地塞米松用于抑制或治療轉(zhuǎn)移性或耐藥性腫瘤的用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及地塞米松或其可藥用的鹽在治療耐藥性或轉(zhuǎn)移性癌癥中的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 癌癥（Cancer)是全球發(fā)病和死亡的主要原因之一，據(jù)世界衛(wèi)生組織（World HealthOrganization，WHO)最新統(tǒng)計，2012年約有1,400萬新發(fā)癌癥病例和820萬例癌癥 相關(guān)死亡，且預(yù)計今后二十年新發(fā)病例數(shù)將增加70% (參考自WHO官方網(wǎng)站http://www. who.int/mediacentre/factsheets/fs297/en/)。其中，肺癌位于癌癥死亡病因的首位，即 使采用手術(shù)聯(lián)合化療、放療的綜合治療手段，五年存活率仍低于15%。
[0003]目前，治療肺癌的方法主要包括放療、化療和祀向治療等。這些方法在肺癌治療初 期，能產(chǎn)生一定的療效，但隨著時間的延長，往往會產(chǎn)生藥物耐受，導(dǎo)致治療失敗。據(jù)統(tǒng)計， 90%以上肺癌患者的死亡在不同程度上與耐藥有關(guān)，因此，耐藥性問題是肺癌治療過程中 急需解決的難題。
[0004] 肺癌轉(zhuǎn)移是指癌細(xì)胞從肺部侵入淋巴管、血管或通過其他途徑被帶到它處繼續(xù)生 長，形成與肺部腫瘤類型相同的腫瘤。據(jù)估計，90%以上癌癥患者死于不同程度的腫瘤轉(zhuǎn)移 和復(fù)發(fā)，其中肺癌占很大一部分。因此，與耐藥性問題一樣，肺癌的轉(zhuǎn)移同樣是治療過程中 的一大難題，如何提高對肺癌耐藥和轉(zhuǎn)移的治療效果具有顯著的臨床意義。
[0005] 地塞米松（Dexamethasone，DEX)是一種留體類化合物，具有抗炎和抑制免疫的 作用，其廣泛應(yīng)用于風(fēng)濕類疾病、皮膚性疾病、過敏反應(yīng)、哮喘、慢性阻塞性肺病、哮吼、腦水 月中、結(jié)核病及其他傳染性疾病的治療。在惡性腫瘤的治療過程中，DEX常用于減輕化療藥物 帶來的毒副作用，如惡心嘔吐等。雖然近年來的臨床前研宄發(fā)現(xiàn)，在某些特定腫瘤的治療過 程中，DEX本身具有一定抑制腫瘤（非耐藥性腫瘤）生長的作用。然而，目前已有的研宄中， 尚無任何證據(jù)表明DEX對耐藥性肺癌和轉(zhuǎn)移性肺癌具有較好的抑制作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明人在研宄肺癌的治療過程中，意外地發(fā)現(xiàn)DEX或其可藥用的鹽對耐藥性肺 癌及其轉(zhuǎn)移具有良好的抑制效果，且無明顯藥物毒性。
[0007]DEX自1960年德國默克公司生產(chǎn)地塞米松磷酸鈉以來，至今上市的DEX衍生物 已達(dá)12種以上。然而，一直以來其在腫瘤方面的應(yīng)用十分有限，特別是在肺癌中的應(yīng)用鮮 有報道。本發(fā)明人在研宄初期，按照抗癌藥研宄的經(jīng)典思路，先開展了體外細(xì)胞試驗，結(jié) 果顯示DEX對肺癌細(xì)胞幾乎沒有殺傷作用（見實施例1)，這一結(jié)果正好解釋了少有研宄 者對DEX的抗肺癌效果進(jìn)行研宄的原因。正當(dāng)本發(fā)明人欲放棄這一研宄課題時，卻在一 次動物體內(nèi)試驗過程中，出人意料的發(fā)現(xiàn)DEX對耐藥性肺癌具有顯著的抑制效果，其作用 明顯好于臨床常用的化療藥物吉西他濱（Gemcitabine，GEM)和小分子革E1向藥物埃羅替尼 (Erlotinib)、舒尼替尼（Sunitinib)，且無明顯藥物毒性（見實施例2、3)。
[0008] 考慮到DEX對內(nèi)分泌的相關(guān)作用，本發(fā)明人還選取了類似藥物他莫昔芬 (Tamoxifen，TAM)進(jìn)行試驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，TAM對耐藥性肺癌幾乎沒有抑制作用（見實施例3)。
[0009] 以上結(jié)果說明，不論是化療藥物還是小分子靶向藥物或內(nèi)分泌治療藥物，在耐藥 性肺癌的治療中，其可行性都難以令人信服，而DEX卻能很好的抑制耐藥肺癌的生長。
[0010] 基于此，本發(fā)明人又嘗試進(jìn)行了DEX抗肺癌轉(zhuǎn)移的試驗。令人驚訝的發(fā)現(xiàn)，DEX在 體內(nèi)外試驗中均能很好的抑制肺癌轉(zhuǎn)移（見實施例3、4)。
[0011] 因此，本發(fā)明的一個目的是提供一種能顯著抑制耐藥性肺癌和轉(zhuǎn)移性肺癌且不產(chǎn) 生明顯毒副作用的治療藥物，包括有效量的地塞米松或其可藥用的鹽。
[0012] 所述的可藥用的鹽是通過常規(guī)的化學(xué)方法從母體化合物合成的，所述母體化合物 包含堿性的或酸性的部分。通常，所述鹽是比如通過這些化合物的游離酸或堿形式和化學(xué) 當(dāng)量的合適的堿或酸在水中或在有機溶劑或在水和有機溶劑的混合物中反應(yīng)而制備的。通 常，非水介質(zhì)如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈是優(yōu)選的。酸加成鹽的例子包含無機酸 加成鹽如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽，和有機酸加成鹽如醋酸鹽、 三氟醋酸鹽、馬來酸鹽、延胡索酸鹽、檸檬酸鹽、草酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、蘋果酸鹽、扁 桃酸鹽、安乃近和對甲苯磺酸鹽。堿加成鹽的例子包含無機鹽如鈉、鉀、鈣和銨鹽，以及有機 的堿金屬鹽如乙二胺、乙醇胺、N，N-二亞烴基乙醇胺、三乙醇胺和堿性的氨基酸鹽。
[0013] 根據(jù)本發(fā)明的一個方面，所述耐藥性肺癌和轉(zhuǎn)移性肺癌意味著具有藥物耐受特性 或具有腫瘤轉(zhuǎn)移特性的包含肺部腫瘤、瘤形成和任何其它的惡性組織或細(xì)胞。具體包括具 有耐藥特性或具有轉(zhuǎn)移特性的小細(xì)胞肺癌或非小細(xì)胞肺癌。其中所述的耐藥性和轉(zhuǎn)移性肺 癌優(yōu)選為耐藥性和轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌。
[0014] 本發(fā)明的另一目的是提供一種抗癌制劑，其包括所述的DEX或其可藥用的鹽和藥 學(xué)上的常規(guī)輔料。其中，地塞米松常規(guī)制劑包括片劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、散劑、顆粒劑、 膠囊劑、微囊、微球、注射液、脂質(zhì)體、緩/控釋制劑等。所述的藥學(xué)上的常規(guī)輔料包括潤滑 劑、填充劑、表面活性劑、增溶劑、助溶劑等。
[0015] 本發(fā)明的實現(xiàn)具有以下積極意義：
[0016] (1)通過DEX治療耐藥性肺癌和轉(zhuǎn)移性肺癌，可顯著抑制腫瘤體積的增大，同時抑 制腫瘤的轉(zhuǎn)移，其效果明顯好于常用化療藥物、小分子靶向藥物和內(nèi)分泌治療藥物，且無明 顯毒副作用；
[0017] (2)本發(fā)明所述的藥物成本低廉，可在確保良好藥效的條件下極大地降低患者的 治療成本。
【附圖說明】
[0018] 圖1為DEX和TAM對A549細(xì)胞存活率的影響結(jié)果圖（n= 6)。耐藥性人非小細(xì)胞 肺癌細(xì)胞（A549)分別給予空白對照和不同濃度DEX或TAM時細(xì)胞存活率的變化曲線。
[0019] 圖2為DEX和TAM對H1299細(xì)胞存活率的影響結(jié)果圖（n= 6)。耐藥性人非小細(xì) 胞肺癌細(xì)胞（H1299)分別給予空白對照和不同濃度DEX或TAM時細(xì)胞存活率的變化曲線。
[0020] 圖3為DEX給藥時雌性荷瘤裸鼠腫瘤的生長（DEX單劑量，n= 5)。耐藥性人非小 細(xì)胞肺癌（A549)荷瘤裸鼠分別給予空白對照、DEX以及埃羅替尼和舒尼替尼時裸鼠腫瘤體 積的變化曲線。
[0021] 圖4為DEX給藥時雌性荷瘤裸鼠腫瘤的照片（DEX單劑量，n= 5)。耐藥性人非小 細(xì)胞肺癌（A549)荷瘤裸鼠分別給予空白對照、DEX以及埃羅替尼和舒尼替尼時裸鼠腫瘤的 實拍照片。
[0022] 圖5為DEX給藥時雌性荷瘤裸鼠腫瘤的生長（DEX多劑量，n= 5)。耐藥性人非小 細(xì)胞肺癌（A549)荷瘤裸鼠分別給予空白對照、DEX0.5mg/kg、DEX2mg/kg、DEX4mg/kg以 及TAM和GEM時裸鼠腫瘤體積的變化曲線。
[0023] 圖6為DEX給藥時雌性荷瘤裸鼠腫瘤的照片（DEX多劑量，n= 5)。耐藥性人非小 細(xì)胞肺癌（A549)荷瘤裸鼠分別給予空白對照、DEX0.5mg/kg、DEX2mg/kg、DEX4mg/kg以 及TAM和GEM時裸鼠腫瘤的實拍照片。
[0024] 圖7為DEX給藥時雌性荷瘤裸鼠體重的變化（n= 5)。耐藥性人非小細(xì)胞肺癌 (A549)荷瘤裸鼠分別給予空白對照、DEX0? 5mg/kg、DEX2mg/kg、DEX4mg/kg以及TAM和 GHM時裸鼠體重的變化曲線。
[0025] 圖8為DEX給藥時雌性荷瘤裸鼠腫瘤同側(cè)腋下淋巴結(jié)的照片（n= 5)。耐藥性人 非小細(xì)胞肺癌（A549)荷瘤裸鼠分別給予空白對照、DEX2mg/kg、DEX4mg/kg時裸鼠腫瘤同 側(cè)腋下淋巴結(jié)的實拍照片。
[0026] 圖9為DEX給藥32天時雌性荷瘤裸鼠的血象指標(biāo)（n= 5)。耐藥性人非小細(xì)胞肺 癌細(xì)胞（A549)荷瘤裸鼠分別給予空白對照、DEX0.5mg/kg、DEX2mg/kg、DEX4mg/kg以及 TAM和GEM32天時裸鼠的血象指標(biāo)。
[0027] 圖10為DEX對H1299細(xì)胞迀移的影響結(jié)果圖。耐藥性、轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 分別給予空白對照、DEX0.lyM、DEXlyM、DEX10yM、DEX40yM時細(xì)胞迀移的實拍照片。
[0028] 圖11為DEX對H1299細(xì)胞迀移的影響試驗中劃痕寬度的定量結(jié)果圖（n= 3)。耐 藥性、轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞分別給予空白對照、DEX0.lyM、DEXlyM、DEX10yM、DEX 40yM時細(xì)胞劃痕的寬度。
【具體實施方式】
[0029] 為了更好的理解本發(fā)明，本發(fā)明人提供了下述的實施例，然而，這些實施例僅僅是 作為說明性的目的而給出的，并且不解釋為對本發(fā)明的限制，因為其中許多變化是可能的， 而不脫離本發(fā)明的主旨和范圍。本發(fā)明的方法雖然在特定實施方案加以描述，但所屬技術(shù) 領(lǐng)域的技術(shù)人員顯而易見，可使所述方法的步驟或步驟的順序發(fā)生變化，但不偏離本發(fā)明 的概念和范疇。更具體來說，顯而易見的在化學(xué)上和生物學(xué)上相關(guān)的其他藥理過程類似的 藥物可以取代本文所述的藥物，同時達(dá)到相同或相似的效果。所述技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員顯 而易見的對所有這種相似的替換或修飾都應(yīng)被認(rèn)為在本發(fā)明的范疇和概念內(nèi)。
[0030] 實施例1 :
[0031] DEX對體外耐藥件肺癌細(xì)朐增葙的影晌
[0032] 本實施例研宄了DEX對耐藥性肺癌細(xì)胞體外增殖的影響。
[0033] 取對數(shù)生長期細(xì)胞，用0. 25%胰酶-0. 53mmol/LEDTA溶液消化、計數(shù)。將A549和 H1299 (均為原發(fā)性耐藥細(xì)胞系）分別按1X104個/孔接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板。培養(yǎng)24h 后，進(jìn)行給藥，DEX給藥組的終濃度為1、5、10、50、100、400、600、1000yM，每組設(shè)6個平行， 繼續(xù)孵育48h。孵育結(jié)束后棄去培養(yǎng)基，每孔加入100y1預(yù)先預(yù)冷的10%三氯乙酸（TCA， w/v)溶液，4°C固定lh;棄去TCA溶液，自來水沖洗5次，自然晾干；每孔加入100y1 0. 4% 磺酰羅丹明B(SRB)染料，室溫下染色30min;棄去SRB染料，