本發(fā)明屬于食品保健技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種降血糖的玉米須口服液的制備方法。
背景技術(shù)：
玉米是世界上分布最廣泛的糧食作物之一，種植面積僅次于小麥和水稻。美國的玉米產(chǎn)量約占世界產(chǎn)量的一半，是最重要的糧食作物，中國年產(chǎn)玉米占世界第二位，分布也很廣，是中國北方和西南山區(qū)及其它旱谷地區(qū)人民的主要糧食之一。玉米須為玉米的花柱和柱頭，最早藥用記載見于1476年的《滇南木草》，為《中華人民共和國衛(wèi)生部藥材標(biāo)準(zhǔn)》1985版(一部)收錄的常用藥材品種11l，具有抗腫瘤、抗菌、降血脂、降血糖、利尿等功效，美國FDA已證實(shí)玉米須屬于一般公認(rèn)為安全(GRAS)的可直接加入食品中的物質(zhì)。
從20世紀(jì)20年代起，國內(nèi)外學(xué)者便對玉米須的化學(xué)成分開始了研究，發(fā)現(xiàn)玉米須中含有多糖類、生物堿類、黃酮類、皂苷類、苦味糖苷、甾醇類、多聚戊糖、揮發(fā)性物質(zhì)、氨基酸、礦質(zhì)元素等多種化學(xué)成分，具有降血糖、利尿、抑菌、降壓、增強(qiáng)免疫、抗癌等功效，玉米須化學(xué)成分及其藥理作用的研究開發(fā)將帶來巨大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
糖尿病是一組以高血糖為特征的代謝性疾病。高血糖則是由于胰島素分泌缺陷或其生物作用受損，或兩者兼有引起。糖尿病時(shí)長期存在的高血糖，導(dǎo)致各種組織，特別是眼、腎、心臟、血管、神經(jīng)的慢性損害、功能障礙。降糖化學(xué)藥可大致分為口服降糖藥物和注射降糖藥物。目前國內(nèi)常用的口服降糖藥物分為促胰島素分泌劑類、二甲雙胍類、α-糖苷酶抑制劑類、噻唑烷二酮衍生物、DDP-4酶抑制劑等；其中促胰島素分泌劑類又分為磺脲類和非磺脲類(格列奈類)。注射降糖藥物有胰島素及類似藥物、GLP-1受體激動(dòng)劑等。降糖藥共同的副作用為低血糖，α-糖苷酶抑制劑、雙胍類及胰島素增敏劑單獨(dú)使用一般不會(huì)引起低血糖，但與其他藥物連用時(shí)仍可能發(fā)生?；颊哂锌赡軙?huì)出現(xiàn)強(qiáng)烈空腹感、出冷汗、全身無力、心悸、手腳發(fā)抖、眼睛發(fā)花、頭疼、發(fā)呆等現(xiàn)象，嚴(yán)重時(shí)會(huì)發(fā)生昏迷。應(yīng)口服碳水化合物或含葡萄糖飲料，嚴(yán)重時(shí)應(yīng)立即注射葡萄糖。
玉米須中富含的多糖能夠明顯降低四氧嘧啶及腎上腺素所造成的高血糖患者的血糖水平，并能增強(qiáng)患者內(nèi)肝糖原含量。研究者通過浸漬法、煎煮法、回流提取法、連續(xù)回流提取法等多種方法提取玉米須中功能成分，但提取物中功能成分的含量不高，雜質(zhì)較多，且口感較酸澀。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供了降血糖的玉米須口服液的制備方法，所制玉米須口服液中功能成分含量較高，且功能成分活性較高，降血糖效果明顯，口服液口感更佳。
本發(fā)明解決技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為：
(1)將優(yōu)質(zhì)玉米須洗凈、曬干再經(jīng)粉碎得玉米須粉末，加入去離子水中，采用復(fù)合酶于50-70℃，PH4-6下，酶解3-6小時(shí)。
(2)將步驟(1)所得酶解液加熱至沸騰，保溫5-10分鐘滅酶，再冷卻至室溫，離心玉米須清液；
(3)將步驟(2)所得玉米須清夜倒入三氯甲烷中，超聲5-10分鐘后，靜置分層，取上層清液，冷凍干燥24小時(shí)得玉米須提取物。玉米須中含有少量生物堿，使其具有酸澀味，影響玉米須口服液的口感，將玉米須清液采用三氯乙烷萃取，進(jìn)一步去除玉米須清液中的生物堿，改善玉米須口服液的口感。
(4)將步驟(3)所得玉米須提取物、乳化劑、蔗糖、山梨酸鉀和純凈水混合均勻即得所需降血糖的玉米須口服液。
作為優(yōu)選，步驟(1)中所述復(fù)合酶由纖維素酶、羧酸酯酶和木瓜蛋白酶組成，所述纖維素酶、羧酸酯酶和木瓜蛋白酶的質(zhì)量比為1：2：0.5。采用復(fù)合酶協(xié)同酶解，相比于單種酶酶解，具有酶解溫度低、時(shí)間短、效率高的優(yōu)點(diǎn)。纖維素酶和羧酸酯酶通過其水解不斷為木瓜蛋白酶提供非還原末端，有效提高了其底物濃度，同時(shí)木瓜蛋白酶又不斷消耗纖維素酶和羧酸酯酶的產(chǎn)物，促進(jìn)二者水解，從而提高酶解效率，提高產(chǎn)物純度。
作為優(yōu)選，步驟(1)中所述玉米須粉末、去離子水與復(fù)合酶的質(zhì)量比為1:15-20：0.2-0.5。
作為優(yōu)選，步驟(2)中所述離心的轉(zhuǎn)速為1200-1500r/min，離心時(shí)間為10-20分鐘。
作為優(yōu)選，步驟(3)中所述玉米須清夜與三氯乙烷的質(zhì)量比為1:8-10。
作為優(yōu)選，步驟(3)中所述超聲的功率為400-600w，采用超聲輔助三氯甲烷萃取能夠提高萃取效率，加速萃取液分層，增加生物堿的溶出率，提高多糖類物質(zhì)的純度。
作為優(yōu)選，步驟(4)中所述乳化劑為硬脂酰乳酸鈉或硬脂酰乳酸鈣。
作為優(yōu)選，步驟(4)中所述玉米須提取物、乳化劑、蔗糖、山梨酸鉀和純凈水的質(zhì)量比為1:0.01-0.03:1-2:0.01-0.03:10-20。
本發(fā)明的有益效果為：
1、采用纖維素酶、羧酸酯酶和木瓜蛋白酶組成的復(fù)合酶酶解，具有酶解溫度低、時(shí)間短、效率高的優(yōu)點(diǎn)。
2、最后采用三氯甲烷萃取法除去玉米須中生物堿，降低玉米須口服液的酸澀感，使其口感更佳。
3、本發(fā)明所制備的玉米須口服液多糖、黃酮類化合物含量高，降血糖效果明顯，且無副作用，適合患者長期服用。
具體實(shí)施方式
為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。
實(shí)施例1
(1)將100g優(yōu)質(zhì)玉米須洗凈、曬干再經(jīng)粉碎得玉米須粉末，加入1500g去離子水中，采用8.5g纖維素酶、17g羧酸酯酶和4.5g木瓜蛋白酶于50℃，PH5下，酶解5小時(shí)。
(2)將步驟(1)所得130g酶解液加熱至沸騰，保溫8分鐘滅酶，再冷卻至室溫，離心得102g玉米須清液；
(3)將步驟(2)所得玉米須清夜倒入1000g三氯甲烷中，超聲10分鐘后，靜置分層，取上層清液，冷凍干燥24小時(shí)得28g玉米須提取物；
(4)將步驟(3)所得5g玉米須提取物、0.1g硬脂酰乳酸鈣、10g蔗糖、0.05g山梨酸鉀和100g純凈水混合均勻即得所需降血糖的玉米須口服液。
實(shí)施例2
(1)將100g優(yōu)質(zhì)玉米須洗凈、曬干再經(jīng)粉碎得玉米須粉末，加入1800g去離子水中，采用14g纖維素酶、29g羧酸酯酶和7g木瓜蛋白酶于60℃，PH6下，酶解6小時(shí)。
(2)將步驟(1)所得150g酶解液加熱至沸騰，保溫10分鐘滅酶，再冷卻至室溫，離心得115g玉米須清液；
(3)將步驟(2)所得玉米須清夜倒入1000g三氯甲烷中，超聲5分鐘后，靜置分層，取上層清液，冷凍干燥24小時(shí)得32g玉米須提取物；
(4)將步驟(3)所得5g玉米須提取物、0.15g硬脂酰乳酸鈣、5g蔗糖、0.1g山梨酸鉀和50g純凈水混合均勻即得所需降血糖的玉米須口服液。
實(shí)施例3
(1)將100g優(yōu)質(zhì)玉米須洗凈、曬干再經(jīng)粉碎得玉米須粉末，加入2000g去離子水中，采用11.5g纖維素酶、23g羧酸酯酶和5.5g木瓜蛋白酶于70℃，PH4下，酶解3小時(shí)。
(2)將步驟(1)所得140g酶解液加熱至沸騰，保溫5分鐘滅酶，再冷卻至室溫，離心得105g玉米須清液；
(3)將步驟(2)所得玉米須清夜倒入840g三氯甲烷中，超聲8分鐘后，靜置分層，取上層清液，冷凍干燥24小時(shí)得35g玉米須提取物；
(4)將步驟(3)所得5g玉米須提取物、0.05g硬脂酰乳酸鈉、8g蔗糖、0.15g山梨酸鉀和80g純凈水混合均勻即得所需降血糖的玉米須口服液。
比較例1
與實(shí)施例1操作相同，不同的是采用30g纖維素酶代替復(fù)合酶，制備玉米須口服液。
比較例2
與實(shí)施例1操作相同，不同的是采用30g羧酸酯酶代替復(fù)合酶，制備玉米須口服液。
比較例3
與實(shí)施例1操作相同，不同的是采用30g木瓜蛋白酶代替復(fù)合酶，制備玉米須口服液。
比較例4
(1)將100g優(yōu)質(zhì)玉米須洗凈、曬干再經(jīng)粉碎得玉米須粉末，加入1500g去離子水中，采用8.5g纖維素酶、17g羧酸酯酶和4.5g木瓜蛋白酶于50℃，PH5下，酶解5小時(shí)。
(2)將步驟(1)所得130g酶解液加熱至沸騰，保溫8分鐘滅酶，再冷卻至室溫，離心得102g玉米須清液；
(3)將步驟(2)所得玉米須清夜冷凍干燥24小時(shí)得30g玉米須提取物；
(4)將步驟(3)所得5g玉米須提取物、0.1g硬脂酰乳酸鈣、10g蔗糖、0.05g山梨酸鉀和100g純凈水混合均勻即得所需降血糖的玉米須口服液。
實(shí)施例4功能成分含量測定：
紫外-可見分光光度法檢測多糖含量。將純化得到的玉米須口服液溶于甲醇中，用液質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行測定。
液相色譜條件：色譜儀：WATERS 2690；檢測器：WATERS 996；分析柱：Lichrospher C-18 2.1x250mm；流動(dòng)相：甲醇-水-梯度洗脫(1％乙酸)；柱溫：30℃；流速：0.3mL/min；進(jìn)樣量：10μL。
質(zhì)譜條件：離子方式：ESI-，ESI+：毛細(xì)管電壓：3.88KV：錐孔電壓：30V；離子源溫度：120℃；脫溶劑氣溫度：300℃；質(zhì)量范圍：200-800m/z：光電倍增器電壓：650V。
測試結(jié)果見表1：
表1：
通過表1可以看出，采用復(fù)合酶酶解得的玉米須口服液中多糖含量和黃酮類化合物含量比單一酶酶解的產(chǎn)物中二者含量更高。
實(shí)施例5口感測試
將實(shí)施例1-3和比較例4所得玉米須口服液采用沸水沖泡，十分鐘后，選擇10位評價(jià)員分別對玉米須口服液進(jìn)行口感評定，評分標(biāo)準(zhǔn)見表2。
表2：
通過表2可以看出：通過三氯甲烷萃取除去生物堿，能有效改善玉米須口服液的色澤、口感和性狀。
以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。