一種脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物及其制備方法，屬于新材料 和藥物控釋技術(shù)等領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 脫氫水飛薊賓它優(yōu)異的藥理特性已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于肝臟保健和治療各種肝臟疾 病，并作為一種保護(hù)劑對(duì)抗一些肝毒素和霉菌毒素，主要是作為一種有效的自由基清除劑 和抗氧化劑。
[0003] 脫氫水飛薊賓是水飛薊賓2, 3位脫氫的氧化產(chǎn)物，結(jié)構(gòu)式如下所示：
[0004]
[0005]在天然水飛薊產(chǎn)物中均有發(fā)現(xiàn)它的蹤跡，這種化合物是導(dǎo)致水飛薊提取物顯黃色 主要組成，但它不易在自然產(chǎn)物中分離提純出，所以對(duì)其藥效和生物活性的研宄鮮有報(bào)道， 現(xiàn)有的研宄一般以水飛薊賓為原料通過(guò)堿催化氧化的半合成法制備成。它顯示了比母體更 優(yōu)異的抗氧化活性和藥理活性，在抗腫瘤和抗惡性細(xì)胞增殖的應(yīng)用中也表現(xiàn)出比水飛薊賓 有效的治療效果，有研宄發(fā)現(xiàn)它對(duì)一些皮膚?。ㄈ纾Ｆぐ_、特應(yīng)性皮瘆等）表現(xiàn)出很好的 治療效果。但研宄發(fā)現(xiàn)，脫氫水飛薊賓較差的水溶性和脂溶性，生物利用度低是制約其臨床 應(yīng)用的瓶頸。
[0006] 脂質(zhì)體是由磷脂分子在水中自組裝形成的一種閉合雙分子層包裹著水相核的有 序組合體。將脂溶性或水溶性差的藥物包載在質(zhì)體囊泡即納米脂質(zhì)體中，利用其納米級(jí)粒 徑優(yōu)勢(shì)、極好的親水性、親脂性、天然的靶向性、長(zhǎng)效性、包容性等特性，增強(qiáng)藥物吸收速度、 生物利用度、拓展藥物給藥方式已經(jīng)成為藥物應(yīng)用研宄的熱點(diǎn)。另外天然磷脂納米脂質(zhì)體 本身還具有清除血管壁膽固醇、軟化血管、提高免疫力等保健功能，是一種安全的天然保健 藥物，以天然磷脂為原料的脂質(zhì)體被譽(yù)為"生物導(dǎo)彈"，在醫(yī)藥、保健食品、化妝品和基因工 程等領(lǐng)域得到廣范的應(yīng)用。
[0007] 鑒于脫氫水飛薊賓給藥時(shí)存在溶解性差、生物利用度低的問(wèn)題，需要尋找一種可 解決脫氫水飛薊賓的溶解性或生物利用度低等問(wèn)題的新型藥物載體體系。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物及 其制備方法。
[0009] 本發(fā)明的技術(shù)方案：
[0010] 一種脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物，該脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合 物包括內(nèi)核和外層，以脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物為內(nèi)核，以脂質(zhì)體為外層；所述磷脂復(fù)合物 中脫氫水飛薊賓與磷脂的摩爾比0. 25:1~3:1 ;所述的脂質(zhì)體中磷脂復(fù)合物與磷脂質(zhì)量比 為1:1~1:8,包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物的脂質(zhì)體為球形顆粒混懸液，其粒徑為200~ 1600nm，包封率為 35. 2 ~95. 8 %。
[0011] 一種脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物的制備方法，是以脫氫水飛薊賓磷脂復(fù) 合物和磷脂為主要原料，采用逆向蒸發(fā)法或注入法制備，其中：
[0012] 所述的逆向蒸發(fā)法步驟為：(A)將脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物溶于有機(jī)溶劑乙醇和 乙醚混合液中，乙醇與乙醚的體積比是0. 5:1~1. 5:1，脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物在有機(jī)溶 劑中的濃度以質(zhì)量體積比計(jì)為1~7g/L; (B)將磷脂溶于有機(jī)溶劑乙醇和乙醚混合液中，乙 醇與乙醚的體積比是0. 5:1~1. 5:1，脂質(zhì)體在有機(jī)溶劑中的濃度以質(zhì)量體積比記為3~ 30g/L，20~40°C超聲處理1~8min; (C)將步驟（A)所得液體與步驟（B)所得液體混合， 加入PBS緩沖液，混合液體與PBS緩沖液體積比1:1~1:3. 3,冰浴超聲1~8min⑶15~ 25°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)30~90min，即得脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體；
[0013] 所述的注入法步驟為：(A)將脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物溶于有機(jī)溶劑乙醇和乙醚 混合液中，乙醇與乙醚的體積比是0. 5:1~1. 5:1，脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物在有機(jī)溶劑中 的濃度以質(zhì)量體積比計(jì)為1~7g/L; (B)將磷脂溶于溶于有機(jī)溶劑乙醇和乙醚混合液中，乙 醇與乙醚的體積比是0. 5:1~1. 5:1，脂質(zhì)體在有機(jī)溶劑中的濃度以質(zhì)量體積比記為3~ 30g/L，20~40°C超聲處理1~8min; (C)將步驟（A)所得液體與步驟（B)所得液體混合， 用注射器將步驟（C)得到的混合液體緩慢注入到PBS緩沖液中，混合液體與PBS緩沖液體 積比1:1~1:3. 3,冰浴超聲1~8min; (D) 15~25°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)30~90min，即得脫氫水飛 薊賓磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體。
[0014] 所述的脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物經(jīng)離心，-20°C貯存，制成包覆脫氫水 飛薊賓磷脂復(fù)合物的脂質(zhì)體混懸液。
[0015] 上述的脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物的制備方法中：所述脂質(zhì)體包覆脫氫 水飛薊賓磷脂復(fù)合物經(jīng)離心，-20°c貯存，制成包覆脫氫水飛薊賓脂質(zhì)體磷脂復(fù)合物的混懸 液。
[0016] 本發(fā)明提供的脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物及其制備方法，可同時(shí)解決脫 氫水飛薊賓脂溶性和水溶性差、生物利用度低等問(wèn)題。且脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù) 合物具有制備簡(jiǎn)單、水分散性好、載藥量易控、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、藥物緩釋效果好等特點(diǎn)，可用于保 健品、化妝品、藥物控制釋放技術(shù)等領(lǐng)域。
[0017] 本發(fā)明的技術(shù)特點(diǎn)如下：
[0018] 1.發(fā)明了一種脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物，載藥量易控，且載藥效果 好；
[0019] 2.所發(fā)明的脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物，具有良好的分散性和穩(wěn)定性。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 通過(guò)下文的實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，所用實(shí)施例不應(yīng)當(dāng)構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限 制。
[0021] 實(shí)施例I
[0022] 脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體的制備
[0023] 稱取IOmg脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物溶于L5ml乙醇/乙醚（體積比1:1)中，再 稱取30mg大豆磷脂溶于I. 5ml乙醇/乙醚（體積比1:1)中；將上述兩溶液混合得到澄清 透明的溶液。之后加入IOmlPBS緩沖液，冰水浴超聲3分鐘，在室溫下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至溶液中 不在爆沸，繼續(xù)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)30min，即得脂質(zhì)體。將所得的脂質(zhì)體溶液稀釋5倍后，用NanoNS 進(jìn)行檢測(cè)，脂質(zhì)體的平均粒度在317~323nm之間，包封率為70%。
[0024] 實(shí)施例2
[0025] 脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體的制備
[0026] 稱取IOmg脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物溶于L5ml乙醇/乙醚（體積比1:1)中，再 稱取80mg大豆磷脂溶于I. 5ml乙醇/乙醚（體積比1:1)中；將上述兩溶液混合得到澄清 透明的溶液。將所得的溶液用細(xì)針筒緩慢注入到3mlPBS緩沖液，冰水浴超聲1分鐘，在室 溫下旋蒸至溶液不在爆沸，繼續(xù)旋蒸50min，即得脂質(zhì)體。將所得的脂質(zhì)體溶液稀釋5倍后， 用NanoNS進(jìn)行檢測(cè)脂質(zhì)體的平均粒度在269-297nm之間，包封率為93 %。
[0027] 實(shí)施例3
[0028] 脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體的制備
[0029] 稱取IOmg脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物溶于L5ml乙醇/乙醚（體積比1:1)中，再 稱取60mg大豆磷脂溶于I. 5ml乙醇/乙醚（體積比1:1)中；將上述兩溶液混合得到澄清 透明的溶液。將所得的溶液用細(xì)針筒緩慢注入到IOmlPBS緩沖液，冰水浴超聲2分鐘，在 室溫下旋蒸至溶液不在爆沸，繼續(xù)旋蒸60min，即得脂質(zhì)體。將所得的脂質(zhì)體溶液稀釋5倍 后，用NanoNS進(jìn)行檢測(cè)脂質(zhì)體的平均粒度在210-220nm之間，包封率為95. 8%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物，其特征在于，該脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊 賓磷脂復(fù)合物包括內(nèi)核和外層，以脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物為內(nèi)核，以脂質(zhì)體為外層；所述 磷脂復(fù)合物中脫氫水飛薊賓與磷脂的摩爾比0. 25:1~3:1 ;所述的脂質(zhì)體中磷脂復(fù)合物與 磷脂質(zhì)量比為1:1~1:8,包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物的脂質(zhì)體為球形顆?；鞈乙?，其粒 徑為200~1600nm，包封率為35. 2~95. 8%。2. 權(quán)利要求1所述的脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物的制備方法，其特征在于， 是以脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物和磷脂為主要原料，采用逆向蒸發(fā)法或注入法制備，其中： 所述的逆向蒸發(fā)法步驟為：(A)將脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物溶于有機(jī)溶劑乙醇和乙醚 混合液中，乙醇與乙醚的體積比是0. 5:1~1. 5:1，脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物在有機(jī)溶劑中 的濃度以質(zhì)量體積比計(jì)為1~7g/L; (B)將磷脂溶于有機(jī)溶劑乙醇和乙醚混合液中，乙醇與 乙醚的體積比是0. 5:1~1. 5:1，脂質(zhì)體在有機(jī)溶劑中的濃度以質(zhì)量體積比記為3~30g/ L，20~40°C超聲處理1~8min; (C)將步驟（A)所得液體與步驟（B)所得液體混合，加入 PBS緩沖液，混合液體與PBS緩沖液體積比1:1~1:3. 3,冰浴超聲1~8min(D) 15~25°C 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)30~90min，即得脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體； 所述的注入法步驟為：(A)將脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物溶于有機(jī)溶劑乙醇和乙醚混合 液中，乙醇與乙醚的體積比是0. 5:1~1. 5:1，脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物在有機(jī)溶劑中的濃 度以質(zhì)量體積比計(jì)為1~7g/L; (B)將磷脂溶于溶于有機(jī)溶劑乙醇和乙醚混合液中，乙醇與 乙醚的體積比是0. 5:1~1. 5:1，脂質(zhì)體在有機(jī)溶劑中的濃度以質(zhì)量體積比記為3~30g/ L，20~40°C超聲處理1~8min; (C)將步驟（A)所得液體與步驟（B)所得液體混合，用注 射器將步驟（C)得到的混合液體緩慢注入到PBS緩沖液中，混合液體與PBS緩沖液體積比 1:1~1:3. 3,冰浴超聲1~8min; (D) 15~25°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)30~90min，即得脫氫水飛薊賓 磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述的脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊賓磷 脂復(fù)合物經(jīng)離心，-20°C貯存，制成包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物的脂質(zhì)體混懸液。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種脂質(zhì)體包覆脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物，是以脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物為內(nèi)核，外層包覆脂質(zhì)體而構(gòu)成。所述脂質(zhì)體以脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物和磷脂材料為主原料，采用注入法或逆向蒸發(fā)法制備，其中脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物不但負(fù)載于內(nèi)核中，也可負(fù)載于外層脂質(zhì)體的雙分子層中或雙分子層的表面。脫氫水飛薊賓包封率以質(zhì)量百分比計(jì)為復(fù)合物的35.2％～95.8％。其制備步驟依次包括脫氫水飛薊賓的制備、脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物的制備、脫氫水飛薊賓磷脂復(fù)合物脂質(zhì)體的制備。本發(fā)明復(fù)合物具有制備過(guò)程簡(jiǎn)單、載藥量易控、分散性好、結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、粒徑均勻等特點(diǎn)，可用于藥物輸送-緩釋體系、保健品等領(lǐng)域。
【IPC分類】A61K31/357, A61K47/24, A61K9/127, A61P1/16
【公開(kāi)號(hào)】CN104887630
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510253292
【發(fā)明人】張秀娟, 吳倩倩, 賀高紅, 尹文娟, 張凱哲
【申請(qǐng)人】大連理工大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年9月9日
【申請(qǐng)日】2015年5月15日