專利名稱：用于預(yù)防和治療凝血噁烷a的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于預(yù)防和治療凝血噁烷A2介導(dǎo)的疾病的藥物，其含有作為活性成分的噠嗪酮化合物或其可藥用的鹽，尤其涉及凝血噁烷A2合成酶抑制劑。
背景技術(shù)：
凝血噁烷A2(TXA2)主要由血小板產(chǎn)生和釋出，并顯示強(qiáng)的血小板凝集和血管加壓作用。有關(guān)于它們的藥理學(xué)作用已有許多報(bào)導(dǎo)。在如下疾病，例如動(dòng)脈硬化、糖尿病、局部缺血性心臟病、肺病、高血壓、休克、Kawasaki疾病和乙醇肝疾病中發(fā)現(xiàn)TXA2的加速產(chǎn)生，因此，這說明TXA2與這些疾病發(fā)作和加重有關(guān)的可能性很高。為治愈這些疾病，已開發(fā)了TXA2合成酶抑制劑和TXA2拮抗劑，例如咪唑衍生物、吡啶衍生物和咪唑并吡啶衍生物。然而，人們?nèi)孕枰哂懈眯Ч挠糜陬A(yù)防和治療TXA2介導(dǎo)的疾病的藥物。
人們已知噠嗪酮化合物具有血小板凝集抑制作用、強(qiáng)心作用、血管舒張作用和抗-SRS-A(過敏反應(yīng)的緩慢反應(yīng)物質(zhì))作用(WO91/16314，US No.5202323，EP-A-482208)。
發(fā)明描述現(xiàn)在我們發(fā)現(xiàn)，上述噠嗪酮化合物和其可藥用的鹽有迄今未知的作用，也就是說，預(yù)防和治療TXA2介導(dǎo)的疾病的活性，尤其是TXA2合成酶抑制作用。
因此，本發(fā)明的目的是提供一種通過使用噠嗪酮化合物的用于預(yù)防和治療TXA2介導(dǎo)的疾病的藥物，尤其是TXA2合成酶抑制。
根據(jù)本發(fā)明，其提供了一種預(yù)防或治療TXA2介導(dǎo)的疾病的藥物，尤其是TXA2合成酶抑制劑，其含有作為活性成分的式(I)的噠嗪酮化合物或其可藥用的鹽
其中R1、R2和R3彼此獨(dú)立地是氫原子或低級(jí)烷基，X是鹵素元素、氰基或氫原子，Y是鹵素原子、三氟甲基或氫原子，A是任意地被羥基取代的C1-C8亞烷基。
以下解釋本說明書中使用的符號(hào)。
用于R1、R2和R3的低級(jí)烷基可以是直鏈或支鏈的，并具有1-6個(gè)碳原子，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基和己基。
優(yōu)選R1和R2均是氫原子，優(yōu)選R3是氫原子或C1-C4烷基。
用于R3的C1-C4烷基的實(shí)例是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基。
用于X和Y的鹵素原子是，例如，氟原子、氯原子、溴原子或碘原子，優(yōu)選X是鹵素原子，優(yōu)選Y是鹵素原子或氫原子。
用于A的任意地被羥基取代的C1-C8亞烷基可以是直鏈或支鏈的，其實(shí)例為亞甲基、1，2-亞乙基、1，2-亞丙基、亞丁基、亞戊基、亞己基、亞庚基、亞辛基、2，2-二甲基-1，2-亞乙基、2，2-二乙基-1，2-亞乙基、2，2-二正丙基-1，2-亞乙基、羥基亞甲基、1-羥基-1，2亞乙基、2-羥基-1，2-亞乙基和3-羥基-1，2-亞丙基。優(yōu)選任意地被羥基取代的C1-C5亞烷基。
在式(I)中，亞甲基和吡啶環(huán)的結(jié)合位置沒有特別限制。優(yōu)選的位置是吡啶環(huán)上相對(duì)于氮原子的3位上。
Y可以在苯環(huán)的任何位置上取代，優(yōu)選在4-位。
尤其優(yōu)選噠嗪酮化合物，其中，在式(I)中，R1和R2是氫原子，R3是氫原子或C1-C4烷基，X是鹵素原子，Y是鹵素原子或氫原子，A是任意地被羥基取代的C1-C5亞烷基。
更優(yōu)選的噠嗪酮化合物(I)的實(shí)例包括4-溴-6-(3-苯基丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-氯-6-(3-苯基丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-氯-6-(3-(4-氯苯基)丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-溴-6-(3-(4-氯苯基)丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-溴-6-(2，2-二甲基-3-苯基丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，
4-氯-6-(2，2-二甲基-3-苯基丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-溴-6-[3-(4-氯苯基)-2，2-二甲基丙氧基]-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-氯-6-[3-(4-氯苯基)-2，2-二甲基丙氧基]-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-溴-6-[3-(4-氯苯基)-3-羥基丙氧基]-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-氯-6-[3-(4-氯苯基)-3-羥基丙氧基]-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-溴-6-[3-(4-氯苯基)-2-羥基丙氧基]-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，和4-氯-6-[3-(4-氯苯基)-2-羥基丙氧基]-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮。
在本發(fā)明中使用的噠嗪酮化合物(I)包括立體和旋光異構(gòu)體。
噠嗪酮化合物(I)是已知化合物，可通過例如Wo91/16314，US5202323和國際專利申請(qǐng)PCT/JP95/69中描述的方法制備。
噠嗪酮化合物(I)的可藥用的鹽是，例如與無機(jī)酸(例如鹽酸、氫溴酸、磷酸和硫酸)形成的鹽和與有機(jī)酸(乙酸、琥珀酸、馬來酸、富馬酸、苯果酸和酒石酸)形成的鹽。
噠嗪酮化合物(I)可通過已知方法轉(zhuǎn)化成上述的鹽。
用于證實(shí)本發(fā)明中使用的化合物(I)的作用的方法并沒有特別的限定，該作用可通過已知方法證實(shí)。
在本發(fā)明中為活性成分的噠嗪酮化合物(I)和其可藥用的鹽是非常低毒性的，對(duì)哺乳動(dòng)物，如人、狗、牛、馬、兔、小鼠和大鼠有預(yù)防和治療TXA2介導(dǎo)的疾病和活性，尤其是TXA2合成酶抑制作用。即，它們具有預(yù)防和治療TXA2介導(dǎo)的疾病作用。例如，腦梗塞、腦血栓形成、支氣管哮喘、腦中風(fēng)、心肌梗塞、急性心力衰竭、心絞痛、高血壓、閉塞性動(dòng)脈硬化、閉塞性血栓性脈管炎、糖尿病性腎病變、糖尿病性神經(jīng)病變和由于糖尿病引起的血甘油三酯過多。
噠嗪酮化合物(I)和其可藥用的鹽的劑量形式的實(shí)例為用于非口腔給藥的，例如，針劑(皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)注射)、軟膏、栓劑或氣霧劑，和用于口腔給藥的，例如片劑、膠囊劑、粒劑、丸劑、糖漿劑、液劑、乳劑或懸浮液劑。
噠嗪酮化合物(I)和其可藥用的鹽通過常用于制藥的方法配制成制劑。
用于口腔給藥的片劑、膠囊劑、粒劑和丸劑通過使用例如賦形劑(例如蔗糖、乳糖、葡萄糖、淀粉和甘露糖醇)、粘合劑(例如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨糖醇、黃蓍膠、甲基纖維素和聚丙烯吡咯烷酮)、崩解劑(例如淀粉、羧甲基纖維素或其鈣鹽、微晶纖維素和聚乙二醇)和潤滑劑(例如滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、氧化硅、乳酸鈉和甘油)制備。
針劑、氣霧劑、糖漿劑、液劑、乳劑和懸浮液劑使用適用于活性成分的溶劑(例如，水、乙醇、異丙醇、丙二醇、1，3-丁二醇和聚乙二醇)、表面活性劑(例如脫水山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯脫水山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪酸酯、氫化蓖麻油的聚氧乙烯醚和卵磷脂)、懸浮劑(例如纖維素衍生物，如甲基纖維素和羧甲基纖維素的鈉鹽，和天然橡膠，如黃蓍膠和阿拉伯膠)、防腐劑(例如對(duì)羥基苯甲酸鹽、氯化苯甲烴銨和山梨酸鹽)等制備。栓劑使用例如聚乙二醇、羊毛脂和椰子油制備。
噠嗪酮化合物(I)和其可藥用的鹽的劑量根據(jù)患者的年齡、體重、癥狀的嚴(yán)重性等因素適當(dāng)?shù)卮_定，對(duì)于成人通常以單一至若干次分配的劑量給藥0.001～500mg/天，優(yōu)選0.005～100mg/天。
本發(fā)明通過實(shí)施例和實(shí)驗(yàn)以實(shí)施例更詳細(xì)地說明。人們應(yīng)理解，它們并不是以任何方式限定本發(fā)明。
使用如下藥物等進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)。
化合物A，4-溴-6-[3-(4-氯苯基)丙氧基]-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮鹽酸鹽；化合物B，4-溴-6-[(3S)-(4-氯苯基)-3-羥基丙氧基]-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮鹽酸鹽；和化合物C，4-溴-6-[(3R)-(4-氯苯基)-3-羥基丙氧基]-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮鹽酸鹽，它們以常規(guī)方法制備溶解于100％二甲基亞砜(DMSO)中，在使用時(shí)在用DMSO稀釋的狀態(tài)下用作試劑。
將消炎痛(由Sigma Chemical Co.制備)懸浮于生理鹽水中，向其中滴加2.5％碳酸鈉溶液(pH約8.0)將其溶解。在使用中將單一用途的稀釋劑稀釋膠原(Collagen Reagent Horm；由Niko Bioscience制備)，對(duì)于前列腺素H2(PGH2，由Funakoshi制備)在氮?dú)夥障鲁ケ螅谑褂脮r(shí)重新溶解于乙醇中。
實(shí)驗(yàn)實(shí)施例1兔血小板的TXA2釋放使用乙二胺四乙酸(EDTA；77mM EDTA，1/10體積)從正常兔子的頸動(dòng)脈采用。血液以1800rpm離心8分鐘，回收上清液中的富血小板血漿，將其隨后以3200rpm離心8分鐘。沉積物(血小板)用Tyrode-HEPES-EDTA緩沖液洗滌，以3200rpm離心8分鐘。將沉積物懸浮在Tyrode-HEPES緩沖液中以制備洗滌的血小板(5×108血小板/ml)。
將100％DMSO或試劑(化合物A，1.5μl)加入洗滌的血小板(270μl)中，混合物在37℃加熱2分鐘。隨后，加入膠原(10μg/ml)和1mMCa2+(或者在研究未刺激的血小板釋放時(shí)僅加入1mM Ca2+，開始實(shí)驗(yàn)。在37℃加熱8分鐘后，加入10-3M消炎痛，將小杯放在冰中以終止反應(yīng)。在以10000rpm離心10分鐘后，收集上清液，貯存于-20℃直到用于TXA2測定。
實(shí)驗(yàn)實(shí)施例2使用兔血小板微粒體的TXA2合成酶的抑制使用EDTA(77mM EDTA，1/10體積)從正常兔的頸動(dòng)脈采血。將血液1300rpm離心10分鐘，回收上清液中的富血小板血漿，將其以3400rpm離心15分鐘。沉積物用生理鹽水(最初體積)洗滌，以3400rpm離心15分鐘。隨后在沉積物中加入0.05M Tris-HCl緩沖液(1mM EDTA，pH7.5，血小板濕重量的3倍重量)，使用polytron勻化混合物(2分鐘，全速)。勻漿以8300rpm離心15分鐘(Tomg RD-20 III，No.3N)，將上清液以1000000rpm離心1小時(shí)(Beckman TL-100，TLA 100.3)。將沉積物懸浮于0.05M Tris-HCl緩沖液(1mM EDTA，pH7.5，血小板濕重量的1/3重量)以制備微粒體級(jí)分。將該級(jí)分貯存在-80℃下直到用于實(shí)驗(yàn)。
加入0.05M Tris-HCl緩沖液(pH7.5，890μl)、100μl上述微粒體(85μg蛋白質(zhì))和100％DMSO或試劑(化合物A，5μl)，混合物在22℃預(yù)培養(yǎng)3分鐘。隨后加入PGH2(5nmol，5μl)以開始反應(yīng)。在22℃培養(yǎng)3分鐘后，加入1N鹽酸以中止反應(yīng)。加入1M Tris堿(55μl)以中和反應(yīng)混合物，混合物以10000rpm離心5分鐘?；厥丈锨逡?，貯存于-20℃直到用于TXA2測量。
在上述實(shí)驗(yàn)實(shí)施例中TXA2量通過使用TXB2(其穩(wěn)定化合物)實(shí)驗(yàn)試劑盒(由Amersham制造)采用EIA方法作為TXB2的量進(jìn)行測定。
實(shí)驗(yàn)實(shí)施例1和2的結(jié)果示于表1中表1

注*1抑制50％TXA2釋放所需的量(μM)*2抑制50％TXA2合成所需的量(μM)實(shí)驗(yàn)實(shí)施例3使用人血小板微粒體抑制TXA2合成酶以實(shí)驗(yàn)實(shí)施例2中的相同方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，只是用人血小板微粒體代替兔血小板微粒體?；衔顰、化合物B和化合物C用作試劑結(jié)果，當(dāng)使用人血小板微粒體時(shí)，TXA2合成酶抑制作用的IC50(抑制50％TXA2合成所需的量)分別為，對(duì)于化合物A為0.010μM，對(duì)于作為光學(xué)異構(gòu)體的化合物B和化合物C為0.020μM和0.030μM。
實(shí)驗(yàn)實(shí)施例4；急性毒性給鼠和狗口服化合物A，經(jīng)測定LD50不小于2g/kg，從而說明本發(fā)明使用的化合物(I)的毒性極其低。
從上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，證實(shí)噠嗪酮化合物(I)和其鹽具有杰出的TXA2釋放抑制作用和TXA2合成酶抑制作用，并且明顯是低毒性。
實(shí)施例1片劑采用常規(guī)方法混合如下成分，并制成每片含50mg活性成分的糖衣片劑。
化合物A 10g乳糖 20g淀粉 5g硬脂酸鎂 0.1g羧甲基纖維素鈣 7g總共42.1g實(shí)施例2 膠囊劑用常規(guī)方法混合如下成分，充入明膠膠囊以制備每粒膠囊含有50mg活性成分的膠囊。
化合物A 10g乳糖 20g結(jié)晶纖維素10g硬脂酸鎂 1g總共 41g實(shí)施例3 軟膏用常規(guī)方法混合如下成分制備1％軟膏化合物A1g橄欖油 20g白凡士林 79g總共 100g實(shí)施例4 氣霧懸浮劑混合如下成分(A)，將得到的混合物裝入裝有閥的容器。在其中在20℃由閥噴咀使推進(jìn)劑(B)加壓至約2.46-2.81mg/cm2(表壓)制備氣霧懸浮劑。
(A)化合物A 0.25wt％肉豆蔻酸異丙酯 0.10wt％乙醇26.40wt％(B)1，2-二氯四氟乙烷和1-氯五氟乙烷的60wt％-40wt％ 73.25wt％混合物噠嗪酮化合物(I)和其可藥用的鹽具有預(yù)防和治療TXA2介導(dǎo)的疾病的活性，尤其是TXA2合成酶抑制作用，用作預(yù)防和治療TXA2介導(dǎo)疾病的藥物。尤其用作TXA2合成酶抑制劑。它們具有預(yù)防和治療TXA2介導(dǎo)的疾病，如腦梗塞、腦血栓形成、支氣管哮喘、腦中風(fēng)、心肌梗塞、急性心力衰竭、心絞痛、高血壓、閉塞性動(dòng)脈硬化、閉塞性血栓性脈管炎、糖尿疾性腎病變、糖尿病性神經(jīng)病變和由于糖尿病引起的血甘油三酯過多的效果。
權(quán)利要求
1.一種用于預(yù)防或治療凝血噁烷A2介導(dǎo)的疾病的藥物，其含有作為活性成分的式(I)的噠嗪酮化合物或其可藥用的鹽 其中R1、R2和R3彼此獨(dú)立地是氫原子或低級(jí)烷基，X是鹵素原子、氰基或氫原子，Y是鹵素原子、三氟甲基或氫原子，A是任意地被羥基取代的C1-C8亞烷基。
2.權(quán)利要求1的藥物，它是凝血噁烷A2合成酶抑制劑。
3.權(quán)利要求1的藥物，其中R1和R2均是氫原子，R3是氫原子或C1-C4烷基，X是鹵素原子，Y是鹵素原子或氫原子，和A是任意地被羥基取代的C1-C5亞烷基。
4.權(quán)利要求1的藥物，其中式(I)的噠嗪酮化合物是選自如下的化合物4-溴-6-(3-苯基丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-氯-6-(3-苯基丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-氯-6-(3-(4-氯苯基)丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-溴-6-(3-(4-氯苯基)丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-溴-6-(2，2-二甲基-3-苯基丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-氯-6-(2，2-二甲基-3-苯基丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-溴-6-(3-(4-氯苯基)-2，2-二甲基丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-氯-6-(3-(4-氯苯基)-2，2-二甲基丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-溴-6-(3-(4-氯苯基)-3-羥基丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-氯-6-(3-(4-氯苯基)-3-羥基丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-溴-6-(3-(4-氯苯基)-2-羥基丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮，4-氯-6-(3-(4-氯苯基)-3-羥基丙氧基)-5-(3-吡啶基甲氨基)-3(2H)-噠嗪酮。
5.一種預(yù)防或治療凝血噁烷A2介導(dǎo)的疾病的方法，其包括施用式(I)的噠嗪酮化合物或其可藥用的鹽 其中R1、R2和R3彼此獨(dú)立地是氫原子或低級(jí)烷基，X是鹵素原子、氰基或氫原子，Y是鹵素原子、三氟甲基或氫原子，A是任意地被羥基取代的C1-C8亞烷基。
6.權(quán)利要求1的式(I)噠嗪酮化合物或其可藥用的鹽在制備用于預(yù)防或治療凝血噁烷A2介導(dǎo)的疾病的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
一種用于預(yù)防或治療TXA
文檔編號(hào)A61K31/50GK1141590SQ9519174
公開日1997年1月29日 申請(qǐng)日期1995年2月20日 優(yōu)先權(quán)日1994年2月22日
發(fā)明者R·池川, 今田光昭, 中村憲史, 谷川啟造, 水流添暢智 申請(qǐng)人:株式會(huì)社綠十字, 日產(chǎn)化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社