專利名稱：：用作治療載體的經(jīng)噴霧干燥的微顆粒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及噴霧干燥的微顆粒及其用作治療性載體的用途。具體來(lái)說(shuō)，本發(fā)明涉及診斷和治療劑的運(yùn)送方式以及生物技術(shù)產(chǎn)品，包括以rDNA技術(shù)為主的治療劑。
背景技術(shù)：
：治療劑最常用的給藥方式，經(jīng)口或經(jīng)胃腸道，在很大程度上不適合來(lái)源于rDNA工業(yè)的肽和蛋白質(zhì)。通常來(lái)源于血的肽和蛋白質(zhì)對(duì)腸內(nèi)酸性/蛋白酶解環(huán)境的敏感性大大地妨礙了這種給藥方式。合理的給藥方式應(yīng)該是靜脈內(nèi)給藥，但是它存在著下列問(wèn)題長(zhǎng)期給藥時(shí)病人的順應(yīng)性較差以及肝臟極頻繁的快速首過(guò)清除率，造成較短的靜脈內(nèi)給藥有效壽命。最近，已經(jīng)研究了通過(guò)粘膜傳遞的運(yùn)送可能性。在研究鼻腔運(yùn)送方式的同時(shí)，卻沒(méi)有廣泛地研究通過(guò)肺氣道的運(yùn)送肽的可能性。肺泡細(xì)胞，它們自身固有的作用就是提供了一個(gè)有效的屏障。然而，對(duì)這種給藥方法而言，物質(zhì)均勻地進(jìn)入肺泡區(qū)域具有明顯的障礙。能夠進(jìn)入肺氣道的最下區(qū)域的顆粒有一個(gè)最佳粒徑即氣動(dòng)直徑＜5μm。大于這種尺寸的顆粒將被較上的氣道嵌塞而被阻擋。從而在市場(chǎng)上普通的懸浮液制劑中，僅有10-30％的顆粒進(jìn)入最下氣道，這些顆粒通常是來(lái)自多分散懸浮液。對(duì)吸入劑來(lái)說(shuō)，目前霧化藥物的方法包括霧化，計(jì)量劑量的吸氣器和干燥粉末系統(tǒng)。水溶液的霧化要求藥物的容積大，而且包括使用笨重?cái)y帶不便的裝置。肺部給藥的最常用的方法是使用以揮發(fā)性推進(jìn)劑為主的裝置，此裝置通常被稱作計(jì)量劑量的吸氣管?；九渲脼樵谝粋€(gè)加壓金屬容器中含有溶解了藥物或藥物懸浮液的一種推進(jìn)劑溶液，推進(jìn)劑通常為CFC11，12或114。通過(guò)按壓一個(gè)調(diào)節(jié)器，釋放含有藥物懸浮液或溶液的推進(jìn)劑氣體，將藥物帶入氣道來(lái)完成給藥。在進(jìn)入肺的過(guò)程中，推進(jìn)劑蒸發(fā)使溶液產(chǎn)生微小沉淀，或從懸浮液中產(chǎn)生游離顆粒。雖這種給藥方法是完全可重復(fù)的并且價(jià)格便宜，但存在日益增長(zhǎng)的來(lái)自環(huán)境方面的壓力，要求減少CFC的使用。而且，由于CFC溶劑易于變性而且穩(wěn)定性差，所以它們與許多現(xiàn)代生物技術(shù)藥品在很大程度上不宜同時(shí)使用。與此同時(shí)，人們趨于使用干燥粉末裝置，此裝置由藥物干燥粉末構(gòu)成，此粉末通常混有一種能促進(jìn)藥物顆粒煙霧化和分散的賦形劑如乳糖或葡萄糖。解聚作用的能量通常由呼吸或通過(guò)裝置吸入空氣來(lái)提供的。藥物通常被微粉化以減少顆粒的體積。此方法對(duì)生物技術(shù)產(chǎn)品不適用。一般來(lái)講，得到的生物技術(shù)產(chǎn)品數(shù)量少，而且在與賦形劑混合之前易受目前所用的干燥和微粉化方法的影響。再者，提供在現(xiàn)代多次給藥吸氣器如Turbohaler(Astra)和Diskhaler(Glaxo)上能夠自由流動(dòng)和重復(fù)給藥的藥物摻合物和賦形劑是特別困難的。意想不到的是，研究表明經(jīng)噴霧干燥的(球形)柳丁氨醇微顆粒與大小相仿的微粉化藥物顆粒相比，具有較大的內(nèi)聚力和粘合力。噴霧干燥原料的電子顯微像表明其表面粗糙有紋孔。Haghpanah等在1994英國(guó)藥學(xué)會(huì)議上報(bào)道用噴霧干燥法已生產(chǎn)出加有柳丁氨醇的白蛋白微顆粒，而且其大小適于呼吸性藥物的運(yùn)送，即1-5μm。其目的是包裹柳丁氨醇，使之釋放緩慢。但這并不說(shuō)明此產(chǎn)物是基本均勻的球形或光滑的微顆粒，而且此微顆粒對(duì)于多次給藥的干燥粉末吸氣器來(lái)講，其流動(dòng)性能今人滿意。含有空氣微膠囊的診斷劑早被用于增強(qiáng)超聲顯影。例如，EP-A-458745(Sintetica)公開(kāi)了一種通過(guò)合成聚合物如聚交酯和聚乙醇酸交酯的界面聚合制備填充有空氣或氣體微球的方法。WO-A-9112823(Delta)公開(kāi)了一種使用白蛋白的類似方法。Wheatley等(1990)Biomaterials11713-717公開(kāi)了藻酸鹽發(fā)生離子移變凝膠化作用，形成直徑＞30μm的微泡。WO-A-9109629公開(kāi)了用作超聲對(duì)比劑的微脂粒。Przyborowski等在Eur.J.Nucl.Med771-72(1982)中公開(kāi)了用噴霧干燥制備用于放射性標(biāo)記的人血清白蛋白(HSA)微球體，以及其在肺閃爍照相顯影中的第二用途。但沒(méi)說(shuō)明此微球體是空心的，在我們的重復(fù)實(shí)驗(yàn)中，生產(chǎn)出略微以有形固體為主的微球體。除非是空心顆粒，否則不適用于超聲波心動(dòng)描記。而且，微球體是用一步法制備，而我們發(fā)現(xiàn)此方法不適于制備超聲波心動(dòng)描記的微膠囊；在前一種方法中需要交未變性的白蛋白從微球體中去掉，因此需要進(jìn)行另外一步篩分步驟，所以很明顯，獲得的微球體的大小范圍較寬。Przyborowski等提到了兩篇先前的公開(kāi)說(shuō)明書(shū)，其公開(kāi)了獲得用于肺閃爍照像的白蛋白顆粒的方法。Aldrich&Johnston(1974)Int.J.Appl.Rad.Isot.2515-18，公開(kāi)了用旋轉(zhuǎn)式圓盤(pán)產(chǎn)生直徑為3-70μm的顆粒，然后此顆粒在熱油中發(fā)生變性。去油，并用放射性同位素標(biāo)記顆粒。Raju等(1978)Isotopenpraxis14(2)57-61中使用了同樣的旋轉(zhuǎn)式圓盤(pán)技術(shù)，不同的是通過(guò)顆粒簡(jiǎn)單的加熱而使白蛋白發(fā)生變性。在這些例子中沒(méi)有一例是所說(shuō)的空心微膠囊，而且所制備的顆粒也不適用于超聲波心動(dòng)描記。EP-A-0606486(Teijin)公開(kāi)了將一種活性劑加入小顆粒的粉末制備，其載體由纖維素或纖維素衍生物組成。其目的是防止藥物顆粒與一個(gè)單位劑量干燥粉末吸氣器中所用的凝膠膠囊粘連。此說(shuō)明書(shū)第12頁(yè)提到了“藥物和基質(zhì)”的噴霧干燥，為的是使所獲得的顆粒80％或80％以上均為0.5-10μm。至于為獲得如此產(chǎn)品所應(yīng)具備的條件，卻沒(méi)有直接給出。EP-A-0611567(Teijin)更特異地談到通過(guò)噴霧干燥制備供吸入用的粉末。載體為一種纖維素，因其能防潮所以選用。實(shí)施例1中給出的條件(乙醇作溶劑，2-5％w/v溶質(zhì))表明對(duì)表面形態(tài)沒(méi)有控制，實(shí)施例4報(bào)道了一個(gè)極差的下部氣道呼吸分?jǐn)?shù)(12％)，它表明其分散性差。當(dāng)藥物含量高時(shí)顯然能獲得球形顆粒，這表明顆粒的表面形態(tài)受相關(guān)藥物和載體的含量控制。Conte等(1994)Eur.J.Pharm.Biopharm.40(4)203-208，公開(kāi)了水溶液的噴霧干燥，最大溶質(zhì)濃度為1.5％。為獲得最近似球形的顆粒，需要的藥物含量較高。這需要收縮和皺褶的顆粒形態(tài)。另外，懸浮于丁醇后，為便于庫(kù)耳特分析顯然必須經(jīng)過(guò)聲處理，這表明顆粒并未完全干燥。本發(fā)明的目的是提供一種治療性運(yùn)送載體，特別是提供一種比現(xiàn)有技術(shù)中的產(chǎn)品更適合于運(yùn)送到肺泡的組合物。發(fā)明簡(jiǎn)述按照本發(fā)明，我們驚奇地發(fā)現(xiàn)在如下的微顆粒(及微膠囊和微球體)中，形成壁的物質(zhì)基本上不受噴霧干燥的影響，其中所述微顆粒適用于作為中間產(chǎn)物，即在生產(chǎn)用于診斷性顯影的含空氣微膠囊中定影前的中間產(chǎn)物，如WO-A-9218164中所公開(kāi)的“中間微膠囊”。這樣，可以將熱敏感性物質(zhì)例如酶、肽和蛋白質(zhì)(如HSA)以及其它聚合物制成高度均勻的微顆粒，微球體或微膠囊，并可將其制成干燥粉末制劑，作治療或診斷用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，我們還發(fā)現(xiàn)可以通過(guò)噴霧干燥制備供治療和診斷劑用的有效可溶性載體，而且此載體為水溶性物質(zhì)，如人血清白蛋白(HSA)的自由流動(dòng)、光滑的球形微顆粒。其質(zhì)量中等顆粒大小(massmedianparticlesize)為1-10μm。通常，制備本發(fā)明的微膠囊的方法包括霧化一種形成壁物質(zhì)的溶液(或分散體)。以此霧化治療或診斷劑，或?qū)⒅委熁蛟\斷劑與如此制備的微膠囊偶合。還有一種情況，即此物質(zhì)本身就是一種活性劑。尤其是我們發(fā)現(xiàn)在此處所述的條件下，更通常由Sutton等(1992)所述條件下，例如使用一種適宜的具有比Haghpanah等更高的溶解濃度和氣體/液體流動(dòng)比混合物和殼形成增強(qiáng)劑，均可制備各種物質(zhì)的光滑球形微顆粒?？梢杂貌煌诤?jiǎn)單的最大尺寸分析的方法，即Haghpanah等所述的激光衍射技術(shù)，確定微顆粒的球形特性。而且，可以將顆粒大小和大小分布控制在一個(gè)較小范圍內(nèi)，并具有較大的可重復(fù)性。例如，通過(guò)庫(kù)耳特分析，以個(gè)數(shù)為基準(zhǔn)，98％的顆粒小于6μm，四分位數(shù)間距(interquartile)為2μm，每批間的平均大小變化小于0.5μm。再者，當(dāng)在一臺(tái)研制的干燥粉末吸氣器上實(shí)驗(yàn)時(shí)，可以完成可重復(fù)的給藥，而且在一般的流動(dòng)條件(30L/min)下，隨后進(jìn)行的霧化使微顆粒從賦形劑中很好地分離。本發(fā)明由未變性的HSA或其它可噴霧干燥物質(zhì)組成的未固定的膠囊，具有非常光滑的表面，并且可以用用量相對(duì)較低的賦形劑處理，生產(chǎn)出干燥粉末吸氣器的理想自由流動(dòng)粉末。使用這種方法，可以生產(chǎn)由一種懸浮的賦形劑和有效成分組成的多相微膠囊。這有利于生產(chǎn)由有效成分組成的自由流動(dòng)的粉末，此些有效成分可以被進(jìn)一步加工以獲得具有優(yōu)良可重復(fù)性及準(zhǔn)確度給藥和霧化的粉末。另外，在自由流動(dòng)粉末的生產(chǎn)過(guò)程中，使用常用形式的噴霧干燥方法能引起的相對(duì)少的變性和向聚合物的轉(zhuǎn)化。在各種情況下，微膠囊懸浮體中有90％大小在所需(例如1-5μm的可呼吸區(qū)域)范圍內(nèi)。因此，我們已闡明如何生產(chǎn)如下的微顆粒大小主要為1-5μm；光滑球形；含氣體；由未被破壞的蛋白分子組成并且在進(jìn)行其它加工步驟之前可以貯存和運(yùn)輸。在制備用于超聲顯影的中間微膠囊中，我們已經(jīng)對(duì)其方法和所得粉末的特性作為定義，這些都是生產(chǎn)用于干燥粉末吸氣器(DPI’S)的超級(jí)粉末所必需的。我們發(fā)現(xiàn)有許多測(cè)定方法(曾被用于回聲對(duì)照劑的測(cè)定)適于確定對(duì)DPI粉有用的顆粒參數(shù)，即能夠確定完整有形微顆粒的交聯(lián)顆粒的回聲率和耐壓性；能夠確定可溶性中間膠囊的球形度和含氣性的DPX或溶劑中的顯微評(píng)定；大小和大小分布分析；以及確定產(chǎn)品定香的最終水平的單體蛋白測(cè)定。特別是用于治療時(shí)，控制顆粒大小和大小分布是必須重視的。我們已經(jīng)選擇了一種生物相容的聚合物，這種聚合物發(fā)生交聯(lián)時(shí)仍然是無(wú)害的，而且我們也已經(jīng)知道如何重復(fù)交聯(lián)這種分子。為了完成可控制交聯(lián)，我們已經(jīng)使微顆粒的形成和交聯(lián)步驟分開(kāi)進(jìn)行，其它乳劑和溶劑的蒸發(fā)步驟不需分開(kāi)進(jìn)行。這意味著此方法的起始步驟不破壞壁形成物質(zhì)。我們已經(jīng)對(duì)特殊參數(shù)作了定義，這些參數(shù)對(duì)于形成顆粒是很重要的。并且對(duì)生產(chǎn)更完整顆粒所需的有益條件也作了說(shuō)明。在選擇HSA作為一種適宜聚合物時(shí)，我們還選擇一種有效載體分子，它可以保護(hù)易變分子；增強(qiáng)肺對(duì)肽的攝??；通過(guò)自然結(jié)合的親合力與低分子量的藥物結(jié)合；經(jīng)共價(jià)鍵修飾，使藥物通過(guò)細(xì)胞屏障進(jìn)入系統(tǒng)循環(huán)以及循環(huán)之外。當(dāng)研究者將噴霧干燥用于生產(chǎn)體積小的微顆粒時(shí)，他們傾向于使用揮發(fā)性溶劑，揮發(fā)性溶劑促進(jìn)液滴快速收縮。還有一種情況，研究者為了使溶液粘度低以便于生產(chǎn)更小的液滴使用低溶質(zhì)容量的原料。在這兩種情況下生產(chǎn)微顆粒，方法對(duì)顆粒的最終形態(tài)不產(chǎn)生什么影響，產(chǎn)生影響的是用于形成顆粒的組分。我們已經(jīng)對(duì)如何從HSA中制備大小可控制的顆粒作了廣泛研究，并將此方法用于包括活性藥物在內(nèi)的多種其它物質(zhì)。我們可以使用較高的溶質(zhì)含量如10-30％w/v對(duì)應(yīng)于0.5-2％來(lái)生產(chǎn)微顆粒，此微顆粒中含有帶乳糖的低分子量活性成分；單獨(dú)的活性成分；帶有HSA的肽以及帶有活性成分的經(jīng)改性的聚合物載體?，F(xiàn)在我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)影響最終顆粒形態(tài)的是方法而不是溶質(zhì)的組分。而且，我們可以將水、與水混溶的溶劑聯(lián)合使用，以改善顆粒的形態(tài)。因此，我們有了一種“方法”，它對(duì)于生產(chǎn)適于肺運(yùn)送的光滑球形大小可控的顆粒，很有益處。人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)可以通過(guò)控制本發(fā)明的方法獲得具有所需特性的微球體。將蛋白溶液供應(yīng)于噴霧噴嘴的壓力可以變化，例如1.0-10.0×105Pa，優(yōu)選2-8×105Pa，首選7.5×105Pa。其它參數(shù)可以作如下變化。用此方法可以獲得新的微球體。另一方面，本發(fā)明提供了空心微球體，其中30％以上優(yōu)選超過(guò)40％，50％或60％的微球體直徑在2μm范圍內(nèi)，至少90％優(yōu)選至少95％或99％的微球體直徑在1.0-8.0μm范圍內(nèi)。四分位數(shù)間距可以為2μm，平均直徑為3.5，4.0，4.5，5.0，5.5，6.0或6.5μm。至少有30％，40％，50％或60％的微球體直徑在1.5-3.5μm，2.0-4.0μm，3.0-5.0μm，4.0-6.0μm，5.0-7.0μm或6.0-8.0μm。有上述百分比的微球體直徑在1.0μm范圍內(nèi)，例如1.5-2.5μm，2.0-3.0μm，3.0-4.0μm，4.0-5.0μm，5.0-6.0μm，6.0-7.0μm或7.0-8.0μm為優(yōu)選。另一方面，本發(fā)明提供了具有蛋白壁的空心微球體，其中至少90％(至少95％或99％為優(yōu)選)的微球體直徑在1.0-8.0μm范圍內(nèi)；至少90％(至少95％或99％為優(yōu)選)的微球體的壁厚為40-500nm，優(yōu)選100-500nm。發(fā)明詳述壁形成物質(zhì)和加工條件應(yīng)當(dāng)這樣來(lái)選擇，即在使用條件下，產(chǎn)品充分無(wú)毒并且沒(méi)有免疫原，而產(chǎn)品有無(wú)毒性和免疫原很明顯是取決于給藥劑量和治療時(shí)間。壁形成物質(zhì)可以是一種淀粉衍生物，一種合成聚合物如聚谷氨酸叔丁氧羰基甲基酯(US-A-4888398)，或一種多糖如聚右旋糖。通常，壁形成物質(zhì)從更具親水性及生物降解能力的生理上可接受的聚合物中選擇，這一點(diǎn)在WO-A-9218164中有詳細(xì)說(shuō)明。壁形成物質(zhì)優(yōu)選蛋白質(zhì)。例如，它可以是膠原蛋白，明膠或(血清)白蛋白，在每種情況下均優(yōu)選來(lái)源于人體的(即來(lái)源于人體的或結(jié)構(gòu)與人體蛋白結(jié)構(gòu)相似的)。首選來(lái)源于血的人血清白蛋白(HSA)，或者，最好是，來(lái)源于微生物(包括細(xì)胞系)發(fā)酵的人血清白蛋白(HSA)，此微生物(包括細(xì)胞系)經(jīng)轉(zhuǎn)變或轉(zhuǎn)染表達(dá)HSA。這在WO-A-9218164中有更詳細(xì)的描述。蛋白溶液或分散體優(yōu)選為0.1-50％w/v，蛋白質(zhì)均為5.0-25.0％的更好，尤其是當(dāng)?shù)鞍诪榘椎鞍讜r(shí)。大約20％的為最佳?？梢允褂帽谛纬晌镔|(zhì)的混合物，在此情況下，后兩種物質(zhì)的百分比與壁形成物質(zhì)的總量有關(guān)。將要噴霧的制劑可以包含除壁形成物質(zhì)以外的其它物質(zhì)，以及溶劑或液體載體?？稍俅螀⒖糤O-A-9218164。采用任何能使分散微球體或微膠囊直徑為1-10μm的適宜技術(shù)都能對(duì)蛋白溶液或分散體(優(yōu)選溶液)(此后稱作“蛋白制劑”)進(jìn)行霧化和噴霧干燥。上述1-10μm對(duì)應(yīng)于至少有90％的微膠囊，直徑采用CoulterMasterSizerII測(cè)量。“微膠囊”一詞的含義是包裹了一個(gè)空間的空心顆粒，此空間不是用任何固體原料而是用一種氣體或蒸氣填充的。但不能形成與UK所售名為Maltesers的糖果類似的蜂窩結(jié)構(gòu)顆粒。霧化包括形成一種蛋白制劑的氣溶膠，例如通過(guò)使用壓力將制劑壓入至少一個(gè)小孔中，或者通過(guò)在一個(gè)熱空氣或其它惰性氣體室中使用離心霧化器形成蛋白制劑的氣溶膠。此室應(yīng)該足夠大的，以致于噴射出的最大液滴不會(huì)在干燥前沉積于壁上。當(dāng)室中的氣體或蒸氣以一定的量與所用的微膠囊一同給藥入血時(shí)，它是潔凈(即無(wú)菌、無(wú)熱原為宜)和無(wú)毒的。液體從蛋白制劑中的蒸發(fā)速度應(yīng)該高到足以形成空心微膠囊但又不致于使微膠囊發(fā)生破裂的程度。蒸發(fā)速度可以通過(guò)改變氣體流速、蛋白制劑中的蛋白濃度、液體載體的特性、溶液的進(jìn)速，以及與氣溶膠相遇的氣體的溫度來(lái)控制。其中與氣溶膠相遇的氣體的溫度尤為重要。在水中白蛋白濃度為15-25％的情況下，通常入口溫度至少為100℃左右足以保證能形成空心膠囊，優(yōu)選至少110℃以上的入口溫度，在入口溫度高達(dá)250℃時(shí)膠囊不發(fā)生破裂。入口溫度為180-240℃左右為宜，優(yōu)選210-230℃左右，首選220℃左右，至少對(duì)白蛋白來(lái)說(shuō)如此。因?yàn)榕c氣溶膠相遇的氣體溫度還隨運(yùn)送氣溶膠的速度以及蛋白制劑中的液體含量變化而變化所以可以通過(guò)控制出口溫度來(lái)保證室中的溫度適宜。我們發(fā)現(xiàn)適宜的出口溫度為40-150℃。還發(fā)現(xiàn)通過(guò)控制流速可以控制其它參數(shù)如完整的空心顆粒的數(shù)目。通常微膠囊含有96-98％的單體HSA。更為具體地講，本發(fā)明的微顆粒，對(duì)于質(zhì)量中等的顆粒大小來(lái)講，最大四分位數(shù)間距為3μm的為宜，為2μm的更好，為1.5μm的最好。通過(guò)帶有一個(gè)體積-大小分布換算的庫(kù)耳特計(jì)數(shù)器確定質(zhì)量中等顆粒的直徑。微顆粒通過(guò)噴霧干燥產(chǎn)生，噴霧干燥中采用低原料流速，高含量的干燥空氣和霧化作用。此噴霧干燥所制備的微膠囊大小非常確定且大小分布緊密。幾名研究人員設(shè)計(jì)了確定氣體噴嘴平均液滴大小的方程式；各種影響平均液滴大小的參數(shù)簡(jiǎn)要介紹如下D＝A/(V2.d)a+B.(Mair/Mliq)-b其中D＝平均液滴大小A＝與噴嘴設(shè)計(jì)有關(guān)的常數(shù)B＝與液體粘度有關(guān)的常數(shù)V＝在液體和噴嘴間的相對(duì)空氣速度d＝空氣密度Mair和Mliq＝空氣質(zhì)量和液體流的質(zhì)量a和b＝與噴嘴設(shè)計(jì)有關(guān)的常數(shù)很顯然，對(duì)于任何給定的噴嘴設(shè)計(jì)來(lái)說(shuō)，液滴大小最容易受噴嘴處相對(duì)速度和同時(shí)并存的空氣/液體質(zhì)量比率的影響。對(duì)于最普通的干燥用途，空氣/液體比率在0.1-10范圍內(nèi)，在這些比率下，平均液滴大小似乎為15-20μm。用于生產(chǎn)大小在上述范圍內(nèi)的微顆粒時(shí)，我們所用的空氣/液體比率在20-1000∶1范圍內(nèi)。結(jié)果是在高比率下生產(chǎn)顆粒，生產(chǎn)出的顆粒與一般顆粒相比非常小而且大小分布非常窄。對(duì)于在較低的空氣/液體比率下生產(chǎn)的微顆粒來(lái)說(shuō)，所生產(chǎn)出的顆粒略微大些，但不管怎樣大小分布仍然緊密，這些都優(yōu)于通過(guò)乳化技術(shù)生產(chǎn)的微顆粒。對(duì)所加有效成分的量要求并不嚴(yán)格；按重量百分比計(jì)，微顆?？梢院兄辽?0％的HSA或其它載體物質(zhì)，含有70％或80％的為優(yōu)選，含有90％的為最佳。供吸氣器裝置使用時(shí)，此微顆?？梢杂靡环N常規(guī)的賦形劑如乳糖或葡萄糖配制。此微顆?？梢院兄委焺┖洼d體，或一種僅具有治療活性的化合物。有效成分的量可以根據(jù)其特性和活性，給藥方式，以及本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的其它因素選擇。僅作為舉例，顆粒的給藥量可以是每日輸布α-1抗胰蛋白酶100mg，或者每日輸布一種如二丙酸氯地米松的活性物質(zhì)0.1mg。例如，活性成分可以是一種診斷性物質(zhì)或一種經(jīng)典的藥物本體，此本體可以以共價(jià)鍵的方式或其它方式與載體物質(zhì)結(jié)合，也可以不與載體物質(zhì)結(jié)合。治療劑可以是一種蛋白物質(zhì)如胰島素、甲狀旁腺素、降鈣素或類似的具有生物活性的肽、沙丁胺醇、水楊酸鹽、甲氧基甲基萘乙酸、沃格孟汀或一種細(xì)胞毒劑。為了實(shí)驗(yàn)的目的，可以包括一種標(biāo)記物如賴氨酸熒光素。本發(fā)明的微顆粒除治療或診斷劑外可以含有一種拮抗劑或結(jié)合受體成分。例如，為了將載體結(jié)合的藥物送至肺泡或肺泡以外的一個(gè)指定受體，在分子載體中可以包括一種糖或其它分子。此處，HSA為本發(fā)明所用水溶性載體物質(zhì)的一個(gè)說(shuō)明性實(shí)例。其它可使用的物質(zhì)包括簡(jiǎn)單和復(fù)雜碳水化合物，簡(jiǎn)單或復(fù)雜氨基-或多氨基酸，脂肪酸或脂肪酸酯，或者天然或重組人蛋白或其片段或短排列。為了使流量或載體特性達(dá)到最佳，本發(fā)明還通過(guò)在微膠囊的制備過(guò)程中改變和減少內(nèi)聚力和粘合力，使干燥的微膠囊的性質(zhì)符合要求。例如，如果需要，可以通過(guò)在無(wú)HSA的系統(tǒng)或包括HSA和活性成分的多相系統(tǒng)中使用高電荷單體或聚合物質(zhì)如賴氨酸或聚合賴氨酸，以及谷氨酸或聚合谷氨酸。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式是將活性成分與HSA一同進(jìn)行噴霧干燥，以增加此活性成分在制劑、包裝以及在肺泡內(nèi)停留時(shí)的穩(wěn)定性，其中最重要的是增加在肺泡內(nèi)膜停留時(shí)的穩(wěn)定性。在此情況下，增強(qiáng)了蛋白酶解的活性。同時(shí)，可以使用蛋白酶抑制劑以保護(hù)肽藥物，這很可能是此方法的相反說(shuō)明。由于HSA既用作賦形劑又用作載體，所以可以提供一種大量過(guò)剩的可供選擇的底物，局部活性的蛋白酶可以對(duì)此底物產(chǎn)生作用。另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是，因?yàn)镠SA已經(jīng)表現(xiàn)出能夠通過(guò)受體或非受體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)胞機(jī)制穿過(guò)肺泡屏障，所以HSA可以被用作一種載體，促進(jìn)一種活性成分進(jìn)入上皮內(nèi)膜。在另一實(shí)施方式中，在進(jìn)行噴霧干燥之前，活性成分可以通過(guò)可裂解的鍵與HSA發(fā)生共價(jià)鍵合。此實(shí)施例代表了一種將活性物質(zhì)從裝置一直送至血流以及體內(nèi)的可能靶器官的方法。形成具有最佳氣動(dòng)大小的顆粒的含義是此“物理”載體將活性成分輸布至吸收部位。一旦沉積在肺泡上，此“分子”載體將保護(hù)和通暢入血通道，而且其一旦入血，可以進(jìn)一步延長(zhǎng)其循環(huán)半衰期，并在受體介導(dǎo)活動(dòng)的基礎(chǔ)上將活性物質(zhì)引入體內(nèi)某一部位。在WO-A-9317713(RijksuniversiteitGroningen)中公開(kāi)了一種適宜的鍵合技術(shù)。公開(kāi)了酯酶敏感性多羥基酸鍵合劑。這種在噴霧干燥前的HSA衍生中所用的技術(shù)，能夠生產(chǎn)一種用于將藥物輸布至全身血管系統(tǒng)的共價(jià)載體系統(tǒng)。在潛在性地保護(hù)不穩(wěn)定本體的同時(shí)，利用HSA穿過(guò)肺泡的潛在力在一段較長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)運(yùn)送藥物。雖然本發(fā)明所用的活性成分可以在微顆粒形成后被吸入微顆粒中或以其它方式與微顆粒聯(lián)合，但優(yōu)選用HSA制備。為延緩其溶解速度，防止吸濕，至少部分微顆粒用一種疏水性或不溶于水的物質(zhì)如一種脂肪酸包裹。下列實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明。實(shí)施例中所用的噴霧干燥器，可以從A/SNiroAtomizer，Soeborg，Denmark得到，商品名“MobileMinor”，這一點(diǎn)在WO-A-9218164中有詳細(xì)描述。實(shí)施例1將一種在無(wú)熱原水(適于注射的)中的無(wú)菌、無(wú)熱原HSA的20％的溶液抽至雙相噴嘴霧化器的噴嘴，此霧化器安裝在上述商業(yè)用噴霧干燥裝置中。將蠕動(dòng)泵速度保持在10ml/分左右，以便在入口空氣溫度為220℃情況下，出口空氣溫度保持于95℃。將壓縮空氣在2.0-6.0巴(2.0～6.0×105帕)下供給此雙相霧化噴嘴。在此范圍內(nèi)，可獲得平均大小為4.25～6.2μm的微膠囊。典型地，平均顆粒大小的增大(通過(guò)減小霧化壓力)導(dǎo)致大小大于10μm的微膠囊數(shù)量的增加(見(jiàn)表1)。表1霧化壓力對(duì)直徑大于10μm的微膠囊出現(xiàn)頻率的影響在上述條件下，即WO-A-9218164實(shí)施例的第一步，噴嘴壓力為7.5巴時(shí)，產(chǎn)生顆粒大小為4.7μm的微顆粒。這些微顆粒呈光滑球形，大小超過(guò)6μm的顆粒少于1％。將此微顆粒溶解于水介質(zhì)中，通過(guò)凝膠過(guò)濾層析測(cè)定HSA的分子量。在噴霧干燥HSA前后所得HSA的色譜實(shí)質(zhì)上是一樣的。通過(guò)HPLC胰蛋白酶肽圖，進(jìn)一步分析噴霧干燥前后的HSA，未發(fā)現(xiàn)所釋放出的肽存在差別。兩種分析均顯示，在所述生產(chǎn)4.7μm的微顆粒的噴霧干燥條件下，對(duì)此蛋白幾乎沒(méi)有或沒(méi)有結(jié)構(gòu)破壞。實(shí)施例2將來(lái)自人血清α-1抗胰蛋白酶在與實(shí)施例1相似的條件下噴霧干燥，其入口溫度為150℃，出口溫度為80℃。干燥條件的其它所有方面均與實(shí)施例1相同。所生產(chǎn)的可溶性微顆粒的平均大小為4.5μm。將微顆粒溶于水介質(zhì)中，并進(jìn)行蛋白結(jié)構(gòu)和正常胰蛋白酶抑制活性的保留分析，然后與原始凍干起始物質(zhì)比較。通過(guò)凝膠滲透和反相層析以及毛細(xì)電泳分析，顯示在噴霧干燥后沒(méi)有明顯結(jié)構(gòu)改變。抑制活性的分析(表2)表明在實(shí)驗(yàn)誤差范圍內(nèi)，其抑制活性完全保留。表2</tables>實(shí)施例3應(yīng)用實(shí)施例1的一般方法，制備由乙醇脫氫酶(ADH)和乳糖組成的微膠囊(ADH0.1％w/w；乳糖99.9％w/w)。我們發(fā)現(xiàn)最優(yōu)化的噴霧干燥步驟需要最大地保留酶的活性。使用實(shí)施例1的一般條件，只改變其出入口溫度，以獲得可以生產(chǎn)所需大小(4～5μm)微顆粒的條件，且其微顆粒在干燥后保留了所有活性，并且在水介質(zhì)中重組。在每個(gè)所示噴霧干燥條件下，與原始物質(zhì)相比保留活性的百分比顯示于表3中。此微膠囊呈光滑球形，并包含空氣，這可在光學(xué)顯微鏡下通過(guò)其在二苯基甲苯中的外觀證明。表3實(shí)施例4在實(shí)施例1所述的條件下進(jìn)行一系列實(shí)驗(yàn)以檢測(cè)液體加料速度對(duì)完整球形顆粒產(chǎn)量的影響。我們發(fā)現(xiàn)，利用含氣微顆粒具有可以反射超聲波的能力，可以確定使完整光滑球形微膠囊的產(chǎn)量最大化的最佳條件。將噴霧干燥后形成的微顆粒熱固定以使它們難以溶解，然后將其懸浮于水中進(jìn)行回聲測(cè)定。我們發(fā)現(xiàn)加大液體進(jìn)料速度使最初噴霧干燥過(guò)程中形成的完整微顆粒的數(shù)量減少(表4)。隨著液體流速?gòu)?增加至16ml/分，其平均顆粒大小和總壓力穩(wěn)定性，即殼的厚度，沒(méi)有改變，只是總回聲產(chǎn)生率發(fā)生變化。我們發(fā)現(xiàn)蒸發(fā)速度越慢(液體流速越高)所形成的完整球形顆粒越少。表4通過(guò)將濃度為1×106ml的熱固定的微顆粒再懸浮于350ml水中，進(jìn)行測(cè)定。在500ml燒杯中慢慢攪拌此溶液，此燒杯上安裝有3.5MHz超聲探針，它連接于Sonus1000醫(yī)用顯像儀上。通過(guò)一影像分析儀捕獲所獲得的灰度影像，并與水空白比較以產(chǎn)生回聲反射的顯影密度單位。通過(guò)測(cè)定樣本在曝光前后的回聲反射，還可以使此測(cè)定方法適于檢測(cè)加壓阻力，其回聲反射是作用于顆粒的原料溶液的壓力環(huán)狀破裂而產(chǎn)生的。此顆粒可將不完整顆粒與完整顆粒鑒別開(kāi)，不完整顆粒帶走用于重組的空氣，而完整顆粒則將空氣封閉于殼內(nèi)。不完整顆粒不顯示加壓阻力，并立即失去反射超聲波的能力。在微膠囊濃度分別為0.25，0.5，1，2，3和4×10/ml時(shí)，實(shí)施例1固定白蛋白顆粒的劑量為c.5，9，13，20，22和24VDU’S(反散射強(qiáng)度)。實(shí)施例5已經(jīng)進(jìn)行了減小顆粒大小和縮窄大小分布的有意義的實(shí)驗(yàn)。進(jìn)行此實(shí)驗(yàn)是為了有效地增加回聲對(duì)照劑的含氣量，以及減少超大顆粒的數(shù)量。由于此實(shí)驗(yàn)擴(kuò)大了在1～5μm范圍內(nèi)可供呼吸的顆粒的可能數(shù)量并且可固有地產(chǎn)生更光滑的顆粒，此顆粒比相似大小的非球形顆粒具有更小的粘合性，所以此實(shí)驗(yàn)對(duì)用于呼吸的制劑有益。我們發(fā)現(xiàn)可通過(guò)減少原料的溶質(zhì)含量以減小顆粒大小。此結(jié)果部分是由于滴形成時(shí)粘度的作用導(dǎo)致的。但我們還發(fā)現(xiàn)在所用條件下通過(guò)減少溶質(zhì)含量可導(dǎo)致完整顆粒數(shù)目的減少。經(jīng)過(guò)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)我們已發(fā)現(xiàn)在原料中混入水混溶性揮發(fā)性溶劑，在干燥過(guò)程中可明顯地提高殼的形成率，同時(shí)伴隨完整顆?；蚩招念w粒數(shù)目的增多(表5)。通過(guò)對(duì)浮至血細(xì)胞計(jì)條狀蓋板表面的顆粒進(jìn)行微觀評(píng)價(jià)，進(jìn)行空心度的評(píng)價(jià)。此血細(xì)胞計(jì)用庫(kù)特耳計(jì)數(shù)對(duì)顆粒進(jìn)行計(jì)數(shù)。表5實(shí)施例6一組物質(zhì)被用于生產(chǎn)光滑球形可溶性微顆粒。所生產(chǎn)出的微顆粒包括惰性物質(zhì)如HSA，乳糖，甘露糖醇，藻酸鈉；單獨(dú)的活性物質(zhì)如α1-抗胰蛋白酶；以及活性物質(zhì)和惰性載體的混合物如乳糖/乙醇脫氫酶，乳糖/布地縮松，HSA/柳丁氨醇。在所有情況下，均生產(chǎn)出光滑球形并且含氣的顆粒。我們已經(jīng)證實(shí)了此方法在控制顆粒形態(tài)方面的可靠性。將顆粒懸浮于丙醇中，然后用顯微鏡觀察。那些含氣的顆粒似乎是一個(gè)被一個(gè)完整黑邊包繞的白色芯，而顆粒破裂或未形成時(shí)表現(xiàn)為空胞。下列微顆粒的顯微評(píng)價(jià)說(shuō)明了可以被干燥以生產(chǎn)光滑球形顆粒的物質(zhì)和活性物質(zhì)的范圍HSA酪蛋白血紅蛋白乳糖ADH/乳糖HSA/過(guò)氧化物酶乳糖/柳丁氨醇乳糖/布地縮松實(shí)施例7在下表(表6)所示的條件下，對(duì)乳糖和布地縮松進(jìn)行噴霧干燥。表6參數(shù)設(shè)定入口溫度220℃出口溫度85℃霧化壓力7.5bar氣閥設(shè)定0.5進(jìn)料速度3.88g/min原料溶液9.3％w/v布地縮松，85％v/v乙醇19％w/v乳糖所得干燥粉末以表7中所列比例，在一個(gè)V型混合器中與賦形級(jí)乳糖混合。然后將此混合物裝入明膠膠囊，并從一RotahalerTM中排出，進(jìn)入一臺(tái)運(yùn)行速度為60L/min的雙段碰撞取樣器。按沉積入低室的百分?jǐn)?shù)計(jì)算可呼吸分?jǐn)?shù)。表7</tables>所得的可呼吸分?jǐn)?shù)明顯優(yōu)于目前在此裝置上通用的粉化產(chǎn)品的可呼吸分?jǐn)?shù)，其最大可呼吸分?jǐn)?shù)通常在10-20％。在一臺(tái)實(shí)驗(yàn)用重力自流進(jìn)料多次給藥DPI中測(cè)定詳細(xì)示于表7的布地縮松/乳糖制劑。所測(cè)參數(shù)是噴射30次以上的噴霧劑量和在四段碰撞取樣器中的可呼吸百分的變量。結(jié)果顯示于下(表8)。表8</tables>對(duì)于通用的DPI裝置，初版的US藥典要求噴射劑量變化小于25％。很明顯，在到目前為止所有被測(cè)的制劑中，均在通行的技術(shù)要求范圍內(nèi)。在制劑1和制劑2的情況下，明顯低于通行界限。實(shí)施例8為了降低先前實(shí)施例中所述的可溶性微膠囊的溶解速度，可以用脂肪酸如棕櫚酸或山萮酸包裹微膠囊。通過(guò)將一種可溶性HSA微膠囊和葡萄糖(50％w/w)的混合物懸浮于一種含10％棕櫚酸或山萮酸的乙醇溶液中，將實(shí)施例1中的可溶性微膠囊包裹。蒸發(fā)掉溶液并通過(guò)一臺(tái)Fritsch粉碎機(jī)將所得餅塊粉碎。用一種源于我們先前超聲研究的間接方法評(píng)定涂層的效力。用一臺(tái)連接有圖像分析儀的HPSonus1000超聲波機(jī)，從一個(gè)每毫升含有1×106微膠囊的水杯中收集超聲波圖像。經(jīng)過(guò)一段時(shí)間測(cè)定超過(guò)空白讀數(shù)的影像強(qiáng)度(VDU)(見(jiàn)表9)。沒(méi)有涂層的微膠囊很快失掉所有空氣，因而有可能反射超聲。但是，帶有涂層的微膠囊在一段較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持其結(jié)構(gòu)，因此在幾分鐘后顯示出一個(gè)被延長(zhǎng)的信號(hào)。表9帶有涂層的HSA微膠囊的回聲產(chǎn)生率實(shí)施例9按照實(shí)施例1中所示(15％含水甘露糖醇噴霧干燥原料)制備可溶性甘露糖醇微膠囊，并用實(shí)施例8中所示的棕櫚酸和山萮酸包裹。將每一種樣品懸浮于水中并測(cè)其回聲產(chǎn)生率。初次分析10分鐘后，重復(fù)測(cè)定被懸浮樣品的回聲產(chǎn)生率(表10)。表10帶有甘露糖醇的微膠囊的回聲產(chǎn)生率實(shí)施例10制備帶有一種包含于基質(zhì)中的模型活性物質(zhì)(賴氨酸-熒光素)的可溶性微膠囊，以生產(chǎn)一種自由流動(dòng)干粉形式的“活性”化合物。在微膠囊溶解時(shí)，此活性化合物以其原本形式釋放。使用賴氨酸作為一種模型化合物，用熒光素異硫氰酸鹽(FITC)標(biāo)記此分子從而能在可溶性微膠囊的制備過(guò)程中以及其后的溶解釋放過(guò)程中監(jiān)測(cè)該化合物。將3g賴氨酸加入用碳酸鹽緩沖的FITC(0.5g總量)中。30℃下保溫1小時(shí)后，測(cè)定所得溶液中用TLC形成的FITC-賴氨酸加合物。這表明有一種穩(wěn)定的FITC-賴氨酸加合物存在。將FITC-賴氨酸加合物與含有100mg/mlHSA的143ml25％乙醇混合，獲得噴霧干燥的原料。用于形成微膠囊的噴霧干燥的條件詳細(xì)顯示于下表11中。在無(wú)乙醇的條件下，我們發(fā)現(xiàn)只有少量百分比的顆粒是光滑球形的。此噴霧干燥方法能夠生產(chǎn)17.21g微膠囊，在把該膠囊樣品懸浮于乙醇時(shí)它不會(huì)發(fā)生溶解。而且觀察不到FITC-賴氨酸加合物的釋放。但是當(dāng)向此乙醇懸浮的微膠囊中加入10ml水時(shí)，微膠囊發(fā)生溶解并且釋放FITC-賴氨酸。用TLC對(duì)加入微膠囊前的加合物進(jìn)行分析，對(duì)溶解時(shí)從微膠囊中釋放的加合物進(jìn)行分析，均表明此模型化合物沒(méi)有改變。表11噴霧干燥條件參數(shù)設(shè)定入口溫度220℃出口溫度85℃霧化壓力7.5bar氣閥設(shè)定0.5進(jìn)料速度3.88g/min原料溶液25％v/v乙醇，10％w/vHSA在硫氰酸銨和2-丙醇的無(wú)水系統(tǒng)中，用一臺(tái)MultisizerII(CoulterElectronics)測(cè)定此可溶性微膠囊的大小。此微膠囊的平均大小為3.28±0.6μm，有90％質(zhì)量百分比的微膠囊的大小在2-5μm以內(nèi)。將微膠囊與葡萄糖混合(50％w/w微膠囊50％w/w葡萄糖)，將此混合物通過(guò)一臺(tái)Fritsch粉碎機(jī)粉碎三次。當(dāng)向水中加入此粉末樣品時(shí)，釋放FITC-賴氨酸，通過(guò)TLC分析測(cè)定發(fā)現(xiàn)與原始形式相比沒(méi)有損失。此實(shí)施例表明制備一種可用于呼吸制劑的氨基酸或肽的制劑是可行的，而且此制劑中加有HSA。實(shí)施例11在乙醇中溶解500mg二丙酸氯地米松并加入50mlHSA原料(10％w/v)，在實(shí)施例10所示條件下進(jìn)行噴霧干燥。在如實(shí)施例10中所示的無(wú)水系統(tǒng)中測(cè)量由此形成的微膠囊的大小。微膠囊的平均大小為3.13±0.71μm，其中90％在2-5μm之間。通過(guò)在10％TCA中HSA的沉淀作用，從此微膠囊中提取二丙酸氯地米松，并且將上清液提取至乙醇中。應(yīng)用HPLC在波長(zhǎng)242nm下分析此乙醇提取液。在此提取液中所檢測(cè)的二丙酸氯地米松處于游離狀態(tài)，但當(dāng)白蛋白丸被提取時(shí)，可觀察到與天然HSA結(jié)合的二丙酸氯地米松的存在。我們發(fā)現(xiàn)雖然大多數(shù)活性化合物處于游離狀態(tài)，但有一些處于白蛋白結(jié)合狀態(tài)。因?yàn)榘椎鞍字皇蔷徛胤植贾裂髦?，這樣可以控制在與游離藥物相比較長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)釋放活性化合物。實(shí)施例12由于至少在實(shí)施例10和11中與此活性化合物結(jié)合的任何物質(zhì)可對(duì)白蛋白的固有特性造成影響，本實(shí)施例提供一種活性化合物初始交聯(lián)后噴霧干燥前的產(chǎn)物。將25mg碳化二亞胺(EDCI)加入一種10mg/ml氨甲喋呤溶液中。攪拌此溶液4小時(shí)以引發(fā)并確保氨甲喋呤完全活化。將50mgHSA加入活化藥物中，并在室溫下攪拌3小時(shí)。通過(guò)白蛋白的氨基將氨甲喋呤化學(xué)結(jié)合于HSA上。然后將此共軛物用作實(shí)施例10中所述的噴霧干燥原料。將由此制備的可溶性微膠囊抽樣，檢定并分析藥物含量。微膠囊的平均大小為3.2±0.6μm，90％(以質(zhì)量計(jì))在2-5μm之間。微膠囊藥物含量分析表明微膠囊沒(méi)有釋放藥物，甚至在溶解后藥物還與HSA結(jié)合。白蛋白的蛋白酶K消化作用釋放此結(jié)合藥物，這表明藥物僅與有限的一些氨基酸和小肽鏈結(jié)合。此前已表明與聚合載體結(jié)合的阿霉素的活性對(duì)癌癥有意義，顯示出多藥物抵抗的表型。實(shí)施例13以藥物與HSA1比5的比例，按實(shí)施例10和12中所述制備甲氧萘丙酸微膠囊。水溶性微膠囊保留非水溶劑的活性化合物。而且，當(dāng)微膠囊在水溶液中溶解時(shí)，活性化合物仍與白蛋白結(jié)合。這一點(diǎn)通過(guò)如前所述的262nm下的HPLC分析表明。當(dāng)用蛋白酶K和酯酶消化時(shí)，甲氧萘丙酸從白蛋白中釋放。實(shí)施例14用在實(shí)施例8至13中所生產(chǎn)的微膠囊樣本在一干粉吸氣器中進(jìn)行其性能評(píng)價(jià)。評(píng)價(jià)每個(gè)制劑的給藥再生性，同時(shí)通過(guò)微觀評(píng)估樣本的霧化。將各個(gè)制劑的樣本加至實(shí)驗(yàn)用干粉吸氣器(DPI)的儲(chǔ)料漏斗。干粉吸氣器應(yīng)用加壓空氣推動(dòng)粉末進(jìn)入一個(gè)給藥量器。應(yīng)用霧化干燥的乳糖校準(zhǔn)所用的定量量器。隨著組合物的功能不同，分配至給藥量器中的樣本的量也不相同，但是各樣本的給藥再生性非常一致，其三個(gè)給藥試驗(yàn)中所獲得的平均值為5.0±0.25mg。通過(guò)將吸氣器與一個(gè)真空室連接，測(cè)定樣品霧化干燥性；通過(guò)排除真空經(jīng)由DPI得到積累好的吸氣物，并且在樹(shù)脂包裹的顯微鏡片上完成空中浮游劑量的收集。這些片用于評(píng)價(jià)顆粒的分散性。此片表明DPI已使樣品解聚，甚至在顯微鏡片上形成一個(gè)微顆粒的分散體。實(shí)施例15從Rotahaler(GlaxoUK)中排放蒸餾水，第1階段為7ml，第2階段為3ml，此后應(yīng)用雙段碰撞取樣方法(用于加壓吸氣的裝置A，英國(guó)藥典1988)分析實(shí)驗(yàn)例10至13中的干粉制劑的性能。利用通過(guò)橡皮接管連接至雙碰撞取樣器的Rotahaler，將制劑從3號(hào)凝膠膠囊中釋放出。真空泵以60L/分運(yùn)轉(zhuǎn)兩個(gè)三秒脈沖，分析到達(dá)碰撞取樣器第1段和第2段的各樣本的量。所有樣本均顯示在碰撞取樣器第2段產(chǎn)生的沉積百分?jǐn)?shù)最大，這表明了肺泡運(yùn)送顆粒的最佳大小。實(shí)施例16在兔肺中進(jìn)行實(shí)施例中所生產(chǎn)的固定不溶性微膠囊和可溶性微膠囊的給藥和沉積比較。對(duì)麻醉的新西蘭白兔或者給可溶性微膠囊或者給固定微膠囊。應(yīng)用計(jì)算機(jī)控制的噴霧器(MumedLtd.，UK)完成給藥?？扇苄晕⒛z囊懸浮于CFC11中，而固定微膠囊懸浮于水中。給藥后，摘取兔肺，并進(jìn)行所制備膠囊的沉積評(píng)價(jià)。在兔肺的肺泡組織中可發(fā)現(xiàn)固定膠囊是完整的。此表明微膠囊具有通過(guò)肺分散的適宜大小。相反，未獲得完整可溶性微膠囊的存在，此膠囊已溶解于肺液中。然后，當(dāng)用熒光顯微鏡研究時(shí)，發(fā)現(xiàn)在某些肺泡組織中存在有FITC-賴氨酸加合物存在。另外，在此動(dòng)物的血和尿中也發(fā)現(xiàn)有此加合物的存在。相反，在血和尿中均無(wú)固定膠囊存在。權(quán)利要求1.在治療或診斷中使用的一種水溶性物質(zhì)的微顆粒，呈光滑球形，并且其中至少90％質(zhì)量中等顆粒大小為1-10μm。2.一種水溶性物質(zhì)的微顆粒，呈光滑球形，并且其中至少90％質(zhì)量中等顆粒大小為1-10μm，其攜帶一種治療劑或診斷劑。3.按照權(quán)利要求2所述的微顆粒，可通過(guò)對(duì)上述水溶性物質(zhì)和治療劑或診斷劑的一種水溶液進(jìn)行噴霧干燥獲得。4.按照任一前述權(quán)利要求所述的微顆粒，其中所述顆粒大小為1-5μm。5.按照任一前述權(quán)利要求所述的微顆粒，其最大四分位數(shù)間距為3μm。6.按照權(quán)利要求5所述的微顆粒，其最大四分位數(shù)間距為2μm。7.按照任一前述權(quán)利要求所述的微顆粒，其是無(wú)菌的。8.按照任一前述權(quán)利要求所述的微顆粒，其被至少部分地用一種不溶于水的物質(zhì)包裹。9.按照任一前述權(quán)利要求所述的微顆粒，其還攜帶一種結(jié)合受體的組分。10.按照任一前述權(quán)利要求所述的微顆粒，其中水溶性物質(zhì)是碳水化合物。11.按照權(quán)利要求1至9中任一權(quán)項(xiàng)所述的微顆粒，其中水溶性物質(zhì)是一種氨基酸或多氨基酸。12.按照權(quán)利要求1至9中任一權(quán)項(xiàng)所述的微顆粒，其中水溶性物質(zhì)是一種脂肪酸或脂肪酸的酯。13.按照權(quán)利要求1至9中任一權(quán)項(xiàng)所述的微顆粒，其中水溶性物質(zhì)是一種蛋白質(zhì)、肽或酶。14.按照權(quán)利要求13所述的微顆粒，其中水溶性物質(zhì)是一種天然或重組形式的人體蛋白或片段。15.按照權(quán)利要求14所述的微顆粒，其中水溶性物質(zhì)是人血清白蛋白。16.按照任一前述權(quán)利要求所述的微顆粒，其中水溶性物質(zhì)在形成微顆粒前經(jīng)過(guò)化學(xué)或酶修飾。17.一種適用于通過(guò)肺氣道施用一種治療劑的吸氣裝置，其含有前述權(quán)利要求中任一權(quán)項(xiàng)所述微顆粒形式的治療劑。18.一種治療劑在制備用于治療一種疾病的藥物中的應(yīng)用，此治療劑經(jīng)由肺氣道給藥而對(duì)此病發(fā)揮作用，其特征在于此治療劑以權(quán)利要求1至16中任一權(quán)項(xiàng)所述的微顆粒形式存在。19.通過(guò)給患者施用有效量的治療劑治療一種疾病的方法，所述治療劑經(jīng)由肺氣道給藥以治療此病，該方法的特征包括以權(quán)利要求1至16中任一權(quán)項(xiàng)所述的微顆粒形式給藥。全文摘要一種水溶性物質(zhì)的微顆粒，呈光滑球形，并且其中至少90％質(zhì)量中等顆粒大小為1-10μm，它還能攜帶一種治療劑或診斷劑，或者使用它作為水溶性物質(zhì)，可以成功地在運(yùn)送上述藥劑的干粉吸氣器中使用。文檔編號(hào)A61K9/50GK1164186SQ9519630公開(kāi)日1997年11月5日申請(qǐng)日期1995年9月26日優(yōu)先權(quán)日1995年9月26日發(fā)明者A·D·蘇頓,R·A·約翰森申請(qǐng)人:安達(dá)里斯有限公司