本發(fā)明涉及β-谷甾醇的一種新用途，具體涉及β-谷甾醇在制備抗柔嫩艾美耳球蟲藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
雞球蟲病是嚴(yán)重危害集約化養(yǎng)雞業(yè)生產(chǎn)的最主要疫病，每年因此而造成的經(jīng)濟損失高達(dá)25億英鎊以上，其病原是頂復(fù)門原蟲類的艾美耳球蟲(Eimeria spp)，其中危害最大的是柔嫩艾美耳球蟲(Eimeria tenella)?；瘜W(xué)藥物治療是控制雞球蟲病的重要措施之一，但目前雞球蟲具有廣泛而嚴(yán)重的抗藥性，迫切需要新的抗球蟲藥物面市。
β-谷甾醇(Beta-Sitosterol)，又稱(3β)-豆甾-5-烯-3-醇，谷甾醇，麥固醇等，該化合物的分子式是C29H50O，分子量414.71，CAS登錄號：83-46-5，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如式(Ⅰ)所示。
β-谷甾醇廣泛分布于植物中，可從數(shù)種植物油中提取，或從米糠油下腳中提取。已經(jīng)證實的藥理作用顯示：(1)可用于藥物，能促進(jìn)傷口愈合，使肌肉增生，增強毛細(xì)血管循環(huán)。還可用于合成調(diào)節(jié)水、蛋白質(zhì)、糖和無機鹽的甾醇激素，是生產(chǎn)甾族激素藥物的重要原料。(2)具有顯著的抗炎功能，可用于治療皮膚癌及皮膚潰瘍。有抗氧能力。在抑制汗腺分泌方面有輔助作用。與維生素類配伍用于護(hù)膚品中，有調(diào)理功效，使皮膚柔滑濕潤，治療或延緩皮膚的角質(zhì)化。亦可用作護(hù)發(fā)品的助劑。(3)有降膽固醇、止咳、祛痰及抑制腫瘤和修復(fù)組織作用。用于高膽固醇血癥、動脈粥樣硬化癥及慢性氣管炎，亦用于早期子宮頸癌及皮膚潰瘍等。
目前為止尚未有β-谷甾醇具有抗柔嫩艾美耳球蟲作用的報導(dǎo)，通過β-谷甾醇已知的性質(zhì)無法推斷其是否具有抗柔嫩艾美耳球蟲的作用。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種β-谷甾醇在制備抗柔嫩艾美耳球蟲藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：
β-谷甾醇在制備抗柔嫩艾美耳球蟲藥物中的應(yīng)用。
進(jìn)一步的，所述藥物劑型為口服制劑。
β-谷甾醇在制備飼料添加劑中的應(yīng)用。
本發(fā)明的有益效果是：
1)本發(fā)明通過將β-谷甾醇與可接受的輔料，制成散劑，添加至飼料中，混勻，按日常飼料量喂食雞，β-谷甾醇的添加量為每100kg飼料中添加5gβ-谷甾醇；或?qū)ⅵ?谷甾醇制成β-谷甾醇水溶性粉劑，溶于水中，按日常飲水量喂食雞，β-谷甾醇的添加量為每100kg水中溶于2.5gβ-谷甾醇。通過動物感染實驗證實β-谷甾醇的抗球蟲指數(shù)(ACI)可達(dá)到180以上，具有較好的抗柔嫩艾美耳球蟲作用。
2)與常規(guī)抗球蟲藥物三字球蟲粉相比，本發(fā)明β-谷甾醇抗球蟲效果明顯。本發(fā)明可有效緩解當(dāng)前養(yǎng)殖業(yè)使用抗球蟲藥物產(chǎn)生的嚴(yán)重耐藥性問題，可以在此基礎(chǔ)上加快新藥的研發(fā)速度，對養(yǎng)殖業(yè)的綠色、健康發(fā)展具有重要益處。
具體實施方式
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，但并不局限于此。
實施例1
β-谷甾醇散劑的制備：取5gβ-谷甾醇(含量不低于95％)和95g淀粉混勻，即可。
散劑的用法用量：將上述100g散劑拌入100kg飼料中，按日常食量喂食。
實施例2
β-谷甾醇水溶性粉劑的制備：取2.5gβ-谷甾醇(含量不低于95％)和97.5g葡萄糖混勻，即可。
水溶性粉劑的用法用量：將上述100g粉劑溶于100升水中。在用藥前給病雞斷水2小時，然后按正常飲水量喂食。
實施例3
下面結(jié)合具體的實驗說明β-谷甾醇的抗雞球蟲實驗。
實驗材料：
對照藥物：常規(guī)抗球蟲藥物三字球蟲粉(30％磺胺氯吡嗪鈉，批號001010)，由上海諾華動物保健有限公司生產(chǎn)。
β-谷甾醇：實施例1的β-谷甾醇散劑，實施例2的β-谷甾醇水溶性粉劑。
球蟲卵囊：柔嫩艾美耳球蟲(Eimeria tenella)廣東株孢子化卵囊，由廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸醫(yī)研究所保存，使用前在無球蟲雛雞體內(nèi)復(fù)壯。
雛雞：嶺南黃雛雞，由廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所提供，飼養(yǎng)于已消毒的專用動物房內(nèi)；雞籠和所用器皿均嚴(yán)格消毒，自由采食和飲用純凈水；試驗前觀察雛雞有無臨床癥狀及連續(xù)2d檢查糞便有無球蟲卵囊，備用。
飼料：由廣東省新南都飼料有限公司定制育雛料，不含任何抗球蟲藥物。
實驗方法：
分組：按試驗分組及處理將150只嶺南黃雛雞飼養(yǎng)至10日齡，逐只稱重，淘汰弱雛和體重過大者，將剩余雛雞隨機分成5組，每組30只，并適當(dāng)調(diào)整使每組雛雞總體重大致相等。
處理：除第I(空白對照)組外，其余各組雛雞均經(jīng)口灌服柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊l×105個/羽；除第I組和第Ⅱ(陽性對照)組外，其余各組雛雞均于感染后立即飼喂或飲用含抗球蟲藥物的飼料或水，第Ⅲ組飼喂含三字球蟲粉的飼料，第Ⅳ組飼喂實施例1的β-谷甾醇散劑與飼料制成的β-谷甾醇拌料，第Ⅴ組飲用實施例2的β-谷甾醇水溶性粉劑與飲水制成的β-谷甾醇飲水，各組飲水和飼料的用量均相同。試驗雛雞的分組情況見表1。
表1試驗雛雞分組
每天觀察并記錄雞群的精神狀況、采食量、糞便情況等；對死亡雛雞稱重，剖檢，若為柔嫩艾美耳球蟲感染引起死亡則病變記分為+4分；所有雛雞于感染后第7天逐只稱重，剖檢，進(jìn)行盲腸病變記分；最后計算各組雛雞的增重和飼料報酬。
藥效判定方法及標(biāo)準(zhǔn)抗球蟲指數(shù)(ACI)按美國默克公司推薦的公式計算：ACI＝(相對增重率+存活率)一(卵囊值+病變值)；相對增重率＝(試驗組增重÷空白對照組增重)×100％；存活率＝(各組存活雛雞數(shù)÷各組雛雞總數(shù))×100％。病變按五級記分：①無卵囊，盲腸正常，為0分；②有卵囊，盲腸黏膜稍增厚，有少量散在出血或少量血樣腸內(nèi)容物，為+1分；③有卵囊，盲腸黏膜增厚，有明顯出血或明顯血樣腸內(nèi)容物，為+2分；④有卵囊，盲腸黏膜增厚，有大量凝血塊或血樣腸芯，為+3分；⑤雛雞因球蟲病死亡或有大量卵囊，盲腸外觀呈醬油色(或小腸中部有點狀壞死灶，黏膜面呈緋紅色)，腸管明顯腫大，內(nèi)容物形成明顯的血樣腸芯，為+4分。組內(nèi)病變值＝每組平均病變記分×20。藥效判定標(biāo)準(zhǔn)是ACI<120為無效，120～160為弱效，160～180為中效，180以上為強效。卵囊值由盲腸內(nèi)容物克卵囊數(shù)(OPG)換算而來。
實驗結(jié)果：
臨床癥狀觀察：
接種柔嫩艾美耳球蟲孢子化卵囊的對照組第2天，病雞出現(xiàn)精神沉郁，呆立，食欲減退；第5天出現(xiàn)明顯血便，并出現(xiàn)死亡，隨后血便逐漸減少。
分別計算各組的抗球蟲指數(shù)，結(jié)果見表2所示。由表2可知，第Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組的抗球蟲指數(shù)均高于第Ⅱ組，第Ⅳ、Ⅴ組的抗球蟲指數(shù)明顯高于第Ⅲ組，故實驗證實β-谷甾醇的抗球蟲指數(shù)(ACI)可達(dá)到180以上，具有較好的抗柔嫩艾美耳球蟲作用，且明顯優(yōu)于常規(guī)抗球蟲藥物三字球蟲粉。
表2各組抗球蟲指數(shù)
上述實施例為本發(fā)明較佳的實施方式，但本發(fā)明的實施方式并不受上述實施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。