本申請(qǐng)是申請(qǐng)日為2012年2月2日、發(fā)明名稱為“受試者的選擇和治療”、申請(qǐng)?zhí)枮?01280007444.7(pct申請(qǐng)?zhí)杙ct/us2012/023590)的中國(guó)專利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。

相關(guān)申請(qǐng)

本申請(qǐng)要求2011年2月3日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)no.61/439,348和2011年6月17日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)no.61/498,263的權(quán)益。將兩個(gè)先前的申請(qǐng)通過(guò)引用整體并入本文。

發(fā)明領(lǐng)域

本申請(qǐng)涉及選擇受試者的方法和利用抗-vla-1抗體治療受試者的方法。

發(fā)明背景

整聯(lián)蛋白是介導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞和細(xì)胞-基質(zhì)粘附的細(xì)胞表面受體的超家族。此類異二聚體蛋白質(zhì)(由兩個(gè)非共價(jià)連接的多肽鏈α和β鏈組成)在發(fā)育和組織修復(fù)過(guò)程中為細(xì)胞生長(zhǎng)、遷移和分化提供了固著以及信號(hào)。整聯(lián)蛋白還牽涉免疫和炎性過(guò)程，所述過(guò)程需要使細(xì)胞外滲出血管，進(jìn)入組織并且朝向感染位置。

vla-1(也稱為αlβl)屬于稱為vla(“極晚期抗原”)整聯(lián)蛋白的一類整聯(lián)蛋白。vla-1結(jié)合膠原(i型和iv型)和層粘連蛋白，其牽涉細(xì)胞在膠原上的粘著和遷移；膠原基質(zhì)的收縮和重組織；和參與細(xì)胞外基質(zhì)重塑的基因的表達(dá)的調(diào)控。

已顯示vla-1參與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、與骨質(zhì)吸收相關(guān)的慢性炎性疾病的發(fā)生?；颊叩年P(guān)節(jié)炎滑膜中的浸潤(rùn)t細(xì)胞表達(dá)高水平的vla-1，利用抗體阻斷其顯著地減少動(dòng)物模型的炎癥反應(yīng)和關(guān)節(jié)炎的發(fā)生。

發(fā)明概述

本發(fā)明至少部分基于利用抗-vla-1抗體治療受試者的新型改進(jìn)的方法的發(fā)現(xiàn)。在一個(gè)方面，本發(fā)明表征了其中如果患者先前已接受利用至少一種第一治療劑的治療并且任選地患者對(duì)第一治療劑的反應(yīng)不能滿足預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，則將受試者，例如患有炎性病癥例如關(guān)節(jié)炎的患者選擇作為接受利用抗-vla-1抗體的治療的候選者的方法。例如，患者可以在給定的量的時(shí)間后，例如在兩周或一個(gè)月或兩個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間過(guò)程后不能經(jīng)歷關(guān)節(jié)炎癥狀的緩解。如果患者對(duì)第一治療劑的反應(yīng)確實(shí)滿足預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)或反應(yīng)水平，則患者通常不被選擇來(lái)接受利用抗-vla-1抗體的治療。

在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)(i)患者未能改善關(guān)節(jié)炎癥狀；(ii)患者停止改善關(guān)節(jié)炎癥狀；或(iii)患者經(jīng)歷關(guān)節(jié)炎癥狀的惡化時(shí)，患者不滿足預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)。關(guān)節(jié)炎癥狀的改善可以表現(xiàn)為例如腫脹關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)或壓痛關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)的減少。關(guān)節(jié)炎癥狀的惡化可表現(xiàn)為腫脹關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)或壓痛關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)的增加。癥狀的改善或惡化還可通過(guò)在第一試劑施用后由患者報(bào)導(dǎo)的疼痛的量，通過(guò)患者的血液中鑒定的rf(類風(fēng)濕因子)的量，或從患者收集的關(guān)節(jié)滑液的性質(zhì)來(lái)測(cè)定。例如，癥狀的改善可通過(guò)關(guān)節(jié)滑液中白細(xì)胞(wbc)或外周血單核細(xì)胞(pmn)數(shù)目的減少來(lái)表示。

可給受試者，例如鑒定為接受通過(guò)本文中描述的方法利用抗-vla-1抗體進(jìn)行治療的候選者的患者，施用抗-vla-1抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，患者患有關(guān)節(jié)炎例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，患者在被選擇來(lái)接受利用抗-vla-1抗體的治療之前接受患有關(guān)節(jié)炎至少6個(gè)月的診斷。在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者患有炎性腸病(ibd)，例如潰瘍性結(jié)腸炎或克羅恩病，并且患者在被選擇來(lái)接受利用抗-vla-1抗體的治療之前接受患有ibd至少6個(gè)月的診斷。

在一個(gè)實(shí)施方案中，第一治療劑是dmard(緩解疾病的抗風(fēng)濕性藥物(diseasemodifyingantirheumaticdrug))，例如金鹽；羥氯喹；抗葉酸劑，例如甲氨蝶呤；嘧啶合成抑制劑，例如來(lái)氟米特；或磺胺藥，例如柳氮磺胺吡啶。例如，dmard可以是甲氨蝶呤，以25mg/周或更少的劑量施用；來(lái)氟米特，以20mg/日或更少的劑量施用；柳氮磺胺吡啶，以3000mg/日或更少的劑量施用；或羥氯喹，以400mg/日或更少的劑量施用。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，第一治療劑是tnf-α抑制劑，例如抗-tnf-α抗體，例如英夫利昔單抗、阿達(dá)木單抗、培化舍珠單抗或戈利木單抗；或融合蛋白依那西普。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，第一治療劑是vla-2的抑制劑，例如抗-vla-2抗體，例如gbr500。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，第一治療劑是整聯(lián)蛋白的抑制劑，例如madcam-1(粘膜血管地址素細(xì)胞粘附分子-1(mucosalvascularaddressincelladhesionmolecule-1)，α4β7整聯(lián)蛋白)。madcam-1抑制劑可以是抗-madcam-1抗體，例如維多珠單抗(mln0002,millenniumpharmaceuticals,cambridge,ma)。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，患者具有炎性腸病，并且患者在接受利用抗-vla-1抗體的治療之前對(duì)利用抗-madcam-1抗體的治療具有不充分的反應(yīng)。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，第一治療劑是b細(xì)胞消耗劑，例如抗-cd20抗體，例如利妥昔單抗(rituxan,genentech,inc.,southsanfrancisco,ca；和idecpharmaceutical,sandiego,ca)。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，第一治療劑是janus激酶(jak)家族成員或脾酪氨酸激酶(syk)家族成員的抑制劑。jak家族成員包括jak1、jak2、jak3和tyk2，并且syk家族成員包括syk和zap-70。在一個(gè)實(shí)施方案中，第一治療劑是jak3的抑制劑，例如小分子抑制劑cp-690,550(托法替尼(tofacitinib))。在另一個(gè)實(shí)施方案中，第一治療劑是syk抑制劑，例如小分子抑制劑r406或其前體藥物r788。

在一個(gè)實(shí)施方案中，在施用抗-vla-1抗體之前停止第一治療劑的施用。例如，在施用抗-vla-1抗體之前至少2周、至少3周、至少4周、至少5周或更長(zhǎng)時(shí)間停止第一治療劑的施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，在患者已從身體清除治療量的第一治療劑之前不給患者施用抗-vla-1抗體。類似地，當(dāng)患者在體內(nèi)具有治療水平的抗-vla-1抗體時(shí)可以不給患者施用第一治療劑。

在一些實(shí)施方案中，當(dāng)施用抗-vla-1抗體時(shí)，患者繼續(xù)接受第一治療劑。例如，當(dāng)施用抗-vla-1抗體時(shí)，患者可繼續(xù)接受dmard或超過(guò)一種dmard。在其它實(shí)施方案中，在接受利用抗-vla-1抗體的治療的同時(shí)，患者將不接受超過(guò)一種dmard。在一個(gè)實(shí)施方案中，在接受利用抗-vla-1抗體的治療同時(shí)，患者接受利用dmard和羥氯喹的治療。

在一個(gè)實(shí)施方案中，在施用抗-vla-1抗體療法后，患者接受第一治療劑的施用，或選擇施用以便在患者中維持抗體和第一治療劑的治療水平。例如，可將抗體和第一治療劑在體內(nèi)維持至少1天、至少2天、至少5天或至少10天或更長(zhǎng)時(shí)間。

在一個(gè)實(shí)施方案中，患者繼續(xù)接受利用第一治療劑的治療，所述第一治療劑是例如甲氨蝶呤、來(lái)氟米特、柳氮磺胺吡啶或羥氯喹，同時(shí)還給患者施用抗-vla-1抗體。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，第一治療劑是甲氨蝶呤，以35mg/周、30mg/周、25mg/周、20mg/周或15mg/周或更少的劑量施用甲氨蝶呤，同時(shí)還給患者施用抗-vla-1抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，第一治療劑是來(lái)氟米特，以30mg/日、25mg/日、20mg/日、15mg/日、10mg/日或更少的劑量施用來(lái)氟米特，同時(shí)還給患者施用抗-vla-1抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，第一治療劑是柳氮磺胺吡啶，以4000mg/日、3500mg/日、3000mg/日、2500mg/日、2000mg/日或更少的劑量施用柳氮磺胺吡啶，同時(shí)還給患者施用抗-vla-1抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，第一治療劑是羥氯喹，以500mg/日、450mg/日、400mg/日、350mg/日、300mg/日或更少的劑量施用羥氯喹，同時(shí)還給患者施用抗-vla-1抗體。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，第一治療劑是羥氯喹，還給患者施用第二dmard，同時(shí)給患者施用抗-vla-1抗體。

在一個(gè)實(shí)施方案中，患者繼續(xù)接受利用第一治療劑的治療，所述第一治療劑是抗-madcam-1抗體，例如維多珠單抗，同時(shí)還給患者施用抗-vla-1抗體。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)適當(dāng)?shù)氖┯猛緩嚼缤ㄟ^(guò)靜脈內(nèi)(iv)注射，每2周1次以20mg/kg、15mg/kg、10mg/kg、6mg/kg、2mg/kg或更少的劑量施用抗-madcam-1抗體，同時(shí)還給患者施用抗-vla-1抗體。

在一個(gè)實(shí)施方案中，抗-vla-1抗體包括包含seqidno:1的序列的輕鏈多肽和包含seqidno:2的序列的重鏈多肽。例如，抗-vla-1抗體可包括包含seqidno:3的序列的輕鏈多肽和包含seqidno:4的序列的重鏈多肽。

在一個(gè)實(shí)施方案中，抗-vla-1抗體結(jié)合與具有包含seqidno:1的序列的輕鏈多肽和包含seqidno:2的序列的重鏈多肽的抗體所結(jié)合的表位相同的表位。

在一個(gè)實(shí)施方案中，提供了利用抗-vla-1抗體治療患者的方法，其中患者先前已施用了第一治療劑，并且其中評(píng)價(jià)對(duì)第一治療劑的反應(yīng)，并且將所述反應(yīng)確定為不充分的。方法包括給患者施用有效量的抗-vla-1抗體。如果例如，(i)患者未能改善癥狀；(ii)患者停止改善癥狀；或(iii)患者經(jīng)歷癥狀的惡化，則反應(yīng)被確定為不充分的。

例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，患者患有關(guān)節(jié)炎例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，如果(i)患者未能改善關(guān)節(jié)炎癥狀；(ii)患者停止改善關(guān)節(jié)炎癥狀；或(iii)患者經(jīng)歷關(guān)節(jié)癥狀的惡化，則反應(yīng)被確定為不充分的。

關(guān)節(jié)炎癥狀的改善可表現(xiàn)為腫脹關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)或壓痛關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)的減少，關(guān)節(jié)炎癥狀的惡化可表現(xiàn)為腫脹關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)或壓痛關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)的增加。在一個(gè)實(shí)施方案中，患者患有ibd，例如潰瘍性結(jié)腸炎或克羅恩病，如果(i)患者未能改善ibd癥狀；(ii)患者停止改善ibd癥狀；或(iii)患者經(jīng)歷ibd癥狀的惡化，則反應(yīng)被確定為不充分的。

在一個(gè)實(shí)施方案中，第一治療劑是dmard例如金鹽；羥氯喹；抗葉酸劑，例如甲氨蝶呤；嘧啶合成抑制劑，例如來(lái)氟米特；或磺胺藥，例如柳氮磺胺吡啶。在其它實(shí)施方案中，第一治療劑是tnf-α抑制劑、jak抑制劑或syk抑制劑、抗-vla-2抗體，例如gbr500；抗-madcam-1抗體，例如維多珠單抗；或抗-cd20抗體，例如利妥昔單抗。

在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明表征了利用抗-vla-1抗體治療患者的方法，其中患者先前已施用了第一治療劑，并且其中對(duì)第一治療劑的反應(yīng)是不充分的。方法包括給患者施用有效量的抗-vla-1抗體。

在一個(gè)實(shí)施方案中，提供了利用抗-vla-1抗體治療患者的方法，其中患者先前已施用了第一治療劑，并且響應(yīng)患者對(duì)第一治療劑的反應(yīng)的負(fù)面評(píng)價(jià)，例如反應(yīng)不能滿足預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)的評(píng)價(jià)，給患者施用有效量的抗-vla-1抗體?？芍苯踊蜷g接獲取負(fù)面評(píng)價(jià)。

在一個(gè)實(shí)施方案中，提供了治療患者的方法，所述方法包括施用第一治療劑，所述第一試劑是抗-vla-1抗體，和第二試劑，其中施用第一和第二治療劑對(duì)于治療患者的關(guān)節(jié)炎是有效的。第二治療劑可以是例如dmard、tnf-α抑制劑、jak抑制劑(例如，jak1、jak2、jak3或tyk2的抑制劑)、syk抑制劑(例如，syk或zap-70的抑制劑)、vla-2抑制劑、il-6抑制劑、il-17抑制劑、il-12/il-23抑制劑、madcam-1抑制劑、cd20抑制劑或另一種生物制劑。例如，第二治療劑可以是甲氨蝶呤、來(lái)氟米特、柳氮磺胺吡啶或羥氯喹、gbr500、英夫利昔單抗、阿達(dá)木單抗、培化舍珠單抗、戈利木單抗、依那西普、利妥昔單抗、托珠單抗(tocilizumab)、阿巴他塞或維多珠單抗。

在一個(gè)實(shí)施方案中，第二治療劑是甲氨蝶呤，以35mg/周、30mg/周、25mg/周、20mg/周或15mg/周或更少的劑量施用。在另一個(gè)實(shí)施方案中，第二治療劑是來(lái)氟米特，以30mg/日、25mg/日、20mg/日、15mg/日、10mg/日或更少的劑量施用。在另一個(gè)實(shí)施方案中，第二治療劑是柳氮磺胺吡啶，以4000mg/日、3500mg/日、3000mg/日、2500mg/日、2000mg/日或更少的劑量施用。在另一個(gè)實(shí)施方案中，第二治療劑是羥氯喹，以500mg/日、450mg/日、400mg/日、350mg/日、300mg/日或更少的劑量施用。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，第二治療劑是抗體，例如抗-madcam-1抗體，例如維多珠單抗，通過(guò)適當(dāng)?shù)氖┯猛緩?，例如通過(guò)靜脈內(nèi)(iv)注射，每2周一次，以例如20mg/kg、15mg/kg、10mg/kg、6mg/kg、2mg/kg或更少的劑量施用抗體。

在一個(gè)實(shí)施方案中，給患者施用第三治療劑，其可以是例如dmard，例如金鹽；羥氯喹；抗葉酸劑，例如甲氨蝶呤；嘧啶合成抑制劑，例如來(lái)氟米特；或磺胺藥，例如柳氮磺胺吡啶；tnf-α抑制劑，例如抗-tnf-α抗體，例如英夫利昔單抗、阿達(dá)木單抗、培化舍珠單抗或戈利木單抗；或融合蛋白依那西普；vla-2抑制劑，例如抗-vla-2抗體，例如gbr500；madcam-1抑制劑，例如抗-madcam-1抗體，例如維多珠單抗；b細(xì)胞消耗劑，例如cd20抑制劑，例如抗-cd20抗體，例如利妥昔單抗；jak抑制劑，例如托法替尼；或syk抑制劑，例如r406或前體藥物r788。在一個(gè)實(shí)施方案中，患者具有ibd，例如潰瘍性結(jié)腸炎或克羅恩病，并且第二治療劑或第三治療劑是madcam-1抑制劑，例如抗-madcam-1抗體，例如維多珠單抗。

在一個(gè)實(shí)施方案中，第一和第二以及任選地第三治療劑的施用導(dǎo)致比在單獨(dú)施用第一或第二(或第三)治療劑后觀察到的癥狀的更大改善。

在一個(gè)實(shí)施方案中，提供了選擇患者作為接受利用抗-vla-1抗體的治療的候選者的方法，其中患者先前已施用了第一治療劑。方法包括對(duì)患者樣品進(jìn)行測(cè)試以評(píng)價(jià)患者對(duì)第一治療劑的反應(yīng)，如果患者對(duì)第一治療劑的反應(yīng)不能滿足預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，則選擇患者作為利用抗-vla-1抗體的治療的候選者。如果患者對(duì)第一治療劑的反應(yīng)確實(shí)滿足預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，則確定不將患者作為接受利用抗-vla-1抗體的治療的候選者。患者可具有關(guān)節(jié)炎例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

如果(i)患者未能改善關(guān)節(jié)炎癥狀；(ii)患者停止改善關(guān)節(jié)炎癥狀；或(iii)患者經(jīng)歷關(guān)節(jié)炎癥狀的惡化，則患者可被選擇為利用抗-vla-1抗體進(jìn)行治療的候選者。

關(guān)節(jié)炎癥狀的改善可表現(xiàn)為腫脹關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)或壓痛關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)的減少，關(guān)節(jié)炎癥狀的惡化可表現(xiàn)為腫脹關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)或壓痛關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)的增加。

在一個(gè)實(shí)施方案中，給被選擇作為進(jìn)行利用抗體的治療的候選者的患者施用有效量的抗-vla-1抗體。

在一個(gè)方面，本發(fā)明表征在將患者選擇或分類為接受利用抗-vla-1抗體的治療的候選者的方法，其中患者先前已施用了第一治療劑。方法包括評(píng)價(jià)患者對(duì)第一治療劑的反應(yīng)，如果患者不滿足預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，則將患者選擇或分類為利用抗-vla1抗體進(jìn)行治療的候選者。如果反應(yīng)確實(shí)滿足預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，則不將患者選擇或分類為接受利用抗-vla-1抗體的治療的候選者。評(píng)價(jià)患者的反應(yīng)可包括分析來(lái)自患者的樣品，例如組織或關(guān)節(jié)液樣品。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了通過(guò)給患者施用第一治療劑治療患者的方法，其中第一治療劑是抗-vla-1抗體，并且還給患者施用第二治療劑，其中第二治療劑是抗炎劑。第一和第二治療劑的施用對(duì)于治療患者的炎性疾病，例如關(guān)節(jié)炎，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是有效的。

在一個(gè)實(shí)施方案中，第二治療劑是甲氨蝶呤、來(lái)氟米特、柳氮磺胺吡啶或羥氯喹。例如，第二治療劑可以是甲氨蝶呤，以例如35mg/周、30mg/周、25mg/周、20mg/周、或15mg/周或更少的劑量施用；第二治療劑可以是來(lái)氟米特，以例如30mg/日、25mg/日、20mg/日、15mg/日、10mg/日或更少的劑量施用；第二治療劑可以是柳氮磺胺吡啶，以例如4000mg/日、3500mg/日、3000mg/日、2500mg/日、2000mg/日或更少的劑量施用；或第二治療劑可以是羥氯喹，以例如500mg/日、450mg/日、400mg/日、350mg/日、300mg/日或更少的劑量施用。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，給患者施用第三治療劑，例如dmard，例如金鹽；羥氯喹；抗葉酸劑，例如甲氨蝶呤；嘧啶合成抑制劑，例如來(lái)氟米特；或磺胺藥，例如柳氮磺胺吡啶；tnf-α抑制劑，例如抗-tnf-α抗體，例如英夫利昔單抗、阿達(dá)木單抗、培化舍珠單抗或戈利木單抗；或融合蛋白依那西普；vla-2抑制劑，例如抗-vla-2抗體，例如gbr500；madcam-1抑制劑，例如抗-madcam-1抗體，例如維多珠單抗；b細(xì)胞消耗劑，例如cd20抑制劑，例如抗-cd20抗體，例如利妥昔單抗；jak抑制劑，例如托法替尼；或syk抑制劑，例如r406，或前體藥物r788。通常，第一、第二和第三試劑彼此不同。

在一個(gè)實(shí)施方案中，患者患有ibd，例如潰瘍性結(jié)腸炎或克羅恩病，并且第二治療劑或第三治療劑是madcam-1抑制劑，例如抗-madcam-1抗體，例如維多珠單抗。

在一個(gè)實(shí)施方案中，第一和第二治療劑的施用導(dǎo)致比在單獨(dú)施用第一或第二治療劑時(shí)癥狀(例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或ibd的癥狀)的更大改善。

除非另外定義，否則本文中使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語(yǔ)具有與由本發(fā)明所屬領(lǐng)域內(nèi)技術(shù)人員通常理解的含義相同的含義。雖然可將與本文中描述的方法和材料相似或等同的方法和材料用于實(shí)施或測(cè)試本發(fā)明，但在下文中描述了適當(dāng)?shù)姆椒ê筒牧?。本文中提及的所有出版物、專利申?qǐng)、專利和其它參考文獻(xiàn)通過(guò)引用整體并入本文。在矛盾的情況下，以本說(shuō)明書(shū)，包括定義為準(zhǔn)。此外，材料、方法和實(shí)施例僅僅是舉例說(shuō)明性的而并非旨在限制。

本發(fā)明的一個(gè)或多個(gè)實(shí)施方案的內(nèi)容示于下文中的附圖和描述中。根據(jù)描述和附圖以及根據(jù)權(quán)利要求，本發(fā)明的其它特征、主題和有利方面將變得顯而易見(jiàn)。

附圖簡(jiǎn)述

圖1a和1b分別是抗-vla-1抗體的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域序列(seqidno:1)和重鏈可變結(jié)構(gòu)域序列(seqidno:2)。此類序列分別包括輕鏈和重鏈cdr。

圖2a和2b分別是抗-vla-1抗體的輕鏈多肽(seqidno:3)和重鏈多肽(seqidno:4)序列。

詳述

本發(fā)明至少部分基于利用抗-vla-1抗體治療患者的新型改進(jìn)方法的發(fā)現(xiàn)。因此，在一個(gè)方法中，使已接受第一療法一定時(shí)間的患者轉(zhuǎn)換至不同療法，所述療法包括利用抗-vla-1抗體的治療。如果例如患者不能實(shí)現(xiàn)或維持預(yù)先選擇水平的對(duì)利用一線療法的治療的反應(yīng)的改善，或停止對(duì)一線療法的反應(yīng)，則患者被選擇用于利用抗-vla-1抗體進(jìn)行治療。例如，在施用一線療法后，患者可以不滿足改善的預(yù)先選擇的標(biāo)準(zhǔn)，或顯示不可接受的水平的癥狀，或不滿足癥狀的預(yù)先選擇的標(biāo)準(zhǔn)。在一些情況下，患者在被選擇來(lái)利用抗-vla-1抗體進(jìn)行治療之前，已接受超過(guò)一種療法。在一個(gè)實(shí)施方案中，利用超過(guò)一種現(xiàn)有療法，患者不能實(shí)現(xiàn)或維持預(yù)先選擇的水平的改善。例如，在利用超過(guò)一種現(xiàn)有療法治療后，患者可以不滿足預(yù)先選擇的水平的改善或顯示不可接受水平的癥狀，或不滿足癥狀的預(yù)先選擇的標(biāo)準(zhǔn)。在此類情況下，患者可被分類為對(duì)一線療法，或?qū)σ环N或多種現(xiàn)有療法的不充分反應(yīng)者，或可被分類為在施用一線療法或一種或多種現(xiàn)有療法后已接受負(fù)面評(píng)價(jià)的患者。不能對(duì)一種或多種現(xiàn)有療法反應(yīng)的患者可被診斷為患有難治性疾病，例如難治性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

如本文中所用，“不能實(shí)現(xiàn)”充分反應(yīng)的受試者意指在治療過(guò)程中從未顯示預(yù)先選擇的水平的改善的受試者。如本文中所用，“停止顯示”或“停止實(shí)現(xiàn)”或“不能維持”預(yù)先選擇的水平的反應(yīng)意指受試者在治療過(guò)程中曾經(jīng)顯示或?qū)崿F(xiàn)預(yù)先選擇的水平的反應(yīng)，但后來(lái)，例如數(shù)天、數(shù)周或數(shù)月后，經(jīng)歷癥狀的惡化，即使在繼續(xù)接受導(dǎo)致癥狀的初始改善的治療的情況下亦如此。

病癥。本發(fā)明中表征的方法特別適合用于治療關(guān)節(jié)炎，例如自身免疫性關(guān)節(jié)炎，例如，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或銀屑病關(guān)節(jié)炎；或其它形式的炎性關(guān)節(jié)炎，例如與炎性腸病相關(guān)的關(guān)節(jié)炎。被選擇來(lái)利用抗-vla-1抗體進(jìn)行治療的患者可患有關(guān)節(jié)炎例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，并且可顯示對(duì)一線療法或?qū)Τ^(guò)一種現(xiàn)有療法的不充分反應(yīng)，或可在施用一線療法，或一種或多種現(xiàn)有療法后已接受負(fù)面評(píng)價(jià)。

自身免疫性關(guān)節(jié)炎由免疫系統(tǒng)的異常引起，該異常使得身體開(kāi)始攻擊其自已的關(guān)節(jié)和結(jié)締組織。自身免疫性關(guān)節(jié)炎的實(shí)例包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、幼年型關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎和強(qiáng)直性脊柱炎。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是特征在于周圍關(guān)節(jié)的非特異性的，通常對(duì)稱的炎癥，潛在地導(dǎo)致關(guān)節(jié)和關(guān)節(jié)周圍結(jié)構(gòu)的進(jìn)行性破壞，具有或不具有全身性表現(xiàn)的慢性綜合癥。幼年型關(guān)節(jié)炎(始于16歲或16歲前的關(guān)節(jié)炎)與成人類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎類似，并且傾向于影響大關(guān)節(jié)和小關(guān)節(jié)，并且可影響生長(zhǎng)和發(fā)育?？稍诩s7％的銀屑病患者中發(fā)生的銀屑病關(guān)節(jié)炎是與皮膚或指甲的銀屑病相關(guān)的炎性關(guān)節(jié)炎；并且對(duì)于rf(類風(fēng)濕因子)是陰性測(cè)試。強(qiáng)直性脊柱炎是特征在于中軸骨骼和大外周關(guān)節(jié)的炎癥的全身性風(fēng)濕性病癥。

其它類型的關(guān)節(jié)炎，特別地炎性關(guān)節(jié)炎適合于利用本發(fā)明表征的方法進(jìn)行治療。例如，當(dāng)一線療法不能或停止緩解關(guān)節(jié)炎癥狀時(shí)，可利用抗-vla-1抗體治療與炎性腸病相關(guān)的關(guān)節(jié)炎。

可通過(guò)許多可獲得的診斷工具測(cè)量試劑治療關(guān)節(jié)炎的功效，所述工具包括但不限于例如體格檢查，包括測(cè)定壓痛關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)或腫脹關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)的數(shù)目、關(guān)節(jié)x-射線、血液檢測(cè)或從患病關(guān)節(jié)收集的液體的檢查。x-射線可顯示可在慢性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中發(fā)生的侵蝕、囊腫和關(guān)節(jié)間隙狹窄。顯示升高的esr(紅細(xì)胞沉降率(erythrocytesedimentationrate))水平或針對(duì)改變的γ-球蛋白的抗體(即，類風(fēng)濕因子“rf”)的存在的血液檢測(cè)顯示類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。來(lái)自類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的關(guān)節(jié)的滑液通常是混濁的，但為無(wú)菌的，具有減小的粘度和通常3,000至50,000個(gè)白細(xì)胞(wbc)/μl。

關(guān)節(jié)炎例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的癥狀包括關(guān)節(jié)痛、關(guān)節(jié)腫脹、關(guān)節(jié)變形、減弱的活動(dòng)關(guān)節(jié)的能力、關(guān)節(jié)周圍皮膚的發(fā)紅、僵硬、關(guān)節(jié)周圍的發(fā)熱、晨僵和瀉流(關(guān)節(jié)中液體的收集)。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)示于aletaha等人,“2010rheumatoidarthritisclassificationcriteria,”arthritisandrheumatism62:2569-2581,2010中，包括受試者的患病大關(guān)節(jié)和小關(guān)節(jié)數(shù)目、血清中rf(類風(fēng)濕因子)和acpa(抗-瓜氨酸蛋白抗體)的水平、crp(c-反應(yīng)性蛋白)和esr(紅細(xì)胞沉降率)水平以及受試者的癥狀是否已持續(xù)至少6周或短于6周的評(píng)價(jià)。癥狀的持續(xù)時(shí)間通過(guò)在評(píng)價(jià)時(shí)自我報(bào)告臨床上牽涉的患者的任何關(guān)節(jié)的滑膜炎的體征和癥狀(疼痛、腫脹和壓痛)的持續(xù)時(shí)間來(lái)測(cè)定。這類因素的每一個(gè)提供了評(píng)分，總評(píng)分≥6(在0-10的等級(jí)上)表示類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

“大關(guān)節(jié)”包括肩膀、肘、髖、膝和踝，并且“小關(guān)節(jié)”包括掌指、近端指間(pip)、第二至第五跖趾(mtp)以及拇指指節(jié)間(ip)關(guān)節(jié)和腕關(guān)節(jié)。

rf和acpa水平通常以iu(國(guó)際單位)報(bào)告?；诟髯詫?shí)驗(yàn)室測(cè)試和測(cè)定的正常上限(uln)，可進(jìn)行下列定義：陰性＝少于或等于實(shí)驗(yàn)測(cè)試和測(cè)定的uln；低水平陽(yáng)性＝高于uln但于≤實(shí)驗(yàn)測(cè)試和測(cè)定的uln的3倍；高水平陽(yáng)性＝>實(shí)驗(yàn)測(cè)試和測(cè)定的uln的3倍。

基于當(dāng)?shù)貙?shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)將crp和esr水平評(píng)分為正常或異常。如果這兩個(gè)測(cè)試中的至少一個(gè)結(jié)果是異常的，則將患者評(píng)分為具有異常急性反應(yīng)。

患有關(guān)節(jié)炎例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的患者通常也具有升高的水平的vla-1⁺細(xì)胞，例如vla-1⁺t細(xì)胞或單核細(xì)胞。

本發(fā)明中表征的方法也適用于治療自身免疫性病癥，例如炎性腸病(ibd)(例如，潰瘍性結(jié)腸炎或克羅恩病)。在一個(gè)實(shí)施方案中，被選擇來(lái)利用抗-vla-1抗體進(jìn)行治療的患者患有ibd并且已顯示對(duì)第一療法，或?qū)Τ^(guò)一種現(xiàn)有療法的不充分反應(yīng)，或在施用一線療法或一種或多種現(xiàn)有療法后已接受負(fù)面評(píng)價(jià)。

可通過(guò)許多參數(shù)來(lái)監(jiān)測(cè)試劑治療ibd的功效，所述參數(shù)包括但不限于例如每日液體或軟大便的次數(shù)、腹痛、腹部包塊(abdominalmass)的存在、<0.47(男人中)和<0.42(女人中)的血細(xì)胞比容、與標(biāo)準(zhǔn)體重的偏差、肛裂、瘺管或膿腫；以及虹膜的炎癥或葡萄膜炎。

克羅恩病活動(dòng)性指數(shù)提供了使用癥狀例如上述癥狀進(jìn)行的疾病嚴(yán)重度的定量評(píng)價(jià)(best等人,“developmentofacrohn’sdiseaseactivityindex.nationalcooperativecrohn’sdiseasestudy”gastroenterology70:439-444,1976)。220-400的cdai通常表示中度至重度克羅恩病。大于450的cdai通常表示嚴(yán)重疾病?？肆_恩病的緩解通常定義為大于150的cdai的下降。對(duì)療法的反應(yīng)通常公認(rèn)為大于70點(diǎn)的cdai的下降。

通常將通過(guò)cdai提供的定量分析(或其它類似活動(dòng)性評(píng)級(jí)法，參見(jiàn)d’haens等人“areviewofactivityindicesandefficacyendpointsforclinicaltrialsofmedicaltherapyinadultswithulcerativecolitis”gastroeneterology132:763-786,2007)與通過(guò)炎性腸病問(wèn)卷調(diào)查(ibdq)提供的定性分析結(jié)合使用，所述問(wèn)卷調(diào)查提供的定性分析報(bào)告了克羅恩病患者的生活質(zhì)量(irvine等人,“qualityoflife:avalidandreliablemeasureoftherapeuticefficacyinthetreatmentofinflammatoryboweldisease.canadiancrohn’srelapsepreventiontrialstudygroup”gastroenterology106:287-96,1994)。ibdq是32項(xiàng)問(wèn)卷法，其將社會(huì)、系統(tǒng)和情緒癥狀以及腸相關(guān)癥狀的元素整合入活動(dòng)性指數(shù)。問(wèn)卷法報(bào)告腸功能、情緒功能、系統(tǒng)癥狀和社會(huì)功能，并且可自我管理。關(guān)于指數(shù)的總評(píng)分在32至224的范圍內(nèi)，最高評(píng)分表示更好的生活質(zhì)量?；颊叩木徑庠u(píng)分通常在170至190的范圍內(nèi)。反應(yīng)通常被定義為15點(diǎn)、16點(diǎn)、17點(diǎn)、18點(diǎn)或更多點(diǎn)的評(píng)分的增加。

一線療法。一線療法可以是本領(lǐng)域已知的任何療法。例如，一線療法可以是治療劑，其為例如大分子(生物制劑)或小分子或細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的胃腸外抑制劑。

在一些實(shí)施方案中，一線療法是治療劑，所述治療劑是小分子抑制劑dmard，例如甲氨蝶呤，在其它實(shí)施方案中，一線療法是生物制劑，例如tnf抑制劑，例如tnf-α抑制劑或白細(xì)胞介素抑制劑，例如il-6、il-17或il-12/il-13抑制劑。tnf-α抑制劑包括例如抗-tnf抗體英夫利昔單抗、阿達(dá)木單抗、培化舍珠單抗和戈利木單抗，以及融合蛋白依那西普。依那西普是可溶性tnf受體2與免疫球蛋白g1的fc組分之間的融合物?？?il-6抗體托珠單抗是il-6抑制劑的實(shí)例。用于治療關(guān)節(jié)炎的其它生物治療劑包括b細(xì)胞消耗劑，例如抗-cd20抗體利妥昔單抗(rituxan,genentech,inc.,southsanfrancisco,ca；和idecpharmaceutical,sandiego,ca)以及t細(xì)胞共刺激阻斷劑，例如阿巴他塞，其為由融合至ctla-4的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域的免疫球蛋白組成的融合蛋白。

在一些實(shí)施方案中，一線療法是治療劑，例如janus激酶(jak)家族和脾酪氨酸激酶(syk)家族成員的抑制劑(例如小分子抑制劑)。此類家族的成員是各種細(xì)胞因子的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑所必需的并且牽涉類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)(代表性自身免疫性炎性疾病)的發(fā)病機(jī)理。jak家族的成員包括jak1、jak2、jak3和tyk2。示例性jak抑制劑是口服可獲得的jak3抑制劑cp-690,550(托法替尼)。syk家族的成員包括syk和鏈相關(guān)蛋白激酶(zap-70)。示例性syk抑制劑是r406和其前體藥物r788(福他替尼二鈉)。

一線療法還可以是抗-極晚期抗原-2(vla-2)抗體，例如gbr500(sanofi,bridgewater,nj)、抗-madcam-1抗體，例如維多珠單抗或抗-cd20抗體，例如利妥昔單抗。

在一個(gè)實(shí)施方案中，患者患有關(guān)節(jié)炎，一線療法包括利用dmard、tnf-α抑制劑、jak(janus激酶)抑制劑、syk(脾酪氨酸激酶)抑制劑、il-6抑制劑、il-17抑制劑、il-12/il-23抑制劑、vla-2抑制劑、cd20抑制劑或另一種生物治療劑的治療。dmard包括例如甲氨蝶呤、金鹽、來(lái)氟米特、柳氮磺胺吡啶或羥氯喹。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，患者患有炎性腸病，例如克羅恩病或潰瘍性結(jié)腸炎，并且一線療法包括利用抗-madcam-1抗體，例如維多珠單抗的治療。

用于治療關(guān)節(jié)炎的一線療法還包括例如熱和冷治療，以及用于支持和定位關(guān)節(jié)的夾板或矯正裝置。關(guān)節(jié)炎患者還可經(jīng)歷水療法、冰按摩(icemassage)或經(jīng)皮膚神經(jīng)刺激(transcutaneousnervestimulation)(tens)。辣椒素乳膏還可涂覆于關(guān)節(jié)上的皮膚以減輕疼痛，患者可施用葡糖胺和軟骨素?；颊呖墒┯么装狈?來(lái)進(jìn)行緩解)，或nsaid(非類固醇類抗炎藥)，例如阿司匹林、布洛芬或萘普生?；颊?特別地患有自身免疫性關(guān)節(jié)炎的患者)還可接受皮質(zhì)類固醇、cox-2(環(huán)氧化酶-2)抑制劑，例如塞來(lái)考昔或免疫抑制劑，例如硫唑嘌呤或環(huán)磷酰胺?；颊哌€可進(jìn)行手術(shù)來(lái)重建關(guān)節(jié)(關(guān)節(jié)成形術(shù))或替換關(guān)節(jié)。患者可以進(jìn)行鍛煉方案，例如低強(qiáng)度有氧代謝活動(dòng)以建立或維持耐力、針對(duì)靈活性的關(guān)節(jié)活動(dòng)度恢復(fù)練習(xí)(rangeofmotionexercises)和針對(duì)肌緊張的強(qiáng)度訓(xùn)練。

以足以引起有益或期望的臨床結(jié)果的量遞送療法例如一線或二線治療劑的“有效量”。可在一次或多次施用中遞送有效量的治療劑?！坝行Я俊钡囊痪€療法可產(chǎn)生“充分的反應(yīng)”?！俺浞值姆磻?yīng)”表現(xiàn)為癥狀的改善，例如腫脹關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)和/或壓痛關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)的減少，或關(guān)節(jié)疼痛的減輕。抗-vla-1抗體的“有效量”是按照臨床上可接受的標(biāo)準(zhǔn)，足以減輕、改善、穩(wěn)定、逆轉(zhuǎn)、減緩或延遲關(guān)節(jié)炎或關(guān)節(jié)炎的癥狀的進(jìn)展的量。

監(jiān)測(cè)受試者在利用一線或二線療法治療后的關(guān)節(jié)炎癥狀的改善。例如，可通過(guò)測(cè)定acr(美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì))評(píng)分來(lái)監(jiān)測(cè)受試者。例如，acr20的評(píng)分表示壓痛和腫脹關(guān)節(jié)總數(shù)的至少20％的減少和下列5個(gè)參數(shù)中的3個(gè)參數(shù)的20％的減少：疾病的醫(yī)生整體評(píng)價(jià)、疾病的患者總體評(píng)價(jià)、疼痛的患者評(píng)價(jià)、c-反應(yīng)蛋白或紅細(xì)胞沉降率以及健康評(píng)價(jià)問(wèn)卷(haq)評(píng)分的傷殘程度。通常地，acr20的評(píng)分表示患者在施用治療劑后具有關(guān)節(jié)炎癥狀的顯著改善。對(duì)于例如acr50或acr70的評(píng)分，患者可顯示更顯著的改善。

如果患者在施用療法后未顯示至少acr20的評(píng)分，例如至少acr50或acr70的評(píng)分，那么患者可接受負(fù)面評(píng)價(jià)，或可被確定為具有對(duì)療法的不充分反應(yīng)。在一些實(shí)施方案中，在1或2周，或1或2個(gè)月或更長(zhǎng)的過(guò)程中監(jiān)測(cè)患者的acr評(píng)分。在一些實(shí)施方案中，患者將不滿足在利用一線療法治療后需要acr20、arc50或acr70的acr評(píng)分的預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，從而患者被選擇來(lái)利用抗-vla-1抗體進(jìn)行治療。

haq是證明有效的問(wèn)卷法(由患者自我管理)，其包括20個(gè)與功能相關(guān)的項(xiàng)和4個(gè)與幫助和裝置相關(guān)的項(xiàng)。問(wèn)題包括8個(gè)子量表：穿衣和整理內(nèi)務(wù)、站立、衛(wèi)生保健、到達(dá)、吃、行走、抓握和活動(dòng)。對(duì)項(xiàng)進(jìn)行0(能夠無(wú)困難地行使功能)至3(不能行使功能)的評(píng)分。haq疾病指數(shù)是量表評(píng)分的加權(quán)和，更高的評(píng)分表示更差的功能。haq疾病指數(shù)的減小超過(guò)-0.19至-0.22(例如，-0.2或-0.21)被認(rèn)為是臨床上重要的。

如果患者在施用療法后未顯示至少0.19，例如至少0.22或更多的haq評(píng)分的提高(增加)，則患者可接受負(fù)面評(píng)價(jià)，或被確定為具有對(duì)療法的不充分反應(yīng)。在一些實(shí)施方案中，在1或2周，或1或2個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間過(guò)程中監(jiān)測(cè)患者的haq的提高。在一些實(shí)施方案中，患者將不滿足需要至少0.19或0.22或更多的haq評(píng)分的提高的預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，從而患者被選擇來(lái)利用抗-vla-1抗體進(jìn)行治療。

還可通過(guò)測(cè)定das(疾病活動(dòng)性評(píng)分)的提高來(lái)監(jiān)測(cè)患者在利用一線或二線療法治療后關(guān)節(jié)炎癥狀的改善。das是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的活動(dòng)性的量度，其整合下列參數(shù)：壓痛和腫脹關(guān)節(jié)的總數(shù)、esr和疾病活動(dòng)性的患者評(píng)價(jià)(vanderheijde等人,“developmentofdiseaseactivityscorebasedonjudgmentinclinicalpracticebyrheumatologists”j.rheumatol.20:579-81,1993)。如果患者在施用療法后未顯示das的改善，例如至少1.6、至少1.8、至少2.0、至少2.5、至少3.0、至少3.2、至少3.6或更多的das的減少，則患者可接受負(fù)面評(píng)價(jià)，或被確定為具有對(duì)療法的不充分反應(yīng)。在一些實(shí)施方案中，在1或2周，或1或2個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間的過(guò)程中監(jiān)測(cè)患者的das的改善。在一些實(shí)施方案中，患者將不滿足需要至少1.6、至少2.0、至少2.2、至少2.8、至少3.2、至少3.6或更多的das的改善(das的減小)的預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，從而患者將被選擇來(lái)利用抗-vla-1抗體進(jìn)行治療。通常地，2.6或更少的das評(píng)分表示ra的緩解，3.2或更少的das評(píng)分表示低疾病活動(dòng)性。在一個(gè)實(shí)施方案中，患者將不滿足為2.6或更少的das的預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，或患者將不滿足為3.2或更少的das的預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)。

28-關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)的das(das28-crp測(cè)量)包括4個(gè)變量的組合：28個(gè)關(guān)節(jié)中壓痛關(guān)節(jié)的數(shù)目、28個(gè)關(guān)節(jié)中腫脹關(guān)節(jié)的數(shù)目、crp(以mg/l表示)和100毫米(mm)的直觀模擬標(biāo)度尺(visualanaloguescale)(vas)上疾病活動(dòng)性量度的主觀評(píng)價(jià)。das28-crp值在0至9.31的范圍內(nèi)，更高的評(píng)分表示更強(qiáng)的疾病活動(dòng)性。通常地，2.6或更少的das28-crp評(píng)分表示ra的緩解，3.2或更少的das28-crp評(píng)分表示低疾病活動(dòng)性。在一個(gè)實(shí)施方案中，患者將不滿足為2.6或更少的das的預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，或患者將不滿足為3.2或更少的das28的預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)。

還可通過(guò)壓痛和腫脹關(guān)節(jié)的總數(shù)的計(jì)數(shù)來(lái)監(jiān)測(cè)患者的關(guān)節(jié)炎癥狀的改善。如果在施用療法后壓痛和腫脹關(guān)節(jié)的總數(shù)減少不超過(guò)例如1、2、3或更多個(gè)，則患者可接受負(fù)面評(píng)價(jià)，或被確定為具有對(duì)療法的不充分反應(yīng)。在一些實(shí)施方案中，在1或2周，或1或2個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間的過(guò)程中監(jiān)測(cè)患者的腫脹或壓痛關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)的減少。在一些實(shí)施方案中，患者將不滿足需要1、2、3或更多個(gè)的腫脹或壓痛關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)的減少的預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，從而患者將被選擇來(lái)利用抗-vla-1抗體進(jìn)行治療。在一些實(shí)施方案中，患者將不滿足需要15％、20％、30％或更多的腫脹或壓痛關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)的減少的預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，從而患者將被選擇來(lái)利用抗-vla-1抗體進(jìn)行治療。

還可通過(guò)放射攝影法例如mri、超聲或x射線監(jiān)測(cè)患者的關(guān)節(jié)炎癥狀的改善。此類方法提供了可顯示滑膜炎、侵蝕變化和水腫的程度的圖像。在例如1或2周或1或2個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間的過(guò)程中不能看到滑膜炎程度的減輕、關(guān)節(jié)侵蝕率的減小或水腫的減輕例如可表示患者具有對(duì)療法的不充分反應(yīng)。在一些實(shí)施方案中，患者將不滿足需要15％、20％、30％或更多的滑膜炎程度的減輕、關(guān)節(jié)侵蝕率的減小或“骨骼水腫”或“骨炎”的減輕的預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，從而患者將被選擇來(lái)利用抗-vla-1抗體進(jìn)行治療。

還可通過(guò)測(cè)定血液或滑液中vla-1⁺細(xì)胞，例如vla-1⁺t細(xì)胞或單核細(xì)胞的數(shù)目來(lái)監(jiān)測(cè)患者在利用一線或二線療法治療后關(guān)節(jié)炎癥狀的改善。如果在施用療法后，vla-1⁺細(xì)胞的數(shù)目的減少例如不超過(guò)15％、20％或30％或更多，則患者可接受負(fù)面評(píng)價(jià)，或被確定為具有對(duì)療法的不充足反應(yīng)。在一些實(shí)施方案中，在1或2周，或1或2個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間的過(guò)程中監(jiān)測(cè)患者的vla-1⁺細(xì)胞的減少。在一些實(shí)施方案中，患者將不滿足需要15％、20％、30％或更多的vla-1⁺細(xì)胞的減少的預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，從而患者將被選擇來(lái)利用抗-vla-1抗體進(jìn)行治療。

在一些實(shí)施方案中，患者將不滿足需要至少15％、20％、30％或更多的壓痛和腫脹關(guān)節(jié)計(jì)數(shù)的改善，以及其余5個(gè)評(píng)分量度(疼痛的患者評(píng)價(jià)(基于范圍為1至100的直觀模擬標(biāo)度尺，評(píng)分越高表示疼痛越大)；急性相反應(yīng)物，例如crp的水平；haq評(píng)分；以及患者和的醫(yī)生整體評(píng)價(jià))中的3個(gè)的至少15％、20％、30％或更多的改善的預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)。以0至100的等級(jí)評(píng)價(jià)患者和醫(yī)生整體評(píng)價(jià)，數(shù)字越高表示疾病越嚴(yán)重。

在一些實(shí)施方案中，通過(guò)測(cè)定每日液體或軟大便的次數(shù)(例如在7天的時(shí)期中)；測(cè)定腹痛的程度或腹部包塊的尺寸或存在；測(cè)定血細(xì)胞比容水平；監(jiān)測(cè)與標(biāo)準(zhǔn)體重的偏離；或測(cè)定肛裂、瘺管或膿腫的存在和尺寸來(lái)監(jiān)測(cè)患者在利用一線或二線療法治療后ibd癥狀的改善。在一個(gè)實(shí)施方案中，測(cè)定癥狀并且將其用于活動(dòng)性評(píng)級(jí)，例如cdai。如果在施用一線或二線療法后，cdai評(píng)分未減少至少50、至少60、至少70或至少80或更多，則患者可接受負(fù)面評(píng)價(jià)，或被確定為具有對(duì)療法的不充分反應(yīng)。在一些實(shí)施方案中，在1或2周，或1或2個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間過(guò)程中監(jiān)測(cè)患者的cdai評(píng)分。在一些實(shí)施方案中，患者將不滿足需要至少50、至少60、至少70或至少80的cdai評(píng)分的減少的預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，從而患者將被選擇來(lái)利用抗-vla-1抗體進(jìn)行治療。

在一些實(shí)施方案中，以對(duì)利用一線或二線療法進(jìn)行治療的反應(yīng)監(jiān)測(cè)患者對(duì)ibdq的評(píng)分。例如，如果在施用一線或二線療法后ibdq評(píng)分不能增加至少15點(diǎn)、至少16點(diǎn)、至少17點(diǎn)、至少18點(diǎn)或更多點(diǎn)，則患者可接受負(fù)面評(píng)價(jià)，或被確定為具有對(duì)療法的不充分反應(yīng)。在一些實(shí)施方案中，在1或2周，或1或2個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間的過(guò)程中監(jiān)測(cè)患者的ibdq評(píng)分。在一些實(shí)施方案中，患者將不滿足需要至少15點(diǎn)、至少16點(diǎn)、至少17點(diǎn)或至少18點(diǎn)或更多點(diǎn)的ibdq評(píng)分的增加的預(yù)定標(biāo)準(zhǔn)，從而患者將被選擇來(lái)利用抗-vla-1抗體進(jìn)行治療。

關(guān)于患者對(duì)一線療法的反應(yīng)的信息可直接或間接獲取。例如，關(guān)于患者的反應(yīng)的信息可由醫(yī)生或直接檢查在施用一線療法后患者的癥狀改善的照護(hù)者進(jìn)行評(píng)價(jià)?；蛘?，可以例如從獲自醫(yī)院或診所、或臨床醫(yī)生或照護(hù)者或數(shù)據(jù)庫(kù)例如在線數(shù)據(jù)庫(kù)的記錄的患者記錄間接獲取信息。

如本文中所用，術(shù)語(yǔ)“獲取(acquire)”或“獲取(acquiring)”是指通過(guò)“直接獲取”或“間接獲取”物理實(shí)體或值而獲得物理實(shí)體或值例如數(shù)值的擁有?！爸苯荧@取”意指進(jìn)行獲得物理實(shí)體或值的過(guò)程(例如，檢查患者或患者樣品)?！伴g接獲取”是指接受來(lái)自另一方或來(lái)源，例如來(lái)自直接獲得物理實(shí)體或值的第三方實(shí)驗(yàn)室的物理實(shí)體或值。

直接獲取物理實(shí)體包括進(jìn)行包括實(shí)體物質(zhì)例如起始材料的物理變化的過(guò)程。示例性變化包括從兩個(gè)或更多個(gè)起始材料產(chǎn)生物理實(shí)體，剪切或片段化物質(zhì)，分離或純化物質(zhì)，將兩個(gè)或更多個(gè)分開(kāi)的實(shí)體組合成混合物，進(jìn)行包括斷裂或形成共價(jià)或非共價(jià)鍵的化學(xué)反應(yīng)。

直接獲取值包括進(jìn)行包括樣品或另一種物質(zhì)的物理變化的過(guò)程，例如通過(guò)進(jìn)行包括物質(zhì)例如樣品、分析物或試劑的物理變化的分析過(guò)程(在本文中有時(shí)稱為“物理分析”)，進(jìn)行分析方法，例如包括下列的一項(xiàng)或多項(xiàng)的方法：將物質(zhì)例如分析物或其片段或其它衍生物與另一種物質(zhì)分離或純化所述物質(zhì)；將分析物或其片段或其它衍生物與另一種物質(zhì)例如緩沖劑、溶劑或反應(yīng)物組合；或改變分析物或其片段或其它衍生物的結(jié)構(gòu)，例如通過(guò)斷裂或形成分析物的第一與第二原子之間的共價(jià)或非共價(jià)鍵；或通過(guò)改變?cè)噭┗蚱淦位蚱渌苌锏慕Y(jié)構(gòu)，例如通過(guò)斷裂或形成試劑的第一與第二原子之間的共價(jià)或非共價(jià)鍵。

“分析”樣品包括進(jìn)行牽涉樣品或另一種物質(zhì)例如起始材料的物理變化的過(guò)程。示例性變體包括從兩種或更多種起始材料產(chǎn)生物理實(shí)體，剪切或片段化物質(zhì)，分離或純化物質(zhì)，將兩種或更多種分開(kāi)的實(shí)體組合成混合物，進(jìn)行包括斷裂或形成共價(jià)或非共價(jià)鍵的化學(xué)反應(yīng)。分析樣品可包括進(jìn)行包括物質(zhì)例如樣品、分析物或試劑的物理變化的分析過(guò)程(在本文中有時(shí)稱為“物理分析”)，進(jìn)行分析方法，例如包括下列的一項(xiàng)或多項(xiàng)的方法：將物質(zhì)例如分析物或其片段或其它衍生物與另一種物質(zhì)分離或純化所述物質(zhì)；將分析物或其片段或其它衍生物與另一種物質(zhì)例如緩沖劑、溶劑或反應(yīng)物組合；或改變分析物或其片段或其它衍生物的結(jié)構(gòu)，例如通過(guò)斷裂或形成分析物的第一與第二原子之間的共價(jià)或非共價(jià)鍵；或通過(guò)改變?cè)噭┗蚱淦位蚱渌苌锏慕Y(jié)構(gòu)，例如通過(guò)斷裂或形成試劑的第一與第二原子之間的共價(jià)或非共價(jià)鍵。

在一個(gè)實(shí)施方案中，確定患者是否具有關(guān)節(jié)炎癥狀的改善，包括如下的一項(xiàng)或多項(xiàng)：評(píng)價(jià)患者，或分析來(lái)自患者的樣品，索取患者的評(píng)價(jià)或樣品的分析，索取來(lái)自患者的評(píng)價(jià)或樣品分析的結(jié)果，或接受來(lái)自患者的評(píng)價(jià)或樣品分析的結(jié)果。一般而言，分析可包括進(jìn)行基本方法(例如，分析患者樣品的vla-1⁺細(xì)胞或單核細(xì)胞的數(shù)目)或接受來(lái)自已進(jìn)行了基本方法的另一個(gè)患者的數(shù)據(jù)的一項(xiàng)或兩項(xiàng)。

抗-vla-1抗體。針對(duì)vla-1，例如針對(duì)vla-1的α亞基、β亞基或兩種亞基的抗體適合用于本文中描述的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗-vla-1抗體結(jié)合vla-1的α1亞基。在例如美國(guó)專利no.7,358,054中公開(kāi)了示例性抗-vla-1抗體，將所述專利通過(guò)引用整體并入本文。用于本文中描述的方法的適當(dāng)抗體包括：具有1、2或3個(gè)輕鏈(lc)cdr和1、2或3個(gè)重鏈(hc)cdr的抗體，并且在一個(gè)實(shí)施方案中所有6個(gè)cdr具有美國(guó)專利no.7,358,054中公開(kāi)的抗體的序列；其中cdr的每一個(gè)與美國(guó)專利no.7,358,054中公開(kāi)的抗體的cdr相異不超過(guò)1或2個(gè)氨基酸(變體氨基酸，當(dāng)用于該上下文中時(shí)，對(duì)于非保守變化可以是獨(dú)立地或作為基團(tuán)是保守的)的抗體。

在一個(gè)實(shí)施方案中，用于本文中描述的方法的抗-vla-1抗體包括來(lái)自美國(guó)專利no.7,358,054中公開(kāi)的抗體的lc可變區(qū)、hc可變區(qū)或兩者的抗體；與美國(guó)專利no.7,358,054中公開(kāi)的抗體結(jié)合交疊的表位或與所述抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合的抗體；具有l(wèi)c可變區(qū)、hc可變區(qū)或兩者的抗體，所述可變區(qū)與美國(guó)專利no.7,358,054中公開(kāi)的抗體的對(duì)應(yīng)部分具有至少90、95或99％的氨基酸同源性；具有與美國(guó)專利no.7,358,054中公開(kāi)的抗體的對(duì)應(yīng)部分相異不超過(guò)10、5或1個(gè)氨基酸殘基的lc可變區(qū)、與所述對(duì)應(yīng)部分相異不超過(guò)10、5或1個(gè)氨基酸殘基的hc可變區(qū)或兩者的抗體。

在一個(gè)實(shí)施方案中，用于本文中描述的方法的抗-vla-1抗體包括輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)，所述輕鏈可變區(qū)與seqidno:1(圖1a)的序列相同或相異不超過(guò)10、5、3或1個(gè)氨基酸，所述重鏈可變區(qū)與seqidno:2(圖1b)的序列相同或相異不超過(guò)10、5、3或1個(gè)氨基酸。

在一個(gè)實(shí)施方案中，抗-vla-1抗體具有輕鏈序列和重鏈序列，所述輕鏈序列與seqidno:3(圖2a)的序列相同或相異不超過(guò)10、5、3或1個(gè)氨基酸，所述重鏈可變區(qū)與seqidno:4(圖2b)的序列相同或相異不超過(guò)10、5、3或1個(gè)氨基酸。

如本文中所討論的，用于本文中描述的方法的示例性抗-vla-1抗體包括美國(guó)專利no.7,358,054中描述的抗體，將所述專利通過(guò)引用整體并入本文。美國(guó)專利no.7,358,054中描述的抗體包括例如單克隆抗體ajh10(atccpta-3580；于2001年8月2日保藏在美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心,10801universityboulevard,manassas,va20110-2209)、haqc2(atccpta-3275；于2001年4月18日保藏)、haaqc2(atccpta-3274；于2001年4月18日保藏)、hsaqc2(atccpta-3356；于2001年5月4日保藏)和maqc2(atccpta-3273)。在布達(dá)佩斯協(xié)議下保藏所有此類抗體。

在一個(gè)實(shí)施方案中，用于本文中描述的方法的抗-vla-1抗體包括包含seqidno:1(圖1a)的序列的輕鏈多肽和包含seqidno:2(圖1b)的序列的重鏈多肽。

在一個(gè)實(shí)施方案中，抗-vla-1抗體具有包含seqidno:3(圖2a)的序列的輕鏈序列和包含seqidno:4(圖2b)的序列的重鏈序列。其它抗-vla-1抗體包括例如美國(guó)專利no.5,391,481和5,788,966中描述的單克隆抗體1b3(atcchb-10536)和ha31/8。

在一個(gè)實(shí)施方案中，抗-vla-1抗體通過(guò)例如物理阻斷相互作用，減小vla-1對(duì)于其對(duì)應(yīng)物(counterpart)的親和力，破壞vla-1復(fù)合物或使所述復(fù)合物去穩(wěn)定，隔離vla-1或?qū)la-1靶向降解來(lái)抑制vla-1與vla-1配體例如膠原之間的相互作用。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體可以在參與vla-1/配體結(jié)合界面的一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基上結(jié)合vla-1。此類氨基酸殘基可通過(guò)例如丙氨酸掃描來(lái)鑒定。在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗體可結(jié)合不參與vla-1/配體結(jié)合的殘基。例如，抗體可改變vla-1的構(gòu)象，從而減少結(jié)合親和力，或抗體可在空間上阻礙vla-1/配體結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體可減少vla-1-介導(dǎo)的事件或活性的激活。

聯(lián)合療法。可替代關(guān)節(jié)炎的其它療法，或除了所述療法外，施用用于關(guān)節(jié)炎治療的抗-vla抗體。

在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)患者對(duì)例如dmard、tnf-α抑制劑、jak(janus激酶)抑制劑(例如，jak1、jak2或jak3抑制劑)、syk(脾酪氨酸激酶)抑制劑、il-6抑制劑、il-17抑制劑、il-12/il-23抑制劑、vla-2抑制劑、mad-cam-1抑制劑、cd20抑制劑或另一種生物抗風(fēng)濕病療法，例如阿巴他塞的施用不反應(yīng)或停止對(duì)其的反應(yīng)或停止所述反應(yīng)的改善時(shí)，施用抗-vla-1抗體。示例性dmard包括甲氨蝶呤、來(lái)氟米特、柳氮磺胺吡啶、羥氯喹、金鹽和青霉素。示例性tnf-α抑制劑包括英夫利昔單抗、阿達(dá)木單抗、培化舍珠單抗、戈利木單抗和依那西普。示例性vla-2抑制劑是抗-vla-2抗體gbr500，示例性madcam-1抑制劑是抗-mad-cam-1抗體維多珠單抗，示例性cd20抑制劑是抗-cd20抗體利妥昔單抗。

患者可接受dmard、抗-tnf-α療法或本文中描述的另一種治療劑，隨后在接受利用抗-vla-1抗體的治療之前患者可停止接受第一療法。在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)患者開(kāi)始接受抗-vla-1療法時(shí)，患者繼續(xù)接受第一治療劑。例如，患者在施用抗-vla-1抗體療法后接受第一治療劑的施用，或選擇施用以便抗體和第一治療劑的治療水平在患者中得以維持?？墒箍贵w和第一治療劑在患者中維持至少1天、至少2天、至少5天、至少10天或更長(zhǎng)時(shí)間。

在一個(gè)實(shí)施方案中，患者接受抗-tnf-α療法和dmard療法，隨后患者停止接受利用抗-tnf-α和dmard療法的任一種或兩種的治療，隨后給患者施用抗-vla-1抗體。

在一個(gè)實(shí)施方案中，患者接受或繼續(xù)接受關(guān)節(jié)炎的其它治療，同時(shí)接受利用抗-vla-1抗體的治療。例如，患者可接受熱和冷治療，或可將夾板或矯正裝置用于支持和定位關(guān)節(jié)。關(guān)節(jié)炎患者還可經(jīng)歷水療法、冰按摩或經(jīng)皮膚神經(jīng)刺激(tens)。辣椒素乳膏還可涂覆于關(guān)節(jié)上的皮膚以減輕疼痛，患者可施用葡糖胺和軟骨素。患者可施用醋氨酚，或nsaid(非類固醇類抗炎藥)，例如阿司匹林、布洛芬或萘普生?；颊?特別地患有自身免疫性關(guān)節(jié)炎的患者)還可接受皮質(zhì)類固醇、cox-2(環(huán)氧化酶-2)抑制劑，例如塞來(lái)考昔或免疫抑制劑，例如硫唑嘌呤或環(huán)磷酰胺?；颊哌€可進(jìn)行手術(shù)來(lái)重建關(guān)節(jié)(關(guān)節(jié)成形術(shù))或替換關(guān)節(jié)?；颊呖梢赃M(jìn)行鍛煉方案，例如低強(qiáng)度有氧代謝活動(dòng)以建立或維持耐力、針對(duì)靈活性的關(guān)節(jié)活動(dòng)度恢復(fù)練習(xí)和針對(duì)肌緊張的強(qiáng)度訓(xùn)練。

抗體。如本文中所用，術(shù)語(yǔ)“抗體”是指這樣的蛋白質(zhì)，所述蛋白質(zhì)包括至少一個(gè)免疫球蛋白可變區(qū)，例如提供免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列或免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域序列。例如，抗體可包括重(h)鏈可變區(qū)(在本文中縮寫(xiě)為vh)和輕鏈(l)鏈可變區(qū)(在本文中縮寫(xiě)為vl)。在另一個(gè)實(shí)例中，抗體包括兩個(gè)重(h)鏈可變區(qū)和兩個(gè)輕(l)鏈可變區(qū)。術(shù)語(yǔ)“抗體”包括抗體的抗原結(jié)合片段，包括單鏈抗體、fab片段、f(ab')2片段、fd片段、fv片段和dab片段，以及iga、igg型的完全抗體，例如完整和/或完全長(zhǎng)度免疫球蛋白(例如，iggl、igg2、igg3、igg4)、ige、igd和igm及其任何亞型。免疫球蛋白的輕鏈可具有κ或λ型。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體被糖基化?？贵w對(duì)于抗體依賴性細(xì)胞毒性和/或補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒性可以是有功能的，或?qū)τ诖祟惢钚缘囊环N或兩種可以是無(wú)功能的。

還可將vh和vl區(qū)域細(xì)分為高變區(qū)(稱為“互補(bǔ)決定區(qū)”(“cdr”))，其間散布有更保守的區(qū)域(稱為“構(gòu)架區(qū)”(fr))。fr和cdr的界限已被精確地界定(參見(jiàn)，kabat,等人,sequencesofproteinsofimmunologicalinterest,第5版，u.s.departmentofhealthandhumanservices,nihpublicationno.91-3242,1991；和chothia,等人,j.moi.biol.196:901-917,1987)。在本文中使用kabat的定義。每一個(gè)vh和vl通常由以下列順序從氨基末端至羧基末端排列的3個(gè)cdr和4個(gè)fr組成：frl、cdrl、fr2、cdr2、fr3、cdr3、fr4?！懊庖咔虻鞍捉Y(jié)構(gòu)域”是指來(lái)自免疫球蛋白分子的可變或恒定結(jié)構(gòu)域的結(jié)構(gòu)域。免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域通常包含2個(gè)由約7個(gè)β-鏈形成的β-折疊，和保守的二硫鍵(參見(jiàn)，例如，williamsandbarclay,ann.revimmunol.6:381-405,1988)?！懊庖咔虻鞍卓勺兘Y(jié)構(gòu)域序列”是指可形成足以將cdr序列置于適合于抗原結(jié)合的構(gòu)象中的結(jié)構(gòu)的氨基酸序列。例如，所述序列可包括天然存在的可變結(jié)構(gòu)域的全部或部分氨基酸序列。例如，序列可省略1、2或更多個(gè)n-或c-末端氨基酸、內(nèi)部氨基酸，可包括一個(gè)或多個(gè)插入或額外末端氨基酸，或可包括其它改變。在一個(gè)實(shí)施方案中，包括免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域序列的多肽可與另一個(gè)免疫球蛋白可變結(jié)構(gòu)域序列締合以形成靶結(jié)合結(jié)構(gòu)(或“抗原結(jié)合位點(diǎn)”)，例如與vla-1相互作用的結(jié)構(gòu)。

抗體的vh或vl鏈還可包括重鏈或輕鏈恒定區(qū)的全部或部分，從而分別形成免疫球蛋白重鏈或輕鏈。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體是兩條免疫球蛋白重鏈和兩條免疫球蛋白輕鏈的四聚體。免疫球蛋白重鏈與輕鏈可通過(guò)二硫鍵連接。重鏈恒定區(qū)通常包括3個(gè)恒定結(jié)構(gòu)域chl、ch2和ch3。輕鏈恒定區(qū)通常包括cl結(jié)構(gòu)域。重鏈和輕鏈的可變區(qū)包含與抗原相互作用的結(jié)合結(jié)構(gòu)域?？贵w的恒定區(qū)通常介導(dǎo)抗體與宿主組織或因子(包括免疫系統(tǒng)的各種細(xì)胞，例如效應(yīng)細(xì)胞和經(jīng)典補(bǔ)體系統(tǒng)的第一補(bǔ)體(ciq))的結(jié)合。

抗體的一個(gè)或多個(gè)區(qū)域可以是人的，有效地人的或人源化的。例如，可變區(qū)的一個(gè)或多個(gè)可以是人的或有效地人的。例如，在人源化抗體中，通常cdr的一個(gè)或多個(gè)例如hccdrl、hccdr2、hccdr3、lccdrl、lccdr2和lccdr3是非人的，例如嚙齒類動(dòng)物，例如小鼠的，并且抗體的其它部分是人的。通常，構(gòu)架區(qū)的一個(gè)或多個(gè)可以是人的，例如hc或lc的frl、fr2、fr3和fr4。在一個(gè)實(shí)施方案中，全部構(gòu)架區(qū)都是人的，例如來(lái)源于人體細(xì)胞，例如產(chǎn)生免疫球蛋白的造血細(xì)胞或非造血細(xì)胞。在一個(gè)實(shí)施方案中，人序列是種系序列，從而由種系核酸編碼。恒定區(qū)的一個(gè)或多個(gè)可以是人的，有效地人的或人源化的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，至少70、75、80、85、90、92、95或98％的構(gòu)架區(qū)(例如，總體地frl、fr2和fr3，或總體地frl、fr2、fr3和fr4)或完整抗體可以是人的，有效地人的，或人源化的。例如，frl、fr2和fr3總體地可與由人種系區(qū)段編碼的人序列具有至少70、75、80、85、90、92、95、98或99％的同一性或完全相相同?！坝行У厝说摹泵庖咔虻鞍卓勺儏^(qū)是這樣的免疫球蛋白可變區(qū)，其包括充足數(shù)量的人構(gòu)架氨基酸位置，以便免疫球蛋白可變區(qū)不引發(fā)正常人的免疫原性反應(yīng)?！坝行У厝说摹笨贵w是這樣的抗體，其包括充足數(shù)量的人氨基酸位置，以便抗體不引發(fā)正常人的免疫原性反應(yīng)。

“人源化的”免疫球蛋白可變區(qū)是這樣的免疫球蛋白可變區(qū)，所述可變區(qū)經(jīng)修飾以便修飾形式在人中引發(fā)比非修飾形式更小的免疫反應(yīng)，例如，經(jīng)修飾以包括充足數(shù)量的人構(gòu)架氨基酸位置以便免疫球蛋白可變區(qū)不引發(fā)正常人的免疫原性反應(yīng)?！叭嗽椿摹泵庖咔虻鞍椎拿枋霭ɡ缑绹?guó)專利no.6,407,213和5,693,762。在一些情況下，人源化免疫球蛋白可在一個(gè)或多個(gè)構(gòu)架氨基酸位置上包含非人氨基酸?？?vla-1抗體還可以是嵌合抗體，從而通過(guò)工程化同源抗體例如鼠、大鼠或兔抗體來(lái)產(chǎn)生。例如，同源抗體可通過(guò)重組dna技術(shù)來(lái)改變，以便重鏈和/或輕鏈的鉸鏈區(qū)和/或恒定區(qū)的部分或全部被來(lái)自另一物種例如人的抗體的對(duì)應(yīng)組分替代。一般而言，工程抗體的可變結(jié)構(gòu)域保持與同源抗體的可變結(jié)構(gòu)域相同或大體上相同。這樣的工程抗體稱為嵌合抗體，并且當(dāng)給鉸鏈和/或恒定區(qū)所源自的物種的個(gè)體施用時(shí)免疫原性小于同源抗體。例如，具人鉸鏈和/或恒定區(qū)和來(lái)自小鼠抗體的構(gòu)架區(qū)的嵌合抗體在人中的抗原性小于fr區(qū)所源自的小鼠抗體。產(chǎn)生嵌合抗體的方法在本領(lǐng)域是公知的。優(yōu)選恒定區(qū)包括但不限于來(lái)源于iggl和igg4的恒定區(qū)。

抗體產(chǎn)生。可通過(guò)多種方法產(chǎn)生結(jié)合vla-1的抗體，包括動(dòng)物的免疫和體外方法，例如噬菌體展示?？蓪la-1的全部或部分用作免疫原或用于選擇的靶。例如，vla-1或其片段，例如vla-1的αl亞基的全部或部分，例如αl-i結(jié)構(gòu)域可用作免疫原。在一個(gè)實(shí)施方案中，被免疫的動(dòng)物包含具有天然的、人的或部分人的免疫球蛋白基因座的免疫球蛋白產(chǎn)生性細(xì)胞。在一個(gè)實(shí)施方案中，非人動(dòng)物包括至少部分人免疫球蛋白基因。例如，可能利用人ig基因座的大片段工程化在小鼠抗體產(chǎn)生中具有缺陷的小鼠株系。使用雜交瘤技術(shù)，可產(chǎn)生和選擇來(lái)源于具有期望的特異性的基因的抗原特異性單克隆抗體。參見(jiàn)，例如，xenomouse^tm,green等人,nat.gen.7:13-21,1994；u.s.2003-0070185；美國(guó)專利no.5,789,650；和wo96/34096。

還可在嚙齒類動(dòng)物中產(chǎn)生針對(duì)vla-1的非人抗體。例如通過(guò)ep239400(winter等人)；美國(guó)專利no.6,602,503；5,693,761和6,407,213中描述的方法人源化非人抗體?；蛘呖墒狗侨丝贵w去免疫化，或者修飾其以使它們成為有效地人的。

ep239400描述了通過(guò)用來(lái)自另一物種的互補(bǔ)決定區(qū)置換(在給定的可變區(qū)內(nèi))一個(gè)物種的它們的互補(bǔ)決定區(qū)(cdr)來(lái)改變抗體。通常地，通過(guò)使用重組核酸技術(shù)將非人抗體，例如小鼠抗體的cdr置換到人抗體的對(duì)應(yīng)區(qū)域中，以產(chǎn)生編碼期望的置換抗體的序列。可添加期望的同種型的人恒定區(qū)基因區(qū)段(通常地ch的γi和cl的κ)，可使人源化重鏈和輕鏈基因在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中共表達(dá)以產(chǎn)生可溶性人源化抗體。還可使用用于人源化抗體的其它方法。例如，其它方法可導(dǎo)致抗體、在三維上靠近結(jié)合決定簇的構(gòu)架位置和免疫原性肽序列的三維結(jié)構(gòu)。參見(jiàn)，例如，wo90/07861；美國(guó)專利no.5,693,762；5,693,761；5,585,089和5,530,101；tempest等人,biotechnology9:266-271,1991以及美國(guó)專利no.6,407,213。

有時(shí)，cdr至人構(gòu)架的直接轉(zhuǎn)移導(dǎo)致所得抗體的抗原結(jié)合親和力的喪失。這是因?yàn)樵谝恍┩纯贵w中，構(gòu)架區(qū)內(nèi)的某些氨基酸與cdr相互作用，從而影響抗體的總體抗原結(jié)合親和力。在這類情況下，至關(guān)重要的是將“回復(fù)突變”引入受體抗體的構(gòu)架區(qū)中，以保持同源抗體的抗原結(jié)合活性。產(chǎn)生回復(fù)突變的一般方法在本領(lǐng)域是已知的。例如，queen等人,proc.natl.acad.sci.usa86:10029-10033,1989；co等人,proc.nat.acad.sci.usa88:2869-2873,1991；和wo90/07861(proteindesignlabsinc.)描述包括兩個(gè)關(guān)鍵步驟的方法。首先，通過(guò)計(jì)算機(jī)分析與同源鼠抗體的v區(qū)域構(gòu)架的最佳蛋白質(zhì)序列同源性來(lái)選擇人v構(gòu)架區(qū)。隨后，利用計(jì)算機(jī)對(duì)鼠v區(qū)域的三級(jí)結(jié)構(gòu)建模，以使可能與鼠cdr相互作用的構(gòu)架氨基酸殘基可視化，隨后將這些鼠氨基酸殘基疊加在同源人構(gòu)架上。在該兩步法下，存在設(shè)計(jì)人源化抗體的幾個(gè)標(biāo)準(zhǔn)。第一標(biāo)準(zhǔn)是將來(lái)自通常與非人供體免疫球蛋白同源的特定人免疫球蛋白的構(gòu)架用作人受體，或使用來(lái)自許多人抗體的共有構(gòu)架。第二標(biāo)準(zhǔn)是如果人受體殘基是不常見(jiàn)的并且供體殘基對(duì)于特定構(gòu)架殘基上的人序列是典型的，則使用供體氨基酸而非受體殘基。第三標(biāo)準(zhǔn)是使用供體構(gòu)架氨基酸而非緊鄰cdr的位置上的受體。

還可使用不同方法，例如tempest,biotechnology9:266-271,1991中描述的方法。在該方法下，可將來(lái)源于newm和rei的重鏈及輕鏈的v區(qū)域構(gòu)架分別用于cdr移植而無(wú)需小鼠殘基的激進(jìn)引入。使用該方法的有利方面是可從x射線晶體學(xué)已知newm和rei可變區(qū)的三維結(jié)構(gòu)，從而可容易地對(duì)cdr與v區(qū)域構(gòu)架殘基之間的特異性相互作用進(jìn)行建模。

可以如boerner等人,j.immunol.147:86-95,1991所述，例如使用體外引發(fā)的人脾細(xì)胞產(chǎn)生結(jié)合vla-1的完全人單克隆抗體。還可如由persson等人,proc.nat.acad.sci.usa88:2432-2436,1991或huang和stollar,j.immunol.methods141:227-236,1991；以及美國(guó)專利no.5,798,230所述，通過(guò)庫(kù)克隆(repertoirecloning)來(lái)制備它們。還可使用標(biāo)準(zhǔn)噬菌體技術(shù)(參見(jiàn)，例如，hoogenboom等人,immunotechnology4:1-20,1998；hoogenboom等人,immunoltoday2:371-8,2000；和u.s.2003-0232333)將大型非免疫人噬菌體展示文庫(kù)用于分離可被開(kāi)發(fā)為人治療劑的高親和力抗體。用于產(chǎn)生完全人抗體的其它方法包括使用非人動(dòng)物，所述非人動(dòng)物具有滅活的內(nèi)源ig基因座并且對(duì)于未重排的人抗體重鏈和輕鏈基因是轉(zhuǎn)基因的?？衫忙羖-i結(jié)構(gòu)域或其期望的抗原性片段免疫此類轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，隨后從來(lái)源于其的b細(xì)胞制備雜交瘤。此類方法描述于例如各種genpharm/medarex(paloalto,ca)出版物/關(guān)于包含人ig微型基因座的轉(zhuǎn)基因小鼠的專利，例如美國(guó)專利5,789,650；各種abgenix(fremont,ca)出版物/關(guān)于xenomice的專利(例如，美國(guó)專利6,075,181；6,150,584和6,162,963；green等人,naturegenetics7:13-21,1994；和mendez等人,nat.genet.15:146-56,1997)；以及各種kirin(japan)出版物/關(guān)于“transomic”小鼠的專利(例如，ep843961，和tomizuka等人,naturegenetics16:133-1443,1997)中。

可在原核和真核細(xì)胞中產(chǎn)生本文中描述的抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，在酵母細(xì)胞例如畢赤酵母屬(pichia)(參見(jiàn)，例如，powers等人,j.immunol.methods251:123-35,2001)、漢遜酵母屬(hanseula)或酵母菌屬(saccharomyces)的細(xì)胞中表達(dá)抗體(例如，scfv)。抗體，特別地可在哺乳動(dòng)物中產(chǎn)生全長(zhǎng)抗體，例如全長(zhǎng)igg抗體。用于重組表達(dá)的示例性哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞包括與dhfr可選擇標(biāo)記一起使用的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(cho細(xì)胞)(包括urlaub和chasin,proc.natl.acad.sci.usa77:4216-4220,1980中描述的dhfr^-cho細(xì)胞)，例如kaufman和sharp,mol.biol.159:601-621(1982)中描述的；淋巴細(xì)胞細(xì)胞系，例如nso骨髓瘤細(xì)胞和sp2細(xì)胞、cos細(xì)胞、k562以及來(lái)自轉(zhuǎn)基因動(dòng)物例如轉(zhuǎn)基因哺乳動(dòng)物的細(xì)胞。例如，細(xì)胞可以是乳房上皮細(xì)胞。

除了編碼免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域的核酸序列外，重組表達(dá)載體可具有額外的核酸序列例如調(diào)控載體在宿主細(xì)胞中復(fù)制的序列(例如，復(fù)制起始點(diǎn))和可選擇標(biāo)記基因?？蛇x擇標(biāo)記基因幫助選擇已將載體引入其中的宿主細(xì)胞(參見(jiàn)，例如，美國(guó)專利no.4,399,216；4,634,665和5,179,017)。示例性可選擇標(biāo)記基因包括二氫葉酸還原酶(dhfr)基因(例如以用于dhfr宿主細(xì)胞的甲氨蝶呤選擇/擴(kuò)增)和neo基因(例如用于g418選擇)。

在用于抗體例如全長(zhǎng)抗體或其抗原結(jié)合部分的重組表達(dá)的示例性系統(tǒng)中，通過(guò)磷酸鈣介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染將編碼抗體重鏈和抗體輕鏈的重組表達(dá)載體引入dhfr^-cho細(xì)胞。在重組表達(dá)載體內(nèi)，抗體重鏈和輕鏈基因各自有效地連接于增強(qiáng)子/啟動(dòng)子調(diào)控元件，例如來(lái)源于sv40、cmv、腺病毒等的此類調(diào)控元件，例如cmv增強(qiáng)子/admlp啟動(dòng)子調(diào)控元件或sv40增強(qiáng)子/admlp啟動(dòng)子調(diào)控元件，以驅(qū)動(dòng)基因的高水平轉(zhuǎn)錄。重組表達(dá)載體還具有dhfr基因，其允許通過(guò)使用甲氨蝶呤選擇/擴(kuò)增來(lái)選擇已用載體轉(zhuǎn)染的cho細(xì)胞。培養(yǎng)選擇的轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞以使其表達(dá)抗體重鏈和輕鏈，并且從培養(yǎng)基回收完整抗體。將標(biāo)準(zhǔn)分子生物學(xué)技術(shù)用于制備重組表達(dá)載體、轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞、選擇轉(zhuǎn)化體、培養(yǎng)宿主細(xì)胞以及從培養(yǎng)基回收抗體。例如，可利用蛋白a或蛋白g通過(guò)親和層析分離一些抗體。

抗體還可包括修飾，例如改變fc功能，例如減弱或消除與fc受體或與ciq或與兩者的相互作用的修飾。例如，可在一個(gè)或多個(gè)殘基上，例如殘基234和237(根據(jù)美國(guó)專利no.5,648,260中的編號(hào))的一個(gè)或多個(gè)上對(duì)人iggl恒定區(qū)進(jìn)行突變。其它示例性修飾包括美國(guó)專利no.5,648,260中描述的那些修飾。

對(duì)于一些包括fc結(jié)構(gòu)域的抗體，抗體產(chǎn)生系統(tǒng)被設(shè)計(jì)來(lái)合成其中fc區(qū)域被糖基化的抗體或其它蛋白質(zhì)。例如，在ch2結(jié)構(gòu)域中的天冬酰胺297上糖基化igg分子的fc結(jié)構(gòu)域。fc結(jié)構(gòu)域還可包括其它真核翻譯后修飾。在其它情況下，以未被糖化的形式產(chǎn)生蛋白質(zhì)。還可通過(guò)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物產(chǎn)生抗體。例如，美國(guó)專利no.5,849,992描述了用于在轉(zhuǎn)基因哺乳動(dòng)物的乳腺中表達(dá)抗體的方法。構(gòu)建轉(zhuǎn)基因，所述轉(zhuǎn)基因包括奶特異性啟動(dòng)子(milk-specificpromoter)和編碼目標(biāo)抗體例如本文中描述的抗體和用于分泌的信號(hào)序列的核酸序列。由此類轉(zhuǎn)基因哺乳動(dòng)物的雌性動(dòng)物產(chǎn)生的奶包括其中分泌的目標(biāo)蛋白質(zhì)，例如抗體?？蓮哪讨屑兓鞍踪|(zhì)，可將所述蛋白質(zhì)用于一些應(yīng)用，直接使用。

抗-vla-1抗體還可包括實(shí)現(xiàn)期望的功能的其它部分。例如，抗體可包括毒素部分，例如破傷風(fēng)類毒素或蓖麻毒素或放射性核素，例如¹¹¹in或⁹⁰y，例如用以殺傷被抗體靶向的細(xì)胞(參見(jiàn)，例如，美國(guó)專利no.6,307,026)?？贵w可包括部分例如生物素、熒光部分、放射性部分、組氨酸標(biāo)記等，以容易地進(jìn)行分離或檢測(cè)?？贵w還可包括可延長(zhǎng)它們的血清半衰期的部分，例如聚乙二醇(peg)部分。

藥物組合物。可將抗-vla-1抗體配制為藥物組合物，例如以給受試者施用以治療關(guān)節(jié)炎，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。通常地，藥物組合物包括藥學(xué)上可接受的載體。如本文中所用，“藥學(xué)上可接受的載體”包括生理上相容的任何和所有溶劑、分散介質(zhì)、包衣、抗菌劑和抗真菌劑、等滲劑和吸收延遲劑等。組合物可包括藥學(xué)上可接受的鹽，例如酸加成鹽或堿加鹽(參見(jiàn)，例如，berge,等人,j.pharm.sci.66:1-19,1977)?？砂凑諛?biāo)準(zhǔn)方法配制vla-1拮抗劑。藥物配制是良好建立的技術(shù)，并且進(jìn)一步描述于例如gennaro(編),remington:thescienceandpracticeofpharmacy,第20版,lippincott,williams&wilkins(2000)(isbn:0683306472)；ansel等人,pharmaceuticaldosageformsanddrugdeliverysystems,第7版,lippincottwilliams&wilkinspublishers(1999)(isbn:0683305727)；和kibbe(編),handbookofpharmaceuticalexcipientsamericanpharmaceuticalassociation,第3版.(2000)(isbn:091733096x)中。

在一個(gè)實(shí)施方案中，可利用賦形劑材料例如氯化鈉、磷酸氫二鈉七水合物、磷酸二氫鈉和穩(wěn)定劑配制抗-vla-1抗體?？梢砸赃m當(dāng)?shù)臐舛仍诶缇彌_溶液中提供抗體，并且可將其在2℃至8℃下貯存。藥物組合物可以以多種形式存在。此類形式包括例如液體、半固體和固體劑型，例如為例如可注射或可輸注的液體溶液；分散體或懸浮劑；片劑；丸劑；粉劑；脂質(zhì)體和栓劑。優(yōu)選形式可取決于期望的施用模式和治療應(yīng)用。通常地，本文中描述的試劑的組合物以可注射或可輸注溶液的形式存在。

可以口服或胃腸外(例如通過(guò)靜脈內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)或肌內(nèi)注射)施用本文中描述的此類抗-vla-1抗體組合物。

如本文中所用，短語(yǔ)“胃腸外施用(parenteraladministration)”和“胃腸外施用的(administeredparenterally)”意指除腸內(nèi)和局部施用(通常通過(guò)注射)外的施用模式，包括但不限于靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、硬膜內(nèi)、囊內(nèi)、眶內(nèi)、心內(nèi)、真皮內(nèi)、腹膜內(nèi)、經(jīng)氣管、皮下、表皮下、關(guān)節(jié)內(nèi)、囊下、蛛網(wǎng)膜下、脊柱內(nèi)、硬膜外、腦內(nèi)、顱內(nèi)、頸動(dòng)脈內(nèi)和胸骨內(nèi)注射和輸注。

可將組合物配制為溶液、微乳劑、分散體、脂質(zhì)體或適合于以高濃度穩(wěn)定貯存的其它有序列結(jié)構(gòu)?？赏ㄟ^(guò)將本文中描述的試劑以需要的量與上文中列舉的成分的一種或組合(根據(jù)需要)一起摻入適當(dāng)?shù)娜軇┲?，隨后進(jìn)行過(guò)濾滅菌來(lái)制備無(wú)菌注射液。一般地，通過(guò)將本文中描述的試劑摻入包含基本分散介質(zhì)和來(lái)自上文中列舉的需要的其它成分的無(wú)菌媒介物來(lái)制備分散體。在用于制備無(wú)菌注射液的無(wú)菌粉劑的情況下，優(yōu)選制備方法是真空干燥和冷凍干燥，所述冷凍干燥產(chǎn)生本文中描述的試劑和來(lái)自其先前無(wú)菌過(guò)濾的溶液的任何另外的期望成分的粉劑?？梢岳缤ㄟ^(guò)使用包衣例如卵磷脂，在分散體的情況下通過(guò)維持需要的粒度以及通過(guò)使用表面活性劑來(lái)維持溶液的適當(dāng)流動(dòng)性?？赏ㄟ^(guò)將組合物包含在延遲吸收的試劑例如單硬脂酸鹽和明膠中來(lái)產(chǎn)生可注射組合物的延遲吸收。

在某些實(shí)施方案中，可利用保護(hù)化合物避免快速釋放的載體例如控釋制劑(包括埋植劑和微型膠囊遞送系統(tǒng))來(lái)制備vla-1拮抗劑?？墒褂蒙锟山到獾纳锵嗳菪跃酆衔?，例如乙烯醋酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、膠原、多正酯和聚乳酸。用于制備此類制劑的許多方法已獲得專利或通常是已知的。參見(jiàn)，例如，j.r.robinson,編,sustainedandcontrolledreleasedrugdeliverysystems,marceldekker,inc.,newyork,1978。

可以例如用使其在循環(huán)中例如血液、血清或其它組織中的穩(wěn)定性和/或保留時(shí)間改善達(dá)例如至少1.5倍、至少2倍、至少5倍、至少10倍或至少50倍的部分修飾抗-vla-1抗體?？梢岳缤ㄟ^(guò)使用標(biāo)記的抗體形式評(píng)價(jià)修飾抗體以估計(jì)其是否可到達(dá)受損位置，例如關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)。

例如，可將抗-vla-1抗體與聚合物例如大體上無(wú)抗原性的聚合物例如環(huán)氧烷烴(polyalkyleneoxide)或聚氧乙烯締合。適當(dāng)?shù)木酆衔镌谥亓可献兓艽蟆？墒褂镁哂蟹秶?00至35,000道爾頓內(nèi)(或范圍在約1,000道爾頓至15,000道爾頓內(nèi)，或范圍內(nèi)在約2,000道爾頓至12,500道爾頓內(nèi))的數(shù)均分子量的聚合物。

在一個(gè)實(shí)施方案中，可將抗-vla-1抗體綴合至水溶性聚合物，例如親水性聚乙烯聚合物，例如聚乙烯醇或聚乙烯吡咯烷酮。此類聚合物的非限定性目錄包括環(huán)氧烷烴(polyalkyleneoxide)共聚物，例如聚乙二醇(peg)或聚丙二醇、聚氧乙烯化多元醇、其共聚物及其嵌段共聚物，只要嵌段共聚物的水溶性得以維持即可。其它有用的聚合物包括聚氧化烯(polyoxyalkylene)，例如聚氧乙烯、聚氧丙烯以及聚氧乙烯與聚氧丙烯的嵌段共聚物，例如普流尼克、甲基丙烯酸酯、卡波姆和分枝或未分枝多糖。

當(dāng)將抗-vla-1抗體與第二試劑例如抗炎劑或dmard組合使用時(shí)，可單獨(dú)地或一起配制兩種試劑。例如，可將各自的藥物組合物混合(例如在即將施用時(shí))，一起施用或可單獨(dú)地施用?？蓡为?dú)施用各自的藥物組合物，在相同或不同的時(shí)間施用。

施用。可以通過(guò)多種方法給受試者例如人受試者施用本發(fā)明中表征的抗-vla-1抗體。對(duì)于許多應(yīng)用，施用途徑是下列途徑之一：靜脈內(nèi)注射或輸注(iv)、皮下注射(sc)、腹膜內(nèi)施用(ip)或肌內(nèi)注射。在一些情況下，施用可以是直接進(jìn)入cns，例如通過(guò)硬膜內(nèi)、腦室內(nèi)(icv)、腦內(nèi)或顱內(nèi)施用?？梢砸怨潭ǖ膭┝炕蛞岳鏼g/kg的劑量施用拮抗劑。

還可選擇劑量來(lái)減少或避免針對(duì)拮抗劑的抗體的產(chǎn)生。

還可定制用于個(gè)別案例的阻斷劑的施用途徑和/或模式。可調(diào)整給藥方案以提供期望的反應(yīng)，例如治療反應(yīng)或組合治療作用。

通常地，可使用抗-vla-1抗體(和任選地第二試劑)的劑量的任意組合(單獨(dú)的或共配制的)，從而以生物可用量給受試者提供試劑。例如，可施用在0.025mg/kg至100mg/kg、0.05mg/kg至50mg/kg、0.1mg/kg至30mg/kg、0.1mg/kg至5mg/kg或0.3mg/kg至3mg/kg的范圍內(nèi)的劑量。其它適當(dāng)?shù)膭┝克桨ɡ?.001mg/kg至100mg/kg體重/施用、0.1mg/kg至50mg/kg體重/施用、0.1mg/kg體重至20mg/kg體重，例如0.1mg/kg體重至10mg/kg體重/施用。在其它實(shí)施方案中，以0.3mg/kg至1mg/kg或5至12.5mg/kg/施用的劑量施用抗體。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明表征了治療受試者的關(guān)節(jié)炎的方法，包括按照選自下列的方案給受試者施用抗-vla-1抗體(例如本文中描述的抗-vla-1抗體)：0.1mg/kg至1mg/kg；0.2mg/kg至1mg/kg；0.3mg/kg至1mg/kg；0.4mg/kg至1mg/kg；0.2mg/kg至4mg/kg以及0.3mg/kg至5mg/kg。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明表征了治療受試者的關(guān)節(jié)炎的方法，包括按照選自下列的方案給受試者施用抗-vla-1抗體(例如本文中描述的抗-vla-1抗體)：5mg/kg至10mg/kg；6mg/kg至9mg/kg；7mg/kg至8mg/kg；5mg/kg至9mg/kg；5mg/kg至8mg/kg；5mg/kg至7mg/kg；6mg/kg至10mg/kg；7mg/kg至10mg/kg以及8mg/kg至10mg/kg。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明表征了治療受試者的關(guān)節(jié)炎的方法，包括按照選自下列的方案給受試者施用抗-vla-1抗體(例如本文中描述的抗-vla-1抗體)：0.03mg/kg至少于0.1mg/kg；0.03mg/kg至0.9mg/kg；0.03mg/kg至0.08mg/kg；0.03mg/kg至0.05mg/kg；0.04mg/kg至0.08mg/kg；0.04mg/kg至0.07mg/kg或0.05mg/kg至少于0.1mg/kg。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明表征了治療受試者的關(guān)節(jié)炎的方法，包括按照選自下列的方案給受試者施用抗-vla-1抗體(例如本文中描述的抗-vla-1抗體)：大于1.0mg/kg至少于5.0mg/kg；大于1.0mg/kg至2.0mg/kg；大于1.0mg/kg至3.0mg/kg；大于1.0mg/kg至4.0mg/kg；2.0mg/kg至少于5mg/kg；3.0mg/kg至少于5mg/kg；4.0mg/kg至少于5mg/kg；2mg/kg至3mg/kg；3mg/kg至4mg/kg；1.5mg/kg至2.5mg/kg；2.5mg/kg至3.5mg/kg或3.5mg/kg/日至4.5mg/kg。

在另一個(gè)方面，本發(fā)明表征了治療受試者的關(guān)節(jié)炎的方法，包括按照選自下列的方案給受試者施用抗-vla-1抗體(例如本文中描述的抗-vla-1抗體)：0.03mg/kg/施用；0.1mg/kg/施用；0.2mg/kg/施用；0.3mg/kg/施用；0.5mg/kg/施用；0.6mg/kg/施用；0.8mg/kg/施用；1mg/kg/施用；3mg/kg/施用；5mg/kg/施用；7mg/kg/施用；8mg/kg/施用；10mg/kg/施用和12.5mg/kg/施用。

在某些實(shí)施方案中，以有效地提供至少1μg/ml的血漿水平的抗體的量施用具有抗-vla-1抗體的組合物。劑量可以是例如每次施用或每日的量。

在一些實(shí)施方案中，每3天至10天一次，例如每3天、4天、5天或6天一次；或每8至16天一次，或每12至30天一次施用抗-vla-1抗體。在一些實(shí)施方案中，每40天、每45天、每50天、每55天、每60天、每70天、每80天、每90天、每100天或每120天施用抗-vla-1抗體。

在一些實(shí)施方案中，在休藥期或停藥期之前，患者接受至少2次、至少3次、至少4次、至少5次或至少6次施用。

施用可以以單次施用方式進(jìn)行，或施用可以以間隔方式(例如治療方案的部分)進(jìn)行。例如，可每天1次或2次或3次，或每周1次或2次或3次，每2周或每3周或每4周1次，或每月1次或2次或3次施用抗-vla-1抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，每1至14天施用抗體。

在一些實(shí)施方案中，每周一次或兩次，或每月一次或兩次皮下或肌內(nèi)或靜脈內(nèi)施用抗-vla-1抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，每周二次皮下施用抗-vla-1抗體。

在一些實(shí)施方案中，開(kāi)始時(shí)提供負(fù)荷劑量(loadingdose)，隨后提供一系列維持劑量。用于負(fù)荷劑量的抗體濃度和施用途徑可以與維持劑量的抗體濃度或施用途徑相同或不同。例如，可靜脈內(nèi)施用負(fù)荷劑量，可皮下提供維持劑量。

如本文中所用，劑量單位形式或“固定劑量”是指適合作為用于待治療的受試者的單一劑量的物理上分離的單位。每一個(gè)單位包含經(jīng)計(jì)算產(chǎn)生與所需藥物載體相關(guān)以及任選地與其它試劑相關(guān)的期望的治療作用的預(yù)定量的活性化合物。

可給關(guān)節(jié)炎患者施用單個(gè)或多個(gè)劑量。在一個(gè)實(shí)施方案中，可通過(guò)連續(xù)輸注施用抗-vla-1抗體。治療可持續(xù)數(shù)天、數(shù)周、數(shù)月或數(shù)年來(lái)治療關(guān)節(jié)炎的癥狀，或阻止疾病進(jìn)展。

藥物組合物可包括藥學(xué)有效量的抗-vla-1抗體。可基于施用的抗體的作用、或抗體與第二試劑(如果使用第二試劑的話)的組合作用來(lái)確定此類有效量?？贵w的治療有效量還可根據(jù)因素例如患者的疾病狀態(tài)、年齡、性別和體重以及化合物引發(fā)個(gè)體的期望反應(yīng)(例如，至少一個(gè)病癥參數(shù)的改善，例如患病關(guān)節(jié)的疼痛或腫脹的減輕)的能力而變化。治療有效量也是其中組合物的任何毒性或有害作用超過(guò)治療有益作用的量。

試劑盒。可在試劑盒中提供抗-vla-1抗體。例如，試劑盒可包括(a)裝有包含抗-vla-1抗體的組合物的容器和任選地(b)信息材料。信息材料可以是與本文中描述的方法和/或抗體用于治療益處的用途相關(guān)的說(shuō)明性、指導(dǎo)性銷售或其它材料。試劑盒可任選地包括用于治療關(guān)節(jié)炎的第二試劑，例如dmard或tnf-α抑制劑。例如，試劑盒包括裝有包含抗-vla-1抗體的組合物的第一容器和裝有第二試劑的第二容器。

除了抗體以外，試劑盒中的組合物還可包括其它成分，例如溶劑或緩沖劑、穩(wěn)定劑或防腐劑。可以以任何形式例如以液體、干燥或冷凍干燥的形式提供抗-vla-1抗體，制劑通常是大體純的和/或無(wú)菌的。當(dāng)在液體溶液中提供試劑時(shí)，液體溶液通常是水溶液。當(dāng)以干燥形式提供試劑時(shí)，通常通過(guò)添加適當(dāng)?shù)娜軇┻M(jìn)行重構(gòu)。可任選地在試劑盒中提供溶劑例如無(wú)菌水或緩沖液。

試劑盒可包括一個(gè)或多個(gè)用于包含試劑的組合物的容器。例如，試劑盒可包括用于組合物和信息材料的分開(kāi)的容器、分配器或小室。在一個(gè)實(shí)例中，可將抗體組合物包含在瓶子、小瓶或注射器中，可將信息材料包含在塑料套或塑料袋中。在一些實(shí)施方案中，可將試劑盒的單獨(dú)的組件包含在單個(gè)未分開(kāi)的容器中。例如，將組合物裝在已在其上以標(biāo)簽的形式粘貼了信息材料的瓶子、小瓶或注射器中。在一些實(shí)施方案中，試劑盒包括多個(gè)例如一堆單個(gè)的容器，每一個(gè)容器裝有一個(gè)或多個(gè)抗-vla-1抗體的單位劑型例如一個(gè)或多個(gè)本文中描述的劑型。容器任選地包括組合單位劑量，例如，以例如期望的比率包含抗-vla-1抗體和第二試劑的單位劑型。例如，試劑盒可包括多個(gè)注射器、安瓿瓶、鋁箔包、泡罩包裝或醫(yī)療裝置，每一個(gè)容器包含單個(gè)組合單位劑量。試劑盒的容器可以密封的；防水的，例如，對(duì)于濕氣或蒸發(fā)的變化是不能滲透的；和/或不透光的。

試劑盒中提供的信息材料可包括關(guān)于抗體的產(chǎn)生、抗體的分子量、濃度、有效期、批次的信息或生產(chǎn)位點(diǎn)的信息等。信息材料還可涉及例如以適當(dāng)?shù)膭┝?、劑型或施用模?例如本文中描述的劑量、劑型或施用模式)施用抗-vla-1抗體來(lái)治療患有關(guān)節(jié)炎的受試者的方法。信息可包括關(guān)于誰(shuí)應(yīng)當(dāng)接受或不應(yīng)當(dāng)接受抗-vla-1抗體作為關(guān)節(jié)炎的療法的信息。例如，信息材料可規(guī)定患者在利用抗-vla-1抗體療法開(kāi)始治療之前，不接受dmard或抗-tnf-α療法，進(jìn)行一定的時(shí)間，例如3周、4周、5周、1個(gè)月或更長(zhǎng)時(shí)間。

試劑盒的信息材料在其形式上不受限制?？梢砸远喾N形式包括打印的文本、附圖或照片(例如在標(biāo)簽或印刷傳單上)提供信息材料。其它適當(dāng)形式包括計(jì)算可讀材料、錄像或錄音。信息材料可包括聯(lián)系信息，例如實(shí)際地址、電子郵件地址、網(wǎng)站或電話號(hào)碼，其中試劑盒的使用者可獲得關(guān)于抗-vla-1抗體和/或其在本文中描述的方法中的用途的實(shí)質(zhì)性信息。

試劑盒任選地包括適合于組合物施用的裝置，例如注射器或其它適當(dāng)?shù)倪f送裝置?？商峁┯靡环N或多種治療劑預(yù)裝載的裝置，或裝置可以是空的，但適合于裝載。

其它實(shí)施方案存在于權(quán)利要求中。

序列表

<110>桑塔魯斯股份有限公司（santarus,inc.）

<120>受試者的選擇和治療

<130>c2095-7003wo

<140>pct/us2012/023590

<141>2012-02-02

<150>61/498,263

<151>2011-06-17

<150>61/439,348

<151>2011-02-03

<160>4

<170>patentin3.5版

<210>1

<211>106

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>人工序列的描述:合成多肽

<400>1

glnileglnleuthrglnserproserserleuseralaservalgly

151015

aspargvalthrilethrcysseralaserserservalasnhismet

202530

phetrptyrglnglnlysproglylysalaprolysprotrpiletyr

354045

leuthrserasnleualaserglyvalproserargpheserglyser

505560

glyserglythrasptyrthrleuthrileserserleuglnproglu

65707580

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859095

pheglyglnglythrlysvalgluilelys

100105

<210>2

<211>118

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>人工序列的描述:合成多肽

<400>2

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151015

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505560

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65707580

glnmetasnserleuargalagluaspthralavaltyrtyrcysthr

859095

argglypheglyaspglyglytyrpheaspvaltrpglyglnglythr

100105110

leuvalthrvalserser

115

<210>3

<211>213

<212>prt

<213>人工序列

<220>

<223>人工序列的描述:合成多肽

<400>3

glnileglnleuthrglnserproserserleuseralaservalgly

151015

aspargvalthrilethrcysseralaserserservalasnhismet

202530

phetrptyrglnglnlysproglylysalaprolysprotrpiletyr

354045

leuthrserasnleualaserglyvalproserargpheserglyser

505560

glyserglythrasptyrthrleuthrileserserleuglnproglu

65707580

aspphealathrtyrtyrcysglnglntrpserglyasnprotrpthr

859095

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100105110

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115120125

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130135140

valglntrplysvalaspasnalaleuglnserglyasnserglnglu

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servalthrgluglnaspserlysaspserthrtyrserleuserser

165170175

thrleuthrleuserlysalaasptyrglulyshislysvaltyrala

180185190

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210

<210>4

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<213>人工序列

<220>

<223>人工序列的描述:合成多肽

<400>4

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serleuargleusercysalaalaserglyphethrpheserargtyr

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glyargphethrileserargaspasnserlysasnthrleutyrleu

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180185190

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195200205

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210215220

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225230235240

valpheleupheproprolysprolysaspthrleumetileserarg

245250255

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260265270

gluvallyspheasntrptyrvalaspglyvalgluvalhisasnala

275280285

lysthrlysproargglugluglntyrasnserthrtyrargvalval

290295300

servalleuthrvalleuhisglnasptrpleuasnglylysglutyr

305310315320

lyscyslysvalserasnlysalaleuproalaproileglulysthr

325330335

ileserlysalalysglyglnproarggluproglnvaltyrthrleu

340345350

proproserargaspgluleuthrlysasnglnvalserleuthrcys

355360365

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370375380

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