一種抗肺癌組合物及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于制藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體而言，本發(fā)明涉及抗肺癌組合物及其應(yīng)用。本發(fā)明所述的一種抗肺癌組合物，其特征在于，包括人參，南沙參，白花蛇舌草，其中，所述人參為160-200份，南沙參為50-90份，白花蛇舌草為60-120份。本發(fā)明還提供了上述組合物在制備抗肺癌藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的有益效果在于：1、通過實驗驗證，藥物有高效的抗癌效果。2、藥物的抗癌機制很可能是由于藥物中的有效成分抑制了L型氨基酸轉(zhuǎn)運體1的轉(zhuǎn)運功能，從而達到良好的抗癌效果。
【專利說明】一種抗肺癌組合物及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于制藥【技術(shù)領(lǐng)域】。具體而言，本發(fā)明涉及一種抗肺癌組合物及其應(yīng)用。【背景技術(shù)】
[0002]近年來，肺癌發(fā)病率和死亡率增長最快，對人群健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一。近50年來許多國家都報道肺癌的發(fā)病率和死亡率均明顯增高，男性肺癌發(fā)病率和死亡率均占所有惡性腫瘤的第一位，女性發(fā)病率占第二位，死亡率占第二位。肺癌的病因至今尚不完全明確，大量資料表明，長期大量吸煙與肺癌的發(fā)生有非常密切的關(guān)系。
[0003]目前肺癌的治療手段有手術(shù)、放射治療、藥物治療，以及上述療法的綜合治療。藥物治療中，中藥因為藥效持久、副作用小，成為患者的首選，以減輕病人痛苦、延長其生命、提高其生活質(zhì)量為目的，市場上此類中藥不少，但普遍存在療效不確切，有效率低的問題。
[0004]L 型氨基酸轉(zhuǎn)運體 I (L-type amino acid transporter 1，LAT1)是近年發(fā)現(xiàn)的一種在癌細胞(包括腎癌，前列腺癌，膀胱癌，大腸癌，胃癌，乳腺癌，胰腺癌，肺癌等)表面特異性高表達的藥物跨膜轉(zhuǎn)運蛋白質(zhì)。研究顯示，LATl功能主要是向癌細胞內(nèi)運送蛋白質(zhì)合成所需要的必需氨基酸，為癌細胞的過度分裂增殖提供充足的“營養(yǎng)供給”，對癌細胞的快速增殖起著重要的作用。因此，某種藥物如果能夠抑制LATl的表達，就可以在一定程度上治療抑制癌細胞的生長，這種藥物具有成為抗癌藥物的前景。
[0005]在篩選治療宮頸癌的藥物的過程中，皂苷類物質(zhì)由于植物來源豐富，容易獲取，療效好，且不良反應(yīng)較低，一度成為人們關(guān)注的目標。人參為五加科人參屬草本植物人參的干燥根，人參的主要成分為人參皂苷，人參皂苷單體化合物具有抗腫瘤，抗疲勞，抗衰老等功效。人參皂苷Rbl和Rgl在天然植物中含量較高，而Rg3、Rh2、compand K等含量較少。許多藥理研究表明，稀有人參皂苷(如Rhl、Rh2、Rg3、Rb3等)藥效更為珍貴，在某些難治性疾病如腫瘤治療方面顯示獨特的療效，因此，對人參進行加工處理，增加人參稀有皂苷的含量，同時篩選藥物組方配伍，形成一個有效的抗癌方劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員研究的關(guān)鍵。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種抗肺癌組合物及其應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明所述的一種抗肺癌組合物，其特征在于，由人參，仙茅，石見川，瓜萎皮，淫羊藿組成，其中，所述人參為160-200份，仙茅為15-30份，石見川為30-80份，瓜萎皮為60-100份，淫羊藿80-120份。
[0008]進一步的，人參為180-195份，仙茅為18_28份，石見川為48_75份，瓜萎皮為80-90份，淫羊藿85-110份。
[0009]進一步的，所述人參經(jīng)過如下方法加工:將人參原材料粉碎20-40目，用人參原料50%-70%重量的水濕潤，噴入人參原料5-20%重量的米根霉菌菌液，在25-30°C條件下有氧發(fā)酵24-72小時，得到生物轉(zhuǎn)化人參。
[0010]進一步的，所述的人參為鮮人參、干人參、紅參中的任一種或幾種。[0011]進一步的，一種抗肺癌組合物和藥學(xué)上可接受的載體組成。
[0012]所說的藥學(xué)中可以接受的輔助性成分，可包括例如在片劑、丸劑、顆粒劑、膠囊劑或適當(dāng)形式的緩釋劑型等固體制劑形式口服藥物制劑中可以接受和使用的填充劑:如淀粉、糊精、糖粉、預(yù)膠化淀粉、乳糖、葡萄糖、碳酸鈣等；黏合劑:如羥丙甲纖維素、聚維酮、淀粉漿、糊精漿、糖漿、膠漿、阿拉伯膠等；賦形劑、潤滑劑:如硬脂酸鎂、硬脂酸鈉、滑石粉、微粉硅膠、液體石蠟、聚乙二醇等；軟膠囊劑中的基質(zhì):如植物油、聚乙二醇等；抗氧化劑:如亞硫酸鈉、抗壞血酸、半胱氨酸、維生素E等；在口服緩控釋制劑中的阻滯劑:如蜂蠟、巴西棕櫚蠟、氫化植物油、硬脂酸、聚維酮、乙基纖維素等；在注射制劑中允許使用的溶劑、助溶劑、穩(wěn)定劑和附加劑等。經(jīng)相應(yīng)的制劑方法和過程，即可制備得到相應(yīng)的口服或注射制劑形式的藥物。在栓劑中使用的基質(zhì):如可可豆脂、半合成甘油脂肪酸酯類、香果脂、氫化油等；水溶性及親水性基質(zhì):如甘油明膠、聚乙二醇、吐溫-61、硬脂酸聚烴氧(40)酯、水溶性殼聚糖、泊洛沙姆等；吸收阻滯劑:如大豆卵磷脂、海藻酸、羥丙基甲級纖維素、硬脂酸、蜂蠟等；在軟膏中使用可藥用輔料或賦形劑，如黏合劑:如預(yù)膠化淀粉、羥丙基纖維素等、填料:如乳糖、蔗糖、甘露醇等；潤滑劑:如硬脂酸、聚乙二醇、硬脂酸鎂、滑石粉、二氧化硅等、崩解劑:如淀粉、竣甲基纖維素納；潤滑劑:如十二烷基硫酸納等。
[0013]其中，口服制劑優(yōu)選為片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、滴丸、軟膠囊、懸浮液、溶液、糖漿、納米乳、脂質(zhì)體；注射制劑優(yōu)選凍干粉針、靜脈乳劑、脂質(zhì)體、納米乳；外用制劑優(yōu)選栓劑、軟膏。
[0014]本發(fā)明還提供了上述組合物在制備抗肺癌藥物中的應(yīng)用。
[0015]其中，抗肺癌藥物優(yōu)選為用于肺癌的含有人參的組合物。
[0016]本發(fā)明所述的藥物制備方法為:將前述的原料按相應(yīng)的重量配比混合，先用清水清洗除雜，然后將其用等質(zhì)量的30-50°C的溫水浸泡l_3h，然后，加入原料重量3-5倍的水，在75-90°C提取3-5次，冷卻過濾后，在65°C以下濃縮成為與原料等質(zhì)量的流浸膏狀，搖勻密封，至于陰涼通風(fēng)處保存。上述浸膏可直接作藥用，也可用于如動物抗癌模型試驗。
[0017]本發(fā)明的有益效果在于:1、通過實驗驗證，組合物有高效的抗癌效果。2、組合物的抗癌機制很可能是由于藥物中的有效成分抑制了 L型氨基酸轉(zhuǎn)運體I的轉(zhuǎn)運功能，從而達到良好的抗癌效果。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0018]圖1為不同濃度抗肺癌組合物對肺癌細胞H1975體外生長的抑制率。
【具體實施方式】
[0019]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步詳細說明，給出的實施例僅為了闡明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。
[0020]下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法；下述實施例中所用的試驗材料，如無特殊說明，均為自常規(guī)生化試劑商店購買得到的；下述實施例中的米根霉(根霉菌Rhizopus oryzae)購自中國普通微生物菌種保藏管理中心，菌株保藏編號:cgmcc3.6919,原始編號:3.851。
[0021]實施例1:中藥組合物由下述原料按重量配比為:人參為200克，仙茅為30克，石見川為30克，瓜萎皮為60克，淫羊藿80克。
[0022]人參原材料粉碎20-40目，其中，所述的人參為鮮人參,用人參原料50%重量的水濕潤，噴入人參原料5%重量的米根霉菌菌液，在25-30°C條件下有氧發(fā)酵24小時，得到生物轉(zhuǎn)化人參。
[0023]制備方法為:先用清水清洗除雜，然后將其用等質(zhì)量的50°C的溫水浸泡lh，然后，加入原料重量5倍的水，在75°C提取3次，冷卻過濾后，在65°C以下濃縮成為與原料等質(zhì)量的流浸膏狀，得到抗肺癌組合物I號。
[0024]實施例2:
中藥組合物由下述原料按重量配比為:人參為160克，仙茅為15克，石見川為80克，瓜萎皮為100克，淫羊藿120克。
[0025]人參原材料粉碎20-40目，人參為干人參與紅參混合物，重量比為1:1，用人參原料70%重量的水濕潤，噴入人參原料20%重量的米根霉菌菌液，在25-30°C條件下有氧發(fā)酵72小時，得到生物轉(zhuǎn)化人參。
[0026]制備方法為:將前述的原料按相應(yīng)的重量配比混合，先用清水清洗除雜，然后將其用等質(zhì)量的30°C的溫水浸泡3h，然后，加入原料重量3倍的水，在80°C提取5次，冷卻過濾后，在65°C以下濃縮成為與原料等質(zhì)量的流浸膏狀，得到抗肺癌組合物2號。
[0027]實施例3:
中藥組合物由下述原料按重量配比為:人參為195克，仙茅為28克，石見川為48克，瓜萎皮為80克，淫羊藿85克。
[0028]人參原材料粉碎20-40目，所述人參為紅參，用人參原料67%重量的水濕潤，噴入人參原料17%重量的米根霉菌菌液，在25-30°C條件下有氧發(fā)酵38小時，得到生物轉(zhuǎn)化人參。
[0029]制備方法為:先用清水清洗除雜，然后將其用等質(zhì)量的44°C的溫水浸泡2.5h，然后，加入原料重量4倍的水，在90°C提取4次，冷卻過濾后，在65°C以下濃縮成為與原料等質(zhì)量的流浸膏狀，搖勻密封，得到抗肺癌組合物3號。
[0030]實施例4:
在本實施例中，通過實驗證明了抗肺癌組合物3號在治療肺癌方面具有良好的效果。
[0031]1.材料與方法
1.1受試藥品 抗肺癌組合物3號
1.2細胞株:
非小細胞肺癌細胞H1975。
[0032]1.3主要試劑
DMEM、RPMI1640、F12K、McCoy’ s 5A培養(yǎng)基購自Hycelone公司和中科邁晨(北京)科技有限公司，胎牛血清(FBS)、胰酶購自Gibco公司，PBS粉末購自Sigma公司，100X青鏈霉素溶液購自北京索萊寶科技有限公司，MTS —步法細胞活力檢測試劑盒(Promega)。
[0033]1.4 儀器
Zenyth 1100多功能掃描儀:奧地利Anthos公司出品；IC 1000 Countstar全自動細胞計數(shù)儀:上海睿鈺生物科技有限公司；HFsafe生物安全柜:力康生物醫(yī)療科技控股有限公司；HERAcell 150i CO2培養(yǎng)箱:Thermo Scientific公司；LD5_2A低速離心機:北京醫(yī)用離心機廠。
[0034]1.5實驗方法
1.5.1人癌細胞的體外培養(yǎng)與鋪板
上述人源癌細胞用含10%FBS和青鏈霉素的DMEM/RPMI1640/F12K/McCoy’ S 5A培養(yǎng)基于37°C、5%C02、95%飽和濕度的培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)、傳代，待細胞生長至融合、于超凈臺內(nèi)用胰酶將貼壁細胞進行消化，以培養(yǎng)基混懸成104~105cells/ml的細胞懸液，鋪于96孔板，每孔鋪細胞懸液100μΙ，繼續(xù)培養(yǎng)24 h。
[0035]1.5.2藥物配制與96孔板投藥
1.5.2.1抗肺癌組合物3號
精密稱取抗肺癌組合物3號600mg，以IOml的DPBS溶解后離心12000rpm 40min,取上清液經(jīng)0.22Mffl的微孔濾膜除菌過濾后再以培養(yǎng)基逐級稀釋成逐級稀釋成30、15、7.5、
3.75、1.875,0.94,0.47mg/ml的溶液，投于96孔板，每孔50μ1，使孔內(nèi)的終濃度分別為10、
5、2.5、1.25,0.63,0.31和0.15mg/kg,對照孔投與同體積的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)48 h。
[0036]1.5.3 MTT 測定
投藥48 h后將MTS —步法細胞活力檢測試劑盒中的試劑，每孔加入20 μ I，放入CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)1-3h，應(yīng)用熒光掃描儀在492nm處測定每孔的OD值，對每孔的存活細胞產(chǎn)生的可溶性甲瓚的顏色進行測定。
[0037]1.5.4結(jié)果計算
根據(jù)每孔的OD值，按下列公式計算對細胞生長的抑制率:
抑制率(％)=(對照組平均OD值-給藥組平均OD值)/對照組平均OD值X 100%
2.結(jié)果
2.1抗肺癌組合物3號對癌細胞的體外生長抑制作用
試驗結(jié)果可見，非小細胞肺癌細胞H1975在體外生長過程中受到不同程度的抑制，抑制率約43.37% ( ±15.83)以上。抗肺癌組合物3號的抑制濃度為0.15~10mg/ml，H1975可見3個濃度以上的劑量依賴關(guān)系(見表1)。
[0038]3.結(jié)論
抗肺癌組合物3號對人源癌細胞系的體外生長具有一定抑制作用。
[0039]表1抗肺癌組合物3號對肺癌細胞的體外生長抑制作用
【權(quán)利要求】
1.一種抗肺癌組合物，其特征在于，由人參，仙茅，石見川，瓜萎皮，淫羊藿組成，其中，所述人參為160-200份，仙茅為15-30份，石見川為30-80份，瓜萎皮為60-100份，淫羊藿80-120 份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗肺癌組合物，其特征在于，所述人參為180-195份，仙茅為18-28份，石見川為48-75份，瓜萎皮為80-90份，淫羊藿85-110份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種抗肺癌組合物，其特征在于，所述人參經(jīng)過如下方法加工:將人參原材料粉碎20-40目，用人參原料50%-70%重量的水濕潤，噴入人參原料5-20%重量的米根霉菌菌液，在25-30°C條件下有氧發(fā)酵24-72小時，得到生物轉(zhuǎn)化人參。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項所述的一種抗肺癌組合物，其特征在于，所述的人參為鮮人參、干人參、紅參中的任一種或幾種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項所述的一種抗肺癌組合物，其特征在于和藥學(xué)上可接受的載體組成。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項所述的一種抗肺癌組合物，其特征在于，口服制劑可以為片劑、膠囊劑、丸劑、顆粒劑、滴丸、軟膠囊、懸浮液、溶液、糖漿、納米乳、脂質(zhì)體。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-3任意一項所述的一種抗肺癌組合物，其特征在于注射用制劑可以為凍干粉針、注射用靜脈乳劑、注射劑、脂質(zhì)體、納米乳、輸液；外用制劑可以為栓劑、軟膏。
8.—種如權(quán)利 要求1所述的抗肺癌組合物作為有效成分在治療抗肺癌藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61K36/88GK104000965SQ201410239263
【公開日】2014年8月27日 申請日期:2014年5月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月30日
【發(fā)明者】金鑫 申請人:金鑫