本發(fā)明屬于藥物研發(fā)領(lǐng)域，具體地說，涉及一種青藤堿在制備治療光敏性皮炎藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

光敏性皮炎(photoallergicdermatitis)是比較常見的皮膚疾病，由陽光中的紫外線照射引起或者加重。光敏性皮炎患者多具有光過敏史，通常在日曬后1-2天發(fā)病，表現(xiàn)為面部、頸部和頸前“v形區(qū)”及上肢伸側(cè)小丘疹、水皰疹并自覺痛癢難耐，嚴(yán)重者可呈濕疹樣改變。光敏性皮炎根據(jù)病變的范圍可分為接觸性光敏性皮炎和系統(tǒng)性光敏性皮炎，如未能及時有效地治療可發(fā)展為慢性光敏性皮膚病。系統(tǒng)性光敏性皮炎是在接觸性皮炎的基礎(chǔ)上，又發(fā)生全身性“再暴露”而產(chǎn)生的系統(tǒng)過敏癥狀，不僅涉及皮膚炎癥，還可以伴有頭痛、關(guān)節(jié)痛、腹瀉及嘔吐等全身癥狀，并可引起血管炎癥樣損傷，這種情況雖然少見，但可以給患者造成嚴(yán)重后果，必須給予足夠重視。光敏性皮炎可以長期反復(fù)發(fā)作，不僅給患者帶來高昂的醫(yī)療費(fèi)用，并且嚴(yán)重影響他們的生活質(zhì)量。光敏性皮炎的本質(zhì)是光變態(tài)性反應(yīng)。近年來，光敏性皮炎在全世界發(fā)病率都呈上升趨勢，研究表明，光敏性皮炎的發(fā)病率與海拔呈正相關(guān)，與緯度呈負(fù)相關(guān)，云南省地處云貴高原，海拔高且緯度低，陽光中的紫外線強(qiáng)，其發(fā)病率高于國內(nèi)其它地區(qū)，而在云南省內(nèi)香格里拉地區(qū)發(fā)病率明顯高于元江、昆明等地區(qū)。

光變態(tài)性反應(yīng)是一個復(fù)合性的過程，涉及到固有免疫和獲得性免疫中多種細(xì)胞和分子間的相互作用。光變應(yīng)原(photosensitizer)是引起光敏性皮炎的始動因子，其吸收紫外光(uvaoruvb)的能量后形成光敏化物質(zhì)或者光敏化產(chǎn)物，并與大分子物質(zhì)(如蛋白質(zhì))結(jié)合形成半抗原－蛋白質(zhì)結(jié)合物，成為完整的抗原或新光過敏原(photoallergen)，它們啟動免疫系統(tǒng)損傷皮膚是形成光敏性皮炎的主要機(jī)制。日常生活中能夠引起光敏性皮炎的光變應(yīng)原種類繁多，很多食品和化學(xué)物品都可能成為光變應(yīng)原。受地理位置(日照)、生活習(xí)慣和勞動生產(chǎn)等因素的影響，各地光變應(yīng)原的種類和數(shù)目不完全相同。隨著社會發(fā)展和技術(shù)進(jìn)步，新的化合物不斷出現(xiàn)在人們的生活中，使光變應(yīng)原的種類也不斷發(fā)生變化，這些化合物在方便和豐富了人們生活的同時也大大增加了光敏性皮炎的風(fēng)險。

光敏性皮炎形成對皮膚的損害，胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素(thymicstromallymphopoietin，tslp)激活樹突狀細(xì)胞(dendriticcells,dcs)并誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞毒性t細(xì)胞(cytotoxict-lymphocyte,tcl)對皮膚的損傷是過敏性皮炎發(fā)生的重要機(jī)制，同時，我們在前期的研究中也發(fā)現(xiàn)光敏性皮炎形成后，tslp基因及蛋白表達(dá)明顯增加。tslp是一種四螺旋束結(jié)構(gòu)的細(xì)胞因子，有文獻(xiàn)報道tslp屬于il-2細(xì)胞因子家族i類細(xì)胞因子，也有報道稱其是一種新的il-7樣細(xì)胞因子，炎癥反應(yīng)時廣泛表達(dá)在肺、皮膚和內(nèi)臟的上皮細(xì)胞以及胸腺髓質(zhì)、粘膜淋巴結(jié)和扁桃體等組織，在過敏性皮炎的角質(zhì)化細(xì)胞內(nèi)存在過度表達(dá)。光敏性皮炎發(fā)生時，光過敏原刺激皮膚上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和肥大細(xì)胞等產(chǎn)生tslp。研究發(fā)現(xiàn)，小鼠tslp可以刺激早期b淋巴細(xì)胞和t淋巴細(xì)胞增殖和分化，但人的tslp只能刺激cd11c⁺dcs，不能激活其它抗原遞呈細(xì)胞、t淋巴細(xì)胞、b淋巴細(xì)胞和自然殺傷(naturalkiller,nk)細(xì)胞等發(fā)揮免疫學(xué)作用，這是因?yàn)槿祟惖腸d11c⁺dcs的il-7受體α(il-7rα)和tslp受體(tslpr)的mrna有一條共表達(dá)鏈，而其它類型的細(xì)胞沒有。tslp可與cd11c⁺dcs上的tslpr和il-7rα結(jié)合，但由tslp-tslpr復(fù)合物的親合力和穩(wěn)定性遠(yuǎn)比tslp－il-7rα大，因此在通常情況下，tslp主要通過tslpr激活cd11c⁺dcs。被激活的tslp-dcs表達(dá)ii型主要組織相容性復(fù)合物(mainhistocompatibilitycomplex，mhc-ii)和i型主要組織相容性復(fù)合物(mainhistocompatibilitycomplex，mhc-i)，并可同時激活cd4⁺和cd8⁺輔助t細(xì)胞介導(dǎo)的過敏性炎癥。cd8⁺t淋巴細(xì)胞在過敏性疾病的發(fā)病和惡化中的作用自從發(fā)現(xiàn)了特異抗原性cd8⁺t淋巴細(xì)胞后得到了極大的重視。tslp-dcs能夠使dcs生成cd40l誘導(dǎo)cd8⁺t淋巴細(xì)胞形成具有明顯細(xì)胞毒性的效應(yīng)性細(xì)胞毒性t淋巴細(xì)胞(cytotoxict-lymphocyte,tcl)，并且分泌高濃度的γ－干擾素(interferon-γ,inf-γ)、il-5和il-13的淋巴細(xì)胞。il-5和il-13在體外實(shí)驗(yàn)中均發(fā)現(xiàn)能誘導(dǎo)嗜酸性細(xì)胞增多并產(chǎn)生ige抗體發(fā)揮免疫學(xué)效應(yīng)。tslp-dcs通過mhc-ii激活cd4⁺t輔助淋巴細(xì)胞產(chǎn)生大量的inf-γ進(jìn)一步加強(qiáng)tcl的細(xì)胞毒性(見圖1)。tslp-dcs還能刺激cd8⁺t淋巴細(xì)胞產(chǎn)生2型細(xì)胞因子(type2cytokine)，它在過敏性炎癥反應(yīng)中是急性和慢性兩種免疫損傷的轉(zhuǎn)換開關(guān)，急性損傷性炎癥損傷時，它推動inf-γ升高；而在慢性損傷時則使tcl數(shù)量增加及細(xì)胞毒性增強(qiáng)。但是在過敏性皮炎中，2型細(xì)胞因子既能夠升高inf-γ的濃度也能增加tcl的數(shù)量及其細(xì)胞毒性，形成免疫損傷的惡性循環(huán)是過敏性皮炎造成嚴(yán)重的濕疹樣損傷的關(guān)鍵病因。在過敏性皮炎的炎癥反應(yīng)中出現(xiàn)的il-5、il-13和inf-γ除引起細(xì)胞毒性損傷外，還能放大并維持這種免疫反應(yīng)，引起組織損傷進(jìn)一步加重。

接觸性光敏性皮炎和系統(tǒng)性光敏性皮炎在病變范圍以及疾病的嚴(yán)重程度上有明顯差異，但是兩者發(fā)病及免疫損傷機(jī)制的差異目前沒有系統(tǒng)的研究資料。我們在前期研究中發(fā)現(xiàn)，無論是病理學(xué)分析還是tslp的表達(dá)量和表達(dá)范圍兩者都存在明顯差異，有必要進(jìn)一步研究明確青藤堿在兩種光敏性皮炎中通過抑制tslp-dcs誘導(dǎo)tcl細(xì)胞毒性作用環(huán)節(jié)及靶點(diǎn)上的差異，為青藤堿用于這兩種光敏性皮炎的治療提供理論指導(dǎo)。

目前對光敏性皮炎因沒有治療的特效藥物，主要以預(yù)防為主。敏感體質(zhì)或者有光過敏史以及接觸過可能引起光過敏物質(zhì)的人群要求5日內(nèi)盡量避免暴露于陽光中。對于輕癥患者，避免光照并用1％慶大霉素濕敷防感染發(fā)生，重癥患者應(yīng)局部或全身使用糖皮質(zhì)激素或口服組胺藥物緩解癥狀并進(jìn)行飲食控制。這些措施主要是對癥治療，缺乏對光敏性皮炎特效的治療手段。有研究報道，中藥雷公藤通過抑制淋巴細(xì)胞增殖及il-5的分泌對接觸性和系統(tǒng)性光敏性皮炎具有較好的療效。但是雷公藤化學(xué)成份復(fù)雜，具有較強(qiáng)的心、肝、腎及生殖系統(tǒng)毒性，而且影響其毒性大小的因素很多，包括入藥部位、生藥產(chǎn)地、炮制方法和用藥劑量等，給用藥安全帶來很大威脅。因此，有必要發(fā)掘新的可用于治療光敏性皮炎的藥物。

青風(fēng)藤是毛茛目防己科防己屬植物青藤(sinomeniumacutumrehd.)和毛青藤(s.acutumrehd.etwils)等植物的藤莖，6-7月收獲后除去細(xì)枝葉，曬干制成。青風(fēng)藤在云南又稱為黑防己、滇防己，為多年生木質(zhì)落葉藤本植物，分布較廣泛，主要分布于武定、巍山、南澗、漾濞和屏邊等地。該植物入藥，藥性苦、平、辛，歸肝、脾經(jīng)，主要功能為祛風(fēng)濕、通經(jīng)絡(luò)、利小便，用于風(fēng)濕性及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，四肢疼痛、麻木及損傷等，其主要活性成份有青藤堿、青風(fēng)藤堿、雙青風(fēng)藤堿、乙基青風(fēng)藤堿等。

青藤堿(sinomenine)系一種提取自青風(fēng)藤的異喹啉類生物堿植物活性單體，化學(xué)名morphinan-6-one,7,8-didehydro-4-hydroxy-3,7-dimethoxy-17-methy(9α,13α,14α)分子式：c19h23no4，分子量：329.38，化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖2，具有鎮(zhèn)痛、消炎、抗心率失常及免疫抑制等藥理作用廣泛應(yīng)用于臨床，目前市售的青藤堿藥品有鹽酸青藤堿(四川中方制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字hh51023711)及鹽酸青藤堿腸溶片(四川金山禪心制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字h51023564)等，臨床上常用于治療風(fēng)濕、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病^[34,35]。有研究者對青藤堿的毒副反應(yīng)作過研究，大鼠每天按100mg/kg(b.w.)的劑量連續(xù)灌胃6周后，觀察到大鼠血清gpt、got、bun及尿沉渣細(xì)胞無明顯變化。低劑量的青藤堿對精子活力無明顯影響，對肝臟有輕微的病理學(xué)改變，但停藥1周后，肝竇恢復(fù)正常，肝細(xì)胞胞質(zhì)充實(shí)，只有少數(shù)肝細(xì)胞有輕度水腫。結(jié)果表明，青藤堿毒副反應(yīng)較小，具有很好的用藥安全性。

近年關(guān)于青藤堿藥理學(xué)研究表明，青藤堿通過作用于抗原提呈細(xì)胞(樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞)和免疫效應(yīng)細(xì)胞等多個環(huán)節(jié)，對正常小鼠和大鼠的免疫功能具有明顯的抑制作用。它能夠降低血液中樹突狀細(xì)胞的tlr-2、tlr-4的蛋白及mrna的表達(dá)，通過抑制nf-κβ的磷酸化，阻滯tlrs-nf-κβ信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑介導(dǎo)的樹突狀細(xì)胞成熟及il-12的分泌，抗cd4⁺th1的過度激活。同時，青藤堿還能抑制樹突狀細(xì)胞的遷移和趨化，降低趨化受體分子ccr5、ccr7等的表達(dá)，減少cxcl9、cxcl10的分泌。在小鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭?，青藤堿的免疫抑制作用機(jī)制是抑制t細(xì)胞亞群，且主要抑制cd4⁺t細(xì)胞，使cd4⁺/cd8⁺t細(xì)胞比值下降并抑制th1細(xì)胞產(chǎn)生il-2。同時應(yīng)用青藤堿還可以明顯降低小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬功能，減輕小鼠免疫器官，如胸腺和脾臟的重量；引起小鼠血漿中cgmp/camp比值下降，可抑制補(bǔ)體激活介導(dǎo)的中性粒細(xì)胞聚集；抑制小鼠外周血t細(xì)胞的增殖。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

有鑒于此，本發(fā)明提供了一種青藤堿在制備治療光敏性皮炎藥物中的應(yīng)用。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明公開了一種青藤堿在制備治療光敏性皮炎藥物中的應(yīng)用。

進(jìn)一步地，該藥物的劑型為片劑、丸劑或口服液中的一種。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明可以獲得包括以下技術(shù)效果：

1)本發(fā)明藥物對光敏性皮炎具有明顯的治療作用；

2)本發(fā)明藥物相對于其它治療光敏性皮炎的藥物具有更低的毒性反應(yīng)；

3)本發(fā)明藥物對光敏性皮炎的治療作用與其降低tslp-dcs誘導(dǎo)t淋巴細(xì)胞毒性損傷密切相關(guān)。

當(dāng)然，實(shí)施本發(fā)明的任一產(chǎn)品并不一定需要同時達(dá)到以上所述的所有技術(shù)效果。

附圖說明

此處所說明的附圖用來提供對本發(fā)明的進(jìn)一步理解，構(gòu)成本發(fā)明的一部分，本發(fā)明的示意性實(shí)施例及其說明用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對本發(fā)明的不當(dāng)限定。在附圖中：

圖1是本發(fā)明背景技術(shù)中tslp-dcs誘導(dǎo)t淋巴細(xì)胞毒性損傷；注：光應(yīng)變原通過諸如tslp與其受體tslpr的“受體識別模式”激活dcs，隨后幼稚th在mhc、共刺激信號以及諸如il-5、il-13，il-2型細(xì)胞和inf-γ作用下產(chǎn)生特異的細(xì)胞毒性cd8⁺t淋巴細(xì)胞損傷病變部位的皮膚，同時分泌炎癥性細(xì)胞因子加劇損傷作用；

圖2是本發(fā)明青藤堿化學(xué)結(jié)構(gòu)；

圖3是本發(fā)明青藤堿對光敏性皮炎小鼠病理形態(tài)學(xué)的影響(×100)，其中，a代表接觸性光敏性皮炎對照組，b代表接觸性光敏性皮炎治療組，c代表系統(tǒng)性光敏性皮炎對照組，d代表系統(tǒng)性光敏性皮炎治療組，e代表正常對照組；

圖4是本發(fā)明青藤堿對光敏性皮炎tslp表達(dá)的影響(100×)，其中，a代表接觸性光敏性皮炎對照組，b代表接觸性光敏性皮炎治療組，c代表系統(tǒng)性光敏性皮炎對照組，d代表系統(tǒng)性光敏性皮炎治療組，e代表正常對照組；

圖5是本發(fā)明凝膠電泳檢測rna提取的完整性；

圖6是本發(fā)明內(nèi)參基因gapdhmrna擴(kuò)增曲線；

圖7是本發(fā)明各實(shí)驗(yàn)組tslpmrna表達(dá)的擴(kuò)增曲線；

圖8是本發(fā)明gapdh(左)和tslp(右)擴(kuò)增產(chǎn)物溶解曲線；

圖9是本發(fā)明westernblotting檢測各實(shí)驗(yàn)組tslp蛋白表達(dá)，從左到右分別為：空白對照組，系統(tǒng)性光敏性皮炎青藤堿治療組，接觸性光敏性皮炎青藤堿治療組，系統(tǒng)性光敏性皮炎雷公藤治療組，系統(tǒng)性光敏性皮炎雷公藤治療組和模型對照組。

具體實(shí)施方式

以下將配合實(shí)施例來詳細(xì)說明本發(fā)明的實(shí)施方式，藉此對本發(fā)明如何應(yīng)用技術(shù)手段來解決技術(shù)問題并達(dá)成技術(shù)功效的實(shí)現(xiàn)過程能充分理解并據(jù)以實(shí)施。

本發(fā)明公開了一種青藤堿在制備治療光敏性皮炎藥物中的應(yīng)用。

具體地，將青藤堿配合輔料制備成片劑、丸劑、口服液等等。

下面結(jié)合具體的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)來說明本發(fā)明的技術(shù)效果：

一、青藤堿治療光敏性皮炎對病理形態(tài)學(xué)及tslp表達(dá)的影響

一)實(shí)驗(yàn)方法：

1.動物及分組：balb/c小鼠24只，體重20±2g，雌雄各半，隨機(jī)分4組(接觸性光敏性皮炎對照組、接觸性光敏性皮炎治療組、系統(tǒng)性光敏性皮炎對照組和系統(tǒng)性光敏性皮炎治療組和正常對照組)，每組雌雄各3只。

2.復(fù)制接觸性光敏性皮炎：在誘導(dǎo)模型前3天每只小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺150mg/kg(b.w.)，每天1次。小鼠背部實(shí)驗(yàn)區(qū)脫毛，連續(xù)3天在實(shí)驗(yàn)區(qū)涂擦以丙酮稀釋的20％的6-甲基香豆素并給予uva10j/cm²和uvb45mj/cm²的劑量照射，完成第一次誘導(dǎo)。第一次誘導(dǎo)后7天，涂10％的6-甲基香豆素于實(shí)驗(yàn)區(qū)并給予uva10j/cm²和uvb45mj/cm²的劑量照射小鼠雙側(cè)耳背部進(jìn)行激發(fā)。

3.復(fù)制系統(tǒng)性光敏性皮炎：于誘導(dǎo)模型前2天每只小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺150mg/kg(b.w.)，每天1次。小鼠背部脫毛后，連續(xù)2天給各小鼠腹腔注射對氨基苯磺酸酰胺400mg/kg(b.w.)，隨后給予uva5j/cm²和uvb0.1mj/cm²的劑量照射小鼠脫毛部位誘導(dǎo)致敏。照射結(jié)束后于照射區(qū)四角皮內(nèi)注射福氏完全佐劑各0.1ml，完成第一次誘導(dǎo)。第一次誘導(dǎo)后5天，各小鼠腹腔注射對氨基苯磺酸酰胺400mg/kg(b.w.)，隨后給予uva5j/cm²照射小鼠雙耳進(jìn)行激發(fā)。

4.治療組每天灌胃30mg/kg(b.w.)青藤堿，對照組灌胃同體積的0.9％nacl溶液，連續(xù)治療30天。

5.治療結(jié)束后，測量耳腫度，取耳組織進(jìn)行病理切片，觀察各組動物皮膚組織炎性浸潤上的差異，抗tslp免疫組織化學(xué)染色觀察，明確tslp的表達(dá)與光敏性皮炎的關(guān)系以及青藤堿治療對tslp表達(dá)的影響。

二)結(jié)果：

1、青藤堿對光敏性皮炎小鼠耳腫度的影響

接觸性光敏性皮炎和系統(tǒng)性光敏性皮炎小鼠動物模型在激發(fā)后24h，明顯耳腫，48h未經(jīng)治療的模型組動物耳腫沒有明顯變化。青藤堿治療組動物耳腫度在激發(fā)后24h，48h與模型組動物比較，耳腫度都有明顯減輕(p<0.05)(表1)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但耳腫均未完全消除。

表1青藤堿對光敏性皮炎小鼠耳腫度的影響(n＝6)

注：^ap<0.05，與接觸性光敏性皮炎對照組比較；^bp<0.05，與系統(tǒng)性光敏性皮炎對照組比較。

2、青藤堿對光敏性皮炎小鼠病理形態(tài)學(xué)的影響

光敏性皮炎的病理形態(tài)學(xué)表現(xiàn)為真皮水腫并伴有大量的淋巴細(xì)胞浸潤，接觸性皮炎的淋巴細(xì)胞浸潤主要在真皮上層及表皮與真皮交界區(qū)(圖3a)，而系統(tǒng)性皮炎的淋巴細(xì)胞浸潤范圍較廣，皮膚全層均發(fā)現(xiàn)浸潤的淋巴細(xì)胞(圖3c)。經(jīng)青藤堿治療，組織水腫和淋巴細(xì)胞浸潤均顯著減輕(圖3b，3d)。

3、青藤堿對光敏性皮炎小鼠tslp蛋白表達(dá)的影響

抗tslp免疫組織化學(xué)染色顯示：不論接觸性光敏性皮炎還是系統(tǒng)性光敏性皮炎，tslp的表達(dá)量都明顯增加。接觸性光敏性炎tslp表達(dá)較為靠近表皮部位，而系統(tǒng)性光敏性皮炎tslp表達(dá)于皮膚較深層部位。經(jīng)青藤堿治療后兩者的表達(dá)量都明顯減少，染色較淺，但較正常對照組顏色較深，表明tslp表達(dá)未降至正常組水平(圖4)。

二、青藤堿治療光敏性皮炎對tslp基因及蛋白水平定量表達(dá)的影響：

一)實(shí)驗(yàn)方法：balb/c小鼠30只，體重：20±2g，雌雄各半，隨機(jī)分5組(正常照組、接觸性和系統(tǒng)性光敏性皮炎青藤堿治療組、系統(tǒng)性和接觸性光敏性皮炎雷公藤陽性對照組)，每組雌雄各3只。按前述方法，復(fù)制兩類光敏性皮炎疾病的動物模型，治療組用30mg/kg(b.w.)青藤堿，陽性對照組雷公藤劑量為10mg/kg，治療30天，取耳組織進(jìn)行前述方法進(jìn)行實(shí)時熒光定量pcr檢測各組tslpmrna表達(dá)的差異，westernblotting檢測tslp蛋白表達(dá)的差異。

二)結(jié)果：

1、各組tslpmrna表達(dá)的差異

實(shí)驗(yàn)提取的rna用普通凝膠電泳檢查其完整性。在紫外燈下，凝膠各點(diǎn)樣泳道顯示明亮清晰的18s、28s及稍顯影的5srrna帶，說明提取的rna完整(見圖5)。

耳組織中的內(nèi)參基因gaptslp目的基因gapdhmrna的擴(kuò)增曲線圖是由熒光定量pcr儀自動生成。擴(kuò)增曲線表明，熒光閾值小，擴(kuò)增體系良好，曲線拐點(diǎn)清楚，指數(shù)期明顯，且指數(shù)斜率較大，擴(kuò)增效率高(見圖6，7)。從溶解曲線圖上看，兩擴(kuò)增產(chǎn)物溶解峰單一，表明擴(kuò)增比較特異，無引物二聚體、單鏈二級結(jié)構(gòu)或錯誤擴(kuò)增產(chǎn)物等假陽性結(jié)果(見圖8)。

青藤堿對各實(shí)驗(yàn)組tslpmrna表達(dá)的影響:與空白對照組比較，接觸性光敏性皮炎及系統(tǒng)性光敏性皮炎模型對照組2^-δδct值明顯升高，有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p^a<0.05)；與上述兩種光敏性皮炎模型對照組比較，兩種光敏性皮炎治療組的tslpmrna均明顯降低，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p^b<0.05)，(見表2)。

表3青藤堿對各實(shí)驗(yàn)組tslpmrna表達(dá)的影響(2^-δδct)(n＝6)

注：與正常對照組比較，p^a<0.01，與模型對照組比較，p^b<0.01。

2、各組tslp蛋白表達(dá)的差異

兩種光敏性皮炎形成后，模型對照組耳組織內(nèi)tslp表達(dá)明顯升高，與正常對照組比較，p<0.05；30mg/kg的青藤堿和10mg/kg的雷公藤治療30天，均能明顯降低tslp的表達(dá)，與模型對照組比較，差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)(見圖9和表3)。

表4青藤堿對光敏性皮炎耳組織內(nèi)tslp蛋白表達(dá)的影響(灰度值掃描,n＝6)

^*p﹤0.05,與正常對照組比較.^▲p﹤0.05,與模型對照組比較.

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，tslp的表達(dá)量與光敏性皮炎的發(fā)生密切相關(guān)，皮炎形成后，tslpmrna及蛋白表達(dá)均明顯增加。青藤堿對接觸性光敏性皮炎和系統(tǒng)性光敏性皮炎小鼠模型的耳腫反應(yīng)有明顯的抑制作用，可減少耳腫度并改善其病理形態(tài)學(xué)表現(xiàn)，減少炎性細(xì)胞浸潤，抑制炎癥的發(fā)展，對光敏性皮炎有明顯的治療作用。青藤堿在治療光敏性皮炎中，對tslpmrna及蛋白表達(dá)均有明顯的抑制作用，提示其對光敏性皮炎的治療與抑制tslp通路調(diào)節(jié)的t淋巴激活的細(xì)胞毒性損傷密切相關(guān)，確切的調(diào)節(jié)機(jī)制還需進(jìn)一步研究以予闡明。

上述說明示出并描述了發(fā)明的若干優(yōu)選實(shí)施例，但如前所述，應(yīng)當(dāng)理解發(fā)明并非局限于本文所披露的形式，不應(yīng)看作是對其他實(shí)施例的排除，而可用于各種其他組合、修改和環(huán)境，并能夠在本文所述發(fā)明構(gòu)想范圍內(nèi)，通過上述教導(dǎo)或相關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)或知識進(jìn)行改動。而本領(lǐng)域人員所進(jìn)行的改動和變化不脫離發(fā)明的精神和范圍，則都應(yīng)在發(fā)明所附權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)。