本發(fā)明屬于畜牧業(yè)動物營養(yǎng)技術(shù)研究領(lǐng)域，涉及一種調(diào)節(jié)仔豬腸道健康中草藥組合物及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)：

仔豬的健康很大程度上受到腸道健康的影響，因為仔豬的腸道是消化和吸收營養(yǎng)物質(zhì)的重要場所，對維護仔豬正常、健康的生長發(fā)育有著極其重要的作用。目前隨著養(yǎng)豬行業(yè)朝著規(guī)模化、集約化的方向發(fā)展，仔豬提前斷奶技術(shù)在各大養(yǎng)豬場廣泛應(yīng)用。一般仔豬達到21-28日齡即進行斷奶，這在促進仔豬的生長發(fā)育和提高母豬的利用率方面都起到積極的作用。但是這一階段仔豬消化道的發(fā)育還不夠完善，各項生理機能都還不健全，對外界各種因素的變化表現(xiàn)的較為敏感，斷奶會給仔豬帶來巨大的應(yīng)激，并且由于營養(yǎng)來源發(fā)生變化，易導(dǎo)致仔豬的腸道黏膜受到破壞，而導(dǎo)致攝人的營養(yǎng)物質(zhì)不能很好的被消化吸收，使得仔豬的免疫力下降，影響了仔豬的健康，使斷奶仔豬的生長發(fā)育受阻，因此，做好仔豬的營養(yǎng)調(diào)控工作，確保仔豬腸道的健康，從而保持仔豬健康，減少疾病的發(fā)生，具有十分重要的意義。

仔豬的腸道是消化的重要場所，腸道形態(tài)變化也會使仔豬腸道對于營養(yǎng)的吸收造成很大的傷害。我國很多研究人員就乳酸桿菌對于仔豬腸道形態(tài)的影響有過一定的研究，認(rèn)為乳酸桿菌可以抑制腸道中病原菌黏膜表面的黏附性，降低病原菌與腸道的連接，從而維持腸道細(xì)胞的完整性。

乳酸桿菌是腸道中的正常菌群，大量研究都已表明乳酸桿菌具有調(diào)節(jié)腸道內(nèi)微生物比例，維持腸道微生物穩(wěn)態(tài)，增強機體免疫力等優(yōu)點。近年來，乳酸桿菌的有益機體的機制研究不斷深入，作為益生菌在仔豬養(yǎng)殖上也受到越來越大的關(guān)注。乳酸桿菌可以產(chǎn)生乳酸等酸性物質(zhì)，有效降低周圍環(huán)境的ph值，可以有效抑制有害菌，也有研究報道過如果在仔豬的飼料中添加乳酸桿菌可以使得腸道內(nèi)的氨濃度得到緩解，降低腹瀉率，此外也有研究表明乳酸桿菌也可提高飼料的轉(zhuǎn)化效率，促進仔豬生長。

合理的使用飼料添加劑。在仔豬采食飼料后，可以在仔豬的日糧中添加一些可改善仔豬腸道健康的飼料添加劑來促進仔豬的消化和吸收，從而降低腸道疾病的發(fā)生，促進腸道的健康。如在日糧中添加丁酸鈉可以促進腸道乳酸桿菌的增殖，從而降低大腸桿菌的數(shù)量；在仔豬發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)時添加谷氨酰胺可以降低腸上皮的通透性，穩(wěn)定腸黏液層，使應(yīng)激狀態(tài)下仔豬的腸黏膜代謝穩(wěn)定；在飼料中添加各種單酶或復(fù)合酶制劑、微生態(tài)制劑、益生元，或者一些藥物類添加劑都可以起到改善腸道健康的作用。

仔豬消化道的發(fā)育還不夠完善，對營養(yǎng)物質(zhì)消化利用率較低。在對仔豬實行早期斷奶時，會產(chǎn)生巨大的斷奶應(yīng)激，加上飼料形式、營養(yǎng)來源發(fā)生改變會對健康產(chǎn)生較大的影響，因此做好仔豬的腸道健康調(diào)節(jié)顯得尤為重要。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本研究通過在斷奶仔豬料中添加二術(shù)三仙散，改善仔豬腸道形態(tài)和腸道菌群，促進腸道健康，進而提高仔豬的生產(chǎn)性能。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明公開了如下的技術(shù)內(nèi)容：

一種調(diào)節(jié)仔豬腸道健康中草藥組合物（二術(shù)三仙散），其特征在于它是由下述重量的原料組成：

蒼術(shù)5-10g，白術(shù)3-8g，干姜7-12g，陳皮3-5g，焦山楂2-5g，焦神曲3-5g，焦麥芽2-5g。

本發(fā)明優(yōu)選的調(diào)節(jié)仔豬腸道健康中草藥組合物（二術(shù)三仙散），其特征在于它是由下述重量的原料組成：

蒼術(shù)5g，白術(shù)3g，干姜10g，陳皮3g，焦山楂2g，焦神曲3g，焦麥芽2g。

本發(fā)明進一步公開了調(diào)節(jié)仔豬腸道健康中草藥組合物的制備方法：

（1）低溫超微粉碎過篩：蒼術(shù)和白術(shù)餅先用低溫超微粉碎機粉碎過300目篩；其余藥品分別用小型低溫固定錘式粉碎機粉碎，過80目篩備用。

（2）混合分量：先將蒼術(shù)和白術(shù)加入混合機中混合均勻作為基礎(chǔ)，然后將干姜、陳皮加入混合機中混勻，最后將剩余的中藥粉逐漸分次加入到混合機中，直至全部中藥粉混勻。所有中藥粉按規(guī)定劑量用電子秤稱量。

（3）質(zhì)檢包裝：成品應(yīng)干燥、疏松、混合均勻、色澤一致，包裝采用內(nèi)置聚乙烯塑料薄膜袋，外用鋁塑真空自封袋。

本發(fā)明進一步公開了調(diào)節(jié)仔豬腸道健康中草藥組合物在用于調(diào)節(jié)仔豬腸道形態(tài)和腸道菌群，促進腸道健康方面的應(yīng)用。試驗結(jié)果顯示：在仔豬飼糧中添加二術(shù)三仙散可以改善仔豬腸道健康，提高仔豬的生產(chǎn)性能。

本發(fā)明的配方中蒼術(shù)為主藥，輔以白術(shù)，干姜，陳皮，焦三仙等，其中蒼術(shù)用量不應(yīng)超過15g。

本發(fā)明根據(jù)本配方中的各種中藥理化性質(zhì)及有效成分，對中藥散劑的制備工藝做了系統(tǒng)優(yōu)化，以最大程度發(fā)揮其藥效作用。研制過程中我們主要考察了如下條件：

1、低溫超微粉碎技術(shù)

對配方中的關(guān)鍵藥材蒼術(shù)、白術(shù)進行了低溫超微粉碎技術(shù)，其余藥材低溫常規(guī)粉碎混合。

2、混合：采用等量遞增法進行混合。

3、分劑量：經(jīng)過用重量法和容量法的對比，我們決定采用重量法，此法劑量準(zhǔn)確，誤差小，易調(diào)整。

4、包裝：包裝采用內(nèi)置聚乙烯塑料薄膜袋，外用鋁塑真空自封袋。更好的防止吸濕、結(jié)塊，變色，分解，從而保證品質(zhì)及服用效果。

本發(fā)明所用到的中藥材的藥理作用如下：

蒼術(shù)

炮制：取蒼術(shù)片，用米泔水浸泡數(shù)小時，取出，置炒制容器內(nèi)，用中火加熱，炒至褐色時，噴淋少許清水，再用文火炒干，取出放涼，篩去碎屑。

藥理：具有燥濕健脾，祛風(fēng)，散寒，明目的功能。

白術(shù)：

炮制：先將鍋用中火燒熱，撒入麥麩，待冒煙時，投入白術(shù)片，不斷翻炒，炒至白術(shù)呈黃褐色，取出，篩去麥麩，放涼。白術(shù)片每100g用麥麩10g。

藥理：具有健脾益氣，燥濕利水，止汗，安胎的功能。

干姜

炮制：先將凈砂置炒制容器內(nèi)，角武火加熱，炒至靈活狀態(tài)，再加入于姜片或塊，不斷翻動，炒至鼓起，表面棕褐色，取出，篩去砂，晾涼。

藥理：具有溫中散寒，回陽通脈，燥濕消痰功能。

山楂

炮制：取凈山楂，置炒制容器內(nèi)，用中火加熱，炒至外表焦褐色，內(nèi)部焦黃色，取出放涼。

藥理：具有消食化積，散瘀行滯的功能。

神曲

炮制：取生六曲置炒藥鍋內(nèi)，用文火加熱，不斷翻炒，至表面焦黃色，內(nèi)部微黃色，有香氣逸出時，取出，放涼。

藥理：具有消食健胃的功能。

麥芽

炮制：取凈麥芽，照清炒法（不加輔料的炒法稱為清炒法。）炒至焦褐色，放涼，篩去灰屑。

藥理：消食化滯。用于食積不消，脘腹脹痛。

陳皮

炮制：取原藥材，除去雜質(zhì)，噴淋清水，潤透，切絲，陰干。

藥理：具有理氣健脾，燥濕化痰的功能。

本發(fā)明更加詳細(xì)的描述如下：

1材料與方法

1.1飼料添加劑組方

組方名稱：二術(shù)三仙散

配方：蒼術(shù)5g，白術(shù)3g，干姜10g，陳皮3g，焦山楂2g，焦神曲3g，焦麥芽2g。

功能主治：燥濕祛風(fēng)，健脾和胃，理氣寬腸，化積導(dǎo)滯。用于脾胃不和，痰飲停滯，脘腹痞滿。

用法用量：內(nèi)服，斷奶仔豬用量0.5-1g/kg體重。拌料使用時，將上述飼料添加劑按1-2%的添加量與仔豬飼料混勻后使用。

試驗采用玉米－豆粕型日糧，參照nrc（1998）豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制仔豬飼料。試驗日糧的組成如下：

玉米60.35、豆粕25、乳清粉5、魚粉4、豆油2.0、磷酸氫鈣1.2、石粉0.8、鹽0.3、賴氨酸0.35、預(yù)混料1。

預(yù)混料為每千克飼糧提供va12000iu，vd33000iu，ve60iu，vk33㎎，vb13㎎，vb27.5㎎，vb64.8㎎，vb1240ug，d-泛酸30㎎，葉酸1.2㎎，煙酸45㎎，生物素0.22㎎，銅15㎎，錳50㎎，鋅120㎎，鐵120㎎，硒0.6㎎，碘0.3㎎。

1.2試驗設(shè)計

試驗選擇28日齡（杜×長×大）斷奶仔豬80頭，平均體重為7.36±0.42kg，按完全隨機區(qū)分為兩個處理：空白對照組，飼糧不添加飼料添加劑；試驗組，飼糧按2%添加飼料添加劑。每個處理4個重復(fù)，每個重復(fù)10頭仔豬，即每組40頭斷奶仔豬，試驗于仔豬28日齡斷奶后開始，42日齡結(jié)束，試驗期為14d。

1.3飼養(yǎng)管理

試驗期間豬只封閉飼養(yǎng)，試驗豬采用相同的飼養(yǎng)管理和環(huán)境條件，干粉料飼喂，自由采食和飲水，試驗期間按豬場正常程序進行免疫，按豬場飼養(yǎng)管理規(guī)程進行消毒和清潔衛(wèi)生等工作。

驗結(jié)束時，每個處理的四個重復(fù)分別隨機選取1頭仔豬進行屠宰試驗。剖殺前12h禁食，采用頸靜脈放血的辦法處死，打開腹腔，立即結(jié)扎噴門瓣、幽門瓣、直腸遠端，無菌取回腸、盲腸等內(nèi)容物，置于液氮速凍后，轉(zhuǎn)放到-80℃冰箱中凍存待分析。取十二指腸、空腸、回腸等放于10%中性福爾馬林固定液中，搖勻，待做組織切片。

1.4檢測指標(biāo)和方法

1.4.1腸道結(jié)構(gòu)

將在10%中性福爾馬林液中固定24h后的標(biāo)本取出，經(jīng)修剪成塊，蒸餾水洗滌，梯度酒精脫水，透明，石蠟包埋，石蠟冷卻凝固，室溫下切片、貼片，烤片，蘇木精-伊紅(he)染色后，在低倍鏡(5×)下觀測，每張切片觀察10-20根完整、長且直的腸絨毛和相應(yīng)的隱窩，測量絨毛高度和隱窩深度。

1.4.2腸道菌群

無菌稱取不同部位的腸內(nèi)容物樣品1g，溶解于9ml的無菌生理鹽水中，充分混合，然后逐級10倍系列稀釋至10^-7。選擇10^-5-10^-7的稀釋度，取0.1ml稀釋液接種到相應(yīng)的滾管培養(yǎng)基中進行乳酸桿菌培養(yǎng)。選取10^-2-10^-5的稀釋度，取0.2ml稀釋液于相應(yīng)的平板培養(yǎng)基中進行大腸桿菌的計數(shù)。

大腸桿菌計數(shù)采用麥康凱瓊脂培養(yǎng)基：蛋白胨，20.0g/l；乳糖，10.0g/l；膽鹽，5.0g/l；氯化鈉，5.0g/l；中性紅，0.075g/l；瓊脂，12.0g/l；ph7.4±0.2。

乳酸桿菌計數(shù)采用rogosa瓊脂：胰蛋白胨，10.0g/l；酵母膏，5.0g/l；葡萄糖，20.0g/l；吐溫80，1.0ml/l；磷酸二氫鉀，6.0g/l；檸檬酸銨，2.0g/l；乙酸鈉，17.0g/l；硫酸鎂，0.575g/l；硫酸錳，0.12g/l；硫酸亞鐵，0.034g/l；瓊脂，20.0g/l；ph5.4±0.2。

1.5統(tǒng)計分析

統(tǒng)計分析各組的十二指腸、空場、回腸的腸道結(jié)構(gòu)和腸道菌群等指標(biāo)，采用單因子anova（ibmspssstatistics20.0）方差檢驗分析。文中數(shù)據(jù)以“均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，概率p<0.05時認(rèn)為差異顯著，概率p<0.01時認(rèn)為差異極顯著。

2結(jié)果與分析

2.1腸道結(jié)構(gòu)

由表1可知，試驗結(jié)束時，試驗組仔豬的十二指腸絨毛高度、十二指腸隱窩深度、十二指腸/隱窩深度、空腸隱窩深度、回腸絨毛高度及回腸隱窩深度與對照組沒有差異；試驗組仔豬的空腸絨毛高度、空腸絨毛高度/隱窩深度與對照組相比，分別提高13.03%、21.18%，差異極顯著（p<0.01）；試驗組仔豬的回腸絨毛高度/隱窩深度與對照組相比，提高13.48%，差異極顯著（p<0.01）。從以上結(jié)果可知，飼糧添加二術(shù)三仙散可以促進仔豬腸道發(fā)育。

表1仔豬腸道結(jié)構(gòu)

注：同行肩注不同大寫字母表示對照組與試驗組差異極顯著（p<0.01）。

2.2腸道菌群

由表2可知，試驗結(jié)束時，試驗組仔豬的回腸大腸桿菌水平與對照組相比，降低了9.30%，差異顯著（p<0.05）；試驗組仔豬的回腸乳酸桿菌水平與對照組相比，提高5.30%，差異顯著（p<0.05）；試驗組仔豬的盲腸大腸桿菌水平、盲腸乳酸桿菌水平與對照組沒有差異。從以上結(jié)果可知，飼糧添加二術(shù)三仙散可以改善仔豬腸道菌群結(jié)構(gòu)。

表2仔豬腸道菌群

注：同行不同小寫字母表示對照組與試驗組差異顯著（p<0.05）。

本發(fā)明在仔豬飼料中添加2%飼料添加劑（二術(shù)三仙散），對飼料添加劑（二術(shù)三仙散）進行了安全性實驗，其方法如下：

1步驟：

（1）材料和方法：選擇28日齡的杜×長×大仔豬10頭，臨床健康、發(fā)育正常，試驗期14天，試驗期內(nèi)隨時觀察中毒表現(xiàn)及死亡情況。

（2）飼喂的仔豬飼料原料組成：

玉米60.35、豆粕25、乳清粉5、魚粉4、豆油2.0、磷酸氫鈣1.2、石粉0.8、鹽0.3、賴氨酸0.35、預(yù)混料1。

預(yù)混料為每千克飼糧提供va12000iu，vd33000iu，ve60iu，vk33㎎，vb13㎎，vb27.5㎎，vb64.8㎎，vb1240ug，d-泛酸30㎎，葉酸1.2㎎，煙酸45㎎，生物素0.22㎎，銅15㎎，錳50㎎，鋅120㎎，鐵120㎎，硒0.6㎎，碘0.3㎎。

使用時，按2%的比例將二術(shù)三仙散添加到仔豬飼料中，制成試驗用日糧進行試驗。

2結(jié)果：給仔豬飼料添加二術(shù)三仙散，連續(xù)飼喂28天，未見明顯中毒現(xiàn)象，觀察期內(nèi)無死亡，剖檢各主要臟器未見明顯異常。

3結(jié)論：仔豬飼料中添加2%的二術(shù)三仙散飼喂仔豬，飼喂效果安全。

本發(fā)明公開的調(diào)節(jié)仔豬腸道健康的中草藥組合物與現(xiàn)有技術(shù)相比所具有的積極效果在于：

（1）本發(fā)明中的蒼術(shù)、白術(shù)作為主藥，對仔豬腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)有很好的改善作用且效果顯著。

（2）本發(fā)明中陳皮、神曲、山楂、麥芽配伍對仔豬腸道微生物菌群有調(diào)節(jié)作用，可促進有益菌增殖，抑制有害菌，從而對腸道健康起到積極的作用。

（3）本發(fā)明中的中草藥，安全高效，藥食同源。

具體實施方式

下面通過具體的實施方案敘述本發(fā)明。除非特別說明，本發(fā)明中所用的技術(shù)手段均為本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的方法。另外，實施方案應(yīng)理解為說明性的，而非限制本發(fā)明的范圍，本發(fā)明的實質(zhì)和范圍僅由權(quán)利要求書所限定。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，在不背離本發(fā)明實質(zhì)和范圍的前提下，對這些實施方案中的物料成分和用量進行的各種改變或改動也屬于本發(fā)明的保護范圍。本發(fā)明所用中草藥及試劑均有市售。另外低溫超微粉碎機有市售。

實施例1

二術(shù)三仙是由下述重量的原料組成：

蒼術(shù)6g，白術(shù)5g，干姜7g，陳皮5g，焦山楂3g，焦神曲3g，焦麥芽3g。

實施例2

二術(shù)三仙是由下述重量的原料組成：

蒼術(shù)5g，白術(shù)3g，干姜10g，陳皮3g，焦山楂2g，焦神曲3g，焦麥芽2g。

實施例3（實施例1-2）

調(diào)節(jié)仔豬腸道健康中草藥組合物的制備方法：

（1）低溫超微粉碎過篩：蒼術(shù)和白術(shù)餅先用低溫超微粉碎機粉碎過300目篩；其余藥品分別用小型低溫固定錘式粉碎機粉碎，過80目篩備用。

（2）混合分量：先將蒼術(shù)和白術(shù)加入混合機中混合均勻作為基礎(chǔ)，然后將干姜、陳皮加入混合機中混勻，最后將剩余的中藥粉逐漸分次加入到混合機中，直至全部中藥粉混勻。所有中藥粉按規(guī)定劑量用電子秤稱量。

（3）質(zhì)檢包裝：成品應(yīng)干燥、疏松、混合均勻、色澤一致，包裝采用內(nèi)置聚乙烯塑料薄膜袋，外用鋁塑真空自封袋。