專利名稱：具有類甾族化合物結(jié)構(gòu)的物質(zhì)、其制造方法和含有該物質(zhì)的抗腫瘤劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從冬蟲夏草中分離具有抗腫瘤活性的活性餾分和其中所含活性成分的方法以及該活性成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)。并且涉及含有該活性餾分或活性成分的抗腫瘤劑。
背景技術(shù)：
冬蟲夏草是一種子實體，它寄生于蝶蛾類鱗翅目和鞘翅目的昆蟲或其幼蟲體內(nèi)，在它們的體內(nèi)形成菌核，然后在夏季形成于作為宿主的昆蟲或其幼蟲的蟲體表面上。已知在世界上的冬蟲夏草約有350種，自古已知，冬蟲夏草對人體完全沒有毒性并且顯示各種各樣的效果，因此它是一種可作為中藥經(jīng)口服用的物質(zhì)，今日在中國已將冬蟲夏草錄載于作為與中藥有關(guān)的書刊的“中草藥學(xué)”或“中藥大辭典”等書刊中，即使在日本也已將冬蟲夏草記載入“新訂和漢藥”及其他許多中文書籍中。
作為記載于各種書籍中的藥理作用，冬蟲夏草具有增強精力、滋養(yǎng)強壯、治療循環(huán)器官系統(tǒng)疾病(日本藥理學(xué)會志，67卷，213頁，1995年)、糖尿病[Biol．Pharm．Bull16卷，1291-1293頁(1993)；同一雜志，19卷，294-296頁(1996)]、肝病[Prog．Med12卷，1172-1174(1992)]等效果。另外，通過近年來的藥理學(xué)研究證實，冬蟲夏草真菌在許多方面具有活性和藥理作用，還報導(dǎo)了它的抗腫瘤和免疫增強作用等[《日本免疫學(xué)會學(xué)術(shù)記錄》18卷，665頁(1988年)；《日本細菌學(xué)會志》45卷，763頁(1990年)；J．Kanazawa《Med．Univ》17卷，330-335頁(1992)]。
然而，對完全純化的冬蟲夏草的活性成分進行的研究和在臨床上應(yīng)用的例子卻很少[J．Am．Pharm．Ass46，114-118(1957)；特開平8-81386號公報]，因此，在把未經(jīng)純化的提取物用于投藥時，必須使用較多量的冬蟲夏草原未或錠劑，這是存在的問題，另外，在藥理作用的均一性和可靠性方面也存在問題。另外，關(guān)于從冬蟲夏草提取的活性物質(zhì)的分類或限定以及其藥理作用的機制方面的研究幾乎未見報導(dǎo)，即使在已被確認具有最多種類冬蟲夏草生長的以中國為首的亞洲諸國中，冬蟲夏草也是被作為葛根湯等湯劑處方中的藥草煎湯服用，只是根據(jù)不同地區(qū)的習(xí)慣和信仰有不同的服用方式，這是目前的現(xiàn)狀，在此情況下不能達到確實地維持穩(wěn)定的藥理效果的目的。
因此，為了能夠確實而且有效地利用冬蟲夏草的藥理作用，特別是其抗腫瘤和增強免疫力等藥理效果，人們強烈地希望開發(fā)一種用于從冬蟲夏草的成分中分離出具有上述活性的活性成分的分離方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明著眼于冬蟲夏草所具有的抗腫瘤效果，其目的是提供一種能夠以純品狀態(tài)獲得具有上述效果的化合物的分離方法。另外，本發(fā)明的另一個目的是提供一種具有上述抗腫瘤效果的化合物。進而，本發(fā)明的再一個目的是提供一種含有上述化合物的抗腫瘤劑。
對附圖的簡單說明

圖1A是本發(fā)明用于從冬蟲夏草中提取活性餾分和活性成分的一般流程圖。
圖1B是在實施例1中使用的本發(fā)明從冬蟲夏草中提取活性餾分和活性成分的流程圖。
圖2是色譜圖，其中示出了在實施列1中獲得的按本發(fā)明分離純化的化合物(Ⅱ)的反相色譜。箭頭所指處是化合物(Ⅱ)的峰。其中示出的保持時間是以樣品注入時間作為0分測得的時間。
圖3是質(zhì)譜圖，其中示出了在實施例1中獲得的作為本發(fā)明活性成分的化合物(Ⅱ)的質(zhì)譜數(shù)據(jù)。
圖4是表示本發(fā)明的活性餾分(圖1B的C5餾分)對細胞增殖的抑制作用(濃度相關(guān)性)的曲線圖。圖中分別示出了在使用纖維芽細胞(以○表示)和Hela細胞(以●表示)時的結(jié)果。
圖5表示按照本發(fā)明方法分離、提取的各餾分(圖1B的C1～C10餾分)對Vero細胞所起的細胞增殖抑制作用。
圖6表示按照本發(fā)明方法分離、提取的各餾分(圖1B的C1～C10餾分)對Hela細胞所起的細胞增殖抑制作用。
圖7是照片，其中示出了DNA碎裂的結(jié)果和Hela細胞內(nèi)的染色質(zhì)凝聚(24小時)的情況。
圖8是照片，其中示出了DNA碎裂的結(jié)果和Hela細胞內(nèi)的染色質(zhì)凝聚(72小時)的情況。
圖9是表示Hela細胞DNA的電泳結(jié)果的照片。其中，泳道1～4表示在24小時之后的結(jié)果，泳道5～8表示在48小時后的結(jié)果，泳道9～12表示在72小時后的結(jié)果。M和數(shù)字分別表示分子量標(biāo)記和標(biāo)記用分子量。
用于實施發(fā)明的最佳實施方案A．本發(fā)明是一種用于分離冬蟲夏草中所含的抗腫瘤活性餾分和活性成分的方法，其特征在于，將冬蟲夏草的子實體部分干燥，再將該已干燥的子實體部分粉碎以制成干燥的粉碎試料，將該試料用水溶性溶劑提取以制成提取液，將該提取液濃縮以制成粗提取物，將該粗提取物用硅膠柱色譜法至少處理1次以分離出具有腫瘤細胞增殖抑制作用的洗脫餾分，以此作為活性餾分，然后將該活性餾分用色譜法分離純化，獲得具有腫瘤細胞增殖抑制作用的活性成分(圖1A)。
對于作為適用于本發(fā)明中的提取原料的冬蟲夏草的子實體，沒有特別限制，只要是能夠寄生于一般公知的蝶蛾類鱗翅目和鞘翅目的昆蟲及其幼蟲體內(nèi)并在其中形成菌核，到夏季時就形成于作為宿主的昆蟲及其幼蟲的軀體表面上的子實體即可。在本發(fā)明中，作為特別適用的冬蟲夏草，可以舉出那些能夠寄生在蝙蝠蛾科的幼蟲(Hepialus armoricanusOber)體內(nèi)并在其中形成菌核，到夏季時就從該昆蟲頭部形成根棒狀的子實體的冬蟲夏草(Cordyceps sinensis)。另外，在Cordyceps sinensis以外的冬蟲夏草中，作為生藥具有藥效的冬蟲夏草已知的還有Cordyceps sobolifera B和蛹蟲草(Cordyceps militaris Link)和Cordyceps nutans Pat等，這些冬蟲夏草也很適用于本發(fā)明中。只要這些冬蟲夏草能夠產(chǎn)生具有如下所述的抗腫瘤效果，就可以利用本發(fā)明的方法從其中提取(分離)出這些活性成分。另外，使用本發(fā)明的方法，可以無區(qū)別地對子實體或被子體進行提取，但是為了獲得特別高的產(chǎn)率，優(yōu)選是從冬蟲夏草的子實體中提取。
作為從該原料中提取分離具有抗腫瘤活性的活性餾分或活性成分的方法，可以使用通常用于從植物中提取物質(zhì)的方法，對此沒有特別限制，但是本發(fā)明在下文示出了特別好的提取分離方法。另外，在分離這些具有抗腫瘤活性的活性餾分或活性成分時使用的對該活性的判定方法也沒有特別限制，可以容易地選擇使用通常公知的方法。具體地說，可以選擇特定的腫瘤細胞，然后根據(jù)對該細胞的增殖所起的抑制效果來進行判定。
如圖1A所示，本發(fā)明的方法一般由以下的工序構(gòu)成。
(1)對作為原料的冬蟲夏草的子實體部分進行干燥的工序，使用該工序的原因是在作為原料的冬蟲夏草的含水量非常高的情況下，在后續(xù)的提取工序中極性物質(zhì)也一起被提取出來，因此在多數(shù)情況下都會對利用色譜法的分離純化處理產(chǎn)生不良影響。對該干燥方法沒有特別限制，但是優(yōu)選使用適當(dāng)大的干燥箱。另外，對干燥溫度也沒有特別限制，但優(yōu)選是在35～60℃左右的溫度范圍內(nèi)。在必要時優(yōu)選進行送風(fēng)干燥。另外，為了防止不必要的光分解，優(yōu)選是在黑暗場所進行干燥。
(2)通過把工序(1)中干燥了的子實體部分粉碎來制備干燥粉碎試料的工序，通過該工序可以提高后續(xù)的提取效果。對粉碎的方法沒有特別限制，可以使用通常的研磨機或粉碎機進行研磨或粉碎。
(3)使用溶劑來浸取在工序(2)中獲得的干燥粉碎試料的工序，通過該工序可以在除去溶劑后獲得粗提取物。作為適用于本發(fā)明中的提取溶劑，可以是水溶性溶劑或非水溶性溶劑。作為水溶性溶劑，具體地可以舉出甲醇或其他低級醇，它們可以單獨使用或者與緩沖液、水組合使用。另外，作為非水溶性溶劑，具體地可以舉出乙醚、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷等。特別優(yōu)選是甲醇或乙酸乙酯，用這兩種溶劑進行提取可以獲得最高的回收率與提取率。
(4)通過除去提取溶劑和濃縮來制備粗提取物的工序，對該工序沒有特別限制，例如可以在減壓下除去溶劑。另外，在必要時也可以在減壓下將粗提取物干燥。
(5)利用柱色譜法處理在工序(4)中獲得的粗提取物以便從其中分離出具有腫瘤細胞增殖抑制作用的成分的分離工序，通過該工序可以獲得含有該成分的洗脫餾分。如有必要優(yōu)選將該工序重復(fù)操作2次以上。這時，為了判別具有抗腫瘤活性的活性餾分，可以順次地測定洗脫的各級餾分的抗腫瘤活性。
對于柱色譜法來說，可以使用公知的各種性質(zhì)的柱材料，但是在本發(fā)明中，優(yōu)選使用硅膠柱色譜法。另外，技術(shù)人員可以根據(jù)上述粗提取物的量、雜質(zhì)的含量、所希望的分離程度(純度)等適宜地選擇可供使用的硅膠的種類、粒徑、填充量、柱子長度等條件。另外，通過將硅膠柱色譜法重復(fù)操作兩次以上，可以獲得具有更高純度的活性餾分。
作為最初(第1次)的硅膠柱色譜法的洗脫溶劑，沒有特別的限制，可以是非極性溶劑、非極性溶劑與極性溶劑的組合或者僅僅是極性溶劑，它們可以單獨使用或者組合使用。在本發(fā)明中特別優(yōu)選使用正己烷-乙酸乙酯、乙酸乙酯-甲醇等的溶劑混合液，技術(shù)人員可以容易地在適宜調(diào)節(jié)這些溶劑混合物的混合比之后再加以使用。對洗脫的餾分級數(shù)沒有特別限制，只要達到可以區(qū)別出各級餾分活性變化的程度即可(具體地在實施例1中如圖1B所示，為5級左右)。在洗脫的各級餾分中，取得了活性(對腫瘤細胞具有特異增殖抑制作用的活性)最高的餾分(具體地是實施例1的圖1B中示出的F4)。
在為了取得具有更高純度的活性餾分或者為了單獨分離出活性成分的情況下，可以將該餾分再用硅膠柱色譜法處理。在此情況下優(yōu)選使用一種非極性程度更高的溶劑作為洗脫溶劑，具體地是利用二氯甲烷與甲醇的混合液，通過逐漸調(diào)節(jié)溶劑的混合比，可以獲得具有更高純度的活性餾分(具體地是實施例1的圖1B中示出的C5)。對洗脫的餾分級數(shù)沒有特別限制，只要達到可以區(qū)別出各級餾分活性變化的程度即可(具體地在實施例1中如圖1B所示為10級左右)。
(6)用色譜法從工序(5)獲得的活性餾分中單獨分離出活性成分的工序，利用該工序可以從冬蟲夏草中分離出其中所含的具有抗腫瘤活性的活性成分的化合物(1)。為了達到這一目的，可以使用各種具有高分離能力的色譜法，其中特別優(yōu)選使用薄層色譜法(以下稱為TLC)和／或高效液相色譜法(以下稱為HPLC)。作為這些色譜法中的載體，可以是順相載體或反相載體，其中特別優(yōu)選是反相載體。通過該色譜法處理，可以獲得一種在HPLC上顯示單一峰的完全純化的活性成分[化合物(Ⅰ)](圖2)?？梢岳迷谠摋l件下在HPLC上呈現(xiàn)的峰的位置(例如保持時間)或在TLC上的斑點的位置(例如Rf值)來比較并確認本發(fā)明的化合物(Ⅰ)。對于TLC載體的種類、展開溶劑或HPLC載體的種類、柱子的長度、洗脫溶劑的種類、溶劑的流量等條件，技術(shù)人員可以容易地根據(jù)通常公知的方法來選擇。
使用本發(fā)明的方法，可以從100g冬蟲夏草的子實體中獲得100mg至10mg的上述化合物(Ⅰ)，但是也可以根據(jù)需要改變提取方法，這樣也可能獲得更高的產(chǎn)量和更高的收率。
B．如上所述，用本發(fā)明的方法分離純化的在冬蟲夏草中所含的作為抗腫瘤活性成分的化合物(Ⅰ)，根據(jù)各種物理化學(xué)的測定結(jié)果(根據(jù)其性狀、各種化學(xué)特性試驗、元素分析、分子量測定、質(zhì)量分析、紅外線共振吸收光譜、紫外可見光吸收光譜、核磁共振吸收光譜及其他化學(xué)結(jié)構(gòu)分析方法等)，表明它是一種一般具有由以下通式(Ⅰ)表示的類甾族結(jié)構(gòu)的物質(zhì)。 其中，R通常是由-CO(CH2)nCH3表示的酰基(n是0～5的整數(shù))。更具體地說，R是乙?；⒈；⒍□；?、戊?；?、己?；⒏；Ｔ趯嵤├?中分離出的化合物是一種具有n=0的?；幕衔?式(Ⅱ))。根據(jù)該結(jié)構(gòu)可以認為，它是一種迄今為止尚未被人們所知的具有全新的類甾族骨架的化合物。應(yīng)予說明，該化合物也包含其異構(gòu)體(含幾何異構(gòu)體和光學(xué)異構(gòu)體)。
這些化合物也可以按照上文說明的本發(fā)明的方法獲得，但對此沒有限定。根據(jù)這些化學(xué)結(jié)構(gòu)式，利用以往公知的類甾體的化學(xué)合成方法可以較容易地設(shè)計一種合成線路并根據(jù)該線路合成出上述化合物。
C．本發(fā)明的抗腫瘤劑的特征在于，其中含有在上文A．和B．中說明的冬蟲夏草中含有的具有抗腫瘤活性的活性餾分或活性成分。也就是說，按照上述方法獲得的化合物(Ⅰ)對腫瘤細胞具有特異顯著的增殖抑制效果。作為其作用機制，可以預(yù)料，這是由于化合物(Ⅰ)能夠直接或間接地切斷腫瘤細胞的DNA的緣故。也就是說，化合物(Ⅰ)盡管對正常細胞完全不顯示增殖抑制作用，但是對腫瘤細胞卻具有特異的增殖抑制效果，因此可作為抗腫瘤劑使用。
在將化合物(Ⅰ)作為醫(yī)藥品制劑使用時，可以將其單獨使用或者與公知的抗癌劑、甾類等的治療藥組合使用，可以將其直接使用或者與公知的賦形劑一起制成錠劑、膠囊劑、注射劑、栓劑、軟膏劑、霜劑、凝膠劑、洗劑、氣霧劑、口腔劑、硬膏劑、敷劑、點眼劑等適宜的藥物劑型使用。
通?？梢园慈淼幕蚓植康?、經(jīng)口的或非經(jīng)口的方式投藥。投藥量可以根據(jù)患者的癥狀、年齡、性別等適宜地決定，通常在對成人投藥時，可以將式(Ⅰ)的化合物按照每次投藥量10～500mg左右和每天約1至數(shù)次的用量投藥。
下面示出本發(fā)明的實施例，但本發(fā)明不受下面實施例中記載的內(nèi)容的任何限制。
(實施例1)抗腫瘤活性成分的提取按照圖1B的流程進行。將100g冬蟲夏草的子實體部分置于干燥箱(溫度為45～50℃的暗處)中加熱干燥，用粉碎機粉碎后用10倍量的甲醇(W／V)浸泡24小時，將浸出液減壓濃縮。然后將粗提取物吸附于第1階段的硅膠色譜柱(35×300mm，Silica gel 60，63～100μm，Merck公司制)中，使用正己烷、1∶1的正己烷／乙酸乙酯、乙酸乙酯、1∶1的乙酸乙酯／甲醇、甲醇作為溶劑，這些溶劑的極性依次逐漸增加，分離出被1∶1的乙酸乙酯／甲醇洗脫的部分(F4層)。
然后，將F4層吸附于第2階段的硅膠色譜柱(35×300mm，Silicagel60，63～100μm，Merck)中，使用二氯甲烷與甲醇的混合液作為提取溶劑，在逐漸提高甲醇的混合比的條件下進行洗脫，獲得了C5層的洗脫部分。進而為了獲得活性成分，用正己烷／乙酸乙酯(1∶1V／V)作為展開液，使硅凝膠薄層色譜(TLC Plate Silica gel 60，F(xiàn)254，Merck公司制)展開2次以除去C5層的雜質(zhì)，回收Rf值在0．5～0．7范圍內(nèi)的試料。
然后把回收的試料添加入反相式高效液相色譜儀中，該色譜儀使用含有1％(V／V)甲醇的二氯甲烷作為洗脫溶劑，以二氧化硅柱(3．9×150mm，Nova-Pak C18，Nova Biochemicals公司制)作為柱子固定相，將洗脫溶劑的流速設(shè)定為1ml／min，將紫外光譜測定器的波長設(shè)定為254nm，獲得了完全純化的活性成分50mg。用反相色譜法對該完全純化的化合物進行分析，結(jié)果示于圖2中，在該條件下顯示出單一的峰。另外，所獲的活性成分化合物具有下述物理化學(xué)性質(zhì)(1)性狀茶褐色，油狀(室溫)(2)分子式C31H58O6(3)碎片質(zhì)譜法(FAB)(m／z)512(基峰，下同)、482、437、393、349、305、261、217、175、149、133(圖3)(4)紅外吸收光譜(cm-1)3300(OH)、1725(C=O)、1645(C=C)、1430(CH3)、1370(CH3CO)、1172(C-CO)、1138(C-O)(5)紫外吸收光譜(λmax；nm)225由這些結(jié)果可以推斷，上述獲得的化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式符合以下的式(Ⅱ)。 (試驗例1)為了證明含有從冬蟲夏草提取的活性化合物的活性餾分對腫瘤細胞的增殖具有特異的抑制作用，使用Vero和Hela細胞進行了增殖抑制作用的研究。此處，Vero是由小猴子的腎臟獲得的腫瘤細胞系統(tǒng)，Hela是由人的子宮頸獲得的腫瘤細胞系統(tǒng)。
將這些細胞用FCS-MEM培養(yǎng)基培養(yǎng)，用胰蛋白酶處理各細胞，然后用不含F(xiàn)CS的RPMI培養(yǎng)液洗滌3次。將試驗前的細胞密度調(diào)整為50000個／ml。向一塊具有96個凹孔的平底凹孔板上滴下含有各種細胞的懸浮液，每一個凹孔中滴下200μl懸浮液。
一天以后，吸取培養(yǎng)液，向試驗孔中滴下活性成分溶液200μl，向?qū)φ湛字械蜗翫MSO溶液200μl，在5％的CO2氣氛中和在37℃的溫度下培養(yǎng)3天。向每個凹孔中添加10μl作為染色試劑的Alarmer Blue試劑，進而培養(yǎng)3小時，然后根據(jù)分光學(xué)的測定(570nm和600nm)按照以下公式?jīng)Q定腫瘤細胞增殖抑制作用。
公式增殖抑制作用=100％-[(試驗孔的吸光度／對照孔的吸光度)×100％]另外，使用同樣的實驗對纖維芽細胞進行評價。結(jié)果示于圖4～圖6中。
圖4示出了活性餾分C5對腫瘤增殖細胞的抑制作用與濃度的依賴關(guān)系，可以看出，對于各種細胞都可看到與提取物用量有關(guān)的抑制作用。圖5示出了各餾分C1～C5(以及作為對照物添加的DMSO)對Vero細胞增殖的抑制作用(以細胞存活率表示)，可以看出，與對照物相比，本發(fā)明所有餾分都具有顯著的抑制作用。另外，圖6示出了各餾分C1～C5(以及作為對照物添加的DMSO)對Hela細胞增殖的抑制作用(以細胞存活率表示)，可以看出，與對照物相比，特別是C5餾分具有十分顯著的抑制作用。
從這些結(jié)果可以看出，本發(fā)明的活性餾分和活性成分對腫瘤細胞顯示特別顯著的增殖抑制作用。
(試驗例2)為了證明從冬蟲夏草提取的活性餾分對腫瘤細胞的DNA顯示特異的切斷作用和具有抗腫瘤作用，研究了該活性餾分對Hela細胞中的DNA的切斷作用。在一個φ10cm的培養(yǎng)皿中配制一種細胞密度為1×106個／ml的Hela細胞懸浮液，將其培養(yǎng)，然后向其中滴下200μl活性餾分溶液。然后分別在24、48、72小時之后各取50μl細胞，將其置于400μl的培養(yǎng)液(含有Tris-EDTA、SDS、Proteinase K)中，在5％CO2氣氛中于37℃下培養(yǎng)一夜。將其添加到鹽中，離心分離分解的蛋白質(zhì)，將上清液加入乙醇中以進行沉淀。
將該沉淀物懸浮于一種含有RNase A的Tris-EDTA緩沖溶液中，2小時后將其在瓊膠上展開，在用溴化3，8-二氨基-5-乙基-6-苯基菲啶鎓染色后將其進行電泳，在紫外光的照射下進行觀察。結(jié)果如圖7和圖8所示，可以確認在細胞核內(nèi)有染色質(zhì)凝集，另外，如圖9所示，電泳的結(jié)果也表明DNA已發(fā)生低分子量化，因此可以看出，由于活性化合物的作用，使得在腫瘤細胞內(nèi)產(chǎn)生了細胞凋亡。
工業(yè)實用性本發(fā)明可用于分離冬蟲夏草中所含的抗腫瘤活性餾分或活性成分。另外還查明了具有該活性的成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)。并且可以提供一種含有在冬蟲夏草中所含的抗腫瘤活性餾分或活性成分的抗腫瘤劑。
權(quán)利要求
1．冬蟲夏草中的抗腫瘤活性餾分和活性成分的分離方法，其特征在于，將冬蟲夏草的子實體部分干燥，再將該已干燥的子實體部分粉碎以制成干燥的粉碎試料，將該試料用水溶性溶劑提取以制成提取液，將該提取液濃縮以制成粗提取物，將該粗提取物用硅膠柱色譜法至少處理1次以分離出具有腫瘤細胞增殖抑制作用的洗脫餾分，以此作為活性餾分，然后將該活性餾分用色譜法分離純化，獲得具有腫瘤細胞增殖抑制作用的活性成分。
2．如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，上述的活性成分是一類滿足下述(1)～(5)的特性的化合物，所說特性是(1)性狀茶褐色，油狀(室溫)(2)分子式C13H58O6(3)碎片質(zhì)譜法(FAB)(m／z)512(基峰)、482、437、393、349、305、261、217、175、149、133(4)紅外吸收光譜(cm-1)3300、1725、1645、1430、1370、1172、1138(5)紫外吸收光譜(λmax；nm)225
3．如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，上述活性成分是由下述式(1)表示的化合物 式中，R是由-CO(CH2)nCH3表示的?；?，式中的n是0～5的整數(shù)。
4．含有權(quán)利要求1所述活性餾分的抗腫瘤劑。
5．含有權(quán)利要求1所述活性成分的抗腫瘤劑。
6．含有權(quán)利要求2所述化合物的抗腫瘤劑。
7．含有權(quán)利要求3所述化合物的抗腫瘤劑。
全文摘要
本發(fā)明提供一種能夠以純品狀態(tài)從冬蟲夏草中分離出具有抗腫瘤效果的化合物。進而,本發(fā)明查清了上述具有抗腫瘤效果的化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。另外,本發(fā)明的目的是提供含有該化合物的抗腫瘤劑。
文檔編號A61P35/00GK1291989SQ9980332
公開日2001年4月18日 申請日期1999年2月25日 優(yōu)先權(quán)日1998年2月27日
發(fā)明者潘臺龍, 后藤茂, 陳肇隆 申請人:久光制藥株式會社