專利名稱：凍干的甲型肝炎減毒活疫苗的制作方法
目前國(guó)內(nèi)的甲型肝炎減毒活疫苗系液體劑型，2-8℃保存有效期僅為半年(6個(gè)月)，-20℃以下冰凍保存有效期僅為12個(gè)月，從出廠地到使用現(xiàn)場(chǎng)均要求疫苗嚴(yán)格的冷鏈運(yùn)輸，如保存和運(yùn)輸不能嚴(yán)格冷鏈，致使疫苗的病毒滴度下降，影響接種效果，且增加了生產(chǎn)及使用部門(mén)的費(fèi)用。
本發(fā)明專利凍干劑型的甲型肝炎減毒活疫苗從根本上解決了疫苗冷鏈運(yùn)輸問(wèn)題，實(shí)現(xiàn)了常溫(22℃)運(yùn)輸，不影響疫苗的病毒滴度，在2-8℃條件下可實(shí)現(xiàn)18個(gè)月的有效期。技術(shù)方案配方凍干保護(hù)劑由蔗糖、味精、尿素、L-精氨酸、海藻糖配比而成?；竟に噦鞔蟮娜伺叻味扼w細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)長(zhǎng)成單層后，感染LA-1株甲型肝炎病毒，37℃吸附4小時(shí)，補(bǔ)加維持液置35℃培養(yǎng)4周，每周換液一次，洗換加疫苗液，凍化、超聲去除細(xì)胞碎片，合并疫苗液，加入凍干保護(hù)劑(4∶1)。保護(hù)劑在疫苗最終濃度分別為明膠0.5-0.7％、蔗糖3-6％、味精0.5-2％、尿素0.3-0.8％、L-精氨酸0.1-0.4％、海藻糖3％。制品入箱前應(yīng)干箱預(yù)冷-20℃以下，制品入箱后凍結(jié)，-40℃保持4小時(shí)，開(kāi)始干燥，冷凝器真空度進(jìn)入正常狀態(tài)后保持1小時(shí)后開(kāi)始加溫，隔板溫度第1小時(shí)加溫至-20℃，第四小時(shí)加溫至-10℃，制品保持在-20℃以下，升華，待制品完全成型后，逐漸加溫至28℃，控制6-8小時(shí)，干燥結(jié)束，凍干后的樣品應(yīng)為淡黃色疏松體，水份≤3％(g/g)。
專有設(shè)備有轉(zhuǎn)瓶機(jī)，醫(yī)用低溫冷凍干燥機(jī)等。優(yōu)點(diǎn)凍干劑型的甲肝減毒活疫苗易于保存，穩(wěn)定性好，徹底解決了液體劑型甲型肝炎減毒活疫苗的冷鏈運(yùn)輸及穩(wěn)定性差等問(wèn)題，2-8℃制品有效期可從液體劑型的6個(gè)月延長(zhǎng)至凍干劑型的18個(gè)月。
實(shí)例凍干后的甲型肝炎減毒活疫苗加速熱穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果37℃7天，前后滴度下降不超過(guò)0.5LogTCID50/ml37℃14天，前后滴度下降不超過(guò)0.5LogTCID50/ml2-8℃18個(gè)月，病毒滴度下降不超過(guò)1.0LogTCID50/ml
權(quán)利要求
1.一種凍干劑型的甲型肝炎減毒活疫苗。該疫苗用海藻糖作凍干保護(hù)劑，同時(shí)加入明膠、蔗糖、味精、尿素、L-精氨酸等成分冷凍干燥而成。
2.根據(jù)權(quán)利要求“1”所述的疫苗，其特征是淡黃色疏松體。傳代后的人胚肺二倍體細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)長(zhǎng)成單層后，感染LA-1株甲型肝炎病毒，37℃吸附4小時(shí)，洗換加疫苗液，凍化、超聲去除細(xì)胞碎片，合并疫苗液，按疫苗液凍干保護(hù)劑＝4∶1(體積比)的比例加入保護(hù)劑。保護(hù)劑在疫苗最終濃度分別為海藻糖3-6％，明膠0.5-0.7％，蔗糖3-6％，味精0.5-2％，尿素0.3-0.8％，L-精氨酸0.1-0.4％。
3.根據(jù)權(quán)利要求“1”所述的疫苗特征是加入凍干保護(hù)劑混勻后冷凍干燥制品入箱前干箱預(yù)冷-20℃以下，制品入箱后凍結(jié)，-40℃保持4小時(shí)，開(kāi)始干燥，冷凝器真空度進(jìn)入正常狀態(tài)后保持1小時(shí)后開(kāi)始加溫，隔板溫度第1小時(shí)加溫至-20℃，第4小時(shí)加溫至-10℃，制品保持在-20℃以下，升華，待制品完全成型后，逐漸加溫至28℃，控制6-8小時(shí)，干燥結(jié)束。凍干后制品水分≤3％(g/g)。
全文摘要
甲型肝炎是由甲型肝炎病毒引起的傳染疾病,為有效控制甲型肝炎的流行與暴發(fā),保護(hù)人類健康,我們通過(guò)人胚肺2BS細(xì)胞傳代培養(yǎng)后感染甲肝病毒,洗換、收獲病毒液,制成甲型肝炎減毒活疫苗。本發(fā)明為在液體劑型甲型肝炎減毒活疫苗中加入由蔗糖、明膠、味精、尿素、L－精氨酸、海藻糖等配比而成的保護(hù)劑,混勻,在適宜的凍干條件下制成凍干劑型。甲型肝炎病毒在凍干狀態(tài)下得到更好的保護(hù),疫苗穩(wěn)定性能好,2—8℃有效期為18個(gè)月,室溫運(yùn)輸過(guò)程中病毒滴度不受影響,方便使用,提高免疫效果。凍干后疫苗無(wú)需冰凍保存,一改液體疫苗低溫凍結(jié)保存及運(yùn)輸過(guò)程中嚴(yán)格冷鏈,2—8℃有效期短(僅為6個(gè)月)的缺點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K39/29GK1243752SQ9811780
公開(kāi)日2000年2月9日 申請(qǐng)日期1998年8月27日 優(yōu)先權(quán)日1998年8月27日
發(fā)明者張晶, 周妍, 王壽江, 高俊芳, 魏巍, 董秀華, 郭麗姝, 趙克儉, 王德賢, 賈國(guó)富 申請(qǐng)人:長(zhǎng)春長(zhǎng)生實(shí)業(yè)股份有限公司