一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片的制作方法
【專(zhuān)利摘要】一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片，屬于獸用生物制品技術(shù)領(lǐng)域。每1000片泡騰片包括以下原料：黃芪多糖：20?60g、二氫槲皮素：30?80g、二氫桑色素：5?20g、橙皮素：10?30g、α?甘露聚糖肽：10?30g、泡騰料：300?500g、填充劑：補(bǔ)足至1000g。本發(fā)明所制備的泡騰片，降低了產(chǎn)品的運(yùn)輸要求，增加了用戶(hù)使用的便利性；本發(fā)明所制備的泡騰片可增強(qiáng)豬只免疫力，提高偽狂犬活疫苗的免疫效果。
【專(zhuān)利說(shuō)明】
一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于獸用生物制品技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰 片。
【背景技術(shù)】
[0002] 偽狂犬病毒(Pseudorabies virus, PRV)屬于皰疼病毒(Herpesviridae)a皰疼病 毒亞科（4]^11&1161'1681'；[1'；[11&6)水痕病毒屬（\^1'；[06110￥；[1'118)的皰疼病毒亞科1型 (Porcine herpesvirus Typel)，能引發(fā)豬的嚴(yán)重疾病。同時(shí)，豬既是偽狂犬病毒的存者， 也是偽狂犬病毒的傳染源，控制豬偽狂犬病不僅對(duì)養(yǎng)豬事業(yè)本身，而且對(duì)其它動(dòng)物養(yǎng)殖的 順利發(fā)展也有著十分重要的意義。在歐美等達(dá)國(guó)家，得利于PRV基因缺失活苗和相應(yīng)鑒別方 法的應(yīng)用，該病得到控制或根除;但在發(fā)展中國(guó)家，該病仍頻繁發(fā)生，嚴(yán)重制約了這些國(guó)家 和地區(qū)養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。但是，凍干活疫苗在養(yǎng)殖戶(hù)使用過(guò)程中較為不便，需要額外的配 備疫苗稀釋液或者直接中冷開(kāi)水稀釋?zhuān)环矫媾鋫湎♂屢簞t大幅度提高生產(chǎn)、使用成本，另 一方面直接使用冷開(kāi)水會(huì)導(dǎo)致疫苗免疫效果較差。
[0003] 黃酮類(lèi)化合物是自然界中存在的多元酚類(lèi)物質(zhì)，也是自然界藥用植物中的主要活 性成分之一。它是指具有15個(gè)碳原子并以C6-C3-C6的方式構(gòu)成的三環(huán)天然有機(jī)物，是植物 在長(zhǎng)期自然選擇中產(chǎn)生的二級(jí)代謝產(chǎn)物，現(xiàn)在已分離鑒定的有4000多種。它廣泛存在于果 蔬、中草藥中，無(wú)毒副作用，它具有顯著的清除機(jī)體內(nèi)自由基、抗老化、抗突變、調(diào)血脂降血 壓等藥理保健功能，是一類(lèi)極具開(kāi)發(fā)前景的天然有機(jī)抗氧化劑，這些抗氧化活性物質(zhì)可以 減少和清除機(jī)體內(nèi)自由基，具有預(yù)防疾病的作用。
[0004] 多糖是中藥活性成分之一，大量研究表明，多糖及糖復(fù)合物在生物體內(nèi)不僅是作 為能量資源和構(gòu)成材料，更重要的是它存在于一切細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)中，參與生命現(xiàn)象中細(xì)胞的 各種活動(dòng)。多糖類(lèi)物質(zhì)是所有生命有機(jī)體的重要組成部分，具有清除自由基、提高抗氧化酶 活性和抑制脂質(zhì)過(guò)氧化的能力。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于設(shè)計(jì)提供一種偽狂犬活疫苗免疫佐 劑泡騰片的技術(shù)方案。
[0006] 所述的一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片，其特征在于每1000片泡騰片包括以下 原料： 黃芪多糖:20-60g 二氫槲皮素:30-80g 二氫桑色素：5-20g 橙皮素：10-30g a_甘露聚糖肽：10_30g 泡騰料:300-500g 填充劑:補(bǔ)足至l〇〇〇g。
[0007] 所述的一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片，其特征在于每1000片泡騰片包括以下 原料： 黃芪多糖:30-50g 二氫槲皮素:40-60g 二氫桑色素：l〇-15g 橙皮素：15-20g α_甘露聚糖肽：15-20g 泡騰料:350-400g 填充劑:補(bǔ)足至1000。
[0008] 所述的一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片，其特征在于所述的泡騰料包括以下重 量份的原料： 無(wú)水檸檬酸= 100-180份 碳酸氫鈉：150-250份 聚維酮K30:10-30份 乙二胺四乙酸二鈉:20-40份 硬脂酸鎂:4-8份。
[0009] 所述的一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片，其特征在于所述的泡騰料包括以下重 量份的原料： 無(wú)水檸檬酸= 120-160份 碳酸氫鈉：180-220份 聚維酮K30:15-25份 乙二胺四乙酸二鈉:25-35份 硬脂酸鎂:5-6份。
[0010] 所述的一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片，其特征在于所述的填充劑為乳糖和微 晶纖維素 MCC102。
[0011] 所述的一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片，其特征在于所述的乳糖和微晶纖維素 MCC102的重量比為2:1。
[0012] 所述的一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片，其特征在于所述的黃芪多糖按以下步 驟制得： a、 取黃芪飲片，加8倍量水，加熱煮沸二次，第一次2h，第二次1.5h，合并提取液，過(guò)濾， 濾液至濃縮藥液量與藥材量比為2:1 (V/G); b、 取上濃縮液，加等量乙醇，攪拌均勻，0 °C -10 °C冷藏36h，過(guò)濾冷藏液，回收乙醇，并濃 縮冷藏液至藥液量與藥材量比為1.6: 1 (V/G)，然后再將濃縮的藥液加1.5倍量乙醇至藥液 含醇量為60%后，0°C-10°C冷藏36h，過(guò)濾冷藏液，回收乙醇，濃縮冷藏液至藥液量與藥材量 比為1:5,即每lml相當(dāng)于藥材5g; c、 取上濃縮液，加水稀釋藥液至每lml相當(dāng)于藥材1 g，0 °C -10 °C冷藏24h后過(guò)濾，濃縮濾 液至每lml相當(dāng)于藥材10g，噴霧干燥，即得。
[0013] 上述的一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片及其制備方法:將各原料進(jìn)行混合，用 壓片機(jī)壓制成片劑，定量分裝，即得到偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片。
[0014] 本發(fā)明具有以下有益效果： 1、本發(fā)明所制備的泡騰片，降低了產(chǎn)品的運(yùn)輸要求，增加了用戶(hù)使用的便利性。
[0015] 2、本發(fā)明所制備的泡騰片可增強(qiáng)豬只免疫力，提高偽狂犬活疫苗的免疫效果。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 為了使本發(fā)明更加容易理解，下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解， 這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍，下列實(shí)施例中未提及的具體實(shí) 驗(yàn)方法，通常按常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行。
[0017] 實(shí)施例1:黃芪多糖制備 a、 取黃芪飲片，投入多功能提取罐中，加8倍量水，加熱煮沸二次，第一次2h，第二次 1.5h，合并提取液，過(guò)濾，濾液進(jìn)入濃縮器至濃縮藥液量與藥材量比為2:1 (V/G); b、 取上濃縮液于醇沉罐中，加等量乙醇，攪拌均勻，0 °C -10 °C冷藏36h，過(guò)濾冷藏液，回 收乙醇，并濃縮冷藏液至藥液量與藥材量比為1.6: 1 (V/G)，然后再將濃縮的藥液加1.5倍 量乙醇至藥液含醇量為60%后，0 °C -10 °C冷藏36h，過(guò)濾冷藏液，回收乙醇，濃縮冷藏液至藥 液量與藥材量比為1:5,即每lml相當(dāng)于藥材5g; c、 取上濃縮液，加水稀釋藥液至每lml相當(dāng)于藥材1 g，0 °C -10 °C冷藏24h后過(guò)濾，濃縮濾 液至每lml相當(dāng)于藥材10g，噴霧干燥，即得。
[0018] 實(shí)施例2:泡騰料的制備 無(wú)水檸檬酸：180份 碳酸氫鈉:250份 聚維酮K30:30份 乙二胺四乙酸二鈉:40份 硬脂酸鎂:8份 將上述原料混合，經(jīng)Co-60輻射滅菌制得泡騰材料。
[0019] 實(shí)施例3:泡騰料的制備 無(wú)水檸檬酸:160份 碳酸氫鈉:220份 聚維酮K30:25份 乙二胺四乙酸二鈉:35份 硬脂酸鎂:6份 將上述原料混合，經(jīng)Co-60輻射滅菌制得泡騰材料。
[0020] 實(shí)施例4:泡騰料的制備 無(wú)水檸檬酸:1〇〇份 碳酸氫鈉：150份 聚維酮K30:10份 乙二胺四乙酸二鈉:20份 硬脂酸鎂:4份 將上述原料混合，經(jīng)Co-60輻射滅菌制得泡騰材料。
[0021 ]實(shí)施例5: -種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片 實(shí)施例1制得的黃芪多糖:50g 二氫槲皮素:50g 二氫桑色素：15g 橙皮素：15g α_甘露聚糖肽:20g 實(shí)施例2制得的泡騰料:478g 填充劑:乳糖248g、微晶纖維素 MCC102 124g。
[0022] 將上述各組分充分混合，用壓片機(jī)壓制成片劑，定量分裝，即得到偽狂犬活疫苗免 疫佐劑泡騰片。
[0023] 實(shí)施例6: -種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片 實(shí)施例1制得的黃芪多糖:30g 二氫槲皮素:30g 二氫桑色素:20g 橙皮素:20g α_甘露聚糖肽:20g 實(shí)施例3制得的泡騰料:376g 填充劑:乳糖336g、微晶纖維素 MCC102 168g。
[0024] 將上述各組分充分混合，用壓片機(jī)壓制成片劑，定量分裝，即得到偽狂犬活疫苗免 疫佐劑泡騰片。
[0025] 實(shí)施例7 : -種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片 實(shí)施例1制得的黃芪多糖:40g 二氫槲皮素:60g 二氫桑色素：l〇g 橙皮素:20g α_甘露聚糖肽:10g 實(shí)施例4制得的泡騰料:374g 填充劑:乳糖324g、微晶纖維素 MCC102 162g。
[0026] 將上述各組分充分混合，用壓片機(jī)壓制成片劑，定量分裝，即得到偽狂犬活疫苗免 疫佐劑泡騰片。
[0027]試驗(yàn)例1本發(fā)明泡騰片的應(yīng)用 1材料 1.1偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片 按本發(fā)明實(shí)施例5-7制得。
[0028] 1.2偽狂犬活疫苗購(gòu)自某生物制品有限公司 1.3試驗(yàn)用豬28日齡健康斷奶仔豬60頭，檢測(cè)偽狂犬抗體、抗原雙陰性。70日齡健康 育肥豬60頭，檢測(cè)偽狂犬抗體、抗原雙陰性。
[0029] 2 方法 2.1將60頭28日齡健康斷奶仔豬分為四組，第一組15頭，作為實(shí)驗(yàn)一組，采用本發(fā)明實(shí) 施例5制備泡騰片進(jìn)行疫苗稀釋;第二組15頭，作為實(shí)驗(yàn)二組，采用本發(fā)明實(shí)施例6制備泡騰 片進(jìn)行疫苗稀釋;第三組15頭，作為實(shí)驗(yàn)三組，采用本發(fā)明實(shí)施例7制備泡騰片進(jìn)行疫苗稀 釋;第四組15頭，作為實(shí)驗(yàn)四組，采用疫苗自帶稀釋液進(jìn)行疫苗稀釋。免疫后于7d、14d、21d、 42d、63d、84d分別采血，分離血清，采用IDEXX偽狂犬抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)各組gB IgG抗體。 [0030] 2.2將60頭70日齡健康陰性豬分為四組，第一組15頭，作為實(shí)驗(yàn)一組，采用本發(fā)明 實(shí)施例5制備泡騰片進(jìn)行疫苗稀釋;第二組15頭，作為實(shí)驗(yàn)二組，采用本發(fā)明實(shí)施例6制備泡 騰片進(jìn)行疫苗稀釋;第三組15頭，作為實(shí)驗(yàn)三組，采用本發(fā)明實(shí)施例7制備泡騰片進(jìn)行疫苗 稀釋;第四組15頭，作為實(shí)驗(yàn)四組，采用疫苗自帶稀釋液進(jìn)行疫苗稀釋。免疫后于7d、14d、 21d、42d、63d、84d分別采血，分離血清，采用IDEXX偽狂犬抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)各組gBIgG 抗體。
[0031 ] 3 結(jié)果 3.1崩解時(shí)限結(jié)果 取1片泡騰片，置盛有200ml水的250ml燒杯中，水溫15-25°C，觀察并記錄完全溶解的時(shí) 間，結(jié)果見(jiàn)表1。
[0032]表1崩解時(shí)限檢驗(yàn)結(jié)果
3.2 28日齡斷奶仔豬試驗(yàn)結(jié)果 表2 28日齡健康斷奶仔豬試驗(yàn)結(jié)果
3.3 70日齡育肥豬試驗(yàn)結(jié)果 表3 70日齡育肥豬試驗(yàn)結(jié)果 4結(jié)論
綜上所述，本發(fā)明豬偽狂犬免疫佐劑泡騰片可以提高機(jī)體免疫力，一方面提前產(chǎn)生抗 體降低免疫空白期，另一方面延長(zhǎng)疫苗保護(hù)期，可大幅度提高偽狂犬活疫苗免疫效果。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片，其特征在于每1000片泡騰片包括以下原料： 黃芪多糖:20-60g 二氫槲皮素:30-80g 二氫桑色素：5-20g 橙皮素：10-30g α_甘露聚糖肽：10_30g 泡騰料:300-500g 填充劑:補(bǔ)足至l〇〇〇g。2. 如權(quán)利要求1所述的一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片，其特征在于每1000片泡騰 片包括以下原料： 黃芪多糖:30-50g 二氫槲皮素:40-60g 二氫桑色素：l〇-15g 橙皮素：15-20g α_甘露聚糖肽：15-20g 泡騰料:350-400g 填充劑:補(bǔ)足至1000。3. 如權(quán)利要求1或2所述的一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片，其特征在于所述的泡騰 料包括以下重量份的原料： 無(wú)水檸檬酸= 100-180份 碳酸氫鈉：150-250份 聚維酮K30:10-30份 乙二胺四乙酸二鈉:20-40份 硬脂酸鎂:4-8份。4. 如權(quán)利要求1或2所述的一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片，其特征在于所述的泡騰 料包括以下重量份的原料： 無(wú)水檸檬酸= 120-160份 碳酸氫鈉：180-220份 聚維酮K30:15-25份 乙二胺四乙酸二鈉:25-35份 硬脂酸鎂:5-6份。5. 如權(quán)利要求1或2所述的一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片，其特征在于所述的填充 劑為乳糖和微晶纖維素 MCC102。6. 如權(quán)利要求1或2所述的一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片，其特征在于所述的乳糖 和微晶纖維素 MCC102的重量比為2:1。7. 如權(quán)利要求1或2所述的一種偽狂犬活疫苗免疫佐劑泡騰片，其特征在于所述的黃芪 多糖按以下步驟制得： a、取黃芪飲片，加8倍量水，加熱煮沸二次，第一次2h，第二次1.5h，合并提取液，過(guò)濾， 濾液至濃縮藥液量與藥材量比為2:1 (V/G); b、 取上濃縮液，加等量乙醇，攪拌均勻，0 °C -10 °C冷藏36h，過(guò)濾冷藏液，回收乙醇，并濃 縮冷藏液至藥液量與藥材量比為1.6: 1 (V/G)，然后再將濃縮的藥液加1.5倍量乙醇至藥液 含醇量為60%后，0°C-10°C冷藏36h，過(guò)濾冷藏液，回收乙醇，濃縮冷藏液至藥液量與藥材量 比為1:5,即每lml相當(dāng)于藥材5g; c、 取上濃縮液，加水稀釋藥液至每lml相當(dāng)于藥材lg，0°C-10°C冷藏24h后過(guò)濾，濃縮濾 液至每lml相當(dāng)于藥材10g，噴霧干燥，即得。
【文檔編號(hào)】A61K31/352GK105997920SQ201610352549
【公開(kāi)日】2016年10月12日
【申請(qǐng)日】2016年5月25日
【發(fā)明人】沈建軍, 張秀文, 李陽(yáng)
【申請(qǐng)人】浙江美保龍生物技術(shù)有限公司