本發(fā)明涉及一種草烏甲素的新用途，屬于藥物應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

骨重建(boneremodeling)在骨組織中不斷進(jìn)行著，包括破骨細(xì)胞(osteoclast，oc)黏附在舊骨區(qū)域，通過分泌釋放酸及酶，前者使骨礦溶解，后者致骨的膠原降解，從而引起骨的破壞與吸收，形成骨吸收陷窩；隨后成骨細(xì)胞(osteoblast，ob)移行至被吸收部位，分泌骨基質(zhì)，骨基質(zhì)礦化而形成新骨。然而，骨質(zhì)疏松癥(osteoporosis，op)的發(fā)生就是由于骨重建過程中骨吸收與骨形成的平衡被打破，長期、過度的骨吸收使骨量減少而導(dǎo)致，其是目前老年人，尤其是絕經(jīng)期和絕經(jīng)后婦女的常見多發(fā)病，發(fā)病率現(xiàn)已位居全球常見病第7位。

目前，針對骨質(zhì)疏松癥(op)的治療主要針對絕經(jīng)后婦女及中老年男性等高危人群的預(yù)防、op的治療以及op并發(fā)骨折的治療三個方面。預(yù)防措施主要包括攝入足夠的鈣與維生素d、運(yùn)動、防跌倒、戒煙酒，其可以延緩op的發(fā)生以及op患者骨量的進(jìn)一步丟失。對于不同類型的op患者，治療op的藥物有雙膦酸鹽類藥物(阿倫膦酸鈉、阿倫膦酸鈉+維生素d、依班膦酸鈉、利塞膦酸鈉以及唑來膦酸)、降鈣素、雌激素受體調(diào)節(jié)劑(雷洛昔芬)、雌激素、pth1-34(特立帕肽)、組織選擇性雌激素復(fù)合物(結(jié)合雌激素/巴多昔芬)以及rankl單抗(狄諾塞麥)等。但是，上述的每類藥物都有不同的適應(yīng)癥、用法、用量、副作用，且部分藥物價格較高而難以被廣泛應(yīng)用。而op并發(fā)骨折的患者，多集中在胸腰段椎體骨折及跌倒所致的髖部骨折為主，嚴(yán)重者多采用椎體成形術(shù)、內(nèi)固定、髖關(guān)節(jié)置換等措施加以處理。與此同時，高齡人群尤其患有骨質(zhì)疏松者跌倒后易致髖部骨折，涉及髖關(guān)節(jié)的創(chuàng)傷目前較多使用關(guān)節(jié)置換予以治療，但是關(guān)節(jié)假體磨損產(chǎn)生的磨損顆粒誘導(dǎo)骨吸收以及無菌性假體松動，是關(guān)節(jié)置換手術(shù)失敗的主要原因，且術(shù)后10年發(fā)生率高達(dá)34％，成為困擾醫(yī)學(xué)界的難題。目前無菌性假體松動的病理機(jī)制尚未完全明確，病理發(fā)現(xiàn)假體周圍組織中有大量的破骨細(xì)胞和巨噬細(xì)胞浸潤。已有研究認(rèn)為無菌性假體松動的發(fā)病過程中，假體周圍的磨損顆粒作為異物刺激局部產(chǎn)生無菌性炎癥，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、t淋巴細(xì)胞分泌高濃度的細(xì)胞因子以及趨化因子，包括腫瘤壞死因子tnf-α、白細(xì)胞介素、前列腺素e2以及巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mcsf)等。這些細(xì)胞因子以及趨化因子可以誘導(dǎo)破骨細(xì)胞大量分化成熟，導(dǎo)致局部發(fā)生骨溶解，進(jìn)一步加劇假體松動。假體與骨組織間松動的加大進(jìn)一步加重了機(jī)械性磨損，導(dǎo)致更多的顆粒產(chǎn)生，誘發(fā)更嚴(yán)重的無菌性炎癥和骨溶解，使整個病理過程呈現(xiàn)惡性循環(huán)。所以，安全有效且價格可接受的針對骨質(zhì)疏松和骨溶解的藥物研究迫在眉睫。

草烏甲素(bla)是從滇西特有藥用植物滇西嘟啦中分離出來的烏頭屬植物生物堿，具有良好的抗炎鎮(zhèn)痛及免疫調(diào)節(jié)作用。草烏甲素作為新型第三類鎮(zhèn)痛藥物，不屬于nsaid，可對鈉離子通道進(jìn)行調(diào)節(jié)，很少有心理依賴性和器質(zhì)性器官毒性作用，可避免nsaid和阿片類鎮(zhèn)痛藥物可能導(dǎo)致的胃腸道和心血管及腎臟不良反應(yīng)、藥物依賴等潛在危險。目前，臨床上廣泛用于治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(ra)、骨關(guān)節(jié)炎、肌纖維炎、頸肩痛、腰腿痛、癌性疼痛以及各種原因?qū)е碌穆蕴弁础５?，對于草烏甲素在抗骨質(zhì)疏松、骨溶解方面的作用與功效迄今為止尚未見相關(guān)報道；同時，該草烏甲素藥物單體是從中藥中提取出來的活性藥物，具有安全性好，副作用較少，無成癮性的特點(diǎn)。因此，對于中草藥提取物草烏甲素藥物進(jìn)一步深入研究具有一定市場前景。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明針對以上現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，提出一種草烏甲素的新用途，解決的問題是如何提供一種藥物的新用途使有效防治骨質(zhì)疏松和滑溶解的發(fā)生。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的，一種草烏甲素的新用途，其特征在于，所述草烏甲素用于制備防治骨質(zhì)疏松或骨溶解的藥物。

草烏甲素(bla)是從滇西特有藥用植物滇西嘟啦中分離出來的烏頭屬植物生物堿，具有良好的抗炎鎮(zhèn)痛及免疫調(diào)節(jié)作用，因此，現(xiàn)有技術(shù)中通常是用來作為抗炎、鎮(zhèn)痛方面的藥物來使用。而本發(fā)明人經(jīng)過大量的研究發(fā)現(xiàn)草烏甲素的另一種全新性能，首次發(fā)現(xiàn)了該中草藥提取物草烏甲素在防治骨質(zhì)疏松或骨溶解方面的藥理作用效果。更具體的說，即本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)草烏甲素能夠抑制破骨細(xì)胞分化的形成，相當(dāng)于能夠抑制破骨細(xì)胞分化通道上蛋白iκbα磷酸化(p-iκbα)、iκbα降解明顯減弱且下游p65磷酸化活化(p-p65)降低，從而達(dá)到抑制破骨細(xì)胞分化；另一方面，在草烏甲素明顯抑制破骨細(xì)胞的情況下對間充質(zhì)干細(xì)胞(bmscs)的增殖并無抑制，并且堿性磷酸酶染色及茜素紅染色提示其對bmscs向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)過程及成骨能力無抑制，而對于草烏甲素能夠明顯抑制鈦顆粒介導(dǎo)的骨丟失。因此，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)的草烏甲素可應(yīng)用在骨質(zhì)疏松、骨溶解的防治藥物，屬于一種全新的應(yīng)用；同時，草烏甲素是從中藥中提取而成，本身單體的安全性好，副作用較少，無成癮性，更有利于其在臨床上的應(yīng)用，且其本身具有良好的抗炎鎮(zhèn)痛及免疫調(diào)節(jié)作用，可為相關(guān)疾病患者帶來更多的好處。

在上述草烏甲素的新用途中，作為優(yōu)選，所述草烏甲素用于制備抑制破骨細(xì)胞分化的藥物。由于本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)草烏甲素能夠抑制破骨細(xì)胞分化，且對于成骨細(xì)胞并無抑制作用，從而使破骨細(xì)胞數(shù)量明顯減少，達(dá)到有效防治骨質(zhì)疏松或防治骨溶解的效果。當(dāng)然，對于草烏甲素用藥濃度的選擇可以根據(jù)臨床進(jìn)一步的進(jìn)行優(yōu)化實(shí)施，但并不限制草烏甲素在防治骨質(zhì)疏松或骨溶解方面的應(yīng)用。

在上述的草烏甲素的新用途中，作為優(yōu)選，所述草烏甲素用于制備抑制破骨細(xì)胞分化過程中nf-κb信號通路活化的藥物。經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，在本發(fā)明的草烏甲素的作用下，由于在rankl刺激下破骨細(xì)胞分化通路上nf-κb通路上蛋白iκbα磷酸化(p-iκbα)、iκbα降解明顯減弱且下游p65磷酸化活化(p-p65)能夠明顯受抑制，所以說，草烏甲素能夠通過nf-κb通路抑制破骨細(xì)胞的分化，從而實(shí)現(xiàn)防治骨質(zhì)疏松或骨溶解的效果。

在上述草烏甲素的新用途中，作為優(yōu)選，所述草烏甲素用于制備抑制破骨細(xì)胞分化過程中破骨分化基因ctsk、ctr、nfatc1、v-atpase-d2、v-atpase-a3和trap表達(dá)水平的藥物。通過用于破骨細(xì)胞分化過程中相關(guān)基因表達(dá)來實(shí)現(xiàn)抑制破骨細(xì)胞分化的效果。

在上述的草烏甲素的新用途中，作為優(yōu)選，所述草烏甲素用于制備抑制破骨細(xì)胞分化過程中抗酒石酸酸性磷酸酶的藥物。能夠使破骨細(xì)胞分化過程中nf-κb通路中的iκbα磷酸化及降解明顯減弱，使下游的p65磷酸化活化降低，實(shí)現(xiàn)抑制破骨細(xì)胞分化的作用。

在上述的草烏甲素的新用途中，作為優(yōu)選，所述藥物包括活性成分草烏甲素和藥學(xué)上可接受的載體。將草烏甲素制成相應(yīng)的藥物后，通常需要添加輔料加工而成，而于對于藥學(xué)上可接受的載體通常可以根據(jù)藥物的劑型或藥效及口味進(jìn)行必要的選擇均可。通常藥學(xué)上可接受的載體如矮味劑、增粘劑、填充劑、崩解劑、著色劑、增粘劑等等均可，但對于藥學(xué)上可接受的載體并不限于上述例舉的種類。

在上述的草烏甲素的新用途中，作為優(yōu)選，所述藥物的劑型包括膠囊、片劑、口服劑或顆粒劑。通過將藥物制成不同的劑型，主要是考慮到有利于藥物吸收和有效保證或提高藥物活性方面，但對于藥物劑型的選擇并沒有具體的限定，并不限于上述例舉的劑型種類。

綜上所述，本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)：

本發(fā)明草烏甲素的新用途中的草烏甲素能夠抑制破骨細(xì)胞分化通道上蛋白iκbα磷酸化(p-iκbα)、iκbα降解明顯減弱且下游p65磷酸化活化(p-p65)降低，通過nf-κb通路抑制破骨細(xì)胞的分化，從而實(shí)現(xiàn)防治骨質(zhì)疏松或骨溶解的效果；且在草烏甲素明顯抑制破骨細(xì)胞的情況下對間充質(zhì)干細(xì)胞(bmscs)的增殖并無抑制，并且堿性磷酸酶染色及茜素紅染色提示也能夠說明其對bmscs向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)過程及成骨能力無抑制。

附圖說明

圖1是本發(fā)明草烏甲素對bmm的細(xì)胞增殖抑制的分析圖。

圖2是本發(fā)明草烏甲素的濃度對破骨細(xì)胞分化的影響分析圖。

圖3是本發(fā)明草烏甲素的作用時間對破骨細(xì)胞分化的影響分析圖。

圖4是本發(fā)明草烏甲素對破骨細(xì)胞分化相關(guān)基因表達(dá)的影響分析圖。

圖5是本發(fā)明草烏甲素對破骨細(xì)胞分化nf-κb通路抑制的影響分析圖。

圖6是本發(fā)明草烏甲素對破骨細(xì)胞分化過程中蛋白相對表達(dá)的影響分析圖。

圖7是本發(fā)明草烏甲素對bmscs的細(xì)胞增殖的分析圖。

圖8是本發(fā)明草烏甲素的濃度對bmscs成骨能力的影響分析圖。

圖9是本發(fā)明草烏甲素對c57小鼠顱骨蓋骨中鈦顆粒介導(dǎo)的骨丟失的影響分析圖。

圖10是本發(fā)明草烏甲素對去卵巢小鼠術(shù)后脛骨骨量丟失的影響分析圖。

具體實(shí)施方式

下面通過具體實(shí)施例和附圖，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步具體的說明，但是本發(fā)明并不限于這些實(shí)施例。

實(shí)施例1

本實(shí)施例中主要是針對草烏甲素抑制破骨細(xì)胞分化的分析，具體過程如下：

1.破骨細(xì)胞的培養(yǎng)

取4到6周的c57bl6小鼠一只，取股骨和脛骨，沖出骨髓腔內(nèi)細(xì)胞后，將細(xì)胞種在t75flask中培養(yǎng)，其中，采用的培養(yǎng)基為含30ng/ml的m-csf的cmalphamem(含10％血清)培養(yǎng)基，每隔一天進(jìn)行換液，進(jìn)行培養(yǎng)3-5天，即可獲得骨髓來源的巨噬細(xì)胞(bmm細(xì)胞)，根據(jù)不同需要，bmm細(xì)胞傳代種板，用含50ng/mlrankl、含30ng/ml的m-csf的cmalphamem的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，隔天換液，培養(yǎng)5-7天，即可長出破骨細(xì)胞。

2.采用cck-8法測bmm細(xì)胞增殖抑制

取上述得到的bmm細(xì)胞種入96孔板，細(xì)胞密度為8×10³細(xì)胞/每孔，每板共30孔(一個control，九個藥物濃度，每組3個復(fù)孔)，草烏甲素最高濃度為200μm，培養(yǎng)基為含30ng/ml的m-csf的cmalphamem，進(jìn)行培養(yǎng)48、96、144小時，用cck-8法讀取藥物處理48小時后對細(xì)胞的影響，如圖1所示，計(jì)算出草烏甲素對bmm細(xì)胞的ic50。

3.破骨細(xì)胞分化分析

取一個96孔板，種30孔細(xì)胞,每孔細(xì)胞數(shù)量為6×10³，細(xì)胞在含50ng/mlrankl、30ng/ml的m-csf的cmalphamem的培養(yǎng)基條件下進(jìn)行培養(yǎng)，藥物最高濃度為ic50濃度，依次半數(shù)遞減，直至為0，隔天換液，培養(yǎng)5-7天，當(dāng)control組已經(jīng)有明顯的破骨細(xì)胞形成，培養(yǎng)終止，將培養(yǎng)基吸掉后，用4％多聚甲醛每孔100ul固定細(xì)胞20分鐘后，用1×pbs洗兩遍，抗酒石酸酸性磷酸酶(trap)染色，在顯微鏡下，計(jì)算多于3個細(xì)胞核，trap染色陽性的破骨細(xì)胞的數(shù)量和鋪展面積，獲得數(shù)據(jù)，明確藥物濃度對破骨細(xì)胞分化有抑制作用。采用同樣方法檢測rankl誘導(dǎo)3、5、7天后草烏甲素對破骨細(xì)胞分化的影響。

結(jié)合圖2和圖3所示，可發(fā)現(xiàn)在草烏甲素濃度為2.5μm時破骨細(xì)胞數(shù)量明顯減少，5μm時破骨細(xì)胞形成顯著受到抑制，10μm時基本無明顯破骨細(xì)胞分化形成。

實(shí)施例2

本實(shí)施例主要是針對草烏甲素抑制破骨細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)的分析，具體過程如下：

采用定量rt-pcr法：應(yīng)用rna抽提試劑盒(trizol試劑)提取總rna，測定濃度后，取一部分進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成cdna，在反應(yīng)體系中合成cdna。該反應(yīng)體系包括逆轉(zhuǎn)錄buffer、上游引物、下游引物、dntp、逆轉(zhuǎn)錄酶、depc水、rna模版(總體積25μl)，得到逆轉(zhuǎn)錄終溶液即為cdna溶液，保存于-80℃。進(jìn)行待測樣品的待測基因?qū)崟r定量pcr，其反應(yīng)體系包括以下：sybrgreen染料、上游引物、下游引物、dntp、taq聚合酶、待測樣品cdna、ddh2o(總體積20μl)。將配制好的pcr反應(yīng)溶液置于realtimepcr儀上進(jìn)行pcr擴(kuò)增反應(yīng)。反應(yīng)條件為不同的目的基因不同的條件。定量pcr檢測破骨細(xì)胞相關(guān)基因ctsk、ctr、nfatc1、v-atpase-d2、v-atpase-a3、trap的表達(dá)，獲得相應(yīng)的數(shù)據(jù)。上述的實(shí)施例中對應(yīng)破骨細(xì)胞相關(guān)基因ctsk、ctr、nfatc1、v-atpase-d2、v-atpase-a3、trap所選用的上、下游引物如下表1所示：

表1：

具體分析結(jié)果如圖4所示，可發(fā)現(xiàn)破骨細(xì)胞(選用實(shí)施例1中的破骨細(xì)胞)相關(guān)基因的表達(dá)隨著草烏甲素濃度的升高而減少，說明草烏甲素對破骨細(xì)胞相關(guān)基因ctsk、ctr、nfatc1、v-atpase-d2、v-atpase-a3、trap的表達(dá)均有較好的抑制作用，也說明草烏甲素對破骨細(xì)胞的分化具體較好的抑制作用，實(shí)現(xiàn)有效防治骨質(zhì)疏松和骨溶解的效果。

實(shí)施例3

本實(shí)施例主要針對草烏甲素通過抑制nf-κb信號通路抑制破骨細(xì)胞分化的分析，具體過程如下：

本實(shí)施例中所用的主要抗體包括iκbα、p-iκbα、p65、p-p65和gapdh。

其中，westernblot按照標(biāo)準(zhǔn)的protocol進(jìn)行，主要包括蛋白的提取和定量，電泳樣本制備以及sds-page電泳，然后進(jìn)行轉(zhuǎn)膜到pvdf膜上。將轉(zhuǎn)膜后的膜進(jìn)行牛奶封閉，采用tbst清洗后進(jìn)行一抗孵浴、采用tbst清洗后再進(jìn)行二抗(熒光二抗)孵浴，清洗后以oddesay顯像系統(tǒng)觀察和拍攝westernblot條帶。運(yùn)用imagej軟件對圖像灰度進(jìn)行分析，計(jì)算目標(biāo)蛋白灰度值與對應(yīng)的內(nèi)參gapdh的比值。

具體分析結(jié)果如圖5和圖6所示，結(jié)果顯示小鼠前破骨細(xì)胞(選用實(shí)施例1中的破骨細(xì)胞)在草烏甲素處理后，在rankl刺激下破骨細(xì)胞分化通路中nf-κb通路上抑制蛋白iκbα磷酸化(p-iκbα)、iκbα降解明顯減弱且下游p65磷酸化活化(p-p65)降低，說明草烏甲素可通過nf-κb信號通路抑制破骨細(xì)胞分化的作用效果。更進(jìn)一步的講，正常情況下，在rankl加進(jìn)去以后，會激活traf6，然后nf-κb信號通路上，ikk1/ikk2激活，進(jìn)而導(dǎo)致iκbα磷酸化成p-iκbα進(jìn)入降解過程(正常情況下，iκbα和nf-κb也就是與p65結(jié)合在一起，阻止p65活性位點(diǎn)的暴露)，而暴露出的p65活性位點(diǎn)，磷酸化后可以從細(xì)胞質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞核啟動相關(guān)破骨細(xì)胞活化所需的基因轉(zhuǎn)錄過程。而草烏甲素加入后，使iκbα磷酸化和降解減少，阻礙了p65的活化，使最下游的磷酸化p-p65減少非常明顯，也就說明了本發(fā)明采用草烏甲素通過nf-κb信號通路抑制破骨細(xì)胞分化的作用。

實(shí)施例4

本實(shí)施例主要針對草烏甲素在抑制破骨細(xì)胞分化有效濃度下對成骨細(xì)胞有無明顯影響的分析，具體分析過程如下：

1.大鼠間充質(zhì)干細(xì)胞(bmscs)培養(yǎng)

取3個月齡的雄性sd大鼠，分離出股骨和脛骨，沖出骨髓腔內(nèi)細(xì)胞后，將細(xì)胞種在t75flask中培養(yǎng)，采用的培養(yǎng)基為dmem高糖培養(yǎng)液(含10％血清)，每隔一天換液，培養(yǎng)3-5天，待細(xì)胞長滿后傳代，繼續(xù)培養(yǎng)傳代至p3代，得到相應(yīng)的大鼠間充質(zhì)干細(xì)胞(bmscs)。

2.采用cck-8法測bmscs細(xì)胞增殖抑制

將bmscs細(xì)胞種入3塊96孔板，細(xì)胞密度為6×10³細(xì)胞/每孔，每板共30孔(一個control，九個藥物濃度，每組3個復(fù)孔)，草烏甲素最高濃度為200μm，培養(yǎng)基為dmem高糖培養(yǎng)液(含10％血清)，培養(yǎng)48、72和96小時，用cck8法讀取藥物處理后對細(xì)胞的影響。如圖7所示，計(jì)算出草烏甲素對bmscs細(xì)胞的ic50。

3.bmscs向成骨細(xì)胞分化

將bmscs細(xì)胞種入2塊12孔板，隔天換液，待細(xì)胞長滿后加入成骨細(xì)胞誘導(dǎo)液(dmem高糖培養(yǎng)基，含50μg/ml抗壞血酸,10mmβ-甘油磷酸鈉,100nm地塞米松)，設(shè)一個control和3個對應(yīng)抑制破骨細(xì)胞的草烏甲素濃度組。分別于14天后行堿性磷酸酶(alp)染色，21天后行鈣結(jié)節(jié)茜素紅染色，確定草烏甲素是否影響bmscs向成骨細(xì)胞分化。

具體分析結(jié)果如圖8所示，可發(fā)現(xiàn)草烏甲素在明顯抑制破骨細(xì)胞的濃度下對間充質(zhì)干細(xì)胞(bmscs)的增殖無抑制，并且堿性磷酸酶染色及茜素紅染色提示其對bmscs向成骨細(xì)胞誘導(dǎo)過程及成骨能力無抑制。

實(shí)施例5

本實(shí)施例主要針對草烏甲素可在體內(nèi)抑制骨質(zhì)疏松及鈦顆粒介導(dǎo)的骨溶解的分析，具體過程如下：

本實(shí)施例采用小鼠去卵巢骨質(zhì)疏松模型和鈦顆粒介導(dǎo)的小鼠顱蓋骨骨吸收動物模型

選取c57bl/j6小鼠24只，隨機(jī)分為4組，每組6只，空白對照組常規(guī)飼養(yǎng)，陽性對照組造模成功后只給予無菌pbs腹腔注射，低濃度藥物組和高濃度藥物組在造模成功后，隔日分別給予草烏甲素0.2mg/kg和0.4mg/kg腹腔注射一次。

去卵巢模型：造模前將小鼠用6.5％水合氯醛按100mg/kg劑量腹腔注射成功后，在無菌條件下取背側(cè)髖部正中矢狀切口，長約0.8cm，分離皮下組織，于腹膜后找到雙側(cè)卵巢，予以結(jié)扎后摘除，縫合皮膚。飼養(yǎng)2月后，全部引頸處死，取脛骨及l(fā)5椎體，4％多聚甲醛固定48小時，1×pbs洗三遍，放入70％乙醇，行micro-ct檢測，觀察骨體積分?jǐn)?shù)、骨小梁數(shù)目、骨小梁分離度以及骨密度等相關(guān)指標(biāo)。

顱蓋骨骨吸收模型：造模組麻醉成功后，在無菌條件下切開顱蓋骨骨膜，取30mg鈦顆粒均勻放入顱蓋骨表面，縫合皮膚；給予或不給藥物處理喂養(yǎng)10天，麻醉后全部引頸處死，解剖取顱蓋骨，行micro-ct檢測。

具體分析結(jié)果結(jié)合圖9和圖10所示，可以發(fā)現(xiàn)c57小鼠顱蓋骨micro-ct檢測顯示在藥物組草烏甲素明顯抑制了鈦顆粒介導(dǎo)的骨丟失。同樣可以發(fā)現(xiàn)去骨質(zhì)疏松小鼠模型micro-ct檢測顯示在藥物組草烏甲素明顯抑制了去卵巢小鼠術(shù)后脛骨骨量丟失。說明本發(fā)明采用草烏甲素能夠有效防治骨溶解的效果。

實(shí)施例6

本發(fā)明的草烏甲素在防治骨質(zhì)疏松及骨溶解方面的應(yīng)用，可以將草烏甲素制成不同劑型的藥物使用。

具體來說，可以將草烏甲素制成包括膠囊、片劑或顆粒劑等劑型。

具體的藥物可包括活性成分草烏甲素和其它藥學(xué)上可接受的載體，對于藥物中各成分的用量可以按照藥物制劑中對于成分的配比要求進(jìn)行調(diào)整即可，對于活性成分草烏甲素的有效含量也可以按照不同劑型等常規(guī)的劑型要求即可，并沒有具體的限定。更進(jìn)一步的，其中，藥學(xué)上可接受的載體可以采用矮味劑、填充劑、崩解劑、著色劑和增粘劑等。矮味劑如葡萄糖、山梨醇、甘露醇等，但并不限定于這些矮味劑；增粘劑如聚維酮(pvpk30)等；填充劑如微晶纖維素等；崩解劑如羥甲基淀粉鉀等；但上述例舉并不限定于這些藥學(xué)上可接受的載體。對于相應(yīng)的藥物劑型的制備方法均可采用本領(lǐng)域一般的通用方法即可。

本發(fā)明中所描述的具體實(shí)施例僅是對本發(fā)明精神作舉例說明。本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員可以對所描述的具體實(shí)施例做各種各樣的修改或補(bǔ)充或采用類似的方式替代，但并不會偏離本發(fā)明的精神或者超越所附權(quán)利要求書所定義的范圍。

盡管對本發(fā)明已作出了詳細(xì)的說明并引證了一些具體實(shí)施例，但是對本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員來說，只要不離開本發(fā)明的精神和范圍可作各種變化或修正是顯然的。