本發(fā)明屬于獸用中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種防治雞產(chǎn)蛋下降綜合征的中藥復(fù)方制劑及制備方法。
背景技術(shù)：
雞產(chǎn)蛋下降綜合征是由禽類腺病毒引起的一種傳染病，任何年齡的雞都易感，雞感染禽類腺病毒后會(huì)影響整個(gè)產(chǎn)蛋期的生產(chǎn)。近年來(lái)，該病在蛋雞或種雞中流行日趨嚴(yán)重，給養(yǎng)雞業(yè)造成了巨大經(jīng)濟(jì)損失。該病可使產(chǎn)蛋率下降20％-40％，蛋的破損可達(dá)20％-40％，已成為引起產(chǎn)蛋損失的主要原因，被列為世界上危害養(yǎng)雞業(yè)最嚴(yán)重的病毒性傳染病之一。該病潛伏期約為1周，發(fā)病雞群外觀正常，飲水、采食無(wú)明顯變化，一些病雞僅出現(xiàn)一過(guò)性下痢。雞群突然產(chǎn)蛋率下降，每天可下降2％-4％，發(fā)病日齡大都集中在產(chǎn)蛋高峰期，185-250d之間，發(fā)病雞呈現(xiàn)蛋品質(zhì)和產(chǎn)蛋率不同程度下降，減蛋率一般在50％左右，最高達(dá)67％，病程長(zhǎng)，常延續(xù)至50余天。為減少雞產(chǎn)蛋下降綜合征的發(fā)病率，提高養(yǎng)殖效益，應(yīng)以抗病毒、燥濕健脾，行氣和血、開(kāi)胃消食、提高免疫力、緩解應(yīng)激為原則。
本發(fā)明針對(duì)易發(fā)生產(chǎn)蛋下降綜合征的雞群開(kāi)發(fā)的中藥復(fù)方按照中醫(yī)理論指導(dǎo)，根據(jù)免疫力低下、易發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)、易發(fā)生腺病毒感染、發(fā)生產(chǎn)蛋量下降、蛋殼異常、蛋體畸形、蛋質(zhì)低劣等臨床癥候，從“抗病毒、燥濕健脾，行氣和血、開(kāi)胃消食、提高免疫力、緩解應(yīng)激”等方面著手，研制開(kāi)發(fā)一種療效確切、安全方便、副作用小、價(jià)格低廉的防治雞產(chǎn)蛋下降綜合征的中藥復(fù)方制劑，從而降低產(chǎn)蛋損失，提高經(jīng)濟(jì)效益。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于針對(duì)雞產(chǎn)蛋下降綜合征為危害養(yǎng)雞業(yè)最嚴(yán)重的病毒性傳染病之一，嚴(yán)重影響了養(yǎng)殖效益，造成巨大經(jīng)濟(jì)損失等的實(shí)際問(wèn)題，提供一種在規(guī)?；B(yǎng)殖禽類的過(guò)程中能夠提高禽類免疫力、緩解應(yīng)激、抗病毒、燥濕健脾，行氣和血、開(kāi)胃消食的中藥復(fù)方制劑。
本發(fā)明為實(shí)現(xiàn)上述目的采用的技術(shù)方案是：一種防治雞產(chǎn)蛋下降綜合征的中藥復(fù)方制劑，所述中藥復(fù)方制劑由以下原料藥制備而成：黃連、黃芩、大青葉、益母草、當(dāng)歸、山楂、蜂膠、大豆異黃酮、維生素E。
進(jìn)一步地，所述中藥復(fù)方制劑由以下重量配比的原料藥制備而成：黃連50-200g、黃芩75-300g、大青葉75-300g、益母草75-300g、當(dāng)歸75-300g、山楂50-200g、蜂膠50-200g、大豆異黃酮10-50g、維生素E 100-400mg。
優(yōu)選的，所述中藥復(fù)方制劑由以下重量配比的原料藥制備而成：黃連75-125g、黃芩100-200g、大青葉100-200g、益母草100-200g、當(dāng)歸100-200g、山楂75-125g、蜂膠75-125g、大豆異黃酮20-40g、維生素E 150-300mg。
最優(yōu)選的，所述中藥復(fù)方制劑由以下重量配比的原料藥制備而成：黃連100g、黃芩150g、大青葉150g、益母草150g、當(dāng)歸150g、山楂100g、蜂膠100g、大豆異黃酮30g、維生素E 200mg。
本發(fā)明所述中藥復(fù)方制劑為中藥散劑、膠囊劑、口服液劑型、顆粒劑劑型或注射液劑型。
本發(fā)明還公開(kāi)了上述防治雞產(chǎn)蛋下降綜合征的中藥復(fù)方制備方法，具體步驟如下：
第一步，取黃連、黃芩、大青葉、益母草、當(dāng)歸、山楂加重量為6-10倍量水浸泡0.5-3小時(shí)，提取揮發(fā)油6-10小時(shí)，收集揮發(fā)油，揮發(fā)油與β－環(huán)糊精按重量比1:10包合，35-50℃干燥，提取后的藥液，另器貯存；
第二步，將第一步的到的藥渣與蜂膠和大豆異黃酮加混合物重量的8-15倍量水煎煮3-5次，每次2小時(shí)，合并煎煮液，過(guò)濾，與第一步得到的藥液合并，靜置過(guò)夜、濾取上清液，減壓濃縮至相對(duì)密度1.21～1.27(50℃)、干燥成干膏；
第三步，干膏與揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物粉碎成細(xì)粉，過(guò)100目篩，加入維生素E及糊精，混勻，制備口服液劑型、膠囊劑型、顆粒劑劑型或注射液劑型；
進(jìn)一步地，第一步中黃連、黃芩、大青葉、益母草、當(dāng)歸、山楂加8倍量水浸泡0.5小時(shí)；
進(jìn)一步地，第一步中干燥溫度為40℃；
進(jìn)一步地第二步中加水量為10倍量水；
進(jìn)一步地，第二部中煎煮次數(shù)為3次。
黃連：屬毛茛科、黃連屬多年生草本植物，葉基徨，堅(jiān)紙質(zhì)，卵狀三角形，三全裂，中央裂片卵狀菱形，羽狀深裂，邊緣有銳鋸齒，側(cè)生裂片不等2深裂；葉柄長(zhǎng)5-12cm。莖中含多種異喹啉類生物堿，小檗堿含量最高，以及黃連堿、甲基黃連堿、藥根堿等。黃連具有很強(qiáng)的抗菌作用，抑制金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、肺炎球菌、腦膜炎雙球菌、痢疾桿菌、炭疽桿菌等。亦有抗病毒，抗原蟲(chóng)作用。此外黃連還有解毒作用，如對(duì)抗細(xì)菌毒素，降低金黃色葡萄球菌凝固酶、溶血素效價(jià)，降低大腸桿菌的毒力等。以及抗炎、解熱的作用。
黃芩：為唇形科黃芩屬多年生草本植物。黃芩的根入藥，味苦、性寒，有清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎等功效。黃芩含黃芩甙、黃芩素等多種黃酮成分，有抗菌、抗病毒的作用，對(duì)甲型鏈球菌、肺炎雙球菌、腦膜炎雙球菌、金黃色葡萄球菌、白喉?xiàng)U菌、結(jié)核桿菌、痢疾桿菌及霍亂弧菌等多種球菌及桿菌以及流感病毒均有抑制作用。此外還有抗炎，抑制免疫反應(yīng)等作用。
大青葉：大青葉含靛甙，大青葉煎劑體外試驗(yàn)對(duì)金黃色葡萄球菌、甲型鏈球菌、腦膜炎雙球菌、肺炎鏈球菌、卡他球菌、傷寒桿菌、大腸桿菌、流感桿菌、白喉?xiàng)U菌及痢疾桿菌有一定抑制作用；大青葉對(duì)乙型腦炎病毒、腮腺炎病毒、流感病毒等也有抑制作用.此外大青葉有殺滅鉤端螺旋體及抗內(nèi)毒素作用。
益母草：性味辛、苦、涼，歸心包、肝經(jīng)。專入血分，最善活血化瘀，有行瘀血而新血不傷，養(yǎng)新血而瘀血不滯之功效。主要成分為生物堿類、黃酮類、二萜類、苯丙醇普類、脂肪酸類、揮發(fā)油類、環(huán)型多肽等，并含有鋅、銅、錳、鐵、硒等多種微量元素。具有改善微循環(huán)、心肌缺血、促進(jìn)淋巴微循環(huán)及T淋巴細(xì)胞增殖、抗炎、鎮(zhèn)痛和利尿等作用。
當(dāng)歸：性味甘、辛、溫，歸肝、心、脾經(jīng)。功能當(dāng)歸味甘而重，故專能補(bǔ)血，其氣輕而辛，故又能行血，補(bǔ)中有動(dòng)，行中有補(bǔ)，為血中之要藥。
山楂：核果類水果，核質(zhì)硬，果肉薄，味微酸澀。干制后可入藥，含表兒茶精[(-)-epicatechin]、槲皮素(quercetin)、金絲桃甙(hyperin)、綠原酸(chlorogenicacid)、山楂酸(crataegolicacid)、檸檬酸(citricacid)、苦杏仁甙(amygdalin)等。具有降血脂、血壓、強(qiáng)心、抗心律不齊等作用，同時(shí)也是健脾開(kāi)胃、消食化滯、活血化痰的良藥。
蜂膠：能滅菌、殺菌、消毒、抑菌、抗病毒、防霉、防腐，解決了抗生素只對(duì)單一微生物起作用的缺陷，且副作用極小。蜂膠常見(jiàn)的真菌、癬菌等都有抑制作用；對(duì)皰疹病毒、流感病毒等都有較好的殺滅作用；對(duì)大腸桿菌、沙門(mén)氏菌等外毒素有中和作用；同時(shí)，與某些抗菌素合用，能提高抗菌活性和延長(zhǎng)其作用。也是天然的抗氧化物質(zhì)。此外，蜂膠還具有能增強(qiáng)免疫力、促進(jìn)細(xì)胞再生作用、鎮(zhèn)痛消炎等多種作用。
大豆異黃酮：為大豆中提取出的黃酮甙及其甙元的一種混合物，規(guī)格為總含量為20％。是大豆生長(zhǎng)中形成的一類次級(jí)代謝產(chǎn)物，豆甙(Daidzin),豆甙元(Daidzein),料木甙(Genistin),料木素(Genistein),黃豆黃素(Glycitin)，黃豆黃素甙元(Glycitein)，又稱植物雌激素。具有影響雌激素分泌、代謝生物學(xué)活性、蛋白質(zhì)合成、生長(zhǎng)因子活性，通過(guò)不同的途徑改善心肌缺血癥狀，擴(kuò)張血管、抑制血小板凝聚，降低血中膽固醇和甘油三酯含量。
維生素E：是一種天然的飼料抗氧化劑，在增強(qiáng)畜禽免疫力、抗氧化能力及預(yù)防不孕癥、提高畜禽生產(chǎn)性能和改善畜禽肉質(zhì)等方面具有重要作用，可以防止細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞膜和脂肪酸等易氧化物的被氧化和被破壞，從而保護(hù)了細(xì)胞膜的完整。維生素E還具有抗應(yīng)激、抗病毒、抗感染等作用。
綜上所述，由于采用了上述技術(shù)方案，本發(fā)明的有益效果是：
采用此種中藥復(fù)方制劑在規(guī)?；B(yǎng)殖家禽的過(guò)程中可防治雞產(chǎn)蛋下降綜合征、抗病毒、提高產(chǎn)蛋量、改善蛋殼異常、畸形蛋、蛋質(zhì)低劣等臨床證候，降低雞產(chǎn)蛋下降綜合征發(fā)生幾率。該中藥復(fù)方制劑具有抗病毒、燥濕健脾，行氣和血、開(kāi)胃消食、提高免疫力、緩解應(yīng)激的功能，可廣泛應(yīng)用于雞產(chǎn)蛋下降綜合征的實(shí)踐中。
具體實(shí)施方式
下面對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
實(shí)施例1
一種防治雞產(chǎn)蛋下降綜合征的中藥復(fù)方膠囊劑，包括：黃連100g、黃芩150g、大青葉150g、益母草150g、當(dāng)歸150g、山楂100g、蜂膠100g、大豆異黃酮30g、維生素E 200mg。
其具體制備方法如下：
第一步，取黃連、黃芩、大青葉、益母草、當(dāng)歸、山楂加重量為8倍量水浸泡0.5小時(shí)，提取揮發(fā)油8小時(shí)，收集揮發(fā)油，揮發(fā)油與β－環(huán)糊精按重量比1:10包合，40℃干燥，提取后的藥液，另器貯存；
第二步，將第一步的到的藥渣與蜂膠和大豆異黃酮加混合物重量的10倍量水煎煮3次，每次2小時(shí)，合并煎煮液，過(guò)濾，與第一步得到的藥液合并，靜置過(guò)夜、濾取上清液，減壓濃縮至相對(duì)密度1.21～1.27(50℃)、干燥成干膏；
第三步，干膏與揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物粉碎成細(xì)粉，過(guò)100目篩，加入維生素E及糊精，混勻，隨后進(jìn)行致粒處理并干燥，得到混合物顆粒，再向混合物顆粒中加入硬脂酸鎂，所述硬脂酸鎂和所述混合物顆粒質(zhì)量之比為0.25:0.5，獲得膠囊內(nèi)容物，將所述的膠囊內(nèi)容物裝入膠囊殼體中即得膠囊劑。
實(shí)施例2
一種防治雞產(chǎn)蛋下降綜合征的中藥復(fù)方注射劑，包括：黃連100g、黃芩150g、大青葉150g、益母草150g、當(dāng)歸150g、山楂100g、蜂膠100g、大豆異黃酮30g、維生素E 200mg。
其具體制備方法如下：
第一步，取黃連、黃芩、大青葉、益母草、當(dāng)歸、山楂加重量為8倍量水浸泡0.5小時(shí)，提取揮發(fā)油8小時(shí)，收集揮發(fā)油，揮發(fā)油與β－環(huán)糊精按重量比1:10包合，40℃干燥，提取后的藥液，另器貯存；
第二步，將第一步的到的藥渣與蜂膠和大豆異黃酮加混合物重量的10倍量水煎煮3次，每次2小時(shí)，合并煎煮液，過(guò)濾，與第一步得到的藥液合并，靜置過(guò)夜、濾取上清液，減壓濃縮至相對(duì)密度1.21～1.27(50℃)、干燥成干膏；
第三步，干膏與揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物粉碎成細(xì)粉，過(guò)100目篩，加入維生素E及糊精，混勻，將獲得的粉末加相對(duì)于其質(zhì)量2倍的氯化鈉及注射用水適量，溶解后再進(jìn)一步加注射用水至需要的體積，過(guò)濾，灌封，滅菌，獲得需要的注射液。
實(shí)施例3
1、長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)過(guò)程
應(yīng)用Wistar大鼠(北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供)將實(shí)驗(yàn)藥物設(shè)定為高、中、低三個(gè)劑量，分別為實(shí)施例1配方的膠囊劑8g/kg、4g/kg、2g/kg。另設(shè)一對(duì)照組，連續(xù)灌胃給藥90天、180天和部分動(dòng)物停藥10天后，觀察對(duì)大鼠各項(xiàng)生理、生化指標(biāo)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：用不同劑量給大鼠連續(xù)口服180天，對(duì)大鼠的進(jìn)食量和體重增長(zhǎng)均無(wú)影響。對(duì)肝腎功能均未發(fā)現(xiàn)明顯毒性作用。對(duì)血常規(guī)、血生化、尿液生化及骨髓片等均未見(jiàn)明顯影響，各組間與對(duì)照組比較無(wú)明顯差異。
2、急性毒性試驗(yàn)過(guò)程：
應(yīng)用ICR小鼠(北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供)40只，體重在25-30克，進(jìn)行急性毒性實(shí)驗(yàn)。小鼠隨機(jī)分為兩組，即對(duì)照組、給藥組，實(shí)驗(yàn)前禁食12小時(shí)，然后給予如實(shí)施例1制備得到的本發(fā)明的中藥膠囊劑混懸液(將膠囊劑溶解在水中獲得混懸液)灌胃，對(duì)給藥的半數(shù)致死量(LD50)進(jìn)行了試驗(yàn)測(cè)定，但未測(cè)到LD50，因此進(jìn)行了最大耐受量試驗(yàn)。結(jié)果：以最大濃度(60％)，最大給藥量(120ml/kg，一日內(nèi)份四次給完)100g/kg灌胃，相當(dāng)于生藥量60g/kg，七日內(nèi)小鼠無(wú)一死亡，處死小鼠解剖觀察各臟器未發(fā)現(xiàn)毒性反應(yīng)，給藥組與對(duì)照組小鼠無(wú)任何差異。
3、雞產(chǎn)蛋下降綜合征效學(xué)試驗(yàn)
試驗(yàn)動(dòng)物：30周齡雌性SPF雞60只，未經(jīng)雞產(chǎn)蛋下降綜合征疫苗免疫。隨機(jī)平均分成3組(對(duì)照組，模型組，中藥組(本方實(shí)施例1))，每組20只雞。治療試驗(yàn)開(kāi)始前適應(yīng)性飼養(yǎng)1周。飼喂正常飼料(不含任何藥物添加劑)，自由采食及飲水，隔離平面籠養(yǎng)，對(duì)照組隔離飼養(yǎng)，模型組、中藥組試驗(yàn)雞用野毒靜脈接種攻毒，感染后24h開(kāi)始給藥治療，對(duì)照組、復(fù)方制劑組每頓服用膠囊劑1粒，連續(xù)給藥7d。
攻毒24h后，試驗(yàn)雞100％發(fā)病。臨床表現(xiàn)為：產(chǎn)蛋率下降25％，蛋殼異常，出現(xiàn)軟殼蛋、薄殼蛋、破損蛋等，蛋體畸形，蛋質(zhì)低劣。
在試驗(yàn)期間，中藥組用藥治療7天后，治愈只數(shù)15只，無(wú)效只數(shù)0只，治愈率為75％。病雞治療后產(chǎn)蛋率恢復(fù)正常，未出現(xiàn)軟殼蛋、薄殼蛋、破損蛋等，蛋體畸形等。針對(duì)雞蛋品質(zhì)進(jìn)行測(cè)定，蛋重量測(cè)定：采用電子天平對(duì)收集的雞蛋進(jìn)行蛋重量測(cè)定，精確到0.01g；蛋形指數(shù)測(cè)定：用游標(biāo)卡尺分別測(cè)定每個(gè)蛋的縱軸長(zhǎng)度和橫軸長(zhǎng)度并計(jì)算蛋形指數(shù)(蛋形指數(shù)＝蛋的長(zhǎng)徑，蛋的短徑)；蛋黃、蛋白、蛋殼重測(cè)定：蛋打開(kāi)將其內(nèi)容物倒入玻璃漏斗，使蛋白流人搪瓷缸內(nèi)，并借助剪刀、鋁匙使蛋黃和蛋白完全分離后，稱取蛋黃重、蛋殼重。用蛋重量減去兩者重量得出蛋白重量。蛋形指數(shù)測(cè)定：用游標(biāo)卡尺分別測(cè)定每個(gè)蛋的縱軸長(zhǎng)度和橫軸長(zhǎng)度并計(jì)算蛋形指數(shù)(蛋形指數(shù)＝蛋的長(zhǎng)徑，蛋的短徑)；蛋黃顏色測(cè)定：用羅氏比色扇在熒光燈下比色。測(cè)定結(jié)果顯示蛋重59.1±3.0，蛋黃重24.5±1.8，蛋白重28±1.2，蛋形指數(shù)1.33±0.2，蛋黃顏色7.8±0.2，均恢復(fù)正常。
表1治療效果統(tǒng)計(jì)表
表2對(duì)雞蛋品質(zhì)的影響
表3對(duì)雞蛋品質(zhì)的影響
此外，從生產(chǎn)性能來(lái)看，模型組雞的日增重與采食量均降低，中藥組雞的生產(chǎn)性能與對(duì)照組相比雖有下降，但仍高于模型組。
表4對(duì)家禽生產(chǎn)性能的影響
試驗(yàn)結(jié)果顯示，中藥復(fù)合制劑組在治療雞產(chǎn)蛋下降綜合征方面具有良好的療效。
本發(fā)明意外的發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明具有協(xié)同增效作用，為證明該作用，本發(fā)明進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn)：
實(shí)施例1中去掉黃連、黃芩，其他成分不變，進(jìn)行上述實(shí)施例3中的雞產(chǎn)蛋下降綜合征效學(xué)試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，去掉黃連、黃芩組產(chǎn)蛋率較本發(fā)明下降20％。
實(shí)施例1中去掉大青葉、益母草，其他成分不變，進(jìn)行上述實(shí)施例3中的雞產(chǎn)蛋下降綜合征效學(xué)試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，去掉大青葉、益母草組產(chǎn)蛋率較本發(fā)明下降13％。
表5治療效果比較
表6治療效果比較
上述實(shí)施例只是為了說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思及特點(diǎn)，其目的是在于讓本領(lǐng)域內(nèi)的普通技術(shù)人員能夠了解本發(fā)明的內(nèi)容并據(jù)以實(shí)施，并不能以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。凡是根據(jù)本發(fā)明內(nèi)容的實(shí)質(zhì)所作出的等效的變化或修飾，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。