本發(fā)明屬于抗癌藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種含有長春新堿和噻唑烷化合物zyf-38的抗癌藥物組合物。
背景技術(shù)：
癌癥是嚴重威脅人類生存健康的重大疾病之一，其發(fā)病率呈上升趨勢，其死亡率很高。癌癥的治療，傳統(tǒng)的方法包括手術(shù)、放射治療和化學(xué)藥物治療，目前化學(xué)治療是晚期癌癥的主要治療手段之一。但目前臨床上廣泛使用的化療藥物療效有限，毒性作用較大，多次后還會發(fā)生耐藥。癌癥的化學(xué)藥物療中，只給予一種抗癌藥物就能達到所需的治療效果的情形十分少見。臨床治療上，為達到良好的治療效果的目的，通常使用具有不同作用機理的兩種以上藥物的多藥物治療。這種聯(lián)合治療的目的在于通過使具有不同作用機理的抗癌藥物聯(lián)合使用以減輕副作用，增強抗癌作用，希望達到減少不敏感細胞群體，防止或延遲產(chǎn)生抗藥性，分散毒性等治療效果。然而，對于聯(lián)合治療，不同作用機理藥物的隨機聯(lián)用并不一定提供抗腫瘤效果增強作用或協(xié)同作用。
長春新堿是一種雙吲哚型生物堿。分子式c46h56n4o10，分子量是824.96。存在于夾竹桃科植物長春花中。它是一種有絲分裂抑制劑，被廣泛用于化學(xué)療法。具有使細胞分裂（有絲分裂）在中期停止的作用，這與秋水仙素相似，但其作用比秋水仙素更強。與秋水仙素一樣可以與微管蛋白結(jié)合而抑制其生物活性，但結(jié)合部位不同。另外它與秋水仙素不同的是對微管蛋白以外的蛋白質(zhì)如肌動蛋白及10納米細絲蛋白等也起作用。在臨床醫(yī)學(xué)上作為抗癌劑之一而被應(yīng)用，特別是對造血器官的腫瘤比較有效。長春堿硫酸鹽可用于治療何杰金氏病和絨毛膜上皮癌，療效較好；對淋巴肉瘤、網(wǎng)狀細胞肉瘤、急性白血病、乳腺癌、腎母細胞瘤、卵巢癌、睪丸癌、神經(jīng)母細胞瘤和惡性黑色素瘤等也有一定療效。(抗腫瘤藥物手冊）。長春新堿被廣泛的應(yīng)用于癌癥的化療方案，但化療存在著比較嚴重毒副反應(yīng)：1、劑量限制性毒性是神經(jīng)系統(tǒng)毒性，主要引起外周神經(jīng)癥狀，如手指、神經(jīng)毒性等，與累積量有關(guān)。足趾麻木、腱反射遲鈍或消失，外周神經(jīng)炎。腹痛、便秘，麻痹性腸梗阻偶見。運動神經(jīng)、感覺神經(jīng)和腦神經(jīng)也可受到破環(huán)，并產(chǎn)生相應(yīng)癥狀。神經(jīng)毒性常發(fā)生于40歲以上者，兒童的耐受性好于成人，惡性淋巴瘤病人出現(xiàn)神經(jīng)毒性的傾向高于其他腫瘤病人。2、骨髓抑制和消化道反應(yīng)較輕。3、有局部組織刺激作用，藥液不能外漏，否則可引起局部壞死。4、可見脫發(fā)，偶見血壓的改變。長春新堿臨床上使用需配合同步服用人參皂苷rh2，其作為一種brm，在化療時和化療藥物同時服用，可以有效的增進淋巴因子il-12等的活性，提升免疫，同時能刺激骨髓，恢復(fù)骨髓的造血功能，另外更能提升細胞對化學(xué)藥物毒性的耐受性，減少副作用，增強化療效果。目前有研究長春新堿脂質(zhì)體，用來降低長春新堿的神經(jīng)毒性。綜上所述，長春新堿臨床上使用療效顯著，但需要抑制其毒性。
噻唑烷化合物在醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)、化學(xué)等很多領(lǐng)域具有廣泛的開發(fā)以及應(yīng)用價值。在醫(yī)藥領(lǐng)域，噻唑烷化合物具有降血糖、抗腫瘤、抗氧化和抗菌等作用，因此在臨床上噻唑烷化合物可用于治療多種疾病。近年來，大量研究表明噻唑烷化合物能通過多種途徑干預(yù)腫瘤發(fā)展的不同階段，進而發(fā)揮潛在的抗癌效應(yīng)，其中涉及的主要機制包括阻止細胞增長、誘導(dǎo)細胞凋亡、抑制細胞侵襲轉(zhuǎn)移、限制能量供應(yīng)等。本發(fā)明人研究中發(fā)現(xiàn)一種噻唑烷化合物(e)-5-(4-hydroxy-3-methoxybenzylidene)-2-(phenylamino)thiazol-4(5h)-one具有抗癌作用，其化學(xué)式為c17h14n2o3s，分子量為326.37，結(jié)構(gòu)式見圖1，命名為zyf-38。經(jīng)研究zyf-38對多種癌細胞具有抑制作用，但其和長春新堿等藥物組合使用的效果未見報道。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
為解決現(xiàn)有技術(shù)上的不足，本發(fā)明提供了一種含有長春新堿和噻唑烷化合物zyf-38的抗癌藥物組合物。
本發(fā)明的目的是提供一種含有長春新堿和噻唑烷化合物zyf-38的組合物作為抗癌藥物，解決臨床藥物復(fù)合使用，減輕毒性，提高療效。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
一種含有長春新堿的抗癌藥物組合物，其中長春新堿和噻唑烷化合物zyf-38之間的重量比為0.1:1至20:0.1。
優(yōu)選的，長春新堿和噻唑烷化合物zyf-38之間的重量比為0.6:1至13.3:1。
更優(yōu)選的，長春新堿和噻唑烷化合物zyf-38之間的重量比為0.6:1、20:3或40:3。
所述藥物組合物的劑型為粉劑、注射液、膠囊、片劑、緩釋劑或口服液中的一種或多種醫(yī)學(xué)上可接受的劑型。
所述藥物組合物的使用方式為注射、口服、手術(shù)放置中的一種或多種醫(yī)學(xué)上可接受的方式。
所述藥物組合物用于制備肺腺癌、宮頸癌、乳腺癌或肝癌的藥物。
本發(fā)明的有益效果是：
1、本發(fā)明可以顯著提高療效。比單組份治療，本藥物組合物具有明顯的協(xié)調(diào)作用，具有增加治療效果作用。
2、本發(fā)明藥物聯(lián)合使用，可以降低抗性的產(chǎn)生。
3、本發(fā)明毒副作用小。
附圖說明
圖1是zyf-38的化學(xué)結(jié)構(gòu)式。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步詳細的描述：
實施例中用到的實驗材料和方法如下：
實驗材料和細胞培養(yǎng)
選用人肺腺癌細胞系a549、人正常胚肺細胞系wi-38細胞、人宮頸癌細胞系hela、人乳腺癌細胞系mcf-7、人肝癌細胞系bel-7402細胞作為實驗細胞，運用含有10%的新生牛血清的1640和dmem培養(yǎng)基，置于37℃、5%co2飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
xtt法檢測細胞存活率
將處于對數(shù)生長期且形態(tài)良好的人肺腺癌細胞系a549、人正常胚肺細胞系wi-38細胞、人宮頸癌細胞系hela、人乳腺癌細胞系mcf-7、人肝癌細胞bel-7402經(jīng)pbs沖洗、0.25%胰酶消化并吹打為單細胞懸液，計數(shù)后，調(diào)整細胞濃度為4×104個/ml，按照100μl/孔接種于96孔板。于37℃、5%co2飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，加入不同濃度的待測藥物，繼續(xù)培養(yǎng)一段時間后加入50μlxtt-pms，孵育4h后，于酶標儀中檢測450nm處的吸光值。
存活率=（實驗組od-空白組od）/（溶劑對照組od-空白組od）×100%。
實施例1zyf-38與長春新堿聯(lián)合使用對多種腫瘤細胞和正常細胞的增殖抑制作用
將處于對數(shù)生長期且形態(tài)良好的人肺腺癌細胞系a549、人正常胚肺細胞系wi-38細胞、人宮頸癌細胞系hela、人乳腺癌細胞系mcf-7、人肝癌細胞bel-7402進行pbs沖洗、0.25%胰酶消化并吹打為單細胞懸液。常規(guī)計數(shù)后，調(diào)整細胞濃度為4×104個/ml，按照100μl/孔接種于96孔板。于37℃、5%co2飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，加入待測藥物，繼續(xù)培養(yǎng)一段時間后加入50μlxtt-pms，孵育4h后，于酶標儀中檢測450nm處的吸光值。
存活率=（實驗組od-空白組od）/（溶劑對照組od-空白組od）×100%。
兩藥相互作用系數(shù)值q=e（a+b）/(ea+eb-ea×eb)，e（a+b）指a、b兩藥聯(lián)合對細胞的抑制率，ea和eb指a、b藥分別對細胞的抑制率。q>1.15時，兩藥有協(xié)同作用；q=0.85~1.15時，兩藥有相加作用；q<0.85時，兩藥表現(xiàn)為拮抗作用。
結(jié)果表明：
（1）人肺腺癌細胞系a549
從表1中可以得出，zyf-38與不同濃度的長春新堿組合對人肺腺癌細胞系a549的增殖抑制作用明顯強于等濃度的zyf-38和長春新堿的單獨作用，但通過計算兩藥相互作用系數(shù)q（表1），發(fā)現(xiàn)zyf-38與低濃度2μg/ml的長春新堿相互作用為相加作用，而zyf-38+4μg/ml長春新堿組合作用其q值（表1）顯示二者對a549細胞為協(xié)同作用，因此zyf-38聯(lián)合長春新堿對a549細胞表現(xiàn)為明顯的協(xié)同作用。
表1、zyf-38與長春新堿聯(lián)用對a549細胞的增殖抑制作用
（2）人宮頸癌細胞系hela
從表2中可以得出，zyf-38與不同濃度的長春新堿組合對人宮頸癌細胞系hela的增殖抑制作用明顯強于等濃度的zyf-38和長春新堿的單獨作用，但通過計算兩藥相互作用系數(shù)q（表2），發(fā)現(xiàn)zyf-38與低濃度2μg/ml的長春新堿相互作用為相加作用，而zyf-38+4μg/ml長春新堿組合作用其q值（表2）顯示二者對hela細胞為協(xié)同作用，因此zyf-38聯(lián)合長春新堿對hela細胞表現(xiàn)為明顯的協(xié)同作用。
表2、zyf-38與長春新堿聯(lián)用對hela細胞的增殖抑制作用
（3）人乳腺癌細胞系mcf-7
從表3中可以得出，zyf-38與不同濃度的長春新堿組合對人乳腺癌細胞系mcf-7的增殖抑制作用明顯強于等濃度的zyf-38和長春新堿的單獨作用，但通過計算兩藥相互作用系數(shù)q（表3），發(fā)現(xiàn)zyf-38與低濃度2μg/ml的長春新堿相互作用為相加作用，而zyf-38+4μg/ml長春新堿組合作用其q值（表3）顯示二者對mcf-7細胞為協(xié)同作用，因此zyf-38聯(lián)合長春新堿對mcf-7細胞表現(xiàn)為明顯的協(xié)同作用。
表3、zyf-38與長春新堿聯(lián)用對mcf-7細胞的增殖抑制作用
（4）人肝癌細胞系bel-7402
從表4中可以得出，zyf-38與不同濃度的長春新堿組合對人肝癌細胞系bel-7402的增殖抑制作用明顯強于等濃度的zyf-38和長春新堿的單獨作用，但通過計算兩藥相互作用系數(shù)q（表4），發(fā)現(xiàn)zyf-38與低濃度2μg/ml的長春新堿相互作用為相加作用，而zyf-38+4μg/ml長春新堿組合作用其q值（表4）顯示二者對bel-7402細胞為協(xié)同作用，因此zyf-38聯(lián)合長春新堿對bel-7402細胞表現(xiàn)為明顯的協(xié)同作用。
表4、zyf-38與長春新堿聯(lián)用對bel-7402細胞的增殖抑制作用
（5）人正常胚肺細胞系wi-38細胞
從表5中可以得出，通過計算zyf-38與長春新堿這兩種藥相互作用系數(shù)q（表5），發(fā)現(xiàn)zyf-38與不同濃度的長春新堿相互作用為相加作用，因此zyf-38聯(lián)合長春新堿對wi-38細胞表現(xiàn)為明顯的相加作用。
表5、zyf-38與長春新堿聯(lián)用對wi-38細胞的增殖抑制作用
實施例2zyf-38與長春新堿聯(lián)用對小鼠移植瘤的抑制作用
將雄性裸鼠隨機分成對照組（加生理鹽水），長春新堿組，zyf-38組以及兩種藥物聯(lián)合作用組，每組10只。首先，將形態(tài)良好且處于對數(shù)生長期的癌細胞于超凈工作臺內(nèi)，用1×pbs緩沖液沖洗，再用0.25%的胰蛋白酶+0.02%edta-na2消化細胞，加入1640培養(yǎng)基，將消化下來的癌細胞混勻，離心并收集癌細胞沉淀，接著用生理鹽水來稀釋沉淀的癌細胞，計數(shù)后調(diào)整細胞濃度為1.2×107個/ml，用一次性注射器吸取0.2ml細胞懸液接種于裸鼠上肢的腋下。待瘤長到大小約1.0cm時，采用尾靜脈注射的方式給藥。我們向?qū)φ战M的裸鼠上肢的腋下注射生理鹽水0.2ml/只，長春新堿組的裸鼠上肢腋下加入抗腫瘤藥物長春新堿的濃度為6mg/kg，zyf-38組的裸鼠上肢腋下加入zyf-38的濃度為10mg/kg。兩種藥物聯(lián)合作用組的裸鼠上肢腋下加入相應(yīng)的聯(lián)合藥物濃度。每隔三天用游標卡尺測量一次腫瘤的直徑(a)和腫瘤的橫徑（b），按照公式v=π/6×(a/2+b/2)3計算腫瘤的體積大小，繪制出腫瘤的生長曲線。
結(jié)果表明，長春新堿或者zyf-38單獨對癌細胞作用后，腫瘤的抑制率分別為33.9%和16.2%，顯著抑制了腫瘤的生長。zyf-38和長春新堿聯(lián)合作用增強了對腫瘤的抑制作用，腫瘤抑制率達到71.2%，q值為1.60，兩藥表現(xiàn)為明顯協(xié)同作用。
表6、zyf-38與長春新堿聯(lián)用對小鼠移植瘤的抑制作用
以上所述僅是本專利的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本專利技術(shù)原理的前提下，還可以做出若干改進和替換，這些改進和替換也應(yīng)視為本專利的保護范圍。