本發(fā)明涉及植物活性組分提取領(lǐng)域，具體涉及一種利用表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法。
背景技術(shù)：
番石榴(psidiumguajava)為桃金娘科番石榴屬植物，原產(chǎn)于熱帶美洲，在我國福建、臺灣地區(qū)、廣東、廣西等地均有分布或栽培?，F(xiàn)代藥理研究表明番石榴葉具有明顯的降血糖、抗病毒，抗菌、止瀉、抗瘧等活性。近年來植物化學研究表明，番石榴葉中可提取的有效部位屬于總黃酮類化合物，具有很好的降糖、抗菌、活血化瘀的作用，因而具有很高的開發(fā)利用價值。
目前，傳統(tǒng)的番石榴葉黃酮提取方法有“水煎煮法”、“乙醇浸漬提取法”、“酶解法”“超臨界萃取”等。但是，傳統(tǒng)水煎法提取效率較低，而且高溫水煮容易導致部分活性物質(zhì)失活；采用醇提法，黃酮類成分提取率較高，但是乙醇消耗量大，回收率低，因此成本較高，且環(huán)境污染嚴重，產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)不可?。幻阜ㄌ崛∫竺妇哂懈叨葘Ｒ恍院蜆O高的活性、而且酶法容易受到酶的種類、用量、酶解時間、溫度等多種因素的影響，生產(chǎn)環(huán)節(jié)較難控制；超臨界萃取法雖然提取效率較高，但是在生產(chǎn)中存在投資過大，操作繁瑣等問題而限制了該方法在生產(chǎn)中的普及應(yīng)用。因此，開發(fā)一種能耗低、時間短、過程清潔、工藝簡單又高效，且易于工業(yè)化生產(chǎn)的番石榴葉黃酮提取方法顯得尤為重要。
微波輔助提取是利用微波的溫度效應(yīng)及電磁場效應(yīng)來提高植物活性物質(zhì)的提取率。微波能通過直接作用于物料分子，是整個物料同時被加熱，即“體加熱”，與普通加熱相比，更能達到能量充分利用的效果。微波輔助提取通過偶極離子旋轉(zhuǎn)和離子傳導兩種方式里外同時加熱，使細胞內(nèi)部溫度升高，壓力增大，當壓力超過細胞壁的承受能力時，細胞壁破裂，位于細胞內(nèi)部的黃酮化合物從細胞中釋放出來，被周圍的溶劑溶解，因此其熱量傳遞和質(zhì)量傳遞方向是一致的，這有助于黃酮類化合物的快速溶出。超聲波是一種彈性波，具有一系列的力學、熱學、電磁學和化學的超聲效應(yīng)、空化效應(yīng)、熱效應(yīng)和化學效應(yīng)等。超聲波的空化效應(yīng)促使溶劑更大程度地滲入細胞中，提高物質(zhì)的傳遞速度；而且它的次級效應(yīng)如機械效應(yīng)、機械振動、乳化、擴散、擊碎和化學效應(yīng)等可使細胞壁破裂而加速植物中黃酮化合物的擴散和釋放。表面活性劑是一類即使在濃度很低時也能顯著降低固-液相表(界)面張力的物質(zhì)。表面活性劑可以通過在表面或界面的吸附作用或在溶液中形成分子聚合體而改變黃酮化合物在水溶液中的溶解性，從而大大提高黃酮的提取效率。如果能夠以水代替有機溶劑做溶媒，通過表面利用表面活性劑的增溶、潤濕作用，同時結(jié)合微波-超聲波優(yōu)點于一體，不僅可以降低企業(yè)生產(chǎn)成本，解決了有機溶劑殘留問題，同時可以大大提高番石榴葉總黃酮的提取率。
曲芬霞等(曲芬霞，陳存及.閩楠組培快繁技術(shù)研究[j].林業(yè)實用技術(shù)，2010，11：004.)研究了微波法提取竹葉黃酮，探究乙醇濃度、葉片采集時間、料液比和微波提取時間這幾個因素對黃酮提取量的影響，得到最佳提取條件為：6月采集葉片、料液比1∶30、60％乙醇濃度、微波提取時間6min。林娜等(林娜，尹禮國，陳云珠.超聲波提取硬頭黃竹葉黃酮工藝優(yōu)化[j].安徽農(nóng)業(yè)科學，2011，39(18)：10816-10817.)利用超聲波法進行竹葉黃酮的提取竹葉黃酮的最佳提取條件為：乙醇濃度85％，提取溫度75℃，提取時間90min，料液比1∶30，該條件下黃酮提取率為1.178％。與傳統(tǒng)溶劑提取法相比，超聲波提取法與微波提取法雖然能提高黃酮提取率，但提取率的提高并不明顯。將超聲波與微波提取法聯(lián)合使用，并利用表面活性劑的吸附作用，能夠在不使用有機溶劑的情況下有效提高黃酮提取率。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
針對以上問題，本發(fā)明的提供了一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，旨在簡化提取操作，提高提取效率。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案為：
一種從番石榴葉中提取總黃酮的方法，將番石榴葉置于表面活性劑的水溶液中，在微波和超聲的輔助下提取，隨后經(jīng)固液分離，即得到所述的包含總黃酮的提取液；
所述的表面活性劑的水溶液中，表面活性劑的質(zhì)量百分數(shù)為1％～3％；
微波的功率為100～150w；超聲功率為600～650w。
本發(fā)明人通過大量研究發(fā)現(xiàn)，采用表面活性劑的水溶液做溶媒，利用表面活性劑的增溶、潤濕作用，同時結(jié)合微波的熱效應(yīng)和輻射作用以及超聲波的空化效應(yīng)于一體，可以降低企業(yè)生產(chǎn)成本，解決了有機溶劑殘留問題，同時可以大大縮短番石榴葉總黃酮的提取時間，提高提取效率。本發(fā)明方法具有步驟簡單、操作方便、成本低廉、提取效率高，且不存在有毒有機溶劑殘留的問題，具有很大的發(fā)展?jié)摿蛻?yīng)用價值。
本發(fā)明采用溶有少量表面活性劑的水溶液作為提取溶劑，利用表面活性劑增溶作用，同時結(jié)合微波的電磁效應(yīng)和超聲波的機械作用，有效促進番石榴葉中黃酮化合物的提取效率。
研究表明，不同類別的表面活性劑對萃取效果具有一定影響。
作為優(yōu)選，所述的表面活性劑為非離子型表面活性劑和陰離子型表面活性劑的混合物。
本發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)，采用非離子型表面活性劑和陰離子型表面活性劑的復配的表面活性劑方能從番石榴葉中高效提取所述的總黃酮。
所述的非離子型表面活性劑為吐溫-40、吐溫-80、司班-60、司班-80；
進一步優(yōu)選，非離子型表面活性劑為吐溫-40、吐溫-80中的至少一種。
所述的陰離子型表面活性劑為十二烷基硫酸鈉、十二烷基磺酸鈉。
進一步優(yōu)選，所述的陰離子型表面活性劑為十二烷基硫酸鈉。十二烷基硫酸鈉在水中溶解度隨溫度升高而增大，在這種特定條件下，十二烷基硫酸鈉配合所述的非離子表面活性劑，提取效果更優(yōu)異。
本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，合適的陰離子型表面活性劑和非離子型表面活性劑的質(zhì)量比對提取效果具有影響，將該范圍控制在合適的范圍下，可出人意料地提升提取效果。
更進一步優(yōu)選，所述的表面活性劑為十二烷基硫酸鈉和吐溫-80的混合物。
作為優(yōu)選，陰離子型表面活性劑和非離子型表面活性劑的質(zhì)量比為1.5～3.5∶1。
進一步優(yōu)選，陰離子型表面活性劑和非離子型表面活性劑的質(zhì)量比為2∶1。
所述的表面活性劑為質(zhì)量比為2∶1的十二烷基硫酸鈉和吐溫-80。
作為優(yōu)選，表面活性劑的水溶液中，表面活性劑的質(zhì)量百分數(shù)為2％～3％，進一步優(yōu)選為2.5～3％。
作為優(yōu)選，微波的功率為120～150w。
進一步優(yōu)選，微波的功率為120w。
作為優(yōu)選，超聲功率為630～650w。
本發(fā)明采用所述的表面活性劑以及微波、超聲協(xié)同，可明顯縮短提取時間。作為優(yōu)選，提取時間為10～20min。
作為優(yōu)選，番石榴葉預先經(jīng)干燥、粉碎處理。
作為優(yōu)選，將番石榴葉干燥至含水量低于或等于2％。
作為優(yōu)選，采用新鮮番石榴葉在50～70℃，恒溫干燥至所述的含水量。
將干燥后的番石榴葉粉碎后過40目篩網(wǎng)，篩下物用作提取原料。
作為優(yōu)選，所述的番石榴葉與表面活性劑的水溶液的質(zhì)量比為1∶15～40。
本發(fā)明一種優(yōu)選的提取番石榴葉總黃酮的方法從番石榴葉中提取黃酮的方法，具體包括如下步驟：
步驟(1)番石榴葉的處理
將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
步驟(2)將番石榴葉粉碎物和蒸餾水質(zhì)量比1∶15～1∶40充分混合后得到料液；
步驟(3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑，混勻后得到混合溶液，所述表面活性劑與水溶液的質(zhì)量百分比為2％～3％；
步驟(4)將步驟(3)的混合溶液進行微波-超聲波提取，微波功率為100～150w，超聲波功率為600～650w，提取時間為10～20min；
步驟(5)將步驟(4)獲得的產(chǎn)物冷卻至室溫，減壓抽濾，所得濾液即為含有番石榴葉黃酮的溶液。
更進一步優(yōu)選，上述方案中，所述表面活性劑為吐溫-40、吐溫-80中的至少一種和十二烷基硫酸鈉的混合物；其中，吐溫-40、吐溫-80中的至少一種與十二烷基硫酸鈉的質(zhì)量比為1∶2；所述的表面活性劑進一步優(yōu)選為十二烷基硫酸鈉與吐溫-80(且質(zhì)量比2∶1)。
所述微波功率為120w，超聲波功率為630w，提取時間為15min。
本發(fā)明研究表明，在所述的表面活性劑以及重量百分比作為溶媒；再配合于所述的功率下的微波和超聲的穿透以及空化效果，可協(xié)同提升溶媒對提取成分的“增溶”的作用，有助于明顯縮短提取時間，提升目的產(chǎn)物的提取率。
本發(fā)明的原理是：在所述的提取體系下，使有效成分可以輕易溶出。以溶有合適劑量的表面活性劑的水取代有機溶劑作為提取介質(zhì)，對有效成分有“增溶”的作用。在所述的協(xié)同的微波和超聲下，可使極性分子發(fā)生共振摩擦從而產(chǎn)生熱效應(yīng)，同時又有穿透性，可以使所述的表面活性劑水溶液和物料內(nèi)部同時加熱，這樣不僅利用了熱效應(yīng)，同時由于細胞內(nèi)部在加熱，產(chǎn)生了壓力，細胞更容易發(fā)生破裂，有效成分可以自由溶出。此外，在所述的協(xié)同的微波和超聲下，在媒介中引起的“空穴作用”局部產(chǎn)生瞬間的高壓來破壞細胞壁和細胞膜結(jié)構(gòu)，從而促進細胞原生質(zhì)通過細胞壁和細胞膜，溶解于媒介中，使有效成分進一步流出；所以將三者結(jié)合同時作用于番石榴葉提取工藝可以大大的提高提取效率，降低成本。
本發(fā)明的優(yōu)點及有益效果：
(1)以溶有少量表面活性劑的蒸餾水溶液作為提取液，取代了傳統(tǒng)的有機溶劑。且不屬于有毒溶劑，不存在殘留的問題。
(2)本發(fā)明所采用的表面活性劑十二烷基硫酸鈉為陰離子表面活性劑與非陰離子表面活性劑的混合物。陰離子表面活性劑在水中溶解度隨溫度升高而增大，在這種特定條件下，陰離子表面活性劑十二烷基硫酸鈉與非陰離子表面活性劑吐溫-80的協(xié)同作用能夠明顯提高黃酮類物質(zhì)的提取率。
(3)采用本發(fā)明所述方法提取番石榴葉總黃酮，提取時間有傳統(tǒng)的2h～5h縮短為10～20min，大大縮短了提取時間，大大降低了生產(chǎn)過程中的能耗及成本，提高了提取效率。
(4)采用本發(fā)明所述方法提取到的番石榴葉總黃酮，由于避免了長時間的熱效應(yīng)，減少了黃酮發(fā)生熱分解及被氧化的程度。
(5)本發(fā)明所述方法對外部環(huán)境無過高要求，同時所需設(shè)備簡單和操作方法簡單，具有潛在的應(yīng)用前景。
附圖說明
圖1是不同表面活性劑在同一條件下提取率對比。
具體實施方法
為了更好理解本發(fā)明，下面結(jié)合實例進一步闡明本發(fā)明的內(nèi)容，但本發(fā)明的內(nèi)容不僅僅局限于下面的實例。
實施例1
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，包括以下步驟：1)將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
2)準確稱量將番石榴葉粉碎物5g，和蒸餾水按質(zhì)量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉與吐溫-80質(zhì)量比為2∶1，混勻后得到混合溶液，所述混合表面活性劑占混合表面活性劑水溶液的質(zhì)量百分比為2％；
4)將步驟(3)的混合溶液進行微波-超聲波提取，微波功率為100w，超聲波功率為600w，提取時間為15min；
采用nano2-al(no3)3-naoh法測定上述提取得到的番石榴葉總黃酮的含量，結(jié)果顯示：總黃酮含量為4.96％。
實施例2
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，包括以下步驟：1)將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
2)準確稱量將番石榴葉粉碎物5g，和蒸餾水按質(zhì)量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉與吐溫-80質(zhì)量比為2∶1，混勻后得到混合溶液，所述混合表面活性劑占混合表面活性劑水溶液的質(zhì)量百分比為2.5％；
4)將步驟(3)的混合溶液進行微波-超聲波提取，微波功率為150w，超聲波功率為650w，提取時間為15min；
采用nano2-al(no3)3-naoh法測定上述提取得到的番石榴葉總黃酮的含量，結(jié)果顯示：總黃酮含量為5.79％
實施例3
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，包括以下步驟：1)將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
2)準確稱量將番石榴葉粉碎物5g，和蒸餾水按質(zhì)量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉與吐溫-80質(zhì)量比為2∶1，混勻后得到混合溶液，所述混合表面活性劑占混合表面活性劑水溶液的質(zhì)量百分比為3％；
4)將步驟(3)的混合溶液進行微波-超聲波提取，微波功率為120w，超聲波功率為630w，提取時間為15min；
采用nano2-al(no3)3-naoh法測定上述提取得到的番石榴葉總黃酮的含量，結(jié)果顯示：總黃酮含量為6.45％。
實施例4
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，包括以下步驟：1)將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
2)準確稱量將番石榴葉粉碎物5g，和蒸餾水按質(zhì)量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉與吐溫-80質(zhì)量比為3.5∶1，混勻后得到混合溶液，所述混合表面活性劑占混合表面活性劑水溶液的質(zhì)量百分比為3％；
4)將步驟(3)的混合溶液進行微波-超聲波提取，微波功率為120w，超聲波功率為630w，提取時間為15min；
采用nano2-al(no3)3-naoh法測定上述提取得到的番石榴葉總黃酮的含量，結(jié)果顯示：總黃酮含量為5.27％。
實施例5
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，包括以下步驟：1)將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
2)準確稱量將番石榴葉粉碎物5g，和蒸餾水按質(zhì)量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉與吐溫-80質(zhì)量比為1.5∶1，混勻后得到混合溶液，所述混合表面活性劑占混合表面活性劑水溶液的質(zhì)量百分比為3％；
4)將步驟(3)的混合溶液進行微波-超聲波提取，微波功率為120w，超聲波功率為630w，提取時間為15min；
采用nano2-al(no3)3-naoh法測定上述提取得到的番石榴葉總黃酮的含量，結(jié)果顯示：總黃酮含量為5.61％。
實施例6
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，包括以下步驟：1)將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
2)準確稱量將番石榴葉粉碎物5g，和蒸餾水按質(zhì)量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉與吐溫-80質(zhì)量比為3∶1，混勻后得到混合溶液，所述混合表面活性劑占混合表面活性劑水溶液的質(zhì)量百分比為2％；
4)將步驟(3)的混合溶液進行微波-超聲波提取，微波功率為100w，超聲波功率為600w，提取時間為15min；
采用nano2-al(no3)3-naoh法測定上述提取得到的番石榴葉總黃酮的含量，結(jié)果顯示：總黃酮含量為5.03％。
實施例7
和實施例3相比，區(qū)別僅在于，表面活性劑為十二烷基磺酸鈉與吐溫-40(質(zhì)量比2∶1)。結(jié)果顯示：總黃酮含量為5.03％。
實施例8
和對實施例3相比，區(qū)別僅在于，表面活性劑為十二烷基磺酸鈉與吐溫-80(質(zhì)量比2∶1)。結(jié)果顯示：總黃酮含量為5.12％。
實施例9
和對實施例3相比，區(qū)別僅在于，表面活性劑為十二烷基磺酸鈉與司班-60(質(zhì)量比2∶1)。結(jié)果顯示：總黃酮含量為4.43％。
實施例10
和對實施例3相比，區(qū)別僅在于，表面活性劑為十二烷基磺酸鈉與司班-80(質(zhì)量比2∶1)。結(jié)果顯示：總黃酮含量為4.29％。
實施例11
和對實施例3相比，區(qū)別僅在于，表面活性劑為十二烷基硫酸鈉與吐溫-40。結(jié)果顯示：總黃酮含量為4.65％。
實施例12
和對實施例3相比，區(qū)別僅在于，表面活性劑為十二烷基硫酸鈉與司班-60。結(jié)果顯示：總黃酮含量為4.53％。
實施例13
和對實施例3相比，區(qū)別僅在于，表面活性劑為十二烷基硫酸鈉與司班-80。結(jié)果顯示：總黃酮含量為4.57％。
實施例14
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，包括以下步驟：1)將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
2)準確稱量將番石榴葉粉碎物5g，和蒸餾水按質(zhì)量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑十二烷基磺酸鈉與吐溫-80質(zhì)量比為2∶1，混勻后得到混合溶液，所述混合表面活性劑占混合表面活性劑水溶液的質(zhì)量百分比為1％；
4)將步驟(3)的混合溶液進行微波-超聲波提取，微波功率為100w，超聲波功率為600w，提取時間為15min；
采用nano2-al(no3)3-naoh法測定上述提取得到的番石榴葉總黃酮的含量，結(jié)果顯示：總黃酮含量為4.86％。
對比例1
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，包括以下步驟：1)將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
2)準確稱量將番石榴葉粉碎物5g，和蒸餾水按質(zhì)量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉與吐溫-80質(zhì)量比為2∶1，混勻后得到混合溶液，所述混合表面活性劑占混合表面活性劑水溶液的質(zhì)量百分比為4％；
4)將步驟(3)的混合溶液進行微波-超聲波提取，微波功率為100w，超聲波功率為600w，提取時間為15min；
采用nano2-al(no3)3-naoh法測定上述提取得到的番石榴葉總黃酮的含量，結(jié)果顯示：總黃酮含量為3.62％。
對比例2
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，包括以下步驟：1)將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
2)準確稱量將番石榴葉粉碎物5g，和蒸餾水按質(zhì)量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉與吐溫-80質(zhì)量比為2∶1，混勻后得到混合溶液，所述混合表面活性劑占混合表面活性劑水溶液的質(zhì)量百分比為2％；
4)將步驟(3)的混合溶液進行微波-超聲波提取，微波功率為50w，超聲波功率為500w，提取時間為15min；
采用nano2-al(no3)3-naoh法測定上述提取得到的番石榴葉總黃酮的含量，結(jié)果顯示：總黃酮含量為3.53％。
對比例3
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，包括以下步驟：1)將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
2)準確稱量將番石榴葉粉碎物5g，和蒸餾水按質(zhì)量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉與吐溫-80質(zhì)量比為2∶1，混勻后得到混合溶液，所述混合表面活性劑占混合表面活性劑水溶液的質(zhì)量百分比為2％；
4)將步驟(3)的混合溶液進行微波-超聲波提取，微波功率為200w，超聲波功率為700w，提取時間為15min；
采用nano2-al(no3)3-naoh法測定上述提取得到的番石榴葉總黃酮的含量，結(jié)果顯示：總黃酮含量為3.26％。
對比例4
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，包括以下步驟：1)將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
2)準確稱量將番石榴葉粉碎物5g，和蒸餾水按質(zhì)量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉，所述表面活性劑占表面活性劑水溶液的質(zhì)量百分比為2％；
4)將步驟(3)的混合溶液進行微波-超聲波提取，微波功率為100w，超聲波功率為600w，提取時間為15min；
采用nano2-al(no3)3-naoh法測定上述提取得到的番石榴葉總黃酮的含量，結(jié)果顯示：總黃酮含量為3.04％。
對比例5
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，包括以下步驟：1)將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
2)準確稱量將番石榴葉粉碎物5g，和蒸餾水按質(zhì)量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑吐溫-80，所述表面活性劑占混合表面活性劑水溶液的質(zhì)量百分比為2％；
4)將步驟(3)的混合溶液進行微波-超聲波提取，微波功率為100w，超聲波功率為600w，提取時間為15min；
采用nano2-al(no3)3-naoh法測定上述提取得到的番石榴葉總黃酮的含量，結(jié)果顯示：總黃酮含量為2.63％。
對比例6
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，包括以下步驟：1)將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
2)準確稱量將番石榴葉粉碎物5g，和蒸餾水按質(zhì)量1∶30充分混合后得到料液；
3)將步驟(2)的料液進行微波-超聲波提取，微波功率為100w，超聲波功率為600w，提取時間為15min；
采用nano2-al(no3)3-naoh法測定上述提取得到的番石榴葉總黃酮的含量，結(jié)果顯示：總黃酮含量為2.41％。
對比例7
和實施例3相比，區(qū)別僅在于，表面活性劑為吐溫-40。結(jié)果顯示：總黃酮含量為2.31％。
對比例8
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，包括以下步驟：1)將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
2)準確稱量將番石榴葉粉碎物5g，和蒸餾水按質(zhì)量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉與吐溫-80質(zhì)量比為1∶1，混勻后得到混合溶液，所述混合表面活性劑占混合表面活性劑水溶液的質(zhì)量百分比為2％；
4)將步驟(3)的混合溶液進行微波-超聲波提取，微波功率為100w，超聲波功率為600w，提取時間為15min；
采用nano2-al(no3)3-naoh法測定上述提取得到的番石榴葉總黃酮的含量，結(jié)果顯示：總黃酮含量為2.84％。
對比例9
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，包括以下步驟：1)將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
2)準確稱量將番石榴葉粉碎物5g，和蒸餾水按質(zhì)量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉與吐溫-80質(zhì)量比為1∶2，混勻后得到混合溶液，所述混合表面活性劑占混合表面活性劑水溶液的質(zhì)量百分比為2％；
4)將步驟(3)的混合溶液進行微波-超聲波提取，微波功率為100w，超聲波功率為600w，提取時間為15min；
采用nano2-al(no3)3-naoh法測定上述提取得到的番石榴葉總黃酮的含量，結(jié)果顯示：總黃酮含量為2.67％。
對比例10
一種表面活性劑協(xié)同微波-超聲波提取番石榴葉總黃酮的方法，包括以下步驟：1)將新鮮番石榴葉放在電熱恒溫干燥箱中，溫度調(diào)節(jié)至60℃，恒溫干燥，當含水率低于2％時，放入手提式粉碎機中，粉碎6分鐘后，過40目篩，得到番石榴葉粉碎物；
2)準確稱量將番石榴葉粉碎物5g，和蒸餾水按質(zhì)量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步驟(2)的料液中加入表面活性劑十二烷基硫酸鈉與吐溫-80質(zhì)量比為4∶1，混勻后得到混合溶液，所述混合表面活性劑占混合表面活性劑水溶液的質(zhì)量百分比為2％；
4)將步驟(3)的混合溶液進行微波-超聲波提取，微波功率為100w，超聲波功率為600w，提取時間為15min；
采用nano2-al(no3)3-naoh法測定上述提取得到的番石榴葉總黃酮的含量，結(jié)果顯示：總黃酮含量為2.98％。
上述實施例及對比例僅是為說清楚地說明所做的實例，但本發(fā)明的實施方式并不受上述實施例及對比例的限制，其他的任何未違背本發(fā)明的精神實質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。