImL含二甲氧基姜黃素5 mg的溶液。
[0043] 給藥與血漿樣品采集、測(cè)試：雄性昆明小鼠48只，體重20 ± 2 g，隨機(jī)分為16組 (n=3)，分別經(jīng)尾靜脈注射給予二甲氧基姜黃素聚合物膠束凍干制劑（1~8組）和二甲氧基 姜黃素 DMSO溶液制劑（9~16組)，給藥劑量以二甲氧基姜黃素計(jì)均為12 mg/kg。分別在給 藥前及給藥后不同時(shí)間點(diǎn)經(jīng)心臟穿刺采集血樣，離心，分離血漿。以雙脫甲氧基姜黃素為內(nèi) 標(biāo)，LC-MS/MS法測(cè)定各血漿樣品的二甲氧基姜黃素藥物濃度。
[0044] 結(jié)果與結(jié)論：兩種制劑給藥的血漿藥物濃度經(jīng)時(shí)變化曲線見(jiàn)附圖5,采用 WinNonlin V6. 2. 1非房室模型計(jì)算得主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。
[0045] 試驗(yàn)結(jié)果顯示，與DMSO溶液制劑相比，聚合物膠束制劑給藥后的血漿藥物暴露量 顯著增加，C niax和AUC (。t)分別為前者的2. 04倍和3. 03倍，因而相同給藥劑量下可能具有更 強(qiáng)藥效作用。另一方面，聚合物膠束制劑組的血漿藥物清除速率顯著降低，血漿藥物消除半 衰期和平均滯留時(shí)間顯著延長(zhǎng)，分別為前者的6. 5倍和6. 6倍，表明本發(fā)明所提供的聚合物 膠束載藥系統(tǒng)具有明顯的長(zhǎng)循環(huán)特征，能有效降低藥物在體內(nèi)的清除速度，在更長(zhǎng)時(shí)間內(nèi) 維持相對(duì)更高的血藥濃度，因而體內(nèi)藥效作用時(shí)間更持久。此外，聚合物膠束制劑組的表觀 分布容積（Vz)顯著增大，為DMSO溶液制劑的2. 06倍，表明本發(fā)明所提供的聚合物膠束載 藥系統(tǒng)明顯改變了二甲氧基姜黃素的組織分布特征，使藥物在體內(nèi)分布更廣，或與組織的 特異性結(jié)合程度更高，提示該制劑可能具有一定的組織分布靶向性。
[0046] (2) SD大鼠口服生物利用度比較試驗(yàn) 試驗(yàn)藥物：二甲氧基姜黃素聚合物膠束凍干制劑，按照實(shí)施例3 (1)制得，臨用前加生 理鹽水溶解至所需濃度；二甲氧基姜黃素 CMC-Na混懸制劑，以0. 5% CMC-Na溶液按常規(guī)方 法分散二甲氧基姜黃素原料藥制成，每ImL含二甲氧基姜黃素10 mg。
[0047] 給藥與血漿樣品采集、測(cè)試：雄性SD大鼠18只，體重200 ± 20 g，隨機(jī)分為3組 (n=6)。其中，I組經(jīng)尾靜脈注射給予二甲氧基姜黃素聚合物膠束凍干制劑，給藥劑量以二 甲氧基姜黃素計(jì)為15 mg/kg ; II、111組分別灌胃給予二甲氧基姜黃素的CMC-Na混懸劑和二 甲氧基姜黃素聚合物膠束凍干制劑，給藥劑量以二甲氧基姜黃素計(jì)均為75 mg/kg。分別采 集各組動(dòng)物給藥前及給藥后不同時(shí)間的血漿樣品，以雙脫甲氧基姜黃素為內(nèi)標(biāo)、乙酸乙酯 為溶劑，液-液萃取法從基質(zhì)中提取二甲氧基姜黃素和內(nèi)標(biāo)，LC-MS/MS法定量測(cè)定二甲氧 基姜黃素的血漿藥物濃度。
[0048] 結(jié)果與結(jié)論：針對(duì)血漿藥物濃度經(jīng)時(shí)變化數(shù)據(jù)采用DAS2. 0軟件進(jìn)行處理，得各試 驗(yàn)組的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。結(jié)果顯示，I、II、III組的血漿二甲氧基姜黃素 AUC分別為6. 238 mg/L · h、0. 324 mg/L · h、4. 803 mg/L · h ;以膠束制劑注射給藥為參比，校正給藥劑量后計(jì) 算得兩種不同制劑中原形藥物二甲氧基姜黃素的口服生物利用度分別為1. 04%和15. 40%， 聚合物膠束制劑為普通CMC-Na分散混懸制劑的14.8倍。試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明所提供的 聚合物膠束給藥系統(tǒng)顯著改善了二甲氧基姜黃素的口服生物利用度，是二甲氧基姜黃素口 服應(yīng)用于臨床的一種有效的給藥系統(tǒng)。
[0049] (3)荷瘤裸鼠組織分布比較試驗(yàn) 主要試驗(yàn)材料：二甲氧基姜黃素聚合物膠束凍干制劑，按照實(shí)施例3 (1)制得，臨用 前加生理鹽水溶解至所需濃度；二甲氧基姜黃素二甲亞砜（DMSO)溶液制劑，以DMSO為 溶劑，按常規(guī)方法溶解二甲氧基姜黃素原料藥，制成每ImL含二甲氧基姜黃素5 mg的溶 液；5~6周齡雌性Balb/C裸小鼠