本發(fā)明屬于醫(yī)藥保健領(lǐng)域，具體涉及到維生素B₁、蟲草酸、核黃素及其組合物在降尿酸藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

痛風(fēng)病嚴(yán)重困擾人類生活，新西蘭、美國(guó)和中國(guó)的流行病學(xué)研究表明痛風(fēng)病癥變得越來越普遍，發(fā)病率約為2％，并不斷升高。其中65歲及以上人群發(fā)生率最高，男性的發(fā)病率比女性發(fā)病率兩倍還高。痛風(fēng)病是高尿酸血癥發(fā)展的結(jié)果，是由于體內(nèi)尿酸濃度高于血液溶解能力(>360μmol/L)，導(dǎo)致尿酸鈉晶體在軟組織、關(guān)節(jié)沉積，這些沉積結(jié)晶引起軟組織、關(guān)節(jié)和骨組織反復(fù)發(fā)炎性劇烈疼痛，嚴(yán)重降低患者生活質(zhì)量。

痛風(fēng)病分為急性和慢性兩種。目前市場(chǎng)上針對(duì)急性痛風(fēng)病治療藥物包括非甾體抗炎藥、秋水仙素、促腎上腺皮質(zhì)激素或類固醇，這些藥物主要是作用于炎癥因子，降低患者痛苦。對(duì)于慢性痛風(fēng)病，管理血液尿酸水平是關(guān)鍵。目前，用來降低人體內(nèi)尿酸濃度的藥物主要有：抑制尿酸合成、促尿酸排泄以及類尿酸酶藥物，包括別嘌呤醇、非布司他、苯溴馬隆、丙磺舒、Lesinurad、尿酸酶、拉布立酶、PEG改性的尿酸酶等，這些藥物存在對(duì)肝和腎代謝器官有較強(qiáng)副作用或在體內(nèi)引起免疫反應(yīng)產(chǎn)生抗體等問題，也容易引發(fā)胃腸道和心血管病。這使得患有肝病和腎病的患者、患有高血壓、充血性心力衰竭、胃炎/潰瘍或者腎功能不全的痛風(fēng)患者使用上述藥物通常具有較高危險(xiǎn)性。因此，發(fā)現(xiàn)和開發(fā)新的高效、安全的降尿酸藥物迫在眉睫。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對(duì)上述情況，本發(fā)明的目的是提供了維生素B₁、蟲草酸、核黃素及其組合物在降尿酸藥物中的應(yīng)用。具體方案如下：

維生素B₁在降尿酸藥物中的應(yīng)用。

蟲草酸在降尿酸藥物中的應(yīng)用。

核黃素在降尿酸藥物中的應(yīng)用。

一種具有降尿酸活性的組合物，包括以下至少一種化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、其N-氧化物類衍生物、其單一異構(gòu)體或異構(gòu)體混合物、其螯合物及其其非共價(jià)復(fù)合物：維生素B₁、蟲草酸、核黃素。

優(yōu)選的，所述具有降尿酸活性的組合物，包括維生素B₁、蟲草酸、核黃素，且其比例為1:1:1。

一種降尿酸藥物，至少包括維生素B₁、蟲草酸、核黃素這三種化合物中的一種。

本發(fā)明所述的維生素B₁、蟲草酸、核黃素及其組合物在應(yīng)用時(shí)，可經(jīng)任何常規(guī)給藥途徑施用，尤其是：消化道途徑，例如口服，如采用片劑或膠囊劑形式；或者，非腸道途徑，如采用注射劑或混懸液形式，局部給藥如采用外用藥水、凝膠、軟膏或藥膏或鼻用或栓劑形式。該藥物組合物含有本發(fā)明化合物的任意形式或其藥學(xué)可接受的鹽，輔以至少一種以上藥學(xué)上可接受的輔料或稀釋劑，并通過混合、制粒或包衣方法等常規(guī)方式制備。

例如，口服劑型可以是片劑或明膠膠囊，含有與活性成分共存的：(1)稀釋劑，如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纖維素、甘氨酸等；(2)潤(rùn)滑劑，如硅膠、滑石粉、十八酸或其鎂鹽或鈣鹽和/或聚乙二醇，等；對(duì)于片劑還包括(3)粘合劑，如硅酸鎂鋁、淀粉糊、明膠、西黃蓍膠、甲基纖維素、羧基甲基纖維素納、聚乙烯吡咯酮等；如果需要，還包括(4)崩解劑，如淀粉、瓊脂、褐藻酸或褐藻酸鹽或泡騰劑混合物，等；和/或(5)吸收劑、著色劑、香精和甜味劑。注射劑型可以是水性等滲溶液或混懸劑，栓劑可通過脂肪乳或混懸劑制備。這些藥物組合物可經(jīng)滅菌和/或含有佐劑，如保鮮劑、穩(wěn)定劑、潤(rùn)濕劑或乳化劑，助溶劑，調(diào)節(jié)滲透壓的鹽和/或緩沖液。此外，它們還可以包括其它治療活性物質(zhì)。經(jīng)皮給藥劑型為含有有效治療劑量的本發(fā)明所述化合物或其組合物，并輔以輔料，藥物載體包括易吸收的藥學(xué)上可接受的溶劑以協(xié)助釋放作用于宿主皮膚。局部使用的適宜劑型，如用于皮膚和眼睛，優(yōu)選本領(lǐng)域熟知的水溶液、藥膏、乳膏或凝膠劑。這些劑型可能含有助溶劑、穩(wěn)定劑、增效劑劑、緩沖液和防腐劑。

本發(fā)明所述的維生素B₁、蟲草酸、核黃素及其組合物可在有效治療劑量下聯(lián)合其它一種或一種以上的治療劑一起施用(藥物聯(lián)合)。例如，與其它緩解癥狀物質(zhì)、非留體類抗炎藥物、抑制尿酸合成藥物、抑制尿酸重吸收藥物聯(lián)合應(yīng)用的協(xié)調(diào)效應(yīng)，如：秋水仙堿；布洛芬，扶他林，吲哚美辛，塞來考昔；別嘌呤醇、非布司他；苯溴馬隆、丙磺舒、Lesinurad、尿酸酶、拉布立酶、PEG改性的尿酸酶。當(dāng)本發(fā)明的化合物與其他治療法聯(lián)合使用時(shí)，聯(lián)合施用化合物的劑量取決于所用的聯(lián)合藥物的類型、聯(lián)合應(yīng)用的特定的藥物，以及治療者的身體狀況等。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)及應(yīng)用效果：

(1)本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了維生素B₁、蟲草酸、核黃素均具有降低血清中尿酸含量的作用，其中，核黃素的降尿酸作用最為顯著，且這三種化合物具有協(xié)同作用，因此，提供了一種維生素B₁、蟲草酸、核黃素及其組合物在降尿酸藥物中應(yīng)用。

(2)毒理實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明所述的維生素B₁、蟲草酸、核黃素對(duì)對(duì)肝、腎、脾無毒，克服了現(xiàn)有降尿酸藥物對(duì)腎臟或肝臟有害的缺陷。

【附圖說明】

圖1為相同劑量的維生素B₁、蟲草酸、核黃素及其組合物對(duì)小鼠血清中尿酸濃度的影響。

圖2為不同劑量的維生素B₁、蟲草酸、核黃素對(duì)小鼠血清中尿酸濃度的影響。

圖3為不同劑量的維生素B₁、蟲草酸、核黃素對(duì)小鼠尿液中尿酸濃度的影響。

圖4為不同劑量的維生素B₁、蟲草酸、核黃素對(duì)小鼠肝臟XOD活性的影響。

圖5為不同劑量的維生素B₁、蟲草酸、核黃素對(duì)小鼠腎臟URAT1水平的影響。

圖6為不同劑量的維生素B₁、蟲草酸、核黃素對(duì)小鼠血尿素氮濃度的影響。

圖7為不同劑量的維生素B₁、蟲草酸、核黃素對(duì)小鼠血清肌酐濃度的影響。

圖8為不同劑量的維生素B₁、蟲草酸、核黃素對(duì)小鼠肝臟系數(shù)的影響。

圖9為不同劑量的維生素B₁、蟲草酸、核黃素對(duì)小鼠腎臟系數(shù)的影響

圖10為不同劑量的維生素B₁、蟲草酸、核黃素對(duì)小鼠脾臟系數(shù)的影響。

【具體實(shí)施方式】

為了驗(yàn)證本發(fā)明的應(yīng)用效果，下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。在未作說明的情況下，本發(fā)明采用的試劑、設(shè)備和方法均為本技術(shù)領(lǐng)域常規(guī)市購(gòu)的試劑、設(shè)備和常規(guī)使用的方法。

實(shí)施例1

維生素B₁、蟲草酸、核黃素及其組合物在相同劑量下(20mg/kg/d)對(duì)高尿酸小鼠的作用：

取70只雄性SPF昆明小鼠(20±2g，購(gòu)自南方醫(yī)科大學(xué))，隨機(jī)分為7組：正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽性對(duì)照組、維生素B₁組、蟲草酸組、核黃素組、組合物組(維生素B₁、蟲草酸、核黃素的質(zhì)量比為1:1:1)。除正常對(duì)照組腹腔注射和灌胃生理鹽水外，其他組按照100mg/kg/d的劑量腹腔注射氧嗪酸鉀鹽，同時(shí)灌胃600mg/kg/d劑量的次黃嘌呤建立高尿酸血癥小鼠模型。造模前一個(gè)小時(shí)禁食不禁水，造模后1小時(shí)，陽性對(duì)照組灌胃5mg/kg/d劑量的別嘌呤醇(AL)，維生素B₁組灌胃20mg/kg/d劑量的維生素B₁，蟲草酸組灌胃20mg/kg/d劑量的蟲草酸，核黃素組灌胃20mg/kg/d劑量的核黃素，組合物組灌胃20mg/kg/d劑量的維生素B₁、蟲草酸、核黃素的組合物(1:1:1)，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組則灌胃相同體積的生理鹽水，連續(xù)7天。第7天灌胃給藥1小時(shí)后，麻醉摘眼球取血，使用離心機(jī)在3500r/min速度下離心10min分離得到血清，檢測(cè)各組小鼠血清中尿酸濃度。

高尿酸血癥動(dòng)物模型對(duì)研究尿酸代謝及相關(guān)疾病極重要。由于尿酸在嚙齒類動(dòng)物體內(nèi)肝臟中可進(jìn)一步降解為尿囊素的尿酸酶，因此在這些動(dòng)物建立高尿酸模型模型是比較困難的。氧嗪酸鉀是尿酸酶阻斷劑，常用于提高模型小鼠血清高尿酸水平；次黃嘌呤是尿酸黃嘌呤氧化酶氧化成尿酸的嘌呤分解代謝途徑的前體。人類高尿酸血癥是因?yàn)槭秤酶秽堰适澄锘驈哪蛩峤?jīng)腎排泄水平低。模仿人類的小鼠高尿酸血癥的病理，本實(shí)施例通過聯(lián)合使用氧嗪酸鉀和次黃嘌呤建立了高尿酸血癥小鼠模型。由于只需要很短的時(shí)間和較少的氧嗪酸鉀和次黃嘌呤，因此該模型特別適合于藥物的篩選。

結(jié)果如圖1所示(*和**表示與正常對(duì)照組相比，差異顯著分別為P<0.05和P<0.01；#和##表示與模型對(duì)照組相比，差異顯著分別為P<0.05和P<0.01；Δ和ΔΔ表示與陽性對(duì)照組相比，差異顯著分別為P<0.05和P<0.01)。與正常對(duì)照組相比，模型對(duì)照組血清尿酸水平達(dá)到386.8μmol/L，高于正常對(duì)照組326.1μmol/L，差異顯著性為P<0.05，這表明高尿酸血癥小鼠模型造模成功。與模型對(duì)照組相比，陽性對(duì)照組中，別嘌呤醇成功地使高尿酸小鼠血清尿酸水平從386.8μmol/L降到230.6μmol/L，差異顯著性為P<0.01，這進(jìn)一步說明高尿酸血癥小鼠模型造模成功，并且商業(yè)藥別嘌呤醇成功地使高尿酸血癥小鼠血液尿酸水平降低。維生素B₁使高尿酸小鼠血清尿酸水平從386.8μmol/L降為258.6μmol/L，這與模型對(duì)照組相比差異顯著性為P<0.01；甘露醇使高尿酸血癥小鼠血清尿酸水平從386.8μmol/L降為216.7μmol/L，這與模型對(duì)照組相比差異顯著性為P<0.01；核黃素使高尿酸血癥小鼠血清尿酸水平從386.8μmol/L降為166.7μmol/L，這與模型對(duì)照組相比差異顯著性為P<0.01，與陽性對(duì)照組相比差異顯著性P<0.01，說明維生素B₁、甘露醇、核黃素均可有效地降低了高尿酸小鼠的血清尿酸水平，并且核黃素的降尿酸活性比別嘌呤醇更強(qiáng)。組合物組小鼠血清尿酸水平從高尿酸血癥小鼠386.8μmol/L降為128.6μmol/L，這與模型對(duì)照組相比差異顯著性為P<0.01，與陽性對(duì)照組相比差異顯著性P<0.01，即組合物的降尿酸活性也高于比別嘌呤醇，且維生素B₁、甘露醇和核黃素三種化合物的降尿酸活性具有協(xié)同效應(yīng)。

綜上所述，維生素B₁、甘露醇、核黃素均具有良好的降尿酸效果，其降尿酸效果可以使高尿酸模型組血液尿酸濃度降低到低于正常小鼠尿酸水平，其中核黃素降尿酸活性優(yōu)于別嘌呤醇，并且三種化合物表現(xiàn)出協(xié)同效應(yīng)。

實(shí)施例2

維生素B₁、蟲草酸、核黃素及其組合物在不同劑量下對(duì)高尿酸小鼠的影響、作用機(jī)制及毒理實(shí)驗(yàn)：

試劑來源：氧嗪酸鉀和次黃嘌呤從奧德里奇試劑公司購(gòu)買，別嘌呤醇由東京化工有限公司提供，苯溴馬隆核黃素、維生素B1和蟲草酸從阿拉丁試劑有限公司購(gòu)買。血清尿酸水平檢測(cè)試劑盒從南京建成生物工程研究所購(gòu)買。XOD檢測(cè)試劑盒和URAT1蛋白質(zhì)檢測(cè)試劑盒從R&D System公司購(gòu)買。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：所有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)計(jì)劃均經(jīng)過廣東微生物研究所倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(GT-IACUC201608151)。用于這項(xiàng)研究的雄性SPF級(jí)昆明小鼠(20±2g)購(gòu)自廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，實(shí)驗(yàn)前1周，所有的動(dòng)物屏障環(huán)境中飼養(yǎng)，并允許自由進(jìn)食食物和水，環(huán)境溫度控制在24-26攝氏度，給藥之前，小鼠禁食1h，自由給水。

本實(shí)施例分別采用別嘌呤醇和苯溴馬隆(FDA批準(zhǔn)的高尿酸血癥藥物)作為陽性對(duì)照組。將實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為13組(每組10只)：正常對(duì)照組，模型對(duì)照組，別嘌呤醇對(duì)照組，苯溴馬隆對(duì)照組，核黃素低、中、高劑量組，維生素B₁低、中、高劑量組和蟲草酸低、中、高劑量組。給藥前一小時(shí)進(jìn)行造模，造模方法同實(shí)施例1。

每個(gè)小鼠每天給藥一次，持續(xù)一周。其中，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組小鼠灌胃同樣體積的生理鹽水(0.9％)，別嘌呤醇對(duì)照組小鼠給藥別嘌呤醇(5mg/kg)，苯溴馬隆對(duì)照組小鼠給藥苯溴馬隆(7.8mg/kg)，核黃素低、中、高劑量組小鼠分別灌胃5、10和20mg/kg劑量的核黃素，維生素B₁低、中、高劑量組小鼠分別灌胃11、22和44mg/kg劑量的維生素B₁，蟲草酸低、中、高劑量組小鼠分別灌胃10、20和40mg/kg劑量的蟲草酸。

所有的小鼠7天后處死，收集血液和尿液。血液樣本在2400轉(zhuǎn)4℃下離心10分鐘，收集血清。分別測(cè)定血清尿酸水平、尿液尿酸水平、血尿素氮水平和血清肌酐水平。實(shí)驗(yàn)7天后，摘除小鼠臟器官，包括肝臟、腎臟和脾臟。所有的器官在生理鹽溶液清洗，并用普通過濾器濾干，然后稱重。器官系數(shù)(肝臟系數(shù)、腎臟系數(shù)和脾臟系數(shù))為器官與體重比。收集肝、腎、脾內(nèi)臟組織，稱重后在冷生理鹽水(0.9％)中勻漿并離心，收集上清液，使用ELISA試劑盒測(cè)定XOD(黃嘌呤氧化酶)和URAT1(尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1)活性。

統(tǒng)計(jì)分析是使用專業(yè)的數(shù)據(jù)處理軟件SPSS。所有數(shù)據(jù)被表示為平均值±平均值標(biāo)準(zhǔn)誤差(S.D)。使用單因素方差分析進(jìn)行分析，組間差異性用雙尾測(cè)驗(yàn)比較，在P<0.05或P<0.01水平認(rèn)為是有顯著差異。

如圖2所示，模型對(duì)照組小鼠血液尿酸水平(240μmol/L，P＜0.01)小鼠與正常對(duì)照組小鼠血液尿酸水平(160μmol/L)相比顯著提高，說明造模成功。別嘌呤醇對(duì)照組(5mg/kg)和苯溴馬隆(7.8mg/kg)組(陽性對(duì)照)小鼠血液尿酸水平分別為137和151μmol/L，顯著低于模型對(duì)照組小鼠(240μmol/L，P＜0.01)，也比正常對(duì)照組小鼠血清尿酸水平低。另外，核黃素低、中、高劑量(5、10和20mg/kg劑量)組小鼠，血清尿酸水平分別為172，163和146μmol/L，顯著低于模型對(duì)照組(P＜0.01)，接近正常對(duì)照組水平；維生素B1低、中、高劑量(11、22和44mg/kg劑量)組小鼠，血清尿酸水平分別為167，154和142μmol/L，顯著低于模型對(duì)照組(P＜0.01)，接近正常對(duì)照組水平；蟲草酸低、中、高劑量(10、20和40mg/kg劑量)組小鼠，血清尿酸水平分別為178，166和164μmol/L，顯著低于模型對(duì)照組(P＜0.01)，接近正常對(duì)照組水平。

由于尿酸排泄通過腎臟與血尿酸水平直接相關(guān)，本實(shí)施例檢測(cè)了不同劑量的維生素B₁、蟲草酸、核黃素對(duì)高尿酸血癥小鼠尿酸排泄(尿液尿酸水平)的影響，結(jié)果如圖3所示。由于氧嗪酸鉀是肝臟尿酸酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑和一種電致尿酸轉(zhuǎn)運(yùn)/通道阻斷劑，次黃嘌呤是尿酸黃嘌呤氧化酶氧化成尿酸的嘌呤分解代謝途徑的前體，故與正常對(duì)照組相比(146μmol/L)，氧嗪酸鉀和次黃嘌呤使小鼠的尿酸排泄明顯增加，模型對(duì)照組小鼠的尿液尿酸含量為295μmol/L，(P＜0.01)。由于別嘌呤醇抑制肝臟XOD活性而導(dǎo)致尿酸生成降低，因此別嘌呤醇使小鼠尿液尿酸水平顯著降低(112μmol/L，P＜0.01)。苯溴馬隆本身抑制腎中URAT1活性，從而降低尿酸的重吸收，使小鼠尿液尿酸水平顯著增加(204μmol/L，P＜0.01)。不同劑量的核黃素分別將小鼠尿液尿酸水平提高至261，326和202μmol/L(P＜0.01)；不同劑量的維生素B₁分別將小鼠尿液尿酸水平提高至182，194和160μmol/L(P＜0.01)；不同劑量的蟲草酸分別將小鼠尿液尿酸水平提高至200，195和229160μmol/L(P＜0.01)。表明維生素B₁、蟲草酸、核黃素主要作用在于抑制尿酸重吸收，進(jìn)而促進(jìn)腎臟尿酸排泄。

由于黃嘌呤氧化酶是尿酸的嘌呤核苷酸代謝的關(guān)鍵酶，黃嘌呤氧化酶水平的變化可能會(huì)明顯改變血清尿酸水平。因此，本實(shí)施例檢測(cè)了維生素B₁、蟲草酸、核黃素對(duì)肝臟XOD活性的影響，結(jié)果如圖4所示。在模型對(duì)照組小鼠(206pg/ml)中，XOD活性是正常對(duì)照組小鼠(185pg/ml)的112％(P＜0.05)。與模型對(duì)照組小鼠相比，別嘌呤醇顯著降低肝臟XOD活性至153pg/ml(P＜0.05)，低于正常水平。然而，維生素B₁、蟲草酸、核黃素在不同劑量均未顯示對(duì)黃嘌呤氧化酶有顯著的抑制作用，表明這三種化合物不是通過抑制XOD活性而實(shí)現(xiàn)降尿酸作用的。

腎小管的URAT1對(duì)腎臟的尿酸重吸收起到重要作用，是高尿酸血癥和痛風(fēng)病的重要指標(biāo)之一。本實(shí)施例檢測(cè)了維生素B₁、蟲草酸、核黃素對(duì)腎器官URAT1水平的影響，結(jié)果如圖5所示。與正常對(duì)照組比較(72.84pg/ml)，模型對(duì)照組小鼠的腎臟URAT1水平(95.26pg/ml)顯著升高(P＜0.01)，與氧嗪酸鉀提高URAT1蛋白水平的事實(shí)一致。別嘌醇對(duì)照組(55.36pg/ml)組和苯溴馬隆對(duì)照組(52.94pg/ml)低于模型對(duì)照組(P＜0.01)。不同劑量的核黃素分別將小鼠URAT1水平降至64.17、60.10和49.04pg/mL(P＜0.01)；不同劑量的維生素B₁分別將小鼠URAT1水平降至57.85、52.67和50.78pg/mL(P＜0.01)；不同劑量的蟲草酸分別將小鼠URAT1水平降至57.39、52.20和53.28pg/mL(P＜0.01)。呈劑量依賴關(guān)系，表明維生素B₁、蟲草酸、核黃素這三種化合物的降尿酸作用機(jī)理可能歸因于對(duì)URAT1蛋白的抑制作用。

血尿素氮是腎健康關(guān)鍵指標(biāo)，腎損傷往往伴有血尿素氮水平的增加。如圖6所示，正常對(duì)照組及模型對(duì)照組小鼠的血尿素氮分別為7.56和8.40mmol/L，無顯著差異。別嘌醇對(duì)照組小鼠的血尿素氮(22.57mmol/L，P＜0.01)為正常對(duì)照組的298％，表明別嘌呤醇使小鼠的腎功能受損。苯溴馬隆組小鼠的血尿素氮是8.31mmol/L，與對(duì)照組無顯著差異。核黃素低、中、高劑量組小鼠的血尿素氮水平分別為10.50、6.98和8.02mmol/L；維生素B₁低、中、高劑量組小鼠的血尿素氮水平分別為7.99、8.02和9.87mmol/L；蟲草酸低、中、高劑量組小鼠的血尿素氮水平分別為8.98、9.02和8.35mmol/L，遠(yuǎn)低于別嘌呤醇組(P<0.01)，和正常對(duì)照相近，表明這三種化合物幾乎不會(huì)對(duì)腎功能產(chǎn)生影響。

血清肌酐水平是腎功能的關(guān)鍵指標(biāo)，各組小鼠血清肌酐水平如圖7所示。由于次黃嘌呤部分替代了氧嗪酸鉀，模型對(duì)照組小鼠血清肌酐水平為57.3μmol/L，與正常組(57.1μmol/L)無顯著性差異。別嘌呤醇對(duì)照組小鼠血清肌酐水平為97.4μmol/L，較正常對(duì)照組(P＜0.01)和模型對(duì)照組顯著升高(P＜0.01)，表明別嘌呤醇可能傷腎。苯溴馬隆組小鼠的血清肌酐水平為56.1μmol/L，與對(duì)照組無顯著差異。核黃素低、中、高劑量組小鼠的血清肌酐水平分別為58.0、60.4和64.4μmol/L；維生素B₁低、中、高劑量組小鼠的血清肌酐水平分別為53.8、54.7和55.4μmol/L；蟲草酸低、中、高劑量組小鼠的血清肌酐水平分別為56.6、56.5和56.2μmol/L，遠(yuǎn)低于別嘌呤醇組(P<0.01)，和正常對(duì)照相近，進(jìn)一步表明這三種化合物可能不損害腎功能。

內(nèi)臟器官重量的變化是一個(gè)敏感的指標(biāo)，在毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)中，給藥組和未給藥的動(dòng)物之間的器官重量的比較，通常被用來評(píng)估的藥物毒性作用的大小。因此，本實(shí)施例通過檢測(cè)小鼠肝臟、腎臟和脾臟系數(shù)，評(píng)估核黃素、維生素B₁和蟲草酸的毒性，結(jié)果如圖8-10所示。

如圖8所示，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組小鼠之間肝臟系數(shù)差異顯著，這與氧嗪酸鉀的肝臟毒性有關(guān)，此外，肝臟毒性也在苯溴馬隆組觀察到。但是不同劑量的核黃素、維生素B₁和蟲草酸對(duì)肝臟系數(shù)均無顯著影響，表明核黃素、維生素B₁和蟲草酸具有一定的緩解氧嗪酸鉀肝臟毒性的作用。

如圖9所示，別嘌醇對(duì)照組小鼠的腎臟系數(shù)(2.09％)明顯高于正常對(duì)照組(1.45％)和模型對(duì)照組(1.47％，P＜0.01)小鼠，此外，別嘌呤醇對(duì)照組還觀測(cè)到水腫性腎炎，說明別嘌呤醇對(duì)腎功能產(chǎn)生負(fù)面影響。苯溴馬隆組小鼠的腎臟系數(shù)為1.49，與對(duì)照組無顯著差異。核黃素低、中、高劑量組小鼠的腎臟系數(shù)分別為1.37、1.38和1.43％；維生素B₁低、中、高劑量組小鼠的腎臟系數(shù)分別為1.47、1.30和1.42％；蟲草酸低、中、高劑量組小鼠的血清腎臟系數(shù)分別為1.37、1.42和1.37％，均與正常組無顯著性差異，并低于所有的別嘌呤醇組(P＜0.01)，進(jìn)一步說明這三種化合物對(duì)腎功能無影響。

脾是動(dòng)物的重要免疫器官，它們的體重系數(shù)可以相對(duì)反映機(jī)體的免疫功能。本實(shí)施例中，如圖10所示，觀察到各處理組小鼠之間肝臟系數(shù)無顯著性差異。說明核黃素、維生素B₁和蟲草酸幾乎不影響脾功能，不會(huì)引起炎癥。

綜上所述，核黃素、維生素B₁和蟲草酸均可降低血清中尿酸的含量，其中，核黃素的降尿酸作用最為顯著，這三種化合物具有協(xié)同作用，且對(duì)肝、腎、脾無毒。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，其降尿酸活性可能是由于對(duì)URAT1蛋白的抑制作用。

以上所述，僅為本發(fā)明的較佳的具體實(shí)施例，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。