本發(fā)明涉及醫(yī)療衛(wèi)生領(lǐng)域，具體涉及丹參酮ⅱa作為可應(yīng)用于人體的星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤藥物的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

近年來，隨著工作壓力大、環(huán)境、食物等各類內(nèi)外因素，腫瘤的患者群體數(shù)量一直呈高速增長的趨勢(shì)?，F(xiàn)有治療方法，多采用手術(shù)切除、放/化療進(jìn)行術(shù)后干預(yù)，直到殺死腫瘤細(xì)胞，但手術(shù)對(duì)人體的損傷極大，而放/化療的過程不僅會(huì)殺死腫瘤細(xì)胞，還同時(shí)會(huì)殺死人體健康細(xì)胞，從而使患者體質(zhì)虛弱免疫力下降，多數(shù)患者體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞又會(huì)死灰復(fù)燃，所以純西醫(yī)的方法治療腫瘤存在極大的隱患，而治療過程也極為痛苦。

隨著對(duì)普通民眾對(duì)中醫(yī)藥認(rèn)識(shí)的逐步加深，且中藥的毒副作用小(合理配伍的情況下，甚至可以做到?jīng)]有副作用)，越來越多的研究者開始研究中醫(yī)藥治療腫瘤，但中醫(yī)采用辯證的方法根據(jù)人體的不同癥狀施藥治療，不同的腫瘤，藥方不同，藥方中君藥的也不同，所以就出現(xiàn)同一味藥，不同病癥的藥方中作用不同。例如：甘草，如果是在咳嗽的患者藥方中，甘草的作用是潤肺止咳的效用，但在多數(shù)含有藥性較烈的藥方中，甘草起的作用是緩和藥性的功效。中醫(yī)辯證的過程對(duì)醫(yī)生的要求較高，如果辯證錯(cuò)誤，甚至可能導(dǎo)致對(duì)人體的極大的損傷。

為解決西藥規(guī)范化但對(duì)人體有害，中藥需一人一方，推廣有困難的技術(shù)問題，所以才有了將中藥有效成分提取物提取，可以直達(dá)病灶，可在不考慮患者本身體質(zhì)的前提下，利用西醫(yī)的規(guī)范化治療方法，既避免現(xiàn)有技術(shù)放/化療手段的對(duì)身體的損傷，同時(shí)還保證了治療的效果。將中醫(yī)和西醫(yī)結(jié)合起來，采用西醫(yī)的快速精準(zhǔn)診斷、標(biāo)準(zhǔn)化給藥方式、中藥提取物的有效成分區(qū)分，合力構(gòu)成中藥提取物精準(zhǔn)、有效治療各病征的。

從西醫(yī)的角度來講，腫瘤屬于局部組織細(xì)胞增生所形成的新生物(neogrowth)，因?yàn)檫@種新生物多呈占位性塊狀突起，也稱贅生物。但同樣是人，為什么有人患肺腫瘤，但有人卻是患肝腫瘤，還有的人是患腦瘤，在西醫(yī)里是沒有原因，把壞細(xì)胞殺死(可能過程中，把好的細(xì)胞也一并殺死了)，而中醫(yī)則講究究竟是人體的什么地方出了問題，而針對(duì)該問題采用什么樣的藥物，具體到中西醫(yī)結(jié)合時(shí)，就是藥物中哪些有效組分是起作用的，選用有效成分，忽略對(duì)人身體起其它作用的成分，并且應(yīng)用西醫(yī)的規(guī)范、標(biāo)準(zhǔn)化治療應(yīng)用于絕大多數(shù)的患者，并且取得較好的治療效果。而具體采用哪些中藥的哪些有效成分應(yīng)用于哪種病癥，就是創(chuàng)新點(diǎn)所在。

星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤是中樞星形系統(tǒng)最常見、預(yù)后較差的原發(fā)性惡性腫瘤，發(fā)病原因復(fù)雜，西醫(yī)臨床治療常采用以手術(shù)為主、輔以放療、化療、生物免疫治療等措施的綜合治療方案，但膠質(zhì)瘤細(xì)胞具有生長迅速、無邊界浸潤、易復(fù)發(fā)等特點(diǎn)，多數(shù)患者治療后的生存期僅約為1年。目前，星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤的臨床治療及預(yù)后尚不令人滿意，尋找有效的化療藥物、并研究其作用機(jī)制，對(duì)于其臨床治療具有重要的意義。

從中醫(yī)的角度講，腦腫瘤隸屬于“頭痛”、“頭風(fēng)”等范疇。腦瘤的發(fā)病原因概括為內(nèi)外因兩種。即內(nèi)為素質(zhì)因素或易感因素，外為誘發(fā)因素或?yàn)橹L因素。腦腫瘤形成的素質(zhì)因素主要為腎虛不充，髓海失養(yǎng)，肝腎同源，腎虛肝亦虛，肝風(fēng)內(nèi)動(dòng)，邪毒上擾清竅，痰蒙濁閉，阻塞腦絡(luò)，血?dú)饽郎纬赡X瘤：中醫(yī)認(rèn)為，“頭為諸陽之會(huì)”總司人之神明，最不容邪氣相犯。若內(nèi)傷七情(怒、喜、憂、思、悲、恐、驚)，或感受六淫邪毒，使臟腑功能失調(diào)，加之外邪侵入，直中腦竅或邪氣客于上焦，氣化不利，經(jīng)脈不通，瘀血、瘀濁內(nèi)停，也可積聚留結(jié)成塊，發(fā)為腦瘤。

丹參酮ⅱa(tanshinoneⅱa，丹參酮ⅱa)是從中藥丹參中分離出的脂溶性二萜醌類化合物，為桔紅色針狀結(jié)晶(etoac)，熔點(diǎn)為209-210℃。易溶于乙醇，丙酮，乙醚，苯等有機(jī)溶劑，微溶于水，該物質(zhì)別名：丹參醌ⅱ，丹參醌ⅱa，具有抗炎、抗氧化、心血管保護(hù)、星形系統(tǒng)保護(hù)、護(hù)肝、抑制病毒復(fù)制等活性。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為解決現(xiàn)有技術(shù)采用西醫(yī)治療的人星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤手術(shù)損傷、放/化療效果不佳，治療后普遍生存時(shí)間短的技術(shù)問題，本發(fā)明提供丹參酮ⅱa作為抗星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤藥物的應(yīng)用，可以大大提高星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤的抑制作用，提高患者的有治療有效率、治愈率，延長患者的生存時(shí)間，減少治愈后的復(fù)發(fā)率。

丹參酮ⅱa作為抗人星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤藥的應(yīng)用，其特征在于：抗人星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤藥中，主要的成分為丹參酮ⅱa。

本發(fā)明丹參酮ⅱa作為抗人星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤藥的應(yīng)用，通過抑制人星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞u251體外實(shí)驗(yàn)和大鼠星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞c6生長的作用實(shí)驗(yàn)，顯示丹參酮ⅱa作用于u-118mg細(xì)胞后，隨丹參酮ⅱa濃度的增加和作用時(shí)間的延長，u-118mg細(xì)胞的存活率逐漸降低。丹參酮ⅱa作用48h后，u-118mg細(xì)胞內(nèi)caspase3mrna和蛋白的表達(dá)高于陰性對(duì)照組；10、30和100μm丹參酮ⅱa組的細(xì)胞凋亡率分別為(9.8±1.8)％、(16.5±2.1)％和(23.2±2.8)％，均高于陰性對(duì)照組的(2.8±1.1)％，(p<0.05)。這些結(jié)果表明，丹參酮ⅱa可通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，從而起抗u-118mg的作用。丹參酮ⅱa作為抗人星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤作用明確，對(duì)人星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤具有很好的抑制作用。

附圖說明

圖1、丹參酮對(duì)u-118mg細(xì)胞生長的影響

圖2、丹參酮ⅱa對(duì)u-118mg細(xì)胞凋亡的影響

圖3、丹參酮ⅱa對(duì)u-118mg細(xì)胞鈣離子濃度([ca2+]i)的影響

圖4、丹參酮ⅱa降低u-118mg細(xì)胞的線粒體膜電位

圖5、丹參酮ⅱa對(duì)u-118mg細(xì)胞內(nèi)cytc、mt1e和caspase3mrna表達(dá)的影響

圖6、丹參酮ⅱa對(duì)u-118mg細(xì)胞cytc、mt1e和caspase3蛋白表達(dá)的影響

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明：

丹參酮ⅱa作為抗人星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤藥的應(yīng)用，其特征在于：抗人星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤藥中，主要的成分為丹參酮ⅱa。

進(jìn)一步的，所述抗人星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤藥，屬于中藥有效提取物組方，組方成分包括丹參酮ⅱa、苦參素、紅參總提取物。

苦參素是從豆科槐屬植物苦參中提取分離出的一種生物堿，以氧化苦參堿為主，并含有少量氧化槐果堿。氧化苦參堿是苦參素升白作用的主要有效成分。具有清熱利濕、利尿解毒、改善肝炎癥狀、體征、退黃、降酶作用。能抑制乙型肝炎病毒的復(fù)制、誘生內(nèi)源性干擾素、保護(hù)肝細(xì)胞、改善肝功能、抗肝纖維化、升高白細(xì)胞及抗腫瘤。適用于治療慢性乙型病毒性肝炎，以及腫瘤放療、化療引起的白細(xì)胞低下和其他原因引起的白細(xì)胞減少癥。本品為我國研制和生產(chǎn)的抗病毒藥，在體內(nèi)能誘生干擾素α，能使慢性乙肝病人血清hbeag和(或)hbvdna陰轉(zhuǎn)，血精丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶下降，臨床療效與干擾素類似。紅參特有的生理活性物質(zhì)g-rh2，panaxytriol，maltol等。g-rh2、panaxytriol有抑制癌細(xì)胞增長的作用，maltol具有抗氧化作用。干燥后的紅參顏色紅潤，氣味濃香。紅參較白參相比組織致密、堅(jiān)固、儲(chǔ)藏性良好。紅參俱有補(bǔ)氣、滋陰、益血、生津、強(qiáng)心、健胃和鎮(zhèn)靜等作用。這些作用紅參與白參沒有嚴(yán)格的區(qū)別，但在補(bǔ)虛方面一般認(rèn)為紅參強(qiáng)于白參。久服紅參可以提高人體免疫力、抗疲勞、抗輻射、抑制腫瘤、調(diào)整人體內(nèi)分泌系統(tǒng)。紅參適合于老人、久病體虛者，紅參具有火大、勁足、功效強(qiáng)之特點(diǎn)，是陰盛陽虛者的首選補(bǔ)品，醫(yī)藥上治療虛脫或強(qiáng)補(bǔ)多用紅參。

鑒于星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤屬于腦瘤的一種，而其中醫(yī)的原因是“腎虛不充，髓海失養(yǎng)，肝腎同源，腎虛肝亦虛”的中醫(yī)辯癥理論，除對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤的直接作用的丹參酮ⅱa，在組方中加入護(hù)肝養(yǎng)肝的苦參素、補(bǔ)氣的紅參，可逐漸改善患者體質(zhì)，對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤的治療起“釜底抽薪”的治療效果，

進(jìn)一步的，所述的抗人星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤藥，丹參酮ⅱa、苦參素、紅參總提取物的質(zhì)量比分別為1.00:(0.05-0.20)：(0.05-0.20)。

進(jìn)一步的，所述的抗人星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤藥，丹參酮ⅱa、苦參素、紅參總提取物的質(zhì)量比分別為1.00:0.12：0.12。

進(jìn)一步的，丹參酮ⅱa、苦參素是市售商品，所述的紅參總提取物的制備步驟如下：

a、將紅參進(jìn)行浸泡，然后用乙醇水溶液進(jìn)行回流提取，將得到的提取液離心處理，取上清液，得到紅參總提取液；工藝參數(shù)為：紅參的浸泡時(shí)間10-80min，回流時(shí)間為40-130min，回流次數(shù)為1-4次，乙醇水溶液中乙醇的體積百分含量為60-90％，紅參和乙醇水溶液的重量份數(shù)比為1∶(5-18)；

b、采用大孔吸附樹脂柱對(duì)步驟a中的總提取液進(jìn)行吸附，先用水洗脫水溶性雜質(zhì)，再用乙醇水溶液洗脫大孔吸附樹脂柱，收集得到紅參洗脫液；工藝參數(shù)為：洗脫水溶性雜質(zhì)時(shí)，乙醇水溶液中乙醇的體積百分含量小于10％；洗脫大孔吸附樹脂柱時(shí)，乙醇水溶液中乙醇的體積百分含量為30-90％；

c、將步驟b得到的洗脫液在45-55℃進(jìn)行干燥，得到紅參總提取物。

進(jìn)一步的，本發(fā)明治療的藥物，在需要時(shí)，可加入藥學(xué)上可接受的載體，載體包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體或潤滑劑等，制成最終的藥物形態(tài)為片劑、顆粒劑、膠囊劑、滴丸劑、注射劑、輸液劑等。

一、體外抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)：

實(shí)驗(yàn)?zāi)康模捍_定選取丹參酮ⅱa作用于人星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞主要藥物成分時(shí)的作用原理、機(jī)制及效果。

1材料和方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

人星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞u-118mg由中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞資源中心提供。rpmi-1640培養(yǎng)基為gibco產(chǎn)品。胎牛血清購自杭州四季青生物工程材料有限公司。丹參酮ⅱa由中國藥品生物制品檢定所提供。5氟尿嘧啶(fu)：上海旭東海普藥業(yè)有限責(zé)任公司。胰蛋白酶、mtt、fura-2/am、羅丹明123(r123)為sigma公司產(chǎn)品；annexv-fitc/pi細(xì)胞凋亡試劑盒購自廣州bd生物科技有限公司。trizol、rt-pcr試劑盒、powergreenpcrmastermix為寶生物(大連)有限公司產(chǎn)品。引物由生工生物工程(上海)有限公司合成?？贵w購自santacruzbiotechnology，inc。主要儀器有450型酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀(美國bio-rad公司)、epics-xlii型流式細(xì)胞儀(美國beckmancoulter公司)、熒光分光光度計(jì)(caryeclipse，australia)、tu1810型紫外可見分光光度計(jì)(北京普析儀器有限責(zé)任公司)、mastercyclergradientcycler(eppendorfag，germany)、iq5multicolorreal-timepcrdetectionsystem(bioradlaboratories，inc.，usa)。

1.2方法

1.2.1丹參酮ⅱa對(duì)u-118mg細(xì)胞生長的影響

應(yīng)用含10％胎牛血清的rpmi-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)u-118mg細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)分為陰性對(duì)照組(control，加入rpmi-1640)、陽性對(duì)照組(fu，100μm，應(yīng)用rpmi1640配制)和丹參酮ⅱa組(0.01μm-100μm，rpmi1640配制)。將u-118mg細(xì)胞接種于96孔板，細(xì)胞懸液的濃度為每毫升5×104個(gè)細(xì)胞，每孔180μl，次日加藥(每孔20μl)。藥物分別作用24、48和72h后，每孔加入20μl5mg/ml的mtt溶液，繼續(xù)培養(yǎng)4h。吸上清液，每孔加入150μl的二甲基亞砜(dmso)。于酶標(biāo)儀570nm波長測(cè)定吸光度(a)值。計(jì)算細(xì)胞的存活率，細(xì)胞的存活率＝實(shí)驗(yàn)組平均a值/陰性對(duì)照組平均a值×100％。

1.2.2丹參酮ⅱa對(duì)u-118mg細(xì)胞凋亡的影響

實(shí)驗(yàn)分為陰性對(duì)照組、10μm、30μm和100μm的丹參酮ⅱa組。收集藥物作用48h后的細(xì)胞，洗滌2次，再用的pbs溶液重懸細(xì)胞。加入annexinv、25℃、避光孵育15min后，再加入碘化丙啶、25℃避光孵育40min。最后加入適量的pbs，充分混勻后，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

1.2.3細(xì)胞內(nèi)鈣的測(cè)定

實(shí)驗(yàn)分組及藥物作用時(shí)間同細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)。收集藥物作用后的細(xì)胞，用含0.2％牛血清白蛋白的緩沖液重懸細(xì)胞，加入終濃度為5μmol·l-1的fura2-am，避光孵育30min。用緩沖液洗3遍，再用含0.2％牛血清白蛋白的緩沖液重懸細(xì)胞，并調(diào)整細(xì)胞濃度為每毫升5×105個(gè)細(xì)胞，再37℃避光孵育20min。熒光分光光度計(jì)測(cè)定f340/f380比率。

1.2.4測(cè)定u-118mg細(xì)胞線粒體膜電位

收集u-118mg細(xì)胞，應(yīng)用d-hanks液重懸后，加入終濃度為500nm的r123溶液，避光孵育30min。之后用d-hanks洗3遍，再用d-hanks液重懸細(xì)胞，細(xì)胞濃度為每毫升為4×105個(gè)細(xì)胞。設(shè)定熒光分光光度計(jì)激發(fā)波長為488nm，發(fā)射波長為535nm，待熒光強(qiáng)度穩(wěn)定后，加入丹參酮ⅱa，測(cè)定不同濃度丹參酮ⅱa組的熒光強(qiáng)度。

1.2.5u-118mg細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞色素c(cytc)、金屬硫蛋白1e(mt1e)和caspase3mrna的表達(dá)

收集藥物作用48h后的細(xì)胞，加入trizol收集總rna，經(jīng)過氯仿萃取、異丙醇沉淀和75％乙醇洗滌后，加入depc水溶解rna。采用紫外分光光度計(jì)測(cè)定各組的a260/a280，計(jì)算rna的含量，并將各組的rna樣品配成50ng/μl的濃度。按試劑盒說明進(jìn)行rt(37℃，15min；85℃，5s)和pcr(95℃10min；95℃15s，60℃1min，40個(gè)循環(huán))。以gapdh為內(nèi)參基因，根據(jù)測(cè)得的ct值計(jì)算目的基因的相對(duì)表達(dá)量。

1.2.6u-118mg細(xì)胞內(nèi)cytc、mt1e和caspase3蛋白的檢測(cè)

收集藥物作用48h后的u-118mg細(xì)胞，經(jīng)ripa裂解、高速離心后，取上清液，采用bradford法測(cè)量蛋白濃度。取等量蛋白，進(jìn)行sds聚丙烯酰胺電泳、轉(zhuǎn)膜和封閉后，一抗孵育過夜，二抗室溫下孵育，ecl法顯色，凝膠圖像分析系統(tǒng)照相。

1.2.7統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用spss18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料用x±s表示，組間比較采用單因素方差分析，以p<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

二、體外抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

2.1丹參酮ⅱa抑制u-118mg細(xì)胞生長

丹參酮ⅱa對(duì)u-118mg細(xì)胞生長的影響如圖1所示。結(jié)果顯示，隨丹參酮ⅱa濃度的增加，u-118mg細(xì)胞的存活率逐漸下降，其中10、100μm的丹參酮ⅱa作用u-118mg細(xì)胞24h、48h和72h后，細(xì)胞存活率均低于陰性對(duì)照組(p<0.01)。

2.2丹參酮ⅱa誘導(dǎo)u-118mg細(xì)胞凋亡

流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示(圖2)，陰性對(duì)照組u-118mg細(xì)胞的凋亡百分率為(2.8±1.1)％；10、30和100μm的丹參酮ⅱa作用u-118mg細(xì)胞48h后的細(xì)胞凋亡率分別為(9.8±1.8)％、(16.5±2.1)％和(23.2±2.8)％，均高于陰性對(duì)照組(p<0.05)。

2.3丹參酮ⅱa對(duì)u-118mg細(xì)胞鈣離子濃度([ca2+]i)的影響

熒光分光光度計(jì)檢測(cè)顯示(圖3)。陰性對(duì)照組u-118mg細(xì)胞的f340/f380比率為2.57±0.06，u-118mg細(xì)胞經(jīng)10、30和100μm的丹參酮iia作用后的f340/f380比率分別為2.99±0.11、3.22±0.08和3.26±0.09，均高于陰性對(duì)照組(p<0.01)。

2.4丹參酮ⅱa降低u-118mg細(xì)胞的線粒體膜電位

熒光分光光度計(jì)檢測(cè)u-118mg細(xì)胞線粒體膜電位的結(jié)果(圖4)顯示，陰性對(duì)照組的熒光強(qiáng)度為98.61±0.57，10、30和100μm作用u-118mg細(xì)胞后的熒光強(qiáng)度分別為98.71±0.56、95.33±0.53和92.73±0.59；其中，30和100μm作用u-118mg細(xì)胞后的熒光強(qiáng)度均低于陰性對(duì)照組(p<0.01)。

2.5丹參酮ⅱa對(duì)u-118mg細(xì)胞內(nèi)cytc、mt1e和caspase3mrna表達(dá)的影響

rt-pcr檢測(cè)顯示(圖5)，丹參酮ⅱa作用u-118mg細(xì)胞后，隨丹參酮ⅱa濃度的增加，u-118mg細(xì)胞內(nèi)cytc和caspase3mrna的含量逐漸增加，各濃度丹參酮iia組的mrna的含量均高于陰性對(duì)照組(p<0.05)；30和100μm的丹參酮ⅱa組的細(xì)胞內(nèi)mt1e的水平低于陰性對(duì)照組(p<0.05)。

mt的結(jié)構(gòu)在生物進(jìn)化中高度保守，有四種異構(gòu)體，mt-ⅰ和mt-ⅱ在大多數(shù)哺乳動(dòng)物的內(nèi)臟器官中廣泛存在，尤以肝、腎細(xì)胞為主，而且參加其功能調(diào)節(jié)。mt-ⅲ分布主要限于中樞星形系統(tǒng)，主要分布于星性膠質(zhì)細(xì)胞(集中于細(xì)胞體和突起中)，其次為星形元細(xì)胞，也有報(bào)道稱少量分布于生殖細(xì)胞、小腸、胃、腎和嗅覺皮質(zhì)細(xì)胞中。mt-ⅳ主要分布于皮膚、舌、消化道等器官的角質(zhì)細(xì)胞和復(fù)層鱗狀上皮細(xì)胞中。

2.6丹參酮ⅱa對(duì)u-118mg細(xì)胞cytc、mt1e和caspase3蛋白表達(dá)的影響

westernblot檢測(cè)顯示(圖6)，丹參酮ⅱa作用u-118mg細(xì)胞48h后，隨藥物濃度的增加，u-118mg細(xì)胞內(nèi)cytc和caspase3蛋白的表達(dá)逐漸增加，而mt1e蛋白的表達(dá)量逐漸降低。

丹參酮ⅱa具有抑制人星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞u251和大鼠星形膠質(zhì)瘤細(xì)胞c6生長的作用，丹參酮ⅱa作用于u-118mg細(xì)胞后，隨丹參酮ⅱa濃度的增加和作用時(shí)間的延長，u-118mg細(xì)胞的存活率逐漸降低。丹參酮ⅱa作用48h后，u-118mg細(xì)胞內(nèi)caspase3mrna和蛋白的表達(dá)高于陰性對(duì)照組；10、30和100μm丹參酮ⅱa組的細(xì)胞凋亡率分別為(9.8±1.8)％、(16.5±2.1)％和(23.2±2.8)％，均高于陰性對(duì)照組的(2.8±1.1)％(p<0.05)。這些結(jié)果表明，丹參酮ⅱa可通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，從而起抗u-118mg的作用。

通過實(shí)驗(yàn)，可以得出，將丹參酮ⅱa作為抗人星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤的主要成分可以有效的抑制細(xì)胞再生，并且可以誘導(dǎo)該類腫瘤細(xì)胞的凋亡。而苦參素和紅參有效提取物的加入，通過患者應(yīng)用，可以有效的提高患者的自身免疫功能，縮短腫瘤的治療周期，初中期患者，經(jīng)過治療可以實(shí)現(xiàn)檢測(cè)指標(biāo)低于規(guī)定值，延長患者的生存周期，晚期患者的生存周期從1年可延長到至少2年以上；同時(shí)還可以明顯改善患者體質(zhì)，減少星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤的復(fù)發(fā)。

本發(fā)明的保護(hù)范圍，不僅限于具體實(shí)施方式所公開的技術(shù)方案，凡將丹參酮ⅱa作為抗人星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤藥的主要成分，進(jìn)一步的還包括苦參素和紅參有效提取物的技術(shù)方案，以及在上述技術(shù)方案內(nèi)容上的微小改進(jìn)、等同替換，均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。