專利名稱：具有神經(jīng)原活性的化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有神經(jīng)原活性的化合物，方法和藥物組合物。該化合物和組合物可以單獨使用或與神經(jīng)營養(yǎng)因子，如神經(jīng)生長因子聯(lián)合使用，用于治療或預(yù)防由疾病或生理外傷引起的神經(jīng)原損傷的方法中。
神經(jīng)病學(xué)疾病與神經(jīng)原細(xì)胞的死亡和損傷有關(guān)。例如，黑質(zhì)中多巴胺能神經(jīng)原的損失是帕金森氏病的病因。雖然在阿耳茨海默氏病中神經(jīng)變性的分子學(xué)機理尚未建立，但炎癥和β-淀粉蛋白和其它這類試劑的沉積會危害神經(jīng)原的功能或生存。當(dāng)患者患有大腦局部缺血或脊髓損傷時，可以觀察到大量的神經(jīng)原細(xì)胞死亡。目前，對于這些疾病還沒有令人滿意的治療方法。
一種治療神經(jīng)病學(xué)疾病的方法包括使用能夠抑制神經(jīng)原細(xì)胞死亡的藥物。最近的一種方法包括通過藥物刺激軸突突起而促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞再生。
軸突突起可以用神經(jīng)生長因子，如NGF進(jìn)行體外刺激。例如神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞系衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)證明在體內(nèi)和體外均具有神經(jīng)營養(yǎng)活性，并且目前被嘗試用于帕金森氏病的治療。胰島素和類胰島素生長因子在大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤PC12細(xì)胞中和在培養(yǎng)的交感神經(jīng)和感覺神經(jīng)原顯示具有刺激神經(jīng)生長活性[Recio-Pinto等，J.Neurosci.，6，pp.1211-1219(1986)]。胰島素和類胰島素生長因子也可在體內(nèi)和體外刺激受損的運動神經(jīng)[Near等，PNAS，pp.89，11716-11720(1992)；和Edbladh等，BrainRes.，641，pp.76-82(1994)]。類似地，成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)刺激神經(jīng)細(xì)胞繁殖[D.Gospodarowicz等，Cell Differ.，19，p.1(1986)]和生長[M.A.Walter等.，Lymphokine Cytokine Res.，12，p.135(1993)]。
但是，使用神經(jīng)生長因子治療神經(jīng)學(xué)疾病有多種缺點。它們不能快速地通過血-腦屏障。它們在血漿中不穩(wěn)定。而且它們的藥物轉(zhuǎn)遞特性也差。
最近，小分子化合物在體內(nèi)顯示有刺激軸索突起的活性。在患有神經(jīng)學(xué)疾病的患者中，這種軸突突起的刺激可以保護(hù)神經(jīng)原不再進(jìn)一步退化，并加速神經(jīng)細(xì)胞的再生。例如，雌激素具有促進(jìn)突索和樹突生長的活性，它們是生長中或受損的成人大腦中的軸突進(jìn)行相互聯(lián)系而通過神經(jīng)細(xì)胞伸出的部分[(C.Dominique Toran-Allerand等，J.Steroid Biochem.Mol.Biol.，56，pp.169-78(1996)；和B.S.McEwen等，Brain Res.Dev.Brain.Res.，87，pp.91-95(1995)]。通過給婦女服用雌激素而減緩阿耳茨海默氏病的發(fā)展。假設(shè)雌激素能夠補充NGF和其它神經(jīng)營養(yǎng)素并且因此幫助神經(jīng)原的分化和生存。
據(jù)報道具有與FK506結(jié)合蛋白(FKBP)親和并抑制該蛋白的旋轉(zhuǎn)異構(gòu)酶活性的化合物也具有神經(jīng)生長刺激活性。[Lyons等，PNAS，91，pp.3191-3195(1994)]。很多這類化合物也具有免疫抑制活性。
免疫抑制藥物，F(xiàn)K506(藤霉素)被證明在PC12細(xì)胞中刺激軸突突出和感覺神經(jīng)節(jié)時與NGF有協(xié)同作用[Lyons等，(1994)]。這些化合物對病灶的大腦局部缺血具有保護(hù)作用[J.Sharkey和S.P.Butcher，Nature，371，pp.336-339(1994)]并加速受損的坐骨神經(jīng)軸索的再生[B.Gold等，J.Neurosci.，15，pp.7509-16(1995)]。
但是，使用免疫抑制化合物顯然是有缺陷的。除危害免疫功能外，長期用這些化合物治療可導(dǎo)致腎毒性[Kopp等，J.Am.Soc.Nephrol.1，p.162(1991)]，神經(jīng)機能缺損[P.C.DeGroen等，N.Eng.J.Med.，317，p.861(1987)]和高血壓[Kahan等，N.Eng.J.Med.，321，p.1725(1989)]。
最近，與FKBP亞型結(jié)合而具有抑制旋轉(zhuǎn)異構(gòu)酶活性，但沒有免疫抑制活性的化合物被用于刺激神經(jīng)生長[見美國專利5,614,547；5,696,135；WO96/40633；WO96/40140；WO97/16190；J.P.Steiner等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，94，pp.2019-23(1997)；和G.S.Hamilton 等，Bioorg.Med.Chem.Lett.，7，pp.1785-90(1997)]。當(dāng)這些化合物被認(rèn)為避免了某些不期望的具有免疫抑制的FKBP結(jié)合化合物的副作用時，它們?nèi)匀慌cFKBP結(jié)合并且抑制其旋轉(zhuǎn)異構(gòu)酶活性。后者的特性仍然導(dǎo)致了不希望的由于FKBP在哺乳動物體內(nèi)的作用引起的副作用。
令人驚奇地，現(xiàn)在知道與FKBP結(jié)合并不是神經(jīng)原活性所必需的。美國未決專利申請?zhí)?8/748,447，08/748,448，08/749,114分別描述了用非FKBP結(jié)合，非-免疫抑制化合物刺激神經(jīng)細(xì)胞生長并防止神經(jīng)變性。由于與FKBP沒有親和性，這些化合物可有利地避免任何與FKBP有關(guān)的生化途徑中潛在的干擾。而且，這些化合物確實能夠通過抑制p-糖蛋白和NRP而抑制多抗藥性(“MDR”)。當(dāng)這些化合物需要刺激神經(jīng)生長和預(yù)防神經(jīng)變性的劑量小于MDR作用的劑量時，仍然需要得到對神經(jīng)原活性專一而沒有其它顯著的作用機制的化合物。
雖然很多神經(jīng)學(xué)退化疾病可以通過刺激軸突突起來治療，但具有這種特性的化合物還是相對較少。而且，新的非免疫抑制化合物也僅僅在最近才在或組織中進(jìn)行試驗。這樣，仍然需要發(fā)現(xiàn)新的能夠刺激患者的軸突突起和預(yù)防神經(jīng)變性而不引起免疫抑制，不干擾FKBP和不影響細(xì)胞泵，如p-糖蛋白或MRP的藥用化合物和組合物。
申請人發(fā)現(xiàn)了幾類不結(jié)合FKBP，不抑制MDR，但具有有效的神經(jīng)原活性的化合物。
此處所用術(shù)語“神經(jīng)原活性”，包括損傷的神經(jīng)原的刺激，神經(jīng)原再生的刺激，神經(jīng)變性的預(yù)防和神經(jīng)學(xué)疾病的治療。本發(fā)明化合物同時具有外周神經(jīng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)活性。
有兩類亞結(jié)構(gòu)的化合物落入WO92/21313公開的化合物通式中。這些化合物的特征是具有下式結(jié)構(gòu)
本發(fā)明的另外兩類化合物具有下列通式
本發(fā)明也包括任何式(I)至(IV)化合物的藥用衍生物。
在每類化合物中，A和B分別選自氫原子，Ar，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，或Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；其中A或B中所述烷基，鏈烯基或炔基鏈上任何一個CH2基均可以被O，S，S(O)，S(O)2或N(R)替代；其中R選自氫原子，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；Ar選自苯基，1-萘基，2-萘基，茚基，薁基(azulenyl)，芴基，蒽基，2-呋喃基，3-呋喃基，2-噻吩基，3-噻吩基，2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基，吡咯基，噁唑基，噻唑基，咪唑基，吡唑基(pyraxolyl)，2-吡唑啉基，吡唑烷基，異噁唑基，異噻唑基，1，2，3-噁二唑基，1，2，3-三唑基，1，2，3-噻二唑基，1，3，4-噻二唑基，1，2，4-三唑基，1，2，4-噁二唑基，1，2，4-噻二唑基，苯并噁唑基，噠嗪基，嘧啶基，吡嗪基，1，3，5-三嗪基，1，3，5-三噻嗪基(trithianyl)，中氮茚基，吲哚基，異吲哚基，3H-吲哚基，二氫吲哚基，苯并[b]呋喃基，苯并[b]噻吩基，1H-吲唑基，苯并咪唑基，苯并噻唑基，嘌呤基，4H-喹嗪基，喹啉基，1，2，3，4-四氫-異喹啉基，異喹啉基，1，2，3，4-四氫-異喹啉基，噌啉基，2，3-二氮雜萘基，喹唑啉基，喹惡啉基，1，8-二氮雜萘基，哌啶基(peridinyl)，咔唑基，吖啶基，吩嗪基，吩噻嗪基或吩惡嗪基或其它化學(xué)上可行的單環(huán)，雙環(huán)或三環(huán)系統(tǒng)，其中每個環(huán)由5至7個環(huán)原子組成并且其中每個環(huán)含有0至3個分別選自N，N(R)，O，S，S(O)，或S(O)2的雜原子，并且其中每個Ar任選地被一至三個分別選自下列的取代基所取代鹵原子，羥基，硝基，-SO3H，三氟甲基，三氟甲氧基，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基，O-[(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基]，O-[(C2-C6)直鏈或支鏈鏈烯基，O-芐基，O-苯基，1，2-亞甲二氧基，-N(R1)(R2)，羧基，N-(C1-C5-直鏈或支鏈烷基或C2-C5-直鏈或支鏈鏈烯基)甲酰氨基，N，N-二-(C1-C5-直鏈或支鏈烷基或C2-C5-直鏈或支鏈鏈烯基)甲酰氨基，N-(C1-C5-直鏈或支鏈烷基或C2-C5-直鏈或支鏈鏈烯基)磺酰氨基，N，N-二-(C1-C5-直鏈或支鏈烷基或C2-C5-直鏈或支鏈鏈烯基)磺酰氨基，嗎啉基，哌啶基，O-Z，CH2-(CH2)q-Z，O-(CH2)q-Z，(CH2)q-Z-O-Z，或CH＝CH-Z；其中R1和R2分別選自(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，氫原子或芐基；或其中R1和R2與和它們相連的氮原子一起構(gòu)成5-7員雜環(huán)；Z選自4-甲氧基苯基，2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基，吡唑基(pyrazyl)，喹啉基，3，5-二甲基異噁唑基，異噁唑基，2-甲基噻唑基，噻唑基，2-噻吩基，3-噻吩基，或嘧啶基；和q是0，1，或2；X是N，O，或CH；當(dāng)X是N或CH時，Y選自氫原子，Ar，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，或Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；當(dāng)X是0時，Y是孤電子對；n是0，1或2；m是0，1或2；n+m小于4并大于0；在通式II和IV中的環(huán)是飽和的，部分不飽和的或不飽和的；在通式II和IV的環(huán)中有1至2個碳原子可以選擇地被分別選自O(shè)，S，S(O)，S(O)2或NR的雜原子替換；且通式II和IV中所述雜環(huán)可任意地與苯稠合。
J選自氫原子，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，或Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；或環(huán)己基甲基；K選自(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，或環(huán)己基甲基；其中K中所述烷基，鏈烯基或炔基鏈中的任一CH2基可被O，S，S(O)，S(O)2或N(R)替換；D選自Ar，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，或Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；其中D中所述烷基鏈中不直接與化合物中SO2相連的任一CH2基可任選地被O，S，S(O)，S(O)2或NR替換。
R3是(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，或Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；其中R3中的烷基，鏈烯基或炔基鏈中任一CH2基可任選地被O，S，S(O)，S(O)2或N(R)替換；其中R3中的烷基，鏈烯基或炔基鏈中除與氮原子相連的CH2基外的任一CH2基團(tuán)可任選地被C(O)替換，條件是在式II中，當(dāng)n是0且m是1時，R3的烷基鏈中第二個CH2基不能被C(O)替換。
此處公開的組合物包括本發(fā)明化合物，載體和選擇性的神經(jīng)原生長因子。
本文公開的刺激神經(jīng)生長和預(yù)防神經(jīng)變性的方法是單獨使用上述化合物或?qū)⑵渑c神經(jīng)原生長因子聯(lián)合使用。該方法可用于治療和預(yù)防由各種神經(jīng)學(xué)疾病和生理外傷引起的神經(jīng)損傷也可用于體外的神經(jīng)細(xì)胞再生。
申請人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)上述通式化合物具有神經(jīng)原活性而不與FKBP結(jié)合，且沒有多抗藥性逆轉(zhuǎn)活性。不受理論束縛，申請人認(rèn)為本申請公開的化合物通過增加細(xì)胞漿Ca2+濃度而發(fā)揮其神經(jīng)原活性。這可能是通過在神經(jīng)細(xì)胞胞漿內(nèi)的網(wǎng)狀質(zhì)上與鈣釋放通道，如利阿諾啶受體或肌醇1，4，5-三磷酸酯受體直接或間接相互作用取得的。
這樣，根據(jù)一個具體方案，本發(fā)明提供了通過使具有下列特性的化合物與神經(jīng)細(xì)胞接觸而刺激神經(jīng)生長或預(yù)防神經(jīng)變性的方法a.增加細(xì)胞漿Ca2+濃度或與利阿諾啶受體結(jié)合；b.不與FKBP結(jié)合；且c.不具有MDR逆轉(zhuǎn)活性。
根據(jù)相關(guān)的方案，本發(fā)明提供具有下列特性的化合物a.具有神經(jīng)原活性；b.能夠增加細(xì)胞漿Ca2+濃度或與利阿諾啶受體結(jié)合；c.不與FKBP結(jié)合；且d.不具有MDR逆轉(zhuǎn)活性。
此處所用術(shù)語“增加細(xì)胞漿Ca2+濃度”是指在上述化合物存在下與適宜的對照物相比在下述的單通道記錄測定試驗中記錄的通道電流有明顯的增加。另外，此處所用術(shù)語“增加細(xì)胞漿Ca2+濃度”也可以是指在此處所述的細(xì)胞測定中的熒光光譜中有明顯的位移。
此處所用術(shù)語“與利阿諾啶受體結(jié)合”是指在下述測定中化合物能夠?qū)Ｒ坏嘏c利阿諾啶匹配而結(jié)合到微粒體上。
此處所用術(shù)語“不與FKBP結(jié)合”是指化合物在至少一個下述的旋轉(zhuǎn)異構(gòu)酶抑制測定中具有10μM或更高的Ki值。
此處所用術(shù)語“不具有DMR逆轉(zhuǎn)活性”是指在至少一個下述MDR測定中在濃度為2.5μM時，化合物具有的MDR比例小于7.0優(yōu)選小于3.0。
單通道記錄實驗是用于測定本發(fā)明化合物引起的細(xì)胞漿Ca2+濃度的必要增加。該實驗按照E.Kaftan等在CirculationResearch，78，p p.990-997(1996)中公開的方法進(jìn)行，該公開插入此引作參考。單通道記錄是在用一對通過CsCl匯合點與溶液接觸的Ag/AgCl電極夾緊時的電壓下進(jìn)行。將囊泡加入順式(cis)的槽中并與平坦的雙層脂質(zhì)融合，該脂質(zhì)是由磷脂酰乙醇胺/卵磷脂組成(3∶1，30mg/ml在葵烷中，Avanti Polar Lipid)。反式(trans)槽中含有250mMHEPES和53mMBa(OH)2，PH7.35；順式槽中含有250mMHEPES-Tris，PH7.35。將化合物溶解在甲醇中并加入順式槽中。將通道電流用雙層鉗子放大器(BC-525A，Warner Instruments)放大并記錄在VHS磁帶上(Dagen Corp)。將數(shù)據(jù)在500Hz八-極Bessel過濾器上過濾，在2KHz數(shù)字化，轉(zhuǎn)移到個人電腦上，并用pClamp型6.0(AxonInstruments)分析。在每一個化合物條件下單通道記錄至少進(jìn)行3次。
利阿諾啶結(jié)合可以通過將帶有3H-利阿諾啶的微粒體蛋白在含有36mMTris PH7.2和50mMKCl的緩沖液中在有或沒有試驗化合物存在下溫育進(jìn)行。對照的最大結(jié)合是在0.72mM ATP和36μMCaCl2存在下進(jìn)行。非特異性結(jié)合是在25μM未標(biāo)記的利阿諾啶存在下進(jìn)行。結(jié)合反應(yīng)在室溫下保溫2小時，然后在30,000xg下離心15分鐘。小丸溶解并且用閃爍計數(shù)法測定放射性。
另外，可將進(jìn)入細(xì)胞的胞漿Ca2+流變成帶有熒光的流動。例如，可以將神經(jīng)原細(xì)胞用NGF和鈣結(jié)合熒光染色劑，如Fura-2在含鈣緩沖液中培養(yǎng)。使細(xì)胞在加入本發(fā)明的試驗化合物前后均連續(xù)成像。然后將加入化合物前后的不同熒光強度以熒光單位在340nm和380nm的定量制圖。
確認(rèn)本發(fā)明化合物與FKBP12結(jié)合的Ki值為10μM或更高的試驗可以通過現(xiàn)有技術(shù)中已知的多種方法取得。特別地，可以測定這些化合物有(或沒有)抑制旋轉(zhuǎn)異構(gòu)酶的活性。這些測定發(fā)的例子是對FKBP12旋轉(zhuǎn)異構(gòu)酶抑制活性的測定可以是對人工底物--N-琥珀?；?Ala-Ala-Pro-Phe-對硝基酰苯胺的異構(gòu)化--接著進(jìn)行分光光度測定[M.W.Harding等Nature，34，pp.758-60(1989)；J.J.Siekierka等，Nature，34，341，pp.755-57(1989)；和S.T.Park等J.biol.Chem.，267，pp.3316-24(1992)]。測定包括順式底物，F(xiàn)KBP12，試驗化合物和胰凝乳蛋白酶。胰凝乳蛋白酶可以使對硝基酰苯胺從反式底物上裂開。測定釋放的對-硝基酰苯胺。
其它的FKBP結(jié)合測定包括用標(biāo)記的FK-506作報道配體的比較LH20結(jié)合試驗。這些方法描述于M.W.Harding等的Nature，341，pp.758-60(1989)和J.J.Sielierka等 Nature，341，pp.755-57(1989)中。
為了確定本發(fā)明化合物是否滿足MDR率低于7.0，有許多公開于美國專利5,543,423，5,717,092，5,726,184或5,744,485中的試驗方法可以使用，這些公開插入此引作參考。
特別地，可以用已知的對具體藥物具有抗藥性的細(xì)胞系。這些細(xì)胞系包括，但不限于L1210，P388D，HL60和MCF7細(xì)胞系。另外，也可以開發(fā)出抗藥的細(xì)胞系。將細(xì)胞系暴露于要拮抗的藥物或試驗化合物中；測定細(xì)胞的成活力并將其與暴露于有試驗化合物存在的藥物中的成活力進(jìn)行比較(“MDR率”)。
根據(jù)方案，本發(fā)明提供下式化合物及其可藥用衍生物
其中A和B分別選自氫原子，Ar，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，或Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；其中A或B中所述烷基，鏈烯基或炔基鏈上任何一個CH2基均可以被O，S，S(O)，S(O)2或N(R)替代；其中R選自氫原子，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，或(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；Ar選自苯基，1-萘基，2-萘基，茚基，薁基(azulenyl)，芴基，蒽基，2-呋喃基，3-呋喃基，2-噻吩基，3-噻吩基，2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基，吡咯基，噁唑基，噻唑基，咪唑基，吡唑基(pyraxolyl)，2-吡唑啉基，吡唑烷基，異噁唑基，異噻唑基，1，2，3-噁二唑基，1，2，3-三唑基，1，3，4-噻二唑基，1，2，4-三唑基，1，2，4-噁二唑基，1，2，4-噻二唑基，1，2，3-噻二唑基，苯并噁唑基，噠嗪基，嘧啶基，吡嗪基，1，3，5-三嗪基，1，3，5-三噻嗪基(trithianyl)基，中氮茚基，吲哚基，異吲哚基，3H-吲哚基，二氫吲哚基，苯并[b]呋喃基，苯并[b]噻吩基，1H-吲唑基，苯并咪唑基，苯并噻唑基，嘌呤基，4H-喹嗪基，喹啉基，1，2，3，4-四氫-異喹啉基，異喹啉基，1，2，3，4-四氫-異喹啉基，噌啉基，2，3-二氮雜萘基，喹唑啉基，喹惡啉基，1，8-二氮雜萘基，吡啶基，咔唑基，吖啶基，吩嗪基，吩噻嗪基或吩惡嗪基或其它化學(xué)上可行的單環(huán)，雙環(huán)或三環(huán)系統(tǒng)，其中每個環(huán)由5至7個環(huán)原子組成并且其中每個環(huán)含有0至3個分別選自N，N(R)，O，S，S(O)，或S(O)2的雜原子，并且其中每個Ar任選地被一至三個分別選自下列的取代基所取代鹵原子，羥基，硝基，-SO3H，三氟甲基，三氟甲氧基，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基，O-[(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基]，O-[(C2-C6)直鏈或支鏈鏈烯基，O-芐基，O-苯基，1，2-亞甲二氧基，-N(R1)(R2)，羧基，N-(C1-C5-直鏈或支鏈烷基，C2-C5-直鏈或支鏈鏈烯基)甲酰胺，N，N-二-(C1-C5-直鏈或支鏈烷基或C2-C5-直鏈或支鏈鏈烯基)甲?；?，N-(C1-C5-直鏈或支鏈烷基或C2-C5-直鏈或支鏈鏈烯基)磺酰氨基，N，N-二-(C1-C5-直鏈或支鏈烷基或C2-C5-直鏈或支鏈鏈烯基)磺酰氨基，嗎啉基，哌啶基，O-Z，CH2-(CH2)q-Z，O-(CH2)q-Z，(CH2)q-Z-O-Z，或CH＝CH-Z；其中R1和R2分別選自(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，氫原子或芐基；或其中R1和R2與和它們相連的氮原子一起構(gòu)成5-7員雜環(huán)；Z選自4-甲氧基苯基，2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基，吡唑基(pyrazyl)，喹啉基，3，5-二甲基異噁唑基，異噁唑基，2-甲基噻唑基，噻唑基，2-噻吩基，3-噻吩基，或嘧啶基；和q是0，1，或2；X是N，O，或C(R)；其中當(dāng)X是N或C(R)時，Y選自氫原子，Ar，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，或Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；當(dāng)X是0時，Y是孤電子對；K選自(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，或環(huán)己基甲基；其中K中所述烷基，鏈烯基或炔基鏈中的任一CH2基可被O，S，S(O)，S(O)2或N(R)替換；n是0，1或2；J選自氫原子，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，或Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；環(huán)己基甲基；且D選自Ar，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，或Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；其中D中所述烷基鏈中不直接與化合物中SO2相連的任一CH2基可任選地被O，S，S(O)，S(O)2或NR替換在式I的優(yōu)選方案中，A和B不同時為氫原子。更優(yōu)選的是A和B中至少有一個為末端被Ar(其自身可被取代或未取代)取代的(C1-C6)直鏈烷基。更優(yōu)選地，A和B中至少有一個為末端被吡啶(其自身可被取代或未取代)取代的(C1-C6)直鏈烷基。
根據(jù)另一個優(yōu)選方案是X是氮原子或氧原子的式I化合物。
在另一個優(yōu)選方案的式I化合物中，J是(C1-C3)直鏈烷基。
在式I的另一個優(yōu)選方案中，K是Ar-取代的(C1-C3)直鏈烷基。更優(yōu)選的是K為末端被未取代的苯基取代的(C1-C3)直鏈烷基。
根據(jù)另一個優(yōu)選式I方案，D選自(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，Ar，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，或Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；或-CH2-S(O)2-(C1-C4)直鏈或支鏈烷基。
更優(yōu)選地，D選自氨基苯基，硝基苯基，異丙基，芐基，氟代苯基，氰基苯基，甲氧基苯基，二甲氧基苯基，甲磺酰甲基，亞乙基苯基，二硝基苯胺基苯基，N，N-二甲基氨基苯基偶氮苯基，N，N-二甲基氨基萘基或乙酰氨基苯基。
更優(yōu)選地，D選自4-氨基苯基，2-硝基苯基，甲磺?；谆?，芐基，亞乙基苯基，4-氟苯基，4-氰基苯基，3，4-二甲氧基苯基，4-甲氧基苯基，4-(2，4-二硝基苯氨基)苯基，4-((4-(N，N-二甲基氨基)苯基)偶氮)苯基，5-(N，N-二甲基氨基)萘基或4-乙酰氨基苯基。
根據(jù)另一個優(yōu)選方案，Y是甲基。
在另一個優(yōu)選方案中，n是0。根據(jù)另一個優(yōu)選方案，本發(fā)明提供下式化合物及其藥用衍生物
其中A，B，Y，D，n和它們附屬的定義如上；m是0，1，或2；n+m小于4但大于0；在式II中的環(huán)是飽和，部分不飽和或不飽和的；在II的環(huán)中有1至2干個碳原子可任選地被分別選自O(shè)，S，S(O)，S(O)2或NR的雜原子替換；且所述式II中的環(huán)可任選地與苯稠合。
優(yōu)選地，在式II中，n是0，m是2和環(huán)是完全飽和的。
根據(jù)其它優(yōu)選的式II化合物是所述環(huán)中的一個碳原子可任選地被選自O(shè)，S，SO，或SO2的雜原子替換。
在式II化合物中各成分的方案是具有與上述式I化合物相同的定義。更優(yōu)選的式I和II化合物列于下列表1和2中
表1.式I化合物
表2.式II化合物
根據(jù)另一個方案，本發(fā)明提供下式化合物及其藥用衍生物
其中A，B，X，Y，K，J，n和其附屬的定義與式I中各定義相同；且R3是(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，或Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；其中R3中烷基，鏈烯基或炔基中的任一CH2基可以被O，S，S(O)，S(O)2或N(R)替換；并且其中R3中烷基，鏈烯基或炔基中除與氮原子相連的CH2基以外的任一CH2基可以被C(O)替換。
根據(jù)另一個方案，本發(fā)明提供下式化合物及其藥用衍生物；
其中A，B，X，Y，n，m和其附屬的基固定義如式(II)化合物；及R3定義如式(III)化合物，條件是在式IV中，當(dāng)n是0且m是1時，R3的烷基，鏈烯基或炔基鏈中的第二個CH2基不能被C(O)替換。
術(shù)語“R3的烷基鏈中的第二個CH2基”是指與氮原子相連的CH2基直接相連的CH2基(如下所示
優(yōu)選地，在式III和IV化合物中A和B中至少有一個是Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基鏈。更優(yōu)選的是A和B中至少一個是末端被苯基或吡啶基取代的(C1-C6)-烷基鏈。
根據(jù)另一個優(yōu)選的方案在式III或IV中，X是N或O。
根據(jù)另一個優(yōu)選的方案，在式III化合物中，K是Ar-取代的烷基。鏈烯基，炔基。更優(yōu)選地，K是芐基。
根據(jù)另一個優(yōu)選方案，在式III化合物，J是氫原子或烷基，優(yōu)選甲基。
在式III和IV中，R3優(yōu)選是氫原子，(C1-C6)-烷基，末端被吡啶基，或3，4，5-三甲氧基苯甲?；谆〈?C1-C6)烷基。
在式III的優(yōu)選方案中，n是0。
在優(yōu)選方案中式IV中的環(huán)是完全飽和的。
在式IV化合物的優(yōu)選方案中，m+n是1或2。甚至更優(yōu)選的是n為0而m為1或2。更優(yōu)選地，n是0且m是2。
式III和IV化合物最優(yōu)選的方案列于下列表中，并且描述于實施例表3.式III和IV化合物
本發(fā)明包括式I至IV化合物的所有光學(xué)和外消旋異構(gòu)體，及其藥用衍生物。
此處所用“藥用衍生物”是指任何可以提供(直接或間接)具有神經(jīng)原活性的本發(fā)明化合物，或其代謝產(chǎn)物或殘余物的任何藥用鹽，酯，前藥，或這些酯或前藥，能夠給患者服用的本發(fā)明化合物或其他化合物的鹽。
令人驚奇地和出人意料地，本發(fā)明的式(I)至(IV)化合物不與FKBP結(jié)合，不抑制旋轉(zhuǎn)異構(gòu)酶活性并且沒有免疫抑制作用。但是，雖然本發(fā)明化合物與已知的逆轉(zhuǎn)多抗病性化合物(見美國專利5,543,423，WO95/26337和WO94/07858)在結(jié)構(gòu)上有些類似，但本發(fā)明化合物沒有顯示抗MDR活性。這樣，本發(fā)明公開的化合物優(yōu)選具有神經(jīng)原活性，而沒有結(jié)構(gòu)類似的化合物副作用。
本發(fā)明化合物的神經(jīng)生長活性最初可以用現(xiàn)有技術(shù)中已知的多細(xì)胞培養(yǎng)試驗來測定。例如，本發(fā)明化合物在軸突突起中的試驗可以按照Lyon等在PNAS，91，pp.3191-3195(1994)中描述的方法用嗜鉻細(xì)胞瘤PC12細(xì)胞進(jìn)行。相似的試驗可以用SH-SY5Y人成神經(jīng)細(xì)胞瘤細(xì)胞進(jìn)行。另外，也可以使用此處引作參考的美國專利5,614,547或G.S.Hamilton等在Bioorg.Med.Chem.Lett.，(1997)上描述的雞背側(cè)底部神經(jīng)節(jié)試驗。
本發(fā)明化合物也可以用帕金森氏病的大鼠模型進(jìn)行體內(nèi)神經(jīng)生長活性試驗[J.P.Steiner等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，94，pp.2019-23(1997)美國專利5,721,256]或繼續(xù)用外科手術(shù)將大鼠的坐骨神經(jīng)碾碎。
根據(jù)另一個方案，本發(fā)明提供含有任意式(I)至(IV)化合物和藥用載體的組合物。優(yōu)選地，本發(fā)明的組合物可以制成制劑給哺乳動物服用(如藥物組合物)。
本發(fā)明化合物的藥用鹽也可以用于該組合物中，這些鹽優(yōu)選是從無機或有機酸或堿衍生的。與酸形成的鹽包括下列乙酸鹽，己二酸鹽，藻酸鹽，天門冬氨酸鹽，苯甲酸鹽，苯磺酸鹽，硫酸氫鹽，丁酸鹽，檸檬酸鹽，樟腦酸鹽，樟腦磺酸鹽，環(huán)戊烷丙酸鹽，二葡糖酸鹽，十二烷硫酸鹽，乙磺酸鹽，甲酸鹽，富馬酸鹽，葡庚糖酸鹽，甘油磷酸鹽，羥乙酸鹽，半硫酸鹽，庚酸鹽，己酸鹽，鹽酸鹽，氫溴酸酸鹽，氫碘酸鹽，2-羥基乙磺酸鹽，乳酸鹽，馬來酸鹽，丙二酸鹽，甲磺酸鹽，2-萘磺酸鹽，煙酸鹽，硝酸鹽，草酸鹽，棕櫚酸鹽，果膠酸鹽，過硫酸鹽，3-苯基丙酸鹽，磷酸鹽，苦味酸鹽，新戊酸鹽，丙酸鹽，水楊酸鹽，琥珀酸鹽，硫酸鹽，酒石酸鹽，硫氰酸鹽，甲苯磺酸鹽和十一烷酸鹽。其它酸，如草酸，雖然其本身不可藥用，但可以用與制備用于獲得本發(fā)明化合物及其藥用加成鹽的中間體的鹽。
堿鹽包括銨鹽，堿金屬鹽，如鈉鹽和鉀鹽，堿土金屬鹽，如鈣鹽和鎂鹽，與有機堿所成的鹽，如二環(huán)己胺鹽，N-甲基-D-葡糖胺，和與氨基酸所成的鹽，如精氨酸，賴氨酸和N-(C1-4烷基)4+鹽。
而且，堿性含氮基團(tuán)可以用一些試劑季銨化，這些試劑例如是低級烷基鹵化物，如氯，溴和碘甲烷，乙烷，丙烷和丁烷；二烷基硫酸酯，如二甲基，二乙基，二丁基和二戊基硫酸酯，長鏈鹵化物，如癸基，月桂基肉豆蔻基和硬脂?；然?，溴化物和碘化物，芳烷基鹵化物，如芐基和苯乙基溴化物等等。因此可得到水或油溶性或分散產(chǎn)品。
本發(fā)明方法和組合物中的化合物也可以通過添加適宜的功能基的修飾以增強選擇的生物活性。這種修飾是現(xiàn)有技術(shù)中已知的并包括那些增加生物滲透進(jìn)入所給的生物系統(tǒng)(如血液，淋巴系統(tǒng)，中樞神經(jīng)系統(tǒng))以增加口服的生物利用度，增加允許注射的溶解性，改變代謝和改變排泄率的修飾。
可用于這些藥用組合物中的藥用載體包括，但不限于，離子交換劑，礬土，硬脂酸鋁，卵磷脂，自-乳化藥物轉(zhuǎn)遞系統(tǒng)(SEDDS)如dα-生育酚，聚乙二醇1000琥珀酸酯，或TPGS，可用于藥物制劑中的表面活性劑例如可以是吐溫或其它類似聚合物轉(zhuǎn)遞基質(zhì)，血清蛋白，如人血清白蛋白，明膠，緩沖物質(zhì)如磷酸鹽，甘氨酸，山梨酸，山梨酸鉀，飽和植物脂肪酸部分甘油酯，水，鹽或電解質(zhì)，如魚精蛋白硫酸鹽，磷酸氫二鈉，磷酸氫鉀，氯化鈉，鋅鹽，膠質(zhì)硅，三硅酸鎂，聚乙烯吡咯烷酮，聚乳酸，聚乙?；垡叶妓幔瑱幟仕?，纖維素-物質(zhì)，如HPC和HPMC，聚乙二醇，羧甲基纖維素鈉，聚丙烯酸脂，蠟，聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物，聚乙二醇，羊毛脂。環(huán)糊精，如α-，β-，和γ-環(huán)糊精，或化學(xué)修飾衍生物如羥基烷基環(huán)糊精，包括2-和3-羥基丙基-β-環(huán)糊精，或其它可增溶的衍生物也優(yōu)選用于增強本發(fā)明化合物的傳遞。
根據(jù)另一個方案，本發(fā)明的藥物組合物還可以包括神經(jīng)營養(yǎng)因子。此處所用術(shù)語“神經(jīng)營養(yǎng)因子”是指能夠刺激神經(jīng)組織生長或繁殖的化合物。用于本發(fā)明的術(shù)語“神經(jīng)營養(yǎng)因子”不包括此處所述的化合物。
現(xiàn)有技術(shù)中已經(jīng)鑒定了大量神經(jīng)營養(yǎng)因子并且這些因子中的任意化合物均可用于本發(fā)明的組合物中。這些神經(jīng)營養(yǎng)因子包括，但不限于，神經(jīng)生長因子(NGF)，胰島素因子生長因子(IGF-1)和其活性切斷衍生物如gIGF-1，酸性和堿性纖維原細(xì)胞生長因子(分別為aFGF和bFGF)，血小板-衍生生長因子(PDGF)，大腦衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)，纖毛神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞系衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)，神經(jīng)營養(yǎng)素-3(NT-3)，神經(jīng)營養(yǎng)素4/5(NT-4/5)，或WO97/36869，WO96/41609，WO97/16190，WO96/40633，WO97/18828，WO96/40140或WO98/13355中描述的任意化合物。本發(fā)明組合物中最優(yōu)選的神經(jīng)營養(yǎng)因子是NGF。
本發(fā)明的組合物可以口服，非腸道給藥，通過吸入噴霧，局部給藥，直腸給藥，鼻給藥，口腔給藥，陰道給藥或通過輸液給藥。此處所用術(shù)語“非腸道”包括皮下注射，靜脈注射，肌肉注射，關(guān)節(jié)內(nèi)給藥，滑液內(nèi)給藥，膜給藥，鞘內(nèi)給藥，病灶內(nèi)給藥(intralesional)和顱骨內(nèi)注射或輸液技術(shù)。優(yōu)選地，組合物通過口服，腹膜內(nèi)或靜脈內(nèi)給藥。
本發(fā)明的藥物組合物可以含有任意常規(guī)的無毒藥用載體，輔料或載體。在某些情況下，可以用藥用酸，堿或緩沖液調(diào)節(jié)制劑的PH以增強制劑的化合物或其傳遞形式的穩(wěn)定性。
本發(fā)明組合物的無菌注射形式可以是水溶液或油質(zhì)懸浮液。這些懸浮液可以根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)中的已知技術(shù)用適宜的分散劑或潤濕劑和懸浮劑配制。無菌可注射制劑可以是在無毒非腸道用稀釋劑或溶劑中的無菌可注射液或或懸浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液?？山邮艿妮d體和溶劑可以用水，林格溶液和去離子氯化鈉溶液。此外，無菌不揮發(fā)油是常用的溶劑或懸浮介質(zhì)。為此目的，任何無味不揮發(fā)油都可使用，包括合成的單-或雙-甘油。脂肪酸，如油酸和其甘油衍生物可用于注射制劑中，作為天然藥用油，如橄欖油或蓖麻油，特別是被聚氧乙基化后。這些油溶液或懸浮液也可以含有長鏈醇稀釋劑或分散劑，如Ph.Helv或類似的醇。
本發(fā)明的藥物組合物可以以任何可口服的劑型口服給藥，包括，但不限于，膠囊，片劑，水懸浮液或水溶液。對于用于口服的片劑，常用的載體包括乳糖，玉米淀粉，磷酸二鈣鹽和微晶纖維素(Avicel)。潤滑劑，如硬脂酸鎂和滑石粉也可經(jīng)常加入。對于口服的膠囊，可用的稀釋劑包括乳糖，干玉米淀粉和TPGS，也可使用其它用于片劑中的稀釋劑。對于口服的軟膠囊(填充本發(fā)明化合物的懸浮液或溶液)，可用的稀釋劑包括PEG400，TPGS，聚乙二醇，阿拉伯醇，Gelucre，Transcutol，PVP和乙酸鈉。當(dāng)口服水懸浮液時，可將活性成分與乳化劑和懸浮劑混合，如CMC鈉，甲基纖維素，膠質(zhì)和明膠。如果需要，可以加入甜味劑和/或調(diào)味劑和/或調(diào)色劑。
此外，本發(fā)明的藥物組合物可以以栓劑的形式直腸給藥?？梢酝ㄟ^將試劑與適宜的無-刺激在室溫為固體但在直腸溫度下為液體的賦形劑混合而制備，該栓劑因此在直腸可以熔化而釋放出藥物。這種材料包括可可脂，蜂蠟，明膠，甘油和聚乙二醇。
本發(fā)明的藥物組合物可以局部給藥，特別是當(dāng)需治療的部位包括通過局部使用而易于吸收的體表和組織時，包括眼部疾病，皮膚病，或下腸道。適宜的局部給藥制劑應(yīng)制成適于這些體表或組織的形式。
對于下腸道的局部使用可以制成直腸栓劑(見上述)或適宜的灌腸制劑。也可以使用局部透皮膏。
對于局部使用，藥物組合物可以制成適宜的含有活性成分懸浮于或溶解于一種或多種載體中軟膏。用于本發(fā)明化合物局部給藥的載體包括，但不限于，礦物油，液體凡士林，白凡士林，聚乙二醇，聚氧乙烯，聚氧丙烯化合物，乳化蠟，硬脂酸，硬脂酸鯨蠟酯，鯨蠟醇，羊毛脂，氫氧化鎂，高嶺土和水。另外，藥物組合物可以制成含有活性成分懸浮于或溶解于一種或多種藥用載體中的洗液或乳膏。適宜的載體包括，但不限于，礦物油，山梨醇單硬脂酸酯，聚山梨酸酯60，鯨蠟酯，蠟，鯨蠟醇，2-辛基十二烷醇，芐醇和水。
對于眼內(nèi)用藥，藥物組合物可以制備成微?；脑诘葷B的，調(diào)節(jié)了PH的滅菌鹽水中的懸浮液，或優(yōu)選在等滲的，調(diào)節(jié)了PH的滅菌鹽水中的溶液，并且加或不加防腐劑如苯甲羥胺氯化物。此外，對于眼內(nèi)使用，藥物組合物可以制成軟膏如凡士林軟膏。
本發(fā)明的藥物組合物可以鼻氣霧劑或吸入劑形式給藥。這些組合物可以根據(jù)藥物制劑領(lǐng)域中已知的常規(guī)技術(shù)制備并可以制備成在鹽水中的溶液，用芐醇或其它適宜的防腐劑，可以提高生物利用度的吸收促進(jìn)劑，碳氟化合物，和/或其它常規(guī)的增溶劑或分散劑。
與載體材料混合以制備單位劑量形式的化合物和神經(jīng)營養(yǎng)因子(在這類組合物中含有神經(jīng)營養(yǎng)因子)的用量取決于所治療的宿主，具體的給藥模式。優(yōu)選地，本發(fā)明組合物可以制成含有可以服用的本發(fā)明化合物在0.01-10mg/kg體重/天的制劑形式。更優(yōu)選地，劑量范圍在0.1-10mg/kg體重/天。
這些組合物含有神經(jīng)營養(yǎng)因子，這些因子和本發(fā)明化合物協(xié)同作用以刺激軸突突起或預(yù)防神經(jīng)變性。因此，在該組合物中神經(jīng)營養(yǎng)因子的用量少于單獨使用該因子治療所需要的量。在該組合物中可服用的神經(jīng)營養(yǎng)因子的劑量范圍在0.01-10mg/kg體重/天。
可以理解對于每一個具體患者的具體劑量和治療情況取決于多種因素，包括所用的具體化合物的活性，年齡，體重，一般健康狀況，性別，飲食，服藥時間，排泄率，聯(lián)合用藥，治療醫(yī)生的判斷和所治療的疾病的嚴(yán)重程度?；钚猿煞值挠昧咳Q于具體化合物和神組合物中的神經(jīng)營養(yǎng)因子。
根據(jù)另一個方案，本發(fā)明提供刺激軸突突起和神經(jīng)生長并預(yù)防神經(jīng)變性的方法。對于該方案，本方法用于刺激患者的軸突突起和神經(jīng)生長并預(yù)防神經(jīng)變性并且是提供給患者服用含有本發(fā)明任意化合物和藥用載體的的藥物組合物而實現(xiàn)的。這些方法中所用化合物的量在0.01至10mg/kg體重/天。
該方法用于治療神經(jīng)損傷和預(yù)防有多種疾病或生理損傷引起的神經(jīng)變性。這包括但不限于，三叉神經(jīng)痛，舌咽神經(jīng)痛，貝爾氏癱瘓，重癥肌無力，肌肉營養(yǎng)不良，肌肉損傷，漸行性肌肉萎縮，漸行性球根遺傳肌萎縮，脫腸(herniated)，破裂的或下垂的無脊椎板綜合癥，子宮頸脊椎關(guān)節(jié)強硬，神經(jīng)叢疾病，胸口破損綜合癥，外周神經(jīng)病，如由鉛，氨苯砜，壁虱，或紫質(zhì)癥引起的神經(jīng)病，或其它外周髓磷脂疾病，阿爾茨海默氏疾病，古蘭-貝爾(Gullain-Barre)綜合癥，帕金森病和其它帕金森神經(jīng)機能障礙疾病，ALS，多硬化癥，其它中樞髓磷脂疾病，中風(fēng)和與中風(fēng)有關(guān)的局部缺血，神經(jīng)paropathy，其它神經(jīng)變性疾病，運動神經(jīng)元疾病，坐骨變形，與糖尿病有關(guān)的神經(jīng)病，脊椎索損傷，面部神經(jīng)變形和其它外傷，化學(xué)治療-和其它藥物-誘導(dǎo)的神經(jīng)病和亨廷頓氏疾病。
在該方案的另一方面，是用于刺激體外神經(jīng)生長的方法。為此，上述化合物或組合物可以直接用于培養(yǎng)中的神經(jīng)細(xì)胞。本發(fā)明的這一方面是用于體外神經(jīng)的再生。
根據(jù)另一方案，刺激軸突突起或預(yù)防神經(jīng)變性的方法包括給患者外加的治療步驟或有神經(jīng)營養(yǎng)因子培養(yǎng)的體外神經(jīng)細(xì)胞，這些因子如上述的本發(fā)明組合物中含有的因子。該方案包括以單劑量形式或分開的多劑量形式給患者服用化合物或神經(jīng)營養(yǎng)因子。如果用分開劑量，共同地，或在小于5小時的間隔內(nèi)連續(xù)給藥。
為了使此處所述的本發(fā)明被更完全地理解，提供下列實施例。應(yīng)該理解這些實施例僅有說明的目的而不以任何方式限制本發(fā)明。一般方法質(zhì)子核磁共振(1H NMR)譜是在Bruker AMX 500儀在500MHz測定的?；瘜W(xué)位移是相對于Me2Si每百萬部分給出的。高效液相色譜分析是在Hewlett-Packard 1050液相色譜儀上進(jìn)行的。
實施例1N-(4-氨基苯磺酰氨基)-(S)-哌啶-2-甲酸-2-(N-甲基)-2-吡啶基乙基)酰胺N-(4-氨基苯磺酰氨基)-(S)-哌啶-2-甲酸-2-(N-甲基)-2-吡啶基乙基)酰胺化合物的合成如下。A.(S)-哌啶-1，2-二甲酸-1-(叔丁酯)-2-((N甲基)-2-吡啶基乙基)酰胺
在(S)-哌啶-1，2-二甲酸-1-叔丁基酯(5.0g，21.8mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中加入EDC(6.0g，191.71，31.2mmol)隨后加入2-(2-甲基氨基乙基)吡啶(3.0g，22mmol)并將混合物室溫攪拌24小時。
將溶液用200ml乙酸乙酯和水(50ml)稀釋。將水層通過加入2NNaOH調(diào)節(jié)PH至12-13以使其為堿性。將分離的有機層用無水MgSO4干燥并減壓濃縮。將粗品通過中壓液相色譜純化用1∶99甲醇/二氯甲烷然后用2∶98甲醇/二氯甲烷溶液梯度洗脫得到3.8g(收率50％)的無色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.49(5∶95甲醇/二氯甲烷)，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。B.(S)-哌啶-2-甲酸-2-((N甲基)-2-吡啶基乙基)酰胺
在步驟A所得化合物(3.8g，10.9mmol)的二氯甲烷(25ml)溶液中加入三氟乙酸(10ml，130mmol)。將混合物室溫攪拌2小時。將溶液減壓濃縮至干。將殘余物溶解在乙酸乙酯(200ml)和水(50ml)中。將水層通過加入2N NaOH至PH14-15而堿化。
將分離的有機層用無水MgSO4干燥并減壓濃縮。將粗品通過中壓液相色譜純化用1∶99甲醇/二氯甲烷然后用1∶10∶90NH4OH/甲醇/二氯甲烷溶液梯度洗脫得到2.2g(收率81％)的無色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.11(1∶10∶90 NH4OH/甲醇/二氯甲烷)，HPLC∶Rt＝5.22分，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。
C.N-(4-硝基苯磺酰氨基)-(S)-哌啶-2-甲酸-2-((N甲基)-2-吡啶基乙基)酰胺
在步驟B所得化合物(200mg，0.81mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中加入三乙胺(2.0ml，101.19，19.8mmol)然后加入4-硝基苯磺酰氯(260mg，1.22mmol)。將混合物室溫攪拌24小時。將溶液用100ml乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉溶液(50ml)稀釋。將分離的有機層用無水MgSO4干燥并減壓濃縮。將粗品通過中壓液相色譜純化用1∶99甲醇/二氯甲烷溶液洗脫得到273mg(收率78％)的黃色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.57(5∶95甲醇/二氯甲烷)，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。D.N-(4-氨基苯磺酰氨基)-(S)-哌啶-2-甲酸-2-((N甲基)-2-吡啶基乙基)酰胺(化合物1)
將步驟C所得化合物(273mg，0.63mmol)的乙酸乙酯(10ml)和乙醇(10ml)溶液在室溫下用150mg10％鈀炭和微陽性氫氣壓下氫化處理24小時。將混合物過濾并真空濃縮，將粗品通過中壓液相色譜純化用二氯甲烷然后2∶98甲醇/二氯甲烷再用0.5∶5∶95的NH4OH/甲醇/二氯甲烷溶液洗脫得到102mg(收率40％)的黃色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.36(1∶10∶90 NH4OH/甲醇/二氯甲烷)，HPLC∶Rt＝6.86分，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。
實施例2(S)-(N-甲基)-2-(甲基-(4-氨基-苯磺酰氨基))-3-苯基-N-(2-(吡啶-2-基)乙基)丙酰胺(S)-(N-甲基)-2-(甲基-(4-氨基-苯磺酰氨基))-3-苯基-N-(2-(吡啶-2-基)乙基)丙酰胺(化合物2)的合成如下。A.(S)-(N-甲基)-2-(甲基-2-叔丁氧基羰基)氨基-3-苯基-N-(3-吡啶-4-基)丙基丁基丙酰胺
在Boc-(N-甲基)苯基丙氨酸(5.0g，17.8mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液中加入EDC(6.0g，191.71，31.2mmol)然后加入2-(2-甲基氨基乙基)吡啶(2.5g，18.4mmol)。將混合物室溫攪拌24小時。將溶液用200ml乙酸乙酯和水(50ml)稀釋。將水層通過加入2N NaOH至PH12而堿化。將分離的有機層用無水MgSO4干燥并減壓濃縮。將粗品通過中壓液相色譜純化用1∶99甲醇/二氯甲烷然后2∶98的甲醇/二氯甲烷溶液洗脫得到2.83g(收率40％)的無色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.56(5∶95甲醇/二氯甲烷)，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。B.(N-甲基)-2-(甲基氨基)-3-苯基-N-(2-(吡啶-2-基)乙基)丙酰胺
在步驟A所得化合物(2.83g，7.1mmol)的二氯甲烷(25ml)溶液中加入三氟乙酸(10ml，130mmol)。將混合物室溫攪拌2小時。將溶液減壓濃縮至干。將殘余物溶解在乙酸乙酯(200ml)和水(50ml)中。將水層通過加入2N NaOH至PH14-15而堿化。將分離的有機層用無水MgSO4干燥并減壓濃縮。將粗品通過中壓液相色譜純化用1∶99甲醇/二氯甲烷然后1∶10∶90的NH4OH/甲醇/二氯甲烷溶液洗脫得到1.53g(收率75％)的無色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.70(1∶10∶90的NH4OH/甲醇/二氯甲烷)，HPLC∶Rt＝5.54分，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。C.(S)-(N-甲基)-2-(甲基-(4-硝基-苯磺酰氨基))-3-苯基-N-(2-(吡啶-2-基)乙基)丙酰胺
在步驟B所得化合物(300mg，1.05mmol)的二氯甲烷(15ml)溶液中加入三乙胺(2.0ml，101.19，19.8mmol)然后加入4-硝基苯磺酰氯(330mg，1.56mmol)。將混合物室溫攪拌24小時。將溶液用100ml乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉溶液(50ml)稀釋。將分離的有機層用無水MgSO4干燥并減壓濃縮。將粗品通過中壓液相色譜純化用二氯甲烷然后1∶99甲醇/二氯甲烷溶液梯度洗脫得到453mg(收率89％)的黃色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.63(5∶95甲醇/二氯甲烷)，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。D.(S)-(N-甲基)-2-(甲基-(4-氨基-苯磺酰氨基))-3-苯基-N-(2-(吡啶-2-基)乙基)丙酰胺(化合物2)
將步驟C所得化合物(453mg，0.94mmol)的乙酸乙酯(20ml)溶液在室溫下用150mg10％鈀炭在微陽性氫氣壓下氫化處理24小時。將混合物過濾并真空濃縮，將粗品通過中壓液相色譜純化用二氯甲烷然后2∶98甲醇/二氯甲烷再用0.5∶5∶95的NH4OH/甲醇/二氯甲烷溶液洗脫得到194mg(收率46％)的黃色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.46(1∶10∶90 NH4OH/甲醇/二氯甲烷)，HPLC∶Rt＝9.04分，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。
實施例3N-(4-硝基苯磺酰氨基)-(S)-哌啶-2-甲酸-(N甲基)-3-(吡啶-3-基)丙基)酰胺N-(4-硝基苯磺酰氨基)-(S)-哌啶-2-甲酸-(N甲基)-3-(吡啶-3-基)丙基)酰胺(化合物3)的合成如下所述。A.3-(3-溴丙基)-吡啶
在3-吡啶丙醇(9.50g，69.3mmol)的DMF(50ml)溶液中加入三苯基膦(20.0g，76.2mmol)然后加入溴(5.4ml，104mmol)。將混合物室溫攪拌48小時。將溶液用200ml水稀釋并將水層通過加入2N NaOH至PH12-13而堿化。將有機層溶解在乙酸乙酯(200ml)中。將分離的有機層用無水MgSO4干燥并減壓濃縮。將粗品通過中壓液相色譜純化用二氯甲烷然后1∶99甲醇/二氯甲烷溶液梯度洗脫得到11.8g(收率85％)的桔黃色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.8(3∶97甲醇/二氯甲烷)，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。B.N-甲基-3-(3-氨基丙基)-吡啶
在步驟A所得化合物(11.8g，59mmol)的甲醇(50ml)溶液中在10至15分鐘內(nèi)吹入N-甲基胺氣體直至飽和。將燒瓶密封并將混合物室溫攪拌過夜。將混合物真空濃縮并將殘余物溶解在乙酸乙酯和水中。將水層通過加入2N NaOH至PH14-15而堿化。將有機層溶解在乙酸乙酯(250ml)中。將分離的有機層用無水MgSO4干燥并減壓濃縮。將粗品通過中壓液相色譜純化用二氯甲烷然后5∶95甲醇/二氯甲烷再用1∶10∶90的NH4OH/甲醇/二氯甲烷溶液梯度洗脫得到3.2g(收率36％)的無色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.14(1∶10∶90的NH4OH/甲醇/二氯甲烷)，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。C.N-甲基-(S)-哌啶-1，2-二甲酸-1-(叔丁酯)-3-((吡啶-3-基)-丙基)酰胺。
在(S)-哌啶-1，2-二甲酸1-叔丁酯(2.28g，9.9mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入EDC(2.0g，191.71，10.4mmol)然后加入步驟B所得化合物(11.8g，59mmol)。將混合物室溫攪拌24小時。將溶液用200ml乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉溶液(50ml)稀釋。將分離的有機層用無水MgSO4干燥并減壓濃縮。將粗品通過中壓液相色譜純化用1∶99甲醇/二氯甲烷然后5∶95甲醇/二氯甲烷溶液梯度洗脫得到1.2g(收率33％)的無色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.28(5∶95的甲醇/二氯甲烷)，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。D.(S)-哌啶-2-甲酸-((N-甲基)-3-(吡啶-3-基)丙基)酰胺
在步驟C所得化合物(1.2g，3.3mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入三氟乙酸(10ml，130mmol)。將混合物室溫攪拌3小時。將溶液減壓濃縮至干。將殘余物溶解在乙酸乙酯(200ml)和2NNaOH(50ml)中。將分離的有機層用無水MgSO4干燥并減壓濃縮。將粗品通過中壓液相色譜純化用5∶95甲醇/二氯甲烷然后1∶10∶90的NH4OH/甲醇/二氯甲烷溶液梯度洗脫得到850mg(收率98％)的無色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.17(1∶10∶90的NH4OH/甲醇/二氯甲烷)，HPLC＝6.67分，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。E.N-(4-硝基苯磺酰氨基)-(S)-哌啶-2-甲酸-((N-甲基)-3-(吡啶-3-基)丙基)酰胺
在步驟D所得化合物(250mg，0.96mmol)的二氯甲烷(15ml)溶液中加入三乙胺(2.0ml，101.19，19.8mmol)然后加入4-硝基苯磺酰氯(300mg，1.42mmol)。將混合物室溫攪拌24小時。將溶液用200ml乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉溶液(50ml)稀釋。將分離的有機層用無水MgSO4干燥并減壓濃縮。將粗品通過中壓液相色譜純化用二氯甲烷然后1∶99甲醇/二氯甲烷溶液梯度洗脫得到165mg(收率37％)的黃色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.52(5∶95的甲醇/二氯甲烷)，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。F.N-(4-硝基苯磺酰氨基)-(S)-哌啶-2-甲酸-((N-甲基)-3-(吡啶-3-基)丙基)酰胺(化合物3)。
在步驟E所得化合物(165mg，0.35mmol)的乙酸乙酯(20ml)溶液在室溫下用150mg10％鈀炭在微陽性氫氣壓下氫化處理24小時。將混合物過濾并真空濃縮，將粗品通過中壓液相色譜純化用二氯甲烷然后2∶98甲醇/二氯甲烷再用0.5∶5∶95的NH4OH/甲醇/二氯甲烷溶液洗脫得到60mg(收率41％)的黃色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.20(5∶95甲醇/二氯甲烷)，HPLC∶Rt＝7.25分，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。
實施例4(S)-(N-甲基)-2-(甲基-(4-氨基-苯磺酰氨基))-3-苯基-N-(4-吡啶-3-基)-1-(3-(吡啶-3-基)丙基)丁基)丙酰胺(S)-(N-甲基)-2-(甲基-(4-氨基-苯磺酰氨基))-3-苯基-N-(4-吡啶-3-基)-1-(3-(吡啶-3-基)丙基)丁基)丙酰胺的合成如下。A.(S)-(N-甲基)-2-(甲基-2-叔丁氧羰基)氨基-3-苯基-N-(4-吡啶-3基)-1-(3-(吡啶-3-基)丙基)丁基)丙酰胺
在Boc-(N-甲基)苯基丙氨酸(1.42g，5.1mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中加入EDC(0.98g，191.71，5.1mmol)然后加入N-甲基-1，7-雙(3-吡啶基)-4-庚胺(1.2g，18.4mmol)。將混合物室溫攪拌24小時。將溶液用100ml乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉溶液(50ml)稀釋。將分離的有機層用無水MgSO4干燥并減壓濃縮。將粗品通過中壓液相色譜純化用2∶98甲醇/二氯甲烷溶液梯度洗脫得到970mg(收率42％)的無色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.51(5∶95的甲醇/二氯甲烷)，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。B.(S)-(N-甲基)-2-(甲基氨基)-3-苯基-N-(3-吡啶-4-基)-1-(4-(吡啶-3基)丙基)丁基)丙酰胺。
在步驟A所得化合物(5.0g，9.2mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入三氟乙酸(20ml，260mmol)。將混合物室溫攪拌3小時。將溶液減壓濃縮至干。將殘余物溶解在乙酸乙酯(200ml)和飽和碳酸氫鈉溶液(100ml)中。將分離的有機層用無水MgSO4干燥并減壓濃縮。將粗品通過中壓液相色譜純化用1∶99甲醇/二氯甲烷然后5∶95的甲醇/二氯甲烷再用1∶10∶90的NH4OH/甲醇/二氯甲烷溶液梯度洗脫得到3.12g(收率76％)的無色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.38(1∶10∶90的NH4OH/甲醇/二氯甲烷)，HPLC∶Rt＝9.52分，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。C.(S)-(N-甲基)-2-(甲基-4-硝基苯磺酰氨基)-3-苯基-N-(4-(吡啶-3-基)-1-(3-(吡啶-3-基)丙基)丁基)丙酰胺。
在步驟B所得化合物(1.5g，3.4mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液中加入三乙胺(5.0ml，101.19，35.8mmol)然后再加入4-硝基苯磺酰氯(1.0g，4.7mmol)。然后將混合物室溫攪拌24小時。將溶液用150ml乙酸乙酯稀釋并用水(50ml)洗滌。將分離的有機層用無水MgSO4干燥并減壓濃縮。將粗品通過中壓液相色譜純化用二氯甲烷然后1∶99甲醇/二氯甲烷溶液梯度洗脫得到1.75g(收率83％)的黃色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.67(5∶95的甲醇/二氯甲烷)，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。D.(S)-(N-甲基)-2-(甲基-(4-氨基-苯磺酰氨基))-3-苯基-N-(4-吡啶-3-基)-1-(3-(吡啶-3-基)丙基)丁基)丙酰胺(化合物4)
將步驟C所得化合物(1.75g，2.78mmol)的乙酸乙酯(50ml)溶液在室溫下用1.0g10％鈀炭在微陽性氫氣壓下氫化處理24小時。將混合物過濾并真空濃縮，將粗品通過中壓液相色譜純化用二氯甲烷然后1∶99甲醇/二氯甲烷再用3∶97的甲醇/二氯甲烷溶液洗脫得到0.79mg(收率47％)的黃色油狀標(biāo)題化合物。TLC∶Rf＝0.36(1∶10∶90的NH4OH/甲醇/二氯甲烷)，HPLC∶Rt＝7.97分，[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。
本發(fā)明化合物，包括列于上述表1中的化合物的合成可以通過對實施例1-4列出的合成方案并用現(xiàn)有技術(shù)中已知的適宜試劑進(jìn)行修飾而完成。
實施例5(S)-哌啶-2-甲酸，(4-吡啶基甲基)酰胺，檸檬酸鹽(S)-哌啶-2-甲酸-1-(叔丁酯)-2-(4-吡啶基甲基)酰胺，檸檬酸鹽(化合物1)如下。A.(S)-哌啶-1，2-二甲酸-1-(叔丁酯)-2-(4-吡啶基甲基)酰胺
按照實施例1中A部分的方法，將(S)-哌啶-1，2-二甲酸-1-(叔丁酯)(2.0g，8.72mmol)和4-(氨基甲基)吡啶(3.18g，29.41mmol)轉(zhuǎn)化成0.75g(收率27％)的產(chǎn)品。[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。B.(S)-哌啶-2-甲酸，(4-吡啶基甲基)酰胺
按照實施例1中B部分的方法，用(S)-哌啶-1-甲酸-1-(叔丁酯)-2-(4-吡啶基甲基)酰胺(0.75g，2.35mmol)得到0.49g(收率95％)標(biāo)題化合物。[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。C.(S)-哌啶-2-甲酸，(4-吡啶基甲基)酰胺，檸檬酸鹽
將步驟B所得的胺(107mg，0.48mmol)和檸檬酸(94mg，0.48mmol)的乙醇溶液加熱到60℃直至溶解。將溶液真空濃縮并將殘余物溶解在絕對乙醇中再真空濃縮至發(fā)泡。[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。
實施例6(S)-哌啶-2-甲酸，(4-吡啶基甲基)酰胺，檸檬酸鹽(S)-哌啶-1，2-二甲酸-1-(叔丁酯)-2-(3-吡啶基甲基)酰胺，檸檬酸鹽的合成如下。A.(S)-哌啶-1，2-二甲酸-1-(叔丁酯)-2-(3-吡啶基甲基)酰胺
按照實施例1中A部分的方法，將(S)-哌啶-1，2-二甲酸-1-(叔丁酯)(2.0g，8.72mmol)和3-(氨基甲基)吡啶(3.18g，29.41mmol)轉(zhuǎn)化成1.0g(收率36％)產(chǎn)品。[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。B.(S)-哌啶-2-甲酸，(3-吡啶基甲基)酰胺
按照實施例1中B部分的方法，用(S)-哌啶-1，2-二甲酸-1-(叔丁酯)-2-(3-吡啶基甲基)酰胺(1.0g，3.13mmol)得到0.56g(收率82％)的標(biāo)題化合物。[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。C.(S)-哌啶-2-甲酸，(2-吡啶基甲基)酰胺，檸檬酸鹽
將步驟B所得的胺(111mg，0.51mmol)和檸檬酸(97mg，0.51mmol)加熱至60℃直至溶解。將溶液真空濃縮并將殘余物溶解在無水乙醇中再真空濃縮至發(fā)泡。[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。
實施例7(S)-哌啶-2-甲酸-2-((N甲基)-2-吡啶基乙基)酰胺，檸檬酸鹽
按照實施例5，C部分的方法，將(S)-哌啶-2-甲酸-2-((N甲基)-2-吡啶基乙基)酰胺(實施例1，B部分產(chǎn)品)轉(zhuǎn)化成檸檬酸鹽。[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。
實施例8(S)-哌啶-2-甲酸-((N-甲基)-3-(吡啶-3-基)丙基)酰胺，檸檬酸鹽
按照實施例6，C部分的方法，將(S)-哌啶-2-甲酸-((N-甲基)-3-(吡啶-3-基)丙基)酰胺(實施例3，D部分產(chǎn)品)轉(zhuǎn)化成檸檬酸鹽。[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。
實施例9(S)-哌啶-2-甲酸，(1，7-二-吡啶-3-基)庚烷-4-基)-酯，富馬酸鹽A.(S)-哌啶-1，2-二甲酸-1-(叔丁酯)-2-(1，7-二-吡啶-3-基)庚烷-4-基)酯
在(1，7-二-吡啶-3-基)庚烷-4-醇(6.6g，24.41mmol)的THF(30ml)溶液中加入(S)-哌啶-1，2-二甲酸-1-(叔丁酯)(5.0g，21.81mmol)和EDC(4.7g，24.52mmol)然后室溫攪拌18小時。將反應(yīng)液用乙酸乙酯(200ml)稀釋并用水洗滌。將有機層用無水MgSO4干燥，真空濃縮并通過中壓液相色譜純化用1∶100甲醇/二氯甲烷溶液洗脫得到2.0g(收率20％)的標(biāo)題化合物。[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。B.(S)-哌啶-2-羧酸，(1，7-二-吡啶-3-基)庚烷-4-基)酯
按照實施例1，B部分的方法，用實施例10，A部分的化合物，(1.0g，4.30mmol)得到1.45g(收率88％)的標(biāo)題化合物。[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。C.(S)-哌啶-2-甲酸，(1，7-二-吡啶-3-基)庚烷-4-基)酯，二富馬酸鹽
按照實施例6，C部分的方法，用1當(dāng)量的胺和2當(dāng)量的富馬酸將實施例10，C部分得到的胺并且轉(zhuǎn)化成標(biāo)題化合物。[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。
實施例10(S)-1-甲基-哌啶-2-甲酸，(1，7-二-吡啶-3-基)庚烷-4-基)酯
在實施例10，B部分得到的胺(300mg，0.79mmol)和多聚甲醛(500mg)在甲醇(15ml)中的混合物加入Na(CN)BH3(500mg)。將混合物室溫攪拌65小時。將反應(yīng)物真空濃縮并溶于2N NaOH水溶液中，再用乙酸乙酯(150ml)萃取。將有機層用無水MgSO4干燥，真空濃縮并通過中壓液相色譜純化用2∶98甲醇/二氯甲烷然后0.5∶5∶95的NH4OH/甲醇/二氯甲烷溶液梯度洗脫得到230mg(收率74％)的清澈油狀標(biāo)題化合物。[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。
實施例11(S)-1-(2-甲基丙基)-哌啶-2-甲酸，(1，7-二-吡啶-3-基)庚烷-4-基)酯
按照實施例11所述方法，將實施例10，B部分所得的胺(300mg，0.79mmol)和2-甲基丙醛(1.6g，22.0mmol)在甲醇(15mml)中的混合物中加入Na(CN)BH3(500mg)。將混合物室溫攪拌65小時。將反應(yīng)物真空濃縮并溶解在2N NaOH(20ml)中再用乙酸乙酯(150ml)萃取。將有機層用無水MgSO4干燥，真空濃縮并通過中壓液相色譜純化用2∶98甲醇/二氯甲烷然后0.5∶5∶95的NH4OH/甲醇/二氯甲烷溶液梯度洗脫得到170mg(收率49％)的清澈油狀標(biāo)題化合物。[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。
實施例12(S)-1-(吡啶-4-基甲基)-哌啶-2-甲酸(1，7-二-吡啶-3-基)庚烷-4-基)酯
按照實施例11的方法，在實施例10，B部分所得的胺(300mg，0.79mmol)和4-吡啶羧甲醛(4-pyridinecarboxalhehyde)(0.5g，4.67mmol)和甲醇(15ml)的混合物中加入Na(CN)BH3(500mg)。將混合物室溫攪拌65小時。將反應(yīng)液真空濃縮并溶于2N的NaOH(20ml)水溶液中再用乙酸乙酯(150ml)萃取。將有機層用無水MgSO4干燥，真空濃縮并通過中壓液相色譜純化用2∶98甲醇/二氯甲烷然后0.5∶5∶95的NH4OH/甲醇/二氯甲烷溶液梯度洗脫得到70mg(收率19％)的清澈油狀標(biāo)題化合物。[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。
實施例13(S)-(N-甲基)-2-(甲基氨基)-3-苯基-N-(2-(吡啶-2-基)乙基)丙酰胺，檸檬酸鹽
按照實施例6，步驟C的方法，將(N-甲基)-2-(甲基氨基)-3-苯基-N-(2-(吡啶-2-基)乙基)丙酰胺(實施例2，B部分產(chǎn)品)轉(zhuǎn)化成檸檬酸鹽。[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)一致。
實施例14(S)-(N-甲基)-2-(甲基氨基)-3-苯基-N-(3-(吡啶-4-基)-1-(4-(吡啶-3-基)丙基)丁基)丙酰胺，檸檬酸鹽
按照實施例6，C部分的方法，將(S)-(N-甲基)-2-(甲基氨基)-3-苯基-N-(3-(吡啶-4-基)-1-(4-(吡啶-3基)丙基)丁基)丙酰胺(實施例4，B部分產(chǎn)品)轉(zhuǎn)化成檸檬酸鹽。[1H]-NMR(CDCl3)與結(jié)構(gòu)-致。
實施例15旋轉(zhuǎn)異構(gòu)酶抑制試驗對FKBP酶活性的抑制通過S.T.Park等在J.Biol.Chem.，267，pp.3316-24(1992)所述的PPIase試驗確定，該公開插入此引作參考。這是胰凝乳蛋白酶-偶聯(lián)試驗其中FKBP催化將肽基質(zhì)Suc-Ala-Leu-Pro-Phe-pNA中的亮氨酸-脯氨酸鍵從順式異構(gòu)化為反式。只有反式，而不是順式可以被胰凝乳蛋白酶裂解。釋放的Phe-pNA可以通過在400nm的吸收監(jiān)控。胰凝乳蛋白酶裂解非?？煲虼隧樖降椒词降漠悩?gòu)化是限速步驟。
各反應(yīng)混合物的組成為0.1M三羥甲基氨基甲烷緩沖劑，PH7.8，15nMFKBP，30μM基質(zhì)和0.5mM至10μM稀釋在Me2SO中的試驗化合物。將混合物在15℃保溫5分鐘然后將反應(yīng)物通過加入胰凝乳蛋白酶(最終濃度為100μg/ml)初始化然后進(jìn)行分光光度測定5分鐘。反應(yīng)液總體積為1ml。沒有一個本發(fā)明化合物的Ki值小于10μM，如下表所示。表4.旋轉(zhuǎn)異構(gòu)酶的抑制<
<p>實施例16MDR敏化試驗為了證明本發(fā)明化合物沒有MDR逆轉(zhuǎn)活性使用已知的對具體藥物具有抗藥性的細(xì)胞系。
用L1210vMDRC.06或HL60/Vinc細(xì)胞進(jìn)行多抗藥性(MDR)試驗。L1210vMDRC.06是用帶有MDR1 cDNA的pHaMDR1/A逆轉(zhuǎn)錄病毒傳導(dǎo)的L1210鼠白細(xì)胞，如Pastan等在Proc.Natl.Acad.Sci.USA，85，pp.4486-4490(1988)上所述。L1210vMDRC.06多抗藥系是已經(jīng)通過在0.06μg/ml秋水仙堿中培養(yǎng)轉(zhuǎn)染細(xì)胞而進(jìn)行藥物選擇的細(xì)胞系。HL60/Vinc人早幼粒細(xì)胞白細(xì)胞系是從HL60藥物敏感母細(xì)胞衍生來的多抗藥細(xì)胞系，該母細(xì)胞是通過增加長春花新堿的濃度而選擇的。
用L1210vMDRC.06進(jìn)行的多抗藥性試驗，是在被制成1×104細(xì)胞/孔的96孔微量滴定盤上并將其暴露于有或沒有本發(fā)明化合物(0.1，0.25，0.5，1.0，或2.5μM)存在下在濃度范圍(50nM-10μM)的阿霉素中進(jìn)行的，該方法描述于U.Germann等的Anti-CancerDrugs，8，pp.125-140(1997)中。培養(yǎng)3天后，細(xì)胞的成活力可以用XTT染色評價線粒體功能而定量[Roehm等J.Immunol.Methods142，pp.257-265(1991)]。所有測定均至少重復(fù)4次。通過將單獨使用阿霉素測得的IC50和阿霉素+化合物的IC50進(jìn)行比較得出結(jié)論。計算MDR率(IC50阿霉素/IC50阿霉素+抑制劑)并其整數(shù)值用于比較化合物的效能。
用HL60/Vinc細(xì)胞的試驗通過制成濃度為4×104細(xì)胞/孔的96孔微量滴定盤而完成。然后將細(xì)胞暴露在有或沒有各種濃度本發(fā)明化合物(0.5，1.0，2.5，5.0或10μM)存在下的各種濃度阿霉素(9nM至6.7μM)中，該方法描述于U.Germann等的Anti-CancerDrugs，8，pp.141-155(1997)中。將細(xì)胞培養(yǎng)3天后，細(xì)胞的成活力可以用XTT染色法評價線粒體功能而定量(Roehm等suDra)。結(jié)果表示為阿霉素的IC50與阿霉素加化合物的IC50的比值。在所有試驗中，MDR抑制劑本身的抗增殖或細(xì)胞毒活性也用HL60/Vinc細(xì)胞測定。多種本發(fā)明化合物的試驗結(jié)果列于下表中。
*在化合物濃度為2.5μM時的MDR率，但化合物5，6和7是在10μM濃度下測定的。
從上述結(jié)果可以看出，結(jié)構(gòu)和MDR率之間似乎沒有很強的相關(guān)性。影響因素是化合物進(jìn)入細(xì)胞的能力，化合物的毒性和化合物在細(xì)胞內(nèi)的代謝。因此，MDR率高于7的化合物并不包括在根據(jù)本發(fā)明參數(shù)缺乏MDR逆轉(zhuǎn)活性的化合物中。
實施例17在PC12細(xì)胞系中軸突突起的定量為了直接測定本發(fā)明化合物的神經(jīng)營養(yǎng)活性，軸突突起試驗可以在Lyons等(1994)描述的嗜鉻細(xì)胞瘤PC12細(xì)胞系上進(jìn)行。
將PC12細(xì)胞在補充有10％熱-滅活馬血清，5％熱-滅活胎牛血清(FBS)，和1％谷氨酸的Dulbecco氏改進(jìn)的Eagle介質(zhì)(DMEM)和5％CO2中保持37℃。
然后將細(xì)胞在涂有5m/cm2鼠尾膠原的96孔盤上制成105/每孔并使其粘附過夜。然后將介質(zhì)用DMEM，2％熱-滅活馬血清，1％谷氨酸，1-5ng/mlNGF(Sigma)替換并改變本發(fā)明化合物的濃度(0.01nM-10000nM)。背景對照培養(yǎng)可以在單獨使用105ng/mlNGF而沒有化合物的情況下進(jìn)行。陽性對照培養(yǎng)是在高濃度NGF(50ng/ml)下進(jìn)行。然后將細(xì)胞在37℃和5％ CO2中培養(yǎng)72小時，用3％的甲醛固定并在0至4的可見范圍內(nèi)測定軸突突起。
結(jié)果見下表。表6本發(fā)明化合物的軸突突起活性
>*在每個試驗濃度測定3次。所示結(jié)果為3個樣品的平均值。**測定重復(fù)兩次，每次用三份進(jìn)行。結(jié)果是六個樣品的平均值。***在每個試驗濃度測定4次。所示結(jié)果為三個樣品的平均值。
用化合物1-18，101和103-113列出的本發(fā)明化合物相對于背景對照培養(yǎng)具有顯著的增加軸突突起的作用。某些化合物在高濃度下缺乏神經(jīng)生長刺激活性(如表示為“0”)是由于這些化合物在高濃度下對細(xì)胞的毒性。化合物103在每次3個濃度測定中只有一個樣品在一個試驗中出現(xiàn)陰性結(jié)果。當(dāng)重復(fù)該試驗時我們證實該化合物顯示了一些神經(jīng)生長刺激活性。
本發(fā)明的其它化合物也被證明具有顯著的神經(jīng)生長刺激活性。
在通過上文提供多個本發(fā)明方案后，可以看出在本發(fā)明的基本教導(dǎo)下用本發(fā)明方法進(jìn)行改進(jìn)而得到其它方案是顯而易見的。因此，本發(fā)明范圍是通過所附的權(quán)利要求書定義而不是上文通過具體實施例提出的具體方案來定義的。
權(quán)利要求
1.下式化合物及其藥用衍生物
其中A和B分別選自氫原子，Ar，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，或Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；其中A或B中所述烷基，鏈烯基或炔基鏈上任何一個CH2基均可以被O，S，S(O)，S(O)2或N(R)替代；其中R選自氫原子，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，或(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；Ar選自苯基，1-萘基，2-萘基，茚基，薁基，芴基，蒽基，2-呋喃基，3-呋喃基，2-噻吩基，3-噻吩基，2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基，吡咯基，噁唑基，噻唑基，咪唑基，吡唑基，2-吡唑啉基，吡唑烷基，異噁唑基，異噻唑基，1，2，3-噁二唑基，1，2，3-三唑基，1，3，4-噻二唑基，1，2，3-噻二唑基，1，2，4-三唑基，1，2，4-噁二唑基，1，2，4-噻二唑基，苯并噁唑基，噠嗪基，嘧啶基，吡嗪基，1，3，5-三嗪基，1，3，5-三噻嗪基，中氮茚基，吲哚基，異吲哚基，3H-吲哚基，二氫吲哚基，苯并[b]呋喃基，苯并[b]噻吩基，1H-吲唑基，苯并咪唑基，苯并噻唑基，嘌呤基，4H-喹嗪基，喹啉基，1，2，3，4-四氫-異喹啉基，異喹啉基，1，2，3，4-四氫-異喹啉基，噌啉基，2，3-二氮雜萘基，喹唑啉基，喹惡啉基，1，8-二氮雜萘基，哌啶基，咔唑基，吖啶基，吩嗪基，吩噻嗪基或吩惡嗪基或其它化學(xué)上可行的單環(huán)，雙環(huán)或三環(huán)系統(tǒng)，其中每個環(huán)由5至7個環(huán)原子組成并且其中每個環(huán)含有0至3個分別選自N，N(R)，O，S，S(O)，或S(O)2的雜原子，并且其中每個Ar任選地被一至三個分別選自下列的取代基所取代鹵原子，羥基，硝基，-SO3H，三氟甲基，三氟甲氧基，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基，O-[(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基]，O-[(C2-C6)直鏈或支鏈鏈烯基，O-芐基，O-苯基，1，2-亞甲二氧基，-N(R1)(R2)，羧基，N-(C1-C5-直鏈或支鏈烷基或C2-C5-直鏈或支鏈鏈烯基)甲酰氨基，N，N-二-(C1-C5-直鏈或支鏈烷基或C2-C5-直鏈或支鏈鏈烯基)甲酰氨基，N-(C1-C5-直鏈或支鏈烷基或C2-C5-直鏈或支鏈鏈烯基)磺酰氨基，N，N-二-(C1-C5-直鏈或支鏈烷基或C2-C5-直鏈或支鏈鏈烯基)磺酰氨基，嗎啉基，哌啶基，O-Z，CH2-(CH2)q-Z，O-(CH2)q-Z，(CH2)q-Z-O-Z，或CH＝CH-Z；其中R1和R2分別選自(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，氫原子或芐基；或其中R1和R2與和它們相連的氮原子一起構(gòu)成5-7員雜環(huán)；Z選自4-甲氧基苯基，2-吡啶基，3-吡啶基，4-吡啶基，吡唑基，喹啉基，3，5-二甲基異噁唑基，異噁唑基，2-甲基噻唑基，噻唑基，2-噻吩基，3-噻吩基，或嘧啶基；和q是0，1，或2；X是N，O，或C(R)；其中當(dāng)X是N或C(R)時，Y選自氫原子，Ar，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，或Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；當(dāng)X是0時，Y是孤電子對；K選自(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，或環(huán)己基甲基；其中K中所述烷基，鏈烯基或炔基鏈中的任一CH2基可任選地被O，S，S(O)，S(O)2或N(R)替換；n是0，1或2；J選自氫原子，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，或Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；或環(huán)己基甲基；且D選自Ar，(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烷基，被(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，或被(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基取代的(C5-C7)-環(huán)烯基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，或Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；其中D中所述烷基鏈中不直接與化合物中SO2相連的任一CH2基可任選地被O，S，S(O)，S(O)2或NR替換。
2.下式化合物及其可藥用衍生物
其中A，B，Y，D，n和其所屬基團(tuán)定義同權(quán)利要求1；m是0，1，或2；n+m是1，2或3；所示的環(huán)為飽和的，部分飽和的或不飽和的；所示環(huán)中的1至2個碳原子可任選地被分別選自O(shè)，S，S(O)，S(O)2或N(R)的雜原子所替換；且所示環(huán)可任選地與苯稠合。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中A或B中至少有一個是終端被吡啶基取代的(C1-C6)-直鏈烷基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中X是氮原子或氧原子。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中J是(C1-C3)-直鏈烷基。
6.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中K是終端被苯基取代的(C1-C3)-直鏈烷基。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中D選自(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，Ar，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，或CH2-S(O)2-(C1-C4)直鏈或支鏈烷基。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7的化合物，其中D選自氨基苯基，硝基苯基，異丙基，芐基，氟苯基，氰基苯基，甲氧基苯基，二甲氧基苯基，甲磺?；谆瑏喴一交?，二硝基苯氨基苯基，N，N-二甲基氨基苯基偶氮苯基，N，N-二甲基氨基萘基或乙酰氨基苯基。
9.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中Y是甲基。
10.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中n是0。
11.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中n是0；m是2；且所示的環(huán)為完全飽和的。
12.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中化合物是選自表1中化合物2，或4至18的任一化合物或表2中化合物1至3中的任一化合物。
13.下式化合物及其可藥用衍生物
其中A，B，X，Y，K，J，n和其所屬基團(tuán)定義同權(quán)利要求1；且R3選自(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；其中R3中烷基，鏈烯基或炔基中的任一CH2基可任選地被O，S，S(O)，S(O)2或N(R)替換；并且其中在R3中的烷基，鏈烯基或炔基中除與氮原子相連的CH2基以外的任一CH2基可任選地被C(O)替換。
14.下式化合物及其藥用衍生物
其中A，B，X，Y，n，m和其所屬基團(tuán)定義如權(quán)利要求2；及R3選自(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，Ar-取代的(C1-C6)-直鏈或支鏈烷基，(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基，Ar-取代的(C2-C6)-直鏈或支鏈鏈烯基或炔基；其中R3中烷基，鏈烯基或炔基中的任一CH2基可任選地被O，S，S(O)，S(O)2或N(R)替換；其中在R3中的烷基，鏈烯基或炔基中除與氮原子相連的CH2基以外的任一CH2基可任選地被C(O)替換。并且其中當(dāng)n是0且m是1時，R3中的烷基，鏈烯基或炔基鏈中的第二個CH2基不能被C(O)替換。
15.根據(jù)權(quán)利要求13或14的化合物，其中A或B中至少有一個是Ar-取代的(C1-C6)-烷基鏈。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的化合物，其中A或B中至少有一個是終端被苯基或吡啶基取代的(C1-C6)-烷基鏈。
17.根據(jù)權(quán)利要求13或14的化合物，其中X是N或O。
18.根據(jù)權(quán)利要求13的化合物，其中K是芐基。
19.根據(jù)權(quán)利要求13的化合物，其中J是氫原子或甲基。
20.根據(jù)權(quán)利要求13或14的化合物，其中R3選自氫原子，(C1-C6)-烷基，終端被吡啶基或3，4，5-三甲氧基苯甲?；谆〈?。
21.根據(jù)權(quán)利要求13的化合物，其中n是0。
22.根據(jù)權(quán)利要求14的化合物，其中n是0；m是2；且所示環(huán)為完全飽和的。
23.根據(jù)權(quán)利要求13或14的化合物，其中所述化合物是選自表3中化合物101至113中的任一化合物。
24.具有下述特征的化合物a.具有神經(jīng)原活性；b.能夠增加細(xì)胞漿Ca2+濃度或與利阿諾啶受體結(jié)合；c.不與FKBP結(jié)合；且d.不具有MDR逆轉(zhuǎn)活性。
25.含有下列成分的組合物a)具有神經(jīng)營養(yǎng)量的權(quán)利要求1，2，13或14任一的化合物；和b)藥物適用載體。
26.根據(jù)權(quán)利要求25的組合物，進(jìn)一步含有神經(jīng)營養(yǎng)因子。
28.根據(jù)權(quán)利要求27的組合物，其中神經(jīng)營養(yǎng)因子選自神經(jīng)生長因子(NGF)，胰島素生長因子(IGF)和其活性截短衍生物，酸性纖維原細(xì)胞生長因子(aFGF)，堿性纖維原細(xì)胞生長因子(bFGF)，血小板-衍生生長因子(PDGF)，大腦衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)，纖毛神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞系衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)，神經(jīng)營養(yǎng)素-3(NT-3)，神經(jīng)營養(yǎng)素4/5(NT-4/5)。
29.根據(jù)權(quán)利要求28的組合物，其中所述神經(jīng)營養(yǎng)因子是神經(jīng)生長因子(NGF)。
30.在患者體內(nèi)或體外神經(jīng)細(xì)胞中刺激神經(jīng)原活性的方法，包括給所述患者或所述神經(jīng)細(xì)胞服用神經(jīng)營養(yǎng)量的權(quán)利要求1，2，13或14任一的化合物。
31.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中將所述化合物給患者服用并將其與適宜藥用的載體一起制成藥用組合物。
32.根據(jù)權(quán)利要求31的方法，另外包括給所述患者服用作為多劑量形式一部分或以分劑量形式的神經(jīng)營養(yǎng)因子。
33.根據(jù)權(quán)利要求32的方法，其中神經(jīng)營養(yǎng)因子選自神經(jīng)生長因子(NGF)，胰島素生長因子(IGF)和其活性平截衍生物，酸性纖維原細(xì)胞生長因子(aFGF)，堿性纖維原細(xì)胞生長因子(bFGF)，血小板-衍生生長因子(PDGF)，大腦衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)，纖毛神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞系衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)，神經(jīng)營養(yǎng)素-3(NT-3)，神經(jīng)營養(yǎng)素4/5(NT-4/5)。
34.根據(jù)權(quán)利要求33的方法，其中神經(jīng)營養(yǎng)因子是神經(jīng)生長因子(NGF)。
35.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述方法是用于治療患有下列疾病的患者三叉神經(jīng)痛，舌咽神經(jīng)痛，貝爾氏癱瘓，重癥肌無力，肌肉營養(yǎng)不良，肌肉損傷，漸行性肌肉萎縮，漸行性球根遺傳肌萎縮，脫腸，破裂的或下垂的無脊椎板綜合癥，子宮頸脊椎關(guān)節(jié)強硬，神經(jīng)叢疾病，胸口破損綜合癥，外周神經(jīng)病，如由鉛，氨苯砜，壁虱，或紫質(zhì)癥引起的神經(jīng)病，或其它外周髓磷脂疾病，阿爾茨海默氏疾病，古蘭-貝爾綜合癥，帕金森病和其它帕金森神經(jīng)機能障礙疾病，肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化癥(ALS)，多硬化癥，其它中樞髓磷脂疾病，中風(fēng)和與中風(fēng)有關(guān)的局部缺血，神經(jīng)paropathy，其它神經(jīng)變性疾病，運動神經(jīng)元疾病，坐骨變形，與糖尿病有關(guān)的神經(jīng)病，脊椎索損傷，面部神經(jīng)變形和其它外傷，化學(xué)治療-和其它藥物-誘導(dǎo)的神經(jīng)病和亨廷頓氏疾病。
36.根據(jù)權(quán)利要求30的方法，其中所述方法是用于體外刺激神經(jīng)再生。
37.根據(jù)權(quán)利要求36的方法，包括另外是神經(jīng)細(xì)胞接觸神經(jīng)營養(yǎng)因子的步驟。
38.根據(jù)權(quán)利要求37的方法，其中所述神經(jīng)營養(yǎng)因子選自神經(jīng)生長因子(NGF)，胰島素生長因子(IGF)和其活性平截衍生物，酸性纖維原細(xì)胞生長因子(aFGF)，堿性纖維原細(xì)胞生長因子(bFGF)，血小板-衍生生長因子(PDGF)，大腦衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)，纖毛神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞系衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)，神經(jīng)營養(yǎng)素-3(NT-3)，神經(jīng)營養(yǎng)素4/5(NT-4/5)。
39.根據(jù)權(quán)利要求38的方法，其中是營養(yǎng)因子是神經(jīng)生長因子(NGF)。
40.刺激患者體內(nèi)或體外神經(jīng)細(xì)胞的神經(jīng)原活性的方法，包括給所述患者或神經(jīng)細(xì)胞服用神經(jīng)營養(yǎng)量的根據(jù)權(quán)利要求24的化合物。
全文摘要
本發(fā)明神經(jīng)刺激神經(jīng)細(xì)胞中軸突生長的化合物,方法和藥物組合物。該化合物和組合物及使用它們的方法是單獨使用或與神經(jīng)營養(yǎng)因子,如神經(jīng)生長因子聯(lián)合使用,以促進(jìn)由疾病或生理外傷引起的神經(jīng)原損傷的修復(fù)。
文檔編號A61P25/28GK1271354SQ98809355
公開日2000年10月25日 申請日期1998年8月27日 優(yōu)先權(quán)日1997年8月29日
發(fā)明者P·麥卡夫雷, P·M·諾瓦克, M·穆里堪 申請人:沃泰克斯藥物股份有限公司