本發(fā)明涉及藥理學(xué)活性物質(zhì)的持續(xù)釋放脂質(zhì)預(yù)濃縮物和包含其的藥物組合物。

背景技術(shù)：
持續(xù)釋放制劑被設(shè)計(jì)成以預(yù)定速率釋放單一劑量的藥理學(xué)活性物質(zhì)以便將所述物質(zhì)在血流中的有效血漿濃度保持特定時(shí)期，從而使由多劑量引起的副作用最小。PLGA[聚乳酸-乙醇酸共聚物]是由美國(guó)食品和藥物管理局(FDA)批準(zhǔn)用于持續(xù)釋放的當(dāng)前使用的可生物降解材料的代表。美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,480,656報(bào)道，經(jīng)由PLGA在體內(nèi)經(jīng)過(guò)特定時(shí)期降解成乳酸和乙醇酸持續(xù)釋放藥理學(xué)活性物質(zhì)。然而，PLGA的酸性降解產(chǎn)物引起炎癥，減少細(xì)胞生長(zhǎng)(K.Athanasiou,G.G.Niederauer和C.M.Agrawal,Biomaterials(生物材料),17,93(1996))。對(duì)于持續(xù)釋放，必須注射其中包括藥物的直徑為10～100微米的PLGA固體顆粒。PLGA固體顆粒的注射伴有疼痛或炎癥，因?yàn)橹睆綖?0～100微米的固體顆粒應(yīng)當(dāng)通過(guò)皮下注射或肌肉注射施用并且經(jīng)過(guò)長(zhǎng)達(dá)數(shù)月的時(shí)期在注射部位降解。因此，需要新的持續(xù)釋放制劑，所述持續(xù)釋放制劑在改進(jìn)的患者順應(yīng)性情況下供應(yīng)有效血漿濃度的藥理學(xué)活性物質(zhì)達(dá)延長(zhǎng)的時(shí)期。最終在本發(fā)明中，本發(fā)明人對(duì)于持續(xù)釋放制劑的廣泛而深入的研究導(dǎo)致了發(fā)現(xiàn)：脂質(zhì)預(yù)濃縮物，所述脂質(zhì)預(yù)濃縮物包含：a)具有帶有至少兩個(gè)以上-OH(羥基)基團(tuán)的極性頭的脫水山梨醇不飽和脂肪酸酯；b)磷脂；和c)液晶硬化劑，所述液晶硬化劑不含離子化基團(tuán)，具有含有三?；蛱辑h(huán)結(jié)構(gòu)的15至40個(gè)碳原子的疏水部分，在沒(méi)有水性流體時(shí)作為液相存在并且在暴露于水性流體時(shí)轉(zhuǎn)變成凝膠狀液晶，表現(xiàn)出優(yōu)異的持續(xù)釋放特性，并且所述預(yù)濃縮物對(duì)于身體是安全的并且是高度可生物降解的。下面給出有關(guān)本發(fā)明的現(xiàn)有技術(shù)的描述。國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)WO2005/117830描述了預(yù)制劑，其包含至少一種中性二酰基脂質(zhì)和/或至少一種生育酚，至少一種磷脂，和至少一種生物相容的含氧的低粘度有機(jī)溶劑的低粘度非液晶混合物。國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)WO2006/075124公開(kāi)了含有至少一種二?；视?、至少一種磷脂酰膽堿、至少一種含氧有機(jī)溶劑和至少一種生長(zhǎng)激素抑制素類(lèi)似物的低粘度混合物的預(yù)配制劑。全部這些預(yù)制劑將藥理學(xué)活性物質(zhì)在體內(nèi)釋放兩個(gè)星期或更長(zhǎng)，但使用二?；|(zhì)，預(yù)制劑的必需成分作為藥物賦形劑是不可用的并且必須證明它是足夠安全的。與本發(fā)明的另一個(gè)區(qū)別是，發(fā)現(xiàn)所述出版物中使用的有機(jī)溶劑降低一些藥物的活性(H.Ljusberg-Wahre,FSNielse,298,328-332(2005)；H.Sah,Y.bahl,JournalofControlledRelease(控制釋放雜志)106,51-61(2005))。美國(guó)專(zhuān)利號(hào)7,731,947公開(kāi)了一種組合物，其包括：包含干擾素、蔗糖、甲硫氨酸和檸檬酸鹽緩沖液的顆粒制劑，包含溶劑諸如苯甲酸芐酯的懸浮賦形劑，其中所述顆粒制劑分散在懸浮賦形劑中。在一個(gè)實(shí)施例中，描述了磷脂酰膽堿連同維生素E(生育酚)溶解在有機(jī)溶劑中并用于將顆粒制劑分散在其中。然而，該組合物不同于本發(fā)明的透明和可過(guò)濾的溶液制劑，因?yàn)樵摻M合物用于分散固體顆粒并且不允許形成液晶。美國(guó)專(zhuān)利號(hào)7,871,642公開(kāi)了制備用于遞送藥理學(xué)活性劑的分散體的方法，所述方法包括將磷脂、聚氧乙烯助乳化劑、甘油三酯和乙醇的均勻混合物分散在水中，其中聚氧乙烯助乳化劑選自聚乙氧基化脫水山梨醇脂肪酸酯(聚山梨醇酯)和聚乙氧基化的維生素E衍生物。通過(guò)將親水聚合物聚氧乙烯綴合到脫水山梨醇脂肪酸酯和維生素E衍生的聚乙氧基化的脫水山梨醇脂肪酸酯和聚乙氧基化的維生素E衍生物分別在結(jié)構(gòu)上完全不同于脫水山梨醇脂肪酸酯和維生素E。它們通常被用作親水表面活性劑，利用聚氧乙烯的性質(zhì)，其不同于本發(fā)明的組分。美國(guó)專(zhuān)利號(hào)5,888,533公開(kāi)了用于在身體內(nèi)原位形成固體可生物降解植入物的可流動(dòng)組合物，其包含：非聚合的水不溶性可生物降解材料；和生物相容的有機(jī)溶劑，所述生物相容的有機(jī)溶劑至少部分地使所述非聚合的水不溶性材料溶解，并且在水或體液中是可混溶的或可分散的，并在放置在體內(nèi)后能夠從組合物擴(kuò)散出或浸出到體液中，其中所述非聚合的材料凝結(jié)或沉淀以形成固體植入物。在該組合物中，甾醇、膽甾醇酯、脂肪酸、脂肪酸甘油酯、蔗糖脂肪酸酯、脫水山梨醇脂肪酸酯、脂肪醇、脂肪醇與脂肪酸的酯、脂肪酸的酸酐、磷脂、羊毛脂、羊毛脂醇以及它們的混合物被描述為非聚合材料，并且使用乙醇作為溶劑。然而，與本發(fā)明的不同在于，該組合物不能形成液晶并且設(shè)計(jì)成通過(guò)水不溶性材料的簡(jiǎn)單凝結(jié)或沉淀形成固體植入物并且必然使用許多有機(jī)溶劑。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
技術(shù)問(wèn)題因此，本發(fā)明的目的是提供基于具有含至少兩個(gè)-OH(羥基)基團(tuán)的極性頭的脫水山梨醇不飽和酯的脂質(zhì)預(yù)濃縮物，其具有顯著的高安全性和生物降解性并且以有利于劑型的注射施用的液態(tài)存在，而當(dāng)暴露于水性流體時(shí)形成液晶，從而提高藥物在體內(nèi)的持續(xù)釋放。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供脂質(zhì)預(yù)濃縮物，其可在不產(chǎn)生疼痛或炎癥(常規(guī)制劑具有的問(wèn)題)的情況下注射。本發(fā)明的進(jìn)一步的目的是提供藥物組合物，所述藥物組合物還含有藥理學(xué)活性成分加本發(fā)明的預(yù)濃縮物。解決問(wèn)題的方案根據(jù)其一個(gè)方面，本發(fā)明提供用于持續(xù)釋放的脂質(zhì)預(yù)濃縮物，其包含a)具有帶有至少兩個(gè)以上-OH(羥基)基團(tuán)的極性頭的脫水山梨醇不飽和脂肪酸酯；b)磷脂；和c)液晶硬化劑，所述液晶硬化劑不含離子化基團(tuán)，具有含三?；蛱辑h(huán)結(jié)構(gòu)的15至40個(gè)碳原子的疏水部分，其中所述脂質(zhì)預(yù)濃縮物在沒(méi)有水性流體時(shí)作為液相存在并且在水性流體存在時(shí)形成液晶。在本發(fā)明中有用的具有含兩個(gè)以上-OH(羥基)基團(tuán)的極性頭的脫水山梨醇不飽和脂肪酸酯由下列化學(xué)式1表示：[化學(xué)式1]其中R1是OH，R2是OH或R并且R3是R，其中R是具有一個(gè)或多個(gè)不飽和鍵的4至30個(gè)碳原子的烷基酯。在本發(fā)明中導(dǎo)致液晶形成的脫水山梨醇脂肪酸酯，不同于常規(guī)對(duì)應(yīng)物如下列化學(xué)式2的油基甘油酸酯(OG)，植烷基甘油酸酯(PG)和甘油單油酸酯(GMO)，甘油二油酸酯(GDO，一種二酰基甘油)。即，造成液晶相的常規(guī)分子都具有由甘油或甘油酸衍生的極性頭和由脂質(zhì)醇或脂肪酸衍生的非極性尾組成的共同結(jié)構(gòu)。[化學(xué)式2]然而，造成液晶相的常規(guī)分子由于下列缺點(diǎn)而稍微難以應(yīng)用到藥物的開(kāi)發(fā)。油基甘油酸酯(OG)和植烷基甘油酸酯(PG)，雖然能夠容易地形成液晶，但是由于其相對(duì)高的毒性而很少用作用于人類(lèi)醫(yī)藥的藥物賦形劑。另一方面，甘油單油酸酯可用作藥用賦形劑，但具有弱的結(jié)晶性以致不能形成持續(xù)釋放藥劑所需的液晶。在如上所述的國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)WO2005/117830中使用的甘油二油酸酯是一種二?；|(zhì)，其中甘油充當(dāng)極性頭。該分子一般不用作藥物賦形劑，因?yàn)槠浒踩陨形吹玫阶C實(shí)。此外，它的生物降解性顯著差。作為深入和徹底研究的結(jié)果，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，脫水山梨醇不飽和脂肪酸酯相對(duì)于常規(guī)使用的液晶分子甘油或甘油酸衍生物的優(yōu)點(diǎn)在于它們形成對(duì)于持續(xù)釋放活性成分非常有效的液晶，具有優(yōu)異的安全性和生物降解性，并可適用于開(kāi)發(fā)克服了現(xiàn)有技術(shù)中遇到的問(wèn)題的醫(yī)療產(chǎn)品。為了用于藥用組合物，材料必須保證是安全且可生物降解的。另外，生物降解性對(duì)于負(fù)責(zé)體內(nèi)持續(xù)釋放的材料是非常重要的因素。如果將使用PLGA的持續(xù)釋放注射劑設(shè)計(jì)成釋放活性成分達(dá)一周，則理想的是，在注射后一周PLGA在體內(nèi)降解。然而，實(shí)際上，PLGA保持不變達(dá)一至數(shù)月，甚至在持續(xù)釋放的功能完成后。因此，具有優(yōu)異的持續(xù)釋放特性、安全性和生物降解性的本發(fā)明的脫水山梨醇不飽和脂肪酸酯適用于在制藥工業(yè)中具有巨大價(jià)值的新的液晶誘導(dǎo)材料。本發(fā)明的脫水山梨醇不飽和脂肪酸酯的脂肪酸可以衍生自植物油(如，棕櫚油、蓖麻油、橄欖油、花生油、脫硫油、玉米油、芝麻油、棉籽油、大豆油、葵花油、紅花油、亞麻子油)，動(dòng)物脂肪和油(例如，乳脂、豬油、牛脂等)，鯨油和魚(yú)油。本發(fā)明的脫水山梨醇不飽和脂肪酸酯可以選自脫水山梨醇單酯、脫水山梨醇倍半酯、脫水山梨醇二酯和它們的混合物。脫水山梨醇單酯是具有一個(gè)經(jīng)由酯鍵與其結(jié)合的脂肪酸基團(tuán)的脫水山梨醇分子并且可以選自脫水山梨醇單油酸酯、脫水山梨醇單亞油酸酯、脫水山梨醇單棕櫚油酸酯、脫水山梨醇單肉豆蔻腦酸酯和它們的混合物。脫水山梨醇倍半酯是平均1.5個(gè)脂肪酸基團(tuán)經(jīng)由酯鍵與其結(jié)合的脫水山梨醇分子。在本發(fā)明中有用的脫水山梨醇倍半酯的代表是脫水山梨醇倍半油酸酯、脫水山梨醇倍半亞油酸酯、脫水山梨醇倍半棕櫚油酸酯、脫水山梨醇倍半肉豆蔻腦酸酯和它們的混合物。脫水山梨醇二酯是具有兩個(gè)經(jīng)由酯鍵與其結(jié)合的脂肪酸基團(tuán)的脫水山梨醇分子，并且可以選自脫水山梨醇二油酸酯、脫水山梨醇二亞油酸酯、脫水山梨醇二棕櫚油酸酯、脫水山梨醇二肉豆蔻腦酸酯和它們的混合物。磷脂對(duì)于層狀結(jié)構(gòu)如脂質(zhì)體的構(gòu)成是必要的，但自身不能形成非層狀相結(jié)構(gòu)，如液晶。然而，磷脂可以參與脫水山梨醇不飽和脂肪酸酯驅(qū)動(dòng)的非層狀相結(jié)構(gòu)的形成，作用是穩(wěn)定所得的液晶。本發(fā)明中有用的磷脂含有具有極性頭的4至30個(gè)碳原子的飽和或不飽和的烷基酯基團(tuán)。磷脂可以選自磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇、磷脂酸、鞘磷脂以及它們的混合物。磷脂發(fā)現(xiàn)于植物和動(dòng)物如大豆和蛋中。在磷脂中，造成疏水尾的長(zhǎng)脂肪酸烴鏈包括飽和脂肪酸鏈，如單棕櫚酰基和二棕櫚?；?、單肉豆蔻?；投舛罐Ⅴ；?、單月桂酰基和二月桂?；约皢斡仓；投仓；?，不飽和脂肪酸鏈，如單亞油酰基或二亞油?；?、單油基和二油基、單棕櫚油酰基和二棕櫚油?；稳舛罐⒛X?；投舛罐⒛X?；退鼈兊幕旌衔?。液晶硬化劑自身不能形成非層狀結(jié)構(gòu)(液晶)，這與脫水山梨醇不飽和脂肪酸酯不同，其也不能形成層狀結(jié)構(gòu)(脂質(zhì)體)，這與磷脂不同。然而，液晶硬化劑通過(guò)增加非層狀結(jié)構(gòu)的曲率從而提高納米尺度的油和水的有序共存而有助于脫水山梨醇不飽和脂肪酸酯驅(qū)動(dòng)的非層狀相結(jié)構(gòu)的形成。為了該功能，需要液晶硬化劑在其分子結(jié)構(gòu)內(nèi)部具有高度限定的極性部分和龐大的非極性部分。在實(shí)踐中，可以?xún)H通過(guò)實(shí)驗(yàn)“試差法”將可注射到身體中的生物相容分子選擇作為本發(fā)明的液晶硬化劑。作為結(jié)果，適合于本發(fā)明組合物的液晶硬化劑具有這樣的分子結(jié)構(gòu)，所述分子結(jié)構(gòu)彼此不同并且因而不能解釋為一種分子結(jié)構(gòu)。從全部選定的液晶硬化劑推斷的共同結(jié)構(gòu)特征是，它們沒(méi)有離子化的基團(tuán)，如羧基和胺基，并具有包括大的碳環(huán)結(jié)構(gòu)或三?；?5到40個(gè)碳原子的疏水部分。本發(fā)明的液晶硬化劑的優(yōu)選實(shí)例可以不含離子化的基團(tuán)，如羧基和胺基，并具有至多一個(gè)酯和-OH(羥基)基團(tuán)作為極性頭，并且具有包含大的碳環(huán)結(jié)構(gòu)或三酰基的20至40個(gè)碳原子的疏水部分。本發(fā)明的液晶硬化劑的優(yōu)選實(shí)例可包括，但不限于，甘油三酯、棕櫚酸視黃酯、生育酚乙酸酯、膽甾醇、苯甲酸芐酯和混合物。在本發(fā)明的組合物中，組分a)和b)之間的重量比為10:1至1:10，并且優(yōu)選為5:1至1:5。a)+b)與c)的重量比為100:1至1:1，并且優(yōu)選為50:1至2:1。形成所需的液晶，這樣重量比的組分保證有效的持續(xù)釋放。如本文所用，術(shù)語(yǔ)“水性液體”旨在包括水和體液，如粘膜液、淚液、汗液、唾液、胃腸液、血管外液、細(xì)胞外液、間質(zhì)液和血漿。當(dāng)與外部環(huán)境為水性流體所占的身體表面、區(qū)域或腔(例如在體內(nèi))進(jìn)行接觸時(shí)，本發(fā)明的組合物經(jīng)歷從溶膠狀液相到凝膠狀液晶相的轉(zhuǎn)變。即，本發(fā)明的組合物是這樣的預(yù)濃縮物，其在施用到人體以前作為液態(tài)存在并且在體內(nèi)轉(zhuǎn)變成允許持續(xù)釋放的液晶相。由本發(fā)明的組合物形成的液晶具有非層狀相結(jié)構(gòu)，其中油和水處于有序的混合物和排列中，其中在內(nèi)相和外相之間沒(méi)有差別。油和水的有序排列提供中間相的非層狀相結(jié)構(gòu)，這是液體和固體之間的物質(zhì)中間體的狀態(tài)。本發(fā)明的預(yù)濃縮物不同于已被廣泛應(yīng)用于設(shè)計(jì)藥物制劑的形成層狀結(jié)構(gòu)如膠束、乳劑、微乳劑、脂質(zhì)體和脂質(zhì)雙層的的常規(guī)組合物。這種層狀結(jié)構(gòu)是在水包油(O/W)或油包水(W/O)類(lèi)型中，其中在內(nèi)相和外相存在清楚的差別。如本文所用的術(shù)語(yǔ)“液體結(jié)晶”，是指在暴露于水性流體后從預(yù)濃縮物形成具有非層狀相結(jié)構(gòu)的液晶。本發(fā)明的脂質(zhì)預(yù)濃縮物可在室溫下由包含具有含至少兩個(gè)以上-OH(羥基)基團(tuán)的極性頭的至少一種脫水山梨醇不飽和脂肪酸酯、至少一種磷脂和至少一種液晶硬化劑的組合物制備，如果必要，通過(guò)加熱或使用均化器。均化器可以是高壓均化器、超聲均化器、珠磨(beadmill)均化器等。如上所述，因?yàn)楸景l(fā)明的脂質(zhì)預(yù)濃縮物可以是這樣的藥物組合物，其在沒(méi)有水性流體時(shí)作為液相存在并在身體中在水性流體存在下形成液晶，所以它可以使用選自以下的方法施用：注射、涂敷、滴注、填充、口服施用和噴霧。并且可以將本發(fā)明的預(yù)濃縮物制成各種劑型，包括注射劑、軟膏劑、凝膠劑、洗劑、膠囊劑、片劑、液體、混懸劑、噴霧劑、吸入劑、滴眼劑、粘合劑和貼劑。具體地，當(dāng)采取注射途徑時(shí)，本發(fā)明的預(yù)濃縮物可通過(guò)皮下或肌肉內(nèi)注射或取決于所使用的藥理學(xué)活性成分的性質(zhì)的其它注射途徑施用。適用于本發(fā)明的預(yù)濃縮物的藥理學(xué)活性成分可以選自蛋白質(zhì)、肽、疫苗、基因、非肽激素、合成化學(xué)品，和它們的組合。作為本發(fā)明的組合物中的藥理學(xué)活性成分的蛋白質(zhì)或肽的實(shí)例包括促紅細(xì)胞生成素、生長(zhǎng)激素(人、豬、牛等)、生長(zhǎng)激素釋放因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子、G-CSF、GM-CSF、M-CSF、凝血因子、胰島素、催產(chǎn)素、加壓素、促腎上腺皮質(zhì)激素、表皮生長(zhǎng)因子、源自血小板的生長(zhǎng)因子、催乳素、促生長(zhǎng)素抑制素、胰高血糖素、白介素-2(IL-2)、白介素-11(IL-11)、胃泌素、四肽胃泌素、五肽胃泌素、尿抑胃素、促胰液素、降鈣素、腦啡肽、內(nèi)啡肽、血管緊張素、促甲狀腺激素釋放激素、腫瘤壞死因子、腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)配體、肝素酶、骨形態(tài)發(fā)生蛋白(bonemorphogenicprotein)、hANP、胰高血糖素樣肽、凝乳酶、緩激肽、桿菌肽、多粘菌素、粘菌素、短桿菌酪肽、短桿菌肽、環(huán)孢素、聚乙二醇綴合蛋白質(zhì)和它們的合成類(lèi)似物、單克隆抗體、酶、細(xì)胞因子以及組合，但不限于此。非肽激素是一類(lèi)不屬于蛋白質(zhì)或肽的激素，并且可以選自，但不限于，睪酮、雌二醇、孕酮、前列腺素、非那雄胺(finateride)、度他雄胺(dutasteride)，其合成類(lèi)似物，以及它們的組合。本發(fā)明的預(yù)濃縮物內(nèi)包含的基因的實(shí)例包括質(zhì)粒DNA、siRNA、多核苷酸、寡脫氧核苷酸、反義寡核苷酸，以及它們的混合物，但不限于此。合成化學(xué)品可以選自：他克莫司(tacrolimus)、阿那托唑(anatrozole)、奧氮平(olanzapine)、阿立哌唑(aripiprazole)、利培酮(risperidone)、甲羥孕酮(medroxyprogesterone)、納曲酮(naltrexone)、甲氨蝶呤(methotrexate)、松醇(pinitol)、奧洛他定(olopatadine)、拉坦前列素(latanoprost)、阿奈可他(anecortave)、曲普瑞林雙羥萘酸鹽(triptorelinpamoate)、米諾地爾(minoxidil)、替勃龍(tibolone)、索利那辛(solifenacin)、他達(dá)拉非(tadalafil)、伐尼克蘭(varenicline)、羅匹尼羅(ropinirole)、芬太尼(fentanyl)、酮替芬(ketotifen)、孟魯司特(montelukast)及其組合，但不限于此。因此，根據(jù)其另一個(gè)方面，本發(fā)明提供藥物組合物，其包括：d)選自蛋白質(zhì)、肽、疫苗、基因、非肽激素、合成化學(xué)品和它們的組合的藥理學(xué)活性成分，以及本發(fā)明的脂質(zhì)預(yù)濃縮物。關(guān)于藥物組合物中使用的成分a)至c)和液晶的描述可參考關(guān)于脂質(zhì)預(yù)濃縮物所給出的那些。此外，藥物組合物的藥理學(xué)活性成分d)的描述可以與關(guān)于脂質(zhì)預(yù)濃縮物所給出的描述相同。藥物組合物可以?xún)?yōu)選配制成注射劑、軟膏劑、凝膠劑、洗劑、膠囊劑、片劑、液體、混懸劑、噴霧劑、吸入劑、滴眼劑、粘合劑和貼劑，但不限于此。更優(yōu)選地，它可被配制成注射劑。本發(fā)明的藥物組合物中的藥理學(xué)活性成分的含量取決于其種類(lèi)和所用的制劑而變化，并且其通常為0.0001至99重量％(基于藥物組合物的總重量)?？梢酝ㄟ^(guò)將藥理學(xué)活性成分添加到本發(fā)明的預(yù)濃縮物而制備本發(fā)明的藥物組合物。如果需要，熱或均化器可用于本發(fā)明的藥物組合物的制備，但是這不是對(duì)本發(fā)明的限制因素。本發(fā)明的藥物組合物的劑量遵循所使用的藥理學(xué)活性成分的公知的劑量，并且可根據(jù)各種因素，包括患者的病況、年齡和性別而變化。它可以經(jīng)口或經(jīng)腸胃外施用。根據(jù)其另一方面，本發(fā)明預(yù)期通過(guò)將本發(fā)明的藥物組合物施用到哺乳動(dòng)物(包括人)通過(guò)藥理學(xué)活性成分的持續(xù)釋放維持藥效的方法，以及藥物組合物用于藥理學(xué)活性成分的持續(xù)釋放的用途。發(fā)明的有益效果如迄今為止所述，基于脫水山梨醇不飽和脂肪酸酯的本發(fā)明的脂質(zhì)預(yù)濃縮物是高度安全的和可生物降解的，并且在不存在水性流體時(shí)作為液相存在而當(dāng)在身體內(nèi)暴露于水性流體后迅速轉(zhuǎn)變?yōu)橐壕?。因此，?dāng)與藥理學(xué)活性成分一起配制時(shí)，相比于固體顆粒相的常規(guī)持續(xù)釋放制劑，液相的預(yù)濃縮物改善患者的順應(yīng)性并表現(xiàn)出優(yōu)異的持續(xù)釋放，且沒(méi)有副作用如疼痛和炎癥。附圖說(shuō)明從下列結(jié)合附圖的詳述，將更清楚地理解本發(fā)明的上述和其它目的、特征和其它優(yōu)點(diǎn)，其中：圖1顯示實(shí)施例4和5以及比較例1至3的組合物的體內(nèi)生物降解性。圖2顯示實(shí)施例14的組合物的體外藥物釋放行為；圖3是顯示實(shí)施例16和比較例5的組合物的體內(nèi)藥物釋放行為的藥代動(dòng)力學(xué)特征曲線；圖4顯示實(shí)施例4和比較例4的組合物在暴露于水性流體后的相變；和圖5以冷凍TEM顯微照片顯示實(shí)施例4的組合物的液晶結(jié)構(gòu)。方面的實(shí)施方式下面的非限制性實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明的選擇實(shí)施方案。應(yīng)當(dāng)理解，顯示的組分的要素的比例和備選物的變化對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員將是顯而易見(jiàn)的并且在本發(fā)明的實(shí)施方案的范圍內(nèi)。在本發(fā)明中使用的添加劑和賦形劑滿足韓國(guó)藥典的要求并且購(gòu)自Aldrich、Lipoid和Croda。實(shí)施例1-11：脂質(zhì)預(yù)濃縮物的制備將具有含至少兩個(gè)-OH基團(tuán)的極性頭的脫水山梨醇不飽和脂肪酸酯、磷脂和液晶硬化劑以下表1中所示的重量比任選在溶劑中混合。在實(shí)施例1至4中，將成分在保持在25～45℃的水浴中用均化器(PowerGenmodel125.Fisher)在3,000rpm混合約10分鐘。將實(shí)施例5和6的成分在保持在30～50℃的水浴中攪拌3小時(shí)。在實(shí)施例7至11中，將成分在保持在45～75℃的水浴中用均化器(PowerGenmodel125.Fisher)在3,000rpm混合約20分鐘。其后，將所得的脂質(zhì)溶液在室溫放置以在25℃進(jìn)行熱平衡，之后將其加載到1cc一次性注射器中。將通過(guò)上述方法得到的脂質(zhì)預(yù)濃縮物注射到水(2克蒸餾水)中并形成液晶相。表1*LC：液晶.實(shí)施例12至21：含有藥理學(xué)活性成分的藥物組合物的制備將具有含至少兩個(gè)-OH基團(tuán)的極性頭的脫水山梨醇不飽和脂肪酸酯、磷脂和液晶硬化劑以下表2中所示的重量比混合。在實(shí)施例12至15中，將成分在保持在30～60℃的水浴中使用均化器(PowerGenmodel125.Fisher)在3,000rpm混合約10分鐘。在實(shí)施例16至21中，將成分在保持在25～50℃的水浴中使用均化器(PowerGenmodel125.Fisher)在3,000rpm混合約5分鐘。將所得的脂質(zhì)溶液在室溫下放置以在25℃造成熱平衡，隨后向其中加入藥理學(xué)活性成分。作為藥理學(xué)活性成分，使用基因藥物siRNA(Bioneer)和熒光綴合的siRNA(Invitrogen，Block-iTFluorescentoligo)、肽藥物艾塞那肽(exenatide)(Teva)以及合成的藥物坦洛新(tamsulosin)(Lekpharmaceuticals)。隨后，使用均化器將成分在3,000rpm均化約5分鐘以得到在溶液相中的藥物組合物。在基因藥物(siRNA，熒光綴合的siRNA)的情況中，將其以表2中所示的量與在蒸餾水中的脫乙酰殼多糖的溶液一起混合以形成復(fù)合物，之后施用到脂質(zhì)溶液。表2比較例1至4在比較例1至3中，二油基甘油酯(一類(lèi)二?；视王?以表3中所示的量與磷脂酰膽堿、生育酚和/或乙醇一起使用，然后在均化器(PowerGenmodel125.Fisher)中以3,000rpm均化約10分鐘。在比較例4中，聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯、磷脂酰膽堿和生育酚乙酸酯以表3中所示的量使用，接著在均化器中以3,000rpm均化約30分鐘。這里，聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯具有取代了脫水山梨醇極性頭上的-OH基團(tuán)的聚氧乙烯基并且不同于本發(fā)明中使用的脫水山梨醇單油酸酯。由于大的聚氧乙烯部分，聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯通常用作親水表面活性劑或乳化劑。表3比較例5向1mL生理鹽水加入20μg的艾塞那肽，接著在室溫下均化。實(shí)驗(yàn)例1：體外安全的比較本發(fā)明的組合物的安全性是通過(guò)執(zhí)行如下的提取集落測(cè)定細(xì)胞毒性試驗(yàn)體外檢測(cè)的。在18mL補(bǔ)充有10％胎牛血清的Eagle最低必需培養(yǎng)基(EMEM)中，提取2克實(shí)施例1、4和比較例1和2的組合物中的每個(gè)。將L929細(xì)胞(小鼠成纖維細(xì)胞，美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(AmericanTypeCultureCollection))以1×102個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種到6孔板中并在5％CO2加濕培養(yǎng)箱中在37℃溫育24小時(shí)。將提取物稀釋在EMEM(0、5、25、50％)中，然后以2mL/孔的量與穩(wěn)定化的L929細(xì)胞接觸放置。在5％CO2加濕培養(yǎng)箱中在37℃溫育7天以后，將細(xì)胞用10％福爾馬林溶液固定并用Giemsa溶液染色以計(jì)數(shù)集落。結(jié)果總結(jié)在下面的表4中。表4*相對(duì)集落形成率(％)＝測(cè)試培養(yǎng)基上的集落數(shù)/0％培養(yǎng)基上的集落數(shù)×100(％)**提取物培養(yǎng)基％＝提取物培養(yǎng)基/(稀釋培養(yǎng)基+提取物培養(yǎng)基)×100(％)如從表4可以看出，相比于施用比較例1和2的組合物的那些，施用實(shí)施例1和4的組合物的組在全部稀釋培養(yǎng)基(5％、25％和50％)上顯示顯著高的細(xì)胞生長(zhǎng)率，說(shuō)明本發(fā)明的組合物(脂質(zhì)預(yù)濃縮物)遠(yuǎn)比常規(guī)組合物(國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)WO2005/117830中公開(kāi)的)更安全。實(shí)驗(yàn)例2：體內(nèi)生物降解性的比較在下面的實(shí)驗(yàn)中評(píng)價(jià)本發(fā)明的組合物的體內(nèi)生物降解性。將實(shí)施例4和5的組合物中的每個(gè)以400mg的劑量皮下注射到SD大鼠的背部，并進(jìn)行監(jiān)測(cè)達(dá)預(yù)定的時(shí)間。為了比較，以相同方式測(cè)試比較例1至3的組合物。注射后兩周給注射部位拍照并且示于圖1中。如圖1中可以看到，觀察到實(shí)施例4和5的組合物大部分被生物降解，幾乎不產(chǎn)生刺激的感覺(jué)，而比較例1至3的組合物保持它們的原始體積的三分之一至三分之二。因此，相對(duì)于比較例1至3的組合物(國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)WO2005/117830)，實(shí)施例4和5的組合物表現(xiàn)顯著高的生物降解性。供參考，已知廣泛地用于持續(xù)釋放的常規(guī)材料PLGA[聚乳酸-乙醇酸共聚物]即使在兩個(gè)或三個(gè)月后在體內(nèi)也保持未降解。因此，本發(fā)明的脂質(zhì)預(yù)濃縮物克服的問(wèn)題是，即使在其完全釋放藥物后，常規(guī)載體系統(tǒng)由于其低的生物降解性仍然保持在體內(nèi)。實(shí)驗(yàn)例3：持續(xù)釋放的體外試驗(yàn)在下列試驗(yàn)中在體外檢驗(yàn)本發(fā)明的組合物的藥物釋放行為。將前列腺癌細(xì)胞(前列腺癌-3，韓國(guó)細(xì)胞系銀行)以5×104個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種到transwell板并在5％CO2增濕培養(yǎng)箱中在37℃溫育2天。將實(shí)施例14的組合物以100mg的量加入到含有3mL的補(bǔ)充有10％胎牛血清的RPMI1640的transwell插入物。使用熒光顯微鏡(EclipseTi-S，尼康)測(cè)定從實(shí)施例14的組合物發(fā)射的熒光，同時(shí)每24小時(shí)將插入物施用到transwell板達(dá)7天。其結(jié)果示于圖2中。使用微分干涉相襯(DIC)顯微術(shù)拍攝圖2的左側(cè)的照片，而右側(cè)的照片顯示熒光綴合的siRNA的細(xì)胞內(nèi)攝取。如從圖2中的數(shù)據(jù)所理解，本發(fā)明的組合物不變地釋放藥理學(xué)活性成分達(dá)至少7天。實(shí)驗(yàn)例4：持續(xù)釋放的體內(nèi)試驗(yàn)在以下試驗(yàn)中體內(nèi)檢驗(yàn)本發(fā)明的組合物的藥物釋放行為。將實(shí)施例16的組合物以對(duì)應(yīng)于140μg/kg的艾塞那肽的劑量皮下注射到6只9周齡、平均體重為300g的SD大鼠(雄性)中。使用市售的試劑盒(免疫測(cè)定試劑盒，Bachem)監(jiān)測(cè)取自SD大鼠的血漿樣品中的艾塞那肽濃度達(dá)14天，以畫(huà)出PK特征曲線(profile)(藥代動(dòng)力學(xué)特征曲線)，如圖3中所示。為了比較，以對(duì)應(yīng)于10μg/kg的艾塞那肽的劑量施用比較例5的組合物(在本文中，實(shí)施例16的艾塞那肽的劑量為比較例5的艾塞那肽的劑量的14倍的原因是，持續(xù)釋放制劑的1周劑量(7天)對(duì)應(yīng)于一般注射劑量的14倍(因?yàn)槊刻焓褂脙纱?)。如圖3中所示，相比于作為一般注射的比較例1的組合物，實(shí)施例16的組合物使生物活性成分的體內(nèi)半衰期增加約25倍，證明其優(yōu)異的持續(xù)釋放效果(在圖3中，繪制6只大鼠所取的測(cè)量的平均)。實(shí)驗(yàn)例5：藥理作用的體內(nèi)試驗(yàn)在以下試驗(yàn)中評(píng)價(jià)本發(fā)明的組合物的藥理學(xué)作用。將含有可誘發(fā)體重減輕的艾塞那肽(抗糖尿病藥)的實(shí)施例16的組合物以對(duì)應(yīng)于140μg/kg艾塞那肽的劑量皮下注射到6只9周齡、平均體重為300克的SD大鼠(雄性)中。在第0天和第14天計(jì)算平均重量并且結(jié)果在下表5中給出。表5實(shí)施例16(g)生理鹽水(g)第0天303308第14天356379重量改變(％)*75100(*重量改變(％)＝施用實(shí)施例16的組合物(g)的組的重量改變/施用生理鹽水(g)的組的重量改變×100)如表5中所示，相比施用生理鹽水的組的重量，施用實(shí)施例16的組合物的組經(jīng)歷了約25％的重量損失達(dá)兩周。因此，通過(guò)持續(xù)釋放的體內(nèi)試驗(yàn)，本發(fā)明的持續(xù)釋放組合物確保生物活性成分的長(zhǎng)效體內(nèi)藥理學(xué)效力以及顯著增加的半衰期(實(shí)驗(yàn)例4)。實(shí)驗(yàn)例6：水性流體中液晶的形成在以下試驗(yàn)中評(píng)價(jià)本發(fā)明的組合物在水相中形成液晶的能力。在加載到注射器以后，將實(shí)施例4和比較例4的組合物滴入到2g的PBS(pH7.4)中并且結(jié)果示于圖4中?；诰哂泻辽賰蓚€(gè)-OH(羥基)基團(tuán)的極性頭的脫水山梨醇不飽和脂肪酸酯(脫水山梨醇單油酸酯)的實(shí)施例4的組合物在不存在水性流體時(shí)作為液相存在，但是在暴露于水性流體后形成液晶。另一方面，基于聚氧乙烯脫水山梨醇不飽和脂肪酸酯(聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯)的比較例4的組合物在PBS中作為液相存在并分散，但即使在暴露于水性流體后也不形成液晶。因此，在水性流體存在下，如在體內(nèi)的環(huán)境中，僅本發(fā)明的組合物迅速形成有助于持續(xù)釋放效果的液晶。在液晶內(nèi)，存在大量類(lèi)似于莫比烏斯帶的納米尺寸(20nm以下)的雙連續(xù)水通道。水通道被雙連續(xù)的脂質(zhì)層環(huán)繞。因此，一旦脂質(zhì)組合物形成半固相的液晶，藥理學(xué)活性物質(zhì)可以?xún)H在它已經(jīng)通過(guò)大量水通道和脂質(zhì)層以后從液晶結(jié)構(gòu)釋放，這提高了藥理學(xué)活性物質(zhì)的持續(xù)釋放效果。因此，本發(fā)明的組合物可以應(yīng)用到持續(xù)釋放藥物制劑。實(shí)驗(yàn)例7：使用冷凍TEM測(cè)定液晶的內(nèi)部結(jié)構(gòu)在以下實(shí)驗(yàn)中檢驗(yàn)了本發(fā)明的組合物的液晶的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。將液相的實(shí)施例4的組合物滴至2克水以產(chǎn)生液晶結(jié)構(gòu)。使用均化器，使水相中的液晶充分分散并在室溫保持在平衡態(tài)直到分析。將稀釋的液晶吸附到網(wǎng)格(grid)上并冷凍，隨后在冷凍透射電子顯微鏡(CryoTecaiF20G2，F(xiàn)EI)中檢驗(yàn)結(jié)構(gòu)。結(jié)果示于圖5中。如在圖5的照片中所示，觀察到液晶具有晶體結(jié)構(gòu)如立方相或六角相。一般，層狀結(jié)構(gòu)如膠束、乳劑、微乳、脂質(zhì)體等，通常以完整的球形狀態(tài)存在，而根據(jù)本發(fā)明的組合物的非層狀結(jié)構(gòu)采取具有一定角度的有序形式，這相當(dāng)不同于球體形式。雖然關(guān)于一個(gè)或多個(gè)實(shí)施說(shuō)明并描述了本發(fā)明，其它技術(shù)人員在閱讀和理解該說(shuō)明書(shū)和附圖時(shí)將想到等效的改變和修改。此外，雖然本發(fā)明的特定特征可能已經(jīng)僅相對(duì)于數(shù)個(gè)實(shí)現(xiàn)中的一個(gè)所披露，這樣的特征可以與如可能是期望的和有利于任何給定或特定的應(yīng)用的其它實(shí)現(xiàn)的一個(gè)或多個(gè)其它特征結(jié)合。