專利名稱：銀杏葉的抽提物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種新的銀杏葉的抽提物及該抽提物的制備方法。
一些銀杏葉的抽提物已廣泛用于治療周圍和腦動脈循環(huán)障礙。制備這些抽提物的方法例如已在DE-B-1767098，DE-B2117429，EP-A0324197，EP-A330567和EP-A0436129中進行了詳細說明。
根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供了一種含有至少25％(重量)的糖脂和少于50ppm(重量)的銀杏酚酸的銀杏葉的抽提物。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方案中，該抽提物含有至少1％(重量)的腦苷脂。
在本發(fā)明的一個實施方案中，此抽提物含有至少35％的糖脂，更優(yōu)選的是含有大約40％的糖脂。在此情況下糖脂優(yōu)選包括單半乳糖甘油二酯、二半乳糖甘油二酯和腦苷脂的混合物。單半乳糖甘油二酯和二半乳糖甘油二酯的重量比優(yōu)選為1∶1-3∶1，最優(yōu)選為5∶3。
在本發(fā)明的另一個實施方案中，抽提物含有少于250％(重量)的糖脂和腦苷脂。在此情況下抽提物含有30％-45％的糖脂和腦苷脂較優(yōu)選，糖脂優(yōu)選以二半乳糖甘油二酯為主。在此情況下糖脂與腦苷脂的重量比以在2∶1-6∶1之間較好，大約4∶1為最優(yōu)選。典型地，腦苷脂含有的半乳糖腦苷脂量優(yōu)選為3％-12％(重量)，最優(yōu)選是3％-10％(重量)。
本發(fā)明也提供了用銀杏葉制備糖脂抽提物的方法，包括下列步驟用有機溶劑抽提樹葉；分離抽提液和樹葉；冷卻抽提液使其沉淀出類脂組分；從抽提液中回收類脂組分；把類脂組分與醇混合；除去不溶的物質(zhì)；抽提該醇溶液；用第一種抽提介質(zhì)處理該醇溶液，以除去中性類脂物和銀杏酚酸；用第二種抽提介質(zhì)處理醇溶液以抽提糖脂；提純含有糖脂的第二種抽提介質(zhì)；并且除去第二種抽提介質(zhì)以提供一種濃縮的糖脂抽提液。
優(yōu)選地，該濃縮的醇溶液溶入一種有機溶劑中，并將溶液加到層析柱中，通過以第一種抽提介質(zhì)經(jīng)過該柱的方法來處理該醇溶液。第一種抽提介質(zhì)典型地是一種有機溶劑，優(yōu)選是丙酮和甲苯的混合物。
優(yōu)選地，該濃縮的醇溶液還要在層析柱中通過以第二種抽提介質(zhì)經(jīng)過該柱來處理。第二種抽提介質(zhì)典型地是一種有機溶劑和醇的混合物，優(yōu)選是丙酮和乙醇的混合物。
在本發(fā)明的一個實施方案中，用于抽提樹葉的有機溶劑是丙酮/水。類脂組分從抽提液中回收后，優(yōu)選進行洗滌再進一步分離出來。用于與類脂組分混合的醇典型地是乙醇。
在一種優(yōu)選的方案中，含有糖脂的抽提液用活性炭處理，并過濾經(jīng)處理的抽提液以除去活性炭從而得以純化。
除去第二種抽提介質(zhì)較好的方法是蒸發(fā)。
另一方面，本發(fā)明的抽提物的成分具有與糖脂相似的極性。
本發(fā)明也提供一種含有本發(fā)明的抽提物的局部施用組合物。
本發(fā)明通過下述實施例的詳細說明會更容易理解。
一般來說，在本發(fā)明的方法中，銀杏葉首先用如丙酮/水這樣的有機溶劑來抽提，并且濃縮抽提后的溶液，例如通過蒸發(fā)和冷卻。隨后過濾該溶液并在沉淀物中加入C1-C3醇如乙醇。攪拌溶液并再過濾。用水調(diào)整濾液，并可用合適的溶劑如石油溶劑油和/或已烷/庚烷來抽提。抽提后的水性醇相隨后被蒸發(fā)至干燥狀態(tài)并加入有機溶劑，優(yōu)選為丙酮/甲苯。
在本發(fā)明的一個實施方案中，有機溶劑是5％-30％、最優(yōu)選是15％的丙酮/溶劑的混合物。
在本發(fā)明的另一個實施方案中，有機溶劑是40％-60％、最優(yōu)選的是50％的丙酮/溶劑的混合物。
得到的溶液經(jīng)過過濾、濃縮、并用第一種抽提介質(zhì)通過層析分離來提純，該第一種抽提介質(zhì)典型的是丙酮/甲苯。使用典型包括丙酮/乙醇的第二種抽提介質(zhì)可以抽提出糖脂組分。隨后提純糖脂組分，例如用活性炭來處理后，過濾除去活性炭，接著通過蒸發(fā)以徹底除去丙酮/甲苯溶劑。
本發(fā)明還提供了一種其成分具有與糖脂類似的極性的抽提物。
在下面的實施例中將詳細說明本發(fā)明方法。
實施例1
第一步在逆流抽提裝置中，在55-60℃用800l60％的丙酮水混合物抽提100kg精磨的銀杏葉。
分離抽提液和樹葉并隨后通過蒸發(fā)濃縮抽提液。
第二步冷卻該濃縮液至8-10℃，并保持該溫度3小時。
傾析回收沉淀的類脂物。
將回收的類脂物溶于攪拌的2.9kg丙酮和0.7kg軟化水的溶液中，然后再加入30kg的軟化水。
持續(xù)攪拌該溶液并冷卻至8-10℃，并且在傾析前至少保持此狀態(tài)3小時。
第三步在第二步傾析出的濕的類脂物中加入200kg乙醇并攪拌60分鐘。
傾析除去不溶解的物質(zhì)。
第四步把第三步得到的乙醇溶液調(diào)至含水12-15％。
用140l油餾出物(沸程在60-80℃)抽提該溶液兩次。
將乙醇-水相蒸發(fā)成大于85％干的抽提物。
第五步把第四步得到的抽提物溶入15％的丙酮/甲苯中。
過濾此溶液后將其加到含30kg二氧化硅的填充柱中，將800l 15％的丙酮/甲苯泵入流過該柱，然后用200l 7.5％的乙醇/丙酮沖洗該柱。
第六步在乙醇/丙酮組分中加入1.1kg活性炭并攪拌該溶液30分鐘以提純該組分。
過濾該溶液并蒸發(fā)除去溶劑。
得到0.98kg具有下列成分的綠褐色油糖脂 40％由單半乳糖甘油二酯 25％以及二半乳糖甘油二酯 15％組成銀杏酚酸 39ppm半乳糖腦苷脂 6％實施例2第一步在逆流的抽提裝置中，在55-60℃用560l的60％的丙酮水混合物抽提70kg精磨的銀杏葉。
分離抽提液和樹葉并蒸發(fā)抽提液使其中丙酮的含量降至3％以下。
第二步冷卻該濃縮液至8-10℃，并保持該溫度3小時。
傾析回收沉淀的類脂物。
將回收的類脂物溶于2.0kg攪拌的丙酮溶液中，然后再加入20kg軟化水。
持續(xù)攪拌該溶液并冷卻至8-10℃，且在傾析前至少保持此狀態(tài)3小時。
第三步在第二步析出的濕的類脂物中加入30kg甲醇并攪拌60分鐘。
傾析除去不溶解的物質(zhì)，蒸發(fā)濾液以除掉甲醇。
第四步在第三步得到的濃縮液中加入10kg丙酮并攪拌1小時。過濾得到的溶液并蒸發(fā)濾液。
第五步將第四步的抽提物溶于15％的丙酮/甲苯中。
過濾該溶液后將其加到含有8.5kg二氧化硅的填充柱中。用泵入60l 15％的丙酮/甲苯使之通過該柱，然后用17l 7.5％的乙醇/甲苯?jīng)_洗該柱。
第六步在乙醇/丙酮組分中加入0.24kg活性炭并攪拌此溶液30分鐘。
過濾該溶液并蒸發(fā)除去溶劑。
獲得0.19kg具有下列成分的綠褐色油糖脂 27％由單半乳糖甘油二酯 20％以及二半乳糖甘油二酯 7％組成銀杏酚酸 30ppm半乳糖腦苷脂 3.5％實施例3第一步在逆流的抽提裝置中，在55-60℃用600l60％的丙酮水混合物抽提70kg精磨的銀杏葉。
分離抽提液和樹葉并蒸發(fā)濃縮抽提液。
第二步冷卻該濃縮液至8-10℃并保持該溫度3小時以上。
傾析回收沉淀的類脂物。
將回收的類脂物溶于攪拌的2.2kg丙酮和0.5kg軟化水的溶液中，然后再加入22kg軟化水。
持續(xù)攪拌該溶液并使之冷卻至8-10℃，并且在傾析前保持該狀態(tài)至少3小時。
第三步在第二步的濕的類脂物中加入55kg乙醇并攪拌60分鐘。
傾析除去不溶解的物質(zhì)。
將乙醇-水相蒸發(fā)至大于85％干抽提物。
第四步把第三步得到的抽提物溶入50％的丙酮/甲苯中。
過濾該溶液后將其加到含有18.5kg二氧化硅的填充柱中。泵入150l 50％的丙酮/甲苯使之流過該柱，然后再用100l 7.5％的乙醇/丙酮沖洗該柱。
第五步如前所述濃縮并再層析該溶液。
在乙醇/丙酮組分中加入0.06kg活性炭并攪拌該溶液30分鐘以純化該組分。
地濾該溶液并蒸發(fā)除去溶劑。
得到0.26kg具有下列成分的綠褐色油糖脂 33％由單半乳糖甘油二酯1％以及二半乳糖甘油二酯 31％組成銀杏酚酸 未測出半乳糖腦苷脂 10％
實施例4第一步在逆流的抽提裝置中，在50-60℃用40l的60％丙酮水混合物抽提5kg精磨的銀杏葉。
分離抽提液和樹葉并蒸發(fā)抽提液以使其中丙酮含量低于3％。
第二步冷卻該溶液至8-10℃并保持該溫度3小時。
傾析回收沉淀的類脂物。
把回收的類脂物溶于0.15kg攪拌的丙酮溶液中，然后再加入1.5kg軟化水。
持續(xù)攪拌并冷卻該溶液至8-10℃且在傾析前保持該狀態(tài)至少3小時。
第三步在第二步析出的濕類脂物中加入2kg甲醇并攪拌60分鐘。
傾析除去不溶的物質(zhì)，蒸發(fā)濾液以除去甲醇。
第四步在第三步得到的濃縮液中加入0.5kg丙酮并攪拌1小時。然后過濾該溶液并蒸發(fā)濾液。第五步把第四步得到的抽提物溶于20％丙酮/甲苯中。
過濾該溶液后將其加到含0.8kg二氧化硅的填充柱中。泵入5.5l 20％的丙酮/甲苯使之流過該柱，然后用1.6l乙醇沖洗該柱。
第六步在乙醇組分中加入25g活性炭并攪拌該溶液30分鐘。
過濾該溶液并通過蒸發(fā)除去溶劑。
得到19g具有下列成分的綠褐色油糖脂 42％由單半乳糖甘油二酯 29％以及二半乳糖甘油二酯 13％組成半乳糖腦苷脂 3％應理解的是盡管該抽提物通過使用(技術)已顯示其含有糖脂，但可能的是它的主要成分具有與糖脂類似的極性。
該抽提物已顯示其在化妝品和護膚方面的活性。
本發(fā)明不限于前文所述的特定的實施方案，可以有各種細節(jié)變化。
權利要求
1.銀杏葉的抽提物，含有至少25％(重量)的糖脂和少于50ppm的銀杏酚酸。
2.如權利要求1或2所述的抽提物，其含有至少1％(重量)的腦苷脂。
3.如權利要求1或2所述的抽提物，其含有至少35％的糖脂。
4.如權利要求1至3中任一項所述的抽提物，其含有大約40％的糖脂。
5.如前述任何一項權利要求所述的抽提物，其中糖脂包括單半乳糖甘油二酯和二半乳糖甘油二酯的混合物。
6.如權利要求6所述的抽提物，其中單半乳糖甘油二酯與二半乳糖甘油二酯的重量比在1∶1-3∶1之間。
7.如權利要求5所述的抽提物，其中所述的比率大約為5∶3。
8.如權利要求1或2所述的抽提物，其含有少于50％(重量)的糖脂和腦苷脂。
9.如權利要求8所述的抽提物，其含有30-45％的糖脂和腦苷脂。
10.如權利要求8或9所述的抽提物，其中糖脂主要是二半乳糖甘油二酯。
11.如權利要求8-10中任一項所述的抽提物，其中糖脂與腦苷脂的比率在2∶1-6∶1之間。
12.如權利要求11所述的抽提物，其中糖脂與腦苷脂的比率大約為4∶1。
13.如權利要求7-11中任一項所述的抽提物，其中腦苷脂中包含有半乳糖腦苷脂。
14.如權利要求13所述的抽提物，其中半乳糖腦苷脂的含量為3-12％(重量)。
15.如權利要求13或14所述的抽提物，其中半乳糖腦苷脂的含量為3-10％(重量)。
16.基本上如前文通過實施例1、2或4所述的銀杏葉的抽提物。
17.基本上如前文通過實施例3所述的銀杏葉的抽提物。
18.銀杏葉的抽提物，含有25％(重量)的單半乳糖甘油二酯，15％(重量)的二半乳糖甘油二酯，6％(重量)的腦苷脂和少于50ppm的銀杏酚酸。
19.一種銀杏葉的抽提物，含有20％(重量)的單半乳糖甘油二酯，7％(重量)的二半乳糖甘油二酯，3.5％(重量)的腦苷脂和少于50ppm的銀杏酚酸。
20.一種銀杏葉的抽提物，含有1％(重量)的單半乳糖甘油二酯，31％(重量)的二半乳糖甘油二酯，10％(重量)的腦苷脂和少于50ppm的銀杏酚酸。
21.一種銀杏葉的抽提物，含有29％(重量)的單半乳糖甘油二酯，13％(重量)的二半乳糖甘油二酯，3％(重量)的腦苷脂和少于50ppm的銀杏酚酸。
22.用銀杏葉制備糖脂抽提物的方法，包括下列步驟用有機溶劑抽提樹葉；分離抽提液和樹葉；冷卻抽提液以沉淀出類脂組分；從抽提液中回收類脂組分；將類脂組分與醇混合；除去不溶的物質(zhì)；抽提該醇溶液；用第一種抽提介質(zhì)處理該醇溶液以除去中性類脂物和銀杏酚酸；用第二種抽提介質(zhì)處理該醇溶液以抽提糖脂；提純含有糖脂的第二種抽提介質(zhì)；以及除去第二種抽提介質(zhì)以提供濃縮的糖脂油提物。
23.如權利要求22所述的方法，其中濃縮的醇溶液溶入一種有機溶劑中并將該溶液加到層析柱中，并將第一種抽提介質(zhì)通過柱以處理該醇溶液。
24.如權利要求23所述的方法，其中第一種抽提介質(zhì)是一有機溶劑。
25.如權利要求24所述的方法，其中有機溶劑是丙酮與甲苯的混合物。
26.如權利要求24或25所述的方法，其中有機溶劑是5-30％的丙酮/甲苯。
27.如權利要求24-26所述的方法，其中有機溶劑是15％的丙酮/甲苯。
28.如權利要求24或25所述的方法，其中有機溶劑是40-60％的丙酮/甲苯。
29.如權利要求24或28所述的方法，其中有機溶劑是50％的丙酮/甲苯。
30.如權利要求23-29中任一項所述的方法，其中濃縮醇溶液通過使第二種抽提介質(zhì)流過層析柱而進行處理。
31.如權利要求30所述的方法，其中第二種抽提介質(zhì)是一種有機溶劑與醇的混合物，優(yōu)選的是丙酮與乙醇的混合物。
32.如權利要求22-31中任一項所述的方法，其中用于抽提樹葉的有機溶劑是丙酮/水。
33.如權利要求22-32中任一項所述的方法，其中從抽提液中回收的類脂組分被洗滌并隨后進一步分離。
34.如權利要求22-33中任一項所述的方法，其中與類脂組分混合的醇是乙醇。
35.如權利要求22-34中任一項所述的方法，其中含有糖脂的介質(zhì)經(jīng)過活性炭處理，然后過濾處理后的抽提液以除去活性炭而得以純化。
36.如權利要求22-35中任一項所述的方法，其中第二種抽提介質(zhì)通過蒸發(fā)除去。
37.基本上如前文通過實施例1、2和4所述的用銀杏葉制備糖脂抽提物的方法。
38.基本上如前文通過實施例3所述的用銀杏葉制備糖脂抽提物的方法。
39.用如權利要求23-37中任一項所述的方法從銀杏葉制備的糖脂抽提物。
40.用如權利要求23-36任一項或權利要求38所述的方法，從銀杏葉制備的糖脂抽提物。
41.如權利要求1-21中任一項所述的抽提物，其中組分具有與糖脂類似的極性。
42.一種包括如權利要求1-21中任一項所述的、權利要求39或40所述的抽提物的局部施用組合物。
全文摘要
銀杏葉的抽提物，包含至少25％(重量)的糖脂和至少1％的含有半乳糖腦苷脂的腦苷脂。該抽提物含有少于50ppm的銀杏酚酸。制備該抽提物是用從類脂組分與醇的混合物中回收類脂組分的方法來完成的。該醇溶液在層析柱中用丙酮和甲苯的混合物處理以除去中性類脂物和銀杏酚酸，并且在層析柱中的該醇溶液用丙酮和水的混合物進一步處理以抽提糖脂。該抽提物已顯示了其在化妝品和護膚方面的活性。
文檔編號A61K8/97GK1136279SQ94194309
公開日1996年11月20日 申請日期1994年11月30日 優(yōu)先權日1993年12月3日
發(fā)明者約瑟夫·奧賴利 申請人:蒙大拿有限公司