本發(fā)明涉及中藥技術(shù)領(lǐng)域，更具體涉及一種黃芪和當(dāng)歸藥物組合物在防治血管內(nèi)膜增生中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

“血管內(nèi)膜增生”是高血壓和血管成形術(shù)后再狹窄等心血管疾病共同的病理生理基礎(chǔ)。血管內(nèi)膜增生發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，但是具有很好療效的藥物卻不多。由于血管內(nèi)膜增生的病理機(jī)制是多途徑、多環(huán)節(jié)的，因此，針對單一靶點(diǎn)的治療其價(jià)值有限。而中藥及復(fù)方具有多成分、多靶點(diǎn)、多途徑的整體調(diào)節(jié)作用，可從多個(gè)環(huán)節(jié)影響血管內(nèi)膜增生。因此，從中醫(yī)藥中尋找抗血管內(nèi)膜增生的有效治療方法，具有重要的科學(xué)意義。

黃芪和當(dāng)歸是臨床常用的中藥藥對，二者配伍具有益氣活血的作用?，F(xiàn)代研究表明血管內(nèi)膜增生的中醫(yī)基本病機(jī)是氣虛血瘀，治療上應(yīng)當(dāng)采用益氣活血法。

目前行業(yè)研究表明，由黃芪和當(dāng)歸配伍組方具有促進(jìn)造血、增強(qiáng)免疫力、心血管保護(hù)作用、抗動脈粥樣硬化、抗缺血性腦損傷、抗臟器纖維化、抗過敏、類雌激素樣作用和抗絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松等多種藥理效應(yīng)，不但可用于治療血虛證，對肝纖維化、腎病、心衰、冠心病、更年期綜合征等也有較好的療效。其主要功效是益氣補(bǔ)血和益氣活血?；钛饔弥饕菍π哪X血管系統(tǒng)具有多方面的保護(hù)作用，可用于多種心腦血管缺血性疾病的治療。黃芪、當(dāng)歸配伍可保護(hù)心肌細(xì)胞，可抑制血管緊張素II(AngII)誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡，其作用機(jī)制與調(diào)節(jié)線粒體通路有關(guān)。黃芪、當(dāng)歸配伍的提取物可使H₂O₂損傷的心肌細(xì)胞乳酸脫氫酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CK)漏出減少，細(xì)胞炎癥反應(yīng)和氧化損傷減輕，通過抗氧化損傷對心肌細(xì)胞發(fā)揮保護(hù)作用。在培養(yǎng)的大鼠心肌細(xì)胞H9C2，黃芪、當(dāng)歸配伍可通過升高細(xì)胞內(nèi)谷胱苷肽(GSH)含量，增強(qiáng)細(xì)胞的抗氧化能力而產(chǎn)生保護(hù)作用(芪歸比為1：1-10：1)。黃芪、當(dāng)歸配伍可減輕大鼠離體心肌缺血再灌注損傷，二藥配伍的效應(yīng)強(qiáng)于單個(gè)藥物。黃芪、當(dāng)歸配伍可保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)，在血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的大鼠動脈內(nèi)皮細(xì)胞凋亡模型,黃芪、當(dāng)歸配伍可通過下調(diào)caspase-8和Bax基因表達(dá)抑制細(xì)胞凋亡，其作用以黃芪當(dāng)歸5∶1和3∶1配比為好。黃芪、當(dāng)歸配伍具有抗動脈粥樣硬化(AS)和血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)增殖作用。兔食餌性AS模型給與黃芪、當(dāng)歸配伍中藥復(fù)方，可降血脂和抗氧化損傷，減輕主動脈粥樣硬化病變。并可促進(jìn)內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPC)增殖、遷移、粘附和成小管功能，促進(jìn)EPC分泌功能和血管新生，這些作用可能是通過PI3K/Akt通路調(diào)節(jié)EPC功能而實(shí)現(xiàn)的。在糖尿病GK大鼠，以高脂加抑制NO合成造成AS，黃芪、當(dāng)歸配伍可調(diào)節(jié)血脂，抑制主動脈炎性細(xì)胞因子表達(dá)，表明黃芪、當(dāng)歸配伍的抗AS作用與其抗血管壁炎癥反應(yīng)有關(guān)。

由上可知，黃芪和當(dāng)歸配伍具有調(diào)節(jié)血管功能的作用。但黃芪和當(dāng)歸以何種比例配伍能達(dá)到抗血管內(nèi)膜增生的最佳效果？在臨床實(shí)際應(yīng)用時(shí)對兩藥究竟如何配伍以達(dá)到益氣活血抗血管內(nèi)膜增生的效果？對這些問題還眾說紛紜，從而制約了其臨床應(yīng)用。進(jìn)一步開展這些問題的研究，一方面可望深入揭示黃芪當(dāng)歸配伍在抗血管內(nèi)膜增生中的最佳比例，從而指導(dǎo)臨床實(shí)踐；另一方面，又將為血管內(nèi)膜增生的防治提供有效的中醫(yī)藥方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

(一)要解決的技術(shù)問題

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題就是如何配伍黃芪和當(dāng)歸以達(dá)到抗血管內(nèi)膜增生的效果，而提供了一種以黃芪和當(dāng)歸為原料制成的藥物組合物在防治血管內(nèi)膜增生中的應(yīng)用。

(二)技術(shù)方案

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種以黃芪和當(dāng)歸為原料制成的藥物組合物在防治血管內(nèi)膜增生中的應(yīng)用。

優(yōu)選地，所述黃芪和當(dāng)歸的配伍比例為1:2，1:5，1:1，5:1。

優(yōu)選地，所述黃芪和當(dāng)歸的配伍比例為1:1。

優(yōu)選地，所述藥物組合物中所述黃芪以含有黃芪有效成分的提取物形式提供，所述黃芪提取物為黃芪水提取物。

優(yōu)選地，所述藥物組合物中所述當(dāng)歸以含有當(dāng)歸有效成分的提取物形式提供，所述當(dāng)歸提取物為當(dāng)歸水提取物。

優(yōu)選地，所述的黃芪和當(dāng)歸藥物組合物的制備方法如下：分別按黃芪和當(dāng)歸的配伍比例1:2，1:5，1:1，5:1，取黃芪和當(dāng)歸生藥，分別加入1-3倍重量的水，以水熱回流法提取三次，合并提取液，分別真空減壓濃縮得浸膏，在所述浸膏中分別加入0.1％的苯甲酸鈉，然后分裝并放置在-4℃保存，即得。

優(yōu)選地，所述的黃芪和當(dāng)歸藥物組合物的制備方法如下：按黃芪和當(dāng)歸的配伍比例1:1，取黃芪和當(dāng)歸生藥，加入2倍重量的水，以水熱回流法提取三次，合并提取液，真空減壓濃縮得浸膏，在所述浸膏中加入0.1％的苯甲酸鈉，然后分裝并放置在-4℃保存，即得。

(三)有益效果

本發(fā)明確立了黃芪和當(dāng)歸配伍在抗血管內(nèi)膜增生中的作用比例及最佳比例，為臨床此類心血管疾病提供了用藥指導(dǎo)，打破了傳統(tǒng)黃芪和當(dāng)歸配伍的比例，豐富了中藥方劑配伍理論。

本發(fā)明確立了黃芪和當(dāng)歸配伍治療血管內(nèi)膜增生類疾病以芪歸1:1為作用最佳，單用當(dāng)歸組、芪歸1:2組、芪歸1:5組、芪歸1:1組、芪歸5:1組皆有療效。單用黃芪組及芪歸2:1組效果不顯著。

附圖說明

為了更清楚地說明本發(fā)明實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實(shí)施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。

圖1是假手術(shù)組大鼠血管病理形態(tài)學(xué)分析圖；

圖2是模型組大鼠血管病理形態(tài)學(xué)分析圖；

圖3是單用黃芪組大鼠血管病理形態(tài)學(xué)分析圖；

圖4是芪歸2:1組大鼠血管病理形態(tài)學(xué)分析圖；

圖5是單用當(dāng)歸組大鼠血管病理形態(tài)學(xué)分析圖；

圖6是芪歸1:5組大鼠血管病理形態(tài)學(xué)分析圖；

圖7是芪歸1:2組大鼠血管病理形態(tài)學(xué)分析圖；

圖8是芪歸1:1組大鼠血管病理形態(tài)學(xué)分析圖；

圖9是芪歸5:1組大鼠血管病理形態(tài)學(xué)分析圖；

圖10是阿托伐他汀組大鼠血管病理形態(tài)學(xué)分析圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對本發(fā)明的實(shí)施方式作進(jìn)一步詳細(xì)描述。以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不能用來限制本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1

黃芪和當(dāng)歸藥物組合物在防治血管內(nèi)膜增生中的應(yīng)用，所述黃芪和當(dāng)歸的配伍比例為0:1。該黃芪和當(dāng)歸藥物組合物的制備方法為：按比例取生藥飲片，以水熱回流法提取三次，合并提取液，真空減壓濃縮得浸膏，在所述浸膏中加入0.1％的苯甲酸鈉，然后分裝并放置在-4℃保存，即得。

實(shí)施例2

黃芪和當(dāng)歸藥物組合物在防治血管內(nèi)膜增生中的應(yīng)用，所述黃芪和當(dāng)歸的配伍比例為1:2。其制備方法同實(shí)施例1。

實(shí)施例3

黃芪和當(dāng)歸藥物組合物在防治血管內(nèi)膜增生中的應(yīng)用，所述黃芪和當(dāng)歸的配伍比例為1:5。其制備方法同實(shí)施例1。

實(shí)施例4

黃芪和當(dāng)歸藥物組合物在防治血管內(nèi)膜增生中的應(yīng)用，所述黃芪和當(dāng)歸的配伍比例為5:1。其制備方法同實(shí)施例1。

實(shí)施例5

黃芪和當(dāng)歸藥物組合物在防治血管內(nèi)膜增生中的應(yīng)用，所述黃芪和當(dāng)歸的配伍比例為1:1。其制備方法同實(shí)施例1。

試驗(yàn)例1

1，藥物組成及制備方法

藥物組成和提?。河没€等比的設(shè)計(jì)方法(見商洪才,張伯禮,王永炎,高秀梅,趙宜軍.一種適用于中藥小復(fù)方配比優(yōu)選設(shè)計(jì)方法的建立.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志.2003.9(3):1-3)，共設(shè)立單用黃芪、單用當(dāng)歸、芪-歸五個(gè)不同的比例配伍(5:1、2:1、1:1、1:2、1:5)組。按上述配伍，分別稱取藥材，以水熱回流法提取三次，合并提取液，真空減壓濃縮得浸膏，配置藥物濃度分別為：黃芪0.22g.mL^-1(生藥)、當(dāng)歸0.11g.mL^-1(生藥)、黃芪-當(dāng)歸不同比例配伍0.39g.mL^-1(生藥)。在藥液中加入0.1％的苯甲酸鈉，然后分裝并放置在-4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

2，實(shí)驗(yàn)分組與造模方法

設(shè)立正常對照組、模型對照組、單用黃芪組(2.2g/kg)組、單用當(dāng)歸組(1.1g/kg)、黃芪當(dāng)歸不同配伍5：1(黃芪3.25g/kg+當(dāng)歸0.65g/kg)、2：1(黃芪2.6g/kg+當(dāng)歸1.3g/kg)、1：1(黃芪1.95g/kg+當(dāng)歸1.95g/kg)、1：2(黃芪1.3g/kg+當(dāng)歸2.6g/kg)、1：5(黃芪0.65g/kg+當(dāng)歸3.25g/kg)，另設(shè)陽性藥物對照組(阿托伐他汀10mg/kg)。

動物模型建立按本課題組以往的方法以2.0F球囊導(dǎo)管損傷血管內(nèi)皮建立內(nèi)膜增生模型(見:Wu L,et al.Effect of Total panax notoginseng saponin on aortic intimal hyperplasia and the expressions of cellcycle protein and extracellular matrix inrats.Phytomedicine,2010,17：233-240)。大鼠以10％水合氯醛腹腔注射麻醉藥后，作頸部正中切口，暴露及游離左頸總動脈1-1.5cm，遠(yuǎn)心端結(jié)扎，在左頸總動脈遠(yuǎn)心端用動脈夾阻斷后，于頸總動脈遠(yuǎn)心端剪一”V”形切口，插入2.0F球囊導(dǎo)管，仔細(xì)操作導(dǎo)管越過主動脈弓入胸，下至腹主動脈，深度約為6-7cm。自導(dǎo)管尾端注入生理鹽水0.1～0.2ml充盈球囊，使球囊膨脹至回拉時(shí)有較明顯的阻力感，保持阻力一致緩慢回拉導(dǎo)管至主動脈弓處，如此反復(fù)9次，再以導(dǎo)絲為軸線旋轉(zhuǎn)球囊180°，使球囊轉(zhuǎn)至血管腔的另一面，依上法再重復(fù)9次，充分剝脫內(nèi)皮。完成后撤出導(dǎo)管，結(jié)扎左頸總動脈近心端血管以止血，逐成縫合肌肉、皮下層及皮膚層。術(shù)后腹腔注射青霉素20萬單位消炎抗菌，連用3天。球囊導(dǎo)管損傷血管后第2天起各組分別灌胃給予不同藥物，每天給藥一次，共給藥14天。取損傷段胸腹主動脈進(jìn)行檢測。

3，檢測指標(biāo)

血管內(nèi)膜增生形態(tài)學(xué)計(jì)量指標(biāo)：Masson法染色后，以病理圖像分析系統(tǒng)測定中膜面積MI、中膜厚度MT、、內(nèi)膜面積IA、內(nèi)膜厚度IT內(nèi)膜面積增生比率HRIA、內(nèi)膜厚度增生比率HRIT，以評價(jià)血管內(nèi)膜增生程度。

4，實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4.1各組大鼠血管病理形態(tài)學(xué)分析：(見圖1)

光鏡下，假手術(shù)組大鼠血管內(nèi)膜內(nèi)彈力膜完整，未見增生(A)。模型組血管新生內(nèi)膜呈均一或不均一增厚，大量增生的VSMC，排列紊亂，管腔呈向心性或偏心性狹窄，內(nèi)膜增生明顯(B)。單用黃芪組與芪歸2:1組血管內(nèi)膜增生改變同模型組(C,D)。單用當(dāng)歸組、芪歸1:5、1:2、1:1、5:1組和阿托伐他汀組血管內(nèi)膜也呈增生性改變，但增生程度較模型組減輕(E,F,G,H,I,J)。

4.2各組大鼠血管內(nèi)膜增生計(jì)量分析：見表1-表3

與假手術(shù)組比較，模型組血管組織內(nèi)膜面積(IA)、內(nèi)膜厚度(IT)、內(nèi)膜面積增生率(HRIA)、內(nèi)膜厚度增生率(HRIT)均顯著增加(P﹤0.01),但中膜面積(MA)和中膜厚度(MT)無顯著變化,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05)。與模型組比較，阿托伐他汀組、單用當(dāng)歸組、芪歸1:1、1:2、1:5、5:1組血管組織IA、IT、HRIA、HRIT均顯著減小(P﹤0.01或P﹤0.05)，芪歸2:1組及單用黃芪組無顯著差異(P﹥0.05)，各藥物組MA和MT無顯著變化(P﹥0.05)。與阿托伐他汀組比較，單用當(dāng)歸組、芪歸1:1、1:2、1:5、5:1組血管組織IA、IT、HRIA、HRIT均無差異(P﹥0.05)，單用黃芪組及芪歸2：1組則比阿托伐他汀陽性藥物組IA、IT、HRIA、HRIT顯著增高(P﹤0.01)。從表中結(jié)果可得：芪歸1:1的IA、IT、HRIA、HRIT數(shù)值最小，其療效最好。

可見黃芪當(dāng)歸配伍抗血管內(nèi)膜增生中，單用當(dāng)歸、芪歸以1:1、1:2、1:5、5:1配伍時(shí)均具有抗血管內(nèi)膜增生的作用，且以芪歸1:1組療效最好。單用黃芪及芪歸以2:1配伍時(shí)抗血管內(nèi)膜增生作用不顯著。

表1：各藥物組大鼠血管形態(tài)學(xué)計(jì)量指標(biāo)(n＝8)

表2：各藥物組大鼠血管形態(tài)學(xué)計(jì)量指標(biāo)(±s，n＝8)

表2：各藥物組大鼠血管形態(tài)學(xué)計(jì)量指標(biāo)(±s，n＝8)

注：與假手術(shù)組比較^※P﹤0.05，^※※P﹤0.01；與模型組比較^■P﹤0.05，^■■P﹤0.01；與阿托伐他汀組比較^□P﹤0.05，^□□P﹤0.01。

本發(fā)明確立了芪歸配伍在抗血管內(nèi)膜增生中的作用比例及最佳比例，為臨床此類心血管疾病提供了用藥指導(dǎo)，打破了傳統(tǒng)芪歸配伍的比例，豐富了中藥方劑配伍理論。

本發(fā)明黃芪當(dāng)歸配伍治療血管內(nèi)膜增生類疾病以芪歸1:1為作用最佳，單用當(dāng)歸組、芪歸1:2組、芪歸1:5組、芪歸1:1組、芪歸5:1組皆有療效。單用黃芪組及芪歸2:1組效果不顯著。

以上實(shí)施方式僅用于說明本發(fā)明，而非對本發(fā)明的限制。盡管參照實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行各種組合、修改或者等同替換，都不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神和范圍，均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍當(dāng)中。