本發(fā)明涉及一種活性成分制備藥物中的應用，更具體的說，是涉及桂皮醛在制備用于靶向治療細菌感染藥物中的應用，屬于醫(yī)藥
技術領域：
。
背景技術：
：近年來，由于廣譜抗生素的廣泛應用，醫(yī)院內(nèi)多重耐藥細菌感染逐年增加，2014年中國醫(yī)院內(nèi)抗菌藥物耐藥監(jiān)測網(wǎng)(CHINET)監(jiān)測數(shù)據(jù)顯示，目前我國MRSA在主要18家三級甲等醫(yī)院的發(fā)生率為30-73％，耐碳氫霉烯類鮑曼不動桿菌(CR-ABA)為62-70％，耐碳氫霉烯類銅綠假單胞菌(CR-PAE)為24-26％，耐碳氫霉烯類肺炎克雷伯菌(CR-KPN)為10-13％，耐萬古霉素腸球菌(VRE)3-4％。多重耐藥細菌的出現(xiàn)和在醫(yī)院環(huán)境的暴發(fā)流行，導致臨床感染性疾病的治療更加棘手，預后較差，病死率增加，尤其是對于血液病、腫瘤、器官移植等免疫力缺陷患者更加兇險，由于多重耐藥菌可選藥物有限，如CR-ABA，往往僅對多粘菌素敏感，而該藥國內(nèi)未上市，導致很多該菌感染，尤其是血流感染患者由于幾乎無藥可醫(yī)，治療不及時而死亡；同時多重耐藥菌極易在醫(yī)院環(huán)境中暴發(fā)流行，因此對于該類菌已成為醫(yī)院臨床工作中面臨的一大難題，鑒于此，安全、高效、敏感的藥物研發(fā)已成為控制及治療多重耐藥細菌感染的當務之急。技術實現(xiàn)要素：有鑒于此，為克服現(xiàn)有技術之缺陷，本發(fā)明開始著手研究、開發(fā)能夠有效治療多重耐藥細菌感染的藥物。桂皮醛是樟科植物肉桂揮發(fā)油(占80-90％)的主要成分，是藥典(2015)法定藥材。國家藥食同源藥材目錄(2015版)，桂皮為藥食同源藥材，是國家食品安全標準、食品添加劑使用標準(GB2076－2011)規(guī)定允許使用的食品天然香料，廣泛應用于食品中。桂皮醛具有解熱、解表、發(fā)散、鎮(zhèn)痛以及抗細菌、抗腫瘤、抗病毒等多種藥理作用。專利ZL03106981.9公開了一種用于深部細菌感染的中藥組合物，其中包括桂皮醛、藿香油和/或丁香油，用于抗深部細菌，該專利指出經(jīng)過反復實驗，篩選出具有良好協(xié)同作用的桂皮醛與藿香油和/或丁香油組合物，使用其不但具有良好的抗深部細菌的作用，同時還具有廣譜抗菌作用。專利ZL201410319040.2公開了一種用于制備抗曲霉菌藥物的中藥組合物，該組合物包括桂皮醛、廣藿香酮，用于抗曲霉菌。專利ZL201410319136.9公開了一種用于制備抗念珠菌藥物的中藥組合物，該組合物包括桂皮醛、廣藿香酮，用于抗念珠菌。上述兩篇專利同時指出，在藿香油的眾多組分中篩選出了廣藿香酮，其抑菌活性較高，并與桂皮醛有良好的協(xié)同增效作用，二者適于配伍后使用，并且較桂皮醛與藿香油配伍后的抑菌活性有顯著的提高，且安全性良好。專利ZL201410318881.1公開了一種用于制備抗角膜炎細菌滴眼劑的組合物，該組合物包括桂皮醛、尼泊金乙酯，用于治療鐮刀菌屬、曲霉菌屬、青霉均屬、酵母屬等所致的角膜炎及角膜潰瘍，同時指出，通過配伍實驗，篩選出桂皮醛與尼泊金乙酯配伍使用，相較于二者分別使用可顯著增強單體抑菌活性，具有明顯的協(xié)同增效作用。專利CN2012100001274.3公開了一種復方十一烯酸納米乳，其包括十一烯酸、肉桂醛、丁香酚活性組分，用于抗真菌感染，三者結合既能一直真菌的增殖，又能將已有的真菌殺滅，達到徹底的抗真菌效果。上述四篇專利作為現(xiàn)有技術均提出桂皮醛與其他活性成分(如廣藿香酮、尼泊金乙酯或丁香酚等)聯(lián)合使用具有協(xié)同增效作用，比單用桂皮醛抑菌作用增強。在現(xiàn)有技術教導之下，發(fā)明人使用桂皮醛與廣藿香酮組合物、桂皮醛與尼泊金乙酯組合物展開了對多重耐藥細菌感染的研究。然而，出乎意料的是，桂皮醛與其他活性成分聯(lián)合使用并未能達到良好的、預期的治療結果。經(jīng)對中藥進行大量的篩選、有效成分的提取、體外抗菌活性實驗、毒理、藥理、抗細菌機制的研究、動物模型的建立、藥物配方的研制和制備等，意外的發(fā)現(xiàn)了單獨使用桂皮醛卻取得了意想不到的治療結果，遂作出本發(fā)明。本發(fā)明在現(xiàn)有技術教導與啟示的基礎上，反其道而行之，首次提出不使用桂皮醛與其他活性成分聯(lián)合用藥，而是單獨使用桂皮醛用于治療多重耐藥細菌感染。因此，本發(fā)明解決現(xiàn)有技術問題的技術方案如下所述。桂皮醛在制備用于靶向治療細菌感染藥物中的應用，所述細菌為多重耐藥細菌。進一步的，上述應用所述多重耐藥細菌為耐甲氧西林金黃色葡萄菌、耐碳氫霉稀類鮑曼不動桿菌、耐碳氫霉稀類腸桿菌科細菌、耐碳氫霉稀類銅綠假單胞菌或耐萬古霉素腸球菌。為實現(xiàn)上述應用，本發(fā)明的第一種方式是，所述用于靶向治療細菌感染藥物，其由以下重量份的組分制備而成：桂皮醛10～60、吐溫-800.1～2、生理鹽水溶液900～1000。本發(fā)明的第二種方式是，所述用于靶向治療細菌感染藥物，其由以下重量份的組分制備而成：桂皮醛10～60、吐溫-800.1～2、β-環(huán)糊精8～15。本發(fā)明的第三種方式是，所述用于靶向治療細菌感染藥物，其由桂皮醛單體包合物和/或藥學上可接受的載體制備而成。針對該第三種方式，進一步的，所述桂皮醛單體包合物由以下重量份的組分制備而成：桂皮醛10～60、羥丙基-β-環(huán)糊精20-80。所羥丙基-β-環(huán)糊精為2-羥丙基-β-環(huán)糊精。針對該第三種方式，所述桂皮醛單體包合物由以下步驟制備：1)將2-羥丙基-β-環(huán)糊精加入到80℃去離子蒸餾水中，攪拌溶解，然后降溫至20℃，制備得到水溶液，備用；其中，2-羥丙基-β-環(huán)糊精與去離子蒸餾水的重量mg/體積mL比為1：10；2)攪拌下，向步驟1)所得水溶液中緩慢滴加用乙酸乙酯溶解的桂皮醛，滴加完畢后，升溫至70℃，并繼續(xù)攪拌1小時，然后置冰箱冷藏24小時，得冷藏液，備用；其中，桂皮醛與乙酸乙酯的體積mL比為1：6；3)將步驟2)所得的冷藏液過濾，固體物用少量蒸餾水洗滌后，低溫5℃真空干燥24小時，研碎，過篩80目，再用乙酸乙酯洗滌三次后晾干，即得白色疏松狀桂皮醛單體包合物。本發(fā)明結合對抗細菌作用歷經(jīng)十幾年的實驗研究，經(jīng)對中藥進行大量的篩選、有效成分的提取、體外抗菌活性實驗、毒理、藥理、抗細菌機制的研究、動物模型的建立、藥物配方的研制和制備等，意外的發(fā)現(xiàn)了單獨使用桂皮醛可以有效治療多重耐藥細菌。這種發(fā)現(xiàn)突破了現(xiàn)有技術的教導與啟示，是本領域技術人員不經(jīng)過創(chuàng)造性勞動就得不出來的，具有突出的實質(zhì)性特點和顯著的進步。為了進一步研究桂皮醛治療多重耐藥細菌的體內(nèi)療效、安全性及藥物在體內(nèi)作用的靶位機制。本發(fā)明采用了組織細菌學、組織病理學、組織生物化學、組織電鏡學的方法，研制出桂皮醛制劑(包括口服劑、注射劑)。為臨床呼吸科、血液科、急診ICU、腫瘤科、器官移植等科室的細菌感染提供一種高效、低毒及靶向治療多重耐藥細菌感染的新型抗菌藥物，為研發(fā)中藥治療多重耐藥細菌感染提供體內(nèi)藥效學及作用機制及理論實驗依據(jù)，為科技成果轉化創(chuàng)造條件。附圖說明圖1鮑曼48h肺組織(10x10)圖2鮑曼48h肺組織(10x40)圖3鮑曼72h肺組織(10x10)圖4鮑曼72h肺組織(10x40)圖5金葡48肺組織(10x10)圖6金葡48h肺組織(10x40)圖7金葡72h肺組織(10x10)圖8金葡72h肺組織(10x40)圖9金葡菌感染后治療一周，肺組織恢復正常(10x10)圖10鮑曼感染后治療一周，肺組織恢復正常(10x10)具體實施方式為了使本領域技術人員能夠更好地理解本發(fā)明，下面結合實施例，對本發(fā)明的技術方案進一步闡述。需要說明的是，以下描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例，本領域普通技術人員基于本發(fā)明實施例，在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。對比試驗例1桂皮醛與廣藿香酮聯(lián)合使用、桂皮醛與尼泊金乙酯聯(lián)合使用與桂皮醛單獨使用對多重耐藥細菌的抗菌活性對比實施例1為專利ZL201410319136.9公開的實施例2，即桂皮醛1.25g，廣藿香酮1.25g，吐溫-800.05g。對比實施例2為專利ZL201410318881.1公開的實施例2的變化，即桂皮醛1.25g，尼泊金乙酯1.25g，吐溫-800.05g。實施例1為桂皮醛1.25，吐溫-800.05g。1、方法：選取河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院住院患者臨床分離的非重復多重耐藥菌各30株，包括耐甲氧西林金黃色葡萄菌(MRSA)、耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌(CR-ABA)、耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌(CRE)、耐碳青霉烯類銅綠假單胞菌(CR-PAE)、耐萬古霉素腸球菌(VRE)。同時選取非重復送檢以上五種非多重耐藥的金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動桿菌、銅綠假單胞菌及屎腸球菌各28株比較桂皮醛對以上細菌的作用效果。質(zhì)控菌株：ATCC25922、ATCC25923、ATCC29212、ATCC27853。2、結果：結果顯示：桂皮醛對多重耐藥細菌有很好的敏感性，見表1表1桂皮醛聯(lián)合使用與桂單獨使用對多重耐藥細菌的抗菌活性的敏感性由表1數(shù)據(jù)可知，桂皮醛單獨使用比桂皮醛與廣藿香酮(尼泊金乙酯)聯(lián)合使用抗細菌作用顯著增強，此結果確實超出預期。為進一步發(fā)揮桂皮醛單獨使用的臨床效果，本發(fā)明提出將桂皮醛使用羥丙基-β-環(huán)糊精包含，得桂皮醛單體包合物。該桂皮醛單體包合物可通過藥學
技術領域：
常規(guī)技術進一步制成口服、注射劑型。桂皮醛單體包合物口服劑用法用量，以桂皮醛計1440-2160mg/60kg/日，分三次口服，480mg-720mg/次，連服2-3周。桂皮醛單體包合物注射劑用法用量，以桂皮醛計400-800mg/60kg/次/日，連用1-2周。所述桂皮醛單體包合物由以下重量份的組分制備而成：桂皮醛10-60、羥丙基-β-環(huán)糊精20-80。所羥丙基-β-環(huán)糊精選自2-羥丙基-β-環(huán)糊精、3-羥丙基-β-環(huán)糊精、2,3-二羥丙基-β-環(huán)糊精、2,6-二羥丙基-β-環(huán)糊精或2,3,6-三羥丙基-β-環(huán)糊精。實施例2本發(fā)明所述的桂皮醛單體包合物組成：桂皮醛1.25g(50重量份)2-羥丙基-β-環(huán)糊精1.25g(50重量份)制備方法：1)將2-羥丙基-β-環(huán)糊精加入到80℃去離子蒸餾水中，攪拌溶解，然后降溫至20℃，制備得到水溶液，備用；其中，2-羥丙基-β-環(huán)糊精與去離子蒸餾水的重量mg/體積mL比為1：10；2)攪拌下，向步驟1)所得水溶液中緩慢滴加用乙酸乙酯溶解的桂皮醛，滴加完畢后，升溫至70℃，并繼續(xù)攪拌1小時，然后置冰箱冷藏24小時，得冷藏液，備用；其中，桂皮醛與乙酸乙酯的體積mL比為1：6；3)將步驟2)所得的冷藏液過濾，固體物用少量蒸餾水洗滌后，低溫5℃真空干燥24小時，研碎，過篩80目，再用乙酸乙酯洗滌三次后晾干，即得白色疏松狀桂皮醛單體包合物。實施例3本發(fā)明所述的桂皮醛單體包合物組成：桂皮醛1g(10重量份)2-羥丙基-β-環(huán)糊精2g(20重量份)制備方法：同實施例2。實施例4本發(fā)明所述的桂皮醛單體包合物組成：桂皮醛6g(60重量份)2-羥丙基-β-環(huán)糊精8g(80重量份)制備方法：同實施例2。對比實施例2桂皮醛單體包合物MIC值同理，依據(jù)對比實施例1所示方法，測定桂皮醛單體包合物對多重耐藥細菌的抗菌活性結果見表2。表2桂皮醛單體包合物對多重耐藥細菌的抗菌活性的敏感性由表2數(shù)據(jù)可知，桂皮醛單體包合物比桂皮醛普通方式單獨使用、桂皮醛與廣藿香酮(尼泊金乙酯)聯(lián)合使用抗細菌作用都顯著增強。此結果進一步超出預期。研究實施例1桂皮醛單體包合物對多重耐藥細菌體內(nèi)療效1、桂皮醛單體包合物治療免疫抑制ICR小鼠多重耐藥細菌感染藥效學(1)建立ICR小鼠免疫抑制動物模型(2)建立ICR小鼠肺多重耐藥金黃色葡萄球菌、鮑曼不動桿菌感染的動物模型(3)桂皮醛單體包合物治療免疫抑制ICR小鼠多重耐藥金黃色葡萄球菌、鮑曼不動桿菌感染肺組織細菌學的藥效學(4)桂皮醛單體包合物治療免疫抑制ICR小鼠多重耐藥金黃色葡萄菌、鮑曼不動桿菌感染肺組織病理學的藥效學2、方法(1)免疫抑制組：(30只)免疫抑制組CTX200mg/kg腹腔注射0.25ml連續(xù)2次20只對照組0.9％NS腹腔注射0.25ml連續(xù)2次10只(2)模型組：(70只)模型組1免疫抑制劑+鼻腔金葡菌1x107cfu/ml30只模型組2免疫抑制劑+鼻腔鮑曼1x107cfu/ml30只對照組1免疫抑制劑+鼻腔生理鹽水10只(3)治療組：(70只)治療組1口服桂皮醛單體包合物(金葡菌)240mg/kg30只治療組2口服桂皮醛單體包合物(鮑曼)240mg/kg30只對照組3口服生理鹽水10只(4)耐藥菌菌懸液制備：將多重耐藥細菌(金黃色葡萄菌、鮑曼不動桿菌)制備成1x108cfu/ml菌懸液50ul滴注到10％水合氯醛麻醉的免疫抑制ICR小鼠兩側鼻腔內(nèi)。(5)桂皮醛單體包合物治療觀察桂皮醛單體包合物240mg/kg，每只小鼠灌胃0.5ml，每日1次，連續(xù)14天。對照組生理鹽水每只小鼠灌胃0.5ml，每日1次，連續(xù)14天。3、結果顯示：桂皮醛單體包合物治療金黃色葡萄菌、鮑曼不動桿菌感染肺組織細菌清除率及病理學療效均達到80％以上，見表3。表3桂皮醛單體包合物治療多重耐藥細菌感染的療效菌種肺細菌陽性肺病理炎癥細菌清除率％病理療效％金葡菌(n＝30)4686.6680大腸埃希菌(n＝30)668080對照組(n＝10)0000模型組：48-72h，肺組織水腫，毛細血管擴張、出血，肺泡破裂，炎細胞浸潤。模型組1：免疫抑制劑+鼻腔鮑曼1x108cfu/ml，圖1-4。模型組2：免疫抑制劑+鼻腔金葡1x108cfu/ml，圖5-8。桂皮醛單體包合物治療組：感染多重耐藥金葡菌、鮑曼菌后，經(jīng)口服桂皮醛包合物240mg/kg，用藥一周，肺組織炎癥消失，肺泡恢復正常。圖9-10。小鼠存活率：模型組，小鼠感染多重耐藥鮑曼不動桿菌48h死亡率90％，72h死亡率100％；小鼠感染多重耐藥金葡菌48h死亡率50％，72h死亡率70％；治療組，感染多重耐藥鮑曼不動桿菌后，經(jīng)口服桂皮醛單體包合物240mg/kg，48-72h后小鼠存活率達到80％。感染多重耐藥金葡菌后，經(jīng)口服桂單體皮醛包合物240mg/kg，48-72h后小鼠存活率達到80％。以上實施例的說明只是用于幫助理解本發(fā)明，使本領域專業(yè)技術人員能夠實現(xiàn)或使用本發(fā)明，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。當前第1頁1 2 3