專利名稱：用于預(yù)防和治療hiv-1感染的且含有至少兩種不同hiv-1逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及預(yù)防和治療HIV-1感染的組合物。更具體講，本發(fā)明涉及預(yù)防和/或治療HIV-1感染的組合物，該組合物包含作為活性組分的HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，其為雜環(huán)碳(氧雜/硫雜)N-酰苯胺〔carb(ox/thio)anilide〕化合物，第二種逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)抑制劑化合物，如2′，5′-二-O-(叔丁基二甲硅烷基)-3′-螺-5-(4-氨基-1，2-氧硫雜環(huán)戊烯(oxathiole)-2，2-二氧化物)(TSAO)衍生物，其不抑制雜環(huán)碳(氨雜/硫雜)N-酰苯胺化合物所抑制的相同HIV-突變菌株，和可有可無(wú)的第三種HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。本發(fā)明也涉及預(yù)防或治療病人HIV-1感染的方法，它包括給予所述病人有效量的HIV-1RT抑制劑化合物，第二種逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)抑制劑化合物，它不抑制雜環(huán)碳氮雜/硫雜)N-酰苯胺化合物所抑制的同種HIV-1突變菌株，和可有可無(wú)的第三種HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。
背景技術(shù)：
已描述各種化合物作為1型人免疫缺陷病毒體外抑制劑并且這些化合物靶向病毒編碼的逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)，例如，nevirapine，吡啶酮，TIBO，BHAP，TSAO，和喹喔啉這些化合物對(duì)HIV-1的選擇性是由于它們與HIV-1RT之間的高特異性作用。
在細(xì)胞培養(yǎng)和AIDS病人中，對(duì)幾種HIV-1特異性RT抑制劑具有耐受性的HIV-1菌株的迅速出現(xiàn)，引起人們對(duì)進(jìn)一步在臨床開發(fā)這些抑制劑的關(guān)注。然而，對(duì)一種HIV-1特異性TR抑制劑具有耐受性的HIV-1未必對(duì)其它HIV-1特異性RT抑制劑具有交叉耐受性。事實(shí)上，已證明，HIV-1特異性RT抑制劑對(duì)在其RT上含不同的氨基酸取代的HIV-1突變菌株具有不同的活性。例如，在其RT上含100Leu->Ile突變菌株的HIV-1菌株對(duì)TIBO R82913和R82150具有耐受性，但對(duì)nevirapine和TSAO衍生物TSAO-T和TSAO-mT不具有耐受性。在其RT中含138Glu->Lys突變菌株的HIV-1菌株對(duì)TSAO衍生物具有耐受性，但對(duì)其它HIV-1特異性RT抑制劑不具有耐受性，如BHAP和nevirapine。相反，在HIV-1菌株RT的181Tyr->Cys突變體使突變病毒對(duì)到目前為止所描述的所有HIV-1特異性RT抑制劑都具有耐受性，除了在美國(guó)專利5,268,239最終所描述的一些氧硫雜環(huán)己二烯碳氧N-酰苯胺(carboxanilide)衍生物外。例如，見Balzarini等人，J.Virology 67(9)5353-5359(1993)(Balzarini I)和Balzarini等人，Virology 192246-253(1993)(Balzarini II)。
曾經(jīng)進(jìn)行過(guò)不成功的嘗試，即將各種HIV-1RT抑制劑混合起來(lái)以便消除病毒的耐受性。例如，見Balzarini I。
因此，本發(fā)明的目的是提供含可抑制抗藥HIV-1菌株出現(xiàn)的HIV RT抑制劑化合物的混合物的組合物。
本發(fā)明的目的也包括，通過(guò)給予本發(fā)明-些HIV RT抑制劑化合物的混合物，提供預(yù)防或治療HIV-1感染的方法。
發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明涉及預(yù)防或治療HIV-1感染的組合物，它包含治療有效量的a)、第一種下式HIV-1RT抑制劑化合物，
其中X1和X2獨(dú)立地為O或S；Q為-CR3＝NOR4或COYR5；Y為O或S；R1為氫，鹵素，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，C3-C4鏈烯氧基，C3-C4鏈炔氧基，一、二或三鹵代甲基，三氟甲氧基，C1-C4烷硫基，C3-C4支鏈烷硫基，硝基或氰基；R2為氫，C1-C4烷基或鹵素；
R3為氫，C1-C4烷基；R4為C3-C6烷基，C3-C6鏈烯基，C3-C6鏈炔基，C1-C8鹵代烷基，C1-C8烷氧基烷基，C1-C8烷硫基烷基，C1-C8羥基烷基，C1-C8酰氧基烷基，C1-C8芳酰氧基烷基，C1-C8羧基烷基，C1-C8烷基羧基烷基，C6-C12芳基羧基烷基，C1-C8氨基烷基，C1-C8烷基氨基烷基，C1-C8二烷基氨基烷基，C1-C8三烷基甲硅烷基烷，其中，上述各烷基部分可以是直鏈或支鏈的；C3-C8環(huán)烷基，苯基，(C1-C6烷基)苯基，C7-C12芳基烷基，C7-C12烷芳基烷基，或雜環(huán)基，其中，雜環(huán)部分為嗎啉基，哌啶基，吡咯烷基，哌嗪基，環(huán)氧乙烷基，氧雜環(huán)丁烷基，呋喃基，四氫吡喃基或四氫呋喃基；并且R5為i)、由一個(gè)或多個(gè)C1-C4烷基，優(yōu)選一個(gè)或兩個(gè)甲基取代或未取代的苯基或C3-C7環(huán)烷基；或
其中R6為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C6烷基，C1-C6羥基烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6羥基鏈烯基，C2-C6鏈炔基，C2-C6羥基鏈炔基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；并且R7和R8獨(dú)立地為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C6烷基，C1-C6羥基烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6羥基鏈烯基，C2-C6鏈炔基，C2-C6羥基鏈炔基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；b)、第二種HIV-1RT抑制劑化合物，它不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物a)所抑制的同種HIV-1突變菌株；及可有可無(wú)的c)、第三種HIV RT抑制劑化合物。
本發(fā)明也涉及預(yù)防或治療HIV-1感染病人的方法，它包括分別或聯(lián)合給予病人上述第一種HIV-1 RT抑制劑化合物a)，第二種HIV-1RT抑制劑化合物，它不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物a)所抑制的同種HIV-l突變菌株，及可有可無(wú)的第三種HIV RT抑制劑化合物。詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明術(shù)語(yǔ)“HIV-1RT抑制劑化合物”是指通過(guò)干擾HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶功能來(lái)抑制HIV-1復(fù)制的任何化合物。
術(shù)語(yǔ)“HIV RT抑制劑化合物”是指通過(guò)干擾HIV逆轉(zhuǎn)錄酶功能來(lái)抑制各種HIV，例如HIV-1或HIV-2，復(fù)制的任何化合物。
就本發(fā)明目的而言，“選擇性HIV-1突變菌株”是指對(duì)特定HIV-1RT抑制劑化合物具有耐受性的突變HIV-1菌株。
為了測(cè)定HIV-1突變菌株，可利用Balzarini I和Balzarini II中所描述的方法選擇特定HIV-1RT抑制劑化合物。
在本發(fā)明組合物中所使用的用作第二種HIV-1RT抑制劑化合物的化合物可以是任何RT抑制劑化合物，它對(duì)第一種HIV-1RT抑制劑化合物(式I)所選擇的同種HIV-1突變菌株無(wú)選擇性。該HIV-1RT抑制劑化合物是已知的并且包括，例如Camarasa等人，J.Med.Chem.35(15)2721-2727(1992)和Perez-Perez等人，J.Med.Chem.35(16)2988-2995(1992)在1992年9月3日提交的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?7/939,410中所描述的TSAO衍生物；Merluzzi等人在Science 2501411-1413(1990)中所描述的聯(lián)吡啶并二氮雜酮(dipyridodiazepinones)，如nevirapine；Goldman等人在Proc.Nat l.Acad.Sci.USA 886863-6867(1991)中所描述的吡啶酮衍生物，如3-{[(4，7-二氯-l，3-苯并唑-2基)甲基]氨基}-5-乙基-6-甲基吡啶-2(1H)-酮(L-697，661)；Kleim等人在Antimicrob.Agents Chemother.37，1659-1664(1993)中所描述的喹喔啉，如喹喔啉S-2720；Romero等人在Proc.Natl.Acad.Sci.USA 888806-8810(1991)中所描述的二(雜芳基)哌嗪(BHAP)衍生物，如N-異丙基-2-〔4-(2-酮基吲哚基)-1-哌嗪基〕-3-吡啶胺(BHAPU-88204)；Pauwels等人在Nature 343470-474(1990)中所描述的四氫咪唑并〔4，5，1-jk][(1，4)-苯并二氮雜-2-(1H)-酮和-硫酮(TIBO)衍生物，如(+)-S-4，5，6，7-四氫-9-氯-5-甲基-6-(3-甲基-2-丁烯基-咪唑并〔4，5，1-jk〕〔1，4〕-苯并二氮雜-2(1H)-硫酮(R82913)；Kashman等人在J.Med.Chem.35，27 35-2743(1992)中所描述的香豆素衍生物，如calanolide A，McMahon等人在Antimicrob.AgentsChemother.37，754-760(1993)中所描述的二芳基砜。如硝基苯基苯基砜(NPPS)；Pauwels等人在Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)901711-1715(1993)中所描述的N-酰苯胺并(anilido)苯基乙酰胺(α-APA)，如R89439；Zhang等人在Abstr.2nd Int.Workshop on HIVDrμg Resistance(June 3-5，Noordwisk，The Netherlands)(1993)no.30中所描述的苯乙基噻唑硫脲衍生物(PETT)，如LY300046.HCl；Ba ba等人在Biochem.Biophys.Res.Comm.165，1375-1381(1989)中所描述的1-〔(2-羥基乙氧基)甲基〕-6-(苯硫基)胸腺嘧啶(HEPT)。
可有可無(wú)的第三種HIV RT抑制劑化合物c)可以為不同于第一種HIV-1RT抑制劑或第二種HIV-1抑制劑的任何HIV RT抑制劑化合物。該HIV-1RT抑制劑化合物是已知的并且包括這樣的化合物，如上述用作第二種HIV-1RT抑制劑化合物或HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑的HIV-1RT抑制劑化合物(該抑制劑不區(qū)分HIV-1和HIV-2)，例如齊多夫定(AZT)，二脫氧肌肝(ddI)，扎西他賓(ddC)，(-)-2′-脫氧-3′-硫代胞苷(3TC)，D4T，PMEA等等。優(yōu)選地，可有可無(wú)的第三種HIV RT抑制劑化合物c)為不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物或第二種HIV-1RT抑制劑化合物所抑制的同種HIV-1突變菌株，如不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物或第二種HIV-1RT抑制劑化合物所抑制的同種HIV-1突變菌株的第三種HIV-1RT抑制劑化合物。
優(yōu)選地，本發(fā)明涉及預(yù)防或治療HIV-1感染的組合物，它包含治療有效量的a)、式(I)的第一種HIV-1RT抑制劑化合物
其中X1為O或S，優(yōu)選O；X2為O或S，優(yōu)選S；Q為-CR3＝NOR4或者優(yōu)選COYR5；Y為O或S，優(yōu)選O；R1為氫，鹵素，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，C3-C4鏈烯氧基，C3-C4鏈炔氧基，一、二或三鹵代甲基，三氟甲氧基，C1-C4烷硫基，C3-C4支鏈烷硫基，硝基或氰基，優(yōu)選氫，鹵素或C1-C4烷基，并且更優(yōu)選鹵素；R2為氫，C1-C4烷基或鹵素，優(yōu)選氫或C1-C4烷基，并且更優(yōu)選氫，甲基或乙基；R3為氫，C1-C4烷基；R4為C3-C6烷基，C3-C6鏈烯基，C3-C6鏈炔基，C1-C8鹵代烷基，C1-C8烷氧基烷基，C1-C8烷硫基烷基，C1-C8羥基烷基，C1-C8酰氧基烷基，C1-C8芳酰氧基烷基，C1-C8羧基烷基，C1-C8烷基羧基烷基，C6-C12芳基羧基烷基，C1-C8氨基烷基，C1-C8烷基氨基烷基，C1-C8二烷基氨基烷基，C1-C8三烷基甲硅烷基烷，其中，上述各烷基部分可以是直鏈或支鏈的；C3-C8環(huán)烷基，苯基，(C3-C6烷基)苯基，C7-C12芳基烷基，C7-C12烷芳基烷基，或雜環(huán)烷基，其中，雜環(huán)部分為嗎啉基，哌啶基，吡咯烷基，哌嗪基，環(huán)氧乙烷基，氧雜環(huán)丁基，呋喃基，四氫吡喃基或四氫呋喃基，優(yōu)選C3-C6烷基，C3-C6鏈烯基，C3-C6鏈炔基，C1-C8鹵代烷基，(C1-C8烷基)硫代(C1-C8烷基)，C3-C8環(huán)烷基或苯基；并且R5為i)、由一個(gè)或多個(gè)C1-C4烷基，優(yōu)選一個(gè)或兩個(gè)甲基取代或未取代的苯基或C3-C7環(huán)烷基；或
其中R6為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C6烷基，C1-C6羥基烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6羥基鏈烯基，C2-C6鏈炔基，C2-C6羥基鏈炔基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基，優(yōu)選C3-C6烷基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；并且R7和R8獨(dú)立地為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C6烷基，C1-C6羥基烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6羥基鏈烯基，C2-C6鏈炔基，C2-C6羥基鏈炔基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基，優(yōu)選氫或C1-C4烷基，并且更優(yōu)選氫；b)、下式第二種HIV-1RT抑制劑化合物
其中B為i)、下式嘧啶
優(yōu)選下式嘧啶
其中X2為氫，C1-C4烷基，C2-C4鏈烯基，C2-C4鏈炔基，鹵素，氰基，硫代氰基，羥甲基，C1-C2鹵代烷基，硝基或氨基，優(yōu)選氫或C1-C4烷基；X3為氫，C1-C4烷基，C2-C4鏈烯基或C2-C4鏈炔基，優(yōu)選氫或C1-C4烷基；X4為OH，SH，NH2，NHCH3，N(CH3)2或NHCOCH3，優(yōu)選，NH2，NHCH3或N(CH3)2；ii)、下式嘌呤
或優(yōu)選下式嘌呤
其中X5為H或優(yōu)選C1-C4烷基；并且X6為H，OH，鹵素，NH2，NHCH3或N(CH3)2；或iii)、下式三唑
其中X7和X8各獨(dú)立地為氫，C1-C4烷基，C1-C4鹵代烷基，三甲基甲硅烷基，乙?；珻1-C6烷氧基羰基，C1-C6烷基羰基，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，或優(yōu)選NH2，NHCH3，或N(CH3)2；R1′為氨基，C1-C4氨基烷基，C2-C4氨基鏈烯基或C2-C4氨基鏈炔基，優(yōu)選氨基或C1-C4氨基烷基；并且R2′和R3′各獨(dú)立地為由相同或不同的苯基或C1-C4直鏈或支鏈烷基三取代的甲硅基；和c)、可有可無(wú)的第三種HIV RT抑制劑化合物，它不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物a)或第二種HIV-1RT抑制劑化合物b)所抑制的同種HIV-1突變菌株。
更優(yōu)選地，本發(fā)明涉及預(yù)防或治療HIV-1感染的組合物，它包含治療有效量的a)、下式第一種HIV-1RT抑制劑化合物
其中Q為-CR3＝NOR4或COYR5；Y為O；R1為氫，鹵素或C1-C4烷基；R2為氫或C1-C4烷基；R3為氫或C1-C4烷基；R4為C3-C6烷基，C3-C6鏈烯基，C3-C6鏈炔基，C1-C8鹵代烷基或(C1-C8烷基)硫代(C1-C8烷基)，其中上述各烷基部分可以是直鏈或支鏈的；C3-C8環(huán)烷基或苯基；并且R5為
i)、由一個(gè)或兩個(gè)甲基取代或未取代的苯基或C3-C7環(huán)烷基；或
其中R6為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C6烷基，C1-C6羥基烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6羥基鏈烯基，C2-C6鏈炔基，C2-C6羥基鏈炔基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；并且R7和R8獨(dú)立地為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C4烷基；b)、下式第二種HIV-1RT抑制劑化合物
其中B為i)、下式嘧啶
其中X2為氫或C1-C4烷基；X3為氫或C1-C4烷基；
X4為NH2，NHCH3或N(CH3)2；ii)、下式嘌呤
其中X5為H或優(yōu)選C1-C4烷基；并且iii)、下式三唑
其中X7和X8各獨(dú)立地為氫，C1-C4烷基，C1-C4鹵代烷基，三甲基甲硅烷基，乙?；?，C1-C6烷氧基羰基，C1-C6烷基羰基，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，或優(yōu)選NH2，NHCH3，或N(CH3)2；R1′為氨基，C1-C4氨基烷基；并且R2′和R3′各獨(dú)立地為由相同或不同的苯基或C1-C4直鏈或支鏈烷基三取代的甲硅烷基；和c)、可有可無(wú)的第三種HIV RT抑制劑化合物，它不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物a)或第二種HIV-1RT抑制劑化合物b)所抑制的同種HIV-1突變菌株。
最優(yōu)選地，本發(fā)明涉及預(yù)防或治療HIV-1感染的組合物，它包含治療有效量的a)、下式第一種HIV-1RT抑制劑化合物
其中R2為氫，甲基或乙基；并且R5為i)、苯基或C3-C7環(huán)烷基；或
其中R6為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C3-C6烷基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；并且R7和R8獨(dú)立地為氫；b)、下式第二種HIV-1RT抑制劑化合物
其中B為i)、下式嘧啶
其中X2為氫或C1-C4烷基；X3為氫或C1-C4烷基；ii)、下式嘌呤
其中X5為C1-C4烷基；或者iii)、下式三唑
其中X7和X8各獨(dú)立地為NH2，NHCH3，或N(CH3)2；R1′為氨基，C1-C4氨基烷基；并且R2′和R3′各獨(dú)立地為由相同或不同的苯基或C1-C4直鏈或支鏈烷基三取代的甲硅烷基；和c)、可有可無(wú)的第三種HIV RT抑制劑化合物，它不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物a)或第二種HIV-1RT抑制劑化合物b)所抑制的同種HIV-1突變菌株。
如美國(guó)專利5,268,389所述，可制備本發(fā)明組合物中用作第一種HIV-1RT抑制劑化合物的式I化合物。如公開的歐洲專利申請(qǐng)0 530 407所述，可制備本發(fā)明組合物中用作第二種HIV-1RT抑制劑化合物TSAO化合物。
可通過(guò)下列方式，如口服，非腸道，舌下，吸入噴霧劑，直腸或者局部，以含常規(guī)無(wú)毒可藥用載體，佐劑和溶媒的劑量單位制劑形式給予本發(fā)明組合物。在標(biāo)準(zhǔn)的藥學(xué)課本，如Remington′s Pharmaceutical Sciences，16th Edition，Mack Publishing Company，Easton，PA(1980)中可以找到適宜的載體，佐劑和溶媒。
可與載體混合來(lái)生產(chǎn)單一劑型的治療有效量活性組分將根據(jù)治療宿主的年齡和疾病以及特定給藥方式變化。通常，以獲得抗病毒有效結(jié)果而不引起任何毒副作用的濃度水平來(lái)給予本發(fā)明組合物中的活性組分。
在本發(fā)明組合物中的第一種HIV-1RT抑制劑化合物與第二種HIV-1RT抑制劑化合物的比率可根據(jù)所選擇的第一種HIV-1RT抑制劑化合物與第二種HIV-1RT抑制劑化合物和HIV感染的癥狀和/或嚴(yán)重性變化，但通常大約為重量比1∶100-100∶1，優(yōu)選大約為重量比1∶5-5∶1。在包含可有可無(wú)的第三種HIV RT抑制劑化合物的本發(fā)明組合物中，第三種HIV RT抑制劑化合物的含量將根據(jù)HIV-1感染的癥狀和/或嚴(yán)重性和所選擇的第三種HIV RT抑制劑化合物變化，但通常大約為組合物總重量的1％-99％，優(yōu)選大約為組合物總重量的20％-80％。當(dāng)將第一種HIV RT抑制劑化合物，第二種HIV RT抑制劑化合物，和第三種HIV RT抑制劑化合物(如果選擇)，以含所有組分的組合物形式給予病人或者可將組分分別給予病人。例如，可首先將第一種HIV-1RT抑制劑化合物給予病人，然后將第二種HIV-1RT抑制劑化合物給予病人，然后將第三種HIV-1RT抑制劑化合物(如果選擇)給予病人。或者，例如，可首先將第二種HIV-1RT抑制劑化合物給予病人，然后將將第一種HIV-1RT抑制劑化合物給予病人，然后將第三種HIV-1RT抑制劑化合物(如果選擇)給予病人?；蛘撸?，可首先將第三種HIV-1RT抑制劑化合物(如果選擇)給予病人，然后給予第一種HIV-1RT抑制劑化合物和第二種HIV-1RT抑制劑化合物?；蛘?，可將第一種HIV-1RT抑制劑化合物和第二種HIV-1RT抑制劑化合物的組合物給予病人，然后給予第三種HIV-1RT抑制劑化合物?；蛘撸墒紫葘⒌诙NHIV-1RT抑制劑化合物和第三種HIV-1RT抑制劑化合物給予病人，然后給予第一種HIV-1RT抑制劑化合物，等等。
可將本發(fā)明組合物中的活性組分作為唯一的活性藥物來(lái)給予時(shí)，也可以將活性組分與一種或多種其它藥物聯(lián)合使用，其中所述其它藥物是對(duì)本發(fā)明組合物中活性組分無(wú)毒的或者它與活性組分的聯(lián)合對(duì)所治療的宿主無(wú)毒。
下列實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)施例材料和方法試驗(yàn)化合物如上Perez-perez等人所述合成TSAO衍生物〔1-[2′，5′-二-0-(叔丁基二甲基甲硅烷基)-β-D-呋喃核糖基]-3-N-甲基胸腺嘧啶-3′-螺-5″-(4″-氨基-1″，2″-氧硫雜環(huán)戊烯2″，2″-二氧化物(TSAO-m3T)。由Zhang Hao(National Institutes ofHealth，Bethesda，MD)提供或從Pharmatech International Inc.(WestOrange，NJ)得到 TIBO R82913。分別由Boehringer IngelheimPharmaceuticals，Inc.(Ridgefield，CT)和Merck，Sharp&Dohme(WestPoint，PA)提供Nevirapine(BI-RG-587)和吡啶酮L-697，661。從The Upjohn Company(kalamazoo，MI)得到BHAP U-88204(N-異丙基-2-〔4-(2-酮基吲哚基)-1-哌嗪基〕-3-吡啶胺)并且從Hoechst AG(Frankfurt，Germany)得到BHAP U-90152。由FukushimaMedical College(Fukushima，Japan)提供MCK-442。用美國(guó)專利5,268,389中所描述的方法制備在下表A列出的化合物I，II，III，IV，和V。
表A
BHAP U-90152具有下列結(jié)構(gòu)
MCK-442具有下列結(jié)構(gòu)
細(xì)胞和病毒從American Tissue Cell Cμ lture Collection(Rockville，Md.)得到CEM細(xì)胞。HIV-1(IIIB)最初從長(zhǎng)時(shí)間受HIV-1感染的H9細(xì)胞的培養(yǎng)上清液中得到，并且由R.C.Gallo和M.Popovic(NationalInstitutes of Health，Bethesda，MD)提供。選擇抗單獨(dú)或聯(lián)合給予的HIV-1特異性RT抑制劑的HIV-1(IIIB)突變菌株在含幾種固定濃度試驗(yàn)化合物的25cm2培養(yǎng)瓶(Falcon；BectonDickinson)中，將HIV-1(IIIB)在5ml CEM細(xì)胞培養(yǎng)基(4×105個(gè)細(xì)胞/ml)中培養(yǎng)2-3代來(lái)制備突變HIV-1菌株。培養(yǎng)基由含10％胎牛血清，2mM L-谷氨酰胺，和0.075％NaHCO3的RPMI 1640組成。最初感染倍數(shù)大約為CCID50(50％細(xì)胞培養(yǎng)基感染劑量)的1000倍。每3-4天，通過(guò)將0.5-1.0ml被感染的培養(yǎng)基上清液加到每ml含4×105個(gè)未被感染的CEM細(xì)胞的5ml懸浮液中，培養(yǎng)出新一代。將在細(xì)胞培養(yǎng)基中形成合體細(xì)胞作為突破的參數(shù)。在聯(lián)合藥物試驗(yàn)中，將化合物以單一藥物試驗(yàn)中所使用的兩個(gè)最低濃度相同的起始濃度合并。在CEM細(xì)胞培養(yǎng)基中，幾種HIV-1突變菌株對(duì)試驗(yàn)化合物的敏感性以250,000個(gè)細(xì)胞/ml的濃度，將CEM細(xì)胞懸浮在培養(yǎng)基中并以100倍50％細(xì)胞培養(yǎng)基感染劑量/ml的野生型HIV-1(IIIB)或突變HIV-1菌株來(lái)感染CEM細(xì)胞。然后，將100μl被感染細(xì)胞的懸浮液加到200μl含100μl適當(dāng)稀釋試驗(yàn)化合物的微量滴定板孔中。在37℃下培養(yǎng)4天后，測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)基中合體細(xì)胞的形成。測(cè)定50％有效濃度(EC50)，即50％抑制HIV-1引起的合體細(xì)胞形成所需要的化合物濃度。制備突變HIV-1感染的CEM細(xì)胞培養(yǎng)基，其用于多聚酶鏈反應(yīng)分析和突變HIV-1菌株多基因(pol gene)的排序上述Balzarini I和Balzarini等人在Pro.Natl.Acad.Sci.USA 906952-6956(1993)(“Balzarini III”)中描述了所使用的方法。選擇低聚核苷酸來(lái)獲得包含RT氨基酸50-270的727-bp片斷。用1×105個(gè)細(xì)胞的10mM Tris.Hcl(PH8.8)，50mM Kcl，1.5mM MgCl2，0.1％Triton X-100，2.5單位耐熱DNA聚合酶(Dyna Zyme，F(xiàn)innzymes Inc.)和15μM的各個(gè)引物(總體積為100μl)的提取物進(jìn)行前病毒DNA的增殖(35周期)。第一組引物(5′-GTAGAATTCTGTTGACTCAGATTGG和5′-TTCTG CCAGTTCTAGCTCTGCTTCT)得到前病毒逆轉(zhuǎn)錄酶基因的900-bp產(chǎn)物。將第一個(gè)PCR得到的反應(yīng)物的十分之一作為模板，并用第二組引物(5′-CCTGAAAA TCCATACAATACTCCAGTATTTG和5′-AGTGCTTTGGTTCCTCTAAGGAGTT TAC)將其轉(zhuǎn)移到新的35-環(huán)PCR中，得到包含氨基酸50-270的727-bp逆轉(zhuǎn)錄酶片斷。第二組低聚核苷酸引導(dǎo)DNA從第一組低聚核苷酸內(nèi)合成并因此從第一個(gè)PCR中擴(kuò)大特異性產(chǎn)物，同時(shí)不進(jìn)一步擴(kuò)大非特異性產(chǎn)物。在1％瓊脂糖凝膠上可見PCR產(chǎn)物。逆轉(zhuǎn)錄酶測(cè)定反應(yīng)混合物(50μl)包含50mM Tris.HCl，PH7.8，5mM二硫蘇糖醇，300mM谷胱甘肽，500μM EDTA，150mM KCl，5mM MgCl2，1.25μg牛血清白蛋白，固定濃度的標(biāo)記底物[2，8-3H]dGTP(2.95μM，2μCi)，固定濃度的模板/引物聚(C).低聚(dG)(0.1mM)，0.06％Triton X-100，5μl抑制劑溶液〔含各種濃度的(5倍稀釋)試驗(yàn)化合物〕，和5μl RT抑制劑。將反應(yīng)混合物在37℃下培養(yǎng)30分鐘，此時(shí)，加入100μl小牛胸腺DNA(150μg/ml)，2ml Na4P2O7(0.1M的1MHCl)，和2ml三氯乙酸(10％，v/v)。將溶液在冰上保持30分鐘，然后洗滌酸不溶性物質(zhì)并進(jìn)行放射性分析。測(cè)定試驗(yàn)化合物的IC50，其為50％抑制病毒顆粒產(chǎn)生的RT活性時(shí)的化合物濃度。結(jié)果化合物I，II，III，IV，和V的抗病毒活性譜已證明，在CEM細(xì)胞中，化合物I，II，III，IV，和V明顯抑制HIV-1(IIIB)的復(fù)制。其50％抑制濃度范圍為0.004-0.05μg/ml?；钚宰畲蟮幕衔颕，II，III，IV，和V對(duì)野生型HIV-1的抑制活性優(yōu)于HIV-1特異性RT抑制劑nevirapine，BHAP，吡啶酮，TIB0和TSAO-m3T(表1)。然而，與后面HIV-1特異性RT抑制劑相反，在培養(yǎng)基中，化合物I，II，III，IV，和V對(duì)吡啶酮耐受性RT/181-Cys HIV-1突變病毒所引起的細(xì)胞病(cytopathicity)的抑制作用更強(qiáng)。結(jié)果，化合物I，II，III，IV，和V抗RT/181-Cys HIV-1突變病毒的活性至少比其它HIV-1特異性RT抑制劑大1-2個(gè)數(shù)量級(jí)。
化合物I，II，III，IV，和V對(duì)其它突變HIV-1菌株(所述菌株在其RT上含138 Glu→Lys和106 Val→Ala變種)的抗病毒作用至少比其它化合物大10-50倍?；衔颕，II，III，IV，和V抗RT/100-Ile和RT/103-Asn突變病毒菌株的活性低于抗野生型HIV-1病毒的化合物。然而，其抗病毒作用仍然在ng/ml范圍，他比其它HIV-1特異性RT抑制劑的濃度低，其它抑制劑的ED50值接近或者甚至明顯高于1μg/ml(表1)。
表1不同的突變HIV-1菌株的敏感/耐受譜
*WT-野生型*在CEM細(xì)胞中，50％有效濃度，或50％抑制病毒引起的細(xì)胞病變所需要的化合物濃度*在含TIBO R82150，TIBO R82913，nevirapine，TSAO-m3T和吡啶酮L-697，661的細(xì)胞培養(yǎng)基中選擇后，分別得到含100Leu→Ile，103Lys→Asn，106Val→Ala，138Glu→Lys或181Tyr→Cys變種的突變病毒菌株。在上述Balzarini I，Balzarini II和Balzarini III中確定氨基酸變種?；衔颕，II，III，IV，和V對(duì)HIV-1RT的抑制作用評(píng)估化合物I，II，III，IV，和V對(duì)重組HIV-1RT的抑制作用。利用聚(C)。低聚(dG)作為模板引物和2.95μM[2，8-3H]dGTP作為放射性標(biāo)記底物，測(cè)得上述化合物是有效的HIV-1RT抑制劑。其IC50值恒定地在0.018-0.077μg/ml之間。已注意到，nevirapine，吡啶酮，BHAP和TIBO的IC50值較高，并且TSAO-m3T抑制HIV-1RT的IC50值甚至比化合物I，II，IV，和V高20-50倍(表2)。
表2抗HIV-1RT(WT)活性
50％抑制濃度。底物[2，8-3H]dGTP(2.95μM)。模板多聚(rC)低聚(dG)失效濃度將化合物I，II，III，IV，和V以及BHAP U88204和nevirapine以0.1，0.5，和2.5μg/ml的起始濃度加到HIV-1(IIIB)感染的CEM細(xì)胞中。在試驗(yàn)過(guò)程中(10次傳代培養(yǎng)或35天)，保持藥物濃度不變。然后，從細(xì)胞培養(yǎng)基中除掉藥物，并將細(xì)胞進(jìn)一步傳代培養(yǎng)至少5代。僅僅在含最低濃度(即0.1μg/m1)化合物I，II，III，IV，和V的培養(yǎng)基中出現(xiàn)病毒?；衔颲在0.5μg/m1下出現(xiàn)病毒突破(表3)。相反，在類似試驗(yàn)條件下，在感染的細(xì)胞培養(yǎng)基中，病毒對(duì)0.1和0.5μg/m1 BHAP和01.，0.5和2.5μg/ml nevirapine的抑制作用產(chǎn)生耐受性。因此，化合物I，II，III，IV，和V在HIV-1感染的細(xì)胞培養(yǎng)基中抑制病毒突破的作用至少分別為BHAP或nevirapine的5-20倍(表3)。在第10代傳代培養(yǎng)中，由UR衍生物充分保護(hù)，并因此未感染上HIV-1引起的細(xì)胞病的HIV-1感染的CEM細(xì)胞培養(yǎng)基中沒(méi)有產(chǎn)生可覺(jué)察到的p24水平，并且沒(méi)有任何前病毒DNA。除掉試驗(yàn)化合物，并進(jìn)一步在不含試驗(yàn)化合物下傳代培養(yǎng)細(xì)胞后，不出現(xiàn)病毒。因此，可以得出結(jié)論，當(dāng)在含明顯低于其它HIV-1特異性RT抑制劑濃度的化合物I，II，III，IV，和V中培養(yǎng)時(shí)，HIV-1感染的細(xì)胞培養(yǎng)基中不含病毒。
表3在CEM細(xì)胞培養(yǎng)物中HIV-1(III)誘導(dǎo)的細(xì)胞病的突破
從第35天開始，在試驗(yàn)化合物不存在下進(jìn)行傳代培養(yǎng)在用化合物I，II，III，IV，和V治療情況下出現(xiàn)的突變HIV-1菌株的特性通過(guò)RT上可能存在的變種來(lái)確定在用化合物I，II，III，IV，和V，以及用化合物A和B(如下定義)治療情況下出現(xiàn)的七種突變HIV-1菌株RT基因的特性。在氨基酸的100，101，103和138部位發(fā)現(xiàn)變種。有趣的是，發(fā)現(xiàn)了三種新的變種。由于密碼子第二個(gè)堿基(A→C)的顛換，突變HIV-1/IV菌株含103Lys→Thr變種?；衔顱在RT的101氨基酸部位選擇新的變種，即由Glu(GAA)取代Lys(AAA)。當(dāng)以0.1μg/ml的濃度使用時(shí)，化合物V選擇在病毒RT上含雙變種，即101-Lys→Ile和141-Glu→Glu的病毒(表4)。
化合物A的結(jié)構(gòu)為
化合物B的結(jié)構(gòu)為
表4在化合物A、B、I、II、III、IV、V、BHAP或Nevirapine選擇過(guò)程中獲得的突變HIV-1菌株逆轉(zhuǎn)錄酶的氨基酸突變
<p>在用化合物I，II，III，IV，和V，A和B治療情況下出現(xiàn)的其它突變病毒在其RT的100，101，103和138部位包含氨基酸改變，其中，所述RT已在先前有關(guān)HIV-1特異性RT抑制劑中報(bào)道過(guò)，它包括TIBOR82150，TIBO R82913，BHAP U88204，吡啶酮L-697，661和TSAO衍生物。在用BHAP和nevirapine治療情況下出現(xiàn)的病毒在其RT中分別包含181Tyr→Cys和106Val→Ala突變。突變HIV-1菌株對(duì)其它HIV-1特異性RT抑制劑的敏感性/耐受性在其RT中包含新的101Lys→Glu突變的突變HIV-1/B顯示一種特有的耐受模式?；衔颕以及所有其它HIV-1特異性抑制劑對(duì)該病毒菌株的作用至少降低2-3個(gè)數(shù)量級(jí)(EC50≥1μg/ml)。然而，吡啶酮L-697，661保留了對(duì)該突變病毒菌株的顯著的抑制效力(EC500.035μg/ml)(表5)。在其RT中包含103Lys→Asn突變的三個(gè)突變HIV-1菌株對(duì)HIV-1特異性抑制劑的敏感譜是顯著不同的。例如，TIBO，BHAP，nevaripine，吡啶酮和MKC-442對(duì)HIV-1/III(0.1)的抑制作用比HIV-I/V(0.5)大10-30倍?；衔颕，II，和IV對(duì)HIV-1/V(0.5)的抑制作用比對(duì)HIV-1/III(0.1)的抑制作用僅僅弱3-5倍，而TSAO-m3T對(duì)兩種病毒突變體的抑制作用是相等的。第三個(gè)RT/103-Asn突變病毒菌株〔HIV-I/I(0.1)〕顯示對(duì)HIV-1特異性RT抑制劑的耐受/敏感譜介于其它兩種RT/103-Asn突變病毒之間。含雙(101Lys→Ile+141Gly→Glu)突變的HIV-1/V(0.1)對(duì)些化合物保留了顯著的敏感性，包括吡啶酮，TSAO-m3T，MKC-442，和化合物II和III。
表5HIV-1突變體對(duì)HIV-1特異的RT抑制劑的敏感/耐受譜
*(-)-2’-脫氧-3’-硫代胞苷最后，在其RT的103位上，含新的Thr突變的HIV-1/IV(0.1)突變菌株保留了對(duì)大多數(shù)ng/ml范圍HIV-1特異性抑制劑的敏感性，除了nevirapine，TIBO R82913，化合物III和化合物V，它們僅僅以1.1-2.75μg/ml的EC50抑制該突變病毒。用化合物IV，TSAO-m3T和/或BHAP U90152進(jìn)行兩個(gè)和三個(gè)藥物的聯(lián)合治療將化合物IV，BHAP和TSAO-m3T以0.04，0.10和0.25μg/ml(化合物IV和BHAP)或者1.0，2.5和5.0μg/ml(TSAO-m3T)的濃度加到HIV-1感染的CEM細(xì)胞中。另外，通過(guò)以其在單一藥物試驗(yàn)中所使用的最低(0.04μg/ml)或中間(0.1μg/ml)的濃度混合抑制劑，將化合物IV，BHAP和TSAO-m3T進(jìn)行各種兩個(gè)或者三個(gè)藥物的聯(lián)合。在我們的試驗(yàn)條件下，在所有評(píng)估濃度進(jìn)行單一藥物治療時(shí)都出現(xiàn)了突變病毒。在一些情況下，病毒最快在開始試驗(yàn)后的7-11天出現(xiàn)。最好時(shí)，病毒出現(xiàn)可延遲到第14天(較高濃度的BHAP和TSAO)或第21天(最高濃度的化合物IV)(表6)。
然而，以其最低濃度(即0.04μg/m l的化合物IV和1.0μg/ml的TSAO-m3T)結(jié)合化合物IV和TSAO-m3T時(shí)，在感染后的第18天出現(xiàn)HIV-1誘導(dǎo)的細(xì)胞病變的第一個(gè)信號(hào)，而0.04μg/ml的化合物IV與2.5μg/ml的TSAO的組合物將病毒突破延遲到感染后的第28天，它比以相同濃度或者是2.5倍(TSAO-m3T)或6倍(化合物IV)濃度的兩種化合物作為單一藥物加到細(xì)胞培養(yǎng)基中能延遲長(zhǎng)得多的時(shí)間(表6)。
用化合物IV(0.1μg/ml)和TSAO-m3T(1.0或2.5μg/ml)的組合物更能延遲病毒突破。在這些試驗(yàn)條件下，病毒被完全抑制，直到第十三次傳代培養(yǎng)(感染后的第46天)。在不存在試驗(yàn)化合物情況下，將該培養(yǎng)物再傳代培養(yǎng)10次(感染后的第77天)，證明了沒(méi)有病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞病變，也證明了培養(yǎng)物是病毒抗原(p24)-陰性的。而且以單一藥物2.5-5倍較高濃度使用化合物IV或TSAO-m3T時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)物中的病毒僅可被抑制14-25天。因此，化合物IV與TSAO-m3T組合產(chǎn)生顯著的延遲或甚至完全預(yù)防突變病毒出現(xiàn)，如果以相同或甚至2.5-5倍較高濃度單獨(dú)使用這些化合物時(shí)，不能獲得這樣的結(jié)果。三組合的化合物IV，BHAP和TSAO-m3T甚至獲得更顯著的作用。當(dāng)以較低濃度加入時(shí)，三藥物組合物基本上能延遲(到第39天，第46天，第56天)或者甚至預(yù)防耐受病毒的出現(xiàn)〔第77天沒(méi)有病毒出現(xiàn)(第22次傳代培養(yǎng))〕，然而，最高單一藥物濃度僅僅預(yù)防病毒突破到14-21天(表6)。所有以0.1μg/ml組合化合物IV的三藥物組合物能夠從病毒中清除HIV-1感染的CEM細(xì)胞培養(yǎng)物。事實(shí)上，通過(guò)PCR證明，這些培養(yǎng)物不含有前病毒，不產(chǎn)生p24并且在第13代以后，在沒(méi)有試驗(yàn)化合物情況下生長(zhǎng)，其生長(zhǎng)速度與未感染的細(xì)胞培養(yǎng)物沒(méi)有區(qū)別。
表6不同濃度下的HIV-1特異的RT抑制劑的不同組合物中突變HIV-1菌株在CEM細(xì)胞培養(yǎng)物中的突破(化合物IV，TSA0-m3T and BHAP U90152)
表6(續(xù)
>
權(quán)利要求
1.預(yù)防或治療HIV-1感染的組合物，它包括治療有效量的a)、下式第一種HIV-1RT抑制劑化合物
其中X1和X2獨(dú)立地為O或S；Q為-CR3＝NOR4或COYR5；Y為O或S；R1為氫，鹵素，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，C3-C4鏈烯氧基，C3-C4鏈炔氧基，一、二或三鹵代甲基，三氟甲氧基，C1-C4烷硫基，C3-C4支鏈烷硫基，硝基或氰基；R2為氫，C1-C4烷基或鹵素；R3為氫，C1-C4烷基；R4為C3-C6烷基，C3-C6鏈烯基，C3-C6鏈炔基，C1-C6鹵代烷基，C1-C8烷氧基烷基，C1-C8烷硫基烷基，C1-C8羥基烷基，C1-C8酰氧基烷基，C1-C8芳酰氧基烷基，C1-C8羧基烷基，C1-C8烷基羧基烷基，C6-C12芳基羧基烷基，C1-C8氨基烷基，C1-C8烷基氨基烷基，C1-C8二烷基氨基烷基，C1-C8三烷基甲硅烷基烷基，其中，上述各烷基部分可以是直鏈或支鏈的；C3-C8環(huán)烷基，苯基，(C1-C6烷基)苯基，C7-C12芳基烷基，C7-C12烷芳基烷基，或雜環(huán)烷基，其中，雜環(huán)部分為嗎啉基，哌啶基，吡咯烷基，哌嗪基，環(huán)氧乙烷基，氧雜環(huán)丁烷基，呋喃基，四氫吡喃基或四氫呋喃基；并且R5為i)、由一個(gè)或多個(gè)C1-C4烷基取代或未取代的苯基或C3-C7環(huán)烷基；或
其中R6為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C6烷基，C1-C6羥基烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6羥基鏈烯基，C2-C6鏈炔基，C2-C6羥基鏈炔基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；并且R7和R8獨(dú)立地為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C6烷基，C1-C6羥基烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6羥基鏈烯基，C2-C6鏈炔基，C2-C6羥基鏈炔基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；b)、第二種HIV-1RT抑制劑化合物，它不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物a)所抑制的同種HIV-1突變菌株；和c)、可有可無(wú)的第三種HIV RT抑制劑化合物。
2.權(quán)利要求1組合物，其中X1為O并且X2為S。
3.權(quán)利要求1組合物，其中Q為COYR5。
4.權(quán)利要求3組合物，其中Y為O。
5.權(quán)利要求1組合物，其中R1為鹵素。
6.權(quán)利要求1組合物，其中R2為氫，甲基或乙基。
7.權(quán)利要求1組合物，其中，R4為C3-C6烷基，C3-C6鏈烯基，C3-C6鏈炔基，C1-C8鹵代烷基或(C1-C8烷基)硫代(C1-C8烷基)，其中，上述各烷基部分可以是直鏈的或支鏈的；C3-C8環(huán)烷基或苯基。
8.權(quán)利要求1組合物，其中R5為i)、由一個(gè)或兩個(gè)甲基取代或未取代的苯基或C3-C7環(huán)烷基；或
其中R6為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C6烷基，C1-C6羥基烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6羥基鏈烯基，C2-C6鏈炔基，C2-C6羥基鏈炔基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；并且R7和R8為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C4烷基。
9.權(quán)利要求8組合物，其中R6為直鏈，支鏈或環(huán)狀C3-C6烷基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；并且R7和R8為氫。
10.權(quán)利要求1組合物，其中第二種HIV-1RT抑制劑b)為下式化合物
其中B為i)、下式嘧啶
其中X2為氫，C1-C4烷基，C2-C4鏈烯基，C2-C4鏈炔基，鹵素，氰基，硫代氰基，羥基甲基，C1-C2鹵代烷基，硝基或氨基；X3為氫，C1-C4烷基，C2-C4鏈烯基或C2-C4鏈炔基；X4為OH，SH，NH2，NHCH3，N(CH3)2或NHCOCH3；ii)、下式嘌呤
或下式嘌呤
其中X5為H或C1-C4烷基；并且X6為H，OH，鹵素，NH2，NHCH3或N(CH3)2；或iii)、下式三唑
其中X7和X8各獨(dú)立地為氫，C1-C4烷基，C1-C4鹵代烷基，三甲基甲硅烷基，乙酰基，C1-C6烷氧基羰基，C1-C6烷基羰基，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，NH2，NHCH3，或 N(CH3)2；R1′為氨基，C1-C4氨基烷基，C2-C4氨基鏈烯基或C2-C4氨基鏈炔基；并且R2′和R3′各獨(dú)立地為由相同或不同的苯基或C1-C4直鏈或支鏈烷基三取代的甲硅烷基。
11.權(quán)利要求10組合物，其中B為i)、下式嘧啶
其中X2為氫或C1-C4烷基；X3為氫或C1-C4烷基；X4為NH2，NHCH3或N(CH3)2；ii)、下式嘌呤
其中X5為H或優(yōu)選C1-C4烷基；或者iii)、下式三唑
其中X7和X8各獨(dú)立地為氫，C1-C4烷基，C1-C4鹵代烷基，三甲基甲硅烷基，乙?；?，C1-C6烷氧基羰基，C1-C6烷基羰基，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，NH2，NHCH3，或N(CH3)2。
12.權(quán)利要求11組合物，其中B為i)、下式嘧啶
其中X2為氫或C1-C4烷基；X3為氫或C1-C4烷基；ii)、下式嘌呤
其中X5為C1-C4基；或者iii)、下式三唑
其中X7和X8各獨(dú)立地為NH2，NHCH3，或N(CH3)2。
13.權(quán)利要求10組合物，其中R1′為氨基或C1-C4氨基烷基。
14.權(quán)利要求10組合物，其中第三種HIV RT抑制劑化合物不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物或第二種HIV-1RT抑制劑化合物所抑制的同種HIV-1突變菌株。
15.權(quán)利要求14組合物，其中第三種HIV RT抑制劑化合物是不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物或第二種HIV-1RT抑制劑化合物所抑制的同種HIV-1突變菌株的第三種HIV-1RT抑制劑化合物。
16.權(quán)利要求10組合物，其中第三種HIV RT抑制劑化合物是不區(qū)分HIV-1和HIV-2RT的HIV RT抑制劑。
17.權(quán)利要求1化合物，它包括a)、下式第一種HIV-1RT抑制劑化合物
其中Q為-CR3＝NOR4或COYR5；Y為O；R1為氫，鹵素或C1-C4烷基；R2為氫或C1-C4烷基；R3為氫或C1-C4烷基；R4為C3-C6烷基，C3-C6鏈烯基，C3-C6鏈炔基，C1-C8鹵代烷基或(C1-C8烷基)硫代(C1-C8烷基)，其中上述各烷基部分可以是直鏈或支鏈的；C3-C8環(huán)烷基或苯基；并且R5為i)、由一個(gè)或兩個(gè)甲基取代或未取代的苯基或C3-C7環(huán)烷基；或
其中R6為直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C6烷基，C1-C6羥基烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6羥基鏈烯基，C2-C6鏈炔基，C2-C6羥基鏈炔基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；并且R7和R8獨(dú)立地為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C4烷基；b)、下式第二種HIV-1RT抑制劑化合物
其中B為i)、下式嘧啶
其中X2為氫或C1-C4烷基；X3為氫或C1-C4烷基；X4為NH2，NHCH3或N(CH3)2；ii)、下式嘌呤
其中X5為C1-C4烷基；或者iii)、下式三唑
其中X7和X8各獨(dú)立地為氫，C1-C4烷基，C1-C4鹵代烷基，三甲基甲硅烷基，乙?；?，C1-C6烷氧基羰基，C1-C6烷基羰基，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，NH2，NHCH3，或N(CH3)2；R1′為氨基或C1-C4氨基烷基；并且R2′和R3′各獨(dú)立地為由相同或不同的苯基或C1-C4直鏈或支鏈烷基三取代的甲硅基；和c)、可有可無(wú)的第三種HIV RI抑制劑化合物，它不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物a)或第二種HIV-1RT抑制劑化合物b)所抑制的同種HIV-1突變菌株。
18.權(quán)利要求14組合物，它包括a)、下式第一種HIV-1RT抑制劑化合物
其中R2為氫，甲基或乙基；并且R5為i)、苯基或C3-C7環(huán)烷基；或
其中R6為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C3-C6烷基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；并且R7和R8獨(dú)立地為氫；b)、下式第二種HIV-1RT抑制劑化合物
其中B為i)、下式嘧啶
其中X2為氫或C1-C4烷基；X3為氫或C1-C4烷基；ii)、下式嘌呤
其中X5為C1-C4基；或者iii)、下式三唑
其中X7和X8各獨(dú)立地為NH2，NHCH3，或N(CH3)2；R1′為氨基，C1-C4氨基烷基；并且R2′和R3′各獨(dú)立地為由相同或不同的苯基或C1-C4直鏈或支鏈烷基三取代的甲硅烷基；和c)、可有可無(wú)的第三種HIV RT抑制劑化合物，它不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物a)或第二種HIV-1RT抑制劑化合物b)所抑制的相同HIV-1突變菌株。
19.預(yù)防或治療感染HIV-1的病人的方法，它包括給予所述病人治療有效量的組合物，該組合物包含治療有效量的a)、下式第一種HIV-1RT抑制劑化合物化合物
其中X1和X2獨(dú)立地為O或S；Q為-CR3＝NOR4或COYR5；Y為O或S；R1為氫，鹵素，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，C3-C4鏈烯氧基，C3-C4鏈炔氧基，一、二或三鹵代甲基，三氟甲氧基，C1-C4烷硫基，C3-C4支鏈烷硫基，硝基或氰基；R2為氫，C1-C4烷基或鹵素；R3為氫或C1-C4烷基；R4為C3-C6烷基，C3-C6鏈烯基，C3-C6鏈炔基，C1-C6鹵代烷基，C1-C8烷氧基烷基，C1-C8烷硫基烷基，C1-C8羥基烷基，C1-C8酰氧基烷基，C1-C8芳酰氧基烷基，C1-C8羧基烷基，C1-C8烷基羧基烷基，C6-C12芳基羧基烷基，C1-C8氨基烷基，C1-C8烷基氨基烷基，C1-C8二烷基氨基烷基，C1-C8三烷基甲硅烷基烷基，其中，上述各烷基部分可以是直鏈或支鏈的；C3-C8環(huán)烷基，苯基，(C1-C6烷基)苯基，C7-C12芳基烷基，C7-C12烷芳基烷基，或雜環(huán)烷基，其中，雜環(huán)部分為嗎啉基，哌啶基，吡咯烷基，哌嗪基，環(huán)氧乙烷基，氧雜環(huán)丁基，呋喃基，四氫吡喃基或四氫呋喃基；并且R5為i)、由一個(gè)或多個(gè)C1-C4烷基取代或未取代的苯基或C3-C7環(huán)烷基；或
其中R6為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C6烷基，C1-C6羥基烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6羥基鏈烯基，C2-C6鏈炔基，C2-C6羥基鏈炔基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；并且R7和R8獨(dú)立地為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C6烷基，C1-C6羥基烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6羥基鏈烯基，C2-C6鏈炔基，C2-C6羥基鏈炔基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；b)、第二種HIV-1RT抑制劑化合物，它不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物a)所抑制的同種HIV-1突變菌株；和c)、可有可無(wú)的第三種HIV RT抑制劑化合物。
20.權(quán)利要求19方法，其中X1為O并且X2為S。
21.權(quán)利要求19方法，其中Q為COYR5。
22.權(quán)利要求21方法，其中Y為O。
23.權(quán)利要求19方法，其中R1為鹵素。
24.權(quán)利要求19方法，其中R2為氫，甲基或乙基。
25.權(quán)利要求19方法，其中，R4為C3-C6烷基，C3-C6鏈烯基，C3-C6鏈炔基，C1-C8鹵代烷基或(C1-C8烷基)硫代(C1-C8烷基)，其中，上述各烷基部分可以是直鏈的或支鏈的；C3-C8環(huán)烷基或苯基。
26.權(quán)利要求19方法，其中R5為i)、由一個(gè)或兩個(gè)甲基取代或未取代的苯基或C3-C7環(huán)烷基；或
其中R6為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C6烷基，C1-C6羥基烷基，C2-C6鏈烯基，C2-C6羥基鏈烯基，C2-C6鏈炔基，C2-C6羥基鏈炔基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；并且R7和R8為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C4烷基。
27.權(quán)利要求26方法，其中R6為直鏈，支鏈或環(huán)狀C3-C6烷基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；并且R7和R8為氫。
28.權(quán)利要求19方法，其中第二種HIV-1RT抑制劑b)為下式TSAO化合物
其中B為i)、下式嘧啶
其中X2為氫，C1-C4烷基，C2-C4鏈烯基，C2-C4鏈炔基，鹵素，氰基，硫代氰基，羥甲基，C1-C2鹵代烷基，硝基或氨基；X3為氫，C1-C4烷基，C2-C4鏈烯基或C2-C4鏈炔基；X4為OH，SH，NH2，NHCH3，N(CH3)2或NHCOCH3；ii)、下式嘌呤
或下式嘌呤
其中X5為H或C1-C4烷基；并且X6為H，OH，鹵素，NH2，NHCH3或N(CH3)2；或iii)、下式三唑
其中X7和X8各獨(dú)立地為氫，C1-C4烷基，C1-C4鹵代烷基，三甲基甲硅烷基，乙?；?，C1-C6烷氧基羰基，C1-C6烷基羰基，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，NH2，NHCH3，或N(CH3)2；R1′為氨基，C1-C4氨基烷基，C2-C4氨基鏈烯基或C2-C4氨基鏈炔基；并且R2′和R3′各獨(dú)立地為由相同或不同的苯基或C1-C4直鏈或支鏈烷基三取代的甲硅烷基。
29.權(quán)利要求28方法，其中B為i)、下式嘧啶
其中X2為氫或C1-C4烷基；X3為氫或C1-C4烷基；X4為NH2，NHCH3或N(CH3)2；ii)、下式嘌呤
其中X5為C1-C4基；或者iii)、下式三唑
其中X7和X8各獨(dú)立地為氫，C1-C4烷基，C1-C4鹵代烷基，三甲基甲硅烷基，乙酰基，C1-C6烷氧基羰基，C1-C6烷基羰基，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，NH2，NHCH3，或N(CH3)2。
30.權(quán)利要求29方法，其中B為i)、下式嘧啶
其中X2為氫或C1-C4烷基；X3為氫或C1-C4烷基；ii)、下式嘌呤
其中X5為C1-C4烷基；或者iii)、下式三唑
其中X7和X8各獨(dú)立地為NH2，NHCH3，或N(CH3)2。
31.權(quán)利要求28方法，其中R1′為氨基或C1-C4氨基烷基。
32.權(quán)利要求28方法，其中第三種HIV RT抑制劑化合物是不區(qū)分HIV-1和HIV-2RT的HIV RT抑制劑。
33.權(quán)利要求28方法，其中第三種HIV RT抑制劑化合物不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物或第二種HIV-1RT抑制劑化合物所抑制的同種HIV-1突變菌株。
34.權(quán)利要求33方法，其中第三種HIV RT抑制劑化合物是不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物或第二種HIV-1RT抑制劑化合物所抑制的同種HIV-1突變菌株的第三種HIV-1RT抑制劑化合物。
35.權(quán)利要求19方法，其中組合物包括a)、下式第一種HIV-1RT抑制劑化合物
其中Q為-CR3＝NOR4或COYR5；Y為O；R1為氫，鹵素或C1-C4烷基；R2為氫或C1-C4烷基；R3為氫或C1-C4烷基；R4為C3-C6烷基，C3-C6鏈烯基，C3-C6鏈炔基，C1-C8鹵代烷基或(C1-C8烷基)硫代(C1-C8烷基)，其中上述各烷基部分可以是直鏈或支鏈的；C3-C8環(huán)烷基或苯基；并且R5為i)、由一個(gè)或兩個(gè)甲基取代或未取代的苯基或C3-C7環(huán)烷基；或ii)、
其中R6為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C6烷基，C1-C6羥基烷基C2-C6鏈烯基，C2-C6羥基鏈烯基，C2-C6鏈炔基，C2-C6羥基鏈炔基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；并且R7和R8獨(dú)立地為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C1-C4烷基；b)、下式第二種HIV-1RT抑制劑化合物
其中B為i)、下式嘧啶
其中X2為氫或C1-C4烷基；X3為氫或C1-C4烷基；X4為NH2，NHCH3或N(CH3)2；或者ii)、下式嘌呤
其中X5為C1-C4烷基；或者iii)、下式三唑
其中X7和X8各獨(dú)立地為氫，C1-C4烷基，C1-C4鹵代烷基，三甲基甲硅烷基，乙?；珻1-C6烷氧基羰基，C1-C6烷基羰基，CONH2，CONHCH3，CON(CH3)2，NH2，NHCH3，或N(CH3)2；R1′為氨基或C1-C4氨基烷基；并且R2′和R3′各獨(dú)立地為由相同或不同的苯基或C1-C4直鏈或支鏈烷基三取代的甲硅烷基；和c)、可有可無(wú)的第三種HIV RT抑制劑化合物，它不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物a)或第二種HIV-1RT抑制劑化合物b)所抑制的同種HIV-1突變菌株。
36.權(quán)利要求35方法，其中，組合物包括a)、下式第一種HIV-1RT抑制劑化合物
其中R2為氫，甲基或乙基；并且R5為i)、苯基或C3-C7環(huán)烷基；或
其中R6為氫或直鏈，支鏈或環(huán)狀C3-C6烷基，C1-C6一、二或三鹵代烷基或C1-C6硫代烷基；并且R7和R8獨(dú)立地為氫；b)、下式第二種HIV-1RT抑制劑化合物
其中B為i)、下式嘧啶
其中X2為氫或C1-C4烷基；X3為氫或C1-C4烷基；ii)、下式嘌呤
其中X5為C1-C4烷基；或者iii)、下式三唑
其中X7和X8各獨(dú)立地為NH2，NHCH3，或N(CH3)2；R1′為氨基，C1-C4氨基烷基；并且R2′和R3′各獨(dú)立地為由相同或不同的苯基或C1-C4直鏈或支鏈烷基三取代的甲硅基；和c)、可有可無(wú)的第三種HIV RT抑制劑化合物，它不抑制第一種HIV-1RT抑制劑化合物a)或第二種HIV-1RT抑制劑化合物b)所抑制的同種HIV-1突變菌株。
全文摘要
本發(fā)明涉及預(yù)防或治療HIV-1感染的組合物，該組合物包含HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，雜環(huán)碳(氧/硫)N-酰苯胺化合物，第二種HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑化合物，它不抑制雜環(huán)碳(氧/硫)N-酰苯胺化合物所抑制的同種突變菌株，和可有可無(wú)的第三種HIV逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。
文檔編號(hào)A61P37/04GK1167442SQ95196540
公開日1997年12月10日 申請(qǐng)日期1995年11月29日 優(yōu)先權(quán)日1994年11月30日
發(fā)明者J·M·R·巴勒加里尼 申請(qǐng)人:里加研究所