本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及一種促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)的乳化組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
脫發(fā)是目前困擾現(xiàn)代人的一大難題。頭發(fā)對(duì)良好的自我形成十分重要，尤其是年輕人，比起老年人脫發(fā)，年輕人脫發(fā)更容易導(dǎo)致自信心喪失。脫發(fā)的誘因很多，從病因角度分類(lèi)，主要包括雄激素性脫發(fā)、病理性脫發(fā)、化學(xué)性脫發(fā)、物理性脫發(fā)、營(yíng)養(yǎng)性脫發(fā)、肥胖性脫發(fā)、遺傳性脫發(fā)、神經(jīng)性脫發(fā)等。
雄激素性脫發(fā)(androgeneticalopecia，aga)是最為常見(jiàn)的脫發(fā)類(lèi)型。aga是一種發(fā)生于青春期和青春期后的毛發(fā)進(jìn)行性減少性疾病，從外觀上看主要是前額部和頭頂部的頭發(fā)軟毛化而變細(xì)變短，最終額頭的發(fā)際線后退而頭頂部的頭發(fā)消失。aga的關(guān)鍵性特征是頭發(fā)毛囊生長(zhǎng)期縮短并伴有終端頭發(fā)毛囊小型化。國(guó)內(nèi)最新流行病學(xué)調(diào)查顯示，本病在我國(guó)的總體患病率達(dá)到21.3％，并且所有研究都表明發(fā)病率隨著年齡增長(zhǎng)而逐漸增加。
aga的常見(jiàn)治療方法包括藥物治療與非藥物治療，如5-α還原酶抑制劑、富含血小板血漿和頭發(fā)移植等。目前較為公認(rèn)aga與雄激素、雄激素受體及雄激素代謝相關(guān)酶密切相關(guān)。最為常用的藥物有非那雄胺、米諾地爾等。非那雄胺是特異性的2型5α-還原酶抑制劑，可阻礙睪酮向雙氫睪酮轉(zhuǎn)化，從而降低血清及組織中雙氫睪酮濃度。非那雄胺通過(guò)使患者頭皮及血清中雙氫睪酮的濃度下降，抑制毛囊變小，促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)，逆轉(zhuǎn)脫發(fā)過(guò)程。但是該類(lèi)藥物長(zhǎng)期服用有較為明顯副作用，如男性呈現(xiàn)部分女性化的特征(如乳腺發(fā)育等)、性欲減退等。米諾地爾是近年來(lái)普遍公認(rèn)的對(duì)脫發(fā)有明顯療效的外用化學(xué)藥，其促進(jìn)頭發(fā)生長(zhǎng)的作用機(jī)理為擴(kuò)張血管和增加真皮乳頭血流量，促進(jìn)毛囊上皮細(xì)胞的增殖和分化，作用于毛發(fā)周期，延長(zhǎng)毛發(fā)生長(zhǎng)期、縮短休止期，推遲退行期?？诜字Z地爾可以引發(fā)全身性反應(yīng)，包括多毛癥和心血管反應(yīng)，局部外用含米諾地爾的各種溶液是最佳選擇。已有充分的臨床試驗(yàn)證實(shí)米諾地爾對(duì)aga有較好的療效，但需長(zhǎng)期用藥維持療效。由于米諾地爾在水中的溶解度很小，目前市售產(chǎn)品常包含較高濃度的乙醇或丙二醇，頻繁使用易導(dǎo)致頭屑增加、頭皮瘙癢、皮膚紅腫干燥、過(guò)敏性皮炎等不良反應(yīng)，阻礙患者長(zhǎng)期使用。
近年來(lái)，植物提取物也成為防治脫發(fā)藥物的開(kāi)發(fā)熱點(diǎn)。例如，有研究表明，表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯可能通過(guò)選擇性抑制5-α還原酶活性有助于預(yù)防或治療aga。此外，已有研究證實(shí)齊墩果酸、甘草酸、槲皮素、黃芩素、姜黃素等都可促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)。
但是，目前尚且沒(méi)有關(guān)于米諾地爾與植物提取物等聯(lián)合使用促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)的報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為了克服目前防治脫發(fā)存在的問(wèn)題和不足以及現(xiàn)有制劑產(chǎn)生的不良反應(yīng)，本發(fā)明提供了一種促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)的乳化組合物，并進(jìn)一步提供了制備所述乳化組合物的方法。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，將米諾地爾與植物提取物姜黃素以及抗真菌藥酮康唑聯(lián)合使用時(shí)，對(duì)毛發(fā)生長(zhǎng)產(chǎn)生協(xié)同增效作用，將所述有效成分制成穩(wěn)定的乳化組合物更便于患者使用。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
一種促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)的乳化組合物，其有效成分為米諾地爾、酮康唑和姜黃素的組合。
在一個(gè)實(shí)施方案中，米諾地爾、姜黃素和酮康唑的質(zhì)量比為1-5∶1-10∶1-6，優(yōu)選的質(zhì)量比為1-3∶2-8∶1-5，尤其優(yōu)選的質(zhì)量比為1-2∶2-6∶1-4，更優(yōu)選的質(zhì)量比為1-2∶2-4∶1-3，具體地，可以為1∶3∶2，2∶4∶1，1∶2∶1。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述有效成分占乳化組合物的含量為8-20％(重量)，優(yōu)選8-15％，更優(yōu)選8％-12％，具體地，可以為8％，9％，12％，15％，20％。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述乳化組合物還包含10-20％的油相基質(zhì)，20％-40％的助溶劑，4％-10％的乳化劑，0.05％-0.2％的防腐劑，且ph值為6.5-7.5。
其中，所述油相基質(zhì)選自植物油、中鏈脂肪酸三甘油酯、長(zhǎng)鏈脂肪酸三甘油酯或油酸乙酯。
所述助溶劑選自甲醇、乙醇、丙二醇、甘油或聚乙二醇類(lèi)。
所述乳化劑選自油酸鈉、硬脂酸鈉、脂肪酸山梨坦類(lèi)，泊洛沙姆類(lèi)，蔗糖脂肪酸類(lèi)、聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯、聚氧乙烯固化蓖麻油等。
所述防腐劑選自苯扎氯銨，山梨酸鉀，苯甲酸鈉，尼泊金甲酯或者尼泊金乙酯。
適當(dāng)時(shí)，可使用ph調(diào)節(jié)劑使得ph范圍在6.5-7.5之間。所述ph調(diào)節(jié)劑是呈酸性或者呈堿性的ph調(diào)節(jié)劑，或者二者的組合；所述呈酸性的ph調(diào)節(jié)劑選自鹽酸、磷酸、硝酸、乳酸、乙酸、枸櫞酸、酒石酸等或其組合；所述呈堿性的ph調(diào)節(jié)劑選自氫氧化鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鉀、磷酸鈉、磷酸鉀等或其組合。
在一個(gè)實(shí)施方案中，所述油相基質(zhì)為大豆油或者油酸乙酯，所述助溶劑為乙醇、甘油或者聚乙二醇200中一種或多種，所述乳化劑選自吐溫80或者聚氧乙烯固化蓖麻油中的一種或者兩種組合，所述防腐劑選自苯扎氯銨、苯甲酸鈉或者尼泊金甲酯中的一種或多種。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述乳化組合物包含8％-12％的有效成分，10％-20％的油酸乙酯，3％-5％的乙醇，5％-15％的甘油，10-20％的聚乙二醇200，4％-5％的吐溫80，4％-6％的聚氧乙烯固化蓖麻油，0.1％-0.15％的苯扎氯銨，且ph值為6.5-7.5。
本發(fā)明的另一目的還在于提供一種所述乳化物的制備方法，所述制備方法包括如下步驟：
a)將米諾地爾、酮康唑和姜黃素按質(zhì)量比混勻后粉碎，過(guò)篩備用；
b)將乙醇、甘油和聚乙二醇200按處方量混合后，按處方量加入步驟a所得藥粉，攪拌均勻至充分溶解，備用；
c)將吐溫80、苯扎氯銨按處方量和水一起研磨均勻得水相；
d)按處方量將聚氧乙烯固化蓖麻油溶解于油酸乙酯中得油相；
e)將油相加入到水相中在研缽中進(jìn)行研磨，研磨均勻后，加入步驟b制備得到的溶液加入到研缽中，調(diào)節(jié)ph至6.5-7.5，繼續(xù)研磨均勻，隨后使用超聲波乳化裝置二次乳化，乳化充分后即得所述乳化組合物。
本發(fā)明的另一目的還在于提供一種所述乳化組合物的用途，其用于制備治療雄激素性脫發(fā)的藥物。
有益效果
本發(fā)明的乳化組合物以米諾地爾、酮康唑和姜黃素組合作為有效成分。在研究的過(guò)程中，本發(fā)明人驚訝地發(fā)現(xiàn)，與其它已知具有促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)的植物提取物(如齊墩果酸、egcg)相比，米諾地爾與姜黃素組合對(duì)毛發(fā)生長(zhǎng)的促進(jìn)作用更為顯著，而且在加入酮康唑之后呈現(xiàn)出協(xié)同增效的促進(jìn)作用，這是現(xiàn)有技術(shù)中從未報(bào)道過(guò)的。而且，本發(fā)明將所述有效成分制備成乳化物，盡可能少地使用乙醇并以刺激性更低的甘油和聚乙二醇200替代常規(guī)溶劑丙二醇增強(qiáng)米諾地爾的溶解性，有效地避免由丙二醇導(dǎo)致的刺激性以及如頭屑、皮膚瘙癢紅腫等局部皮膚反應(yīng)。同時(shí)，所述乳化組合物的ph值維持在弱酸性至中性的范圍，可以更進(jìn)一步地減少對(duì)皮膚的刺激性。本發(fā)明制備得到的乳化組合物具有更佳的穩(wěn)定性，長(zhǎng)期保存不會(huì)引起分層或者有效成分的析出，便于患者使用和保存。
具體實(shí)施方式
在下文中更詳細(xì)地描述了本發(fā)明以有助于對(duì)本發(fā)明的理解。
應(yīng)當(dāng)理解的是，在說(shuō)明書(shū)和權(quán)利要求書(shū)中使用的術(shù)語(yǔ)或詞語(yǔ)不應(yīng)當(dāng)理解為具有在字典中限定的含義，而應(yīng)理解為在以下原則的基礎(chǔ)上具有與其在本發(fā)明上下文中的含義一致的含義：術(shù)語(yǔ)的概念可以適當(dāng)?shù)赜砂l(fā)明人為了對(duì)本發(fā)明的最佳說(shuō)明而限定。
試驗(yàn)例1：對(duì)aga治療作用的大鼠篩選試驗(yàn)
1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
選取42只雄性wistar大鼠，6周齡左右，體重在190-210g之間。將所有大鼠置于溫濕度適宜的動(dòng)物房中飼養(yǎng)，每日通風(fēng)1-2次，每次1小時(shí)。每日保證各12小時(shí)白天和黑夜交替，同時(shí)保持安靜并避免其他干擾。保證大鼠有足夠的活動(dòng)空間。給予大鼠維持飼料進(jìn)行喂養(yǎng)，采用市政自來(lái)水作為大鼠飲用水，飲水不受限制。所有大鼠先進(jìn)行2周的適應(yīng)性飼養(yǎng)后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。
1.2動(dòng)物分組
將42只大鼠隨機(jī)分為7組，分別為組1：空白對(duì)照組6只；組2：模型組6只；組3：米諾地爾組6只；組4：米諾地爾+齊墩果酸(1∶2)組6只；組5：米諾地爾+egcg(1∶2)組6只；組6：米諾地爾+姜黃素(1∶2)組6只；組7：米諾地爾+姜黃素+酮康唑(1∶2∶1)組6只。各組之間的動(dòng)物在體重、周齡、全身狀態(tài)等方面無(wú)顯著性差異。
1.3實(shí)驗(yàn)藥物
將實(shí)驗(yàn)藥物溶于乙醇、甘油和水(4∶4∶2)組成的溶劑中，制成10％的外用甘油制劑。
1.4造模
除空白對(duì)照組之外，所有大鼠每天于背部皮下注射劑量為5mg/kg/日的丙酸睪丸酮1次，持續(xù)8周，空白對(duì)照組在大鼠背部相同部位皮下注射等量生理鹽水。連續(xù)皮下注射丙酸睪丸酮3周后，觀察所有注射造模藥物的大鼠，背部皮毛均開(kāi)始毛色變灰，且容易斷裂。4周后開(kāi)始出現(xiàn)毛發(fā)脫落，造模動(dòng)物脫毛區(qū)皮毛更為稀疏，纖細(xì)，易斷。表明造模成功。
1.5給藥
從實(shí)驗(yàn)開(kāi)始第2天起，對(duì)組3-7使用實(shí)驗(yàn)用甘油制劑進(jìn)行治療，組1和組2不給藥。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，除了組1皮下注射生理鹽水之外，其余各組持續(xù)皮下注射丙酸睪丸酮，維持大鼠體內(nèi)的雄激素水平。
1.6實(shí)驗(yàn)動(dòng)物觀察
1.6.1一般狀態(tài)觀察
每天觀察各組大鼠的脫毛程度，并觀察藥物涂抹區(qū)是否出現(xiàn)紅腫、滲液等皮膚局部反應(yīng)。
1.6.2制備皮膚組織切片
實(shí)驗(yàn)8周后，選取各組大鼠背部脫毛區(qū)，平行脊柱取材，選取面積約為3×2cm2，每只大鼠取三塊面積基本相同的皮膚組織切片。按照常規(guī)皮膚組織病理過(guò)程制作標(biāo)本，石蠟包埋、切片，he染色，在顯微鏡下觀察大鼠鼠毛囊形態(tài)學(xué)變化并計(jì)數(shù)視野內(nèi)的毛囊總數(shù)，取三塊切片的平均值，進(jìn)行相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)以x±sd表示。當(dāng)p＜0.05時(shí)，差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
1.7實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1.7.1肉眼觀察大鼠毛發(fā)脫落情況
表1、肉眼觀察各組大鼠毛發(fā)脫落情況
從表1列出的肉眼觀察結(jié)果可以看出，米諾地爾+齊墩果酸(1∶2)組和米諾地爾+egcg(1∶2)組相較于米諾地爾單用組，有一定改善脫發(fā)的作用，但是相較于米諾地爾+姜黃素(1∶2)組，效果較差。米諾地爾+姜黃素+酮康唑(1∶2∶1)組改善脫發(fā)的效果明顯優(yōu)于其他各組，與空白對(duì)照組大鼠的毛發(fā)情況最為接近。各組的藥物涂抹區(qū)均未出現(xiàn)紅腫、滲液等皮膚局部反應(yīng)。
1.7.2切片毛囊觀察與毛囊計(jì)數(shù)
觀察皮膚毛囊的橫斷面情況，空白對(duì)照組中毛囊密度最高，造模組中視野內(nèi)可見(jiàn)毛囊明顯減少，其它各組較空白對(duì)照組均有不同程度的減少，而且各組之間毛囊密度可見(jiàn)明顯差異，組7＞組6＞組5≈組4＞組3。
表2、各組毛囊計(jì)數(shù)情況比較
注：*與空白對(duì)照組相比，p＜0.05；#與造模組相比，p＜0.05，；$與米諾地爾+姜黃素+酮康唑(1∶2∶1)組相比，p＜0.05。
從表2可以看出，米諾地爾與齊墩果酸、egcg、姜黃素聯(lián)合使用時(shí)促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)的作用優(yōu)于單用米諾地爾，其中米諾地爾與姜黃素聯(lián)合使用時(shí)效果最好，在米諾地爾與姜黃素聯(lián)用時(shí)加入抗真菌藥酮康唑后，促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)的作用有顯著性增強(qiáng)(p＜0.05)。上述結(jié)果表明米諾地爾+姜黃素+酮康唑在促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)、防止脫發(fā)方面取得了協(xié)同增效的作用。
試驗(yàn)例2：對(duì)aga治療作用的停藥試驗(yàn)
按照試驗(yàn)例1的方法及分組進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)，在給藥8周后各組停止給藥，但繼續(xù)注射丙酸睪丸酮；各組停藥3周后，按照試驗(yàn)例1中1.6.2部分內(nèi)容制備皮膚組織切片，對(duì)毛囊總數(shù)計(jì)數(shù)，以考察停藥后的大鼠毛發(fā)生長(zhǎng)情況，具體結(jié)果如下：
表3、各組毛囊計(jì)數(shù)情況比較
注：*與空白對(duì)照組相比，p＜0.05；#與造模組相比，p＜0.05，；$與米諾地爾+姜黃素+酮康唑(1∶2∶1)組相比，p＜0.05。
實(shí)施例1
一種促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)的乳化組合物包含10％的有效成分，20％的油酸乙酯，3％的乙醇，10％的甘油，20％的聚乙二醇200，4％的吐溫80，4％的聚氧乙烯固化蓖麻油，0.1％的苯扎氯銨，且ph值為6.8，其中有效成分中米諾地爾、姜黃素和酮康唑的質(zhì)量比為1∶2∶1；
制備方法包括以下步驟：
a)將米諾地爾、酮康唑和姜黃素按質(zhì)量比混勻后粉碎，過(guò)篩備用；
b)將乙醇、甘油和聚乙二醇200按處方量混合后，按處方量加入步驟a所得藥粉，攪拌均勻至充分溶解，備用；
c)將吐溫80、苯扎氯銨按處方量和水一起研磨均勻得水相；
d)按處方量將聚氧乙烯固化蓖麻油溶解于油酸乙酯中得油相；
e)將油相加入到水相中在研缽中進(jìn)行研磨，研磨均勻后，加入步驟b制備得到的溶液加入到研缽中，調(diào)節(jié)ph至6.8，繼續(xù)研磨均勻，隨后使用超聲波乳化裝置二次乳化，乳化充分后即得所述乳化組合物。
實(shí)施例2
一種促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)的乳化組合物包含12％的有效成分，18％的油酸乙酯，5％的乙醇，12％的甘油，18％的聚乙二醇200，4％的吐溫80，5％的聚氧乙烯固化蓖麻油，0.1％的苯扎氯銨，且ph值為6.9，其中有效成分中米諾地爾、姜黃素和酮康唑的質(zhì)量比為1∶3∶2；
制備方法包括以下步驟：
a)將米諾地爾、酮康唑和姜黃素按質(zhì)量比混勻后粉碎，過(guò)篩備用；
b)將乙醇、甘油和聚乙二醇200按處方量混合后，按處方量加入步驟a所得藥粉，攪拌均勻至充分溶解，備用；
c)將吐溫80、苯扎氯銨按處方量和水一起研磨均勻得水相；
d)按處方量將聚氧乙烯固化蓖麻油溶解于油酸乙酯中得油相；
e)將油相加入到水相中在研缽中進(jìn)行研磨，研磨均勻后，加入步驟b制備得到的溶液加入到研缽中，調(diào)節(jié)ph至6.9，繼續(xù)研磨均勻，隨后使用超聲波乳化裝置二次乳化，乳化充分后即得所述乳化組合物。
實(shí)施例3
一種促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)的乳化組合物包含8％的有效成分，15％的油酸乙酯，4％的乙醇，15％的甘油，15％的聚乙二醇200，5％的吐溫80，4％的聚氧乙烯固化蓖麻油，0.1％的苯扎氯銨，且ph值為7.3，其中有效成分中米諾地爾、姜黃素和酮康唑的質(zhì)量比為2∶4∶1；
制備方法包括以下步驟：
a)將米諾地爾、酮康唑和姜黃素按質(zhì)量比混勻后粉碎，過(guò)篩備用；
b)將乙醇、甘油和聚乙二醇200按處方量混合后，按處方量加入步驟a所得藥粉，攪拌均勻至充分溶解，備用；
c)將吐溫80、苯扎氯銨按處方量和水一起研磨均勻得水相；
d)按處方量將聚氧乙烯固化蓖麻油溶解于油酸乙酯中得油相；
e)將油相加入到水相中在研缽中進(jìn)行研磨，研磨均勻后，加入步驟b制備得到的溶液加入到研缽中，調(diào)節(jié)ph至7.3，繼續(xù)研磨均勻，隨后使用超聲波乳化裝置二次乳化，乳化充分后即得所述乳化組合物。
試驗(yàn)例3：乳化組合物的穩(wěn)定性研究
2.1低溫試驗(yàn)
取實(shí)施例1的乳化組合物樣品，置于4℃冰箱內(nèi)48h，取出后置于40℃水浴鍋中水浴48h，重復(fù)循環(huán)3次后觀察乳劑外觀變化。
2.2凍融試驗(yàn)
取實(shí)施例1的乳化組合物樣品，置于-20℃冰箱內(nèi)48h，取出后置于40℃水浴鍋中水浴48h，重復(fù)循環(huán)3次后觀察乳劑外觀變化。
2.3加速穩(wěn)定性試驗(yàn)
取實(shí)施例1的乳化組合物樣品，置于40℃±2℃、rh75％±5％條件下6個(gè)月，于第0個(gè)月、1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月取樣，觀察其外觀顏色、性狀、測(cè)定其中米諾地爾的含量。
2.4長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)
取實(shí)施例1的乳化組合物樣品，置于25℃±2℃、rh60％±5％條件下6個(gè)月，于第0個(gè)月、3個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月、12個(gè)月取樣，觀察其外觀顏色、性狀、測(cè)定米諾地爾的含量。
2.5試驗(yàn)結(jié)果
2.5.1低溫和凍融試驗(yàn)結(jié)果
反復(fù)低溫或凍融后，實(shí)施例1的乳化組合物保持乳白色且均一無(wú)分層的外觀。
2.5.2加速穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果
表3、實(shí)施例1乳化組合物的加速穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果
2.5.3長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果
表4、實(shí)施例1乳化組合物的長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果
從以上穩(wěn)定性結(jié)果可以看出，本發(fā)明的乳化組合物在試驗(yàn)過(guò)程中保持良好的外觀性狀，雖然米諾地爾的含量略有降低，但是在規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)之內(nèi)?？梢?jiàn)，本發(fā)明的乳化組合物具有良好的穩(wěn)定性。
以上描述了本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方式，然其并非用以限定本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員對(duì)在此公開(kāi)的實(shí)施方案可進(jìn)行并不偏離本發(fā)明范疇和精神的改進(jìn)和變化。