本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其用途。

背景技術(shù)：

鼻炎為臨床常見(jiàn)病和多發(fā)病，鼻炎的發(fā)生主要與過(guò)敏反應(yīng)有關(guān)，屬于免疫性炎癥的范疇。目前，治療鼻炎主要采用特非那丁等抗組胺藥物或曲尼司特、酮替芬等抗過(guò)敏藥物，這些藥物對(duì)鼻炎的慢性化和反復(fù)發(fā)作療效較差或無(wú)效。因此，成分明確、質(zhì)量可控且安全高效的小分子化合物在研制鼻炎治療藥物方面，具有潛在的價(jià)值。

從天然產(chǎn)物中尋找化合物或先導(dǎo)化合物并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到高效低毒的潛在藥物最有重要價(jià)值。

本發(fā)明涉及的化合物I是一個(gè)2009年發(fā)表(Sheng Yin et al.,2009.Harrisotones A–E,five novel prenylated polyketides with a rare spirocyclic skeleton from Harrisonia perforata.Tetrahedron 65(2009)1147–1152)的化合物，我們對(duì)化合物I進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾，獲得了兩個(gè)新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合物III和化合物IV制備了組合物，并對(duì)該組合物抗鼻炎活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，其具有抗鼻炎活性。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明公開(kāi)了一個(gè)新的組合物，該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物中化合物III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為90％和10％。

本發(fā)明公開(kāi)的組合物可以制成藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的載體。

藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的組合物具有較好的抗鼻炎作用。本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的鹽具有同樣的藥效。

組合物10mg/kg口服給藥，對(duì)抗原(卵白蛋白)和組胺所致大鼠搔抓鼻部、 打噴嚏反應(yīng)及鼻腔血管通透性升高具有抑制作用，因此，可用于制備治療鼻炎的藥物。

以下通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí)施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加以限定。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1 化合物Harrisotone A的制備

化合物Harrisotone A(I)的制備方法參照Sheng Yin等人發(fā)表的文獻(xiàn)(Sheng Yin et al.,2009.Harrisotones A–E,five novel prenylated polyketides with a rare spirocyclic skeleton from Harrisonia perforata.Tetrahedron 65(2009)1147–1152)的方法。

實(shí)施例2 Harrisotone A的O-溴乙基衍生物(II)的合成

將化合物I(472mg，1.00mmol)溶于15mL苯，向溶液中加入四丁基溴化銨(TBAB)(0.08g)，1,2-二溴乙烷(3.760g，20.00mmol)和6mL的50％氫氧化鈉溶液?；旌衔镌?5攝氏度攪拌3h。3h之后將反應(yīng)液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取兩次，合并有機(jī)相溶液。然后對(duì)有機(jī)相溶液依次用水和飽和食鹽水洗滌2次，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，最后減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為：石油醚/丙酮＝100:1.5，v/v)，收集棕色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的黃色粉末(602mg，76％)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ5.18(s,2H),4.56(s,2H),3.93(d,J＝16.7Hz,4H),3.79(s,2H),3.62(d,J＝0.9Hz,4H),3.15(s,2H),2.48(s,2H),2.41(d,J＝9.4 Hz,4H),2.27(s,1H),1.95(s,1H),1.88–1.80(m,8H),1.77(d,J＝15.5Hz,7H),1.68(s,1H),1.61(s,1H),1.51(s,1H),1.25(d,J＝58.1Hz,1H),1.15–0.75(m,6H). ¹³C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ206.46(s),198.24(s),195.44(s),190.27(s),135.27(s),120.09(s),115.02(s),84.45(s),76.58(s),74.12(s),63.67(s),62.76(s),60.36(s),50.96(s),45.22(s),39.69(s),36.61(s),34.40(s),32.63(s),30.81(d,J＝8.9Hz),28.77(s),25.30(s),24.09(d,J＝19.2Hz),22.77(s),18.20(s).

HRMS(ESI)m/z[M+H]⁺calcd for C₃₄H₅₀Br₃O₆:793.1137；found 793.1134.

實(shí)施例3 Harrisotone A的O-(二乙氨基)乙基衍生物(III)的合成

將化合物II(396mg，0.5mmol)溶于15mL乙腈當(dāng)中，向其中加入無(wú)水碳酸鉀(345mg，2.5mmol)，碘化鉀(84mg，0.5mmol)和二乙胺(2920mg，40mmol)，混合物加熱回流3h。反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取2次，合并有機(jī)相。依次用水和飽和食鹽水洗滌合并之后的有機(jī)相，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為：石油醚/丙酮＝100:1.5，v/v)，收集棕色集中洗脫帶，濃縮即得到化合物III的淡黃色固體(246.1mg,64％)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ5.13(s,2H),4.19(s,2H),3.52(d,J＝5.3Hz,4H),3.21(s,2H),3.04(s,2H),2.85(s,12H),2.64(d,J＝13.5Hz,4H),2.33(s,3H),2.18(s,1H),2.11(s,2H),2.04(s,1H),1.98(s,1H),1.88(s,1H),1.77(d,J＝5.0Hz,7H),1.70(d,J＝15.5Hz,7H),1.61(s,1H),1.54(s,1H),1.44(s,1H),1.37(s,1H),1.10(s,24H).

¹³C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ206.30(s),198.04(s),195.18(s),190.07(s),135.11(s),119.89(s),114.86(s),84.15(s),76.42(s),66.70(s),62.58(s),60.18(s),59.97(s),52.53(s),51.93(s),50.76(s),47.69(s),45.04(s),39.51(s),36.43(s),30.63(d,J＝8.9Hz),28.61(s),25.10(s),23.93(d,J＝19.2Hz),22.57(s),18.04(s),12.27(s).

HRMS(ESI):m/z[M+H]⁺calcd for C₄₆H₈₀N₃O₆:770.6047；found:770.6044。

實(shí)施例4 Harrisotone A的O-(哌嗪基)乙基衍生物的合成

將化合物II(396mg，0.5mmol)溶于16mL乙腈當(dāng)中，向其中加入無(wú)水碳酸鉀(345mg，2.5mmol)，碘化鉀(84mg，0.5mmol)和無(wú)水哌嗪(6892mg，80mmol)，混合物加熱回流1h。反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入15mL冰水中，用等量二氯甲烷萃取2次，合并有機(jī)相。依次用水和飽和食鹽水洗滌合并之后的有機(jī)相，再用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為：石油醚/丙酮＝100:1.5，v/v)，收集淡棕色集中洗脫帶即得到化合物IV的淡棕色固體(286.9mg,71％)。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ5.14(s,2H),4.21(s,2H),3.53(d,J＝6.2Hz,4H),3.09(s,2H),3.05(s,2H),2.66(s,12H),2.57–2.53(m,4H),2.33(d,J＝15.0Hz,15H),2.24(s,1H),2.14(s,2H),2.10(s,1H),2.00(s,1H),1.88(d,J＝10.5Hz,3H),1.79(d,J＝5.0Hz,7H),1.71(d,J＝15.5Hz,7H),1.63(s,1H),1.55(s,1H),1.46(s,1H),1.15–1.05(m,8H).

¹³C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ206.30(s),198.04(s),195.28(s),190.07(s),135.11(s),119.89(s),114.86(s),84.25(s),76.42(s),66.70(s),62.58(s),60.18(s),59.97(s),54.35(s),54.16(s),53.66(s),50.78(s),45.24(s),45.06(s),39.49(s),36.45(s),30.61(d,J＝8.9Hz),28.61(s),25.10(s),23.93(d,J＝19.2Hz),22.58(s),18.04(s).

HRMS(ESI):m/z[M+H]⁺calcd for C₄₆H₇₇N₆O₆:809.5905；found:809.5901。

實(shí)施例5 本發(fā)明組合物對(duì)卵白蛋白引起大鼠過(guò)敏性鼻炎的影響

雄性SD大鼠，體重180～220g，腹腔注射卵白蛋白1mg及氫氧化鋁凝膠10mg，其后隔日注射1次，共7次。從第14天始，每日在大鼠兩側(cè)鼻腔內(nèi)滴入1mg/ml卵白蛋白生理鹽水溶液10ul，共7次。末次滴注后立刻觀察30分鐘內(nèi)大鼠打噴嚏及擦鼻的次數(shù)，試驗(yàn)藥物于卵白蛋白末次滴注前1小時(shí)口服給予。

組合物的制備：將研磨之后過(guò)200目網(wǎng)的90mg化合物III的粉末和研磨之后過(guò)200目網(wǎng)的10mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用渦輪攪拌儀混合即得到100mg組合物，使用時(shí)用水溶解這100mg的組合物即得到組合物的溶液。

由表1可見(jiàn)，組合物(10mg/kg)明顯抑制卵白蛋白所致過(guò)敏性鼻炎大鼠的噴嚏和搔抓鼻部反應(yīng)?；衔颕II和化合物IV無(wú)此作用。

表1本發(fā)明組合物對(duì)卵白蛋白引起大鼠過(guò)敏性鼻炎的影響

*p<0.05，與對(duì)照組比較

實(shí)施例6 本發(fā)明組合物對(duì)組胺引起的大鼠鼻炎的影響

雄性SD大鼠，體重180～220g，口服給予試驗(yàn)藥物后1小時(shí)，兩側(cè)鼻腔內(nèi)滴入1M組胺生理鹽水溶液10ul，觀察30分鐘內(nèi)大鼠打噴嚏及擦鼻的次數(shù)。

由表2可見(jiàn)，本發(fā)明組合物(10mg/kg)明顯減少組胺所致鼻炎大鼠的噴嚏次數(shù)，對(duì)搔抓鼻部反應(yīng)呈抑制趨勢(shì)?；衔颕II和化合物IV無(wú)此作用。

表2本發(fā)明組合物對(duì)組胺引起大鼠鼻炎的影響

*p<0.05，與對(duì)照組比較

實(shí)施例7 本發(fā)明組合物對(duì)卵白蛋白、組胺引起大鼠鼻腔血管通透性升高的影響

雄性SD大鼠，體重180～220g，分別以主動(dòng)致敏大鼠和正常大鼠觀察卵白蛋白及組胺引起的鼻腔血管通透性升高，大鼠的致敏方法同過(guò)敏性鼻炎試驗(yàn)，在初次免疫后第14天，大鼠腹腔注射戊巴比妥鈉40mg/kg，麻醉后自氣管向鼻腔插管，固定后將此插管與恒流泵相連(0.25ml/min)，以37℃生理鹽水沖洗鼻腔10分鐘，其后大鼠尾靜脈注射1％Evans藍(lán)生理鹽水溶液5ml/kg，3分鐘后收集灌流液10分鐘。在致敏大鼠和正常大鼠，灌流液中分別含卵白蛋白1mg/ml和組胺40ug/ml，自鼻腔收集的灌流液經(jīng)1200×g離心10分鐘，620nm處比色測(cè)定上清液中的Evans藍(lán)濃度，受試藥物與抗原或組胺灌流前1小時(shí)口服給藥。

由表3可見(jiàn)，本發(fā)明組合物(10mg/kg)明顯抑制卵白蛋白所致過(guò)敏性鼻炎大鼠的鼻腔血管通透性?；衔颕II和化合物IV無(wú)此作用。

表3本發(fā)明組合物對(duì)卵白蛋白引起大鼠鼻腔血管通透性升高的影響

**p<0.01，與對(duì)照組比較

由表4可見(jiàn)，本發(fā)明組合物10mg/kg明顯降低組胺所致大鼠的鼻腔血管通透性?；衔颕II和化合物IV無(wú)此作用。

表4本發(fā)明組合物對(duì)組胺引起大鼠鼻腔血流通透性升高的影響

**p<0.01，與對(duì)照組比較

結(jié)論：組合物口服給藥，對(duì)抗原(卵白蛋白)和組胺所致大鼠搔抓鼻部、打噴嚏反應(yīng)及鼻腔血管通透性升高具有顯著抑制作用，因此，可用于制備治療鼻炎的藥物?；衔颕II和化合物IV對(duì)抗原(卵白蛋白)和組胺所致大鼠搔抓鼻部、打噴嚏反應(yīng)及鼻腔血管通透性升高沒(méi)有顯著抑制作用，因此，不可用于制備治療鼻炎的藥物。

實(shí)施例8本發(fā)明所涉及組合物片劑的制備

取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機(jī)制成100片。

實(shí)施例9 本發(fā)明所涉及組合物膠囊的制備

取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。