本發(fā)明涉及中藥藥品
技術領域：
，具體地說，涉及一種由烏藥經(jīng)醇提水沉離心制得的、具有顯著促進膽固醇逆轉(zhuǎn)運的烏藥部位及其在制備預防、改善和治療高脂血癥、動脈粥樣硬化和非酒精性脂肪肝的藥物方面的應用。
背景技術：
：高脂血癥(hyperlipidemia,hlp)是由于機體脂質(zhì)代謝異常，引起血漿中一種或幾種脂質(zhì)結構失衡的代謝性疾病，hlp是動脈粥樣硬化(as)的首要危險因素，與心腦血管疾病的發(fā)生直接相關，在as基礎上發(fā)生的心腦血管病高居死亡前列。對脂質(zhì)代謝異常的達標治療能夠有效減少外周動脈病、心肌梗死和缺血性腦卒中的發(fā)生，減少由于高脂血癥引起的心血管病的發(fā)生。目前臨床常用降血脂藥以他汀類、煙酸類、貝特類、多烯類等化學藥為主，化學藥降脂療效肯定，但長期應用多存在肝腎損傷、胃腸道反應等不同程度的不良反應。中藥具有多靶點、整體協(xié)同等作用特點，在高脂血癥等慢性代謝疾病的治療上具有獨特的優(yōu)勢。對具有確有降脂療效的中藥開展系統(tǒng)深入的制備工藝、作用機制等研究，對于臨床as的防治及抗高脂血癥中藥新藥的研發(fā)具有重要現(xiàn)實意義。高脂血癥可表現(xiàn)為高膽固醇(tc)血癥、高甘油三酯(tg)血癥或兩者兼而有之(混合型高脂血癥)。研究發(fā)現(xiàn)，高血清tc和低密度脂蛋白膽固醇(ldl-c)水平是我國血脂異?；颊叩奶攸c之一，大量流行病學與高膽固醇臨床治療資料顯示，ldl-c是心血管疾病最重要的危險因子之一，每降低1.0mmol/lldl-c，可降低20％主要心血管事件，ldl-c是血脂異常導致心血管疾病治療的首要干預目標。因此，降低血漿ldl-c水平，調(diào)節(jié)膽固醇代謝的平衡，是防治高脂血癥及其導致的心血管疾病的有效途徑。研究表明，體內(nèi)膽固醇水平主要通過胞內(nèi)合成、腸道吸收和膽固醇清除來維持相對恒定，而機體多余膽固醇清除主要通過膽固醇逆轉(zhuǎn)運(reversecholesteroltransport,rct)來實現(xiàn)，rct對體內(nèi)膽固醇穩(wěn)態(tài)的維持起著重要的積極作用。因此，藥物干預rct對于高脂血癥及各種心腦血管病的治療具有重要意義。膽固醇逆轉(zhuǎn)運(rct)是血脂代謝的中心環(huán)節(jié)，可以防止脂質(zhì)沉積。它是指體內(nèi)多余的膽固醇經(jīng)轉(zhuǎn)運體介導從外周細胞流出，轉(zhuǎn)移至hdl，隨血液循環(huán)至肝臟，與肝細胞表面受體結合，被選擇性攝取后轉(zhuǎn)變?yōu)槟懼猁}，繼而由糞便排除體外。其中膽固醇由巨噬細胞流出是rct的第一步，也是其限速步驟。目前發(fā)現(xiàn)有多種因子參與了膽固醇從巨噬細胞的流出。b族清道夫受體i(sr-bi)是第一個在分子水平上確定的hdl受體，與hdl具有高度的結合力，介導膽固醇酯的選擇性攝取，在hdl的代謝中起重要作用，刺激肝臟sr-bi的表達可以促進體內(nèi)巨噬細胞膽固醇逆轉(zhuǎn)運。atp結合盒轉(zhuǎn)運子1(abca1)屬于abc基因家族的一員，它介導脂質(zhì)從細胞外流至貧脂或無脂的高密度脂蛋白(hdl)前體或apoa-i，在膽固醇和hdl生成的起始步驟中起重要作用，被稱作膽固醇逆轉(zhuǎn)運的守門人；同時，abca1也能減少apoa-1在肝分解，提高血apoa-1的水平，進一步促進hdl-c的形成。abcgi是atp結合盒轉(zhuǎn)運蛋白家族一員，主要表達于巨噬細胞及各器官的吞噬細胞系統(tǒng)。研究發(fā)現(xiàn)，abcgi也可以作為轉(zhuǎn)運體將巨噬細胞中的膽固醇轉(zhuǎn)移至成熟型hdl。abcgi-基因敲除鼠中巨噬細胞膽固醇大量積聚，提示abcgi途徑在巨噬細胞膽固醇流出中有重要的地位。lxra是配體活化的轉(zhuǎn)錄因子，在體內(nèi)膽固醇轉(zhuǎn)運的平衡調(diào)控中起著十分重要的作用。lxra通過對三磷酸腺苷轉(zhuǎn)運體超家族(abca1、abcgi、abcg5和abcg8)以及載脂蛋白e、載脂蛋白基因簇apocii、ci、civ的表達調(diào)節(jié)來直接或間接地調(diào)控巨噬細胞、肝細胞及脂肪細胞等外周細胞的膽固醇代謝，lxra的活化可以促進rct。pparγ是lxra的上游基因，屬于核內(nèi)受體超家族成員。pparγ能夠刺激lxra的基因表達，進而調(diào)控靶基因abc超家族介導膽固醇流出，實現(xiàn)膽固醇逆轉(zhuǎn)運。hdl是膽固醇逆轉(zhuǎn)運(rct)的主要執(zhí)行者，sr-bi、abc1參與了rct中膽固醇的流出，而lcat、cetp及膽固醇7ɑ-羥化酶(cyp7a1)則參與了rct和膽固醇的代謝。膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(lcat)由肝臟分泌，它在血漿中主要通過與apoa-i結合，作用于圓盤狀hdl及球形hdl，促進膽固醇酯(ce)的形成和hdl成熟，使hdl成為hdl2，脂質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白在hdl2和富含tg脂蛋白間進行ce與tg互換，引起rct，從而促進血漿膽固醇下降。膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(cetp)在肝臟、小腸等組織中合成，它是hdl中ce與ldl和vldl三酰甘油交換過程中的重要調(diào)節(jié)因子。進食高脂肪、高膽固醇飲食，或因ldl受體和apoe缺陷而產(chǎn)生的內(nèi)源性tc血癥，均可誘導cetp的表達，從而促進rct速度。膽固醇7α-羥化酶(cyp7a1)是膽固醇代謝轉(zhuǎn)化為膽汁酸途徑的主要限速酶，肝cyp7a1rna表達的增加，可促進肝細胞內(nèi)膽固醇轉(zhuǎn)化為膽汁酸排出體外。綜上可知，調(diào)節(jié)rct過程中關鍵蛋白的表達水平，可有效調(diào)節(jié)rct過程，從而維持體內(nèi)的膽固醇代謝平衡，有效防止高脂血癥及相關as等疾病的發(fā)生發(fā)展。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術的不足，提供一種促進膽固醇逆轉(zhuǎn)運的提取物及其制備方法與應用。本發(fā)明中，烏藥經(jīng)醇提、水沉、離心后，去除了部分雜質(zhì)，具有顯著的促進膽固醇逆轉(zhuǎn)運，降低血脂及防治動脈硬化和非酒精性脂肪肝的作用，改善了中藥提取物“粗、大、黑”狀況，減少了藥物的服用量，易于提高服用者的依從性。本發(fā)明的目的是通過以下技術方案來實現(xiàn)的：一種促進膽固醇逆轉(zhuǎn)運的提取物，包含異烏藥醚內(nèi)酯26-40mg/g，烏藥醚內(nèi)酯15-23mg/g，烏藥醇19-30mg/g。一種促進膽固醇逆轉(zhuǎn)運的提取物的提取方法，采用體積濃度為70-90％乙醇溶液對烏藥進行提取，減壓回收乙醇，獲得提取液。將提取液濃縮至1/3體積，然后加入濃縮液3-6倍的水進行沉淀。離心后所得的沉淀物即為提取物。一種促進膽固醇逆轉(zhuǎn)運的提取物在制備調(diào)節(jié)血脂的藥物，預防、改善和治療動脈粥樣硬化的藥物以及非酒精性脂肪肝的藥物中的應用。進一步地，所述藥物中，提取物的質(zhì)量含量為1－100％本發(fā)明的有益效果如下：針對當前高脂血癥發(fā)病現(xiàn)狀，現(xiàn)有改善或治療高血脂、動脈粥樣硬化和非酒精性脂肪肝產(chǎn)品的不足及中藥特色和優(yōu)勢，本發(fā)明提供了一種具有促進膽固醇逆轉(zhuǎn)運的提取物。所述的提取物，經(jīng)醇提、水沉、離心，去除了部分雜質(zhì)，富集了烏藥醚內(nèi)酯、烏藥醚內(nèi)酯、烏藥醇等成分的含量，提高了純度，改善了中藥提取物“粗、大、黑”狀況，可減少藥物服用量，有助于提高使用者的依從性；能促進高脂血癥膽固醇逆轉(zhuǎn)運，具有良好的降血脂作用。藥理(動物)研究證實，本發(fā)明所提供的提取物，具有明顯的促進膽固醇逆轉(zhuǎn)運、降血脂和拮抗脂肪肝作用。給予該提取物，能顯著降低高脂飲食誘導的高脂血癥模型大鼠血清tc、tg、ldl-c及肝臟tc、tg水平，增加血清hdl-c水平、肝臟膽汁酸含量及糞便總膽汁酸及tc的排出量，改善肝細胞脂肪變程度。進一步作用機制研究發(fā)現(xiàn)，該提取物能增加小腸絨毛npc1l2表達和肝組織sr-bi、ldlr、apoa-1、膽固醇7ɑ-羥化酶(cyp7a1)、abcg5和abcg8等膽固醇逆轉(zhuǎn)運途徑相關蛋白表達，促進膽汁酸合成和tc分解及tc從糞便排出。本發(fā)明明確了該提取物降血脂作用的作用機制，即促進膽固醇逆轉(zhuǎn)運，促進膽固醇從糞便、膽汁中的排泄；其作用機制、主要成分及含量相對明確，能更好的促進靶點明確、具有中藥特色的抗高脂血癥等中藥新藥等的研發(fā)，開發(fā)應用前景良好。本發(fā)明具有促進膽固醇逆轉(zhuǎn)運的提取物，可單用或配伍應用于抗高脂血癥、動脈粥樣硬化及非酒精性脂肪肝藥品研制，將會帶來很好的社會和經(jīng)濟效益。附圖說明附圖1烏藥部位對肝組織sr-bi、apoa-1、fxr(nr1h4)、cyp7a1、abcg5、abcg8、pparγ等膽固醇逆轉(zhuǎn)運相關蛋白表達的影響。具體實施方式烏藥為樟科植物烏藥linderaaggregate(sims)kosterm.的干燥塊根，主產(chǎn)浙江天臺；富含烏藥醚內(nèi)酯、異喹啉生物堿等成分，為臨床常用理氣中藥，具有調(diào)氣健脾，行氣止痛，疏肝解郁等功效和良好的調(diào)節(jié)胃腸道功能作用。近年研究發(fā)現(xiàn)，烏藥能促進胃液、腸液等消化液分泌，對小腸推進和胃排空具有雙向調(diào)節(jié)作用；能有效降低ccl4、乙硫氨酸所致肝損傷動物血清轉(zhuǎn)氨酶水平，保護肝臟免受脂肪浸潤；烏藥不同提取物能顯著降低酒精性肝損傷模型大鼠血清tc、tg、alt、ast含量，改善肝組織病理學改變。發(fā)明人所在課題組研究表明，烏藥醇提取物對高脂飲食誘導的高脂血癥具有良好的拮抗作用，其降血脂作用與促進膽固醇逆轉(zhuǎn)運有關。本發(fā)明提供的提取物，在前期研究結果結合成分理化性質(zhì)基礎上，經(jīng)提取方法等的考察，確定了醇提、水沉、離心制備該部位的方法，經(jīng)hplc分析，提取物中含異烏藥醚內(nèi)酯26-40mg/g，烏藥醚內(nèi)酯15-23mg/g，烏藥醇19-30mg/g。區(qū)別于傳統(tǒng)水提取，去除了部分水溶性雜質(zhì)，提高了成分的含量，從而更好地起到降血脂的目的；且減少了服用量，可增加使用者的依從性。本發(fā)明更進一步的明確了提取物降血脂作用與促進膽固醇逆轉(zhuǎn)運，促進膽固醇從糞便、膽汁中的排泄有關。區(qū)別于大多數(shù)降脂中藥或提取物作用機制不明的不足，且主要成分及含量相對明確，能更好的促進靶點明確、具有中藥特色的抗高脂血癥等中藥新藥等的開發(fā)，前景良好。本發(fā)明更進一步地提供一種將具有促進膽固醇逆轉(zhuǎn)運的提取物在各種調(diào)節(jié)血脂、防治動脈粥樣硬化和非酒精性脂肪肝藥品的劑型上的應用，如顆粒劑、片劑、膠囊劑，適用范圍廣，適用性強。下面通過以下實施例對本發(fā)明作進一步說明，它將有助于理解本發(fā)明，但并不限制本發(fā)明的內(nèi)容。實施例1：不同醇濃度對烏藥提取物中烏藥醚內(nèi)酯等成分提取率的影響研究1、實驗材料1.1、色譜條件：色譜儀：agilent1200hplc儀，色譜柱：ultimate-xb-c18(5μm4.6*250nm)，檢測波長：235nm，柱溫：30℃，流速：1ml/min，流動相：超純水(a)-乙腈(c)，梯度洗脫：0min，56％c，44％a；50min，56％c，44％a；55min，95％c，5％a；60min，95％c，5％a。1.2、對照品：異烏藥內(nèi)酯(lot：160710)、烏藥醚內(nèi)酯(lot：160421)、烏藥醇(lot：160510)購自北京北納創(chuàng)聯(lián)生物技術研究院；1.3、不同烏藥提取物制備：取烏藥飲片適量，分別加10bv水、30％、50％、70％、90％乙醇回流提取2次，每次1h，濾取濾液，減壓回收乙醇并濃縮，離線后減壓干燥，得各烏藥提取物。2、方法與結果2.1、線性關系：分別取上述三個對照品適量，置25ml棕色具塞容量瓶中，加甲醇溶解并定容，得異烏藥醚內(nèi)酯濃度為0.030mg/ml，烏藥醚內(nèi)酯濃度為0.040mg/ml，烏藥醇濃度為0.033mg/ml的混合對照品溶液。取混合對照品溶液，分別進樣3、5、7、9、11、13、15μl，測定峰面積，以進樣量(μg)為橫坐標x，峰面積(area)為縱坐標y繪制標準曲線，得異烏藥內(nèi)酯標準曲線為y＝981.9x-3.0571，r2＝1；烏藥醚內(nèi)酯標準曲線為y＝1053.5x-4.2125，r2＝1；烏藥醇標準曲線為y＝659.36x-5.8875，r2＝1。2.2、各烏藥提取物中異烏藥醚內(nèi)酯等含量測定：取各烏藥提取物約1g，置100ml棕色具塞容量瓶中，加甲醇溶解并定容，進樣前過0.45μm濾膜，進樣10μl，測定峰面積，計算各提取物中異烏藥醚內(nèi)酯等含量。結果表明，在醇濃度0％～70％范圍內(nèi)，隨著醇濃度的增加，提取物中異烏藥醚內(nèi)酯、烏藥醚內(nèi)酯及烏藥醇的含量逐漸增加，以70％乙醇濃度提取物中三者的成分為最高(見表1-1)。表1-1.不同醇濃度烏藥提取物中異烏藥醚內(nèi)酯等含量測定烏藥提取物異烏藥醚內(nèi)酯(mg/g)烏藥醚內(nèi)酯(mg/g)烏藥醇(mg/g)水提物1.820.000.0030％醇提物9.930.582.1650％醇提物12.052.403.7070％醇提物12.784.825.1890％醇提物12.154.925.11實施例2：不同制備方法制得的烏藥提取物中烏藥醚內(nèi)酯等成分的比較研究1、實驗材料1.1、色譜條件及對照品同實施例1。1.2、不同烏藥提取物制備取烏藥飲片適量，分別按如下制法制備各烏藥提取物：(1)烏藥飲片加10bv70％乙醇回流提取2次，每次1h，濾取濾液，減壓回收乙醇并濃縮至適當體積，濃縮液依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，收集各萃取物，減壓回收溶劑并濃縮，干燥，得烏藥石油醚萃取提取物(a)、乙酸乙酯萃取提取物(b)、正丁醇萃取提取物(c)及水提取物(d)，備用。(2)烏藥飲片加10bv70％乙醇回流提取2次，每次1h，濾取濾液，減壓回收乙醇并濃縮至1/3體積，濃縮液加入3-6倍水攪拌，離心，分取沉淀物，減壓干燥，得烏藥提取物(e)。1.3、含量測定：取各烏藥提取物適量，稱定重量，置100ml棕色具塞容量瓶中，加甲醇溶解并定容，進樣前過0.45μm濾膜，hplc進樣分析，測定峰面積，計算各提取物中異烏藥醚內(nèi)酯等含量。結果表明，在不同方法制得的烏藥提取物中，以醇提水沉法制得的烏藥提取物中異烏藥醚內(nèi)酯、烏藥醚內(nèi)酯及烏藥醇的總量為最高(見表2-1)。表2-1.不同制備方法制得的烏藥提取物中烏藥醚內(nèi)酯等成分含量測定結果實施例3：烏藥醇提水沉提取物降血脂作用研究1、實驗材料1.1、動物雄性sd大鼠，體重200±20g，購自浙江省醫(yī)學科學院實驗動物中心。1.2、藥物與試劑烏藥由天臺山烏藥有限公司提供；烏藥飲片加10bv70％乙醇回流提取2次，每次1h，濾取濾液，減壓回收乙醇并濃縮至1/3體積，濃縮液加入3-6倍水攪拌，離心，分取沉淀物，減壓干燥，得烏藥醇提水沉提取物；臨用前取上述樣品適量，用純水配置成相應濃度藥液，備用。陽性對照：阿托伐他汀。tc、tg、ldl-c、hdl-c、ast、alt等生化試劑盒均購自寧波美康生物科技有限公司；肝組織及糞便中tc、tg、總膽汁酸(tba)檢測用試劑盒購自南京建成生物工程研究所。高脂飼料購自特洛菲飼料科技有限公司。1.3、儀器accutetba-40fr全自動生化分析儀(東芝三廠醫(yī)療株式會社)；powerwave340酶標儀(美國bio-tek儀器有限公司)。2、實驗方法2.1、分組與給藥大鼠適應性喂養(yǎng)7d后，稱定體質(zhì)量，隨機分為正常對照組和造模組，除正常對照組大鼠外，其余大鼠給予高脂飼料，2周后禁食12h，眼眶靜脈叢采血，測定血清中tc水平，根據(jù)tc水平隨機分為5組：正常對照組、模型對照組、陽性對照組(阿托伐他汀6.0mg/kg)、烏藥提取物組(4、2、1g/kg)。除正常對照組外，其余各組繼續(xù)給予高脂飼料，造模同時正常對照組和模型對照組灌服純水，其余各給藥組分別灌胃給予相應劑量藥物，每日1次，灌胃容積為1ml/100g體質(zhì)量，連續(xù)5周。2.2、攝食量及體質(zhì)量測定試驗期間每天定量供給飼料，記錄剩余量并計算攝食量；每3天記錄大鼠體質(zhì)量一次。2.3、血液生化學指標檢測實驗期末，采血，分離血清，全自動生化分析儀檢測大鼠血清血脂生化指標(tc、tg、ldl-c、hdl-c)。2.4、糞便tc及tba水平檢測實驗結束前36h，單獨飼養(yǎng)于代謝籠中，正常喂食，自由飲水，收集24h大鼠糞便，于80℃烘箱中干燥48h，研磨成粉。稱取干燥糞便適量，加10bv無水乙醇超聲提取，3000r/min離心10min取上清，cod-pap法檢測樣品中總膽固醇(tc)水平，酶比色微板法檢測總膽汁酸(tba)水平，計算糞便總tc和tba含量。2.5、肝指數(shù)及肝脂、tba水平測定給藥5周后，稱定體質(zhì)量，處死大鼠，摘取肝臟。取肝左葉相同部位肝組織0.5g，加入預冷的0.9％生理鹽水4.5ml，冰水浴中制成10％的肝勻漿，3000r/min離心10min，取上清液，測定肝組織勻漿中蛋白含量。另取，相同部位肝組織0.5g加入無水乙醇4.5ml，冰水浴中制成10％的肝勻漿，3000r/min離心10min，取上清液，cod-pap法測定肝組織及糞便中tc水平，gpo-pap酶法測定肝組織tg水平，酶比色微板法檢測總膽汁酸水平。2.6、膽固醇逆轉(zhuǎn)運相關蛋白表達檢測取經(jīng)甲醛固定的小腸和肝組織，常規(guī)石蠟包埋、切片、梯度乙醇脫蠟水化，免疫組化-dab染色法，檢測小腸ncp1l1、肝組織ldl-r、sr-bi蛋白表達定位；取液氮凍存的肝組織，蛋白抽提試劑盒提取總蛋白，bca法測定蛋白濃度；蛋白變形，sds-page電泳，wb濕法轉(zhuǎn)膜，5％脫脂牛奶封閉，分別滴加一抗、二抗孵育，ecl顯色。以β-actin為內(nèi)參，計算各處理組目的蛋白的表達。2.7、統(tǒng)計學方法計量資料數(shù)據(jù)以表示，兩組間比較采用t-test，模型組及各給藥組間比較采用單因素方差分析多重比較，p＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。3、實驗結果3.1、對高脂血癥(hlp)模型大鼠血脂水平的影響表3-1結果顯示，與正常組比，模型大鼠血清tc、tg、ldl-c水平顯著升高(p<0.01，p<0.05)，hdl-c水平顯著降低(p<0.01)；與模型組比，各劑量烏藥提取物能不同程度地降低模型大鼠血清tc、tg及l(fā)dl-c水平(p<0.01，p<0.05)，升高hdl-c水平(p<0.01，p<0.05)顯示了良好的降血脂作用。3-1.烏藥提取物對hlp模型大鼠血清血脂水平的影響注：與正常對照組比較，△p<0.05，△δp<0.01；與模型對照組比較，*p<0.05，**p<0.01；下同。3.2對模型大鼠肝脂及tba水平的影響表3-2結果顯示，與正常組比，模型大鼠肝組織tc及tba含量顯著增加(p<0.01，p<0.05)，與模型組比較，各劑量烏藥能顯著降低模型大鼠肝組織tc含量(p<0.01，p<0.05)，對tg有降低趨勢，但差異無統(tǒng)計學意義；對tba含量無顯著性差異。3-2.烏藥提取物對hlp模型大鼠肝臟tc、tg及總膽汁酸(tba)水平的影響3.3對模型大鼠糞便tc及tba水平的影響表3-3結果顯示，與正常組比，模型大鼠糞便中tc及tba含量顯著增加(p<0.01，p<0.05)，與模型組比較，各劑量烏藥能顯著增加模型大鼠糞便tba及tc含量(p<0.01，p<0.05)，提示烏藥提取物能促進體內(nèi)tc及tba從腸道的排泄。3-3.烏藥提取物對hlp模型大鼠糞便tba及tc水平的影響3.4對體內(nèi)膽固醇逆轉(zhuǎn)運(rct)相關蛋白表達的影響表3-4及附圖1結果顯示，與正常組比較，模型組大鼠小腸ncp1l1、肝組織fxr(nr1h4)表達水平有降低趨勢，肝ldl-r表達顯著增加(p<0.05)，sr-bi、apoa-1cyp7a1、abcg5、abcg8、pparγ表達顯著降低；與模型組比較，烏藥提取物能增加小腸ncp1l1表達(p<0.01)及肝組織sr-bi、apoa-1cyp7a1、abcg5、abcg8、pparγ表達水平，降低肝組織ldl-r水平，提示烏藥提取物具有促進體內(nèi)rct作用。3-4.烏藥提取物對hlp模型大鼠rct相關蛋白表達的影響上述結果表明，烏藥經(jīng)醇提水沉制得的提取物具有顯著的降血脂作用；該降脂作用與促進膽汁酸合成及tc分解、上調(diào)rct相關蛋白表達，促進rct及tc從糞便的排泄有關。以上所述的僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應當指出，對于本
技術領域：
中的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明核心技術特征的前提下，還可以做出若干改進，這些改進和潤飾也應視為本發(fā)明的保護范圍。當前第1頁12