本發(fā)明涉及一種具有降低血糖功效的藥物組合物。
背景技術(shù)：
：隨著經(jīng)濟(jì)高速發(fā)展和工業(yè)化進(jìn)程的加速，生活方式的改變和老齡化進(jìn)程的加速，使我國糖尿病患病率正呈快速上升的趨勢，成為繼心腦血管疾病、腫瘤之后另一個嚴(yán)重危害人民健康的重要慢性非傳染性疾病。2型糖尿病的特征是胰島素抵抗和胰島β細(xì)胞進(jìn)行性衰竭，后者是糖尿病進(jìn)展和惡化的決定性因素。不論是1型還是2型糖尿病，最終在多因素?fù)p害下均會導(dǎo)致β細(xì)胞衰竭，β細(xì)胞的分泌缺陷和數(shù)量缺失可導(dǎo)致胰島素供給缺乏，機(jī)體代謝障礙。糖尿病早期，β細(xì)胞功能損害可以部分可逆，但到了晚期，由于胰島數(shù)量和β細(xì)胞總量減少，功能衰退發(fā)展為不可逆。因此，保護(hù)β細(xì)胞功能是有效和持久控制血糖從而減少糖尿病慢性并發(fā)癥的根本措施。由于糖尿病誘因復(fù)雜，單一成分無法真正延緩糖尿病病程進(jìn)展，因此需要多種藥物聯(lián)合并以合適比例配伍，才能發(fā)揮更好的降糖作用。本發(fā)明針對糖尿病的發(fā)病特點(diǎn)，采用科學(xué)、系統(tǒng)的方法，從中國傳統(tǒng)食藥兩用類藥材的活性成分中篩選出β-葡聚糖、白藜蘆醇、京尼平苷和人參皂苷，并將這四種成分進(jìn)行合適比例的配伍，從而用于控制血糖從而治療糖尿病。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種藥物組合物，該組合物具有保護(hù)胰島β細(xì)胞、降低血糖、提高免疫力等功效，適合于糖耐量異常、血糖值高的糖尿病人。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明首先通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，從中國傳統(tǒng)藥食兩用藥材的活性成分中篩選出四種具有保護(hù)胰島β細(xì)胞功效的成分：β-葡聚糖、白藜蘆醇、京尼平苷和人參皂苷，并將這四種成分進(jìn)行合適比例的配伍組成組合物。所述組合物按重量份數(shù)由下述組分組成：β-葡聚糖100～300份、白藜蘆醇5～20份、京尼平苷10～40份、人參皂苷5～20份。其中，所述β-葡聚糖是青稞、燕麥或大麥中的活性成分；所述白藜蘆醇是虎杖、花生、葡萄、桑葚中的活性成分；所述京尼平苷是梔子中的活性成分。優(yōu)選地，組合物按重量份數(shù)由下述組分組成：β-葡聚糖200份、白藜蘆醇15份、京尼平苷25份、人參皂苷12份。然后通過動物實(shí)驗(yàn)觀察組合物降血糖效果，結(jié)果顯示與高血糖模型組相比，本發(fā)明藥物組合物能顯著降低糖尿病小鼠的空腹血糖，提高糖耐量，提高血清胰島素水平，提高胰島素敏感指數(shù)，同等劑量下組合物改善糖尿病小鼠體重降低、提高糖耐量和提高空腹胰島素的能力顯著優(yōu)于四種單一組分(P＜0.05)，表明四種成分配伍能顯著提高療效。同時，本發(fā)明還能通過保護(hù)胰島β細(xì)胞，恢復(fù)胰島功能，平穩(wěn)持續(xù)地降低血糖，糖尿病小鼠停止給藥30天后血糖值也能維持在理想水平，表明本發(fā)明能減少血糖反彈，治療糖尿病更加持久。附圖說明圖1：β-葡聚糖對INS-1細(xì)胞四氧嘧啶損傷LDH活力的影響；圖2：白藜蘆醇對INS-1細(xì)胞四氧嘧啶損傷LDH活力的影響；圖3：京尼平苷對INS-1細(xì)胞四氧嘧啶損傷LDH活力的影響；圖4：人參皂苷對INS-1細(xì)胞四氧嘧啶損傷LDH活力的影響。具體實(shí)施方式為了更好地解釋本發(fā)明，以下結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明的主要內(nèi)容，但本發(fā)明的內(nèi)容不僅僅局限于以下實(shí)施例。實(shí)施例1.利用細(xì)胞實(shí)驗(yàn)篩選具有保護(hù)胰島細(xì)胞作用的物質(zhì)INS-1細(xì)胞購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)研究所細(xì)胞資源中心，用完全培養(yǎng)基(含10％FBS和100U青鏈霉素溶液的RPMI-1640培養(yǎng)基)于37℃、5％CO2飽和濕度培養(yǎng)。取對數(shù)生長期的INS-1細(xì)胞，0.25％胰蛋白酶消化，用完全培養(yǎng)基吹打，制備成單個細(xì)胞懸液，將細(xì)胞濃度調(diào)整為1×105個/ml，接種于96孔板中，100μl/孔，置于5％CO2、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求分組，處理組細(xì)胞給予24mmol/L的四氧嘧啶損傷，同時分別給與不同濃度的候選藥物，每個濃度設(shè)置6個復(fù)孔，37℃繼續(xù)培養(yǎng)24h；另外還設(shè)立正常對照組(不給予任何藥物處理)、模型組(僅給予24mmol/L的四氧嘧啶損傷)、陽性對照組(在四氧嘧啶處理的基礎(chǔ)上加入40mmol/L茶多酚)。處理結(jié)束后取上清，移至另一96孔板中，按照南京建成生物科技公司乳酸脫氫酶(LDH)檢測試劑盒的要求操作，按下面公式計(jì)算各組細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH的活力：所有數(shù)據(jù)用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)均以平均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)誤(X±SEM)表示，各組均數(shù)之間均用單因素方差檢驗(yàn)進(jìn)行差異性比較，其中P<0.05表示差異具有顯著性。結(jié)果如圖1-4所示，#P<0.05，##P<0.01，與正常對照組相比有顯著性差異；*P<0.05，與四氧嘧啶組模型組相比有顯著性差異。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)四氧嘧啶損傷細(xì)胞后，細(xì)胞培養(yǎng)上清中的LDH活力與正常對照組相比顯著升高，而處理組和陽性對照組均能降低細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH活力，說明β-葡聚糖、白藜蘆醇、京尼平苷、人參皂苷在一定濃度范圍內(nèi)對四氧嘧啶誘導(dǎo)的INS-1大鼠胰島細(xì)胞損害有顯著保護(hù)性作用。實(shí)施例2.組合物輔助降血糖作用研究選用清潔級昆明小鼠，體重18～20g，四氧嘧啶160mg/kg單次腹腔注射造模后，選取血糖值穩(wěn)定在成模水平(10-25mmol/L)的小鼠隨機(jī)分為模型組，組合物組(灌胃320mg/kg的組合物)，β-葡聚糖組(灌胃320mg/kg的β-葡聚糖)、白藜蘆醇組(灌胃320mg/kg的白藜蘆醇)、京尼平苷組(灌胃320mg/kg的京尼平苷)和人參皂苷組(灌胃320mg/kg的人參皂苷)，同時另設(shè)正常組，灌胃生理鹽水。在造模后及灌胃30、45天時，測定空腹血糖水平、血糖曲線下面積(反應(yīng)糖耐量)及血清胰島素水平，所有數(shù)據(jù)用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)均以平均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)誤(X±SEM)表示，各組均數(shù)之間均用單因素方差檢驗(yàn)(one-wayANOVA)進(jìn)行差異性比較，其中P<0.05表示差異具有顯著性。結(jié)果如表1～4所示。與模型組相比，β-葡聚糖、白藜蘆醇、京尼平苷和人參皂苷具有改善糖尿病小鼠體重降低的癥狀、降低小鼠的空腹血糖，提高糖耐量，提高血清胰島素水平的趨勢，同時，組合物能顯著改善糖尿病小鼠體重降低的癥狀、顯著降低小鼠的空腹血糖，提高糖耐量，提高血清胰島素水平，與模型組相比均有顯著差異(P＜0.05)，組合物改善糖尿病小鼠體重降低、提高糖耐量和提高空腹胰島素的能力優(yōu)于四種組分單一給藥(P＜0.05)，表明組合物有很好的輔助降血糖功效，且作用效果優(yōu)于同等劑量的單一組分。表1動物實(shí)驗(yàn)各組體重變化(g)組別30天體重變化量45天體重變化量正常組6.33±2.748.51±2.72模型組2.14±1.54*0.58±3.26*組合物組5.94±1.977.26±1.48#β-葡聚糖組4.61±1.034.58±1.18#&白藜蘆醇3.52±1.313.85±2.36#&京尼平苷3.14±2.803.25±1.89#&人參皂苷2.98±1.673.11±2.373#&與同期正常組比較，*P<0.05，與同期模型組比較，#P<0.05，與同期組合物組比較，&P<0.05，n＝8～10。表2動物試驗(yàn)各組血糖變化(mmol/L)組別0天30天45天正常組5.28±0.424.86±0.745.88±0.52模型組17.84±0.98*22.21±1.79*20.16±1.66*組合物組18.18±1.16*14.13±0.88*#12.24±1.36*#β-葡聚糖組17.58±1.16*17.13±0.88*#16.24±1.36*#&白藜蘆醇18.12±1.21*15.65±1.03*#16.78±1.25*#&京尼平苷18.74±1.89*16.21±1.80*#18.00±1.89*&人參皂苷18.28±0.86*18.02±0.97*&18.79±1.37*&與同期正常組比較，*P<0.05，與同期模型組比較，#P<0.05，與同期組合物組比較，&P<0.05，n＝8～10。表3動物試驗(yàn)各組血糖曲線下面積(反應(yīng)糖耐量)變化(mmol/L)組別0天30天45天正常組14.08±0.5713.63±0.7814.23±1.85模型組45.32±1.77*46.43±2.47*44.01±1.52*組合物組43.08±1.96*32.37±1.89*#30.06±1.71*#β-葡聚糖組44.08±1.96*38.27±1.89*#&33.06±1.71*#白藜蘆醇43.36±2.20*37.20±2.42*#&32.49±2.73*#京尼平苷42.83±1.68*36.72±1.86*#&35.62±2.09*#&人參皂苷45.54±2.29*38.76±2.52*#&37.39±1.88*#&與同期正常組比較，*P<0.05，與同期模型組比較，#P<0.05，與同期組合物組比較，&P<0.05，n＝8～10。表4動物試驗(yàn)各組空腹胰島素和胰島素敏感指數(shù)變化組別空腹胰島素(mU/L)胰島素敏感指數(shù)(ISI)正常組15.62±0.54-4.52±0.30模型組9.99±0.68-5.30±0.61*組合物組14.29±0.78*#-4.91±0.13*#β-葡聚糖組9.29±0.78*&-5.06±0.20*白藜蘆醇10.37±0.88*&-5.16±0.20*&京尼平苷11.86±0.63*&-5.11±0.21*人參皂苷11.92±0.48*&-5.18±0.14*&與同期正常組比較，*P<0.05，與同期模型組比較，#P<0.05，與同期組合物組比較，&P<0.05，n＝8～10實(shí)施例3.組合物維持血糖調(diào)控作用研究選用清潔級昆明小鼠，體重18～20g，四氧嘧啶160mg/kg單次腹腔注射造模后，選取血糖值穩(wěn)定在成模水平(10-25mmol/L)的小鼠隨機(jī)分為模型組，組合物組(灌胃320mg/kg的組合物)，β-葡聚糖組(灌胃320mg/kg的β-葡聚糖)、白藜蘆醇組(灌胃320mg/kg的白藜蘆醇)、京尼平苷組(灌胃320mg/kg的京尼平苷)和人參皂苷組(灌胃320mg/kg的人參皂苷)，同時另設(shè)正常組，灌胃生理鹽水。灌胃45天后各組停止灌胃，正常飲食飼養(yǎng)30天，測定空腹血糖水平及血糖曲線下面積(反應(yīng)糖耐量)，所有數(shù)據(jù)用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，各組均數(shù)之間均用單因素方差檢驗(yàn)進(jìn)行差異性比較，其中P<0.05表示差異具有顯著性。結(jié)果如表5所示。與模型組相比，組合物、β-葡聚糖、白藜蘆醇、京尼平苷和人參皂苷都可以顯著改善糖尿病小鼠體重降低的癥狀，但在降低小鼠的空腹血糖，提高糖耐量方面，只有組合物組與模型組相比有顯著差異，同等劑量下組合物改善糖尿病小鼠體重降低、降低空腹血糖和提高糖耐量的能力優(yōu)于四種組分單一給藥(P＜0.05)，表明本發(fā)明組合物降血糖效力平穩(wěn)持久，糖尿病小鼠即使停止喂養(yǎng)服藥，血糖值也能維持在理想水平。表5動物試驗(yàn)各組體重、空腹血糖和血糖曲線下面積(反應(yīng)糖耐量)變化與正常組比較，*P<0.05，與模型組比較，#P<0.05，與組合物組比較，&P<0.05，n＝8～10。當(dāng)前第1頁1 2 3