本發(fā)明涉及垂盆草苷在制備治療或預(yù)防慢性腎損傷的藥物中的應(yīng)用，具體涉及垂盆草苷在制備治療或預(yù)防慢性腎功能衰竭和腎纖維化的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
垂盆草(Sedum sarmentosum Bunge)，多年生草本，景天科景天屬多肉植物，垂盆草用藥歷史悠久，根據(jù)草及藥典記載其有清利濕熱，解毒等多種功效，常用于濕熱黃疸，小便不利，癰腫瘡瘍；急、慢性肝炎。對(duì)垂盆草化學(xué)成分的研究比較多，目前已從垂盆草中分離得到垂盆草苷、黃酮、生物堿、三萜、甾醇等成分，其中黃酮類成分最多?，F(xiàn)代藥理研究表明：垂盆草具有保肝降酶、免疫抑制、抗脂質(zhì)過氧化、抑菌等作用。從垂盆草中提取獲得的垂盆草苷藥理研究顯示小鼠0.5～1.0mg灌胃對(duì)CCl4性肝損傷有明顯的保護(hù)作用，可使肝細(xì)胞內(nèi)糖元和葡萄糖-6-磷酸酶、乳酸脫氫酶含量增加，肝細(xì)胞內(nèi)琥珀酸脫氫酶和ATP酶的活性增強(qiáng)[汪麗亞，施九皋，楊美玲，等.景垂片對(duì)小白鼠四氯化碳性肝損傷保護(hù)作用的組織學(xué)和組織化學(xué)觀察[J].中西醫(yī)結(jié)合雜志，1983，3(4):237]，另外垂盆草苷在大劑量時(shí)(500mg/kg)有免疫抑制作用[翟世康，沈美玲，熊玉蘭，等.垂盆草甙免疫抑制作用的研究[J].中華微生物學(xué)與免疫學(xué)雜志，1982，1(3):145]。本發(fā)明人通過大量的實(shí)驗(yàn)研究，發(fā)明了垂盆草苷在制備治療或預(yù)防慢性腎功能衰竭和腎纖維化的藥物中的應(yīng)用。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
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本發(fā)明提供了垂盆草苷在制備治療或預(yù)防慢性腎損傷的藥物中的應(yīng)用
本發(fā)明提供了垂盆草苷在制備治療或預(yù)防慢性腎功能衰竭的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明提供了垂盆草苷在制備治療或預(yù)防腎纖維化的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明提供了以垂盆草苷為活性成分的用于慢性腎功能衰竭和腎纖維化的藥物組合物。
本發(fā)明提供的垂盆草苷在用于慢性腎功能衰竭和腎纖維化時(shí)，其使用劑量范圍是50mg～1000mg；優(yōu)選50～500mg。
本發(fā)明提供的垂盆草苷可以按文獻(xiàn)公開的方法制備[Hussain K，Ismail Z，Sadikun A，Ibrahim P.Standardization and in vivo antioxidant activity of ethanol extracts of fruit and leaf of Piper sarmentosum.Planta Med.2010；76(5):418-425.]。
本發(fā)明提供的垂盆草苷藥物組合物可以根據(jù)制劑需要，加入相應(yīng)輔料，以、片劑、丸劑、顆粒劑、膠囊、糖漿等形式存在。本發(fā)明提供的各種劑型均可以采用藥學(xué)常規(guī)方法制備而成。
本發(fā)明人進(jìn)行了下列試驗(yàn)來證實(shí)治療或預(yù)防慢性腎功能衰竭和腎纖維化的藥物中的應(yīng)用，但藥理作用不限于此。
具體實(shí)施方式
制備例1垂盆草苷片劑的制備
稱取5.0g垂盆草苷、120.0g糖粉、40.0g乳糖和23.0g羧甲基淀粉鈉充分混合均勻后過100目篩，加入適量的3％PVPK30水溶液適量制軟材，20目篩制粒，60℃干燥3小時(shí)，18目篩整粒，加入2.0g硬脂酸鎂，混合均勻后壓1000片，每片約200mg，即得。
試驗(yàn)1垂盆草苷對(duì)腎切除導(dǎo)致大鼠慢性腎衰的影響
1.1藥品與試劑
垂盆草苷(純度：98.6％，購買于成都普思生物科技有限公司)
谷胱甘肽(山東綠葉制藥有限公司，規(guī)格：300mg/支，批號(hào)：20150806)
肌酐和尿素氮試劑盒(北京中生科技公司，批號(hào)：150606)
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：普通級(jí)Wistar大鼠，雄性，體重280g－350g，山東綠葉制藥有限公司動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。合格證號(hào)：魯動(dòng)質(zhì)字200906005號(hào)。
1.2試驗(yàn)方法與結(jié)果
大鼠140只，體重150-200g，動(dòng)物喂養(yǎng)1周，將動(dòng)物分為7組，每組20只，即正常組，模型組，谷胱甘肽靜脈注射(150mg/kg)組，垂盆草苷5mg/kg組，垂盆草苷20mg/kg組，垂盆草苷50mg/kg組，垂盆草苷100mg/kg組，除正常組外，大鼠用5/6腎切除方法制成慢性腎衰模型，第一次手術(shù)切除左腎2/3，一周后行第二次手術(shù)切除右腎，第二次手術(shù)后5周開始給藥，垂盆草苷給藥方式為灌胃給藥，給藥后4周、8周分別大鼠眼框取血，測(cè)定血清肌酐和尿素氮，給藥后4周處死10只，試驗(yàn)結(jié)束處死10只，作病理切片，觀察腎功能的病理改變。
從表1、表2結(jié)果可以看出，垂盆草苷5mg/kg組降低大鼠慢性腎衰血清肌酐和尿素氮(與模型組比較，p<0.05)；谷胱甘肽靜脈注射(150mg/kg)組，垂盆草苷20mg/kg組，垂盆草苷50mg/kg組，垂盆草苷100mg/kg組明顯降低大鼠慢性腎衰血清肌酐和尿素氮(與模型組比較，p<0.01)；垂盆草苷50mg/kg組降低大鼠慢性腎衰血清肌酐和尿素氮與垂盆草苷100mg/kg組比較，無顯著性差異。
病理改變：給藥第4周模型組光鏡下見腎小球有不同程度代償性肥大，系膜細(xì)胞增生，系膜基質(zhì)增多，腎小球毛細(xì)血管襻呈分葉狀，部分腎小球囊腔消失，毛細(xì)血管管壁增厚，腎小管腫脹、擴(kuò)張，管腔內(nèi)有蛋白沉積，部分小管萎縮，間質(zhì)有炎性細(xì)胞浸潤，各給藥組亦見上述改變，但病變程度較輕，隨劑量增大，病變程度減輕；給藥第8周模型組光鏡下見系膜細(xì)胞增生，基質(zhì)明顯增多，毛細(xì)血管管壁塌陷，毛細(xì)血管節(jié)段性硬化，硬化區(qū)多在血管壁附近硬化的腎小球內(nèi)可見均質(zhì)圓形PAS染色深紅色的沉積物，個(gè)別腎小球有局灶球囊粘連，局灶新月體形成，間質(zhì)可見炎細(xì)胞浸潤，纖維組織增生，各組腎小球硬化程度不等，隨劑量增大，病變程度減輕。
表1垂盆草苷對(duì)腎切除慢性腎衰大鼠給藥4周血清肌酐和尿素氮的影響
*，p<0.05，**，p<0.01，與模型組比較
表2垂盆草苷對(duì)腎切除慢性腎衰大鼠給藥8周血清肌酐和尿素氮的影響
*，p<0.05，**，p<0.01，與模型組比較
試驗(yàn)2垂盆草苷對(duì)單側(cè)輸尿管結(jié)扎大鼠腎間質(zhì)纖維化的影響
2.1材料
垂盆草苷(純度：98.6％，購買于成都普思生物科技有限公司)
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：普通級(jí)Wistar大鼠，雄性，體重280g－350g，山東綠葉制藥有限公司動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。合格證號(hào)：魯動(dòng)質(zhì)字200906005號(hào)。
依那普利，北京諾華制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：140306；羥脯氨酸試劑盒，南京建成生物公司，批號(hào)：150906。
2.2試驗(yàn)方法與結(jié)果
大鼠70只，體重200-230g，動(dòng)物喂養(yǎng)1周，各大鼠以10％水合氯醛3.0mL/kg腹腔注射麻醉后，將大鼠右側(cè)臥位固定于手術(shù)臺(tái)上，剪毛后用碘酒、75％酒精消毒手術(shù)區(qū)，行左側(cè)腹切口，逐層切開皮膚、肌肉及腹壁各層，暴露并分離左側(cè)輸尿管，其中10只大鼠僅切開腹腔并游離左側(cè)輸尿管，但不結(jié)扎和剪斷，作為假手術(shù)組，其余60大鼠用4-0絲線結(jié)扎兩道，上一道結(jié)扎點(diǎn)位于左腎下極水平，然后在兩道結(jié)扎點(diǎn)間剪斷輸尿管，逐層縫合，60只造模大鼠隨機(jī)分為6組，即模型組、依那普利(4mg/kg)組，垂盆草苷5mg/kg組，垂盆草苷20mg/kg組，垂盆草苷50mg/kg組，垂盆草苷100mg/kg組，各組給藥21天后，10％水合氯醛麻醉后處死各組動(dòng)物，切取適量腎組織，按羥脯氨酸試劑盒測(cè)定說明測(cè)定羥脯氨酸。
從表3結(jié)果可以看出，垂盆草苷5mg/kg組降低大鼠羥脯氨酸水平(與模型組比，p<0.05)；依那普利(4mg/kg)組，垂盆草苷5mg/kg組，垂盆草苷20mg/kg組，垂盆草苷500mg/kg組，垂盆草苷100mg/kg組明顯降低大鼠羥脯氨酸水平(與模型組比較，p<0.05或0.01)，垂盆草苷50mg/kg組降低羥脯氨酸水平，與垂盆草苷100mg/kg組比較，無顯著性差異。
表3垂盆草苷對(duì)單側(cè)輸尿管結(jié)扎大鼠腎組織羥脯氨酸含量的影響
p<0.05，**，p<0.01，與模型組比較 。