本發(fā)明屬于天然藥物領(lǐng)域，特別涉及一種含蓽茇酰胺和大黃素的具有抗肺癌作用的復(fù)方藥物組合物及其用途。
背景技術(shù)：
肺癌是發(fā)病率和死亡率增長(zhǎng)最快，對(duì)人群健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一。近50年來(lái)許多國(guó)家都報(bào)道肺癌的發(fā)病率和死亡率均明顯增高，男性肺癌發(fā)病率和死亡率均占所有惡性腫瘤的第一位，女性發(fā)病率占第二位，死亡率占第二位。肺癌的病因至今尚不完全明確。目前，治療肺癌的常見(jiàn)治療方式有：手術(shù)、放療、化療、中藥治療。其中手術(shù)和放療是最常用的方法，但是手術(shù)治療的風(fēng)險(xiǎn)大、費(fèi)用高，而放療副作用大，大大的增加了肺癌患者的痛苦。近年來(lái)，市面上逐漸出現(xiàn)了一些治療肺癌的藥物，例如：鉑類、替尼類等。但是上述藥物整體治療效果仍然不樂(lè)觀，而且易于復(fù)發(fā)。因此，研究和開(kāi)發(fā)出一種治療效果好，不易復(fù)發(fā)的肺癌是當(dāng)前亟需解決的難題。所以尋找安全、有效、低毒的抗腫瘤藥物和研究其作用機(jī)理，具有重要意義。
蓽茇酰胺(piperlongumine，plm)又稱蓽茇明堿(pipledine)，屬生物堿類化合物。最初分離自胡椒科植物蓽茇piperlongumlinn.的根，在長(zhǎng)柄胡椒p.sylvaticumroxb.及瘤突胡椒p.tuberculatumjacq.等的根中也有分得。隨著對(duì)蓽茇酰胺研究的深入，發(fā)現(xiàn)蓽茇酰胺具有多種藥理學(xué)作用，其中對(duì)腫瘤細(xì)胞具有顯著的細(xì)胞毒作用，可調(diào)節(jié)高脂血癥大鼠的血脂代謝，并表現(xiàn)出抗血小板凝集、鎮(zhèn)痛、抗真菌等諸多藥理活性。最新研究表明它對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有特異性的細(xì)胞毒作用，而對(duì)正常細(xì)胞的毒性非常小(nature.2011jul13；475(7355):231-4.；acschembiol.2013may17；8(5):923-9.)，因此蓽茇酰胺是一種極具潛力的能夠選擇性殺死腫瘤的中藥單體。
大黃素(emodin，ed)是大黃的主要有效成分之一，具有消炎、抑菌、抗病毒等作用，近年來(lái)，研究發(fā)現(xiàn)其具明顯廣譜抗腫瘤作用，且毒副作用較低，選擇性較強(qiáng)而備受關(guān)注。大黃素抗腫瘤作用的研究，主要從抑制腫瘤生長(zhǎng)、抑制遷移侵襲、聯(lián)合用藥增強(qiáng)療效、輔佐化療增敏減毒4個(gè)方面。ed對(duì)肝癌、肺癌、乳腺癌和結(jié)直腸癌等多種癌癥具有積極的預(yù)防和治療作用(oncotarget.2017.doi:10.18632/oncotarget.16611.；biomedpharmacother.2017；90:222-228.；cellphysiolbiochem.2017；41(1):339-357.)，這將有助于提高化療藥物的效應(yīng)。ed抗癌機(jī)理主要涉及清除羥基自由基、對(duì)腫瘤細(xì)胞具有選擇性殺傷作用，還能通過(guò)改變細(xì)胞核酸的分子序列抑制腫瘤的生長(zhǎng)、凋亡和分化。
基于上述背景，經(jīng)過(guò)文獻(xiàn)調(diào)研，組合plm和ed用于惡性腫瘤肺癌的預(yù)防和治療作用尚未見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道幾乎沒(méi)有。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為了克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點(diǎn)和不足，本發(fā)明的首要目的在于提供一種具有抗肺癌作用的復(fù)方藥物組合物；該復(fù)方藥物組合物的活性成分是由蓽茇酰胺和大黃素組成。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種上述具有抗肺癌作用的復(fù)方藥物組合物的用途；藥理試驗(yàn)證明該復(fù)方藥物組合物具有協(xié)同抗肺癌作用。
本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
一種具有抗肺癌作用的復(fù)方藥物組合物，該復(fù)方藥物組合物的活性成分是由蓽茇酰胺和大黃素組成。
優(yōu)選的，所述蓽茇酰胺和大黃素的摩爾比為1:1～1:10。
更加優(yōu)選的，所述蓽茇酰胺和大黃素的摩爾比為1:1～1:5。
該復(fù)方藥物組合物還含有藥物上可接受的載體。
上述的一種具有抗肺癌作用的復(fù)方藥物組合物在制備抗淋肺癌藥物中的用途。
所述抗肺癌藥物可用于包括人在內(nèi)的哺乳動(dòng)物的肺癌的治療。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下突出的優(yōu)點(diǎn)及有益效果：
發(fā)明人在對(duì)蓽茇酰胺(plm)和大黃素(ed)配伍藥理活性的研究中發(fā)現(xiàn)，將蓽茇酰胺和大黃素組合給藥，特別是當(dāng)兩者摩爾比為1:1-1:10配伍時(shí)具有很好抗癌細(xì)胞的協(xié)同作用。發(fā)明人分別對(duì)肺癌為模型進(jìn)行體外mtt篩選，發(fā)現(xiàn)其具有很強(qiáng)的抗增殖活性并呈良好的時(shí)效與量效關(guān)系，結(jié)合經(jīng)典聯(lián)合給藥分析原理(median-effectprinciple)和統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果表明其具有協(xié)同作用，尤其是在fa＜0.5時(shí)可明顯產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)抑制三種癌細(xì)胞增殖，這說(shuō)明ed和plm組合物可在低劑量配伍時(shí)產(chǎn)生ed或plm單藥高劑量的生物學(xué)效應(yīng)，從而可以大大降低藥物的毒副作用產(chǎn)生，具有良好的臨床用藥開(kāi)發(fā)前景。同時(shí)，等效應(yīng)劑量評(píng)價(jià)表明，復(fù)合藥物對(duì)正常肝細(xì)胞l-o2的毒性尚未增加。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。
實(shí)施例1：肺癌細(xì)胞篩選優(yōu)化蓽茇酰胺(plm)和大黃素(ed)復(fù)方藥物組合物。
取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的肺癌細(xì)胞，分別接種3×104個(gè)細(xì)胞/孔于96孔板上，待生長(zhǎng)6小時(shí)后，離心棄上清，然后按以下分組給藥：腫瘤細(xì)胞設(shè)不加藥組和加藥組，其中加藥組設(shè)ed和plm單藥組、ed和plm聯(lián)合用藥不同摩爾比例組，每組設(shè)4-6個(gè)復(fù)孔，培養(yǎng)24小時(shí)，棄上清，加入100μl含0.5mg/ml的mtt(四氮唑鹽)無(wú)血清培養(yǎng)液培養(yǎng)4小時(shí)，加入100μldmso(二甲亞砜)，放置于微型振蕩儀上振蕩10min，再置于酶標(biāo)儀上570nm處檢測(cè)od值。結(jié)果按照以下抑制率公式計(jì)算每種情況下腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率，具體結(jié)果見(jiàn)表1。
抑制率＝(1-加藥組od值/對(duì)照組od值)
表1為ed和plm單獨(dú)和聯(lián)合給藥作用細(xì)胞24小時(shí)后不同濃度的ic50抑制率。
當(dāng)plm和ed按摩爾比1:1和1:10配伍組合時(shí)的抑制情況。當(dāng)摩爾比改變時(shí)，plm和ed配伍的濃度進(jìn)行調(diào)整增加，其抑制率呈濃度依賴性。
表1ed和plm單藥/組合作用24小時(shí)ic50(μm)
實(shí)施例2：plm和ed聯(lián)合給藥效應(yīng)分析
以median-effectprinciple(中效原理或chou-talalay聯(lián)合指數(shù)法)為評(píng)價(jià)基礎(chǔ)，應(yīng)用combidrug統(tǒng)計(jì)軟件繪制劑量-效應(yīng)曲線及不同效應(yīng)下的合用指數(shù)曲線(fa-c曲線)，從兩藥合用的效應(yīng)與合用指數(shù)的關(guān)系定量評(píng)價(jià)兩藥之間是協(xié)同、拮抗或相加關(guān)系。具體步驟如下：
藥物作用效應(yīng)即抑制率(fa)＝1-(試驗(yàn)組平均od570值/腫瘤細(xì)胞空白對(duì)照組平均od570)根據(jù)中效方程式fa/fu＝(d/dm)m，兩邊取對(duì)數(shù)logfa/fu＝mlogd–mlogdm，設(shè)a＝-mlogdm，b＝m，x＝logd，y＝logfa/fu,代入中效方程式得y＝bx–a；其中fa為藥物作用效應(yīng)，fu＝1–fa，d為藥物濃度，m為斜率，dm為中效濃度，即50％效應(yīng)時(shí)的藥物濃度。依上述公式，計(jì)算出兩種抗癌藥單用及合用時(shí)各自的中效濃度dm(logdm＝-a/m)，再計(jì)算出單用及兩藥合用時(shí)在各種效應(yīng)時(shí)所需藥物濃度〔d＝dm(fa/fu)1/m〕，可計(jì)算出兩藥合用時(shí)在各種效應(yīng)時(shí)的合用指數(shù)〔ci＝d1/dx1+d2/dx2+α(d1d2)/(dx1dx2)，d1、d2為兩藥合用時(shí)產(chǎn)生x效應(yīng)時(shí)兩藥各自所需濃度，dx1、dx2為兩藥單獨(dú)使用時(shí)產(chǎn)生x效應(yīng)時(shí)兩藥各自濃度〕。α＝0為兩種相互排斥性藥物，α＝1為兩種相互非排斥性藥物。因ed與plm作用機(jī)制不同，故本實(shí)驗(yàn)中取α＝0。當(dāng)ci<1，兩藥合用效應(yīng)為協(xié)同；ci＝1，兩藥合用效應(yīng)相加；ci>1，兩藥合用效應(yīng)拮抗。
經(jīng)過(guò)軟件分析，本發(fā)明的復(fù)方藥物組合物具有良好的協(xié)同作用，具體效應(yīng)見(jiàn)表2，根據(jù)median-effectprinciple評(píng)價(jià)效應(yīng)的原則，即ci指數(shù)<0.1時(shí)具有很強(qiáng)的協(xié)同作用(verystrongsynergism)；ci指數(shù)為0.1–0.3時(shí)為強(qiáng)協(xié)同效應(yīng)(strongsynergism)；ci指數(shù)為0.3–0.7具有協(xié)同效應(yīng)(synergism)；ci指數(shù)為0.7–0.85具有中度協(xié)同效應(yīng)(moderatesynergism)；ci指數(shù)為0.85–0.90區(qū)間時(shí)具有弱協(xié)同效應(yīng)(slightsynergism)；ci指數(shù)為0.90–1.10區(qū)間時(shí)具有近疊加效應(yīng)(nearlyadditive)；ci指數(shù)>1.10及以上時(shí)具有拮抗效應(yīng)。表2可見(jiàn)，ed和plm配伍具有協(xié)同效應(yīng)；尤其是當(dāng)兩者摩爾比為1-1:10配伍時(shí)具有良好的協(xié)同效應(yīng)，當(dāng)兩者摩爾比為1-1:5時(shí)協(xié)同效應(yīng)最強(qiáng)。
表2plm和ed不同配伍組合對(duì)a549作用24小時(shí)的聯(lián)合指數(shù)ci比較
實(shí)施例3：蓽茇酰胺(plm)和大黃素(ed)復(fù)方藥物組合物按照以下處方制成片劑：
處方如下：
制備工藝如下：
將藥物和輔料分別過(guò)80目篩，將蓽茇酰胺與50克微晶纖維素和12克羧甲基淀粉鈉充分混合，10％淀粉漿制軟材，18目篩制粒，60℃下干燥，得顆粒1。將大黃素與12克微晶纖維素、15克淀粉和8克羧甲基淀粉鈉充分混合，10％淀粉漿制軟材，18目篩制粒，60℃下干燥，得顆粒2。按等量遞增原則，將顆粒1和顆粒2充分混合，16目篩整粒，加入硬脂酸鎂，混勻，壓片，片重500mg。
上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。